ISSN 1980-3540

05.02, 42-47 (2010) www.sbg.org.br

2010: UM SCULO DE DROSOPHILA NA GENTICA.

Lenira M N Sepel e lgion L S. Loreto
Departamento de Biologia e PPG Educao em Cincias, CCNE, Univ. Fed. de Santa Maria, Santa Maria. RS. elgion.loreto@pq.cnpq.br

Resumo H cem anos, uma mosquinha, a Drosophila, foi empregada pela primeira vez como organismo experimental para dar suporte a algumas teorias de uma cincia novata: a Gentica. Com o passar dos anos, esta mosquinha se tornou mais e mais popular na cincia. Revelou-se um modelo muito verstil e hoje, na era genmica, ela vem sendo usada para auxiliar no entendimento de fenmenos biolgicos muito diversos, entre eles os processos do desenvolvimento, envelhecimento, cncer, mal de Alzheimeir, comportamentos de aprendizagem, alcoolismo entre tantas outras aplicaes. Neste artigo apresentamos um pouco da histria da Drosophila enquanto organismo experimental, destacamos seu potencial para aplicao na sala de aula e sugerimos algumas leituras interessantes sobre este organismo-modelo centenrio e ainda to promissor. Organismo-modelo No incio do sculo XX, a Cincia ganhou um campo totalmente novo, a Gentica. Desde ento, as informaes nessa rea se acumulam de modo rpido e vrias aplicaes resultantes das pesquisas em gentica fazem parte do nosso dia-a-dia. H muito que comemorar e h muito o que lembrar. As primeiras dcadas da Gentica foram marcadas por experimentos elegantes e definitivos que consolidaram os novos conhecimentos advindos da redescoberta dos trabalhos de Mendel.

Figura 1 Drosophila melanogaster, por um sculo a musa da Gentica (crdito da figura, ver aps bibliografia). Vrios organismos comearam a ser usados como fonte de informao na intensa busca por compreender os mecanismos de transmisso das caractersticas hereditrias. Surgiram assim os primeiros organismos-modelo para a pesquisa em Gentica. A designao organismo-modelo se aplica s espcies que so utilizadas para investigar um problema particular e produzem resultados que no se aplicam apenas quele grupo em estudo, mas a vrias outras espcies. Dependendo do tipo de pesquisa, as concluses obtidas a partir de um organismo-modelo podem ser estendidas a vrias espcies, ou a todas, sendo consideradas concluses universais. A estreia da mosca das frutas como organismomodelo para elucidar mecanismos de transmisso de caractersticas e estabelecer as relaes entre genes e fentipos ocorreu em 1910, quando Thomas Hunt Morgan publicou na revista Science os resultados de pesquisas com cruzamentos de Drosophila melanogaster. Desde ento, Drosophila tornou-se um dos organismos-modelo mais estudados e versteis da pesquisa em Gentica. O que permitiu Drosophila ser to adequada como organismo42

