Dissertao de Mestrado:

Ensaios de Biodegradao de Surfactantes em Resduos Industriais

Autor: Amauri Geraldo de Souza

Universidade Federal de So Joo Del-Rei Departamento de Cincias Naturais Ps-Graduao Multidisciplinar em Fsica, Qumica e Neurocincias

Ensaios de Biodegradao de Surfactantes em Resduos Industriais

Dissertao apresentada a Universidade Federal de So Joo del Rei, para obteno do ttulo de Mestre em Qumica Analtica, rea de concentrao:Qumica Ambiental

AUTOR: Amauri Geraldo de Souza ORIENTADORA: Patrcia Benedini Martelli Dra. IQSC-CENA/USP- Prof. UFSJ CO-ORIENTADORA: Honria de Ftima Gorgulho Dra. UFMG Prof. UFSJ

So Joo del Rei Estado de Minas Gerais Brasil Julho 2006

SOUZA, Amauri Geraldo de Ensaios de Biodegradao de Surfactantes em Resduos Industriais. [Minas Gerais] 2006 V, 94 p. 29,5 cm (DCNAT/UFSJ, M. SC., Qumica,2006) Dissertao - Universidade Federal de So Joo Del-Rei, Multidisciplinar em Fsica, Qumica e Neurocincias. 1.Biodegradao 2. Resduos Industriais 3. Surfactantes I. UFSJ II. Ttulo (srie)

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Aos meus pais Duca e Erclia A minha namorada pelos momentos de ausncia e impacincia Aos meus irmos, Jos, Carlos, Anelito, Edna e Arlan Aos meus queridos sobrinhos Aos meus familiares DEDICO

DEUS, que me fez compreender que devemos aceitar sempre a Sua vontade, e no a nossa

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AGRADECIMENTO

- DEUS, por iluminar e guiar sempre a minha vida, dando-me sade e persistncia; - Aos meus pais pelo incentivo, perseverana, carinho e confiana depositados, sem ELES nada seria possvel; - A Prof Dra. Patrcia Benedini Martelli pela amizade, orientao e ensinamento do decorrer do curso; - A Prof Dra. Honria de Ftima Gorgulho pela co-orientao, estmulo e auxlio no decorrer de todo o curso; - A Prof Dra. Andria Spessoto, pela amizade, auxlio na parte de microbiologia - Ao Prof. Dr. Valdir Mano pelas correes de portugus - Aos funcionrios e professores do DCNAT/FIQUINI, pela amizade e confiana depositados; - A todos os colegas do Laboratrio de Qumica, que direta ou indiretamente contriburam para elaborao desta dissertao, especialmente ao Joo pela parte de anlises, Everton pelas fotos e ao Diego pela parte de DQO; - Ao tcnico do Laboratrio de Qumica, Denlson, pela ajuda dada na parte experimental; - A CAPES pelo auxlio financeiro, atravs da concesso de bolsa de estudos, para realizao do trabalho; - Ao colega Douglas pela amizade, incentivo, compreenso e convvio dirio na repblica

LISTA DE ABREVIATURAS E SMBOLOS ABS sais sdicos de alquilbenzeno sulfonados ramificados, surfactante aninico AT porcentagem de biodegradao do surfactante CPC cloreto de cetilpiridneo, surfactante catinico CTAS substncias ativas ao tiocianato de cobalto C.M.C concentrao micelar crtica CO concentrao inicial mdia da soluo do tensoativo (em mg SAAM/L) CT concentrao da soluo no tempo t (em mg SAAM/L) Cia SJ Companhia de Tecelagem Sanjoanense DBO demanda bioqumica de oxignio DBO5 demanda biolgica de oxignio do 5 dia DQO demanda qumica de oxignio FIA sistema de anlise por injeo em fluxo FITEDI Fiao e Tecelagem de Divinpolis LAS lauril sulfato de sdio, surfactante aninico MBAS Substncias ativas ao azul de metileno TP tetrmero de propileno SAAM substncias ativas ao azul de metileno SDS dodecil sulfato de sdio, surfactante aninico rpm rotaes por minuto U.F.C unidades formadoras de colnias Mic grau de dissociao da micela GMic energia de Gibbs para o processo de micelizao HMic - entalpia padro para o processo de micelizao SMic entropia do processo de micelizao - grau de dissociao da micela

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RESUMO A possibilidade de empregar materiais oriundos da natureza, que possuem capacidade de degradar compostos qumicos, considerados txicos ao meio ambiente, tem apresentado uma alternativa atrativa. Esses materiais so encontrados em grande abundncia nos ecossistemas. Nesse trabalho, a biodegradao das solues-padro dos tensoativos aninico e catinico, lauril sulfato de sdio (LAS), cloreto de cetilpiridneo (CPC), respectivamente foram avaliadas. Para isso, algumas variveis analticas das metodologias espectrofotomtricas empregadas para a determinao dos surfactantes foram otimizadas. No processo de biodegradao, utilizou-se trs inculos: rio, solo e o lodo, os quais foram coletados na regio de So Joo del Rei. Amostras industriais e comerciais foram empregadas na biodegradao de surfactante aninico. O trabalho foi realizado no Laboratrio de Pesquisa em Qumica, da Universidade de So Joo del Rei, e a parte microbiolgica foi caracterizada na Universidade de So Paulo - ESALQ/USP Para o processo de biodegradao, empregou-se solues-padro de 1,0 a 5,0 mg.L-1 do LAS e 30 a 50 mg.L-1 do CPC. A biodegradao dos tensoativos nas solues-padro estudadas, foram avaliadas monitorando quantitativamente a sua concentrao, durante um perodo de 20 dias. As curvas analticas de 0,1 a 2,0 mg.L-1 e 2,5 a 60 mg.L-1 para LAS e CPC, respectivamente mostraram uma boa linearidade (R = 0,999).Todos os inculos utilizados para o LAS mostraram boa biodegradao (> 95%). Enquanto que, para a biodegradao do CPC, o solo apresentou melhor biodegradao. Os resultados mostraram que os tensoativos foram biodegradados pelos microorganismos dos inculos estudados. As propriedades fsico-qumicas no processo de micelizao dos tensoativos foram investigadas para solues-padro de LAS e CPC (ex: concentrao micelar crtica e grau de dissociao). Os parmetros termodinmicos foram determinados utilizando condutimetria. Os valores da energia de Gibbs, entalpia e a entropia foram obtidos por medidas de condutividade e temperatura. Os resultados mostraram que essas propriedades so proporcionais ao aumento da temperatura e ainda, as anlises quantitativas foram realizadas abaixo da concentrao micelar crtica.

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ABSTRACT The possibility to use natural materials, which are capable to degrade chemical compounds that are considered toxic to the environment, has been an attractive alternative. Besides, these materials are found in great abundance in the ecosystems. In the present work, the biodegradation of the anionic and cationic tensoactives lauril sodium sulphate (LAS) and cetylpyridinium chloride (CPC), respectively, was evaluated by investigating analytical parameters of spectrophotometric methods employed in surfactants determination. In the biodegradation process, the inoculums used, river, soil, and mud, were collected in So Joo del Rei region. Industrial and commercial samples were used for surfactant anionic biodegradation. Most of this work was development in the Chemistry Research Laboratory at So Joo del Rei University, whereas the microbiology assays were conducted at the University of So Paulo USP/ESALQ. In the biodegradation process standard solutions ranging from 1.0 to 5.0 mg L-1 of LAS and 30 to 50 mg L-1 of CPC were employed. The tensoactives biodegradation in these solutions were monitoring by quantitatively determining their concentration for a 20-day period. The analytical curves in the ranges 0.1 to 2.0 mg L-1 and 2.5 to 60 mg L-1 for the LAS and CPC, respectively, exhibited linear profiles (R=0.999). All inoculums allowed high (>95%) biodegradation of LAS. On the other hand, for CPC, the soil presented the best biodegradation. The results showed that the tensoactives were efficiently degraded by the microorganisms presenting the inoculums. The physical-chemistry proprieties in the process of micellization of the tensoactives were investigated for LAS and CPC (e.g. critical micelle concentration and dissociation degree). These thermodynamic parameters were determined by conductimetry. The Gibbs free energy (GMic), enthalpy (HMic), and entropy (SMic) were obtained by conductivity and temperature measurements. The results showed that these proprieties are directly proportional to the temperature. Furthermore, quantitative analyses were accomplished below the critical micelle concentration.

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Sumrio
Lista de abreviaturas e smbolos.......................................................................... ndice de Figuras................................................................................................... ndice de Tabelas.................................................................................................. 1 INTRODUO.............................................................................................. 2 OBJETIVOS................................................................................................... 3 REVISO DA LITERATURA...................................................................... 3.1 Classificao dos tensoativos...................................................................... 3.1.1 Tensoativos aninicos............................................................................... 3.1.2 Tensoativos catinicos.............................................................................. 3.2 Agregao dos tensoativos em soluo aquosa........................................ 3.3 Biodegradao............................................................................................. 3.4 Anlise de surfactantes............................................................................... 3.5 Demanda Qumica de Oxignio (DQO)...................................................... 3.6 Caracterizao termodinmica dos tensoativos estudados.......................... 4 RELAO ENTRE OS PARMETROS MICELAR E A ESTRUTURA DO TENSOATIVO.............................................................................................. 4.1 Natureza do grupo hidrofbico.................................................................. 4.2 Natureza do grupo hidroflico.................................................................... 4.3 Natureza do contra-on................................................................................ 4.4 Termodinmica do processo de micelizao............................................... 5 PARTE EXPERIMENTAL............................................................................ 5.1 Solventes e reagentes.................................................................................. 5.2 Equipamentos.............................................................................................. 5.3 Mtodo do azul de metileno lauril sulfato de sdio (LAS).................. 5.3.1 Extrao e anlise espectrofotomtrica do surfactante aninico........... 5.4 Mtodo do tiocianato de cobalto.................................................................. 5.4.1 Extrao e anlise espectrofotomtrica do surfactante catinico............. 5.5 Coluna de vidro........................................................................................... 5.6 Cintica de biodegradao.......................................................................... 5.6.1 Obteno e tratamento dos inculos....................................................... 5.6.1.1 Inculo de gua de rio......................................................................... 5.6.1.2 Inculo de solo de jardim..................................................................... 31 31 31 32 32 34 34 36 36 37 38 38 38 40 42 42 43 vi xi xiii 1 2 3 8 8 9 11 17 23 28 29

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5.6.1.3 Inculo lodo.......................................................................................... 5.7 Caracterizao de microorganismos isolados do solo................................. 5.7.1 Solo........................................................................................................... 5.7.2 Seleo de microorganismos degradadores............................................. 5.7.3 Ensaio de biodegradao.......................................................................... 5.8 Medidas de condutividade.......................................................................... 6 RESULTADOS E DISCUSSO.................................................................... 6.1 Estudo de diferentes solventes..................................................................... 6.2 Demanda qumica de oxignio................................................................... 6.3 Efeito da coluna de vidro............................................................................ 6.4 Anlise do surfactante aninico.................................................................. 6.5 Biodegradao do surfactante aninico...................................................... 6.5.1 Biodegradao do LAS pelo inculo rio.................................................. 6.5.2 Biodegradao do LAS pelo inculo do solo........................................... 6.5.3 Biodegradao do LAS pelo inculo do lodo........................................... 6.6 - Anlise do surfactante catinico.................................................................. 6.7 Biodegradao do tensoativo catinico...................................................... 6.7.1 Biodegradao do tensoativo catinico pelo inculo rio......................... 6.7.2 Biodegradao do tensoativo catinico pelo inculo do solo................. 6.7.3 Biodegradao do tensoativo catinico pelo inculo lodo....................... 6.8 Biodegradao com as bactrias isoladas.................................................... 6.9 Estudo termodinmico no processo de micelizao.................................... 6.9.1 - A variao da c.m.c com a temperatura.................................................... 6.9.2 - A relao entre a C.M.C e a estrutura do tensoativo................................. 6.9.3 - O grau de dissociao................................................................................ 6.9.4 Valores obtidos de GMIC......................................................................... 6.9.5 Entalpia e entropia do processo de micelizao....................................... 7 CONCLUSES.............................................................................................. 8 REFERNCIA BIBLIOGRFICAS..............................................................

44 45 45 45 46 46 47 48 49 50 51 52 54 60 62 64 66 66 68 69 72 77 77 78 81 83 84 87 89

LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1 - Reao de obteno do sabo............................................................. FIGURA 2 Estruturas de sabo com os detergentes............................................. FIGURA 3 Regies hidroflicas de alguns tensoativos aninicos ....................... FIGURA 4 Surfactante aninico, lauril ter sulfato de sdio............................... FIGURA 5 - Tensoativos catinicos ....................................................................... FIGURA 6 Representao das molculas do agente surfactante ......................... FIGURA 7 - Representao bidimensional das regies que formam uma micela inica normal com estrutura esfrica. X e O indicam as localizaes relativas dos contra-ons do grupo cabea e das caudas (hidrocarbonetos), respectivamente...... FIGURA 8 - Micela do surfactante em meio aquoso aps atingir a concentrao micelar crtica........................................................................................................... FIGURA 9 - Influncia do nmero de cadeias carbnicas na C.M.C ..................... FIGURA 10 - Interaes entre ons monovalentes, de um soluto, com os stios aninicos do surfactante........................................................................................... FIGURA 11 - Efeito das ramificaes das cadeias no processo de biodegradabilidade .................................................................................................. Figura 12: Grfico ilustrativo da condutividade em funo da concentrao do surfactante................................................................................................................ FIGURA 13 - Aparelho de separao do LAS (do ingls - Sublation apparatus)... FIGURA 14 - Representao esquemtica da coluna de vidro montada para os experimentos............................................................................................................ FIGURA 15 - Sistema para medidas de condutividade........................................... FIGURA 16 - Extrao do LAS com diferentes solventes orgnicos ..................... FIGURA 17 Amostras de resduos industriais antes do pr-tratamento na coluna de vidro.................................................................................................................... FIGURA 18 - Amostras de resduos industriais aps o tratamento na coluna de vidro......................................................................................................................... FIGURA 19 - Curva analtica do LAS.................................................................... FIGURA 20 - Diferenas estruturais entre o ABS e o LAS ................................... FIGURA 21 - Curva de degradao de um surfactante aninico............................

4 5 8 9 10 13

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15 15

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22

30 39

40 47 48

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FIGURA 22 - Biodegradao de uma soluo- padro 1,00 mgL-1 de LAS e uma amostra industrial..................................................................................................... FIGURA 23 - Biodegradao da soluo de 3,0 mgL-1 de LAS............................. FIGURA 24 - Biodegradao da amostra comercial (YP).................................... FIGURA 25 - Biodegradao da amostra industrial FITEDI.................................. FIGURA 26 - Biodegradao da amostra industrial FITEDI.................................. FIGURA 27 - Biodegradao da amostra industrial Cia SJ..................................... FIGURA 28 Biodegradao empregando o inculo solo para diferentes concentraes de LAS............................................................................................. FIGURA 29 Biodegradao empregando o inculo solo..................................... FIGURA 30 - Biodegradao de 5,00 mg.L
-1

55

56 57 58 59 59

61 61

de LAS empregando o inculo 63 64

lodo.......................................................................................................................... FIGURA 31 - Biodegradao das amostras industriais........................................... FIGURA 32 - Curva analtica obtida a partir das solues de cloreto de cetilpiridneo............................................................................................................ FIGURA 33 - Biodegradao de 50,0 mgL-1 do CPC, com inculo rio.................. FIGURA 34 - Repetio da biodegradao da soluo-padro do CPC................. FIGURA 35 - Biodegradao de 50,0 mgL-1 do CPC............................................. FIGURA 36 - Biodegradao das diferentes solues-padro do CPC.................. FIGURA 37 - Efeito da biodegradao dos diferentes inculos para a soluopadro de 50,0 mg.L-1 do CPC................................................................................ FIGURA 38 - Efeito da DQO na biodegradao do CPC, com o lodo.................... FIGURA 39 - Mapa metablico de transformaes do LAS pelas bactrias.......... FIGURA 40 - Efeito da biodegradao de 3,00 mgL-1 de LAS, na presena das bactrias isoladas..................................................................................................... FIGURA 41 - Efeito da biodegradao das bactrias estudadas em 3,00 mgL-1 de LAS......................................................................................................................... FIGURA 42 Valores da condutividade em funo da concentrao do surfactante catinico obtido pelos dados experimentais a 30C.............................. FIGURA 43 - Estudo da condutividade do LAS e CPC.......................................... FIGURA 44 Grfico da condutividade do LAS....................................................

66 67 67 68 69

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79 80 81

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LISTA DE TABELAS TABELA 1: Exemplos de tensoativos .................................................................... TABELA 2: Dados experimentais obtidos pelo estudo da DQO para a biodegradao com o lodo....................................................................................... TABELA 3: Valores da C.M.C do CPC obtidas por condutividade em diferentes temperaturas............................................................................................................. TABELA 4: Valores da C.M.C do LAS obtidos por condutividade em diferentes temperaturas............................................................................................................. TABELA 5: Valores da C.M.C para diferentes temperaturas , obtidos para os tensoativos............................................................................................................... TABELA 6: Valores obtidos do grau de dissociao (Frahm) por condutividade... TABELA 7: Energia livre de Gibbs do processo de micelizao dos tensoativos estudados.................................................................................................................. TABELA 8: Entalpia de micelizao HMic. para algumas temperaturas................ TABELA 9: Entropia de micelizao SMic para algumas temperaturas................ 83 84 85 78 82 78 77 71 7

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1 - INTRODUO A poluio dos cursos dgua pelos surfactantes um tema polmico que vem sendo discutido e estudado mundialmente, onde ilegal a comercializao de detergentes no-biodegradveis. No comeo dos anos de 1960, enormes quantidades de detergentes que tinham cadeias alqulicas ramificadas estavam sendo usadas. Estes surfactantes no eram degradados pelas bactrias e apareciam na descarga dos esgotos nos rios fazendo com que, os grandes rios, como o Mississipi, se tornassem imensas bacias de espuma, com graves aspectos estticos e efeitos txicos sobre a populao. A produo mundial do surfactante excede trs milhes de toneladas por ano, sendo a maioria utilizada como matria prima para fabricao de detergentes de uso domstico [1]. Os surfactantes tm sido alvos de crticas por se tratar do problema de contaminao do meio ambiente, devido ao seu excesso em descargas residurias e, principalmente, no sistema aqutico, pelo elevado teor de fosfato. O fosfato pode atingir at 50% de eficincia na limpeza, sendo, portanto, um dos maiores responsveis pelo aumento de contedo de nutrientes nas guas que so despejadas nos rios e lagos. O excesso de fosfato provoca o aumento da velocidade de crescimento e da produo de algas e ervas daninhas, causando o efeito da eutrofizao, diminuindo o teor de oxignio disponvel nas guas e comprometendo a vida animal. Embora existam outras fontes de nutrientes de fosfatos, como fertilizantes agrcolas e dejetos animais, o controle nos agentes de limpeza e resduos industriais reduziria muito a escala de contaminao, conforme defendem os rgos legisladores do meio ambiente, como a Fundao Estadual do Meio Ambiente (FEAM) e Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA). A maior utilizao dos surfactantes se d nas indstrias txteis, no processo de tingimento, pela necessidade da adio de uma substncia que diminua a tenso superficial (no caso, um tensoativo) das solues de corantes, facilitando sua interao com o tecido a ser tinto e aumentando a umectao das fibras. Devido ao grande emprego dos tensoativos, ocorreu nos ltimos anos um acmulo destes produtos em guas de crregos e rios devido descarga de efluentes industriais industriais e domsticos. No meio ambiente, alm de causar a eutrofizao, os tensoativos modificam as caractersticas da gua, como tenso superficial, provocando a morte dos seres que vivem na superfcie das guas e, conseqentemente, 1

dos peixes que se alimentam destas espcies. A modificao da tenso superficial tambm interfere na vida das aves que sobrevivem das espcies aquticas em geral. Na regio do Campo das Vertentes existe uma grande preocupao em relao aos resduos descartados no Rio das Mortes provenientes das indstrias txteis. Uma destas indstrias, a Companhia Txtil So Joanense (Cia SJ), tem se preocupado com a implantao de sistemas de tratamento de efluentes e tambm com a porcentagem de biodegradabilidade dos tensoativos que so utilizados durante seus processos de lavagem e tinturaria de tecidos. Considerando o problema exposto, o presente trabalho tem como objetivo verificar a quantificao analtica de dois tipos de surfactantes: um aninico, dodecil sulfato de sdio (SDS) ou lauril sulfato de sdio (LAS), e um catinico, cloreto de cetilpiridneo (CPC), cujas estruturas esto representadas abaixo. tambm nosso objetivo investigar o impacto desses surfactantes no meio ambiente, avaliando a porcentagem de biodegradabilidade em amostras coletadas diretamente das indstrias da regio do Campo das Vertentes.

