Corroso microbiolgica do ao inoxidvel AISI 316 em meio de sulfato em diferentes pH.

Microbial corrosion of stainless steel AISI 316 in sulfate medium at different pH. Guilherme J. T. Alves1, Jeferson E. de Moraes1, Maico T. da Cunha2, Andressa Galli3, Everson do P. Banczek4, Cynthia B. Frstenberger5, e Paulo R. P. Rodrigues6.
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Mestre em Qumica Aplicada, 2Doutorando em Qumica Aplicada, 3Doutora em Qumica Analtica, 4Doutor em Cincias - Materiais, 5Doutora em Cincias Biolgicas, 6Doutor em Cincias. UNICENTRO Universidade Estadual do Centro Oeste - PR A durabilidade do ao AISI 316 tem diminudo ao longo dos anos, devido ao de microorganismos existentes no meio industrial, onde h a proliferao de algas, fungos e bactrias, que juntos formam o biofilme. No presente trabalho estudou-se a influncia da Escherichia coli na corroso do ao AISI 316, em meio de Na2SO4 0,5 mol L-1 em trs diferentes valores de pH. Foram utilizadas as tcnicas de potencial de circuito aberto (PCA), polarizao andica potenciodinmica (PAP), espectroscopia de impedncia eletroqumica (EIE), microscopia ptica (MO), voltametria cclica (VC) e microscopia eletrnica de varredura (MEV). Os resultados obtidos nas curvas de PAP mostraram que o ao AISI 316 passivo at 1,00 0,05V/ESM. As EIE confirmaram que a resistncia do ao AISI 316 diminui com a presena da E. coli. As MO para os trs valores de pH estudados revelaram a formao de biofilme sobre a superfcie do metal, bem como o surgimento de corroso localizada, comprovada pela histerese observada na voltametria. A MEV elucidou que o tipo de corroso que o ao inoxidvel AISI 316 sofre, na presena da E. coli, localizada devido a aerao diferencial e dissoluo preferencial das incluses. Palavras-chave: oxidao, sulfato de sdio, Escherichia coli. The durability of steel AISI 316 has declined over the years due to the action of microorganisms existing in the industrial environment, where there is a proliferation of algae, fungi and bacteria, which form the biofilm. In the present work we studied the influence of Escherichia coli in the corrosion of steel AISI 316, in Na2SO4 0.5 mol L-1 medium at three different pH values. The techniques used were open circuit potential (OCP), anodic potentiodynamic polarization (APP), electrochemical impedance spectroscopy (EIS), optical microscopy (OM), cyclic voltammetry (CV) and scanning electron microscopy (SEM). The results in the curves of APP showed the steel AISI 316 is passive until 1,00 0,05V/ESM. The EIS confirmed that the resistence of corrosion of steel AISI 316 decreases with the presence E. coli. The OM for the three pH values studied showed the biofilm formation on the metal surface and the corrosion localized proven by the hysteresis observed in voltammetry. The SEM elucidated that type of corrosion than stainless steel AISI 316 occurs in the presence of E. coli is localized due to differential aeration and inclusions preferential dissolution of inclusions. Key-words: oxidation, sodium sulfate, Escherichia coli.

