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1. INTRODUO O papel moeda existe desde 1618, quando foi posto em circulao na China. As cdulas constituem-se em excelentes marcadores, inclusive o de higiene, podendo revelar diversos aspectos scio-culturais de um povo. Essas caractersticas ficam claras, principalmente, por meio das notas de menor valor, devido rapidez com que circulam e pelas camadas sociais que alcanam (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). A superfcie das cdulas monetrias propicia um habitat de proliferao de diversas espcies microbianas que se multiplicam a partir de resduos e substncias das mos. No Brasil, o tempo mdio de cdulas de menor valor colocadas em circulao no ultrapassa quinze meses, estando expostas a diversas injrias como abraso, dobras, rasgos, riscos, pregas, absoro de poeira, leo e graxa. Instrumento indispensvel sociedade capitalista, nesse nterim, as cdulas so manipuladas milhares de vezes no perodo de circulao, adquirindo microrganismos do ambiente e do organismo humano. Estes podem provocar no ser humano uma srie de doenas, variando de infeces cutneas oportunistas e das vias urinrias a acometimentos sistmicos que podem levar morte (SOUZA et al., 2005). Pesquisa realizada, com 210 indivduos de dez profisses diferentes, demonstrou que, em mdia, as mos de cobradores de nibus e de caixas de supermercados apresentam 98,69 bactrias e fungos por centmetro quadrado. quase a mesma taxa de microrganismos existentes em uma ferida infectada, de 100 por centmetro quadrado. O resultado dessa pesquisa no surpreendeu, pois o dinheiro uma das coisas mais sujas que passam pelas mos das pessoas e pouqussimas so aquelas que tm conscincia disso (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). Em 2001, a pedido do Banco Central, foram analisadas 110 notas de R$ 10 e de R$1 e o resultado das anlises dos resduos foi taxativo: as cdulas de R$ 1, as que mais transitam pelas mos da populao, especialmente a que vivem em regies com srias deficincias sanitrias, era um grande depositrio de microrganismos patognicos que, dependendo do estado de sade dos indivduos, podem deflagrar problemas gravssimos, como a septicemia, uma infeco generalizada. Em cada centmetro quadrado das notas de R$ 1 havia 30,4 bactrias

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e fungos. Nas cdulas de R$ 10, a relao era de 8,24 microrganismos por centmetro quadrado, praticamente o mesmo nvel de sujeira encontrada em uma nota de US$1 (de 8,33). Mais recentemente, foi realizado um estudo, desta vez concentrado nas cdulas de R$ 1. Na mdia, as notas apontaram a existncia de 247,25 microrganismos por centmetro quadrado. A concluso foi que o dinheiro, principalmente as cdulas de R$ 1 mais sujo do que se imagina. Este estudo indicou a existncia de muitos microrganismos nas cdulas analisadas. Entre eles, a maior presena (42%) foi de estafilococos, um tipo de bactria que causa furnculos, teris, inflamao no ouvido (otite) e faringite, alm de intoxicao alimentar. Para adquirir essas doenas, basta passar a mo contaminada sobre a pele ou pegar um alimento e ingeri-lo sem lavar. J os fungos encontrados no dinheiro so causadores de alergias respiratrias e de contato, mas as notas de real tambm apresentam elevada quantidade de coliformes fecais, resultado da falta de higiene das pessoas depois de usarem o banheiro (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). Falta de hbitos higinicos da populao aumenta a presena de microrganismos. Problema tambm existente em outros pases e a troca de papel por moeda reduz os riscos (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). A deciso do Banco Central de substituir as notas de R$ 1 por moedas do mesmo valor no tem como motivao apenas a reduo de custos. Tambm uma questo de sade. Como se desgastam demais e os hbitos de higiene da populao no so os mais desejveis, as notas acabam se transformando em depsitos de bactrias e focos de transmisso de doenas. As moedas, por sua vez, minimizam esses riscos, pois os metais tm atividade antimicrobiana. O Banco Central ter que fazer uma ampla campanha de conscientizao, pois h uma resistncia grande da populao, principalmente da masculina, de aceitar moedas como troco. O dinheiro sujo no exclusividade do Brasil, mesmo em pases ricos, como os Estados Unidos e a ustria, onde o frio rigoroso, as cdulas apresentam grande quantidade de microrganismos. que, no inverno, as pessoas tomam menos banho e lavam menos as mos, estimulando a disseminao de bactrias e fungos (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). As cdulas de real comeam a se tornar um perigo para a sade medida que vo perdendo o verniz que as recobrem. Sem essa proteo, passam a reter muitas coisas, entre elas, o suor, um campo frtil para o desenvolvimento de microrganismos. Nas notas de R$ 1, esse processo de deteriorao mais rpido. A