SO3-Na+ Lauril sulfato de sdio

N+ Cloreto de cetilpiridneo 2 OBJETIVOS

Cl-

1 - Determinar os tensoativos aninicos e catinicos pelo mtodo oficial baseado no Standard Methods [2]. Nessa parte de desenvolvimento de metodologias pretende-se utilizar o mnimo de amostra e reagente para gerar menor quantidade de resduo; 2 - Trabalhar com amostras geradas nas indstrias da regio de So Joo Del Rei; 3 - Estudar a cintica de biodegradao do surfactante aninico (LAS) baseado na metodologia da ANVISA [3];

4 Desenvolver uma metodologia para o estudo da biodegradabilidade de surfactantes catinicos, baseada na metodologia de biodegradao de surfactantes aninicos da ANVISA [3]; 5 - Estudar a cintica de biodegradao dos tensoativos com diferentes tipos de inculos; 6 - Estudar o efeito da concentrao micelar crtica (C.M.C) dos surfactantes, em diferentes temperaturas, por meio de medidas de condutividade; 7 Caracterizar as colnias de bactrias mais eficientes no processo de biodegradao dos surfactantes. 8 - Estudar a termodinmica de micelizao dos surfactantes e, posteriormente, fazer um estudo comparativo com a literatura; 3 REVISO DA LITERATURA Durante vrias geraes, a aplicao mais difundida dos tensoativos foi na forma de sabes utilizados na limpeza. Estes sabes eram basicamente formados por sais de cidos graxos, feitos pela saponificao de triglicerdeos [4], sendo os primeiros tensoativos com aplicao prtica registrados por volta de 600 A.C. Foram utilizados pelos romanos, embora estes, provavelmente, tenham aprendido a sua manufatura com os celtas ou outro povo mediterrneo. Acredita-se, no entanto, que os sabes vinham sendo usados h mais de 2300 anos. Durante a 1 Guerra Mundial, foram introduzidos os primeiros tensoativos sintticos que, entretanto, no se tornaram produtos comercialmente viveis at a dcada de 1940. Com a 2 Guerra Mundial, devido escassez de leos e gorduras, os tensoativos sintticos vieram a substituir os antigos sabes para a maioria das aplicaes [5]. Logo aps a guerra, o tetrmero de propileno (TP, C12H25 ramificado) ligado ao benzeno, tornou-se o material predominante e os TP-benzeno sulfonados rapidamente superaram comercialmente todos os outros materiais detergentes. Durante o perodo de 1950 a 1965 corresponderam a mais da metade de todos os detergentes usados no mundo. Os TP-benzeno sulfonatos dominaram o mercado, sem nenhuma ameaa, at 1960. Nesta poca foi observado que os efluentes de esgotos estavam produzindo maiores quantidades de espumas em rios e lagos por todo o mundo. Alm disso, as 3

guas retiradas de poos prximos aos pontos de rejeitos domsticos tendiam a espumar medida que saam das torneiras. Tal fenmeno indesejado, aps muita investigao, foi atribudo impossibilidade dos TP-benzenos sulfonatos (tambm referidos como alquilbenzenos sulfonatos, ABS) de serem completamente degradados por bactrias e por outros processos no tratamento de efluentes industriais. Foi verificado que era a cadeia alqulica ramificada que dificultava a ao dos microorganismos. Os lcoois de cidos graxos sulfatados, por outro lado, possuam alta biodegradabilidade. Essa propriedade foi atribuda ao fato de apresentarem cadeias lineares. Os fabricantes de detergentes, voluntariamente ou pela legislao, mudaram dos TP-benzeno para os alquilbenzeno lineares (LAS) como matria-prima bsica para a obteno de molculas detergentes, devido maior biodegradabilidade e aceitao do ponto de vista de impacto ambiental destes ltimos. As vantagens apresentadas pelos tensoativos sintticos, em relao aos sabes, so o seu custo inferior e a sua melhor tolerncia dureza da gua (pois no sofrem precipitao em meio contendo ons de metais alcalino-terrosos) e variao do pH do meio [5]. Os detergentes mais comuns eram formados por molculas de cido sulfnico que, reagindo com soda caustica, formava o sulfonato de sdio. A hidrlise alcalina dos leos e gorduras resulta na formao de glicerol e sabo (sal de cido graxo), de acordo com a reao:

Figura 1 - Reao de obteno do sabo A estrutura de uma molcula de sabo formada por espcies qumicas que possuem uma extremidade apolar (a cadeia longa) e uma extremidade polar inica que se caracteriza como sal. Os detergentes possuem uma estrutura muito semelhante, conforme representado na Figura 2, porm so sintetizados industrialmente.

O C O Na
+

Sabo

SO 3-Na+

Detergente aninico
N+(CH3)3Br-

Detergente catinico Figura 2 Estruturas de sabo com os detergentes Molculas com estes tipos de estruturas, representadas na Figura 2, so chamadas de surfactantes (do ingls - surface active-agents), definidos como qualquer composto que modifica a tenso superficial (usualmente que reduz), quando dissolvido em gua, e que ainda altera de maneira anloga a tenso interfacial entre dois lquidos. O sabo uma dessas substncias, mas o conceito aplicado, com maior freqncia, aos derivados orgnicos, como os sais de sdio dos sulfatos ou dos sulfonatos de alquila de elevada massa molecular. Os surfactantes do sabo e dos detergentes sintticos efetuam, na lavagem, a ao de limpeza primria e formao de espuma, mediante o mesmo mecanismo de reduo desta tenso superficial. So molculas anfiflicas, isto , possuem na sua estrutura duas regies de polaridade opostas: uma polar (ou hidroflica) e outra apolar (ou hidrofbica). A presena destas duas regies distintas em uma mesma molcula faz com que a mesma apresente uma grande capacidade de adsoro na interface ar-gua ou leo-gua, assim como na superfcie dos slidos. A regio hidroflica constituda por grupos inicos ou no-inicos polares ligados cadeia carbnica, sendo normalmente denominada de cabea ou grupo polar do tensoativo. A regio hidrofbica constituda normalmente de uma ou mais cadeias alqulicas ou alquilfenlicas, com oito a dezoito tomos de carbono, linear ou ligeiramente ramificada, contendo, na maioria dos produtos comercializados, um anel benznico substituindo alguns tomos da cadeia. denominada de cauda do tensoativo.

Como conseqncia destas caractersticas, algumas destas substncias atuam como detergentes ou como agentes emulsificantes, dispersantes ou solubilizantes. Algumas caractersticas de um surfactante so a capacidade detergente, formao e estabilidade de espuma, suavidade pele e facilidade de remoo da sujeira. A tcnica utilizada para fabricar o sabo e sua frmula, combina os tensoativos as suas propriedades, desde biolgicas s industriais como: reguladores de espuma, reforadores, espessantes, aditivos, inibidores de corroso, agente anti-redeposio, inibidores de mancha, abrilhantadores pticos, agentes alvejantes, perfumes, corantes e enzimas, conforme a sua aplicabilidade [6]. Os tensoativos so classificados em quatro famlias importantes, de acordo com a funo da carga da regio hidroflica e do carter inico como: aninicos, catinicos, no-inicos e zwitterinicos (anfotricos). Alguns exemplos esto na Tabela 1.

Tabela 1 - Exemplos de tensoativos

Aninicos

CH3(CH2)10COO-Na+ CH3(CH2)11SO4 Na CH3(CH2)11

+

dodecanoato de sdio (sabo) dodecilsulfato de sdio (SDS) Dodecilbenzeno sulfonato de sdio (SDBS)

SO3- Na+ CH2 CO2 C8H18

Bis-(2-etilexil)-sulfossuccinato AAOT ou Aerosol-OT

de

sdio

Na+ -O3S CH CO2 C8H18 CH3NCH 2 COO-Na+ CO(CH2)10CH3

N-lauroilsarcosinato de sdio (Gardol)

Catinicos

CH3(CH2)12CH2N+(CH3)3Cl+ N C16H33Cl -

Cloreto de tetradeciltrimetilamnio (TTACl) Cloreto de hexadecilpiridineo (CPyCl)

Cloreto CH3(CH2)12CH2N (CH3)2CH2

+

tetradecilbenzildimetilamnio

Cl-

(TBzCl)

CH3(CH2)10CH2N+ (H)3ClCH3(CH2)15(CH2CH2O)20OH C8H17-C6H4-(CH2CH2O)10OH C12H25-(CH2CH2O)4OH

Cloreto de dodecilamnio
No-inicos

ter hexadecil(20)-polioxietilnico (Brij 58) ter 1,1,3,3-tetrametil-butil-fenil (9,5) - polioxietilnico (triton X-100) ter dodecil (4) poli-oxietilnico (Brij 30)

CH3(CH2)7CH=CH(CH2)8-(OCH2CH2)20OH ter oleil (20)-poli-oxietilnico ( Brij 99)

Zwitterinicos

C12H25N+(CH3)2CH2COOC12H25N+(CH3)2(CH2)3SO3-

N-dodecil-N,N-dimetil-betana 3-(n-dodecil-N,N-dimetilamnio)-propano1-sulfonato

3.1 Classificao dos tensoativos 3.1.1 Tensoativos aninicos So os maiores grupos de produtos disponveis comercialmente e representam em torno de 65 a 70% das vendas mundiais. Possui um ou mais grupos polares que, quando dissolvido ou disperso em meio aquoso, apresentam em sua constituio uma carga negativa, Figura 3, caracterstica de nions, e constituem a parte ativa em gua. Nos sulfonatos e fosfonados, o carbono liga-se diretamente ao enxofre e ao fsforo, respectivamente. Nos steres do cido sulfrico e do cido fosfrico o carbono liga-se ao oxignio.

Figura 3 Regies hidroflicas de alguns tensoativos aninicos O tensoativo aninico mais comumente empregado o dodecilbenzeno sulfonado de sdio (SDS), que apresenta excelentes propriedades de detergncia e poder espumante. Entretanto, apresenta problemas de solubilidade em gua, na presena de eletrlitos, aumentando o risco de turvao em algumas formulaes. Alm disso, um tensoativo causador de irritao e perda de umidade da pele, mas, nas concentraes empregadas em detergentes lquidos para lavagem manual de loua, no causam estes efeitos na pele. Sendo, portanto, o dodecil benzeno sulfonato de sdio o agente tensoativo mais utilizado na composio de detergentes em produtos de limpeza. Durante dez anos, at 1965, a produo de alquilados ramificados (ABS) teve um grande crescimento de produo. A utilizao de alquilados ramificados como matria-prima para detergentes foi interrompida devido ao fenmeno de produo de espumas nos cursos de gua e nas estaes de tratamento. Esse fenmeno foi causado pela taxa insuficiente de biodegradabilidade (os microorganismos degradam as cadeias ramificadas numa taxa extremamente lenta). O alquilado linear substituiu o ABS em regies onde existia o consumo elevado e/ou onde a legislao exigia uma degradao mais rpida do tensoativo. Nessa poca, esta substituio se fez em quase todos os 8

pases desenvolvidos. No Brasil, o Ministrio da Sade proibiu a partir de Janeiro de 1981 (art. 68 do decreto n 79094) a fabricao, comercializao ou importao de saneantes de qualquer natureza contendo aninicos no biodegradveis [7]. O lauril ter sulfato de sdio, conforme est representado na Figura 4, um tensoativo aninico que exibe um efeito sinrgico em relao capacidade de disperso de sujeira oleosa, da solubilidade em gua, da tolerncia a eletrlitos e da compatibilidade com a pele [8]. O lauril ter sulfato de sdio, bem como o lauril sulfato de sdio, utilizado em cosmticos devido ao seu baixo potencial de irritabilidade da pele. Os provenientes de lcoois graxos sulfatados de maior peso molecular, devido ao seu elevado ponto de turvao, no devem ser utilizados na formulao de xampus transparentes, porm so indicados para xampus cremosos e perolados. O lauril ter sulfato de sdio o tensoativo de uso mais difundido na fabricao de xampus [9], pois confere boa viscosidade e, por ser quase incolor, no interfere na cor do produto. Apresentando baixo poder de turvao, o lauril ter permite fabricar xampus que permanecem transparentes mesmo a baixas temperaturas.

Figura 4 Surfactante aninico, lauril ter sulfato de sdio; n = n mdio de mols de xido de eteno 3.1.2 Tensoativos catinicos Representam somente 5% das vendas mundiais, possui um ou mais grupos polares e quando dissolvidos ou dispersos em gua, apresentam cargas positivas na parte ativa da molcula. Devido a esta carga, esses produtos so utilizados como substratos para produzir compostos que conferem maciez, propriedades hidrofbicas e antiestticas, inibidores de corroso e agentes antimicrobianos [7]. So quaternrios de amnio produzidos pela reao de substituio nucleoflica de haletos de alquila por aminas. Os quatro tomos de carbono esto ligados diretamente ao tomo de nitrognio por ligaes covalentes, da a denominao de quaternrio, enquanto que o nion, geralmente cloro, est em ligao inica (Figura 5). Sua ao sobre a tenso superficial devido a uma grande cadeia carbnica, hidrofbica, unida a um grupo bsico hidroflico. No so usados como detergentes

domsticos porque apresentam um fraco poder detergente, mas so notveis umectantes e de grande poder de disperso. So inativados ou precipitados por agentes aninicos, como o sabo, devido a sua incompatibilidade [7]. Estes sais de amnio foram desenvolvidos em 1940 e so usados como amaciantes em produtos domsticos e auxiliares txteis (C12 a C18). Em amaciantes so utilizados devido necessidade do mercado causada pela introduo dos detergentes sintticos para roupas, os quais permitiram um bom nvel de limpeza, mas ao mesmo tempo, deixavam a roupa spera e desconfortvel. Os amaciantes possuem a capacidade de instalarem-se na superfcie das fibras de tecidos devolvendo a maciez original, perdida aps sucessivas lavagens com detergentes. Alm de amaciantes, agem como germicida, algicida, bacteriosttico em remdios e sanitizante em produtos de limpeza domstica e em piscinas (C8 a C10). Dependendo da sua concentrao em bactericidas, podem ser absorvidos pela membrana celular dos microorganismos e romper a membrana da clula. Nas concentraes geralmente usadas, so inodoros, ao contrrio dos outros desinfetantes como o cresol, o hipoclorito, o formol etc. Apresentam tambm a propriedade de formar uma pelcula aderente onde so utilizados. Por causa disso, so usados em cremes de enxge, xampus para cabelos, emulsificador de asfalto, lubrificantes, complexantes etc [8]. Os sais de amnio quaternrio (aminas quaternrias) so derivados amnicos ideais para as aplicaes em amaciantes de roupas, porque o tomo de nitrognio possui a carga positiva (Figura 5).
CH3 CnH2n+1 N
+

CH3 Cl

(a)

CH3

CH3 CnH2n+1 N+ CH3 Cl(b)

CnH2n+1
CH3 CnH2n+1 N
+

CH2

Cl

(c)

CH3

Figura 5 - Tensoativos catinicos: (a) cloreto de alquil trimetil amnio, (b) cloreto de dialquil dimetil amnio e (c) cloreto de alquil benzil dimetil amnio; n = 8 a 18

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A incorporao dos tensoativos catinicos s frmulas de ps de aninicos (mais vendidos para lavagem de roupas) e mesmo de lquidos difcil. O tensoativo tem que deixar os tecidos livres de qualquer contaminao. Ele acaba sendo eficiente a ponto de lavar o prprio amaciante e impede a deposio do mesmo nas fibras. Por isso, fica difcil compatibilizar a atuao dos dois ingredientes [9]. O amaciante precisa depositarse nas fibras para permitir seu deslizamento, dando a sensao de maciez. A carga eltrica negativa induzida pelos tensoativos, mais pronunciada em sintticos, neutralizada. Alm dos produtos para limpeza domstica, os catinicos, graas a sua natureza, apresentam outras aplicaes. O uso de aminas graxas em emulses asflticas deve-se a sua propriedade tensoativa. No setor de minerao, atuam como agente de flotao, permitindo que o minrio, ou sua impureza, a ser flotado, adquira propriedades hidrfobas, migrando para a superfcie e facilitando a separao [10]. A indstria txtil emprega os sais quaternrios como auxiliares de tingimento, pois as propriedades umectantes favorecem a penetrao de gua e outros lquidos nas fibras de tecidos, assegurando assim a penetrao dos corantes e, desse modo, a sua fixao [11]. As indstrias de defensivos agrcolas formulam seus produtos com aminas graxas etoxiladas como emulsionantes. A indstria de cosmticos usa os sais quaternrios como princpio ativo antiesttico em cremes e recondicionadores capilares, e as indstrias farmacuticas os usam como agentes bacteriostticos e auxiliares de extrao de antibiticos. Na clarificao do acar, as aminas quaternrias retm impurezas aninicas da soluo de acar, permitindo uma posterior cristalizao do acar branco refinado. 3.2 Agregao dos tensoativos em soluo aquosa A dissoluo de um tensoativo em gua provoca o aparecimento de interaes desfavorveis entre sua parte apolar e o solvente devido a: (I) alta tenso interfacial gua/hidrocarboneto, (II) estruturao das molculas de gua ao redor da cadeia hidrofbica (hidratao hidrofbica) e (III) diminuio nos graus de liberdade da cadeia hidrofbica [12,13]. Os monmeros do tensoativo tendem a adsorver (aderir) nas interfaces (lquido-vapor, lquido-slido ou lquido-lquido, quando disponvel), de modo a reduzir a energia livre total do sistema [12,13]. Nessa adsoro, as cadeias dos

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hidrocarbonetos permanecem para fora da soluo e os grupos hidroflicos na interface aquosa [14]. Neste fenmeno de adsoro, ocorre a substituio de molculas de gua, presentes na interface, pelo grupo hidrofbico do tensoativo. Como as foras intermoleculares de atrao entre uma molcula de gua e um grupo no polar so menores do que entre duas molculas de gua, isto reduz o poder de contrao da superfcie, ou tenso superficial [6]. Tenso superficial a tendncia que um lquido apresenta de reduzir ao mnimo a sua rea superficial. conseqncia da existncia de foras intermoleculares. Dependendo da sua estrutura, da concentrao e da composio do meio, os tensoativos podem se agregar em soluo aquosa formando micelas, vesculas ou cristais lquidos liotrpicos, entre outros tipos de agregados. Alguns tensoativos se agregam em solventes orgnicos de baixas polaridade e constante dieltrica, formando micelas inversas [6,15]. Quando um agente tensoativo adicionado gua, suas molculas tendem a arranjar-se de modo a minimizar a repulso entre seus grupos hidrofbicos e a gua. A parte hidroflica fica na soluo e a parte hidrofbica fica na interface gua-ar, conforme podemos observar na Figura 6. Essa disposio provoca uma diminuio da tenso superficial da gua.

(a)

(b)

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(c) Figura 6 Representao das molculas do agente surfactante: (a) superfcie da gua, (b) bolha de sabo e (c) interior da micela. Se aumentarmos a concentrao do agente tensoativo na gua, este tende a ocupar a parte interna da soluo, formando inicialmente dmeros, trmeros, tetrmeros, at que em determinada quantidade atingem a denominada concentrao micelar crtica (CMC), Figura 6 c. Acima dessa concentrao, as molculas do tensoativo formam grandes agregados moleculares de dimenses coloidais. Estes agregados so denominados micelas, geralmente contm 60 a 100 molculas do tensoativo, que se associam espontaneamente em soluo aquosa. Ento, quando as concentraes esto superiores CMC, as molculas possuem um dimetro entre 3-6 mm, o que representa de 30-200 monmeros. A CMC depende da estrutura do tensoativo (tamanho da cadeia do hidrocarboneto) e das condies experimentais (fora inica, contra-ons, temperatura etc.) [16]. Geralmente, em soluo aquosa, as molculas do tensoativo agregam-se formando uma esfera com caudas hidrofbicas voltadas para o seu interior e os grupos hidroflicos, ou carregados, para seu exterior. Cada micela composta por um certo nmero de molculas de tensoativos, denominado nmero de agregao, que determina geralmente o tamanho e a geometria do sistema micelar. O termo micela normal utilizado para se referir a agregados de tensoativos em meio aquoso, o qual apresentado na Figura 7.

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Figura 7 - Representao bidimensional das regies que formam uma micela inica normal com estrutura esfrica. X e O indicam as localizaes relativas dos contra-ons do grupo cabea e das caudas (hidrocarbonetos), respectivamente. Quando o tensoativo est, predominantemente, na forma de monmeros, abaixo da CMC, ocorre um equilbrio dinmico entre micelas e monmeros [12,17]. As micelas so termodinamicamente estveis e facilmente reprodutveis, e so destrudas pela diluio com gua ou ficando as concentraes ficarem abaixo da CMC. A formao das micelas acompanhada por mudanas distintas em vrias propriedades fsicas tais como espalhamento de luz, viscosidade, condutividade eltrica, tenso superficial, presso osmtica e capacidade de solubilizao de solutos [18,13]. Os contra-ons, quando em concentraes suficientes, provenientes da prpria ionizao do tensoativo ou ainda como aditivos soluo, diminuem a repulso entre as cabeas dos monmeros (Figura 8). A presena de Na2SO4, por exemplo, pode alterar a concentrao micelar crtica. A partir da concentrao micelar crtica que se manifesta ao do detergente. No entanto, os monmeros que mais contribuem para a diminuio da tenso superficial da gua, enquanto que as micelas, ao contrrio dos monmeros, ficam dispersas em toda a soluo, apresentando um menor efeito sobre a tenso superficial da gua. As cadeias apolares atraem-se e os grupos negativos repelem-se formando ligaes de hidrognio com a gua

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Figura 8 - Micela do surfactante em meio aquoso aps atingir a concentrao micelar crtica. As micelas, que no superam algumas dezenas de ngstrons, so responsveis pela grande maioria das propriedades de sabes e detergentes e suas utilizaes. Os fenmenos de umectao, emulso e disperso, que explicam o efeito detergente, so devidos s micelas complexas presentes nas solues e derivam da orientao das grandes cadeias das molculas. A fase hidroflica associa-se gua por pontes de hidrognio e a fase lipoflica associa-se s gorduras por interaes de van der Waals. Existe uma relao entre a concentrao micelar crtica com a presena de insaturaes e o tamanho da cadeia carbnica do tensoativo. medida que o nmero de tomos de carbono reduzido, diminui a concentrao da micela formada em meio aquoso. Na Figura 9 podemos verificar a influncia do nmero de carbonos na cadeia que formam a C.M.C.

