Preparao da lmina de extenso sangunea (Esfregao de Sangue) Material: Sangue perifrico Tcnica: Leishman O leishmam uma mistura de Romanowsky

y apresentando eosina, azul de metileno e azur de metileno na sua composio. O azur de metileno o azul de metileno oxidado. Seqncia na preparao da lmina. 1. Fazer a assepsia do dedo em algodo embebido com lcool; 2. Furar o dedo utilizando uma microlanceta; 3. Colocar a gota de sangue na extremidade de uma lmina histolgica breviamante limpa; 4. Utilizando-se de outra lmina histolgica, fazer corretamente o esfregao deixando uma pelcula de sangue sobre a lmina; Segurar a lmina, contendo a gota de sangue, com os dedos polegar e indicador da mo esquerda; Inclinar uma outra lmina histolgica a 450, segurando com os dedos polegar e indicador, da mo direita. Levar a lmina inclinada at o incio da gota de sangue; Quando a lmina toca na gota, o sangue escorre em seu bordo. Ai deve-se fazer voltar a lmina inclinada para trs, formando-se ento a pelcula de sangue. 5. Deixar secar ao ar; 6. Colocar a lmina sobre um suporte na pia; 7. Cobrir o esfregao com Leishman e deixar por 4 minutos; 8. Sem retirar o Leishman, adicionar gua destilada e deixar por 7 minutos; 9. Escorrer a lmina na pia; 10. Lavar a lmina com gua destilada; 11.Deixar secar ao ar;

12.Observar a lmina com 1000x de aumento, utilizando a objetiva de imerso; Observao de Sangue perifrico Observar com 1000x de aumento. Utilizar o leo de imerso Observar as hemcias (tambm denominados eritrcitos ou glbulos vermelhos), leuccitos (tambm denominado glbulos brancos) e as plaquetas. O numero de hemcias varia de 4,5 a 6 milhes por mm3 de sangue, o nmero de leuccitos de 8.000 a 10.000 por mm3 de sangue e o de plaquetas de 150.000 a 400.000 por mm3 de sangue. 1. HEMCIAS A quantidade de hemcias muito maior que a de leuccitos e plaquetas, da a predominncia das mesmas no campo microscpico. As hemcias que so clulas anucleadas quando adultas e que se coram em rseoamarelado pela eosina.

2. Leuccitos Os leuccitos esto subdivididos em granulcitos e agranulcitos. Os granulcitos apresentam granulaes especficas sempre com a mesma forma tamanho e ultraestrutura. Os agranulcitos no apresentam granulaes especficas. Os ncleos de todos os leuccitos se coram em prpura pelo azur de metileno. Linfcitos Os linfcitos podem ser classificados em pequenos, mdios e grandes. O seu ncleo ocupa quase toda clula e o citoplasma azulado fica mais na periferia.

 Moncitos Os moncitos que geralmente apresentam o ncleo em forma de feijo ou de rim, so clulas grandes e com o citoplasma bem azulado.

Presena de hemcias,2 neutrfilos e moncito bem caracterstico.

 Eosinfilo Os eosinfilos geralmente apresentam o ncleo bilobulado com uma ponte cromatnica. Os grnulos so maiores que os dos neutrfilos e se coram em vermelho pela eosina.

 Basfilos Os basfilos apresentam-se com ncleo que pode ter uma forma de S. Os grnulos do basfilo ficam bem escuros e podem mascarar o ncleo, no entanto, tambm esto presentes no citoplasma; e o seu nome j indica a sua afinidade.

 Neutrfilos Os neutrfilos podem apresentar-se com ncleos em forma de basto ou segmentados. Quanto maior o nmero de segmentos, mais velha a clula. Os grnulos dos neutrfilos se coram em salmo por um mistura de componentes.

3. Plaquetas As plaquetas que na realidade so fragmentos de megacaricitos se coram em vermelho, e apresentam-se relativamente menores em relao s hemcias. As plaquetas ligadas coagulao do sangue podem apresentar-se isoladas ou agrupadas sendo rseo-avermelhadas. Elas so pequenas, pois so fragmentos de clulas maiores chamadas megacaricitos.