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reposio de cdulas custa to caro ao Banco Central. Dos R$ 160 milhes gastos todos os anos para a fabricao de papel moeda, 80%, ou R$ 128 milhes, so destinados substituio de notas estragadas. No ano passado, foram destrudos 860 milhes de cdulas. Em 2006, a projeo de que 1,2 bilhes de notas sejam retiradas de circulao (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). Ciente dos riscos de lidar com esse dinheiro imundo, o Banco Central reduziu o contato dos funcionrios com as cdulas estragadas. Atualmente, 90% do processo de destruio do papel moeda automatizado. Diminuindo ao mximo o contato com esse dinheiro (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005). A substituio de cdulas de papel para as de polmero poderia resultar em diminuio das populaes de microrganismos que aderem a essas notas. Entretanto, este procedimento no pode ser visto como uma soluo fcil para o problema de sade que envolve a contaminao das notas de papel por microrganismos (AYRES et al., 2001; SOUZA et al., 2005). Em se tratando de notas de dez reais, as de papel apresentam uma maior contaminao por microrganismos do que as cdulas de plstico, porm, todas as notas de real apresentam microrganismos de origem fecal, independente do seu valor ou material de confeco (SOUZA et al., 2005). O dinheiro no seria um perigo to grande sade pblica se as pessoas realmente se preocupassem em lavar as mos depois de manuse-lo. No entanto, 20 ou 30 segundos de lavagem no so suficientes para reduzir a quantidade de microrganismos, o ideal seria esfreg-las por trs minutos com um lcool gel usado, constantemente, pelo pessoal que trabalha na rea de sade (MARTINS; COSTA; TRTORA, 2005).

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2. MICRORGANISMOS FREQENTEMENTE ENCONTRADOS EM DINHEIRO 2.1 ENTEROBACTRIAS a maior e mais heterognea famlia de bactrias Gram negativas de importncia mdica. So considerados atualmente 27 (vinte e sete) gneros, 102 (cento e dois) espcies e 8 (oito) grupos indefinidos. Independente da complexidade, mais de 95% das amostras implicadas em casos clnicos colocada em 25 (vinte e cinco) espcies, sendo possvel o isolamento de enterobactrias de qualquer amostra clnica (ANVISA, 2004). A famlia das enterobactrias talvez seja a mais importante famlia bacteriana, nela esto inseridos diversos gneros como Escherichia, Proteus, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Shigella e Salmonella . Podem ser encontradas na natureza ou na microbiota normal do homem e animais. Com relao ao homem, estes patgenos esto entre os principais agentes de infeco hospitalar e, sem dvida, constituem a principal causa de infeco intestinal e urinria em muitos pases. As suas relaes com os animais tambm interessam muito ao homem no s porque causam perdas econmicas, mas tambm porque os animais representam vasto reservatrio de patgenos humanos. Por estas razes, poucos microrganismos tm sido to estudados quanto os membros mais importantes da famlia (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). Nesta famlia esto contidos tambm os coliformes totais que so bacilos Gram negativos que fazem parte, entre outros, da microbiota residente no trato gastrointestinal dos mamferos. A presena de coliformes totais no um indicativo de contaminao fecal, pois este inclui bactrias no entricas como a Serratia sp. e Aeromonas sp. No entanto sua presena serve como indicativo da qualidade higinico-sanitria do produto. Os coliformes termotolerantes diferenciam-se dos totais por fermentarem a lactose com produo de gs a uma temperatura de 44,5C. O principal representante do grupo, e o indicador especfico de contaminao fecal a Escherichia coli (GASPAROTTO; ROCHA; GRECELL, 2006). Esta famlia dividida atravs de diferentes provas em 11 (onze) principais gneros, tendo sido descritos nos ltimos anos outros 16 (dezesseis) gneros e

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algumas espcies, mas ainda consideradas de pouca ou nenhuma importncia clnica (ANVISA, 2004). So bacilos Gram negativos, no esporulados, com motilidade varivel, oxidase negativos, e que crescem em meios bsicos (caldo peptona), meios ricos (gar sangue, gar chocolate e CLED), meios seletivos (Mac Conkey, EMB). So anaerbios facultativos (crescem em aerobiose e anaerobiose), fermentam a glicose com ou sem produo de gs, so catalase positivos, e reduzem nitrato a nitrito (ANVISA, 2004). So capazes de metabolizar uma ampla variedade de substncias como carboidratos, protenas e aminocidos, lipdeos e cidos orgnicos. Utilizam glicose e amnia como fontes nicas de carbono e nitrognio, respectivamente (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.1.1 Escherichia coli A diversidade patognica da Escherichia coli chega a ser fantstica. A espcie compreende pelo menos cinco categorias de amostras que causam infeco intestinal por diferentes mecanismos e vrias outras especificamente associadas com infeces urinrias, meningites e provavelmente outras infeces extraintestinais. As categorias que causam infeco intestinal so coletivamente chamadas de Escherichia coli diarreiognicas e as associadas a infeces extraintestinais de EXPEC (Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli ). Alm de ser um patgeno importante, Escherichia coli membro da flora intestinal normal do homem, sendo encontrada nas fezes de todos os indivduos normais. Esta estreita associao com as fezes do homem (e tambm dos animais) representa a base do teste para verificar contaminao fecal da gua e dos alimentos, to usado em sade pblica. Em termos quantitativos, Escherichia coli provavelmente seja o patgeno humano mais importante (TRABULSI; ALTERTHUM , 2005). 2.1.2 Proteus Proteus mirabilis a espcie mais importante, principalmente em relao a infeces urinrias adquiridas na comunidade e em hospitais. As espcies de Proteus produzem grandes quantidades de urease que degrada a uria formando amnia e outros produtos. Acredita-se que a alcalinizao da urina durante