modelo? A facilidade e o baixo custo de manuteno em laboratrio; um ciclo de vida curto, que permite o nascimento de uma nova gerao a cada dez dias; a produo de proles numerosas, pois uma nica fmea pode gerar centenas de descendentes; a complexidade das caractersticas fenotpicas morfoanatmicas e metablicas; a possibilidade de observar os cromossomos de modo mais detalhado. A primeira contribuio: os genes esto nos cromossomos O primeiro trabalho em que o gnero Drosophila foi usado marcaria a histria da Gentica pela novidade que trazia para os padres mendelianos de herana. At ento, as buscas por caractersticas que se ajustassem s propores descritas por Mendel se restringiam aos padres dominante e recessivo, independentes da localizao cromossmica. Morgan apresentou uma nova forma de herana, a herana ligada ao cromossomo X, que no fazia parte das observaes de Mendel. Atravs da anlise dos resultados de vrios cruzamentos, Morgan demonstrou que a cor do olho em D. melanogaster, a pequena mosca das frutas - era determinada por um gene que fica em um dos cromossomos sexuais. Nessa espcie de mosca, as fmeas tm dois cromossomos X e os machos, um X e um Y. O padro de transmisso da cor do olho era diferente das propores mendelianas tpicas. Morgan concluiu que a transmisso da caracterstica estudada dependia de um gene que estava localizado no cromossomo X. Pela primeira vez, um gene responsvel por uma caracterstica ganhou um local especfico: os genes esto mesmo nos cromossomos. Temos que lembrar que, em 1910, os resultados de Mendel recm haviam sido redescobertos e no havia uma aceitao geral sobre a validade das previses mendelianas. Havia naquele perodo muitas dvidas. Questionava-se principalmente se o padro de transmisso seria aplicvel para todos os tipos de caractersticas e para todos os tipos de organismos. At ento, ningum sabia tambm onde se localizavam os genes e a prpria designao gene tinha sido empregada pela primeira vez, um ano antes (1909), por Johannsen. A informao trazida pelo trabalho de Morgan com Drosophila indicou a localizao de um gene no cromossomo X e a partir dessa descoberta, as heranas antes apenas dominantes ou recessivas passaram a ser identificadas como autossmicas ou ligadas aos cromossomos sexuais.

A sala das moscas A partir do primeiro trabalho, Morgan e seus alunos Alfred Sturtevant, Calvin Bridges e Herman Muller, no curto espao de cinco anos, publicaram uma srie de artigos importantes que constituram o suporte para a teoria cromossmica da herana. Os genes realmente ocupavam posies fixas nos cromossomos e, atravs de cruzamentos apropriados, era possvel estabelecer em que ordem eles estavam organizados. Foi com Drosophila melanogaster que Morgan e seus colaboradores produziram os primeiros mapas genticos, indicando as posies e distncias relativas entre os genes de um mesmo cromossomo. Centimorgan (cM), a unidade criada para expressar a distncia entre genes nos mapeamentos genticos, foi uma homenagem a Morgan. Os trabalhos de Thomas Morgan e seu grupo foram desenvolvidos em um pequeno laboratrio, conhecido como a Sala das Moscas (fly room), na universidade de Columbia (New York). Foi nesse ambiente pequeno, quase todo ocupado por prateleiras com frascos cheios de moscas, que as bases da Gentica foram construdas e a Drosophila tornou-se um dos organismos mais teis para a Cincia. Por vrias dcadas a Sala das Moscas no parou de produzir novidades. Em 1927, Muller demonstrou que expor Drosophila aos raios X ou a outras radiaes ionizantes provocava aumento nas taxas de mutaes e de rearranjo cromossmico. Essa descoberta no s abriu as portas para o entendimento das mutaes, como facilitou a obteno de novos fentipos para as investigaes genticas. Logo os laboratrios estavam cheios de linhagens mutantes, com inverses e delees cromossmicas provocadas pela exposio radiao. Esse rico material permitiu, aos pesquisadores do incio de sculo XX, novos e variados experimentos, acelerando a obteno de informaes sobre os fenmenos genticos a partir das mutaes obtidas nos estoques de Drosophila (Rubin e Lewis, 2000). Um detalhe interessante na histria de Morgan que, antes de 1910, ele era um dos que se manifestavam de modo muito ctico em relao universalidade das concluses de Mendel e tambm no apostava na possibilidade dos fatores hereditrios estarem associados aos cromossomos. As evidncias obtidas atravs dos estudos com Drosophila fizeram Morgan mudar de idia. Os detalhes dessa mudana so apresentados de modo muito interessante por Lilian Al-Chueyr P. Martins, no artigo intitulado Thomas Hunt Morgan e a teoria cromossmica: de crtico a defensor (Martins,1998).

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cromossmicas. Pela primeira vez foi possvel integrar em uma nica representao as informaes entre mapas genticos e mapas cromossmicos. A partir das anlises das bandas cromossmicas dos politnicos de Drosophila tambm foi possvel obter as primeiras evidncias do funcionamento dos genes. As regies cromossmicas onde existem genes em transcrio tornam-se visivelmente diferentes e so chamadas de puffs. A observao dos puffs permite acompanhar quando, em que situao, um gene ligado ou desligado e, assim, localizar os genes nos mapas cromossmicos.

