Microscopia

MICROSCOPIA

■ Ciência que estuda os métodos e as

aplicações em que se usa o Microscópio
para observação de objetos, ou
pormenores de objetos, com dimensões
inferiores ao limite de resolução do olho
humano (0,1 mm).
Classificação dos Microscópios em função do
número de sistemas de lentes:

■ Microscópio simples ou Lupa – apenas

possui uma lente ou um sistema de lentes
centradas;

■ Microscópio composto – possui dois

sistemas de lentes centradas, ocular e
objetiva, para produzir uma imagem
ampliada
 Classificação dos Microscópios compostos
em função do princípio de iluminação que utiliza

■ Fotónico – em que o responsável pela

transmissão de imagem é um feixe de
fotões (luz visível, ultravioleta ou infra-
vermelho).

■ Electrónico – emprega um feixe de

eletrões para produzir imagens ampliadas.
A História do
Microscópio
■ Robert Hooke, estudioso inglês,
foi o primeiro (em 1665) a
observar células. Para tal valeu-
se de um rudimentar
microscópio, idealizado anos
antes por um outro estudioso,
Anthony Van Leeuwenhoeck.

■ Hooke observou cortes finos de

cortiça, que se apresentavam
ao microscópio com um aspecto
similar a pequenos favos de mel
empilhados. A cada um destes
favos Hooke atribuiu a
designação de cellulae
(células).
A história do
microscópio ótico
começa na
antiguidade clássica,
com a lente de
aumento simples, e
apresenta um
“renascimento” no
séc. XVII.
■ Cerca de dez anos mais tarde o próprio
Leeuwenhoeck observou pequenos seres vivos,
que designou por “protozoários”, aos quais mais
tarde foi dada a designação de bactérias.
■ Assim, à medida que se dava a evolução do
microscópio ótico, também o conhecimento da
constituição dos diferentes organismos ia
evoluindo.

■ A ciência atravessava uma fase de grande

desenvolvimento, que viria a culminar no séc.
XIX.

■ Durante todo este período a preocupação dos

homens da ciência centrava-se não só no
aperfeiçoamento dos sistemas óticos, mas
também na evolução das técnicas inerentes à
preparação do material para observação.
■ Em meados do nosso século, o aparecimento do
microscópio eletrónico e, mais recentemente, do
microscópio confocal laser, associados a sistemas
computadorizados de análise de imagem, contribuíram
para o avanço da biologia celular e molecular,
continuando assim o conhecimento iniciado por Hooke.
MOC – Microscópio Ótico Composto
MET – Microscópio Eletrónico de Transmissão
MOC
Microscópio Ótico Composto
 Microscópio Ótico

O Microscópio Ótico e os seus constituintes:

✔Parte Mecânica;

✔Parte Ótica.
 Microscópio
Óptico

Parte Mecânica
✔Pé ou Base
✔Braço ou coluna
✔Platina
✔Tubo ou canhão
✔Revólver ou Porta-objetivas
✔Parafuso Macrométrico
✔Parafuso Micrométrico
Parte Ótica Microscópio Ótico

Sistema de iluminação:
✔Espelho ou lâmpada
✔Condensador
✔Diafragma
Sistema de ampliação:
✔Ocular
✔Objetivas
✔Objetivas de imersão
Oculares

Ampliam a imagem
fornecida pelo sistema
de objetivas.
Canhão ou tubo

Serve de
suporte ao
sistema ocular
Braço

Serve de
suporte à
platina e ao
revólver.
Revólver

Serve de suporte às
objetivas e permite
a sua mudança.
Objetivas

Amplia a imagem
do objeto que está
a ser observado.
Platina

Serve de suporte à
preparação a observar.
Tem uma abertura na
parte central (janela da
platina).
Condensador

Distribui regularmente no
campo da preparação a
luz que atravessa o
diafragma
Diafragma

Regula a intensidade da
luz captada pelo
espelho e que incide
na preparação.
Fonte de Luz
Parafusos Macrométrico e
Micrométrico

Permite movimentos (de

maior ou menor amplitude)
de aproximação ou
afastamento entre a
preparação e as objetivas -
focagem.
Base ou pé Constitui a base
de suporte de
todos os
elementos do
microscópio.
Cuidados Gerais na Utilização do MOC:
✔ Na mesa apenas deverá permanecer o material
estritamente necessário;
✔ Antes de pegar na caixa do microscópio, verifica
sempre que está fechada;
✔ Transporta sempre o microscópio com ambas as
mãos, apoiando uma sobre a base e com a outra a
segurar o braço;
✔ Coloca o microscópio na mesa afastado do bordo;
✔ Não mexer nas objetivas e ocular com os dedos;
Cuidados Gerais na Utilização do MOC:
✔ As lentes devem ser limpas com pincel ou papel
apropriado ou com um pano de limpeza macio;
✔ A objetiva de imersão, quando utilizada, deve ser
limpa com um pano embebido em xilol;
✔ Evita molhar o microscópio;
✔ Antes de arrumar, verifica que a objetiva de menor
ampliação está no prolongamento do tubo.
Microscópio Ótico
Manuseamento do MOC Microscópio Óptico

Iluminação:
✔ Antes de iniciar qualquer observação é necessário
proceder à iluminação do campo microscópico;
✔ Verifica se a objetiva de menor poder ampliador
está em posição de observação;
✔ Verifica se o diafragma está completamente
aberto e se o condensador está completamente
subido;
Manuseamento do MOC: Microscópio Óptico

Iluminação:
✔ Se o microscópio tiver uma fonte de iluminação
própria liga-a. (se não utiliza o espelho – face
côncava para a luz artificial e face lisa para luz
natural. Orienta o espelho de modo a que o campo
do microscópico fique completamente iluminado.)
Ordem de utilização das objectivas:

✔ A observação inicia-se com a objetiva de menor

ampliação;

✔ Vai-se aumentando gradualmente o poder de

ampliação até à objetiva de maior ampliação;

✔ Se for necessário utilizar a objectiva de 100 X,

deverá colocar-se uma gota de óleo de imersão
sobre a preparação.
Focagem:

✔ Coloca a preparação a observar na platina e depois

de a centrar, fixa-a com o auxílio das pinças;

✔ Utiliza o parafuso macrométrico em movimentos

lentos para deslocar o tubo ou a platina até que a
objectiva fique muito próxima da preparação;

✔ Observa pela ocular enquanto rodas o parafuso

macrométrico lentamente até obteres uma imagem
nítida;
Focagem:

✔ Percorre lentamente a preparação em vários

sentidos afim de encontrares a zona de maior
interesse ;

✔ Centra a zona de maior interesse;

✔ Corrige a focagem com o auxílio do parafuso

micrométrico, rodando-o em movimentos lentos.
Técnica de substituição de objetivas:

✔ Para observar com ampliações maiores basta rodar

o revólver no sentido da objetiva da ampliação
pretendida;

✔ Corrige-se a focagem utilizando apenas o parafuso

micrométrico.
 O
Microscópio
Ótico