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infeces urinrias causadas por estes organismos contribua para a formao de clculos urinrios (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.1.3 Citrobacter As espcies mais importantes so Citrobacter freudii e Citrobacter diversus (Citrobacter koseri), as quais podem causar infeces urinrias, bacteremias e infeces respiratrias entre outras. Uma espcie que tem sido bastante citada ultimamente Citrobacter rodentium, que, embora no cause infeco no homem, compartilha fatores de virulncia (intimina) com patgenos humanos como Escherichia coli enteropatognica e Escherichia coli enteroemorrgica (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.1.4 Klebsiella O habitat mais comum da Klebsiella sp o ambiente natural (solo, gua, etc.) e a superfcie mucosa dos mamferos. Nos seres humanos, os locais freqentes de colonizao so o trato gastrointestinal, os olhos, as vias respiratrias e o sistema genito-urinrio. Classicamente descrita por Friedlander como causa da pneumonia, a Klebsiella uma enterobactria que pode causar infeco em diferentes rgos e sistemas, como o trato urinrio e sistema nervoso central, especialmente em recmnascidos de alto risco (ALMEIDA, 2005). As caractersticas das diferentes espcies de Klebsiella incluem a ausncia de motilidade e a presena de cpsula polissacardea. As quatro espcies mais comumente descritas so: Klebsiella pneumoniae (patgeno humano mais comum), Klebsiella oxytoca (patgeno humano menos comum), Klebsiella terrigena e Klebsiella planticola (espcies do solo e ambientes aquticos). Os organismos so definidos sorologicamente pelas cpsulas de polissacardeos (antgenos K) e lipossacardeos (antgenos O) (ALMEIDA, 2005). 2.1.5 Enterobacter Duas espcies Enterobacter cloaceae e Enterobacter aerogenes predominam sobre todas as demais como causa de infeces humanas em vrios rgos. Uma caracterstica importante das duas espcies a capacidade de contaminar

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equipamentos mdicos e solues para uso parenteral (TRABULSI; ALTERTHUM , 2005). 2.1.6 Shigella A Shigella semelhante aos outros membros da famlia Enterobacteriaceae. Diferem da maioria por serem imveis no teste-padro de motilidade. Atravs de estudos de hibridao de DNA, a Shigella no pode ser diferenciada de Escherichia coli, e ambas so consideradas, inclusive, como uma nica espcie por alguns autores. Shigella infecta principalmente o homem e, excepcionalmente, outros primatas como macacos e chimpanzs, causando shigelose ou disenteria bacilar. Raramente ocorre em animais (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). O gnero Shigella constitudo de quatro espcies, designadas Shigella dysenteriae (sorogrupo A; treze sorotipos), Shigella flexneri (sorogrupo B; seis sorotipos), Shigella boydii (sorogrupo C; dezoito sorotipos) e Shigella sonnei (sorogrupo D; um sorotipo). Shigella sonnei costuma aparecer em duas formas, denominadas formas I (lisa) e II (rugosa). A passagem da forma I para a forma II conseqncia da perda de um plasmdio, que confere a sntese do antgeno O de Shigella sonnei. As amostras dos sorogrupos A, B e C so muito similares fisiologicamente, enquanto Shigella sonnei pode ser diferenciada das demais pela positividade na reao da descarboxilao da ornitina e da produo de -Dgalactosidase. Os sorotipos de Shigella so caracterizados somente pelos antgenos O, uma vez que estas bactrias so desprovidas de antgenos K e H. A Shigella dysenteriae tipo I (bacilo de Shiga) difere das demais por produzir a toxina Stx (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.1.7 Salmonella As Salmonellas apresentam caractersticas semelhantes s descritas da famlia Enterobacteriaceae. Entretanto, ao contrrio de muitas delas e em comum com outras, as Salmonellas clinicamente mais importantes no fermentam a lactose, o que bsico para a diferenciao de colnias nos meios de isolamento contendo lactose. Esta caracterstica pode variar, pois foi observado que amostras de Salmonellas podem adquirir plasmdios que transportam genes que codificam

