Artigo

Glicerol: um subproduto com grande capacidade industrial e metablica

Resumo
O glicerol, conhecido tambm como 1,2,3 propanotriol, foi descoberto por Scheele em 1779, que o extraiu de uma mistura aquecida de litargrio e azeite de oliva. Atualmente, o glicerol possui ampla aplicao industrial, com destaque na fabricao de resinas sintticas, gomas de ster, remdios, cosmticos, pastas de dentes. Tambm utilizado em grandes quantidades no processamento de tabaco e alimentos. Este lcool com trs hidroxilas, incolor, viscoso, higroscpico e de sabor adocicado um importante intermedirio no metabolismo dos organismos vivos, sendo encontrado naturalmente na forma combinada como glicerdeos em animais, gorduras vegetais e leos. O glicerol tambm pode ser recuperado como um subproduto quando estes leos so saponificados no processo de fabricao industrial de sabo, ou separado diretamente de gorduras na produo de cidos graxos. A sua produo microbiolgica conhecida h 150 anos, no entanto, a sua produo comercial ocorre atravs da sntese de propileno desde 1949, devido ao baixo rendimento do processo microbiolgico em relao ao processo qumico e dificuldade de sua extrao e purificao dos caldos fermentados. Palavras-chave: glicerol, propanotriol, glicerina, osmorregulador
Priscila Vaz de Arruda, Rita de Cssia L. B. Rodrigues e Maria das Graas de Almeida Felipe*. Escola de Engenharia de Lorena EEL/USP * Autor para correspondncia: Estrada Municipal do Campinho CP 116 CEP: 12602-810. Lorena. SP Fone: (12) 3159-5046 Fax: (12) 3153-3133 E-mail: mgafelipe@debiq.faenquil.br

Summary
Glycerol, also known as propane-1,2,3-triol, was discovered by Scheele in 1779 who extracted it from a heated mixture of litharge and olive oil. Currently, glycerol has a large industrial application, particularly in the production of synthetic resins, ester gums, drugs, cosmetics and toothpastes. It is also used in large amounts during the processing of tobacco and foods. This clear, viscous, hygroscopic trihydric alcohol is an important intermediate in the metabolism of living organisms and it has been found naturally in a combined form as glycerides in animals and vegetable fats and oils. Glycerol can also be recovered as a by-product when these oils are saponified in the industrial process of soap manufacturing, or by separating it from the fats in the production of fatty acids. While the process of glycerol microbiological production has been known for 150 years, its commercial production has been carried out using propylene synthesis only since 1949. This fact is due to the low yield of the microbiological process when compared to the chemical process, and its difficult extraction and purification from broth. Keywords: glycerol, propane-1,2,3-triol, glycerin, osmoregulator

Introduo
O glicerol (1,2,3 propanotriol ou glicerina) foi descoberto por Scheele em 1779 durante o processo de saponificao de azeite de oliva. Pasteur (1858) tambm observou sua formao como um subproduto da fermentao alcolica, em concentraes de 2,5 - 3,6% do contedo de etanol (1), podendo ser o glicerol o segundo maior produto formado durante a fermentao alcolica (2).
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Caractersticas O glicerol um polilcool de frmula estrutural apresentada na Figura 1, o qual est presente em diferentes espcies, incluindo protistas unicelulares e mamferos (3). No entanto, difcil encontrarmos o glicerol na sua forma livre nesses organismos, pois geralmente se encontra como um triglicerdeo combinado como, por exemplo, a cidos graxos como os cidos: olico, palmtico e esterico. Grandes quantidades de
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Figura 1. Estrutura do Glicerol

Peso Molecular Densidade (glicerol 100%) 25C Viscosidade 20C Ponto de ebulio (101.3 KPa) Ponto de fuso Ponto de inflamao Tenso superficial 20C Calor especfico (glicerol 99.94%) 26C Calor de evaporao 55C Calor de dissoluo Calor de formao Condutividade trmica
Tabela 1. Propriedades fsico-qumicas do glicerol (4,6,7)