Figura 2 Thomas Morgan trabalhando no fly room (crdito da figura, ver aps bibliografia) Os cromossomos politnicos Drosophila j era um organismo experimental consagrado pela grande quantidade de informaes acumuladas sobre os fentipos mutantes obtidos inicialmente nos trabalhos do grupo da Sala das Moscas. Em 1934, a identificao de um fenmeno peculiar permitiria novas possibilidades para o uso desse organismo-modelo. Theophilus Painter descobriu que nas glndulas salivares das larvas de Drosophila, as clulas sofrem vrios ciclos de replicao cromossmica sem citocinese. As cromtides-irms resultantes dessas duplicaes cromossmicas sem diviso celular no se separam, ficam unidas de telmero a telmero. O resultado final corresponde a milhares de cromtides idnticas reunidas, formando estruturas muito grandes, em longitude e espessura, os chamados cromossomos politnicos. Nesse tipo de organizao cromossmica possvel distinguir facilmente regies claras e escuras, formando um padro de bandas, como se fosse um cdigo de barras. Essas regies correspondem aos pontos em que a cromatina (associao do DNA com protenas) est mais condensada (regies escuras ou bandas) ou s partes em que a cromatina est menos condensada (regies claras ou interbandas) (ver Figura 3). Em 1935 Calvin Bridges publicou um mapa cromossmico registrando o padro de bandas observado para cada cromossomo de D. melanogaster de modo to detalhado que usado at hoje. Com a construo desse mapa de bandas foi possvel identificar em que regio especfica de um cromossomo est um determinado gene, estabelecer relaes entre alteraes fenotpicas e alteraes cromossmicas, detectar a presena de rearranjos, delees e duplicaes em regies

Figura 3 Cromossomos politnicos de Drosophila melanogaster, em que podem ser observados os puffs, as bandas e as interbandas (crdito da figura, ver aps bibliografia). Uma mosca quase humana Que organismo-modelo maravilhoso para as pesquisas em Gentica! no apenas tem ciclo de vida curto, prole numerosa, manuteno fcil, fartura de mutantes, tem tambm cromossomos gigantes! Mas, moscas so moscas e humanos so humanos. Podemos aprender com uma mosca apenas os padres mais gerais de funcionamento, estudar apenas fenmenos que so similares a todos os organismos. Por exemplo, como so os genes, como esto organizados nos cromossomos. Como os cromossomos so transferidos a cada diviso celular e de gerao a gerao... Mas, as semelhanas param por a. Ou no? Vrios pesquisadores, entre eles Edward Lewis, Christiane Nsslein-Volhard, Walter Gehring e Thomas Kalfmann comearam a estudar os genes que controlam o desenvolvimento de Drosophila, um inseto holometbolo, com desenvolvimento que se inicia em ovo, passa por estgio de larva e inclui metamorfose para atingir a fase adulta. Aos poucos foram colecionando mutantes que apresentavam alteraes no desenvolvimento e usaram