Figura 9 - Influncia do nmero de cadeias carbnicas na C.M.C: (a) C-18 saturado, (b) C-12 saturado e (c) C-8 saturado Na figura 9.a vemos um micela, em soluo aquosa, de um surfactante C-18 saturado. Supondo que cada micela seja constituda por 12 cadeias saturadas, observamos que dever existir uma distncia mnima entre cada stio negativo para que 15

a repulso seja minimizada [19]. Em (b), vemos uma micela de um surfactante C-12 saturado. Supondo, tambm, que ela seja constituda por 12 cadeias, nota-se que a distncia entre cada stio aninico bem menor que em (a), o que tende a desestabilizar a micela. Portanto, a situao (c) aproxima-se mais do real, visto que as distncias so maiores entre os stios aninicos. Notamos, neste ltimo caso, que a micela seria constituda, em hiptese, por oito cadeias apenas. Dessa maneira, mais micelas seriam formadas para uma dada concentrao do agente surfactante. A adio de alguns ctions monovalentes e bivalentes, em solues aquosas contendo tensoativos aninicos, favorece a formao de micelas. A presena de solutos como o NaCl, Na2SO4, MgSO4, dentre outros, minimiza a repulso eletrosttica entre os nions, contribuindo, para a formao da micela. A adio desses sais, alm de provocar a formao de micelas com um nmero maior de molculas do tensoativo, provoca uma diminuio da mobilidade das partculas (Figura 10). Um excesso de eletrlito provoca a diminuio da solubilidade do tensoativo em gua, desestabilizando as micelas, produzindo turvao e separao de fases. Em alguns casos, mesmo com a quantidade adequada do eletrlito, um possvel abaixamento da temperatura pode ocasionar uma turvao indesejvel no produto. Nos detergentes formulados, como tensoativos sintticos, o uso do sulfato de magnsio (ction bivalente) no causa grandes problemas. Desse modo, pequenas quantidades do mesmo so suficientes para se obter a viscosidade desejada, no apresentando o risco do detergente ficar turvo e apresentar precipitados indesejveis. Porm, esse sal no deve ser adicionado nos sabes, porque forma sais insolveis.

Figura 10 - Interaes entre ons monovalentes, de um soluto, com os stios aninicos do surfactante.

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3.3 Biodegradao Com o aumento das reas urbanas e o desenvolvimento industrial e populacional, novos compostos tm sido sintetizados e continuamente introduzidos em grande quantidade nos mananciais hdricos. A maioria destes compostos so persistentes, ou seja, difceis de serem biodegradados, podendo ser bioacumulados ou, ainda, se transformarem em produtos txicos, causando assim srios transtornos ecolgicos. A poluio de corpos dgua com estes compostos provocam, alm da poluio visual, alteraes em ciclos biolgicos, afetando, principalmente, o processo de fotossntese. Assim, a busca de novas tecnologias e processos tm sido desenvolvidos e aplicveis ao tratamento de efluentes, para transformar substncias persistentes em substncias biodegradveis, no sentido de aumentar a eficincia dos sistemas de tratamentos biolgicos, de grande interesse industrial [20]. A biodegradao ou biotransformao uma das principais tcnicas de recuperao dos ecossistemas contaminados. um processo multifacetado, envolvendo um complexo de molculas que interagem com comunidades mistas de microrganismos. Desse modo, conta com a versatilidade metablica, especialmente de bactrias e fungos, capazes de biodegradar muitos tipos de resduos em substncias mais simples e menos txicas. De fato, durante muitos anos, pensou-se que os microrganismos podiam e deviam biodegradar completamente todas as substncias orgnicas, incluindo todos os poluentes contidos em guas naturais ou no solo. As invenes de alguns compostos, especialmente os organoclorados, os quais eram resistentes a uma rpida biodegradao, foi responsvel pela retificao dessa concepo errnea. As substncias resistentes biodegradao so chamadas recalcitrantes ou bioimunes [21,22]. No entanto, outras substncias, como muitos compostos orgnicos biodegradam-se totalmente, sendo transformados em compostos orgnicos menos txicos que as substncias originais. Os compostos sintticos mais poluentes so os que contm, principalmente, nitrognio e enxofre, que causam a poluio, sendo eles; os alquilsufonatos, os alquilbenzenos sulfonatos e os arilsulfonatos, comercialmente vendidos como surfactantes. Esses poluentes so biodegradveis, podendo os microrganismos utilizar o nitrognio (N) ou enxofre (S) como nutrientes [3].

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Dentro deste contexto, o setor txtil apresenta um especial destaque devido ao seu grande parque industrial instalado, gerador de grandes volumes de efluentes, os quais, quando no tratados, podem causar srios problemas de contaminao ambiental. A biodegradao de surfactantes foi estudada durante muitos anos [23,24], e ainda est sendo investigada [25,26]. A maioria desses estudos sobre biodegradao de surfactantes so determinantes para a degradao metablica pelos microorganismos [27,28] e esta relacionado estrutura do tensoativo. Esta estrutura determinante para uma melhor biodegradabilidade dos surfactantes [29,30,31]. A degradao de surfactantes em resduos industriais e domsticos depende das condies locais e regionais como: clima, tipo de solo, vegetao, fauna e microrganismos decompositores. Em 1995, Rocha et al. [32] fizeram um estudo para avaliar o comportamento de hidrofbicos da micela dos surfactantes. O tensoativo (Triton X-100) testado foi txico para bactria e, assim, impediu a biodegradao do bifenil e fenantreno em concentraes prximas da concentrao micelar crtica (C.M.C) do surfactante. Neste sentido, em 1996, Perez e colaboradores [33] em seus estudos comprovaram que o lauril sulfato de sdio (LAS) pode ser txico aos microorganismos responsveis pelo tratamento da degradao e dos organismos presentes em ecossistemas naturais. Este trabalho discutiu tambm o efeito do LAS na purificao aerbica por plantas presentes em esgoto. Os resultados mostraram que o LAS influncia no pH e na capacidade de degradao aerbica da matria orgnica na concentrao de 20 mg.L-1. De acordo com a ANVISA [3], os surfactantes so considerados biodegradveis, porque so substncias qumicas com propriedades tensoativas, susceptveis aos processos de decomposio e degradao pelos microrganismos. Em decorrncia desses processos, no origina substncias consideradas nocivas ao meio ambiente ou que possuam grau de toxicidade superior ao da substncia tensoativa original. Os principais grupos microbianos nesse processo so as bactrias e os fungos, contudo essa atividade regulada, principalmente, pelas condies ambientais [34]. O fator preponderante na atividade microbiana determinado pela velocidade e extenso da degradao dos compostos orgnicos. Logo aps a introduo dos surfactantes sintticos na dcada de 1940, foi demonstrado que os diversos campos de aplicaes poderiam induzir no meio ambiente a adaptao microbiana ocasionando um aumento na velocidade da degradao dos respectivos compostos.

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As bactrias so os principais microorganismos relatados na literatura e as mais utilizadas no processo de biodegradao. Alguns desses microorganismos podem ser isolados do solo e utilizados na biodegradao. Por exemplo, Pseudomonas sp e
Sphingomonas sp tm sido reportadas na degradao de corantes da indstria txtil, da

nicotina, em compostos que apresentam os radicais metil e etil. Entre outras, as

Pseudomonas aeroginosas so utilizadas na degradao de herbicidas. Recentemente,

pesquisadores isolaram do solo o fungo Phaenerochaete chrysosporium. Este tem a capacidade de mineralizao (precipitar), parcialmente, ou em alguns casos completamente, uma variedade de poluentes, que so resistentes degradao [35,36]. Neste contexto, Spadaro et al. [37] estudaram a ao do Phaenerochaete chrysosporium na descolorao de efluentes txteis, demonstrando que este fungo foi capaz de mineralizar alguns corantes. Assim, em 2000, Couto e colaboradores [38] observaram uma excelente eficincia no tratamento de uma amostra de resduo simulada em laboratrio alcanando descoloraes de 95%, aps o tratamento com o fungo
Phaenerochaete chrysosporium.

Em 2005, Chen e colaboradores [39] estudaram a biodegradao do surfactante no-inico (Triton X-100), usando culturas de diferentes espcies de bactrias em diferentes condies ambientais (pH). Para esta biodegradao isolaram cinco tipos de microorganismos chamadas de bactrias (A, B, C, D e E). Nesse trabalho observaram que as bactrias A, B e C utilizaram o surfactante como fonte de carbono e as outras utilizaram os sais (NH4)2SO4 e KNO3 do meio como fonte de nitrognio. A cintica de biodegradao foi eficiente em pH 7,0 para todas as bactrias em 18 h de incubao. Quiroga et al. [40] fizeram um estudo sobre a cintica de biodegradao de surfactantes (LAS e SDS) em guas do mar. Para isso propuseram um modelo cintico para avaliar a biodegradao do surfactante em duas temperaturas (5 e 20C), que resultava na converso e combinao dos compostos orgnicos em CO2 e H2O. Verificaram que o SDS melhor biodegradvel pelas enzimas hidroflicas presentes no meio, ou sintetizadas pelos microrganismos, enquanto que o LAS mais resistente biodegradao porque a ligao carbono entre o anel aromtico e o enxofre do grupo sulfonato mais difcil de ser quebrada biologicamente. Neste contexto, sobre biodegradao, as bactrias mais utilizadas so as Pseudomonas, elas so uma infinidade de espcies que agem no processo, mas no h muitos relatos na literatura sobre a biodegradao de surfactantes por estes microorganismos. Sabe-se que os microrganismos exibem duas estratgias para 19

assimilao ou metabolismo do substrato que so o catabolismo e o cometabolismo. No catabolismo, o substrato absorvido quebrado em molculas menores e vo gerar energia, consequentemente a biomassa microbiana aumenta s custas do substrato, e este diminui consideravelmente. Por outro lado, no cometabolismo ocorrem transformaes de um substrato secundrio biodegradvel como fonte de carbono e energia. Desta maneira, pode transformar em outro composto sem retirar energia para seu desenvolvimento [40]. Corte et al. [41] informaram a primeira descrio de biodegradao do SDS atravs de amostras de olo-diesel a 10C. Temperaturas maiores inibiram a biodegradao, devido baixa resistncia dos microrganismos a altas temperaturas. Neste sentido, Anderson e colaboradores [42] realizando testes com gua de rio, mostraram que 25 mg.L-1 de SDS era biodegradado aps 60-160 h a 5-10C. Depois, Marchesi et al. [43] informaram que 20 mg.L-1 de SDS era completamente biodegradado por bactrias do gnero Pseudomonas aps 12,5 h a 25C. A biodegradao de surfactantes assegurada em baixas concentraes ambientais. A maioria dos laboratrios estuda a biodegradao de surfactantes [43,44], a temperaturas mais altas que as normais na natureza, resultando na seleo de microrganismos que crescem nesta temperatura. Porm, o problema de poluio do surfactante severo em temperaturas mais baixas como prevalece no ambiente rtico e alpino. Em 1979, Water e colaboradores [45] conseguiram biodegradar o surfactante catinico na presena do surfactante aninico testado em bebidas alcolicas. Por um monitoramento, atravs de anlises colorimtricas, alcanaram uma biodegradao de 95% em concentraes de 0,1-10 mg.L-1. Algumas propriedades do inculo podem interferir no fenmeno da biodegradao acelerada, como por exemplo o contedo de areia e matria orgnica. Inculo com alto contedo de areia apresenta uma reduzida mineralizao, sendo que o pH pode ter efeito notvel neste processo. A diversidade microbiana bastante afetada pelo pH, e estudos tm demonstrado que pequenas flutuaes no pH podem ter efeitos na resposta microbiana frente aos resduos industriais. A quantidade e o tipo de argila podem afetar grandemente o local onde h carbono orgnico estabilizado. Neste ambiente, por exemplo, as argilas podem aumentar a taxa de crescimento microbiano, especialmente durante a degradao inicial de substratos orgnicos prontamente disponveis. Mas, por outro lado, podero reduzir a perda de carbono na forma de CO2, aumentando a eficincia da utilizao desse 20

elemento pelos microorganismos e ainda formando complexos com produtos de decomposio e com substncias hmicas [46]. Os produtos formulados a partir de detergentes sintticos, por sua vez, geralmente empregam ingredientes ativos do tipo aninico, como os sais sdicos de alquilbenzenos sulfonatos ramificados (ABS) ou lineares (LAS), pequenas quantidades de ingredientes ativos do tipo no-inico possuem como aditivos mais importantes o tripolifosfato de sdio, sem o qual a ao dos detergentes sintticos perde muito em desempenho. A presena desses derivados de ABS ou de LAS no esgoto causa o inconveniente da formao acentuada de espuma nos cursos de gua receptores (20,0 mg.L-1 so suficientes para formar espuma) [47]. Tanto o ABS quanto o LAS podem biodegradar-se parcialmente (biodegradao primria) ou completamente (biodegradao total), existindo um meio aerbio adequado e transcorrendo um tempo apropriado. A biodegradao primria aquela ocorrida quando a molcula alterada pela ao de um microrganismo, de maneira que tenha perdido suas caractersticas de tensoativo ou que no mais responda a procedimentos analticos para a deteco do tensoativo original. Oin et al. [48] avaliaram a biodegradao primria do surfactante catinico (brometo de cetilpiridineo) e anftero (N-dodecil-N,N-dimetil-betana) atravs de agitao trmica por anlises espectrofotomtricas. Os resultados apresentaram uma biodegradao de 94%. Os autores tambm mostraram que a biodegradao do surfactante diminui com o aumento da cadeia e que a presena do grupo hidroflico afeta a degradao do tensoativo, mas no sua biodegradabilidade. A biodegradao total ou mineralizao pode ser entendida como sendo a converso completa da molcula do tensoativo em CO2, gua, sais inorgnicos e produtos associados com o processo metablico normal da bactria. Em 1990, Tauk [46] estudou a biodegradao de resduos orgnicos no solo, atravs do hmus, em que verificou que a adio de um substrato orgnico, prontamente degradvel, pode aumentar grandemente a liberao de CO2 do hmus no solo. O LAS pode sofrer mineralizao biolgica total, produzindo CO2, gua e sulfato. O processo de biodegradao ocorre nas estaes de tratamento de esgotos e na natureza, e pode ser descrito pela etapa de oxidao de um ou dois grupos metila da cadeia alqulica, transformando-os em grupos carboxlicos. A oxidao destrutiva do anel aromtico a outra etapa, ocorrendo a quebra da ligao carbono-enxofre, provocando a liberao de sulfato [19]. 21

A degradao do LAS mais rpida que a do ABS porque um tensoativo mais biodegradvel quanto mais linear for seu radical lipoflico (apolar). Os ismeros dos alquilbenzenos sulfonatos, quando possuem o grupamento fenila ligado extremidade da cadeia, sofrem biodegradao mais rpida com relao queles que possuem o grupamento fenila ligado ao centro da cadeia carbnica. A presena de muitas ramificaes gera uma taxa de biodegradao extremamente lenta. Portanto, dentre os compostos apresentados a seguir, o ismero 2-fenil alcano degrada-se mais rapidamente (Figura 11).
CH3 CH3 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 mais biodegradvel
CH2 CH CH2 CH2 CH2

O S O O
-

CH2 CH

CH3 CH CH3

CH2

CH2

CH2

CH3

menos biodegradvel

S O
-

O CH3 CH2 CH2 CH CH3 CH2 CH CH3 CH2 CH CH2 CH3 S O O

-

pouco biodegradvel

Figura 11 - Efeito das ramificaes das cadeias no processo de biodegradabilidade Geralmente, a biodegradabilidade depende da existncia de condies aerbias. O tratamento aerbio do esgoto, ou a presena de condies de oxigenao intensa de guas receptoras, permite a reduo acentuada dos possveis malefcios decorrentes da ao desses surfactantes. Mongensen e colaboradores [49] demonstraram que o LAS pouco resistente biodegradao em condies anaerbias. Tentaram sua digesto em gua de esgoto, comprovando que a concentrao do LAS depende do aumento da matria orgnica durante a estabilizao anaerbica e sua transformao. Os sabes obtidos a partir de gordura animal e/ou vegetal, pelo fato de apresentarem cadeia carbnica linear, so rapidamente biodegradados no ambiente [50]. Bayona et al. [51] estudaram a biodegradao de alquilbenzenos (C11-C14) por culturas de bactrias Pseudomonas sp, revelando que a biodegradao do ismero aumenta quando o grupo fenil localizado no final da cadeia alquil, na presena de molcula que 22

contm grupo sulfonato. Posteriormente, em 1993, Purcha et al. [52] estudaram a biodegradao do hidrocarboneto aromtico policclico (PAIIs) e o efeito da micela do surfactante no-inico. Eles relataram completa biodegradao do hidrocarboneto pelas bactrias presentes no inculo derivado do petrleo durante o monitoramento de 65 h. Aly e colaboradores [53] estudaram durante 13 dias a biodegradao do surfactante aninico na presena dos compostos orgnicos hexadecano e naftaleno, usando dois tipos de solos, que continham petrleo. Demonstraram que o aumento da concentrao de surfactante no inibe a biodegradao na presena destes compostos orgnicos presentes neste solo, sendo que o naftaleno degrada mais que o hexadecano. Alguns microorganismos esto envolvidos no processo de biodegradao de substncias presentes em resduos industriais, enquanto que outros usam produtos dessa degradao para sintetizar novos compostos. 3.4 Anlise de surfactantes Os surfactantes so importantes, em Qumica Analtica, so capazes de modidificar algumas propriedades reacionais (velocidade da reao, estereoqumica) com conseqente melhoria em sensibilidade e/ou seletividade analtica. O emprego dos tensoativos em produtos naturais ou sintticos, apresentaram um aumento significativo nos ltimos anos, em praticamente todos os campos da Qumica Analtica. Muitos trabalhos utilizam os tensoativos, capaz de formar complexos, procurando melhorar o desempenho analtico, facilitando a quantificao no s do surfactante, mas tambm de outros compostos. A presena de surfactantes no meio reacional pode ocasionar a formao de um novo complexo com diferentes propriedades espectrais (usualmente com maior absortividade molar), alm de poder proporcionar tambm maior estabilidade e seletividade quando comparado com o complexo binrio. Estudos sobre os efeitos dos surfactantes na formao de complexos permitem concluir que maiores modificaes espectrais ocorrem, quando a carga do surfactante responsvel pela formao da micela oposta ao on do complexo, formado entre o reagente cromognico e o analito [54]. A formao de complexos ternrios pode ocorrer atravs de associao inica, como ocorre com complexo catinico, formado entre um on-metlico e a 1,10-fenantrolina com o nion vermelho de bromo-pirogalol [55].

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Uma forma de quantificar analiticamente espcies qumicas, como os surfactantes, a espectrofotometria UV-Vis. Esta uma tcnica muito explorada em funo da sua robustez, custo relativamente baixo e grande nmero de aplicaes desenvolvidas. Consultando o banco de dados do Analytical Abstracts, verificam-se mais de 30.000 citaes relacionadas a esta tcnica [56]. Os procedimentos espectrofotomtricos envolvem, geralmente, medidas diretas de espcies que absorvem radiao eletromagnticas, podendo tambm se acoplar a outras tcnicas e/ou processos como cromatografia, eletroforese e anlise em fluxo. A espectrofotometria fundamentada na lei de Lambert-Beer, que a base matemtica para medidas de absoro de radiao por amostras no estado slido, lquido ou gasoso, nas regies ultravioleta, visvel e infravermelho do espectro eletromagntico. Para medidas de absoro da radiao em determinado comprimento de onda, tem-se: A= log(I0/I) = bc; em que A a absorvncia, I0 a intensidade da radiao monocromtica que incide na amostra e I a intensidade da radiao que emerge da amostra. A absortividade molar () uma grandeza caracterstica da espcie absorvente, cuja magnitude depende do comprimento de onda da radiao incidente, b o caminho ptico (cm) e c a concentrao do analito na da amostra (mol.L-1) [54]. Para a determinao espectrofotomtrica de espcies qumicas de interesse na regio UV-Vis, normalmente necessrio o uso de reagentes para a converso da espcie de interesse em uma forma que permita a deteco de absoro de radiao com maior sensibilidade e/ou seletividade. Sendo assim, espcies que absorvem fracamente podem ser convertidas em compostos com maior absortividade molar, visando determinao de menores quantidades do analito [57]. Em 1961, Ross et al. [55] usaram o surfactante catinico brometo de N-cetilN,N,N-trimetil amnio (CTAB) para determinar espectrofotometricamente o estanho empregando o violeta de pirocatecol (PCV) como reagente cromognico. Um complexo vermelho foi formado entre o PCV e o estanho (IV) em pH 2,5, apresentando absortividade molar de 6,5 x 104 mol.L-1 e a medida espectrofotmtrica foi realizada em 555 nm. Considerando que o sistema de anlise qumica por injeo em fluxo acoplada a espectrofotometria uma tcnica muito explorada, vrios autores tm proposto a determinao do surfactante empregando esta tcnica. Com o intuito de automatizar a 24