92,09 1,262 Kg/m3 939 cps 290C 18C 177C 63,4 mN/m 2,435 J/g 88,12 J/mol 5,8 KJ/mol 667,8 KJ/mol 0,28 W/(m.K)

glicerol podem ser encontradas tambm em leos ou azeites como o de coco, dend, soja, algodo e oliva, bem como em gorduras de animais como a banha de porco e sebo (4). O termo glicerol aplica-se somente ao composto puro, 1,2,3 propanotriol, enquanto o termo glicerina aplica-se purificao de compostos comerciais que contm normalmente quantidades maiores ou iguais a 95% de glicerol (4). No caso da utilizao do glicerol em humanos, para fins teraputicos, como em remdios, por exemplo, a terminologia encontrada em sua especificao deve ser glicerol USP (4). O glicerol, desde 1959, reconhecido como substncia atxica, permitido como aditivo em alimentos, e tambm considerado como substncia GRAS (Generally Regraded as Safe) pelo Food and Drug Administration dos Estados Unidos, e certamente permitido em alimentos enlatados (4). No Brasil, seu uso em produtos alimentcios assegurado pela Resoluo de n 386, de 5 de Agosto de 1999 (5). Estudos mostraram que a administrao de 5% de glicerol em animais e humanos no causou toxicidade ou efeitos inRevista Analytica Dezembro 2006/Janeiro 2007 N26

desejveis nestes organismos, relata-se apenas que uma leve irritao da pele pode ocorrer com o contato de glicerol no diludo, devido retirada de gua da pele em funo de seu forte poder higroscpico (4,6). Dentre as caractersticas fsico-qumicas do glicerol (Tabela 1) destacam-se as propriedades de ser um lquido oleoso, incolor, viscoso e de sabor doce, solvel em gua e lcool em todas as propores e pouco solvel em ter, acetato de etila e dioxano e insolvel em hidrocarbonetos (7). Devido combinao de propriedades fsico-qumicas como no toxicidade, ausncia de cor e odor, o glicerol uma substncia com grande variedade de aplicaes, conforme esto ilustradas na Figura 2. Na indstria de alimentos o glicerol utilizado como aditivo alimentar em funo de suas propriedades estabilizantes, antioxidantes, sequestrantes, emulsificantes e umectantes. Como produto farmacutico sua aplicao se deve sua alta viscosidade, o que permite sua utilizao em xaropes (4, 5). Tambm, considerado como um agente crioprotetor em microrganismos, pois no permite a formao de cristais de gelo na clula, mantendo a estabilidade da parede celular e vitalidade da mesma durante o processo de congelamento para sua conservao (3, 8). Outra caracterstica do glicerol seu papel como osmorregulador, importante mecanismo que ocorre nas clulas como reao a fatores ambientais, como por exemplo, o aumento da presso osmtica. Assim, em resposta a estas alteraes e como forma de manuteno da estabilidade celular, esta responde atravs de mecanismos de osmorregulao como no caso a produo de glicerol pela clula, o que acarreta em diminuio da permeabilidade da membrana e restabelecimento da atividade celular (8, 9, 10). Devido a esse mesmo efeito osmorregulador o glicerol utilizado como agente purgativo (3) e em funo de sua rpida habilidade de contrabalancear a presso hdrica, este pode ser empregado no tratamento de edemas cerebrais e intraoculares (glaucoma) e tambm da hipertenso intracranial (11). O glicerol utilizado tambm no tratamento de dores gastrointestinais e constipaes por facilitar a absoro intestinal de gua. Outras aplicaes importantes do glicerol so em diagnsticos de desordem do metabolismo de carboidratos e como indicador de doenas renais, j que os rins so capazes de reabsorverem o glicerol e a deteco de sua perda atravs de testes na urina, pode ento indicar esse tipo de doena. A ingesto de glicerol por atletas mostrou aumentar a resistncia destes atividade fsica em aproximadamente 24% do tempo de tolerncia de exerccio em relao aqueles que no utilizaram o glicerol. Isso ocorre devido combinao da ingesto de glicerol e lquido, pois h um aumento do volume de gua do corpo, mantendo uma maior hidratao atravs da reduo da velocidade de eliminao de gua do organismo (3).
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Alm das aplicaes na indstria de alimentos, teraputicas e em diagnsticos, o glicerol ainda empregado para produo de resinas e polisteres devido sua reatividade polifuncional e tambm como lubrificante na indstria txtil (4). Tem tambm um importante papel no processamento do tabaco, pois este ajuda a manter a umidade prevenindo o ressecamento deste produto, alm deste poder ser utilizado como solvente de muitos compostos (3, 4, 5, 12). Recentemente novas aplicaes do glicerol vem sendo descobertas, como seu emprego como substrato para fermentaes bacterianas com a finalidade de se obter produtos de alto valor agregado como polmeros biodegradveis, raminolipdeos, biosurfactantes, dentre outros (13). Produo de glicerol Tradicionalmente o glicerol produzido por saponificao dos leos, gorduras ou sebos utilizando lixvias alcalinas, sendo obtido como subproduto na fabricao de sabo, no entanto, esse processo no tem sido mais utilizado a nvel industrial devido substituio do sabo por detergentes (1, 7, 12, 14). A sua obteno pode ser a partir de derivados do petrleo por clorao a altas temperaturas, mas devido formao de subprodutos prejudiciais ao meio ambiente essa rota entrou em declnio (1,15). Uma outra via de sua obteno a hidrogenao da sacarose na presena de um catalisador a alta presso e temperatura (7). Devido s diferentes possibilidades de aplicaes do glicerol na indstria e a sua ocorrncia em vrios processos fisiolgicos vitais tanto em procariticos quanto em eucariticos, vem aumentando o nmero de pesquisas para a sua produo por via fermentativa a partir de fontes renovveis de energia (Tabela 2), cujos resultados destas pesquisas tem sido patenteados (4,12). No processo fermentativo a matria-prima empregada incide apreciavelmente nos custos de fabricao do glicerol (4,6). importante considerar