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essas moscas especiais para demonstrar que a formao do organismo depende de uma sequncia de genes que vo sendo ligados e desligados, seja durante a formao do embrio, seja durante as transformaes que ocorrem na pupa. Os pesquisadores do desenvolvimento de Drosophila conseguiram obter informaes muito detalhadas sobre a sequncia de ativao dos genes e as respostas esperadas, descrevendo como, medida em que os genes corretos so ativados, as vrias partes que compem uma mosca vo sendo formadas. A grande surpresa veio quando, com as novas tcnicas que permitiram examinar os genes na sua composio mais fundamental, ou seja, quando as tcnicas de sequenciamento do DNA permitiram identificar qual a sequncia de nucleotdeos que compe um gene. Os resultados do sequenciamento dos genes envolvidos no desenvolvimento tornaram evidente que as sequncias de nucleotdeos eram muito similares. As comparaes entre genes de Drosophila e de mamferos revelaram que muitos genes que controlam o desenvolvimento so evolutivamente conservados. Sendo assim, mais uma vez, Drosophila revelou-se um excelente organismomodelo, permitindo a identificao de genes importantes no desenvolvimento de humanos. Um dos exemplos mais notveis de que Drosophila tambm um modelo para obter informaes sobre genes que controlam o desenvolvimento de humanos o trabalho desenvolvido por Walter Gehring e colaboradores. Em Drosophila havia sido identificado um gene que, quando alterado, determinava a produo de moscas sem olhos. Sabendo que em humanos existe um gene muito similar, cujas mutaes esto associadas a um distrbio de desenvolvimento denominado anirdia (ausncia de ris), os pesquisadores realizaram um experimento que demonstrou o quanto esses dois genes eram funcionalmente semelhantes. Eles transferiram o gene humano para embries de Drosophila. As moscas resultantes desse processo de transferncia eram transgnicas, apresentavam nas suas clulas DNA humano. De acordo com as alteraes realizadas no gene humano havia a produo normal de olhos nas Drosophila transgnicas ou se obtinham moscas com desenvolvimento de numerosos olhos espalhados pelo corpo. Esses experimentos foram importantes para demonstrar que nossos genes podiam funcionar corretamente em Drosophila e que a produo de moscas transgnicas podia ser uma boa soluo para estudar o funcionamento de alguns genes humanos (Figura 3). A Drosophila que foi to til para a Gentica mendeliana, entrou definitivamente para o mundo da biologia molecular e, mais recentemente, da genmica.

Em 2000, foi publicado o genoma de D. melanogaster e, em 2003, quando o genoma humano foi divulgado, foi possvel comparar os dois, revelando de modo mais detalhado as semelhanas. muito significativo que 70% dos genes associados a doenas humanas tenham correspondentes em Drosophila. Essas semelhanas permitem que vrios genes associados a distrbios comuns na nossa espcie, tais como cncer, alcoolismo, doenas degenerativas do sistema nervoso, sejam estudados em Drosophila (Martinez-Arias 2008). Ainda que no sejamos moscas, podemos aprender muito sobre ns mesmos, estudando Drosophila.

Figura 3 Drosophila transgnica em que um gene humano, envolvido na formao do olho, modificado para ser expresso em vrias partes da mosca, produzindo vrios olhos em diversas partes do corpo do inseto. Para entender evoluo No incio do sculo XX, com o nascimento da Gentica, alguns pesquisadores trataram de conciliar os novos conhecimentos sobre a hereditariedade com a teoria evolutiva proposta por Darwin. Essa conciliao era necessria porque, quando Darwin props a seleo natural como fora evolutiva, no havia uma explicao razovel e correta para a transmisso das caractersticas selecionadas de uma gerao para outra. Esse era um ponto frgil da teoria evolutiva darwiniana. A unio entre os conhecimentos advindos da Gentica com a teoria evolutiva de Darwin recebeu o nome de Teoria Sinttica da Evoluo ou neodarwinismo. Um dos construtores da sntese entre Gentica e Teoria Evolutiva de Darwin foi Theodozius Dobzhansky, pesquisador russo que foi para EUA realizar estgio na Sala das Moscas com Morgan e acabou naturalizado como norte-americano. Dobzhansky foi um entusiasta em empregar Drosophila como modelo para estudos evolutivos. Ele reconheceu que esse gnero, composto de aproximadamente 1500 espcies, algumas das quais j sendo modelos experimentais importantes, era muito