determinao de tensoativos catinicos, Motomizu et al. [58] desenvolveram um mtodo espectrofotomtrico empregando o sistema FIA baseado na interao com indicador azo, alaranjado de metila, de etila, propila e butila em presena de tensoativo no-inico. Os melhores resultados foram obtidos com o reagente cromognico alaranjado de propila. A reao foi estudada em pH 6,8. Nesta condio, o indicador est protonado e apresenta mximo de absoro em 510 nm. Os tensoativos catinicos (quaternrios de amnio) reagem como o alaranjado de propila com mximo de absoro em 400 nm. Em presena do tensoativo aninico TX-100 forma-se um agregado (micela) devido ao par inico formado com o surfactante catinico, com absoro mxima em 485 nm. Nesse trabalho Motomizu e colaboradores obtiveram resposta linear na faixa de 10-6 mol.L-1 e conseguiram determinar o tensoativo noinico na concentrao de 0 a 3x10-5 mol.L-1 em batelada, e 0 a 2 x10-5 mmol pelo FIA. E para determinao do aninico foi de 0 a 2x10-5 mol.L-1 em batelada e 0 a 5x10-5 mol.L-1 pelo FIA. Ambos os procedimentos foram aplicados em amostras de guas naturais para as determinaes dos tensoativos catinicos cloreto de alquiltrimetil amnio e cloreto de diestearildimetil amnio. Assim sendo, baseados no efeito solvatocrmico da interao entre indicador azo e ons hidrofbicos, Motomizu e colaboradores [59] propuseram um sistema em fluxo para a determinao de tensoativos aninicos com os indicadores azo alaranjado de metila, etila, propila e butila. O procedimento foi baseado na reao entre SDS ou DBS e o on hidrofbico do quaternrio de amnio: cloreto de alquiltrimetil amnio formando um on complexo estvel. A frao residual do on hidrofbico reage com o indicador azo deslocando o mximo de absoro do indicador de 400 para 510 nm. Os melhores resultados foram observados quando foi utilizado o indicador alaranjado de propila, obtendo-se resposta linear entre 0,5 x 10-6 mol.L-1 e 8,0 x 10-6 mol.L-1, limite de deteco de 5,0 x 10-8 mol.L-1 e freqncia analtica de 50 determinaes por hora. Nesta mesma poca, visando explorar um novo procedimento analtico e tambm baseados no efeito cromognico, Tripathi et al. [60] determinaram o Fe3+ na gua de chuva observando o fenmeno da colorao, por meio da reao deste on com o tiocianato de cobalto, com limite de deteco de 8,0 mg.L-1. Em 1998, Patel e Patel [61] propuseram um procedimento utilizando o sistema FIA, baseado na precipitao de indicadores catinicos com tensoativos aninicos para a formao de pares inicos. Para isso, os autores investigaram os indicadores catinicos verde brilhante, verde de malaquita, azul de metileno, violeta de etila e cristal 25

violeta com os tensoativos aninicos SDS e DBS. Os melhores resultados foram observados quando utilizou-se o indicador catinico verde brilhante para a formao de pares inicos com SDS e DBS. Com o procedimento proposto, obteve-se linearidade entre 1,0 mg.L-1 e 20 mg.L-1, limite de deteco de 0,1 mg.L-1 e freqncia de amostragem de 50 determinaes por hora. Este procedimento foi aplicado em amostras de guas de rio e efluentes domsticos. Em 1999, Patel e colaboradores [62] propuseram outro procedimento utilizando sistema FIA acoplado ao mtodo espectrofotomtrico baseado em formao de complexos ternrios Fe (III), tiocianato de amnio e tensoativo catinico DTAB, TTAB, CTAB e CPC. O mtodo consiste no aumento da absoro em 410 nm com a adio do tensoativo catinico ao complexo Fe(III)-SCN- . Com esse procedimento, Patel e colaboradores obtiveram linearidade entre 0,5 e 30 mg.L-1 e limite de deteco de 0,25 mg.L-1, sendo este limite de deteco maior que o trabalho de Tripathi (2.0x104mol.L-1 em 490 nm), para o on ferro. Possvelmente as condies experimentais influenciassem esta diferena no limite de deteco. Estudos de potenciais interferentes no apresentaram interferncia significativa. O procedimento foi aplicado em amostras de guas, efluentes domsticos, detergentes e xampus. Em 2000, Nemcova et al. [63] propuseram um sistema FIA para determinao de tensoativos catinicos e no inicos baseando-se na formao com Cu(II)cromazurol S. Nesse caso, foram avaliadas as potencialidades do sistema FIA proposto obtendo-se resposta linear entre 0 e 13 mg.L-1, desvio padro entre 4,4% e 0,5% e freqncia de amostragem de 120 determinaes por hora. Muitas das inovaes referentes espectrometria de absoro molecular consistem em estratgias para o aumento de sensibilidade, permitindo que concentraes da ordem de nmol.L-1 sejam detectveis. Nesse sentido, Sun et al. [64] desenvolveram um mtodo espectrofotomtrico para determinar o surfactante catinico cloreto de benzildimetiltetradecilamnio em sedimentos, a partir de sua extrao e separao por uma membrana de politetrafluoretoetileno (PTFE). O surfactante foi medido a 603 nm, obtendo resultados satisfatrios, atingindo de 85 a 100% de recuperao. Safavi et al. [65] fizeram a determinao dos surfactantes catinicos brometo de dodecyltrimetilamnio (DTAB) e cloreto de cetilpiridneo (CPC) em amostras de xampus. Esse procedimento foi baseado na quimiluminescncia gerada durante a oxidao do luminol por N-bromosuccinimide NBS e N-colorosuccinimide NCS em 26

meio alcalino. O mtodo simples, rpido e seletivo para o sistema FIA, com um limite de deteco de 0,86x10-5 mol.L-1 para DTAB e 0,42x10-5 mol.L-1 para o CPC. Em 2005, Lavorante et al. [66], baseado em trabalhos anteriores [67], determinaram o surfactante aninico dodecil sulfato de sdio (SDS) por FIA com o metil orange (MO) em pH 5,0, na presena do surfactante catinico cloreto de cetilpiridneo (CPC). Por meio da formao do par-inico CPC+MO, e posteriormente na presena de SDS, ocorre a substituio do MO pelo surfactante aninico SDS, o qual ser determinado. O mtodo proposto apresentou um limite de deteco de 0,0034 mg.L-1 para o tensoativo aninico. Devido versatilidade de aplicaes dos surfactantes torna-se necessria sua determinao em guas naturais de maneira a verificar seu potencial de contaminao, com a inteno de diminuir o consumo de solvente e o volume de efluente gerado na anlise de tensoativos aninicos. Nos Estados Unidos, o limite permitido de 700,0 g.L-1 em amostras de gua para o consumo humano e 1,0 mg.L-1 para peixes. Neste contexto, Torralba et al. [68] desenvolveram um procedimento em multicomutao para determinar o surfactante aninico dodecil sulfato de sdio (SDS) em amostras de gua. Basearam-se no mtodo de referncia (azul de metileno), que determina o par inico formado com o azul de metileno (MB) e o tensoativo. Este mtodo proposto por Torralba e seus colaboradores foi um procedimento analtico muito importante, pois reduziu a quantidade de clorofrmio e l de vidro que trazem incmodo para quem os manuseia, e so caros, assim conseguiram aumentar a produtividade do laboratrio. Deste modo, teve-se uma reduo de 35 vezes no volume de efluente gerado, reduzindo o volume em torno de 97%, sem perdas de sensibilidade. Os pesquisadores obtiveram uma faixa linear entre 0,2 mg.L-1 a 1,7 mg.L-1 de SDS , com limite mximo de deteco de 1,7 mg.L-1 e desvio padro de 5,9% e freqncia de amostragem de 40 determinaes por hora. Tambm foram realizados estudos de potenciais interferentes, e no foram observadas interferncias significativas. O procedimento foi aplicado para amostras de efluentes domsticos e industriais e os resultados foram comparados com o mtodo de referncia em que no foi observada diferena significativa em nvel de 95% de confiana. Obtendo uma reduo em torno de 97% do consumo do solvente orgnico (clorofrmio). Aps consultar a literatura, e baseando no trabalho de Torralba [68], na presente dissertao foram utilizadas duas metodologias de referncia em batelada para quantificarmos os tensoativos: 27

1 - mtodo do Azul de Metileno (MBAS), substncias ativas ao azul de metileno, para quantificar o surfactante aninico Sthandard Methods [2] e 2 mtodo do tiocianato de cobalto (CTAS), substncias ativas ao tiocianato de cobalto, para quantificar o surfactante catinico, Sthandard Methods [2]. A quantificao rotineira dos surfactantes foi realizada espectrofotometricamente em seus respectivos comprimentos de onda de mxima absoro. Ambas as metodologias foram feitas em batelada e sofreram algumas adaptaes com o intuito de consumir menor quantidade de reagentes e amostra possveis. 3.5 Demanda qumica de oxignio (DQO) As tcnicas e, principalmente, o equipamento empregados nas pesquisas hidrobiolgicas variam conforme a finalidade do estudo que est sendo realizado, as caractersticas ambientais do rio ou lago considerado e, sobretudo, com os recursos disponveis para a realizao do trabalho. Estudos limnolgicos com finalidade tcnica ou cientfica requeram, geralmente, aparelhos de grande complexidade e alta preciso. Para trabalhos em reas reduzidas e anlises de rotina, ou quando no se dispe de grandes recursos financeiros, pode-se empregar equipamento mais modesto, aumentando o nmero de dados em poucos pontos de coleta, obtendo-se, dessa forma, uma preciso razovel de resultados, com um mnimo de despesas de material e operao. A obteno de informaes integradas sobre um determinado local depende basicamente do estudo das interaes que ocorrem entre os fatores biticos e abiticos que regem o funcionamento desse ecossistema. Porm, no se pode esquecer que estas interaes esto vinculadas a uma escala temporal, refletindo um comportamento dinmico e imprevisvel, intrnseco a cada ambiente. A Demanda Qumica de Oxignio (DQO) um parmetro que caracteriza de modo indireto a quantidade de oxignio consumido num processo de degradao qumica da matria biodegradvel ou no. Uma das limitaes deste teste o fato de que no diferencia a matria orgnica no biodegradvel da biodegradvel. A matria orgnica biodegradvel determinada pelo teste de DBO (Demanda Bioqumica de Oxignio). A vantagem da DQO em relao a DBO o tempo do ensaio, a demanda qumica de oxignio e realizado em poucas horas, enquanto o ensaio de DBO requer no 28

mnimo cinco dias. Entretanto, a DQO o oxignio requerido para estabilizao da matria orgnica atravs da ao qumica de um oxidante qumico enrgico (dicromato de potssio). Por isso a DQO normalmente maior que a DBO5(demanda bioqumica de oxignio do 5 dia) a 20C. Para cada ao da DBO, ocorreu, anteriormente, certa ao de DQO, em menor intervalo de tempo. Tal anlise indica, na realidade, a capacidade total que a amostra tem de consumir o oxignio, atravs de reaes qumicas. guas ricas em matria orgnica e inorgnica apresentam maiores ndices de D.Q.O. No decorrer dos experimentos surgiram alguns questionamentos e algumas dvidas em relao ao inculo lodo, pois este um composto orgnico que tem uma parte slida e uma parte liquida. Nesse sentido, ser que o CPC no estaria sendo adsorvido na superfcie slida do lodo ao invs de estar sendo biodegradado? Esta dvida no surgiu com a gua de rio e nem com o solo, pois os mesmos foram estudados em soluo aquosa aps sofrer uma filtrao. Neste sentido no presente trabalho foi utilizado a tcnica de DQO para determinar a quantidade de matria presente no meio, ou seja determinar indiretamente a quantidade de tensoativo presente no meio. Esta tcnica foi utilizada apenas para o estudo do inculo lodo. 3.6 Caracterizao termodinmica dos tensoativos estudados A tcnica de condutividade e a calorimetria so propriedades que podem ser empregadas para determinar parmetros termodinmicos de micelizao de surfactante e seus efeitos nas estruturas dos agregados formados. Permitindo observar fatores que controlam as propriedades das solues dos surfactantes em suas aplicaes. Pode-se obter parmetros fsico-qumicos, como; energia livre de Gibbs Gmic, entalpia Hmic e entropia Smic, do processo de formao micelar. A termodinmica de formao de micelas depende de parmetros como tamanho da cadeia, grupo hidrofbico. O objetivo desta parte da dissertao relacionar: (I) os parmetros fsico-qumicos de solues aquosas dos tensoativos e (II) se a formao de micelas ocorrem antes ou depois das concentraes estudadas no presente trabalho. O clculo dos termos termodinmicos exige o conhecimento, prvio, da C.M.C e do valor de . Esse ltimo pode ser calculado pela equao de Frahm (equao 1) que

29

por sua vez, requer o conhecimento da inclinao da reta aps a C.M.C e antes da C.M.C. De acordo com Frahm e seus colaboradores [13], a razo entre os coeficientes angulares das retas, dos grficos de condutividade especfica em funo da concentrao, aps e antes da C.M.C., fornece uma estimativa do valor do grau de dissociao ( ):
Frahm = S2/S1 Equao 1

sendo S2 e S1 os coeficientes angulares das retas aps e antes da C.M.C, respectivamente. A curva obtida em um grfico de medidas de condutividade especfica em funo da concentrao para um tensoativo, Figura 12, apresenta uma mudana abrupta em sua inclinao na regio da C.M.C. Os dados de condutividade especfica, em funo da concentrao obtidos experimentalmente, obtm-se um grfico semelhante ao da Figura 12, permitindo calcular os valores de grau de dissociao das micelas (), que podem ser calculados pela equao 1.

Figura 12: Grfico ilustrativo da condutividade em funo da concentrao do surfactante. Neste tratamento, a micela considerada como um macroon e sua contribuio condutividade total da soluo so considerados semelhantes dos monmeros do tensoativo, o que pode ocasionar uma super-estimativa do grau de dissociao [69]. Aps obter esses dados, pode-se calcular suas grandezas e comparar se os resultados esto prximos aos citados na literatura [70,71].

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4 RELAO ENTRE OS PARMETROS MICELARES E ESTRUTURA DO TENSOATIVO 4.1 Natureza do grupo hidrofbico. O processo de micelizao semelhante, termodinamicamente, transferncia de grupos hidrocarbonetos de uma soluo aquosa para um meio apolar e hidrocarbonetos lquidos [72]. Desta forma, a variao do nmero de tomos de carbono presentes na cadeia alqulica da parte hidrofbica de uma srie homologa de tensoativos um fator determinante da C.M.C. De uma maneira geral, o aumento da cadeia carbnica, fixando-se as demais variveis, provoca aumento na hidrofobicidade do monmero, diminuindo o valor de C.M.C. e aumentando as dimenses da micela [73,6]. 4.2 Natureza do grupo hidroflico A variao da natureza do grupo hidroflico para tensoativos que possuam a mesma cadeia hidrofbica, no provoca grandes alteraes no valor de C.M.C. como as descritas no item anterior [74]. Entretanto, a natureza do grupo hidroflico um fator importante na determinao do tamanho micelar e na reatividade de reaes catalisadas por solues micelares aquosas. O tamanho micelar , entre outros itens, controlado pela distncia mdia de aproximao dos contra-ons ao centro de carga do tensoativo [75]. Grupos hidroflicos de pequeno volume permitem que os contra-ons se aproximem da interface micelar, fazendo com que o grau de dissociao seja pequeno. Isto diminui a carga efetiva da micela o que resulta em um aumento do nmero de agregao micelar. Por outro lado grupos hidroflicos de grande volume dificultam a aproximao dos contra-ons, aumentando o grau de dissociao e diminuindo o nmero de agregao micelar [76,77]. Assim, na srie de cloreto de hexadeciltrialquilamnio observa-se a formao de micelas at o cloreto de hexadecitri-n-butilamnio [78] embora Buckingham [79] tenha observado formao de micelas acima de 35C para brometo de tri-npentiltetradecilamnio.

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4.3 Natureza do contra-on Uma mudana na natureza do contra-on em tensoativos inicos, por exemplo, por uma maior polarizabilidade ou maior valncia, provoca maior interao entre o on e a cabea da molcula de tensoativo, o que d origem a uma diminuio na C.M.C. e um correspondente aumento no nmero de agregao. Um aumento no tamanho do contraon, considerando seu raio hidratado, leva a um aumento no valor de C.M.C. [16, 80, 6]. 4.4 - Termodinmica do processo de micelizao A termodinmica da formao de micelas em soluo aquosa tem sido explicada principalmente atravs de duas diferentes abordagens [81,13]: i) modelo de separao de fases, no qual considera-se que as micelas constituem uma nova fase formada no sistema, acima da concentrao micelar crtica (C.M.C.) e pode ser escrito por: (Nag + m) S mS + SNag

Equao 2

sendo Nag o nmero de molculas de tensoativos constituintes de cada micela (nmero de agregao), m o nmero de molculas de tensoativo livres em soluo (no micelizadas), S representa o monmero do tensoativo, SNag a micela e a seta () indica uma nova fase e Kn a constante de equilbrio de formao da micela; ii) modelo de ao das massas, no qual considerado que as micelas e os monmeros esto em uma espcie de equilbrio qumico, que pode ser representado por uma seqncia de mltiplos equilbrios:
K2 K3
K4

S+S S2 + S
S3 + S

S2 S3
S4

...
SNag-1 + S
Kn

SNag,

ou em uma etapa:

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NagS

Kn

SNag

Equao 3

No modelo de separao das fases (ou pseudofases), pode-se escrever [81]:

micela = monomrico + RT ln(C.M.C)

Equao 4

em que: micela = potencial qumico da fase micelar A energia livre de micelizao, ou seja a energia livre de Gibbs a diferena entre os potenciais qumicos do monmero na micela (micela) e em soluo diluda (monomrico):
Gmic = micela + monomrico = RT ln(C.M.C)

Equao 5

Para tensoativos inicos, na ausncia de eletrlito externo, essa equao fica:

Gmic = (2 - ) RTln(C.M.C)

Equao 6

em que: grau de dissociao Recentemente, trabalhos citados na literatura [70,82-85], mostram que a concentrao de frao molar tem sido usada preferencialmente nos clculos da energtica do processo de micelizao. Nesse sentido, os valores de C.M.C obtidos nas Tabelas 3 e 4 foram convertidos para frao molar e empregados na equao 6. O estado padro hipottico para o tensoativo em soluo aquosa tomado como sendo o monmero solvatado frao molar igual a um, com as propriedades de uma soluo infinitamente diluda. Para o tensoativo micelizado, o estado micelar por si prprio considerado como sendo o estado padro [6]. As solues de trabalho so muito diludas, permitindo que as concentraes dos solutos sejam obtidas como iguais s suas atividades.

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5 PARTE EXPERIMENTAL O trabalho foi desenvolvido no Laboratrio de Pesquisa em Qumica da Universidade Federal de So Joo Del Rei- UFSJ. As anlises para identificar as colnias de bactrias estudadas, foram realizadas no laboratrio de Microbiologia da ESALQ, Piracicaba SP. 5.1 Solventes e regentes Os solventes e reagentes utilizados foram da Synth, Grupo de Qumica, Ecibra, Reagen, Vetec (nacionais) e/ou Sigma Adrich (importados) [86,87], e foram tratados ou preparados conforme descrito a seguir. Todos os reagentes utilizados foram de grau analtico (P.A) e preparados com gua destilada e deionizada. Para a quantificao analtica do surfactante aninico foram utilizados os seguintes reagentes:
Soluo-padro de LAS (VETEC - 90,0%): foram dissolvidos aproximadamente

1,2075 g de C12H25NaO4S (previamente seco), em 1000 mL de gua, obtendo uma concentrao de 1000 mg.L-1;
Clorofrmio (Synth-99,80%); Cloreto de metileno ou dicloro metano (Synth- 99,5%); Tolueno (Synth - 99,5%); Benzeno (Reagen); Soluo de azul de metileno: foram dissolvidos 100 mg (0,1 g) de C16H18N3SCl.3H2O

(Synth) em 100 mL de gua, em seguida foram transferidos 30 mL para um balo volumtrico de 1000 mL. Adicionaram-se, 6,8 mL de H2SO4( Synth- 95,0-98,0%) concentrado e 50,0 g de NaH2PO4.H2O (Ecibra- 99,0%), completando-se para 1000 mL com gua;
Soluo lavadora de fosfato: adicionaram-se 6,8 mL de H2SO4 (Synth 95,0-98,0% )

concentrado em 500 mL de gua e 50 g de NaH2PO4.H2O (Ecibra- 99,0%). Em seguida a dissoluo foram completados para 1000 mL de gua;
Perxido de hidrognio concentrado (Synth - 29,0%); utilizado apenas para amostras

de resduos industriais e
Acetona (Ecibra): usada para secar a vidraria.

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Para determinar quantitativamente o surfactante catinico foram utilizadas as solues abaixo:

Soluo-padro de CPC (Sigma Aldrich- 99,0%): dissolveu-se 1,0 g de

C21H38NCl.H2O, em 1000 mL de gua, obtendo uma soluo de 1000 mg.L-1 e

Soluo tiocianato de cobalto: foram pesados 30,0 g de Co(NO3)2. 6H20 (Vetec - 98,0-

102,0%) e dissolvidos em 500 mL de gua. Em seguida foram adicionados 200 g de NH4SCN (Synth-97,5%), aps dissoluo o volume foi completado para 1000 mL com gua. Para o pr-tratamento da amostra na coluna de vidro foram utilizados os seguintes reagentes:
Soluo de cido ntrico (0,5 mol.L-1): foram diludos 50 mL de HNO3(Synth - 64,0-

66,0%) em 1000 mL de gua. Esta soluo foi sempre utilizada para lavar a vidraria usada nas anlises;
Cloreto de sdio (0,1 mol.L-1): foram pesados 100 g de NaCl (Synth - 99,0%) e

adicionados na amostra da coluna de vidro;

Bicarbonato cido de sdio (0,1 mol.L-1): foram pesados 5 g de Na2HCO3(Grupo

Qumica) e adicionados na amostra da coluna de vidro e

Acetato de etila: CH3COOC2H5 (Synth- 99,5%).