1. Introduo O ao AISI 316 resistente corroso, viabilizando sua aplicao em sistemas de distribuio de gua, indstrias de papel, petrolfera e alimentcia. Isso se deve ao alto teor de cromo e nquel, pois estes elementos formam uma camada de xido auto-passivante, conferindo-lhe resistncia em meios oxidantes (Gemelli, 2001; Gentil, 1996; Rodrigues, 1997). Ao longo dos tempos os microorganismos sempre estiveram presentes nos diferentes sistemas industriais utilizados nas diversas reas de produo, os quais utilizam o ao nas suas estruturas. Mas como os meios so diferentes nas diversas aplicaes, ocorreu uma adaptao natural dos microorganismos, ou seja, desenvolveram formas de vida que lhes proporcionassem maior segurana e proteo, para sua permanncia nas superfcies colonizadas agravando mais ainda o problema da corroso. Logo se observou que nos ambientes naturais, a maioria das bactrias eram encontradas sob a forma de microcolnias aderidas a superfcies slidas (formao de biofilmes) (Videla, 1993; Moraes, 2009; Flemming, 1991). O termo biofilme usado para descrever a forma de vida sssil das bactrias, caracterizado pela adeso destas, a suportes slidos. No interior dos biofilmes as clulas esto mais protegidas do que se estivessem em suspenso, pois o biofilme atua como uma barreira de substncias polimricas extracelulares (SPE) fazendo com que prevalea o transporte de nutrientes por difuso atravs dos poros, canais e reas de densidade menor, ao invs do transporte por conveco. Assim as molculas grandes tem dificuldade de se moverem dentro do biofilme ao contrrio dos nutrientes que so molculas de tamanho menor e chegam facilmente at as clulas (Moraes, 2009; Flemming, 1991; Pimenta, 2003). As bactrias participam desse processo de forma ativa, porm sem modificar a natureza eletroqumica da corroso e sim a cintica da reao, pois neste caso tambm se encontra uma zona andica onde ocorre a reao de oxidao do metal (corroso), enquanto que a reao catdica transcorre simultaneamente (Beech, 1999; Gantzer, 1989). Nas indstrias citadas no primeiro pargrafo, h condies timas para o desenvolvimento da Esterichia coli, porm o meio encontrado em estaes de tratamento dgua e saneamento bsico ainda maior, pois a E. coli tem mais facilidade de se adaptar e formar colnias em ambientes com pH prximo de 7, e em temperaturas de 33oC 38oC (Padhye, 1992). A corroso em metais provoca um custo de 4% do produto interno bruto de pases industrializados, sendo que 20% desses custos so devido corroso microbiolgica. O interesse em estudar a influncia deste microorganismo na corroso do ao AISI 316 est relacionado facilidade de encontrar a E. coli em diversos tipos de ambientes cuja aplicao est nas tubulaes de saneamento bsico, trocadores de calor em destilarias de indstrias petrolferas bem como nas estruturas de mquinas de fabricao de papel (Anunziato et al., 2008; Moraes et al., 2008 e 2012). 2. Experimental 2.1. Preparao das amostras de metal Os eletrodos de trabalho utilizados eram placas retangulares de ao inoxidvel austentico AISI 316 com rea circular mdia de 0,28 cm2, embutido em teflon. Para o polimento dos eletrodos de trabalho foram utilizadas lixas de SiC de #200, 300, 400, 600 e 1200 mesh, sucessivamente. 2.2. Preparo de solues Preparou-se o meio de cultura nos valores de pH 6, 7 e 8, utilizando reagentes de grau analtico e cepas puras de E. coli ATCC 25922 (cdigo da cepa do micro organismo puro). Na preparao do meio de cultura e das solues contendo E. coli foi adicionado em 1L de gua destilada, 10g de Peptona (fonte de protena) e 80g de sulfato de sdio (Na2SO4) que constitui o eletrlito. Em seguida esterilizou-se a soluo em autoclave por 20 minutos a uma temperatura de

