.

DETERMINAO DO TEMPO DE COAGULAO

. Mtodo de Lee & White
Colher 1 a 2ml de sangue e coloc-Io em tubo de hemlise. Marcar o tempo inicial, deixar este tubo em posio vertical e inclin-Io a intervalos de 1 minuto, no momento em que se possa inverter o tubo sem que haja deformao do cogulo, marca-se o tempo final. Determina-se o tempo de coagulao, como o tempo gasto entre o inicial e o final.

. Mtodo do Tubo Capilar

o sangue poder ser obtido por puno cutnea, aps desprezar a primeira gota, encher o tubo capilar com sangue e mant-Io na posio horizontal. Marcar o tempo e a intervalos de 30 segundos., quebrar fragmentos de aproximadamente 1cm do tubo. Quando aps a quebra do tubo aparecerem fi lamentos de fibrina nas. extremidades deste, marca-se o perodo transcorrido. O tempo de coagulao corresponde ao tempo gasto at o aparecimento do cogulo.

. Mtodo da lmina
Em uma lmina de vidro, colocar uma gota de sangue de aproximadamente 5mm de dimetro, marcar o tempo inicial. A cada 30 segundos transcorridos, inclinar a lmina e quando no mais houver deformao da gota marcar o tempo final.

Quadro 3.17 Tempo de coagulao normal nos animais domsticos Espcie Bovino Ovino Eqino Eqino (Brasil) Su(no Canino Caprino Felino Ave (pinto) Mtodo de Lee & White (minutos) 4a15 4a8 4a15 7 a 9,1 6,2 3 a 13 Mtodo Capilar (minutos) 2,5 a 11,5 1a6 3 a 15 4 3a4 2,5 a 11,5 5,2 :t 0,2 3 Mtodo da Lmina (minutos)

2,8

114

INTERPRETAO o tempo de coagulao encontra-se aumentado quando h: hemofilia leso heptica severa trombocitopenia uremia envenenamento pelo fsforo - deficincia de vitamina K - deficincia de mangans em aves.

6. TEMPO DE SANGRIA
Consiste na observao do tempo gasto para que haja hemostasia de uma pequena inciso realizada na pele e est intimamente relacionado com o nmero de plaquetas. . DETERMINAO DO TEMPO DE SANGRIA

. Mtodo de Duke
Realizar assepsia da regio onde dever ser realizada a prova (orelha ou lbio). Praticar uma inciso cutnea com agulha comum ou lanceta de Bensade de modo a conseguir um fluxo de sangue e atravs de um cronmetro marcar o tempo quando aparecer a primeira gota de sangue e atravs do papel de filtro enxugar o sangue a cada 30 segundos, encerrar o tempo quando no mais aparecer sangue, determinando-se assim o tempo de sangria. INTERPRETAO Existe o tempo de sangria determinado para os animais de acordo com o local onde realizada a inciso. Este tempo poder estar aumentado quando h: trombocitopenia, defeito na parede vascular, leso heptica severa, uremia e aps administrao de grande quantidade de anticoagulante. TEMPO DE SANGRIA NOS ANIMAIS DOMSTICOS

o tempo de sangria nos animais domsticos varia entre 1 a 5 minutos, podendo ser observado no cavalo 5 a 15 segundos pelo mtodo de Duke.

7. TESTE DE COMPATIBILIDADE SANGfNEA

Tendo em vista a dificuldade para determinao do grupo sang(neo em Medicina Veterinria, o teste de compatibilidade sang(nea auxilia bastante quando h necessidade de uma transfuso sang(nea. 115

. PROVACRUZADADE COMPATIBllIDADESANG(NEAPARA
VERIFICAO DA AGlUTINAO E HEMllSE
Para obter-se a Prova Cruzada de Compatibilidade Sangnea colhe-seo sangue do doador e do receptor com anticoagulante. sendo no caso usado o citrato de sdio a 3,8% na proporo de uma parte de citrato para trs de sangue. Do sangue colhido com anticoagulante preparar as suspenses de clulas do doador e receptor. . Preparao da Suspenso de Eritrcitos

Em um tubo A e B colocar 3ml de soluo fisiolgica.No tubo A acrescentar 2 gotas do sangue (citratado) do doador e no tubo B 2 gotas do sangue do receptor. . Obteno do Plasma Em 2 tubos identificados D e R colocar 2ml de sangue (com anticoagulante), do doador e receptor, respectivamente. Centrifugar a 3.500 rpm durante 5 minutos, utilizar o sobrenadante que constitui o plasma.
Quadro 3.18 Prova cruzada de compatibilidade sangrnea Tubos Suspenso de clulas do doador Suspenso de clulas do receptor Plasma do doador
Plasma do receptor

O,1m! O,1ml O,1ml O,1ml

.o,1ml O,1ml O,1m! O,1m!