Para preparao dos inculos e para verificar o crescimento de bactrias foram preparadas as seguintes solues:
Agar Nutritivo: foram dissolvidos 2,0 g de agar nutriente (Synth) em 1000 mL de

gua;
Agar nutriente: foram dissolvidos 8,0 g de agar nutriente (Biobrs), em 1000 mL de

gua;
Soluo-tampo fosfato: foram pesados 8,5 g de fosfato monobsico de potssio

KH2PO4 (Reagen), 21,75 g de fosfato dibsico de fosfato, K2HPO4(Synth -99,0%), 33,4 g de fosfato dibsico de sdio heptahidratado Na2HPO4. 7H2O (Ecibra-99,0%) e 17,0 g de cloreto de amnio NH4Cl (Synth 99,5%) e dissolvidos em 1000 mL de gua;
Soluo de sulfato de magnsio (0,2 mol.L-1): foram dissolvidos 22,5 g de

MgSO4.7H2O (Reagen) em 1000 mL de gua;

Soluo de cloreto de clcio (0,2 mol.L-1): foram dissolvidos 27,5 g de CaCl2 anidro

(Ecibra) em 1000 mL de gua e

35

 Soluo de Cloreto frrico (0,1 mol.L-1): foram dissolvidos 0,25 g de FeCl3.6H2O

(VETEC) em 100 mL de gua. 5.2 Equipamentos Um espectrofotmetro UV-visvel- Cary 50 Probe (Varian), com arranjo linear de foto diodo - Interfaciado com um microcomputador foi empregado nas determinaes espectrofotomtricas. Para fazer a esterilizao dos materiais utilizados no estudo das bactrias isoladas do solo foi utilizado uma estufa Quimis (200C), um autoclave Bio Eng (120C). A mesa agitadora (TECNAL TE-140) foi empregada para homogeneizar a soluo de preparo do inculo a partir dos microorganismos isolados do solo. Os dados termodinmicos foram obtidos com um Condutivmetro SM LF 37 acoplado a um eletrodo LTG 1/22 SM e um banho-maria ( Quimis). 5.3 Mtodo azul de metileno - lauril sulfato de sdio (LAS) A metodologia utilizada foi baseada na proposta descrita pelo Standard Methods, a qual descreve o mtodo espectrofotomtrico para determinao de surfactantes aninicos em amostras de guas naturais, efluentes domsticos, industriais, abastecimento e lodo. O presente mtodo aplicvel a substncias ativas ao azul de metileno (MBAS) para baixas concentraes em torno de 0,025 mg.L-1 LAS [2]. O LAS reage com o ction do azul de metileno (MB+), formando um complexo azul, reao descrita abaixo. O produto era extrado em clorofrmio, por duas vezes, sendo o corante original insolvel neste meio. O extrato, ou seja, a fase orgnica, lavada com soluo cida (soluo lavadora de fosfato) para hidrolisar complexos menos estveis das possveis substncias interferentes.
+ +

(MB )Cl + RSO3Na

(MB )(RSO3) + NaCl

Equao 7

A extrao realizada com a finalidade de se eliminar os componentes inorgnicos e/ou insolveis (fosfatos, sulfatos, carboxilatos orgnicos e fenis), os quais poderiam interferir na determinao quantitativa. Outras espcies como, aminas,

36

cianetos, cloretos, nitratos e tiocianatos tambm sero eliminados pela soluo de fosfato, quando formam pares inicos com o azul de metileno. Os cloretos, com o azul de metileno, interferem em concentraes a partir de 1000 mg.L-1 [81]. A eliminao quantitativa desses componentes no necessria, assim como no necessria extrao quantitativa dos tensoativos. Entretanto, o extrato deve conter, pelo menos, 90% das substncias que respondem ao azul de metileno, contidas no produto comercial ou na amostra a ser estudada [2]. Diariamente para realizar as determinaes foi necessrio realizar uma curva analtica para quantificar as amostras de interesse. A intensidade de cor azul obtida na fase orgnica foi monitorada a 652 nm [2]. O mtodo especialmente valioso para a determinao de baixas (limites de 0,0025 mg.L-1) concentraes dos surfactantes e, por isso, til nos estudos de poluio ambiental dos recursos hdricos. 5.3.1 Extrao e determinao espectrofotomtrica do surfactante aninico Com intuito de evitar menores custos e danos a sade buscou-se por algumas modificaes na metodologia oficial [2], empregada para determinao dos surfactante aninico. Em um funil de separao de 125 mL foram adicionados 25 mL da amostra de surfactante aninico, 2 gotas de cido sulfrico(1,0 mol.L-1), 2,5 mL de cloreto de metileno e 6,3 mL do reagente azul de metileno. Para amostras industriais, 2 gotas de perxido de hidrognio foram adicionadas, para evitar a descolorao do azul de metileno. Aps agitao, transferiu-se a poro para um bquer, repetiu-se a extrao adicionando-se mais 2,5 mL de cloreto de metileno, combinando todos os extratos no mesmo bquer. Posteriormente, devolveu-se a fase orgnica para o funil de separao. Adicionou-se aos extratos 12,5 mL da soluo lavadora de fosfato, no mesmo recipiente que continha o resduo da fase orgnica, agitou e devolveu para o funil de separao a fase lquida que sobrou do bquer. Agitou vigorosamente por 30 segundos e deixou em repouso para separar a fase orgnica. Aps este repouso, transferiu-se esta fase para um balo volumtrico de 10 mL, atravs de um funil com algodo pr-lavado com o dicloro metano. Completou-se o volume do balo volumtrico com dicloro metano e homogeneizou.

37

5.4 Mtodo do tiocianato de cobalto A metodologia utilizada para analisar o surfactante catinico, cloreto de cetilpiridneo foi a descrita tambm pelo Standard Methods, substncias ativas ao tiocianato de cobalto (CTAS) [2]. Estas reagem em soluo aquosa com o tiocianato, equao 8, e a fase orgnica extrada foi medida a 625 nm.
+

nCoSCN

+ mCP

{[(SCN)n](CP)m} m+n

Equao 8

5.4.1 Extrao e anlise espectrofotomtrica do surfactante catinico Com o objetivo de evitar menores custos e trabalhar com uma qumica verde, buscamos por algumas modificaes na metodologia oficial. Em funil de separao de 125 mL, adicionaram-se 25 mL da amostra, 2 gotas de cido sulfrico (1,0 mol.L-1), 2,5 mL de cloreto de metileno e 5 mL do reagente tiocianato de cobalto. Em seguida, transferiu-se a fase orgnica para um recipiente atravs de uma filtrao com algodo umedecido com dicloro metano. Repetiu-se a extrao adicionando-se mais 2,5 mL de cloreto de metileno. Aps esta etapa, transferiu o extrato para um balo de 10 mL e completou o volume com cloreto de metileno. Em todos os dias de anlises era obtido uma curva analtica com as soluespadro. Para as amostras de resduos industriais era preciso fazer um pr-tratamento para eliminar os possveis interferentes e facilitar a determinao espectrofotomtrica dos surfactantes para isso foi utilizada uma coluna de vidro, que ser descrita a seguir. 5.5 Coluna de vidro Para evitar a presena de alguns interferentes que poderiam dificultar as anlises, foi utilizado uma coluna de vidro (do ingls Sublation apparatus) para extrao dos surfactantes [2], Figura 13. Esta coluna isola todos os tipos de surfactantes, em solues aquosas. As metodologias empregadas para os surfactantes catinico e aninico so especficas para estes tipos de tensoativos, evitando a quantificao dos outros dois tipos de surfactantes

38

no-inicos e anfteros. As amostras industriais analisadas chegavam ao laboratrio muito escuras, dificultando as determinaes quantitativas.

Figura 13 - Aparelho de separao do LAS (do ingls - Sublation apparatus),(A) acetato de etila, (B) amostra, (C) juno de bola, (D) cinta, (E) garrafa e (F) filtro de vidro sinterizado Os acessrios juntamente com a coluna de vidro para separao dos surfactantes presentes em uma determinada amostra, pode ser observado na Figura 13. Para isso, efetuou-se a montagem no laboratrio de acordo com o esquema anterior. Nesta coluna de vidro foi colocado, aproximadamente, 1250 mL da amostra a ser tratada, com intuito de atingir a borda inferior da torneira superior. Foram adicionados 5 g de NaHCO3 mais 100 g de NaCl (para formar complexos com os interferentes), e 100 mL de acetato de etila. No vidro ao lado foram adicionados 100 mL de acetato de etila por onde seria controlado o fluxo de nitrognio, Figura 14.

39

Figura 14 - Representao esquemtica da coluna de vidro montada para os experimentos O equipamento consiste em borbulhar gs nitrognio a uma vazo de 1 L/min em acetato de etila. Onde ocorre a formao de bolhas que passam pela amostra que contem alm de surfactantes outros contaminantes que esto presentes na amostra. O surfactante adsorvido na interface gs-gua e carregado para a camada superior de acetato de etila. O fluxo de nitrognio foi controlado para evitar que a camada de acetato se miscibilize com a amostra e evapore rapidamente. Borbulhou-se o gs de 5 a 10 minutos, aps este tempo retirou-se a camada superior de acetato, na qual continha os surfactantes. Aps esta etapa evaporou-se o acetato de etila at seu ponto de fuso especfico 78C. O resduo obtido foi diludo e quantificado de acordo com o tipo de surfactante de interesse. No decorrer dos trabalhos surgiu a curiosidade de investigar qual era os tipos de microorganismos presentes nos inculos, que melhor usariam o tensoativo como fonte de nutrientes. Para isso realizou-se o isolamento desses microorganismos, que ser descrito a frente. 5.6 Cintica de biodegradao Para o ensaio de biodegradao foi utilizada uma metodologia da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA), que descreve a determinao da biodegradabilidade de tensoativos aninicos. Este mtodo consiste na medida da

40

biodegradao dos tensoativos presentes na amostra, sob condies especficas, tendo como referncia o n-DBSS (n-dodecil benzeno sulfonato de sdio) e o TPBSS (tetrapropileno benzeno sulfonato de sdio), ambos padres, testados em paralelo como critrio de verificao da validade do ensaio [88]. Esta portaria descreve a biodegradao apenas com um tipo de inculo solo de jardim, mas tendo esta norma de biodegradabilidade como base, foi escolhido neste trabalho utilizar mais dois tipos de inculos. Os trs tipos de inculos estudados foram; gua de rio, solo de jardim com 100.000 unidades formadoras de colnias (U.F.C), segundo recomendao da metodologia e o lodo. A quantificao analtica do surfactante foi feita expressando a concentrao em mg.L-1 das substncias ativas ao azul de metileno (SAAM) e transformada para porcentagem de biodegradao conforme a frmula descrita na metodologia: AT = (CO CT/ CO) X 100 em que: AT = porcentagem de biodegradao no tempo t CO = concentrao inicial mdia da soluo (em mg SAAM/L) CT = concentrao de soluo no tempo t (em mg SAAM/L) O ensaio da biodegradao foi realizado nas melhores condies possveis, em ambiente favorvel ao desenvolvimento dos microorganismos, ou seja, em ambiente aerado. Para isso foi utilizado bombinhas de aqurio, garantindo a oxigenao diria do sistema de biodegradao. Este sistema de biodegradao foi montado na ausncia de luz, para garantir que os microorganismos no morram na falta de oxignio, e o surfactante no degrade na presena da luz. Em todos os inculos estudados foram adicionados ao sistema de biodegradao 1,0 mL de solues: de tampo fosfato, cloreto frrico, sulfato de magnsio e cloreto de clcio, para garantir os sais necessrios sobrevivncia dos microorganismos presentes no meio. Os inculos so ativos no dia da coleta, por isso, eram preparados e usados no mesmo dia do ensaio. As anlises eram realizadas no primeiro dia de biodegradao, repetidas no quinto dia, a partir do qual eram feitas em dias alternados. Em cada dia da anlise era retirado alquotas de 25 mL do sistema de biodegradao, a poro extrada no poderia ultrapassar trs horas de espera para ser analisada no espectrofotmetro. A anlise do trmino da biodegradao, era interrompido quando a diferena entre dois valores, num perodo de quatro dias, era inferior a 0,15 mg.L-1. A durao do ensaio no deve exceder 41

Equao 9

19 dias, conforme recomendaes da Portaria n 393, de 15 de maio de 1998 [3]. Todas as anlises foram realizadas em duplicatas, para aferir a preciso do mtodo. A amostra comercial estudada, foi o detergente comercial neutro da marca YP que sofreu diluies de 0,001 mL do detergente concentrado em 1000 mL de gua. Essa diluio foi necessria para que fosse possvel quantific-lo na faixa linear da curva. As amostras industriais estudadas foram de duas empresas, Cia SJ, situada na prpria cidade de So Joo e a FITEDI (Fiaes e Tecelagem de Divinpolis) que possui uma sede em Barbacena e outra em Divinpolis. Ambas as indstrias so de tecido e utilizam surfactantes em grande escala no processo de tinturaria. 5.6.1 Obteno e tratamento dos inculos 5.6.1.1 Inculo gua de rio As amostras de gua de rio foram coletadas em uma rea urbana, na cidade de So Joo Del Rei, Crrego do Lenheiro, que passa no centro da cidade. Este inculo foi coletado, com cuidado de estar recolhendo alquotas da rea superficial do rio. Amostra de rio foi coletada, em frasco de vidro mbar de boca larga, para facilitar a coleta e escuro para evitar alguma decomposio da comunidade dos microorganismos presentes naquela pequena representao. Evitou coletar as amostras em dias chuvosos e aps alguns descartes de resduos industriais, que frequentemente so lanados nesse ambiente. A amostra foi preparada passando por uma filtrao em papel de filtro, e o volume inicial 200 mL foi rejeitado e o restante guardado em condies aerbicas at a adio no sistema de biodegradabilidade. Para estudo da biodegradao do surfactante aninico, preparou-se 250 mL solues-padro entre 1,0 e 5,0 mg.L-1 a partir de uma soluo estoque de 100,0 mg.L-1 de LAS. Ento era feita uma anlise conforme a metodologia descrita no item 5.3.1, antes de acrescentar o inculo, como uma forma de verificar e confirmar a concentrao. Nessa etapa, efetuou-se uma anlise da gua de rio antes de acrescentar a soluo-padro. Em um recipiente adequado foi adicionado a amostra seguindo de 2 mL do inculo de rio e colocado em ambiente de biodegradao, conforme descrito no item 5.6. Para a biodegradao do tensoativo catinico, preparou-se 250 mL de soluoestoque de 50,0 mg.L-1 a partir de uma soluo estoque de 1000,0 mg.L-1 de CPC. Ento 42

era feito uma anlise conforme a metodologia descrita no item 5.4.1, antes de acrescentar o inculo, como uma forma de confirmar a concentrao final. Nessa etapa, efetuou-se uma anlise da gua de rio antes de acrescentar a soluo-padro. Em um recipiente adequado foi adicionado a amostra, em seguida 250 mL do inculo de rio e colocado em ambiente para biodegradar conforme descrito no item 5.6. Para a amostra comercial YP estudada foi feita diluio descrita em 5.6. Em recipientes adequados foram colocados 300 mL do YP diludo e 2 mL do inculo. Este ensaio foi acompanhado por uma soluo-padro LAS (1,0 mg.L-1), para aferir as anlises e a validade do mtodo. Para a amostra industrial da Cia SJ foi feita diluio de (1:3). Em um recipiente adequado foram adicionados 100 mL da amostra e 300 mL da gua de rio. Era preciso analisar tanto a amostra do rio quanto a amostra industrial, antes de misturlas, para saber a concentrao real do tensoativo presente neste inculo e na soluo aquosa. Aps a adio de ambas no mesmo recipiente foi feito uma nova determinao, para saber a concentrao real que iria ser biodegradada e prosseguia a biodegradao conforme item 5.6. Este ensaio foi acompanhado de uma soluo-padro (1,0 mg.L-1 LAS) para aferir a validade do ensaio. Para o resduo industrial da FITEDI foi feito a diluio (1:1). Em um recipiente adequado foram colocados 100 mL da amostra industrial e 2 mL de gua de rio. Antes de serem adicionadas no mesmo recipiente, foi feito anlise da amostra industrial e do inculo do rio, segundo a metodologia, 5.3.1. Aps a juno de ambas repetia-se a anlise para saber a concentrao real do surfactante aninico, que iria biodegradar, como referncia do primeiro dia. Este ensaio era seguido por uma soluo- padro de 5,0 mg.L-1 de LAS nas mesmas condies do ensaio, para aferir a validade do processo de biodegradao. 5.6.1.2 Inculo solo de jardim As amostras de solo foram coletadas dentro do campus Dom Bosco da Universidade Federal de So Joo Del Rei- UFSJ, situada na cidade de So Joo Del Rei. O material escolhido deveria ser mais isento possvel de argila, areia e matria orgnica, conforme descrio 3.3. Procedeu-se da seguinte maneira para preparar o inculo do solo; foram pesados 100 g de solo e dissolvido em 1000 mL de gua. Ficou em repouso por 60 min. Em 43

seguida, o sobrenadante foi filtrado, desprezando os primeiros 200 mL. O restante do filtrado foi mantido em condies aerbicas at o momento de adicion-lo no sistema para biodegradao. Para o ensaio de biodegradao do LAS, adicionou-se 250 mL da soluopadro de 1,0 mg.L-1 de LAS e 2 mL do inculo, previamente preparado. Repetiu-se esse procedimento para as solues-padro de 3,0 e 5,0 mg.L-1 de LAS. Ento era feita uma determinao conforme a metodologia descrita no item 5.3.1. No era necessrio fazer uma anlise antes de acrescentar o solo, pois esse no possua o tensoativo em sua constituio. Esses experimentos eram feitos em duplicatas. Para a amostra FITEDI, foi feito a seguinte diluio (1:1) adicionando-se 100 mL da amostra industrial, 100 mL de gua destilada e 2 mL do inculo. O ensaio foi trabalhado conforme descrito na seo 5.6. As solues em estudo foram feitas em duplicatas, e como referncia utilizou-se um padro de 1,0 mg.L-1 de LAS. Para o ensaio de biodegradao do CPC, adicionou-se 250 mL da soluopadro de 50,0 mg.L-1 de CPC e 2 mL do inculo, previamente preparado. Repetiu-se esse mesmo procedimento para solues-padro de 30,0 e 40,0 mg.L-1 de CPC. Ento era feito uma anlise conforme a metodologia descrita no item 5.4.1. No sendo necessrio a anlise antes de acrescentar o inculo pelo mesmo motivo citado anteriormente. Esse experimento tambm foi realizado em duplicatas. 5.6.1.3 Inculo lodo Em um pequeno crrego, que corta o terceiro campus da Universidade CTAN (Campus Tancredo Neves), foi coletado uma amostra de lodo em um recipiente de vidro de boca larga. Esta amostra foi levada para o laboratrio para fazer o tratamento adequado. Neste processo o lodo foi lavado com bastante gua destilada at ficar isento de sujeira. Em seguida ficou em repouso em gua destilada por no mnimo 2 horas, at o momento do ensaio. Este lodo foi trabalhado empregando gua destilada e de torneira para verificar se o meio iria interferir no processo de biodegradao. Para a soluo-padro LAS, foram preparados 250 mL de soluo 5,0 mg.L-1 em duplicadas, com gua de torneira e gua destilada e colocadas em recipientes adequados e foram adicionados 5,0 g da matria orgnica do lodo em cada recipiente e prosseguiu-se as anlises, conforme seo 5.3.1. 44

Para o padro CPC, foram preparados 300 mL de trs solues-padro de 30,0, 40,0 e 50,0 mg.L-1 em duplicatas, com gua destilada e gua de torneira colocados em recipientes adequados. Logo em seguida foram adicionados 5,0 g de lodo em cada recipiente contendo as solues. Aps a anlise do primeiro dia seguiu-se as condies de biodegradao, segundo item 5.6. Para a amostra industrial da Cia SJ; adicionaram-se 300 mL de gua destilada, 100 mL da amostra industrial e 5,0 g de lodo. O mesmo procedimento foi repetido para a gua de torneira. Prosseguindo as anlises e a biodegradao conforme os respectivos itens, 5.3.1 e 5.6. Para verificar a validade do processo de biodegradao, utilizou-se uma soluo-padro de 5,0 mg.L-1. Para a segunda amostra industrial da FITEDI; adicionaram-se 100 mL da amostra, 100 mL da gua destilada e 5,0 g do lodo. O mesmo procedimento foi repetido para gua de torneira. Prosseguindo as anlises e a biodegradao conforme os respectivos itens, 5.3.1 e 5.6. Para verificar a validade do processo de biodegradao, utilizou-se uma soluo-padro de 5,0 mg.L-1. 5.7 Caracterizao de microrganismos isolados do solo 5.7.1. Solo O solo utilizado nos experimentos de biodegradao do surfactante LAS foi coletado no prprio Campus da UFSJ, onde foram desenvolvidos os experimentos. Amostras compostas do solo foram retiradas na profundidade de 0-15 cm, devidamente acondicionadas em sacos plsticos esterilizados e mantidas a 4C sob umidade controlada. 5.7.2. Seleo de microrganismos degradadores Amostra de 10g (peso seco) de solo foram homogeneizadas em 90 mL de gua destilada esterilizada e, em seguida, alquotas de 100 L foram plaqueadas em meio mnimo (MS) (contendo: 3,0 gL-1 de NaNO3; 1,0 gL-1 MgSO4.7H2O; 0,5 gL-1 de KCl; 0,01 gL-1 de KH2PO4; 0,5 gL-1 de de FeSO4.7H2O e 16 gL-1 de agar)

suplementado com 3,0 mg L-1 do surfactante LAS (pureza99.6%).

45

As placas foram incubadas a 28 C por 24 h e colnias isoladas foram repicadas em outras placas contendo meio de cultura MS. As colnias foram caracterizadas morfologicamente quanto textura, cor e reao de Gram. 5.7.3. Ensaio de biodegradao Para se avaliar a biodegradao do tensoativo aninico foi utilizado a metodologia da ANVISA. Para este ensaio foram utilizadas linhagens bacterianas selecionadas previamente em meio de cultura MS contendo o tensoativo como fonte de carbono e energia. Erlenmeyers (250 mL) foram preparados, em triplicatas, contendo 100 mL do meio de cultura MS e levados para esterilizao em autoclave a 120C durante 20 minutos. Em seguida, inculos de 100 L (0,1 mL) de duas linhagens bacterianas foram adicionadas, separadamente, nos erlenmeyers e estes levados para incubao a 28 C, durante o perodo de 28 dias, conforme descrio do item 5.6. A determinao das taxas de biodegradao do surfactante foram procedidas nos intervalos de tempo de 0, 7, 14, 21, 28 e 32 dias de incubao, de acordo com as recomendaes do IBAMA [89]. A taxa de biodegradao do surfactante aninico, no decorrer dos experimentos, foi determinada pela metodologia descrita da seo 5.6. Um segundo ensaio foi preparado nas mesmas condies experimentais anteriormente descritas e como forma de confirmar os resultados obtidos. Porm as anlises para determinar as taxas de biodegradao do surfactante foram monitoradas nos intervalos de tempo de 0, 3, 5, 8 e 10 dias de incubao, de acordo com as recomendaes da metodologia de biodegradao da ANVISA [3]. 5.8 Medidas de condutividade Para realizar as medidas de condutividade da soluo dos tensoativos foi utilizado um banho-maria (Quimis), um condutivmetro (LF 37) acoplado a um eletrodo, calibrado com soluo de KCl 0,01 mol.L-1 e um termmetro (Figura 15).