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enzimas que permitem a cepa a fermentao da lactose e assim desenvolverem colnias lactose positivas em meios de isolamento, semelhantes s de Escherichia coli (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). As Salmonellas infectam o homem e praticamente todos os animais domsticos e selvagens, incluindo pssaros, rpteis e insetos. No homem, as Salmonellas causam vrios tipos de infeco, e as mais comuns so a gastroenterites e a infeces sistmicas (febres tifide e paratifide) (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.2 BACTRIAS GRAM-NEGATIVAS NO FERMENTADORAS Os bacilos Gram negativos classificados como no fermentadores (BNFs) so microrganismos aerbios, no esporulados, que se caracterizam pelo fato de serem incapazes de utilizar carboidratos como fonte de energia atravs de fermentao, degradando-os pela via oxidativa (ANVISA, 2004). A identificao dos bacilos Gram negativos no fermentadores sempre foi um desafio para os laboratrios de rotina em microbiologia, considerando que a maioria deles no realiza este tipo de identificao, ou o faz de maneira elementar em virtude da pouca incidncia em amostras ambulatoriais, assim como pela complexidade e elevado custo dos esquemas completos de identificao. So tambm algumas das bactrias mais difceis de serem identificadas laboratorialmente, pois do resultados negativos em muitos testes convencionais (ANVISA, 2004; MENEZES et al., 2004). A caracterizao deste grupo de bactrias de grande importncia nos casos de infeco hospitalar. Embora a sua incidncia, mesmo em hospitais, seja pequena quando comparada a outros agentes etiolgicos, geralmente eles apresentam resistncia elevada a vrios antibiticos e so capazes de causar infeces graves. Estas bactrias colonizam e causam infeces, em especial, em pacientes graves oriundos de Centro Terapia Intensiva e submetidos a procedimentos invasivos, sendo importante classific-los at o nvel de gnero e espcie (ANVISA, 2004). Neste grupo est includo o gnero Pseudomonas e alguns outros gneros estreitamente relacionados, que constituem a famlia atualmente denominada Pseudomonadaceae. Os membros dessa famlia caracterizam se como bacilos Gram negativos retos ou ligeiramente curvos, aerbios estritos; a maioria das cepas

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apresenta motilidade por meio de um ou mais flagelos polares, utilizam glicose e outros carboidratos oxidativamente e em geral so citocromo oxidase positivas (MENEZES et al., 2004). As Pseudomonas so microrganismos ubquos encontrados no solo, na matria orgnica em decomposio, na vegetao e na gua. So tambm encontradas em todo o ambiente hospitalar em reservatrios midos, como alimentos, flores cortadas, pias, sanitrios, esfreges para piso, equipamento de tratamento respiratrio e dilise e, at mesmo em solues desinfetantes. A persistncia do estado de portador nos seres humanos rara como parte da microbiota normal, a no ser que o indivduo esteja hospitalizado, ou seja, um hospedeiro imunocomprometido ambulatorial. Pseudomonas aeruginosa o pseudomono mais freqentemente isolado de amostras clnicas. A ampla distribuio ambiental das Pseudomonas assegurada por suas exigncias simples para crescimento (MENEZES et al., 2004). A gravidade das infeces das vias areas inferiores por Pseudomonas aeruginosa pode variar desde uma colonizao ou traqueo-bronquite benigna at a ocorrncia de broncopneumonia necrosante grave. A colonizao observada em pacientes com fibrose cstica, outras doenas pulmonares crnicas ou neutropenia. A infeco pulmonar por Pseudomonas em pacientes com fibrose cstica tem sido associada exacerbao da doena subjacente, bem como a doena invasiva no parnquima pulmonar. As cepas mucides esto comumente associadas nestes pacientes, e sua erradicao difcil com antibioticoterapia. Os pacientes neutropnicos e outros pacientes imunocomprometidos so freqentemente expostos a Pseudomonas atravs de exposio a equipamento de tratamento respiratrio contaminado. A doena invasiva nesta populao caracteriza-se por broncopneumonia difusa e geralmente bilateral, com formao de microabscessos e necrose tecidual (MENEZES et al., 2004). As infeces por Pseudomonas so basicamente oportunistas, isto , restrita a pacientes com comprometimento das defesas do hospedeiro. Isto ilustra a importncia da capacidade do hospedeiro de impedir a colonizao e invaso por Pseudomonas (MENEZES et al., 2004). Em todo o mundo reconhecida a crescente prevalncia de bactrias resistentes aos antimicrobianos, sobretudo das multirresistentes, que no vm

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mostrando, em geral, comprometimento em relao sua virulncia, infectividade ou sobrevida (MENEZES et al., 2004). Autoridades e organizaes cientficas internacionais vm expressando, com freqncia e nfase, suas preocupaes com o fenmeno e tm recomendado esforos no sentido de sua melhor caracterizao nas diferentes regies e no correr do tempo. Nesse sentido, estudos longitudinais, que visem obteno e anlise de taxas de resistncia dos agentes bacterianos isolados de pacientes, constituem-se em valioso recurso prtico para o adequado direcionamento da antibioticoterapia (MENEZES et al., 2004). De maneira mais comum, a transmisso de bactrias multirresistentes se d de maneira cruzada, atravs dos profissionais de sade, tanto pelo contato direto entre um paciente e outro, como pelo contato indireto devido ao manuseio de artigos ou superfcies contaminadas. Mais raramente pode ocorrer transmisso por uma fonte nica diretamente de artigo ou equipamento contaminado (MENEZES et al., 2004). As cepas de bactrias resistentes a mltiplos antibiticos no apresentam maior potencial de transmissibilidade ou virulncia quando comparadas s cepas sensveis, entretanto, as infeces devidas a agentes multirresistentes apresentam opo teraputica restrita (MENEZES et al., 2004). 2.3 Staphylococcus Os Staphylococcus so bactrias esfricas, que formam colnias de clulas aderidas umas s outras, ora encadeadas, aos pares ou formando correntes, ora agrupadas em forma de cachos, o que deu origem a seu nome. So cocos Gram positivos, anaerbios facultativos, imveis e no esporulados que mais resistem no meio ambiente. Podem sobreviver por meses em amostras clnicas secas, so relativamente resistentes ao calor e podem tolerar uma concentrao aumentada de sal. Pertencem famlia Micrococcaceae, que contm todos os Gram positivos que produzem catalase. H 33 (trinta e trs) espcies de Staphylococcus, mas destas apenas 11 (onze) infectam o homem e a nica patognica a Staphylococcus aureus. Das outras 10 (dez), as mais conhecidas so: Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus saprophyticus (SANTOS, 2000).