Deixar os tubos na temperatura ambiente por 30 minutos e centrifugar a 1.000 rpm durante um minuto. Pesquisar a presena de hemlise no sobrenadante, em seguida homogeneizar e pesquisar a aglutinao macroscpica e microscopicamente. Havendo hemlise ou aglutinao nos tubos 1 ou 2 e os tubos 3 e 4 permanecendo inalterados, a incompatibilidade est presente, deve-se recorrer a outro doador. INTERPRETAO o mtodo pouco exato, no sendo muito seguro os resultados negativos. No cavalo necessrio a pesquisa de hemlise e aglutinao em virtude desta espcie apresentar certos iso-anticorpos que atuam como hemolisinas. Nos bovi116

nos e ovinos deve-se realizar a pesquisa de hemlise apenas, pois os eritrcitos destas espcies apresentam muito pouca tendncia aglutinao; no co a presena de uma pequena hemlise no espedfica.

8. LEUCEMIAS
Representam as enfermidades neoplsias dos leuccitos, e podem acometer um ou mais tipos de clulas dos tecidos hematopoticos. O seu diagnstico pode ser feito atravs do exame de sangue circulante, exame de medula atravs puno ou ainda atravs bipsia de gnglio. As leucemias de acordo com seu grau de malignidade e o nmero de leuccitos por milmetro cbico de sangue podem ser classificadas em: leucmicas, subleucmicas e aleucmicas.

Tipo leucmico

Produz leucocitose intensa com elevado nmero de clulas deformadas e imaturas no sangue circulante.

. Tipo subleucmico Os leuccitos apresentam-se em nmero normal ou ligeiramente aumentados enquanto que pequena a quantidade de clulas deformadas no sangue circulante. . Tipo aleucmico
Tambm neste tipo os leuccitos apresentam-se dentro dos valores normais e poucas so as clulas anormais no san!ijuecirculante. Nas leucemias aleucmicas e em algumas subleucmicas, torna-se necessrio o exame da medula e bipsia para a confirmao do diagnstico. Baseando-se no curso do processo leucmico, as leucemias podem ser agrupadas em agudas e crnicas. As agudas geralmente so subleucmicas e as crnicas podem ser do tipo leucmico, subleucmico ou aleucmico. De acordo com o tipo de clula predominante no sangue circulante, na medula ssea ou no tecido linfide, as leucemias podem ser denominadas em granulodticas (tambm chamadas mielgenas); linfocticas (Iinfossarcoma, linfoma maligno ou leucemia) e monocticas. Existem vrios outros termos representativos das leucemias, dentre eles merecem citao:

. Leucose
Neoplasias dos leuccitos de um modo geral. Em determinados pases aplicado apenas para as leucemiasdas aves.
117

. Leucemia
"Sangue branco", termo usado primeiramente por Wirchow em 1847, representa as leucoses nas quais os leuccitos neoplsicos so observados no sangue circulante.

. Linfossarcoma
Neoplasia de origem linfgena, sendo este termo aplicado somente para as neoplasias com um ponto central de origem (unicntrica, as quais se estendem por invaso e metstase).

. Linfoma maligno
Assim so denominadas as leucemias de origem linfgena, quando se observa engrossamento de muitos ou todos os linfonodos, representa as leucemias que possuem muitos pontos de origem (multicntrica).

. Doenade Hodgkin
Rara nos animais domsticos, representada pelos processos granulomatosos dos gnglios linfticos com hiperplasia linfoctica no incio do processo, seguida de perda prog,ressiva da estrutura normal dos linfcitos. Este tipo tem como sinal patognomnico a presena de clulas Reed-Sternberg as quais so gigantes, mono ou multinucleadas. LEUCEMIA NOS ANIMAIS DOMSTICOS

- Leucemia nos bovinos

Acomete animais em todas as idades, todavia sua maior freqncia d-se em animais acima de 5 anos de idade. Nesta espcie animal a maior incidncia de neoplasia dos tecidos hematopoticos do tipo linfoctico, raramente observa-se o tipo granuloctico. A leucemia linfoctica em que ocorre associao de numerosos focos neoplsicos distribudos em todo corpo com a infiltrao de clulas malignas em todos os rgos, geralmente denominada linfossarcoma ou linfocitoma, em virtude deste termo expressar melhor a natureza generalizada do processo. Nos bovinos a leucemia comumente afebril e no leucograma pode-se observar a contagem dos leuccitos em valor normal, diminudos ou intensamente aumentados. No tipo linfoctico a linfocitose uma constante com muitas formas atpicas ou imaturas; a anemia no um achado obrigatrio. No tipo granuloctico pode-se observar granulcitos imaturos no sangue circulante e na medula ssea ' com a presena de marcada anemia. Existem chaves de classificao baseadas no nmero de leuccitos e linfcitos ou apenas no nmero de linfcitos para auxiliar o diagnstico do linfossarcoma nos bovinos. 118