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(a) exterior do banho-maria

(b)

Figura 15 - Sistema para medidas de condutividade (a) interior do banho-maria e (b)

Em uma cela de vidro foram colocados 50 mL de gua, em que adaptou-se o eletrodo do condutivmetro e um termmetro. A tampa da cela foi muito bem vedada, deixando apenas um pequeno orifcio para acrescentar o volume de tensoativo (Figura 14a). Primeiramente realizou-se o estudo da condutividade do tensoativo catinico e depois do tensoativo aninico. A soluo de CPC utilizada foi de 5.000 mg.L-1 e a soluo de LAS foi de 10.000 mg.L-1. Com ajuda de uma micropipeta adicionou-se 0,1
L das solues dos surfactantes, dentro da cela, registrando-se a cada adio a

condutividade especfica para aquela concentrao, a qual era anotada para posteriores anlises. Foram realizados experimentos com baixas concentraes das soluespadro, mas no foi possvel atingir a concentrao micelar crtica. Efetuou-se os clculos da concentrao final dos tensoativos aps a adio de cada volume de 0,1 L. Com os dados obtidos foi possvel fazer um grfico de (condutividade de mS/cm x temperatura), para posterior realizao das etapas do estudo termodinmico. 6 - RESULTADOS E DISCUSSO Neste captulo sero apresentados alguns resultados sobre os mtodos de anlises efetuados. Posteriormente, uma discusso da biodegradao dos tensoativos estudados, com os respectivos inculos, organizado pela seqncia dos experimentos realizados, sero abordados. Como propriedades fsico-qumicas dos surfactantes sero discutidas a sua termodinmica. 47

6.1 Estudo de diferentes solventes Na determinao do surfactante aninico, segundo o Standard Methods [2], utiliza-se o clorofrmio, como solventes orgnicos para a extrao. Devido ao custo elevado desse reagente orgnico e do grau de toxicidade (cancergeno), estudou-se diferentes solventes orgnicos para verificar se os outros solventes apresentavam a mesma eficincia que o clorofrmio no processo de extrao do surfactante aninico. Foram investigados cinco tipos de solventes: clorofrmio, dicloro metano, hexano, tolueno e benzeno. Utilizou-se uma soluo-padro de 1,0 mg.L-1 de LAS, empregando a metodologia de extrao descrita no item 5.3.1. Na Figura 16, pode-se observar os valores obtidos na extrao do LAS.

Figura 16 - Extrao do LAS com diferentes solventes orgnicos. A partir dos dados obtidos, optou-se empregar o dicloro metano, o qual apresentou uma melhor taxa de extrao da soluo-padro LAS de 1,0 mg.L-1, apresentando um acrscimo de 50% do sinal analtico com melhoria na sensibilidade, em relao ao clorofrmio. Numa srie de trs repeties o cloreto de metileno manteve-se o mesmo comportamento. A absortividade molar (), que a caracterstica de uma substncia, no caso o tensoativo, indicando a quantidade de luz que foi absorvida no comprimento de onda de 652 nm, apresentando para o dicloro metano = 2.03x105 L.mol-1 e do clorofrmio de = 1.6x105 L.mol-1. Observamos pelos valores de absortividade que o dicloro metano extrai melhor o tensoativo que o clorofrmio, ou seja apresentou uma absortividade maior. Por isso optou-se pelo dicloro metano para

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extrair o surfactante aninico e tambm por evitar danos sade, no apresentando uma elevada toxicidade como o clorofrmio. 6.2 Demanda qumica de oxignio A demanda qumica de oxignio (DQO) uma determinao mais rpida da demanda de oxignio e pode ser feita por meio da avaliao do oxignio, de uma amostra de gua. O on dicromato, Cr2O72-, na forma de um de seus sais, como o Na2Cr2O7, dissolvido em cido sulfrico resultando um poderoso agente oxidante. Esta a preparao usada no lugar do O2 para determinar a DQO. A semi-reao do dicromato durante a oxidao da matria orgnica representada abaixo [23]:
2+ 3+

Cr2O7

+ 14 H + 6 e

2 Cr

+ 7 H2O

Equao 10

Na prtica, adiciona-se amostra um excesso de dicromato, e a soluo resultante retrotitulada com Fe2+ at o ponto final. O nmero de mols de oxignio que a amostra teria consumido na oxidao do mesmo material igual a 6/4 (= 1,5 vezes) o nmero de mols de dicromato, j que este ltimo aceita seis eltrons por on, enquanto que o oxignio aceita apenas quatro [21]: O2 + 4H+ + 6 e-

2 H2O

Equao 11

Assim, o nmero de mols de O2 requeridos para a oxidao 1,5 o nmero de mols do dicromato realmente utilizado. Na medida da demanda de oxignio (DQO), a soluo cida de dicromato um oxidante to forte que oxida substncias que consumiriam o oxignio muito lentamente em guas naturais, e que, portanto, no constituem uma ameaa real para seu contedo de oxignio. Em outras palavras, o dicromato oxida substncias que no seriam oxidadas pelo O2 na determinao da DBO. Devido a esse excesso de oxidao, principalmente de matria orgnica estvel, como a celulose para o CO2, e de Cl- para o Cl2, o valor da DQO de uma amostra de gua , em regra geral, ligeiramente maior que o valor da DBO. Nenhum dos mtodos da anlise oxida hidrocarbonetos aromticos ou

49

muitos alcanos, que so resistentes em qualquer circunstncia degradao em guas naturais [21]. As guas poludas com substncias orgnicas associadas a resduos de animais e de alimentos ou a de esgoto, apresentam uma demanda de oxignio superior solubilidade de equilbrio mxima do oxignio dissolvido. Sob tais circunstncias, a menos que a gua seja continuamente aerada, a depleo de seu oxignio alcanada rapidamente, e os peixes que vivem nela morrero. Os resultados obtidos pela DQO sero discutidos no item 6.7.3, na biodegradao do CPC pelo inculo do lodo. 6.3 Efeito da coluna de vidro Inicialmente, acreditava-se que a coluna de vidro fosse eficiente na extrao dos surfactantes presentes nas amostras industriais, evitando a presena de interferentes, e consequentemente ajudando no processo de biodegradao. Aps fazer diversos testes, passando as amostras pela coluna de vidro e colocando-as posteriormente para biodegradar, verificou-se que essa etapa no influenciou no processo de biodegradao, pois o mesmo ocorreu normalmente em amostras industriais, mesmo antes e aps passar pela coluna. As amostras empregadas precisariam de um pr-tratamento ou de uma diluio para que tornasse vivel a determinao espectrofotomtrica. Nesse sentido, com o emprego da coluna de vidro, foi possvel clarear as amostras estudadas, pois as mesmas apresentavam uma colorao muito forte. Na Figura 17 possvel observar as amostras antes do pr-tratamento.

Figura 17 - Amostras de resduos industriais antes do pr-tratamento na coluna de vidro

50

Essas amostras contm outros compostos orgnicos utilizados no processo de

tingimento dos tecidos, os quais so considerados interferentes. Possivelmente, esses interferentes foram eliminados por essa coluna de vidro. A seguir, est ilustrado as mesmas amostras aps passar pela coluna de vidro (Figura 18).

Figura 18 - Amostras de resduos industriais aps o tratamento na coluna de vidro. A coluna de vidro se mostrou eficiente no processo de pr-tratamento, apresentando um clareamento, facilitando assim a determinao espectrofotomtrica do surfactante. 6.4 Determinao do surfactante aninico Numa sociedade moderna industrializada, a qumica analtica tem importante papel a preencher. Assim, a maioria das pesquisas industriais confiam na anlise qumica qualitativa e quantitativa a fim de assegurar a qualidade dos seus resduos descartados. A anlise das substncias realizado para ter certeza de que no esto presentes compostos extraordinrios, que possam ser deletrios ao processo de transformao. Para examinar quantitativamente o tensoativo estudado, foi utilizada a metodologia descrita na seo 5.3.1, passando por algumas otimizaes. Em 1999, Koga et al. [67] tambm propuseram uma otimizao da metodologia do Standard Methods, visando diminuir o consumo de reagentes. O consumo da amostra foi reduzido em torno de 50%, enquanto que para o reagente cromognico foi de 30%. A faixa linear de resposta foi de 0,02 a 0,5 mg.L-1 (5,7x108 1,4x106 mol.L-1 de dodecilbenzenosulfonato de sdio). No presente trabalho, conseguimos diminuir a quantidade de reagentes (solvente orgnico e reagente cromognico), reduzindo o seu 51

consumo em torno de 50%, e o volume da amostra em 75%. E ainda substituiu-se a l de vidro pelo algodo, pois esta trazia desconforto para quem a manuseava. Nesse sentido, conseguimos evitar danos sade e gerar menor quantidade de resduo, trabalhando com uma qumica verde. A partir dessas modificaes foi possvel obter a curva analtica, mostrada na Figura 19. O sinal analtico do branco foi obtido utilizandose o dicloro metano sem a presena do analito. Todos os dias de anlise de amostragem era obtida uma curva analtica (0,10, 0,30, 0,50, 1,0, 1,5, e 2,0 mg.L-1 do LAS).
1,6 1,4 1,2 1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0,5 1,0 1,5
-1

Absorvncia

2,0

LAS/ mgL

Figura 19 - Curva analtica do LAS. A partir da curva obtida foi possvel observar que o mtodo apresenta uma resposta linear at 2,0 mg.L-1 (A = - 0,01371 + 0,71476 C) e um bom coeficiente de correlao (R = 0,99901). O mtodo apresentou uma boa sensibilidade, sendo possvel quantificar o tensoativo em baixas concentraes, apresentando uma faixa linear de 0,10 a 2,00 mg.L-1 e um limite de deteco de 0,001 mg.L-1. Esta lei descrita pela equao A= bc, a absorvncia proporcional concentrao da espcie absorvente, e s aplicada para substncias quando a radiao monocromtica e as amostras so diludas [90]. No caso de solues concentradas do tensoativo, as molculas do soluto influenciam umas as outras, devido sua proximidade. Este soluto torna-se o solvente, alterando as propriedades das molculas tais como, tenso superficial, foras de atrao e solubilidade. Solutos no-absorventes podem interagir com as espcies, alterando a absortividade [91]. O tensoativo poderia continuar absorvendo em uma regio de saturao, superior a uma absorbncia de 1,4, tornando-se uma leitura crtica.

52

6.5 Biodegradao do surfactante aninico A biodegradabilidade do surfactante aninico (ABS), referida na seo 3.3, apresentava algumas dificuldades devido a presena da cadeia ramificada (Figura 20 a). Com o desenvolvimento de novas pesquisas foi possvel sintetizar este mesmo tipo de material, porm com uma cadeia lateral linear, Figura 20 b, facilitando assim a sua biodegradao. Com o desenvolvimento, esse tensoativo foi denominado um tensoativo biodegradvel. Assim, a biodegradao pode ser definida como a destruio dos compostos qumicos pela ao biolgica dos organismos vivos. O resultado final da biodegradao a formao da gua, gs carbnico e sais inorgnicos. CH3 CH CH2 CH CH2 CH CH2 CH CH3 CH3 CH3 CH3 (a) SO3Na

CH3 CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 CH CH2 CH2 CH2 CH2 CH3

(b)

SO3Na

Figura 20 - (a) Estrutura ramificada do ABS e (b) Estrutura linear LAS No trabalho desenvolvido pelos pesquisadores Borsato, Moreira e Peelen [19,92], foi possvel aferir a diferena existente entre o tempo de degradao do ABS (ramificado) e do LAS (linear), Figura 21.

53

Figura 21- Curva de degradao de um surfactante aninico; () cadeia ramificada e () cadeia linear. O LAS degrada muito mais rpido que o ABS, isso deve-se ao fato da estrutura linear ter maior superfcie de contado para que os microorganismos possam interagir com o tensoativo e o transformar em compostos menos txicos que os de origem. Isto no acontece com o ABS devido s ramificaes presentes na cadeia. Portanto, a interao do mesmo com os microorganismos dificultada devido ao fato de possuir menor superfcie de contato por causa das ramificaes. Desse modo, conclui-se que o LAS mais biodegradvel, pois apresenta seu radical lipoflico (apolar) mais linear em relao ao ABS. O surfactante ABS, que apresenta em sua estrutura ramificaes, gera uma taxa de biodegradao extremamente lenta. Nesta seo foi feito um breve relato sobre as condies estruturais dos tensoativos para que o mesmo possa ser biodegradado. A seguir sero discutidos os resultados obtidos de biodegradao realizados com os diferentes inculos, para o surfactante aninico. 6.5.1 Biodegradao do LAS pelo inculo do rio A anlise de biodegradao do LAS foi verificada primeiramente com soluespadro de 1,0 mg.L-1 e 5,0 mg.L-1 , para verificar se a concentrao iria influenciar no sistema de biodegradao. Nesse experimento, utilizou-se 250 mL da soluo-padro e adicionou-se 2 mL do inculo do rio. Aps verificar os resultados com as solues-

54

padro foi empregado uma amostra comercial (YP) e algumas amostras de resduos industriais. A biodegradao empregando solues-padro pode ser visualizada no grfico abaixo, Figura 22. Conforme se pode verificar a concentrao do tensoativo vai diminuindo com o decorrer dos dias.

1,5

Concentrao (mgL )

-1

1,0

0,5

0,0

Tempo/dias

Figura 22 - Biodegradao de uma soluo-padro 1,0 mg.L-1 de LAS, () branco H2O destilada, () soluo-padro 1,0 mg.L-1 + inculo ,() amostra de rio e () amostra industrial na amostra de rio. A Figura 22 mostra que a biodegradao do LAS, para a soluo-padro, nessa concentrao mostrou-se eficiente, pois no oitavo dia de biodegradao no havia mais indcios de tensoativo em nenhuma das amostras, ou seja, as concentraes iniciais foram totalmente degradadas. A amostra de rio apresentou resultados satisfatrios no havendo nenhuma concentrao no oitavo dia. Esse mesmo comportamento pode ser observado para a soluo-padro no inculo gua do rio. As diferenas nas concentraes do oitavo dia podem ser bem perceptveis em relao ao primeiro dia de biodegradao. Estudos de biodegradao tambm foram realizados com solues-padro superiores a 1,0 mg.L-1 de LAS, cujos resultados esto mostrados na Figura 23 a e 23 b. A Figura 23 b, representa a porcentagem de biodegradao em funo do tempo (dias) uma outra forma de observar o processo de biodegradao, cuja concentrao convertida para porcentagem pela frmula descrita na seo 5.6. Assim, foram usados os grficos para os resultados obtidos em termos de concentrao ou em termos de porcentagem de biodegradao.

55

.
3,5 3,0

Concentrao (mgL )

-1

2,5 2,0 1,5 1,0 0,5 0,0 0 2 4 6 8 10

Tempo/ dias

(a)
100

99%
80

% de Degradao

60

40

20

0 0 2 4 6 8

Tempo/ dias

(b) Figura 23 - Biodegradao da soluo de 3,0 mg.L-1 de LAS: (a) concentrao (mg.L-1 ) e (b) porcentagem. Os estudos apresentaram resultados satisfatrios, atingindo 99% de

biodegradao para o 8 dia do processo. Em ambas as Figuras (23 a e 23 b) podemos assegurar que o LAS biodegradvel para o inculo rio, com uma cintica eficiente em torno de oito dias. Dessa maneira, pode ser considerado biodegradvel, pois atingiu um valor acima de 95%. Aps estudar e conhecer o efeito da biodegradao com solues-padro empregou-se as amostras industriais e comerciais. Para acompanhar o desenvolvimento do processo de biodegradao dessas amostras, utilizou-se como referncia uma soluo-padro do surfactante aninico. A primeira amostra estudada foi o detergente

56

comercial da marca (YP), que possui alm do tensoativo outros compostos como sulfato de magnsio, EDTA, formol, corante etc. O grfico da sua biodegradao esta ilustrado na Figura 24.

1,2

1,0

0,8

LAS (mg.L-1)

0,6

0,4

0,2

0,0

9 11

14

Tempo/ dias

Figura 24 - Biodegradao da amostra comercial (YP): () soluo-padro 1,0 mg.L-1 de LAS e () amostra comercial. Observando o grfico pode perceber que a soluo-padro (1,0 mg.L-1) foi totalmente degradada no 5 dia. Enquanto que para a amostra comercial persistia um pouco mais no processo de biodegradao, necessitando de mais dias que a soluopadro. A amostra comercial no 7 e no 9 dia de anlise apresentaram uma concentrao de 0,55 mg.L-1 e 0,53 mg.L-1, respectivamente. Enquanto que no 5 dia o valor obtido na anlise foi de 0,34 mg.L-1. Observa-se que os valores obtidos de concentraes para o 5 foram superiores, nesse sentido podemos concluir que esta diferena proveniente de algum erro experimental. Isso pode ser confirmado pelas anlises obtidas nos 11 e 14 dias, cujos valores encontrados foram de aproximadamente, 0,0 mg.L-1, respectivamente. Esta persistncia no processo de biodegradao possivelmente devido a presena de outros componentes no detergente comercial, os quais no existem na soluo-padro. Por exemplo, a presena de formol (bactericida) poderia retardar a ao dos microorganismos no processo de biodegradao, impedindo assim, a ao dos mesmos.

57

Uma outra investigao sobre o processo de biodegradao foi realizado para uma amostra proveniente de empresa de tecelagem (FITEDI), a qual utiliza tensoativo no seu processo de tinturaria. Os resultados obtidos podem ser verificados na Figura 25.
1,0

0,8

LAS (mg.L )

-1

0,6

0,4

0,2

0,0

11

13

15

Tempo/ dias

Figura 25 - Biodegradao da amostra industrial FITEDI: () 1,0 mg.L-1 de LAS e () amostra industrial. Na Figura 25, foi observado que a biodegradao da soluo-padro e da amostra industrial foram eficientes no processo. A soluo-padro comportou-se normalmente no processo de biodegradao, atingindo uma taxa de biodegradao de 97% no 5 dia. E a amostra industrial apresentou uma boa biodegradao dentro de 15 dias. Pois, os dados obtidos no 15dia de biodegradao, apresentaram uma concentrao de 0,07 mg.L-1, ou seja, atingindo 78% de biodegradao. Para confirmao do processo de biodegradao das amostras provenientes da indstria FITEDI, utilizou-se outra amostra industrial, cujos resultados esto ilustrados na Figura 26. Para acompanhar esse processo de biodegradao das amostras industriais, utilizou-se como referncia uma soluo-padro do surfactante aninico de 5,0 mg.L-1.

58

100

80

% Degradao

60

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12 14

Tempo/ dias

Figura 26 - Biodegradao da amostra industrial FITEDI: () 5,00 mg.L-1 de LAS e () amostra industrial. Na Figura 26, observa-se que no 13 dia de anlise a taxa de biodegradao da soluo-padro e da amostra industrial foram 100% e 98%, respectivamente. Foi feito o estudo para outra amostra industrial, proveniente da indstria de tecelagem Cia SJ e para uma soluo-padro de 5,0 mg.L-1cujos dados experimentais encontram-se na Figura 27.

100

80

% Degradao

60

40

20

0 0 2

Tempo/ dias

10

Figura 27 - Biodegradao da amostra industrial Cia SJ: () 5,00 mg.L-1 de LAS e () amostra industrial. Esta Figura mostra o efeito da biodegradao para o LAS, na qual foi observado que a soluo-padro foi biodegradvel, atingindo 100% para o 9 dia de biodegradao e a amostra industrial apresentou 98% de biodegradao, praticamente 100% de degradao. Portanto, essa amostra degradou-se mais que a amostra da indstria FITEDI, necessitando de menor nmero de dias para atingir uma tima porcentagem de 59

biodegradao. A indstria Cia SJ precisou de 9 dias, enquanto que a FITEDI utilizou 15 dias para alcanar uma boa biodegradabilidade. Portanto, a metodologia desenvolvida para a biodegradao empregando o inculo do rio, apresentou resultados satisfatrios. Confirmando que, os microorganismos presentes nesse inculo foram eficientes no processo de biodegradao para todas as amostras estudadas. 6.5.2 Biodegradao do LAS pelo inculo do solo O solo um sistema vivo e heterognio composto de muitas associaes microbianas. Essas associaes so sensveis a modificaes fsicas e qumicas tais como: alteraes no modo de cultivo e adio de substncias biologicamente ativas que podem afetar o equilbrio microbiano. E ainda, o solo rico em nutrientes propiciando um ambiente adequado para sobrevivncia de muitas espcies de organismos. Esses degradam hidrocarbonetos como nica fonte de carbono e esto amplamente distribudos na natureza. Devido a essa riqueza em nutrientes e microorganismos o solo usado em outros trabalhos, por exemplo, para biodegradar a borra oleosa [36]. O solo usado para fazer isolamento de microorganismos que degradam independemente, os compostos poluentes do mesmo. Esses microorganismos degradam herbicidas (como clomazone e glifosato), esse estudo foi realizado em lavadoras de arroz do Rio Grande do Sul [36]. Assim, a partir deste relato o solo foi escolhido como inculo, o qual proporciona a proliferao de muitos microorganismos. Como o surfactante um composto orgnico ele possui uma grande fonte de nutrientes que podem ser usados por esses microorganismos, garantindo sua sobrevivncia no meio. O processo de biodegradao empregando o inculo do solo foi realizado baseando na metodologia discutida na seo 5.6. Para fazer o ensaio de biodegradao foi utilizado como referncia soluespadro de LAS, como forma de verificar a validade do mtodo de biodegradao, para um posterior ensaio com uma amostra industrial. Obtendo solues-padro de 1,0, 3,0 e 5,0 mg.L-1 de LAS, o inculo foi adicionado nessas solues, conforme a seo 5.6. Os resultados obtidos com as diferentes solues-padro encontram-se na Figura 28.