120o C. Aps 24 horas com a soluo a 30oC, adicionou-se as cepas de E. coli (ATCC 25922), obtendo-se ento o caldo concentrado com pH 7. Aps 48 horas, as bactrias estavam com mxima atividade metablica. Diluiu-se em 100mL uma alquota de 10% de caldo concentrado em Na2SO4 0,5 mol L-1, e sem a E. coli contendo apenas Peptona em Na2SO4 0,5 mol L-1 mantendo-as a uma temperatura de 35oC. Para os meios com pH 6 e 7, foram adicionadas aos caldos preparados, solues de cido sulfrico 1 mol.L-1 e hidrxido de sdio 1 mol.L-1, respectivamente. Para a gerao de imagens no microscpio eletrnico de varredura, preparou-se 300 mL da soluo 0,5 mol L-1 de Na2SO4 com 10% de E. coli em pH 7 a 35oC. Essa soluo foi dividida em dois bqueres, cada um com 150 mL de soluo. 2.3. Medidas eletroqumicas Todos os ensaios eletroqumicos foram realizados em uma clula eletroqumica de 100 mL, com um sistema constitudo de trs eletrodos. Os potenciais do eletrodo de trabalho, ao inoxidvel AISI 316, foi medido empregando um eletrodo de referncia de Hg/HgSO4. Uma placa de platina, de grande rea foi utilizada como contra eletrodo. Medidas de potencial de circuito aberto (Eca) foram realizadas, a fim de se obter o potencial de corroso (Ecorr) o qual foi definido quando o potencial no variou 5mV em at 30 minutos. Nos ensaios de polarizao potenciodinmica andica, as curvas foram registradas a uma velocidade de varredura de 1 mV.s-1 desde o Ecorr at o potencial de +1,3V. Para a gerao de imagens por MEV, foi aplicado um potencial de +1,4V por 600 segundos. Na voltametria cclica, as curvas foram obtidas a partir do Ecorr at + 1,4 V e retornando catodicamente novamente at o Ecorr. Os experimentos de Espectroscopia de Impedncia Eletroqumica (EIE) foram executados nas faixas de frequncias de 3 kHz a 1 mHz. O potencial de perturbao foi 5 mV. Todos os experimentos foram conduzidos temperatura ambiente e em triplicata. Em todas as medidas eletroqumicas foi utilizado o potenciostato da marca GAMRY modelo PCI-G300 e um analisador de freqncia PCI-EIS300 acoplado a um computador. 2.4. Microscopia ptica e eletrnica de varredura A microscopia ptica foi utilizada para a revelao das superfcies do metal antes e depois de imerso em soluo contendo os microorganismos, e aps as polarizaes e impedncias eletroqumicas. Para isso utilizou-se o microscpio metalogrfico OLYMPUS modelo BX41M. Para a anlise morfolgica, utilizou-se o microscpio eletrnico de varredura JEOL modelo JSM7401F, e as imagens registradas foram antes e aps as polarizaes. 3. Resultados Na Tabela 1 so apresentados os potenciais de corroso (Ecorr) obtidos para o ao AISI 316 contendo 10% de E. coli e no branco em Na2SO4 0,5 mol L-1 com trs valores de pH. Tabela 1: Potenciais de corroso (Ecorr), para o ao AISI 316, na presena de E. coli em Na2SO4 0,5 mol L-1 nos valores de pH 6, pH 7 e pH 8.
Ecorr / mV vs. ESM
pH 6 pH 7 pH 8

Branco
-0,155 0,005 -0,380 0,002 -0,241 0,008

10% (EC)
-0,160 0,005 -0,388 0,010 -0,200 0,008

As curvas de polarizao potenciodinmica andica do ao inoxidvel AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1 nos pH 6, 7 e 8 so mostradas na Figura 1.

(A)

(B)

(C) Figura 1 Curvas de polarizao potenciodinmicas andicas do ao inoxidvel AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1, nos pH (A) 6, (B) 7 e (C) 8. Na Figura 2 e Tabela 2 so apresentados os diagramas de EIS e os valores de resistncia polarizao, para o AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1 na presena de E. coli 10% e no branco e em valores de pH 6, 7 e 8.

(A)

(B)

(C) Figura 2 Diagramas tipo Nyquist para o ao AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1, na ausncia e com 10% de E.coli em pH: (A) 6, (B) 7 e (C) 8.

Tabela 2: Resistncia polarizao (Rp) do ao AISI 316 na presena de E. coli em concentraes de zero (branco), e 10% em meio de Na2SO4 0,5 mol L-1 nos pH 6, 7 e 8, obtidos pelos resultados da Figura 2.
(Rp) (.cm2) em pH 6 (.cm2) em pH 7 (.cm2) em pH 8 Branco 10% E. coli

76 360 175

52 60 50

Na Figura 3 so apresentadas as micrografias da superfcie do ao inoxidvel AISI 316 com 12 horas de imerso na soluo contendo 10% de E. coli e aps a polarizao nos trs valores de pH. Antes da Polarizao Aps Polarizao

pH 6

pH 7

pH 8

Figura 3 Micrografias da superfcie do ao inoxidvel AISI 316 imersas em Na2SO4 0,5 mol L-1 com 10% de E. coli por 48 horas, antes e aps as polarizaes nos diferentes valores de pH estudados. Aumento de 100x. Na Figura 4 so apresentadas as microscopias feitas atravs do MEV para as trs amostras de ao AISI 316.

(A)

(B)

(C) Figura 4: Microscopia eletrnica de varredura com aumento de 1500 vezes para o: (A) substrato de ao AISI 316 polido; (B) substrato de ao AISI 316 aps imerso por um perodo de 24 horas em Na2SO4 0,5 mol L-1 com 10% de E. coli; e (C) substrato de ao AISI 316 aps remoo do biofilme via polarizao andica potenciodinmica. Na Figura 5, so mostrados os voltamogramas cclicos da regio transpassiva para o ao AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1 com 10% de E. coli e sem a presena de E. coli nos valores de pH 6, 7 e 8.