- L eucem ia nos Ovinos e Caprinos

So raros os casos de neoplasias das clulas sang neas em ovinos e caprinos, existem poucos relatos de leucemia e linfoma maligno nestas espcies. Nos estudos feitos de leucemia em caprinos observou-se discreta leucocitose, linfocitose, com uma quantidade razovel de linfcitos atpicos, contudo no foi observada a presena de anemia. - Leucemia nos Eqinos No achado freqente, a maioria dos casos relatados foi do tipo linfoctico, onde a anemia no constituiu uma observao constante. O quadro leucocitrio variou no decorrer da doena.
Quadro 3.19 Chave de Goetze et alii, 1956 para classificar os bovinos com linfossarcoma segundo a idade, nmero total de leuccitos e a percentagem de linfcitos
L euc cito s/mm 3 sangue

Lnfctos % at 65 Negativo Negativo Suspeito 65 a 75 Negativo Suspeito Positivo 75 ou + Suspeito

At 2 anos at 12.000 12.000 a 18.000 18.000 ou +

3 ou mais anos at 10.000 10.000 a 18.000 18.000 ou +

Quadro 3.20 Chave de Bendixe., para classificao de bovinos com linfossarcoma, segundo a idade e nmero absoluto de linfcitos Idade/Anos animal Oa 1 1a2 2a3 3a4 4 Normal (!;nfctos/mm 3) 10.000 9.000 7.500 6.500 5.000 Suspeito 10.000 9.000 7.500 6.500 5.000 a 12.000 G 11.000 a 9.500 a 8.500 a 7.000 Positivo 12.000 11.000 9.500 8.500 7.000

Leucemia nos Su(nos

Tambm nesta espcie rara a ocorrncia de leucemia, foram poucos os casos observados, sendo estes do tipo linfide.

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Leucemia nos Caninos

Tem-se observado os tipos linfoctico, granuloctico e monoctico, todavia o tipo monoctico raro. Os casos de leucemia linfoctica nesta espcie tm-se 119

apresentado geralmente do tipo subleucmico, podendo em alguns achados ocorrer leucocitose e anemia. No tipo granuloctico os leuccitos podem estar situados nos valores normais ou aumentados, sendo que a presena de granulcitos imaturos pode ocorrer no sangue circulante. A leucemia monoctica caracterizada por leucocitose e monocitose (com a presena de monoblastos).

- Leucemia nos Felinos

Pod~ ocorrer a leucemia linfoctica, granuloctica ou monoctica; na linfoctica pode-se observar grande variao do nmero de leuccitos, sempre com a presena de linfcitos imaturos no sangue circulante a anemia progressiva tem sido um achado freqente. Na leucemia granuloctica h sempre leucocitose e anemia, porm no tipo monoctico tem-se observado leuccitos em valores normais com monocitose e a presena de monoblastos no sangue circulante.

9. PESQUISA DE HEMATOZOARIOS
A pesquisa de hematozori'os" geralmente feita atravs de esfregaos corados onde pesquisa-se a presena dos parasitos. Dentre os inmeros parasitos sangneos merecem citao os gneros Anaplasma, Babesia, Filaria, Haemobartonella, Erlichia e Trypanosoma.

ANAPLASMA

. Anaplasma marginale
Acomete geralmente bovinos e ruminantes selvagens. Quando observados em esfregaos corados (mtodo de G iemsa ou Wright) apresentam-se em 'formas de corpsculos arredondados que medem 0,2 a 0,5J.ide dimetro, e alojam-se geralmente na periferia da hematia. Estes hematozorios podero ser confundidos com artefatos de colorao ou com corpsculos de Howell-Jolly, todavia deve-se observar que esses parasitos apresentam uniformidade em tamanho e posio. Um eritrcito pode apresentar-se parasitado por uma a sete unidades deste hematozorio (Fig. 3.17).

A ausncia do Anaplasma no esfregao no afirma que

animal no esteja

parasitado. Geralmente o clnico faz solicitao da pesquisa de hematozorios quando o animal apresenta intensa anemia; entretanto nesta fase o nmero de hematias parasitadas inferior a 10%. Tem-se demonstrado que entre o 27? e 29? dias aps a infeco ocorre o maior nmero de eritrcitos parasitados (acima de 70%) deste perodo em diante este valor vai decrescendo at quando o nmero de clulas parasitadas inferior a 10% (340 dia em diante). Enquanto isto a anemia comea a aparecer no 28? dia aps a instalao do processo chegando ao ponto mximo no 30? dia (Quadro 3.21). O diagnstico da ariaplasmose ainda pode ser determinado pelo teste de Boyton, Card teSt para Anaplasmose, ou air:tda fixao do complemento. 120