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Aula Prtica N3 MICROSCOPIA: observao macroscpica e microscpica de micro-organimos Professores: Fernando Carlos Pagnocca (Turma 1) Lara Dures Sette (Turma 2) Introduo O microscpio tico um instrumento (Figura 1) amplamente utilizado em laboratrios de Microbiologia. Existem vrios tipos (campo claro, campo escuro, contraste de fase, fluorescncia) e cada um tem finalidades especficas. Utilizando um sistema de lentes e fonte de iluminao, os microscpios ticos comuns (campo claro) podem ampliar um pouco mais de 1.000X o tamanho original do espcime. Esta limitao est relacionada com princpios fsicos (abertura numrica das lentes, comprimento de onda da luz visvel, dentre outros parmetros). Embora o primeiro objeto que se deseje observar seja o micro-organismo inteiro, utilizando preparaes especficas e com o auxlio adicional de corantes e de iluminao, podemos visualizar estruturas internas como membranas, ncleo (em eucariotas) e endsporos (de bactrias) e tambm estruturas externas, como cpsula e flagelos.
1 Base ou p 2 Fonte de luz 3 Parafuso de foco (micrometro) 4 Brao ou haste 5 Condensador 6 Platina 7 Charriot 8 Objetivas 9 Revlver 10 - Canho
Figura 1. Modelo esquemtico de um microscpio tico
OBJETIVO: Conhecer o microscpio e aprender a tcnica de preparo de lminas a fresco para visualizao das clulas microbianas. Caracterizao macroscpica das culturas de bactrias, leveduras e fungos filamentosos 1. Caracterizao macroscpica A partir das placas contendo culturas microbianas, selecione 4 culturas e descreva as principais caractersticas das colnias que permitem sua diferenciao.
Culturas 1 2 3 4
2. Caracterizao microscpica Preparo de lmina a fresco 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) Utilizar as 4 colonias selecionadas para a caracterizao macroscpica. Colocar uma gota de gua estril no centro da lmina de vidro utilizando uma Flambar a ala. Esfri-la na tampa da placa de Petri, ou no meio slido, numa regio sem colnia. Tocar levemente na colnia, retirando uma pequena quantidade. Homogeneizar este material com a gota de gua, cuidando para obter uma Cobrir com lamnula para examinar ao microscpio.
8)
organismos. Deixar a mesma repousando sobre a poro lateral do bico de Bunsen. Observe ao microscpio utilizando a objetiva com 40X de aumento. Anote as caractersticas na tabela abaixo e desenhe o que observar. CULTURA Micro-organismo 1 Micro-organismo 2 Micro-organismo 3 Micro-organismo 4 FORMA ARRANJO/TAMANHO
Micro-organismo 1
Micro-organismo 2
Micro-organismo 3
Micro-organismo 4