(A)

(B)

(C) Figura 5: Voltamogramas cclicos do ao AISI 316 em Na2SO4 0,5 mol L-1 com 10% de E coli e sem E. coli (branco) em pH (a) 6, (b) 7 e (c) 8. Eletrodo de Referncia de sulfato mercuroso (ESM). Velocidade de varredura: 1 mV s-1. 4. Discusses Os valores dos potenciais de corroso apresentados na Tabela 1 mostram, por mais que, se aumente a concentrao da E. coli no meio estudado, no h alterao significativa do potencial de corroso, exceo do pH 8. Verifica-se tambm na Tabela 1 que h uma diferena nos potenciais de corroso variando o pH do meio. Na Figura 1 nota-se que a curva de polarizao para os valores de pH 6, 7 e 8, a soluo com 10% de E. coli h uma aumento significativo na densidade de corrente na regio do potencial

aplicado E = 0,95V/ESM, em relao ao sistema sem E. coli. A princpio, a formao do biofilme deve minimizar a densidade de corrente, mas quando ocorre o descolamento deste filme, verifica-se que a liga fica susceptvel a corroso, levando a um aumento brusco na densidade de corrente. Os diagramas tipo Nyquist, apresentados na Figura 2 e os resultados de Rp, apresentados na Tabela 2, confirmam que a resistncia de polarizao do ao AISI 316 em relao ao meio oxidante diminui, quando na presena de E. coli em todos os valores de pH estudados. Outra importante constatao de que a Rp para os pH 6 e 8 na ausncia de E. coli so menores do que o registrado para o pH 7, confirmando a oxidao menos intensa. As micrografias da Figura 3, antes da polarizao, mostram que est evidente a formao do biofilme na superfcie do ao. Esse biofilme mais bem visualizado na micrografia do pH 7, onde h uma rea mais escurecida sobre a superfcie do metal. Contudo, nas micrografias pticas do ao AISI 316 que foram submetidas polarizao, observa-se pontos caractersticos de corroso localizada, justamente em regies que foram cobertas pelo biofilme. Essas observaes puderam ser realizadas, aps as polarizaes nos trs valores de pH estudados, houve o descolamento dos biofilmes. Na imagem gerada por MEV da Figura 4(A) mostrada a superfcie do ao AISI 316 somente polida, mostrando as ranhuras oriundas do processo de polimento da pea metlica e incluses de fases. Na Figura 4(B), observada a superfcie do metal aps o tempo de imerso na soluo contendo a E. coli, verifica-se que alm das ranhuras do polimento h a presena de biofilmes formados sobre a superfcie do substrato metlico. Este biofilme tem a forma de paliadas, um arranjo tpico observado para colnias de E. coli. Na microscopia da Figura 4(C) observa-se na superfcie do ao AISI 316, aps a polarizao, a remoo do biofilme e a existncia de corroso por aerao diferencial (pontos escuros), provavelmente devido a oxidao ser mais acentuada nas regies de incluses que estava abaixo do biofilme. Os voltamogramas cclicos da Figura 5 mostram que nas solues livres da presena de E. coli (branco), no foi registrado uma histerese significativa, ou seja, no teve mudana significativa na rea do eletrodo exposto ao meio oxidante. Porm quando comparado aos voltamogramas obtidos nas solues com 10% de E. coli, evidente a histerese, indicando uma alterao na rea do eletrodo de trabalho (ao AISI 316), portanto houve corroso localizada na superfcie do metal. A voltametria cclica comprovou o que se verificou nas micrografias, uma vez que, o aumento da rea no ciclo do voltamograma caracteriza corroso localizada. O mecanismo de corroso influenciado pela E. coli ocorre quando rea do ao ao qual o biofilme fica aderido, torna-se pouco oxigenada e isto compromete a formao da camada xido protetora na superfcie do ao. Desta forma, a liga perde a propriedade auto-passivante, o que a torna vulnervel a corroso, alm de que os processos biolgicos, que ocorrem na interface biofilme-metal, dando origem corroso por aerao diferencial e dissoluo preferencial das incluses. 4. Concluses A corroso microbiolgica do ao inoxidvel AISI 316 em meio de Na2SO4 0,5 mol L-1 contendo Escherichia coli semelhante nos pH 6 8. Os resultados mostram que h uma corroso localizada no metal abaixo do biofilme devido aerao diferencial e dissoluo preferencial das incluses. Agradecimentos CAPES e ao CNPq.

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