Acares Melao de cana Melao de beterraba Caldo de cana

Amido Mandioca Cereais Batatas Gros de sorgo

Celulose Madeira Bagao de cana-de-acar Palha de trigo Palha de arroz

Tabela 2. Matrias-primas empregadas para produo fermentativa do glicerol (4,7)

Gnero Bactrias Bacillus subtilis B. coli Bacterium orleanense B. pasteurianum Lactobacillus lycopersici Leveduras Saccharomyces cerevisiae S. ellipsoideus S. mellis Zygosaccharomyces rouxii Candida stellata C. boidinii C. kefyr C. pseudotropicali Pichia angusta Hanseniaspora guilliermondii
Tabela 3. Alguns microrganismos produtores de glicerol (12, 16)

Fungos Aspergillus niger Rhizopus nigricans R. javanicus Botrytis cinerea

Algas Dunaliella tertiolecta D. bioculata D. salina D. viridis

Protozorios Trypanosoma cruzi Leishmania mexic

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Empresa Cognis, Ohio Colgate-Palmolive Crompton, Memphis, Tenn. Dow, Freeport, Tex. Procter & Gamble, Ivorydale, Ohio
Tabela 4. Empresas americanas e suas respectivas capacidades de refinamento de glicerina (30)

Capacidade (milhes de Kg) 65 20 30 140 150

Figura 2. Diferentes aplicaes do glicerol

tambm que os processos com leveduras freqentemente resultam em altos rendimentos de glicerol, no entanto, muito difcil a sua recuperao do caldo fermentado, especialmente quando esses caldos contm matrias-primas sem valor e no refinadas. Essas dificuldades so o maior problema durante o processo de obteno microbiolgica de glicerol (1,4). Diferentes microrganismos como bactrias, leveduras, fungos e tambm algas e alguns protozorios so mencionados na literatura como produtores de glicerol (Tabela 3) (12, 16).
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Existem fundamentalmente dois processos de obteno de glicerol pela via fermentativa: o mtodo do sulfito e o mtodo do carbonato. As Fermentaes podem ser realizadas em batelada, com e sem recirculao, contnuas e com clulas imobilizadas, empregando diferentes fontes de carbono (4). O processo sulfito, tambm conhecido como Protol Process o mais importante processo de produo microbiolgica de glicerol, consistindo na adio de sulfito ao meio de fermentao (1), tendo sido este processo a forma de obteno do glicerol durante a 1 e 2 Guerra Mundial, na Alemanha (12).
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Demanda 1999: 427 milhes de Kg 2000: 453 milhes de kg 2004: 494 milhes de kg

Crescimento Histrico: 1995-2000: 1,9% ao ano Futuro: 2,2% ao ano

Tabela 5. Demanda x Crescimento anual do glicerol no mercado americano (30)

A levedura Saccharomyces cerevisiae utilizada na produo de glicerol por este mtodo, pela sua utilizao como inculo da fermentao aps seu cultivo em acar de beterraba (10%), sulfito de sdio (3%) e sais (1). Este processo ocorre em anaerobiose em recipientes de 1000 m3, temperaturas variando de 30-35C, durante 2-3 dias. Aps a etapa de fermentao seguese a de clarificao e filtrao, mediante a qual se precipitam os sais e slidos em suspenso e em seguida ocorre a separao da massa celular, a qual pode ser recirculada e incorporada ao processo depois de lavada, ou pode ser extrada e enviada como alimento para animais. A mistura obtida possui 3% de glicerol, 2% de etanol e 1% de acetaldedo, sendo o mximo rendimento de glicerol de 20% (1, 6, 7). Esta mistura depois de separada por destilao, resulta em glicerol, etanol e acetaldedo e aps esta etapa, o glicerol redestilado por arraste de vapor a presso reduzida a 180C, obtendo-se um produto escuro com concentraes de 60 a 70% (7). No