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No entanto, apesar dos antimicrobianos existentes, da melhora das condies sanitrias e das medidas de controle de infeco hospitalar, este microrganismo continua a ser um dos mais importantes patgenos para o homem (ANVISA, 2004). Os Staphylococcus esto presentes na gua, no solo e em alimentos derivados de animais, como ovos, carne de animais e de aves, leite e seus derivados. Apesar de sobreviverem em diversos ambientes, eles habitam principalmente a pele e mucosas de mamferos e aves. Podem tambm estar presentes no trato respiratrio, urinrio e gastrointestinal e o seu principal reservatrio so as narinas (SANTOS, 2000). Os Staphylococcus esto geralmente mais envolvidos em infeces de pele superficiais e profundas, podendo atingir os tecidos subcutneos e musculatura. Quando ocorre uma quebra na barreira da pele, cria-se a oportunidade para a agresso. A resposta do sistema de defesa resulta no surgimento dos fenmenos vasomotores que iro gerar calor, tumorao, dor no local e produo de pus. Tambm podem provocar conjuntivites, pneumonias, meningites, endocardites e mesmo infeces da corrente sangnea, como a septicemia, que pode provocar uma doena generalizada, envolvendo vrios rgos (SANTOS, 2000).

2.4 Clostridium Este gnero extremamente heterogneo, composto de cerca de 150 espcies e seu hbitat natural o solo e o intestino. Felizmente, poucas espcies so responsveis por importantes infeces no homem e nos animais, a saber: Clostridium perfringens, Clostridium clostridioforme, Clostridium innocuum, Clostridium ramosum, Clostridium difficile, Clostridium butyricum, Clostridium cadaveris, Clostridium sporogenes, Clostridium bifermentans, Clostridium glycolicum, Clostridium tertium, Clostridium septicum, Clostridium tetani, Clostridium botulinum, Clostridium sordelli, Clostridium histolyticum, Clostridium novyi. As dozes primeiras espcies so responsveis por 95% de casos de infeces por Clostridium sp (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). O gnero definido como aquele que rene bacilos Gram-positivos esporulados, alguns anaerbicos obrigatrios ( Clostridium perfringens), outros aerotolerantes (Clostridium tertium) e, alguns, raros, que no toleram traos de oxignio (Clostridium haemolyticum e Clostridium novyi). As clulas vegetativas, da

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maioria das espcies, so bacilos retos ou curvos, variando de pequenas formas de bastonetes cocides a formas longas, filamentosas com extremidades arredondadas ou retas. Algumas vezes, em cultivos prolongados, podem ser observados bacilos com aparncia de Gram-negativos e, em muitas ocasies, formas Gram-positivas e Gram-negtivas so observadas em uma mesma lmina. Os endsporos ovais ou esfricos usualmente so maiores do que as clulas vegetativas. Certas espcies s produzem esporos sob condies especiais, como o caso de Clostridium perfringens. A maioria no capsulada, e praticamente todos so catalasenegativos. Os clostrdeos usualmente so fermentadores e/ou proteolticos, porm alguns so assacarolticos e no-proteolticos. As espcies Clostridium perfringens, Clostridium ramosum e Clostridium innocuum so imveis, porm a maioria mvel atravs de flagelos peritrqueos (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). Esto amplamente distribudos na natureza e so encontrados no solo, em vegetaes, em sedimentos marinhos e no intestino do homem e de outros vertebrados, alm de insetos. A espcie Clostridium perfringens j foi encontrada em praticamente todos os solos examinados, com exceo das areias do deserto Saara. As espcies componentes do gnero so, em sua maioria, avirulentas, embora algumas possam ser isoladas de infeces endgenas, enquanto outras so patgenos reconhecidos (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.5 Bacillus O gnero Bacillus compreende mais de 50 espcies, algumas delas sendo bastante conhecidas. uma bactria Gram-positiva esporulada que, quando cultivada no laboratrio, costuma apresentar-se em longas cadeias serpentinosas, a maioria das clulas mostrando esporo central ou subterminal. Entretanto, em material clnico, as clulas so isoladas e no apresentam esporos. Seu habitat natural o solo, onde os esporos podem permanecer viveis por dezenas de anos, gua, matria orgnica animal e vegetal nas condies mais variadas de temperatura, umidade, pH, etc. Por exemplo, Bacillus anthracis um patgeno humano e animal conhecido como agente do antraz ou carbnculo. A doena humana quase sempre foi dependente do contato com animais doentes ou produtos provenientes destes animais. A introduo da vacinao animal e de medidas higinicas adequadas reduziu bastante a importncia de Bacillus anthracis como um