60

100

80

% Degradao

60

40

20

11

14

17

Tempo/ dias

Figura 28 Biodegradao empregando o inculo solo para diferentes concentraes de LAS: () 1,0 mg.L-1, () 3,0 mg.L-1 e () 5,0 mg.L-1. Verifica-se pela Figura 28, que todas as solues-padro, tiveram o mesmo comportamento diante do ensaio de biodegradao, atingindo uma porcentagem de aproximadamente 98%, para o 17 dia. Aps estudar o comportamento das solues-padro diante do processo de biodegradao, foi feito um ensaio para analisar uma amostra de indstria da FITEDI. Com os dados experimentais obtidos foi possvel obter a Figura 29, para uma melhor interpretao e visualizao dos resultados.

100

80

% Degradao

60

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12

Tempo/ dias

Figura 29 Biodegradao empregando o inculo solo: () amostra industrial FITEDI e () soluo-padro 1,0 mg.L-1 de LAS. Foi observado que a amostra industrial analisada atingiu 98% de biodegradao para o 12 dia do ensaio. E a soluo-padro que acompanhou o experimento tambm

61

apresentou uma biodegradao de 100%. Portanto o inculo do solo eficiente no processo de biodegradao para diferentes concentraes do padro LAS e para amostra industrial da FITEDI. Embora seja uma amostra bastante complexa, por ser um resduo industrial, no demonstrou que a influncia de interferentes (aminas, cloretos...) poderiam comprometer o processo de biodegradao. 6.5.3 Biodegradao do LAS pelo inculo lodo Os lodos so constitudos por uma fase lquida (geralmente gua ou solvente) e uma fase slida, as quais apresentam alto teor de umidade, superior a 90% [26]. O tratamento dos esgotos com certeza ir reduzir a poluio dos rios e melhorar a sade pblica da populao, resultando na produo de um lodo rico em matria orgnica e nutrientes, denominado solo de esgoto ou biosslido, havendo necessidade de uma adequada disposio final desse resduo [36]. Entretanto, diversos projetos e tratamentos de esgotos no contemplam o destino do lodo produzido e com isso anulam-se parcialmente os benefcios da coleta e do tratamento de efluentes. Assim, a comunidade precisa encarar com muita seriedade esse problema. E com auxlio das pesquisas cientficas e tecnolgicas, desenvolver alternativas seguras e factveis para que esse produto no se transforme num novo problema ambiental. O lodo pode ser utilizado na agricultura, aps ser reciclado do esgoto [36]. Portanto, o lodo apresenta a vantagem de ser biodegradador de efluentes, mas ao mesmo tempo apresenta a desvantagem de transformar-se em um poluidor dependendo do tipo de descarte. Considerando os trabalhos apresentados na literatura, o lodo pode ser usado no tratamento de efluentes. Nesse sentido, optou-se por estud-lo no processo de biodegradao, por ser um composto orgnico oriundo dos mais variados ambientes e tipos. Inicialmente, surgiu-se a dvida se o lodo que pretendamos estudar sobreviveria melhor na gua de torneira, rica em sais minerais, ou na gua destiladadeionizada, quase isenta de sais. A partir dessa hiptese, a soluo-padro foi preparada adequadamente e colocada para biodegradar com 5,0 g de lodo devidamente preparado no laboratrio (seo 5.6.1.3). A Figura 30 mostra os resultados experimentais obtidos com a soluo-padro de LAS.

62

100

80

% Degradao

97%
60

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

Tempo/ dias

Figura 30 - Biodegradao de 5,0 mg.L-1 de LAS empregando o inculo lodo: () gua deionizada e () gua de torneira. Pela Figura 30, observou-se que o ensaio da biodegradao para a soluopadro tanto na gua de torneira quanto na gua deionizada no apresentaram diferenas no processo, atingindo 97% de biodegradao. Portanto, a composio das guas utilizadas no comprometeram a sobrevivncia dos microorganismos presentes no lodo. Analisando a Figura 30 observa-se que as linhas praticamente so equivalentes, ou seja, tiveram o mesmo delineamento. Desse modo, o lodo pode ser considerado um inculo capaz de degradar o tensoativo aninico. Foi feito o estudo do efeito da biodegradao para duas amostras industriais; a Cia SJ e a FITEDI. Aps preparao das amostras, foi possvel obter os resultados no processo de biodegradao, conforme mostra a Figura 31.

63

100

80

% Degrado

60

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12

Tempo/ dias

Figura 31 - Biodegradao das amostras industriais, empregando o inoculo lodo: () Cia SJ, (K) FITEDI e () 5,0 mg.L-1 de LAS. Nessa Figura, verifica-se que a soluo-padro de 5,00 mg.L-1 e a amostra da Cia SJ apresentaram uma boa taxa de biodegradao, acima de 98%. Entretanto, a amostra da FITEDI apresentou uma biodegradao de apenas 82%. Importante salientar que esses experimentos foram realizados em duplicatas e apresentaram erros relativos menores que 2%. Os trs inculos estudados apresentaram boa porcentagem de biodegradao para todas as concentraes das solues-padro LAS, aproximadamente 100%. E para as amostras industriais tambm estudadas foram eficientes. Conforme pode ser observado nas Figuras 25, 26, 27, 29 e 31, atingiram valores superiores a 90% de biodegradao acima de 10 dias. Como os resultados apresentados so muito promissores, possivelmente esses inculos podem ser utilizados no tratamento de resduos industriais em grande escala. Nas sees anteriores foram feitas s discusses julgadas necessrias sobre a biodegradao do tensoativo aninico, nos prximos itens sero discutidos sobre a biodegradao do tensoativo catinico. Antes ser necessrio dar um enfoque da anlise quantitativa desse surfactante. 6.6 Anlise do surfactante catinico Para a maioria das anlises qumicas, a resposta do procedimento analtico deve ser avaliada usando quantidades conhecidas do analito (solues-padro), de forma que a resposta para uma quantidade desconhecida possa ser determinada. Tendo em vista

64

esse propsito, normalmente realiza-se uma curva analtica, a qual apresenta a resposta de um mtodo analtico em funo da quantidade conhecida do analito [91]. O tensoativo catinico foi quantificado analiticamente pela metodologia descrita no item 5.4.1 [2], que passou por algumas modificaes. Essas mudanas foram necessrias devido ao alto consumo de reagente orgnico e a l de vidro. O volume da amostra, reagente cromognico e solvente orgnico foram reduzidos em 75 %, enquanto que o reagente cromognico e o solvente orgnico foram reduzidos em 60%. E a l foi substituda pelo algodo, pois esta trazia desconforto para quem a manuseava. Essa metodologia espectrofotomtrica, baseia-se na reao de complexao entre o CPC (surfactante catinico) e o tiocianato de cobalto, que ser detectado a 625 nm. Aps a otimizao dessas variveis (volume das solues) foi possvel obter uma curva analtica com solues de referncia do CPC contendo 1,0, 3,0, 5,0, 10, 20, 30, 40, 50 e 60 mg.L-1. A curva analtica era obtida em todos os dias de anlises. A equao da reta obtida foi A = -0,00604 + 0,00496 C, apresentando uma tima correlao linear (R = 0,99902), conforme mostra a Figura 37. O mtodo desenvolvido para a determinao do CPC apresentou uma faixa linear para concentraes de 2,0 at 60 mg.L-1 do CPC. E para concentraes inferiores a 2,0 mg.L-1, tornou-se muito difcil quantific-lo. Os sinais de absorbncia obtidos para concentraes de 50 e 60 mg.L-1, o tensoativo catinico ainda apresenta um sinal analtico baixo 0,24 e 0,31, respectivamente. Observando os coeficientes angulares de ambos os tensoativos, temos para o tensoativo aninico 1 = 0,71476 e para o tensoativo catinico 2 = 0,00496, a razo entre eles 1 e
2, obtivemos 144. Comparando com o mtodo

espectrofotomtrico proposto com o mtodo do LAS, o mtodo para determinao do CPC apresenta uma menor sensibilidade, o que caracterstico de cada mtodo espectrofotomtrico. Pelos resultados obtidos temos que a sensibilidade do LAS e 144 vezes maior que o CPC.

65

0,35 0,30 0,25

Absorbncia

0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 0 10 20 30 40

-1

50

60

70

CPC/ mgL

Figura 32 - Curva analtica obtida a partir das solues-padro de cloreto de cetilpiridneo. 6.7 Biodegradao do tensoativo catinico A metodologia desenvolvida para a biodegradao do surfactante catinico foi baseada no mtodo proposto de biodegradao do tensoativo aninico [3], pois no existe na literatura uma metodologia especfica para biodegradao do CPC. Os inculos gua de rio, solo e lodo escolhidos foram empregados nas mesmas condies de estudo do LAS, em ambiente aerado com fluxo continuo de oxignio. No sistema de biodegradao para cada um dos inculos estudados, acrescentou-se 1,0 mL de cada uma das solues a seguir: sulfato de magnsio, cloreto frrico, cloreto de clcio e tampo fosfato para garantir os sais necessrios para os microorganismos. O estudo foi realizado com solues-padro do CPC, como forma de verificar se a adaptao do mtodo de biodegradao do LAS para o CPC seria vlido. 6.7.1 Biodegradao do CPC pelo inculo do rio A anlise de biodegradao do CPC foi verificada primeiramente com uma soluo-padro de 50 mg.L-1. Para este ensaio utilizou-se 250 mL de uma soluopadro de 100 mg.L-1 de CPC e adicionou-se 250 mL do inculo rio. Os resultados obtidos (Figura 33), mostraram que no decorrer do tempo a porcentagem de biodegradao aumenta, indicando que o surfactante catinico tambm apresenta uma boa taxa de biodegradao. importante salientar que a biodegradao do CPC somente possvel trabalhar com a razo de 1:1, ou seja, a mesma quantidade do inculo e 66

mesma quantidade da amostra. Esse fato no foi observado para o tensoativo aninico, pois o mesmo degrada com menor quantidade de inculo.
80 70 60

% Degradao

50 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

Tempo/ dias

Figura 33 - Biodegradao de 50 mg.L-1 do CPC, com inoculo rio. Os resultados apresentaram uma biodegradao de aproximadamente 60%, para o 14 dia de anlise. De acordo com a metodologia, o ensaio deve ser encerrado quando a diferena entre dois valores num perodo de quatro dias, for inferior a 0,15 mg.L-1. Nesse sentido, portanto a anlise foi encerrada, pois os resultados j tinham atingido esta diferena.Os resultados experimentais foram realizados em duplicata, os quais podem ser observados na Figura 34.
100

80

% Degradao

60

40

20

0 0 5 10 15 20

Tempo/ dias

Figura 34 Repetio da biodegradao da soluo-padro de 50 mg.L-1 do CPC. Ambos os experimentos apresentaram o mesmo comportamento. Pode-se perceber que a biodegradao do CPC necessita de um maior tempo para atingir uma boa taxa de biodegradao. Enquanto que, o tensoativo aninico necessitava de

67

aproximadamente, 15 dias para atingir essa taxa de biodegradao (acima de 90%). Essa diferena no tempo de biodegradao, possivelmente deve-se a cadeia do tensoativo catinico ser maior que a cadeia do tensoativo aninico. Necessitando de maior quantidade de microorganismos (volume de inculo) para conseguir quebrar a cadeia do CPC em outros compostos ou us-los como nutriente. 6.7.2 Biodegradao do CPC pelo inculo do solo De acordo com a metodologia descrita no item 5.6.1.2, nesse experimento utilizou-se de duas solues; uma soluo-padro 50 mg.L-1 do CPC, sem inculo e outra soluo-padro de 50 mg.L-1 do CPC, a qual adicionou-se 2,0 mL do inculo. Os resultados experimentais obtidos foram tratados adequadamente e transformados para porcentagem de biodegradao (Figura 35).

100 90 80

% Degradao

70 60 50 40 30 20 10 0

11

14

17

19

22

Tempo/ dias

Figura 35 - Biodegradao de 50 mg.L de CPC: () na presena do inoculo do solo e

() na ausncia do inoculo do solo.

-1

Desta maneira, os resultados apresentados nessa Figura confirmaram que o solo um timo agente biodegradador, confirmando, assim o trabalho apresentado anteriormente na literatura [36]. A soluo padro de 50 mg.L-1 sem o inculo foi usada como referncia para ter certeza que o solo estava atuando como um agente biodegradador do tensoativo catinico. E perceptvel, que na presena do solo a soluo-padro atingiu uma tima porcentagem de biodegradao, acima de 90%. As

68

anlises feitas para as solues-padro, 30 e 40 mg.L-1 referidas na seo 5.6.1.2, no apresentaram coerncia nos resultados por isso no foram citadas. 6.7.3 Biodegradao do CPC pelo inculo lodo Relatos anteriores demonstraram que o lodo muito usado em tratamento de efluentes industriais [22,36]. Como estes efluentes possuem uma srie de compostos, o lodo foi estudado para verificar a biodegradao de alguns componentes, como o tensoativo catinico. Para esse ensaio foram utilizadas diferentes solues-padro, 30, 40 e 50 mg.L-1 de CPC. Nesse estudo, empregou-se 300 mL da soluo-padro e foram adicionados 5,0 g do lodo previamente preparado. O ensaio foi preparado e estudado no decorrer de 14 dias. Os dados experimentais foram tratados adequadamente e esto ilustrados na Figura 36.
80 70 60

% Degradao

50 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16

Tempo/ Dias

Figura 36 - Biodegradao das diferentes solues-padro do CPC: () 30 mg.L-1, () 40 mg.L-1 e (K) 50 mg.L-1. No processo de biodegradao destas solues, verifica-se que a partir do 8 dia ocorre um patamar, ou seja uma regio comum a todos, atingindo uma taxa de biodegradao perceptvel. A porcentagem de biodegradao foi proporcional ao aumento da concentrao, pois a soluo-padro de 50 mg.L-1 para este inculo, foi o que melhor comportou-se no processo de degradao, comparada com as outras concentraes estudadas. Conforme mostra a Figura 36, apenas as maiores concentraes atingiram 65% e 75% de degradao. Enquanto que, a soluo-padro de concentrao menor, 30 mg.L-1 no apresentou boa porcentagem degradao, apenas de

69

aproximadamente 55%. Portanto, a partir desse experimento, pode-se concluir que a concentrao do CPC influncia na porcentagem de biodegradao. Observando o comportamento da soluo-padro de 50 mg.L-1 de CPC em alguns experimentos, optou-se trabalhar com esta concentrao, por atingir melhor taxa de biodegradao no processo. Assim sendo, foi feito um estudo com essa concentrao empregando todos os inculos em estudo. Os resultados obtidos com este estudo encontram-se ilustrados na Figura 37.
100 90 80 70

% Degradao

60 50 40 30 20 10 0

11

14

17

Tempo/ dias

Figura 37 - Efeito da biodegradao dos diferentes inculos para a soluo-padro de 50 mg.L-1 do CPC: () inculo do rio, () inculo do solo e () inculo do lodo. A partir dos dados obtidos na Figura 37, pode-se verificar nitidamente que o rio no 5 dia apresentou uma porcentagem de degradao um pouco maior que o lodo. E o solo apresentou em todos os dias uma porcentagem de biodegradao bem maior que os outros dois inculos. O solo no 17 dia atingiu uma porcentagem acima de 80% de degradao, enquanto que, o inoculo lodo e o inculo rio atingiram valores de 75% e de 55%, respectivamente. Dessa maneira, o solo foi o melhor inculo para biodegradar o CPC nesta concentrao. A partir do 11 dia, atingiu praticamente 80% de biodegradao, e este valor foi mantido at o final do ensaio. No decorrer dos experimentos surgiram alguns questionamentos e algumas dvidas em relao ao inculo lodo, pois este um composto orgnico que tem uma parte slida e uma parte lquida. Nesse sentido, ser que o CPC no estaria sendo adsorvido na superfcie slida do lodo ao invs de estar sendo biodegradado. Esta dvida no surgiu com a gua de rio e nem com o solo, pois os mesmos foram estudados em soluo aquosa aps sofrer uma filtrao.

70

Ento, uma maneira de verificar esses questionamentos e ainda, com a finalidade de usar outra tcnica para confirmar os resultados de biodegradao, foi realizado um experimento acompanhado pela DQO, demanda qumica de oxignio. No laboratrio no temos um analisador de carbono, COT (carbono total orgnico), para avaliar a matria orgnica por isso usamos a tcnica de DQO. Os resultados obtidos esto apresentados na Tabela 2. Tabela 2 - Dados experimentais obtidos pelo estudo da DQO.
Dias
1 5 8 12 *Valores expressos em mg.L-1 de O2

mg.L-1 de O2
22,9 26,9 51,2 73,3

mg.L-1 de O2
29,3 26,0 45,1 69,8

Pode-se observar que a DQO manteve uma certa coerncia, at o 5 dia de biodegradao. A partir deste dia, a DQO apresentou um aumento, sendo que no 12 dia, j tinha atingido 73,3 e 69,8 mg.L-1 de O2. Este aumento da DQO indica que a matria orgnica determinada por esse mtodo tambm est aumentando, indicando que esta matria orgnica vem da decomposio do lodo, pois no existe outra fonte. Portanto o lodo considerado eficiente apenas nos primeiros dias de biodegradao, pois mantm a matria orgnica estvel. O valor da DQO no 12 dia atingiu uma concentrao em mg.L-1 de O2, trs vezes maior em relao ao 1 dia. Embora diminua a concentrao do tensoativo, Figura 38 a, ele ao invs de transformar o tensoativo em substncia menos txicas, possivelmente esta sendo adsorvido na sua superfcie.

71

100

100
90

80

80 70 60 50 40 30

% Degradao

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12 14

DQO/ mgL

60

-1

20 0 2 4 6 8 10 12 14

Tempo/ dias

Tempo/ dias

(a) DQO.

(b)

Figura 38 - Efeito da DQO na biodegradao do CPC: (a) 50,0 mg.L-1 e (b) anlise da Pelo grfico 38 a, observa-se que a biodegradao da soluo-padro de CPC estudado apresentou uma porcentagem de degradao de aproximadamente 95%. O experimento foi repetido e os valores obtidos apresentaram a mesma taxa de biodegradao. Na Figura 38 b, o estudo realizado para monitorar a DQO, mostra que a partir do 6 dia o lodo no apresenta mais microorganismos, aumentando indefinidamente a DQO, indicando um grande aumento da matria orgnica. Este estudo comprovou que o solo foi mais eficiente na biodegradao do tensoativo catinico em relao aos outros inculos estudados, atingindo uma taxa maior de biodegradao, acima de 90%. Os experimentos mostraram que foi possvel biodegradar o tensoativo catinico, baseando-se na metodologia do aninico, ou seja, foi possvel desenvolver uma metodologia para biodegradar o tensoativo catinico. Os inculos estudados tanto para o tensoativo aninico quanto para o tensoativo catinico atingiram uma boa taxa de biodegradao. A taxa de biodegradao do surfactante catinico foi influenciada pela concentrao deste tensoativo o que no ocorreu para o surfactante aninico. O aninico demonstrou boa taxa de biodegradao em todas as diferentes concentraes estudadas. 6.8 Biodegradao com as bactrias isoladas Os microorganismos ocorrem em praticamente todos os ambientes do planeta, podendo sobreviver em locais cujas condies ambientais extrapolam os limites de tolerncia de animais e plantas. Devido a sua relativa simplicidade morfolgica e grande diversidade gentica e metablica, os microorganismos se adaptaram evolutivamente

72

para viver em habitat e condies diversas do planeta, como baixas concentraes de nutrientes, extremos de temperatura, salinidade e pH. Outros microorganismos utilizam os compostos xenobiticos, hidrocarbonetos, presentes no solo como fonte de energia para sua sobrevivncia, ou seja, como fonte de carbono. As bactrias isoladas do solo utilizaram o tensoativo como fonte de energia para sua sobrevivncia, por isso foi possvel estud-las. Nesse estudo, com as bactrias isoladas, foram obtidos timos resultados no processo de biodegradao. Os isolados bacterianos foram identificados por sequenciamento de parte do gene que codifica a subunidade 16S do rRNA (rDNA) [93]. Os resultados apontaram para que todos os microorganismos testados nos ensaios de biodegradao do tensoativo pertencem ao gnero Pseudomonas. Antes da caracterizao as bactrias foram classificadas como bactria 14 e bactria 17, a partir da identificao do gnero elas foram chamadas de Pseudomonas 14 e 17, ou melhor, isolados 14 e 17, respectivamente. A biodegradao do LAS iniciada com a liberao do sulfato inorgnico alquil sulfatase, liberando o lcool que oxidado a cido lurico e a lcool dehidrogenase. A Figura 39, ilustra todas as etapas de transformao do LAS (mapa metablico) no processo de biodegradao. necessrio que ocorra todas estas etapas para que os compostos oriundos venham suprir as bactrias de energia.