caso da produo de glicerol pelo mtodo carbonato, utilizado carbonato de sdio (concentraes maiores que 5% do caldo) e a levedura Saccharomyces ellipsoideus. Neste processo o pH mantido sempre alcalino, sendo o rendimento de 20-25% de glicerol e semelhante ao sulfito, obtm-se uma mistura de glicerol e etanol, alm de cido actico (1,12). A produo de glicerol tambm realizada com leveduras osmoflicas, pois estas so capazes de produzir altos rendimentos deste lcool e outros poliis na ausncia de sulfito ou agentes alcalinos (carbonato de sdio), empregando-se concentraes de acares de 20-40%, extrato de levedura, uria e sulfato de amnio, como fontes de nitrognio (1). Alm disso, estas leveduras so tolerantes s altas concentraes de sal, o que minimiza a contaminao permitindo que a fermentao ocorra sob condies no-estreis. Estas leveduras podem converter mais que 60% de acares em poliis, no entanto, a velocidade de converso extremamente baixa (1). Por isso, mutantes com baixas atividades da enzima lcool desidrogenase e baixa atividade respiratria so desenvolvidas para aumentar a produo de glicerol (1,12). Uma levedura osmotolerante recm descoberta, a Candida glycerinogenes vem sendo empregada na China para a produo industrial de glicerol, devido a sua alta eficincia
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de converso e produtividade. A formao de glicerol por essa levedura chega a 110-130 g/L, contra apenas 30-40 g/L, para Saccharomyces cerevisiae (12,17). Espcies osmotolerantes de leveduras, alm de produzir o glicerol produzem outros poliis, como exemplo: arabitol, eritrol, manitol e xilitol (12, 18, 19). A levedura Candida guilliermondii, tem o xilitol como principal metablito de sua via fermentativa e o glicerol como subproduto deste metabolismo, conforme observado nas fermentaes empregando bagao de cana-de-acar (18), aparas de eucalipto (20), casca de aveia (21) e cevada (22). No processo fermentativo de obteno de xilitol empregando a levedura C. guilliermondii, a formao de glicerol ocorre como mecanismo para recuperao do cofator (NAD+), essencial para a enzima xilitol desidrogenase, a qual converte xilose em xilitol como o primeiro passo desta bioconverso, alm de sua formao estar associada tambm exposio da clula condies de estresse celular. A formao de glicerol se d pela reduo de didroxicetona fosfato a glicerol 3 fosfato, catalisado por adenina dinucleotdeo na sua forma oxidada (NAD+), seguida pela desfosforilao do glicerol 3 fosfato a glicerol (Figura 2). Em C. guilliermondii foi constatado que a formao de glicerol est associada ao pH, sendo o pH 7,5 favorvel para sua formao, alm do que a proporo de glicose:xilose no meio tambm interferiu na quantidade de glicerol, observando-se que o aumento desta relao aumentou a formao do glicerol (19, 23). Pesquisas tambm tm mencionado a formao de glicerol resultante do metabolismo de xilose por outras leveduras como C. boidinni, C. shehatae, Pichia sitptis, Pachysolen tannophilus (24, 25) e Candida tropicallis (26). A produo de glicerol durante o metabolismo de acares em leveduras dependente das condies de cultivo e no caso da formao do glicerol, um soluto compatvel, a sua formao se d como um mecanismo no qual o microrganismo evita a perda de gua para o meio extracelular, alm de manter o equilbrio redox do citosol, principalmente na ausncia de oxignio (8). importante ressaltar ainda que o glicerol tambm assimilado por algumas leveduras como do gnero Candida e SacRevista Analytica Dezembro 2006/Janeiro 2007 N26