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patgeno humano e animal at recentemente. O Bacillus subtilis um dos contaminantes mais comuns em laboratrio. O Bacillus cereus tem sido responsabilizado por casos de intoxicao alimentar em diferentes pases. Duas formas clnicas de intoxicao so conhecidas. Uma manifesta-se principalmente por vmitos (forma emtica) e outra por diarria (forma diarrica). A primeira mediada por uma toxina termoestvel, cujo mecanismo de ao no conhecido. O perodo de incubao de aproximadamente seis horas e durao mdia dos sintomas de nove horas. O alimento mais comumente implicado o arroz. A forma diarrica mediada por uma toxina termolbil semelhante toxina colrica, inclusive com relao ao mecanismo de ao. O perodo de incubao de 8-10 horas e a durao dos sintomas de em mdia 24 horas. Os alimentos mais implicados so carnes e vegetais. Outra espcie do gnero Bacillus bastante conhecida, principalmente em agricultura, Bacillus thurigencis. Esta espcie produz uma toxina altamente letal para certas espcies de insetos e assim muita usada no combate de pragas. Um achado recente e bastante surpreendente refere-se semelhana existente entre cromossomos de Bacillus anthracis, Bacillus cereus e Bacillus thurigencis. Na realidade, tendo-se por base esta semelhana, as trs bactrias pertencem a uma nica espcie, embora sejam extremamente diferentes em suas caractersticas fenotpicas. Estas diferenas so mediadas por plasmdios especficos. Do ponto de vista evolutivo, pode-se pensar que a diversificao foi decorrncia de uma simples aquisio de diferentes tipos de plasmdios pela mesma espcie de bactria. Demonstrou-se recentemente que alguns destes plasmdios podem ser transferidos por conjugao e uma espcie para outra (TRABULSI; ALTERTHUM, 2005). 2.6 FUNGOS Os fungos incluem organismos muito diversificados e em muitos casos pouco relacionados. Apresentam algumas caractersticas comuns aos vegetais e outras aos animais, sendo que sua posio entre os seres vivos foi polmica durante muito tempo. No sistema de cinco reinos, proposta por Wittaker (1969) para a classificao dos seres vivos, o grupo adquiriu identidade prpria: Reino Fungi (grego: sphongos = esponja; latin = fungus) (DIAS; ROCHA, 2000).

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Fungos so seres dispersos no meio ambiente, em vegetais, ar atmosfrico, solo e gua e, embora sejam estimados em 250 mil espcies, menos de 150 foram descritos como patgenos aos seres humanos (ANVISA, 2004). Os fungos so eucariticos, diferem, portanto, das bactrias, algas azuis e proclorofceas. No possuem clorofila e nesta caracterstica constituem um grupo bastante homogneo; no h excees. Excetuando-se os raros casos, possuem paredes celulares definidas, so geralmente imveis, porm podem possuir estgios reprodutivos mveis, reproduzindo-se assexuadamente atravs de esporos, na maior parte dos casos. No possuem caule, razes ou folhas, nem um sistema de conduo sofisticado como as plantas superiores. A forma varia desde um simples talo esfrico sem qualquer outro acessrio e que se transforma totalmente em um esporngio na maturidade, at a forma filamentosa multicelular (micelial), ramificada ou no. Os ncleos so relativamente fceis de serem observados e as estruturas somticas, com raras excees, demonstram possuir restrita ou nenhuma diviso de trabalho (DIAS; ROCHA, 2000). Os fungos de interesse mdico, agentes de micoses, so de dois tipos morfolgicos: leveduras, que so unicelulares e bolores ou fungos filamentosos, que so multicelulares. Existe um subgrupo dentro dos filamentosos, chamados fungos dimrficos, que se apresentam sob ambas as formas, dependendo principalmente da temperatura, mas sob influncia tambm do teor de CO 2 e condies nutricionais (ANVISA, 2004). Os fungos aclorofilados, nucleados, produtores de esporos e heterotrficos, que geralmente se reproduzem sexuadamente assexuadamente e cujas estruturas somticas filamentosas e ramificadas so envolvidas por paredes celulares contendo celulose ou quitina ou ambas. Possuem pigmentos responsveis pelas cores variadas que apresentam, mas nenhuma capaz de absorver energia para sntese de carboidratos a partir de CO 2. Assim, so heterotrficos, mas se nutrem por absoro, ao contrrio dos animais, por ingesto. Executam-se os representantes da classe Nyxomicetes que tambm se nutrem por ingesto. Os fungos dependem de gua lquida para seu crescimento e desenvolvimento. A maioria tambm depende do oxignio para a respirao, sendo, portanto, aerbicos. Muitos, entretanto, so anaerbicos facultativos, isto , respiram na presena de oxignio e fermentam na ausncia. Conforme a nutrio, os fungos so classificados em duas categorias: saprfitas (ou saprbios) e parasitas. Os saprfitas se