73

O O alquil sulfatase S

OO

dodecil sulfato

OH alcool dehidrogenase O H

1 - dodecanol

dodecanal

aldedo dehidrogenase (NAD+ ) O Oacil-CoA sintetase O S CoA lauril-CoA

cido laurico

Figura 39 - Mapa metablico de transformaes do LAS pelas bactrias. Nesse mapa, observa-se que as bactrias estudadas transformam o lauril sulfato de sdio em 1-dodecanol, atravs de uma enzima alquil sulfatase. As outras etapas ocorre sucessivamente utilizando as enzimas especficas. O produto final desse processo o lauril-CoenzimaA, que vai desencadear o ciclo de Krebs (aceptor de O2), necessrio para o metabolismo das Pseudomonas que so bactrias aerbicas. As bactrias foram utilizadas como inculo para o padro LAS e procedeu ao ensaio de acordo com a metodologia de biodegradao [3]. Primeiramente foi realizado um teste com uma soluo-padro de 3,0 mg.L-1 de LAS, as anlises foram efetuadas a cada sete dias e prosseguiu at o 32 dia, conforme a metodologia do IBAMA, 1990 [89]. Esta metodologia descreve o perodo de meia vida das bactrias (tempo necessrio para que uma bactria degrade 50% do composto orgnico) e deve ser realizado em pelo menos 32 dias. Os resultados experimentais deste estudo encontram-se representados na Figura 40.

74

100

80

% Degradao

60

40

20

14

21

28

Tempo/ dias

Figura 40 - Efeito da biodegradao de 3,0 mg.L-1 de LAS, na presena das bactrias isoladas: () isolado 14 e () isolado 17. Atravs da Figura 39, observa-se que praticamente no 7 dia de anlise do ensaio de biodegradao, o isolado 17 consumiu todo o tensoativo, atingindo 100% de biodegradao. Enquanto que, o isolado 14 ainda no tinha consumido todo o tensoativo. O mesmo aconteceu para os dias 14 e 21 onde o isolado 17 confirmou o consumo total do LAS, enquanto que o isolado 14 ainda no tinha consumido todo o LAS. Nos dias posteriores, observou-se que ambas bactrias consumiram todo o LAS, atingindo 100% de biodegradao. A partir dos resultados obtidos, pode-se deduzir que o isolado 17 mais eficiente, pois a mesma apresenta uma cintica de biodegradao mais rpida. O experimento foi repetido para aferir os resultados obtidos nas mesmas condies do experimento anterior, porm, as anlises foram realizadas a cada trs dias. Este experimento foi proposto para confirmar se a cintica de biodegradao do tensoativo pelas bactrias ocorria em um intervalo de tempo inferior a 5 dias. Os resultados experimentais so mostrados na Figura 41.

75

100

80

% Degradao

60

40

20

0 0 2 4 6 8 10 12

Tempo/ dias

Figura 41 - Efeito da biodegradao das bactrias estudadas em 3,0 mg.L-1 de LAS: () Isolado 14 e () Isolado 17. A partir dos dados obtidos na Figura 41, foi possvel confirmar que o isolado 17 apresentou uma melhor cintica de biodegradao, atingindo uma taxa de 100% no 3 dia de incubao. Enquanto que, o isolado 14 necessita de mais dias para atingir o 100% de degradao, apresentando assim, uma cintica mais lenta de biodegradao. Embora no tenha realizado o experimento, o isolado 17 possivelmente pode necessitar de menos de at 3 dias para biodegradar o LAS. As bactrias isoladas do solo mostraram-se muito eficientes no processo de biodegradao. Seria necessrio realizar outros experimentos com diferentes concentraes de LAS, para verificar se a mesma poderia interferir no processo de biodegradao dessas bactrias. Conseguimos confirmar que realmente as bactrias utilizam o surfactante como fonte de carbono e se comportaram muito bem nos ensaios submetidos. Nos itens anteriores foi feito uma discusso a respeito dos ensaios de biodegradao com os diferentes tipos de inculos sobre o tensoativo aninico e catinico. Nas sees que seguem sero abordados a discusso da termodinmica de micelizao para ambos os tensoativos.

76

6.9 Estudo termodinmico no processo de micelizao 6.9.1 - A variao da C.M.C com a temperatura Na Tabela 3 so mostrados os valores da C.M.C obtidos experimentalmente para diferentes temperaturas. Tabela 3 - Valores da C.M.C para diferentes temperaturas, obtidos para os tensoativos.
Temperatura (K) CPC
283 288 293 303 313 318 333 348 0,00095 0,00104 0,00106 0,00110 0,00117 0,00127 0,00214 0,00196

C.M.C/ mol.L-1 LAS

0,00280 0,00297 0,00304 0,00311 -

O que pode ser observado dos valores contidos na Tabela acima a presena de uma pequena diferena na C.M.C de ambos os tensoativos em todas as temperaturas. O aumento da temperatura causa uma diminuio do grupo hidroflico das molculas de tensoativo, o que favorece a micelizao. Por outro lado, esse aumento da temperatura tambm causa a quebra na estrutura da gua ao redor do grupo hidrofbico, esse efeito que desfavorece a micelizao. A influncia desses efeitos podem possivelmente determinar se a C.M.C est aumentando ou diminuindo dentro de uma determinada faixa de temperatura [94]. Pode-se tambm perceber, por exemplo, que a 283 K os valores da C.M.C para o CPC e para o LAS foram 0,00095 e 0,00280 mol.L-1, respectivamente. A concentrao micelar crtica do surfactante aninico foi determinada em uma concentrao maior que a concentrao micelar crtica para o surfactante catinico.

77

6.9.2 - A relao entre a C.M.C e a estrutura do tensoativo O termo concentrao micelar crtica (C.M.C) definido como a concentrao total de tensoativo a partir da qual as micelas tornam-se observveis [95]. Na Tabela 4 e 5 so mostrados os valores reais da C.M.C em mg.L-1dos tensoativos estudados, obtidos a partir de medidas de condutividade em mg.L-1, em que se observa uma grande diferena, na faixa dos valores da C.M.C de ambos os tensoativos estudados. Tabela 4 - Valores da C.M.C do CPC obtidas por condutividade em diferentes temperaturas.
Temperatura (K) mg.L-1
283 288 293 303 313 318 333 348 340 374 378 395 418 454 552 705

C.M.C mol.L-1
0,00094 0,00104 0,00105 0,00110 0,00116 0,00126 0,00154 0,00196

Tabela 5 - Valores da C.M.C do LAS obtidos por condutividade em diferentes temperaturas.

Temperatura (K) mg.L
283 293 303 313 807 858 876 896
-1

C.M.C mol.L-1
0,00279 0,00297 0,00303 0,00310

Uma comparao dos valores obtidos da Tabela 4 com os da Tabela 5, mostram que, de um modo geral, a C.M.C do CPC mais ntida, ou seja, mais fcil de ser

78

calculada a altas temperaturas, e ocorre em concentraes mais baixas (acima de 307 mg.L-1). Enquanto que, a C.M.C do LAS (Tabela 5) ocorre em concentraes mais altas, acima de 807 mg.L-1. Observa-se tambm, que as diferenas nos clculos da C.M.C do LAS foram algumas vezes inferiores em relao ao CPC. Nesta tcnica, a C.M.C pode ser determinada pela variao da condutividade especfica em funo da concentrao do tensoativo. A concentrao, na qual as micelas tornam-se detectveis, depende da sensibilidade da tcnica usada. Uma regra geral diz quanto maiores os valores de C.M.C, mais larga a faixa de concentraes na qual a transio ocorre [95]. A Figura 42, demonstra como foi feito o clculo da C.M.C a partir da condutividade, obtida pelos dados experimentais.
0,24 0,22 0,20 0,18 0,16

mS/cm

0,14 0,12 0,10 0,08 0,06 0,04 0,02 0,00 0

CMC= 395 mg/L

100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 1300

CPC/ mgL

-1

Figura 42 Valores da condutividade em funo da concentrao do surfactante catinico. Dados experimentais obtidos a 30C. Pode-se perceber uma mudana brusca em sua inclinao na regio da C.M.C, conforme Figura 42. Esta quebra pode ser explicada devido ao abaixamento da condutividade, onde os monmeros dos tensoativos se comportam como eletrlitos fortes. As micelas, por outro lado, apresentam uma associao parcial dos contra-ons, sendo a contribuio das mesmas para a condutncia total da soluo menor do que se todos os monmeros que a constituem permanecessem no agregados. Assim sendo, o incremento da condutividade com o incremento da concentrao total de tensoativo diminui. Por outro lado, a quebra da curva atribuda ao aumento da massa por unidade de carga do material em soluo [94]. Em solues aquosas de tensoativos antes de ser atingida a concentrao micelar crtica (C.M.C), a adio de tensoativo faz com que a condutividade especfica da 79

soluo aumente linearmente com o aumento da concentrao. Quando a C.M.C atingida, as molculas de tensoativo passam a agregar-se em micelas, que apresentam mobilidade (condutividade especfica), menor que as das molculas dos tensoativos livres. Os contra-ons do tensoativo tambm comeam a se associar s micelas formadas, contribuindo para a diminuio da condutividade. Desse modo, a condutividade especfica da soluo acima da C.M.C aumenta linearmente com o aumento da concentrao, mas com uma taxa menor, Figura 42. A Figura 43, ilustra as medidas de condutividade realizadas para ambos os tensoativos em diferentes temperaturas.
0,70 0,65 0,60 0,55

Condutividade (mS/cm)

0,50 0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 -0,05 0

5C 10C 15C 20C 30C 30C 40C 45C 60C 75C

200

400

600

800
-1

1000

1200

1400

CPC/ mgL

(a)
0,70 0,65 0,60 0,55

Condutiviadade (mS/Cm)

0,50 0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 -0,05 -200 0 200 400 600
10C 20C 30C 40C

800 1000 1200 1400 1600 1800 2000

LAS/ mgL

-1

(b) Figura 43 - Estudo da condutividade: (a) CPC e (b) LAS.

80

Analisando-se ambas as Figuras, observa-se que no foi possvel medir a condutividade em baixas e altas temperaturas. Para temperaturas baixas, os tensoativos formavam precipitados e a condutividade diminui intensamente. Enquanto que, para temperaturas elevadas a condutividade aumenta indefinidamente, pois a gua comea a evaporar, aumentando-se assim a condutividade inica. Na Figura 43 b, no se observa nitidamente o ponto C.M.C do LAS necessitando realizar um segundo experimento, em diferentes temperaturas. Os resultados obtidos para um segundo experimento so apresentados na Figura 44.
1,4 1,2
5C 15C 30C 45C 60C

Condutividade (mS/cm)

1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0

500

1000

1500

2000
-1

2500

3000

LAS/ mgL

Figura 44 Grfico da condutividade do LAS. Nesse experimento foi possvel observar melhor o ponto da C.M.C que a Figura 43 b. Porm, para a temperatura de 60C a condutividade do LAS aumenta indefinidamente, iniciando-se o processo de evaporao de algumas molculas de gua. Com isso, no foi possvel estudar o efeito da condutividade para altas temperaturas. 6.9.3 - O grau de dissociao O grau de dissociao micelar uma medida da frao de contra-ons dissociados da micela. Para micelas inicas, temos um centro formado pelas cadeias alqulicas dos tensoativos, rodeado por uma camada parecida com uma soluo concentrada de eletrlito. Essa regio chamada de, camada de Stern, consiste nos grupos polares do tensoativo, os contra-ons associados e a gua interfacial. Alm da camada de Stern, temos os contra-ons remanescentes, que presenciam duas foras opostas: a atrao eletrosttica s micelas e as colises trmicas, que tendem a dispers-los. O equilbrio resultante dessas foras opostas origina a dupla camada

81

eltrica, cuja extenso no espao pode ser considervel, diminuindo com o aumento da fora inica do meio. A partir das medidas de condutividade possvel calcular os valores do grau de dissociao pelo mtodo de Frahm, Frahm [13]. No clculo do grau de dissociao foi utilizado o mtodo de Frahm, de acordo com a equao 1. O mtodo de Frahm assume que as condutividades que encontram-se abaixo e acima da C.M.C, so causadas exclusivamente pelos contra-ons do tensoativo [13]. Com os dados experimentais obtidos utilizando a condutividade foi possvel calcular o grau de dissociao dos tensoativos, os quais encontram-se na Tabela 6. Tabela 6 - Valores obtidos do grau de dissociao (Frahm) por condutividade.
Temperatura (K) CPC
283 288 293 303 313 318 333 348 0,0461 0,384 0,440 0,448 0,467 0,498 0,510 0,524

Frahm LAS
0,609 0,643 0,682 0,783 -

Com esses dados observa-se uma boa sensibilidade de em funo da temperatura, para ambos os surfactantes. Para o CPC, apresenta aproximadamente, 45% de acrscimo no grau de dissociao de um em relao ao outro em todas as temperaturas estudadas. Por exemplo, a 283 K apresentou um valor mais baixo 0,046 em relao as outras temperaturas que aumentam proporcionalmente com a temperatura, atingindo um grau mximo de dissociao a 348 K. Esse fato deve-se a saturao da concentrao do tensoativo, que em altas concentraes passa a comportar-se como um solvente e no mais como um soluto. Consequentemente, interferindo no grau de dissociao. Entretanto para o LAS percebe-se um comportamento semelhante ao CPC, seu grau de dissociao tambm aumenta de acordo com o aumento da temperatura, observando-se em torno de 60% de aumento de um em relao ao outro..

82

A seguir ser abordado uma rpida discusso dos valores termodinmicos envolvidos no processo de micelizao. Os valores do grau de dissociao foram necessrios estud-los para proceder os estudos termodinmicos. 6.9.4 - Valores obtidos de GMIC. A energia livre de Gibbs do processo de micelizao (GMic.) foi calculada pela equao 6, e os resultados esto apresentados na tabela 7. Tabela 7 - Energia livre de Gibbs do processo de micelizao dos tensoativos estudados.
Temperatura (K) CPC
283 288 293 303 313 318 333 348 -13,928 -16,040 -14,825 -15,062 -14,930 -14,176 -16,606 -14,724

GMic/ kJmol-1 LAS

-30,180 -32,571 -32,602 -33,541 -

A partir dos valores da Tabela 7, observa-se uma pequena dependncia de GMic em funo da temperatura. Os valores da energia livre de Gibbs obtidos esto prximos aos valores encontrados no trabalho proposto por Wardian et al [71]. Para o tensoativo aninico (-27,2 a -35,5 kJmol-1) e temperatura 303 K o G foi de -32,602 kJmol-1 e para o tensoativo catinico ( -27,9 a -36,1 kJmol-1) e temperatura de 303 K foi de -15,062 kJmol-1. Os valores obtidos na tabela 7 foram similares aos encontrados na literatura [71]. Nesse sentido, podemos concluir que a temperatura influencia pouco na energia livre de Gibbs. A formao de micelas sempre est associada a uma variao grande e negativa na energia livre de Gibbs, GMic [96]. Os valores negativos de GMic so devidos principalmente aos valores obtidos de SMic, sendo o processo de micelizao governado primariamente pelo ganho de entropia associado a ele [94].

83

Esse ganho da entropia na micelizao em meio aquoso explicado de dois modos: (1) a liberao, devido a micelizao, das molculas de gua que estavam congeladas na solvatao das cadeias hidrofbicas dos monmeros (tambm chamado de efeito hidrofbico), e (2) aumento dos graus de liberdade da cadeia hidrofbica no interior apolar das micelas, comparado ao meio aquoso [94]. A entropia e a entalpia de micelizao variam muito com a temperatura, mas as variaes de ambas praticamente se compensam, por isso a variao observada na energia livre pequena [81]. 6.9.5 Entalpia e entropia do processo de micelizao Para fazer os clculos da entalpia do processo de micelizao utilizando-se a equao de vant Hoff (Equao 12) necessrio dispor dos dados sobre a variao da C.M.C (Tabela 3) e do grau de dissociao (Tabela 6) em relao a temperatura.
Hmic = - (2 - ) RT2[dln(C.M.C)/dT]

Equao 12

Os valores experimentais obtidos da entalpia de micelizao (HMIc.) esto ilustrados na Tabela 8. Tabela 8 Entalpia de micelizao HMic. para algumas temperaturas.
Temperatura K
283 288 293 303 313 318 333 348

HMic./ kJmol-1 CPC

-112,35 -122,13 -124,04 -129,88 -136,85 -138,40 -160,69 -165,19

LAS
-45,050 -49,876 -51,821 -55,201 -

84

A partir dos valores obtidos para o de GMic. (Tabela 7) e de HMic (Tabela 8), atravs de medidas de condutividade foi possvel calcular a entropia do processo de micelizao, SMic. Para esta etapa utilizou-se a equao 13.
Smic = H - G/T

Equao 13

Os resultados obtidos para a entropia do processo de micelizao encontram-se na Tabela 9. Tabela 9 - Entropia de micelizao SMic para algumas temperaturas.
Temperatura K
283 288 293 303 313 318 333 348

S/ kJmol-1 CPC
-0,0016 -0,0024 -0,0024 -0,0025 -0,0027 -0,0027 -0,0031 -0,0032

LAS
-0,0169 -0,0591 -0,0634 -0,0692 -

Pode perceber que a entropia diminui com o aumento da temperatura, favorecendo uma reao exotrmica e uma espontaneidade da reao de agregao dos monmeros do tensoativo, nos surfactantes estudados. Observa-se tambm que o aumento da temperatura, influencia nos valores de
SMic que caem rapidamente (Tabela 9), e uma diminuio do valor de HMic (Tabela

8) que a altas temperaturas, se tornam o principal contribuinte para GMic. Essa observao tem sido explicada em termos da estrutura da gua. Com o aumento da temperatura, as redes de ligaes de hidrognio das molculas de gua se quebram e a gua se torna um solvente menos estruturado. Os efeitos entrpicos que dominam o efeito hidrofbico temperatura ambiente so reduzidos a altas temperaturas. A micelizao nessas condies dirigida por uma entalpia exotrmica de associao [96]. Considerando nosso estudo do processo termodinmico dos tensoativos estudados nas vrias temperaturas, verificamos que a faixa de concentrao que 85

trabalhvamos nos experimentos estava bem abaixo da concentrao micelar crtica de ambos os surfactantes. Para o surfactante aninico o mximo da faixa linear de concentrao era de 2,0 mg.L-1 a temperatura ambiente e o valor da C.M.C encontrado foi de 374 mg.L-1. Enquanto que, para o surfactante catinico o mximo da faixa linear foi de 60 mg.L-1 a temperatura ambiente e sua C.M.C foi 858 mg.L-1. Assim sendo, com tcnica de condutividade foi possvel estudar esses parmetros termodinmicos e verificar a concentrao que os tensoativos em questo estavam sendo utilizados. Em todos os ensaios de biodegradao realizados as anlises das soluespadro e as amostras de resduos industriais foram realizadas antes da concentrao micelar crtica (C.M.C). Nessa fase os tensoativos encontravam-se dissociados em monmeros e no em micelas. Os resultados desses estudos mostraram que a concentrao micelar crtica do tensoativo catinico atingida a 40% abaixo da concentrao micelar critica do tensoativo aninico que atingida em torno de 60% acima.

86

7 CONCLUSES Nesse trabalho foi possvel fazer a determinao do tensoativo aninico e catinico por medidas espectrofotomtricas e estudar sua biodegradao com diferentes tipos de inculos. A determinao de surfactantes em resduos industriais uma forma importante de avaliar o impacto que causam no meio ambiente quando so utilizados em grande escala. A cintica de biodegradao para todos os inculos empregados para todas as concentraes das solues-padro do LAS estudados atingiram uma taxa acima de 90% de biodegradao, em aproximadamente dez dias. A presena de alguns compostos, sulfato de magnsio, EDTA, formol, corante e perfume sinttico na amostra comercial (YP), no mostrou nehuma influncia no processo de biodegradao. Dessa maneira, essa amostra apresentou uma biodegradao de apenas 80%. Nas amostras industriais estudadas obteve-se uma boa taxa de biodegradao atingindo um valor acima de 90%. Foi possvel estudar a cintica de biodegradao das solues-padro do surfactante catinico, baseando-se na metodologia existente para o surfactante aninico. Com esse estudo conseguiu-se desenvolver uma metodologia para biodegradao do surfactante catinico, que ainda no existe na literatura. Solues-padro de at 50 mg.L-1 do tensoativo catinico, apresentaram resultados satisfatrios com boa taxa de biodegradao. A biodegradao desse tensoativo foi maior no inculo do solo, mostrando ocorrer melhor adaptao da microbiota para utiliz-lo como fonte de carbono. O inculo do lodo no pde ser considerado biodegradador para o CPC, pois no diminui a quantidade de matria orgnica DQO, mas sim aumenta indefinidamente a partir do quinto dia no processo de biodegradao. A utilizao do solo, tornou-se possvel fazer o isolamento e caracterizar duas colnias do gnero Pseudomonas, que conseguem biodegradar o surfactante aninico em curto espao de tempo. Estudou-se o comportamento termodinmico no processo de micelizao de ambos os tensoativos em vrias temperaturas, empregando medidas de condutividade, cujos resultados esto coerentes com os apresentados na literatura.

87

PERSPECTIVAS
Controle da razo massa de inculo em funo da quantidade analtica do

tensoativo;
Utilizar outras tcnicas para analisar qualitativamente tensoativos como:

titulao, cromatografia, espectroscopia de IR e RMN etc...

Analisar outros tipos de inculos, por exemplo, aguap; Analisar a biodegradao de surfactantes anfotricos e no-inicos, baseando-

se na metodologia empregada para aninicos;

Monitoramento contnuo de DBO e DQO durante o processo de biodegradao

para todos os inculos;

Otimizao da biodegradao para implementao em escala industrial; Trabalhar com mais grupos de bactrias isoladas dos inculos e cultiv-las em

laboratrios;
Fazer um controle de pH antes e durante o processo de biodegradao e Trabalhar com a biodegradao de surfactante catinico em amostras

industriais e comerciais.

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