charomyces e pela bactria Clostridium pasteurianum, resultando em diversos compostos como etanol, 1-3 propanotriol, butanol e butirato (28, 29).

Concluso
A caracterstica mais surpreendente do glicerol o nmero e a variedade de processos no s industriais, mas tambm metablicos no qual ele est envolvido. Uma vez que ele intermedirio de vrios processos metablicos em numerosos organismos, sua importncia fundamental, sugerindo uma origem comum e antiga do mesmo. Alm disso, essa conservao evidencia que a sntese de glicerol e seu metabolismo exercem uma importante funo fisiolgica, como fonte de carbono e energia, como agente crioprotetor e osmoregulador para os microrganismos. J em seres humanos vem sendo utilizado como parmetro em diagnsticos de doenas e aplicaes teraputicas. Tambm se observa um grande nmero de processos industriais no qual o glicerol vem sendo utilizado como na indstria alimentcia, farmacutica, qumica e txtil. A produo comercial do glicerol ocorre por via qumica a partir da sua recuperao de vrios produtos como os da indstria de sabo ou de gorduras na produo de cidos graxos, no entanto, a alternativa de produo microbiana atrativa em funo da possibilidade de reduo de custos deste processo.

Aspectos Econmicos da Produo de Glicerol

Devido a grande importncia do glicerol na indstria, milhes de quilos de glicerina so refinados anualmente no mundo inteiro. Abaixo (Tabela 4), lista-se algumas empresas americanas que refinam a glicerina e suas respectivas capacidades. Dessas empresas, a Dow Chemical a nica a produzir glicerina sinttica, enquanto as outras a obtm como subproduto de leos e sabo, sendo que a demanda e o crescimento da produo de glicerol no mercado americano tem crescido anualmente conforme pode ser verificado na Tabela 5 (30). Atualmente, o preo do glicerol no mercado mundial est entre US$1.10/Kg e US$1.25/Kg e a expectativa o aumento desse preo com a inflao nos prximos 10 anos (12, 14). O preo da produo de glicerol por fermentao microbiana de difcil estimativa. Recentemente, a High Plains Corporation (Wichita, KS), relatou que o custo de produo de glicerol est entre US$0.40/Kg e US$0.53/Kg, o que resulta em um investimento lucrativo em comparao aos preos de venda no mercado (quase 300% de lucro) (12).