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atrativo e promissor para estudar os mecanismos atravs dos quais a evoluo ocorria. Embora o gnero Drosophila tenha se tornado conhecido pelas espcies que so atradas por frutos maduros e em incio de fermentao, h outras espcies com uso diversificado de recursos, tanto para alimentao quanto para oviposio. Algumas espcies de Drosophila utilizam flores, outras cactos ou fungos e h tambm as que necessitam de recursos muito restritos, tais como as espcies que ovipositam apenas em guano de morcego ou em maxilpedes de uma determinada espcie de caranguejo. Essa variabilidade na explorao do ambiente torna o gnero Drosophila apropriado para estudar as relaes entre genes e ambientes, para investigar como as adaptaes surgem e so mantidas. Na busca de compreender melhor a evoluo do gnero Drosophila, Dobzhansky comeou a estudar os drosofildeos das Amricas e veio para o Brasil. O desenvolvimento da Gentica no nosso pas est ligado aos estudos que Dobzhansky realizou nas dcadas de 40 e 50 do sculo passado. Para executar suas pesquisas de campo sobre evoluo, utilizando o gnero Drosophila como modelo, Dobzhansky estabeleceu parcerias com pesquisadores brasileiros, entre eles Andr Dreyfus e Crodovaldo Pavan, que se tornaram pioneiros da gentica no Brasil. O artigo de Glick (2008) relata como mais de uma gerao de geneticistas brasileiros tiveram uma formao direta na escola de Dobzhansky, desenvolvendo inicialmente pesquisas com espcies nativas de Drosophila. Assim, pode-se dizer que Drosophila tambm foi importante para o desenvolvimento da gentica brasileira. Drosophila na sala de aula No s para a pesquisa a Drosophila um excelente material. Tambm pode ser um recurso didtico excepcional, da pr-escola universidade. Nas sries iniciais, permite de modo rpido e econmico que os professores trabalhem questes associadas origem atravs de reproduo, as diferentes fases do ciclo de vida e metamorfose, auxiliando no desenvolvimento de habilidades tais como a observao, registro, associao entre informaes e elaborao de concluses a partir de observaes (Demczuk et al 2007). Para esta faixa etria, o texto Drosfila, uma mosquinha famosa, atravs de linguagem e ilustraes adaptadas, traz para o universo infantil as informaes sobre o gnero Drosophila e pode ser um bom material suplementar a experincia de criar mosquinhas (do Val, 2007). Como iniciar e manter uma cultura de Drosophila pode ser encontrado em: www.ufsm.br/labdros No ensino mdio e universidade, o emprego de

Drosophila como recurso didtico pode ser muito variado. Algumas das aplicaes so clssicas: as demonstraes das leis de Mendel, a construo de mapas de ligao, a observao de interao allica e a anlise de cromossomos. Outros usos so mais exploratrios e envolvem aprendizagem atravs de projetos. Esses organismos, notavelmente adequados experimentao, permitem, atravs de tcnicas relativamente simples, a execuo de experimentos em reas muito variadas tais como desenvolvimento/organognese, etologia, toxicologia e mutagnese. Com pouco recurso e alguma criatividade experimentos muito significativos podem ser desenvolvidos com estas mosquinhas. Bibliografia:
DEMCZUK, O.M.; SEPEL, L.M.N e LORETO, E.L.S., Investigao das concepes espontneas referentes a ciclo de vida e suas implicaes para o ensino nas sries iniciais. Revista Electrnica de Enseanza de las Ciencias. 6(1): 117-128. 2007. do VAL, F. Drosfila, a mosquinha famosa. So Paulo, Ed. Terceiro Nome, 2007. GLICK, T.F. O programa brasileiro de Gentica Evolucionria de Populaes, de Theodosius Dobzhansky. Revista Brasileira de Histria, 28(56):315-325, 2008. MARTINEZ-ARIAS, A. Drosophila melanogaster and the development of Biology in the 20th century. in: Drosophila; Methods and Protocols. Editado por Dahmann, C. Totowa USA, Humana Press, 2008. MARTINS, L. A-C P. Thomas Hunt Morgan e a teoria cromossmica: de crtico a defensor. Episteme, 3(6): 100-126, 1998. RUBIN, G.M. e LEWIS, E. B. A Brief History of Drosophila s contributions to genome research. Science 287: 2216-2219, 2000. STURTEVANT, A. H. A history of genetics. New York, Harper & Row, 1965.

Fontes das figures:

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