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alimentam de matria orgnica animal ou vegetal morta e os parasitas vivem dentro de ou sobre organismos vivos (animais ou vegetais), deles retirando seus alimentos (DIAS; ROCHA, 2000). 2.6.1 LEVEDURA As leveduras so fungos unicelulares, isto , formados por uma nica clula e, geralmente, no formam filamentos com miclio. So maiores que a maioria das bactrias, podem ter forma oval, podendo ser alongadas e esfricas. As leveduras gostam de acar preferindo como habitat, frutas, flores e as cascas das rvores (LACAZ et al., 2002). As leveduras se reproduzem assexuadamente multiplicando-se por brotamento, processo pelo qual na superfcie da clula adulta (clula me) desenvolve-se uma pequena salincia (clula-filha) que se transformar numa nova clula (LACAZ et al., 2002). As leveduras so capazes de crescimento anaerbio facultativo. Podem utilizar oxignio ou um componente orgnico como aceptor final de eltrons, sendo um atributo valioso porque permitem que esses fungos sobrevivam em vrios ambientes. Se for dado acesso a oxignio, as leveduras respiram aerobicamente para metabolizar hidratos de carbono formando dixido de carbono e gua; na ausncia de oxignio elas fermentam os hidratos de carbono e produzem etanol e dixido de carbono (LACAZ et al., 2002). A levedura um fungo em regra, unicelular que se reproduz geralmente por brotamento (ANVISA, 2004). Leveduras so fungos capazes de colonizar o homem e animais e, frente perda do equilbrio parasita-hospedeiro, podem causar diversos quadros infecciosos com formas clnicas localizadas ou disseminadas (ANVISA, 2004). So utilizadas como Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces ellipsoideus e Saccharomyces calbergensis, so agentes normais da fermentao alcolica utilizada na fabricao de vinhos, cervejas e fermentos. Zygosaccharomyces tem capacidade de se desenvolverem em lquidos com alta concentrao de acar. E por isso so responsveis pela deteriorao de mel, melao e xaropes. Schizosaccharomyces, muito comum na superfcie de frutos, no solo, no bagao e em substratos. Picchia, Hansenula e Debaryomyces responsveis pela formao de

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filme na superfcie de lquidos de origem vegetal, cidos. Endomyces vernalis, utilizvel na sntese de produtos graxos. Endomyces fiberliger, levedura capaz de produzir amilase (LACAZ et al., 2002). 2.6.2 BOLOR O bolor um fungo filamentoso, multicelular, constitudo de hifas (ANVISA, 2004). Os bolores, normalmente, no fazem parte da microbiota animal e, portanto o homem no um reservatrio importante para esse grupo de fungos. As portas de entrada no hospedeiro so as vias areas superiores ou quebra na barreira epidrmica aps traumatismos com objetos perfuro-cortantes (ANVISA, 2004).

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3. OBJETIVOS Avaliar a contaminao microbiolgica do dinheiro coletado em feira livre nos municpios de Fernandpolis e Jales, e comparar a prevalncia de colonizao nas cdulas de dez reais confeccionadas de matria celulose com as de polmero, uma vez que, no Brasil, so as nicas veiculadas sob estas duas formas.

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4. MATERIAL E MTODOS 4.1 Amostra analisada: Foram coletadas e analisadas 48 amostras de cdulas de real, distribudas da seguinte maneira: quinze de R$1; nove de R$2; oito de R$5; dezesseis de R$10; sendo que destas, oito feitas de material-papel e oito feitas de polmero. 4.2 Procedimento no ato da coleta: Cada nota foi depositada sobre um plstico rgido estril em superfcie plana. O material para anlise foi coletado assepticamente com swab umedecido em soluo salina estril, esfregado sobre ambas as faces da cdula e imediatamente introduzido em tubo de ensaio contendo caldo de infuso de crebro e corao (BHI) e incubado por 24 horas a 37C (AYRES et al., 2001). 4.3 Identificao de bactrias Gram-positivas: Aps a turbidez do caldo BHI, as amostras foram inoculadas pela tcnica de esgotamento em gar Chocolate e incubadas por 24 horas a 37C. Decorrida a multiplicao microbiana, estas foram observadas pela tcnica de colorao de Gram e identificadas pela prova da catalase e coagulase em tubo (KONEMAN et al., 2001; ANVISA, 2004). 4.4 Identificao de bactrias Gram-negativas: Aps turbidez do caldo BHI, as amostras foram inoculadas pela tcnica de esgotamento em gar Mac Conkey e incubadas por 24 horas a 37C. Aps a multiplicao bacteriana, estas foram identificadas atravs dos seguintes meios: Trplice Acar Ferro (TSI); Sulfato Indol e Motilidade (SIM); Vermelho de Metila (VM); Voges Proskauer (VP); meio de oxidao e fermentao (OF); Citrato de Simmons (KONEMAN et al., 2001; ANVISA, 2004). 4.5 Identificao fngica:

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Os fungos foram identificados atravs de observaes macroscpicas e microscpicas das colnias, por meio do exame direto com salina estril (KONEMAN et al., 2001; ANVISA, 2004).