Agradecimentos
Os autores agradecem ao apoio financeiro da FAPESP, da CAPES e do CNPq para o desenvolvimento de projetos de pesquisa.

Figura 3. Fluxograma simplificado da via biotecnolgica de obteno de xilitol a partir de materiais lignocelulsicos (Adaptado de 27)

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Referncias
1. REHM, H. Microbial production of glycerol and other polyols. In: Biotechnology vol. 6B. Special microbial process. Weinheim: VCH, pp. 52-64, 1988. 2. TOSETTO, MG; ANDRIETTA SR. Cintica de produo de glicerol em processo de fermentao alcolica utilizando diferentes matrias primas industriais. In: Simpsio Nacional de Fermentaes, Florianpolis. Anais do 14 SINAFERM, Florianpolis, 2003. CDROM. 3. BRISSON, D; VOHL, MC; ST-PIERRE, J; HUDSON, TJ; GAUDET, D. Glycerol: a neglected variable in metabolic process? In: BioEssays v.23, pp. 534-542, 2001. 4. MORRISON, LR. Glycerol. In: Encyclopedia of Chemical Technology. New York: Wiley, pp. 921-932, 1994. 5. Resoluo n 386 de 5 de Agosto de 1999. Disponvel em: www.anvisa.gov.br/alimentos/aditivos_alimentares.htm. Acesso em 20 de julho de 2006. 6. JACKOBSON, G.; KATHAGEN, FW; KLATT, M. Glycerol. In: Ullmanns encyclopedia of industrial chemistry. Weinheim: VCH, pp. 477-489, 1989. 7. LPES, FD; REVILLA, JLG; MUNILLA, MH. Glicerol. In: Manual dos Derivados da Cana-de-Acar: diversificao, matrias-primas, derivados do bagao do melao, outros derivados, resduos, energia. Braslia: ABIPTI, cap. 5.4, pp. 393-397,1999. 8. NEVOIGT, E; STAHL, U. Osmoregulation and glycerol metabolism in the yeast Saccharomyces cerevisiae. FEMS Microbiology Reviews, v.21, p. 231-241, 1997. 9. REP, M; ALBERTYN, J; THEVELEIN, JM; PRIOR, BA; HOHMANN, S. Different signaling pathways contribute to the control of GPD1 gene expression by osmotic in Saccharomyces cerevisiae. In: Microbiology, v.145, pp. 715-727, 1999. 10. SAN JOS, C; MONGE, RA; PEREZ-DIAS, R; PLA, J; NOMBELA, C. The mitogen-activated protein kinase homolog HOG1 gene controls glycerol accumulation in the Candida albicans. In: Journal Bacteriology, v.178, pp. 2850-2852, 1996. 11. McCABE, ER. Disorders of glycerol metabolism. In: The metabolic bases of inherited discase, 7ed. New York: McGraw-Hill Book Co. pp. 1631-1652, 1995. 12. WANG, ZX; ZHUGE, J; FANG, H; PRIOR, BA. Glycerol production by microbial fermentation: A review. In: Biotechnology Advances v.19, pp. 201-223, 2001. 13. Industrial Oil Products Program: IOP 3.1 New Uses of Gycerol. Disponvel em: www.aocs.org/archives/am2006/techprog.asp. Acesso em 12 de setembro de 2006. 14. AGARWAL, GP. Glycerol. In: Advances in Biochemistry. Eng. Biotechnol v.41, pp. 95-128, 1990. 15. HESTER, A. Microbial glycerol. In: Industrial Bioprocess v.22 (4), pp. 3-5, 2000. 16. TAHERZADEH, JM; ADLER, L; LIDN, G. Strategies for enhancing fermentative production of glycerol a review. In: Enzyme and Microbial Technology v.31, pp. 53-66, 2002. 17. JIN, H; FANG, H; ZHUGE, J. By-product formation by a novel glycerol-producing yeast, Candida glycerinogenes, with different O2 supplies. In: Biotechnology Letters v.25, pp. 311-314, 2003. 18. ONISHI, H. Osmophilic yeast. In: Advances in Food and Nutrition Research v.12, pp. 53-94, 1963. 19. RODRIGUES, RCLB; FELIPE, MGA; ROBERTO, IC; VITOLO, M. Batch xylitol production by Candida guilliermondii FTI 20037 from sugarcane bagasse hemicellulosic hydrolysate at controlled pH values. Bioprocess and Biosystems Engineering, v.26, pp. 103-107, 2003. 20. VILLAREAL, MLM. Avaliao do tratamento do hidrolisado hemicelulsico de resduos de eucalipto, com carvo ativo e resinas de troca inica, para produo de xilitol. Tese de Doutorado. Faculdade de Engenharia Qumica de Lorena. Dept. de Biotecnologia. Ps-Graduao em Biotecnologia Industrial. Lorena/So Paulo, 2005. 21. TAMANINI, C; OLIVEIRA, AS; FELIPE, MGA; CANETTIERI, EV; CNDIDO, EJ; HAULY, MCO. Avaliao da casca de aveia para produo bioptecnolgica de xilitol. In: Acta Scientiarum, v.26, n 1, pp. 117-125, 2004. 22. Cndido, EJ; Carvalho, GBM; Felipe, MGA; ALMEIDA E SILVA, JB. Aproveitamento da palha de cevada para obteno biotecnolgica de xilitol. In: ICTR 2004 - Congresso Brasileiro de Cincia e Tecnologia em Resduos e Desenvolvimento Sustentvel, 2004, Florianpolis. 23. SILVA, DDV. Efeito da relao glicose:xilose na bioconverso de xilose em xilitol por Candida guilliermondii em hidrolisado de bagao de cana-de acar. Tese de Doutorado. Faculdade de Engenharia Qumica de Lorena. Dept. de Biotecnologia. Ps-Graduao em Biotecnologia Industrial. Lorena. So Paulo, 2004. 24. VANDESKA, E; AMARTEY, S; KUZMANOVA, S; JEFFRIES, T. Effects of environmental conditions on production of xylitol by Candida boidinii. In: World Journal of Microbiology and Biotechnology, v.11, pp. 213-218, 1995. 25. HAHN-HGERDAL, B; JEPPSSON, H; SKOOG, K; PRIOR, BA. Biochemistry and physiology of xylose fermentation by yeasts. In: Enzyme and Microbial Technology, v.16, pp. 933-943, 1994. 26. YAHASHI, Y; HORITSU, H; KAWAI, K; SUZUKI, T; TAKAMIZAWA, K. Production of xylitol from D-xylose by Candida tropicalis: the effect of D-glucose feeding. In: Journal of Fermentation and Bioengineering, v.81, n.2, pp. 148-152, 1996. 27. SILVA, DDV; FELIPE, MGA. Effect of glucose:xylose ratio on xylose reductase and xylitol dehydrogenase activities from Candida guilliermondii in sugarcane bagasse hydrolysate. In: Journal of Chemical Technology and Biotecnology, v.81, pp. 1294-1300, 2006. 28. FLORES, CL; RODRGUEZ, C; PETIT, T; GANCEDO, C. Carbohydrate and energy-yielding metabolism in non-conventional yeasts. In: FEMS Microbiology Reviews, v.24, pp. 507-529, 2000. 29. BIEBL, H. Fermentation of Glycerol by Clostridium pasteurianum Batch and Continuous Culture Studies. In: Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology, v.27, pp. 18-26, 2001. 30. Glycerine. Disponvel em: www.the-innovation-group.com/ChemProfiles/ Glycerine.htm. Acesso em 18 de agosto de 2006.

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