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5. RESULTADOS Das 48 amostras de dinheiro analisadas todas apresentaram contaminao microbiana. Das 15 cdulas de um real, tivemos 21 Bacillus sp e 1 Enterobactria. Nas 9 cdulas de dois reais, foram 11 Bacillus sp e 1 Clostridium sp. As 8 cdulas de cinco reais, forneceu 6 Bacillus sp, 3 Clostridium sp e 1 Bactria nofermentadora. J, nas 8 cdulas de dez reais de papel, foram 5 Bacillus sp, 1 Staphylococcus sp e 3 Enterobactrias. E, nas 8 cdulas de dez reais de plstico, tivemos 7 Bacillus sp, 1 Staphylococcus sp e 1 Enterobactria, conforme mostra a figura abaixo.

Figura 1- Microrganismos isolados em dinheiro brasileiro


coletado em feira livre nos municpios de Fernandpolis e Jales

100% 80% 60%

1 3 3 1

1 1
No Fermentador Enterobactrias

21
40%

11 6 5

Staphylococcus sp Clostridium sp Bacillus sp

20% 0%

R$1

R$2

R$5

R$10 de papel

R$10 de plstico

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6. CONCLUSES As amostras analisadas apresentaram os seguintes microrganismos: Bacillus sp, Staphylococcus sp coagulase negativa, Enterobactrias, Bacilo Gram-negativo No Fermentador e Clostridium sp. Este estudo indicou a existncia de muitos microrganismos nas cdulas analisadas, principalmente as cdulas de R$ 1, que mais transitam pelas mos da populao. Em se tratando de notas de dez reais, as de papel apresentaram pouca diferena de contaminao por microrganismos do que as cdulas de plstico, porm, todas as notas de real apresentam microrganismos, independente do seu valor ou material de confeco, mostrando tambm, a possibilidade de contaminao sanitria. O dinheiro no seria um perigo sade pblica se as pessoas se preocupassem em lavar as mos depois de manuse-lo.

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8. ANEXOS Prova da catalase: realizada para observar se a bactria em questo produz a enzima que decompe o perxido de hidrognio (H 2O2) em gua e oxignio. utilizada para diferenciar Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Corynebacterium, Micrococcus, Bacillus, Moraxella catarrhalis (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Prova da coagulase: realizada para verificar a capacidade de o microrganismo reagir com o plasma e formar um cogulo. utilizada para separar as espcies de Staphylococcus de importncia clnica, Staphylococcus aureus coagulase positiva, das demais espcies coagulase negativa (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Trplice acar ferro (TSI): Contm trs acares: 0,1%glicose, 1,0% lactose, 1,0% sacarose; vermelho de fenol para deteco da fermentao de carboidratos e sulfato de ferro para deteco da produo de sulfato de hidrognio (indicado pela cor preta na base do tubo). A fermentao indicada pela mudana da cor do indicador de pH de vermelho para amarelo. Utilizado para diferenciar bacilos Gram negativos com base na fermentao de carboidratos, produo de sulfato de hidrognio e gs (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Sulfato, indol e motilidade (SIM): Determina a habilidade de o

microrganismo metabolizar o triptofano em indol. O triptofano um aminocido que pode ser oxidado por certas bactrias resultando na produo de indol, aps a adio de reagentes de Kovacs. Utilizado para diferenciar gneros e espcies de enterobactrias, no fermentadores, Haemophilus e anaerbios (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Vermelho de metila (VM): um teste quantitativo para identificar espcies bacterianas que produzem cidos orgnicos (lctico, actico e frmico) a partir da fermentao da glicose, pois muitas bactrias produzem cidos suficientes para manter o pH abaixo de 4,4. A formao desses cidos pode ser detectada pelo

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indicador vermelho de metila, que adquire a colorao vermelha ao reagir com o meio no pH de 4,4 (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Voges Proskauer (VP): a outra via de fermentao da glicose que as bactrias podem utilizar. Tem a formao do composto acetona que adquire a colorao vermelha devido ao cataltica de -naftol e hidrxido de potssio (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Oxidao e fermentao (OF): Verifica a capacidade do microrganismo em utilizar os carboidratos pela via oxidativa ou fermentativa. Diferencia bacilos Gram negativos quanto ao tipo de metabolismo empregado em utilizar carboidratos (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Citrato de Simmons: Verifica a capacidade da bactria de utilizar o citrato de sdio como nica fonte de carbono, juntamente com sais de amnia, alcalinizando o meio. Diferencia gneros e espcies de enterobactrias e no fermentadores (ANVISA, 2004; KONEMAN et al., 2001). Prova da oxidase: til para categorizar inicialmente muitas espcies de bactrias que apresentam colnias com morfologia caracterstica. Considera-se que as colnias oxidase-positivas no pertenam a enterobactrias e, em geral, isto ajuda a identificar certas espcies bacterianas produtos de oxidase, como as de Aeromonas, Plesiomonas, Pseudomonas e Pasteurella (KONEMAN et al., 2001; ANVISA, 2004).