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Agentes de fermentao:
Bactrias:
As bactrias so onipresentes na natureza,
em ambientes aerbios e anaerbios contendo
gua.
Entre os gneros, as habilidades sintticas variam
desde quelas das espcies autotrficas, que
requerem apenas compostos inorgnicos para o
crescimento, quelas das espcies heterotrficas.
Igualmente h uma enorme amplitude de habilidade
degradativa. Por causa dessas capacidades diversas,
as bactrias tem sido exploradas industrialmente para
acumular produtos intermedirios e finais do
metabolismo.
So uma rica fonte de produo de enzimas.
Agentes de fermentao:
- Vrus:
Os vrus so os menores
microrganismos. Os vrus parasitos de
bactrias so denominados bacterifagos.
A cultura de vrus para testar drogas
antivirais e para a produo de
vacinas um importante empreendimento
industrial.
Agentes de fermentao:
Fungos: Os fungos so amplamente espalhados na natureza em
ambientes de umidade mais baixa do que aquela que favorece as
bactrias. O metabolismo de fungos essencialmente aerbio. Do
ponto de vista morfolgico os fungos so divididos em dois grandes
grupos: os bolores e as leveduras.
Bolores: caracterizam-se por formarem um miclio que um
conjunto de estruturas filamentosas denominadas hifas.
Leveduras: so fungos geralmente unicelulares de forma e
tamanho muito variados, indo desde elementos esfricos at clulas
elpticas, quase filamentosas.
Agentes de fermentao:
Para todos os microrganismos existem trs temperaturas
cardeais: temperatura mnima abaixo da qual no h
crescimento; temperatura mxima acima da qual no
h crescimento; temperatura tima, onde o crescimento
mximo. A temperatura tima de crescimento microbiano varia
com o tipo de microrganismo .
A faixa de crescimento mais comum situa-se entre 25 e 45 C .
Termfilas: em torno de 60 0C
Crifilas: em torno de 10
Mesfilas: entre 20 e 40 0C
Agentes de fermentao:
Fontes de microrganismos de interesse
Microrganismos que possam ter interesse industrial,
podem ser obtidos basicamente das seguintes formas:
isolamento a partir de recursos naturais;
compra em colees de cultura;
obteno de mutantes naturais;
obteno de mutantes induzidos por mtodos
convencionais;
obteno de microrganismos recombinantes por
tcnicas de engenharia gentica.
Agentes de fermentao:
Caractersticas desejveis de microrganismos
Para uma aplicao industrial, espera-se que os
microrganismos apresentem as seguintes caractersticas gerais:
elevada eficincia na converso do substrato em produto;
permitir o acmulo de produto no meio para se ter elevada
concentrao do produto no substrato;
no produzir substncias incompatveis com o produto;
apresentar constncia quanto ao comportamento fisiolgico;
no ser patognico;
no exigir condies de processo muito complexas;
no exigir substratos dispendiosos;
permitir a rpida liberao do produto para o meio.
Agentes de fermentao:
Muitas clulas vivas necessitam de oxignio para
manuteno de seu metabolismo.
Nosbioprocessos conduzidos com microrganismos
aerbios, (Bioprocessos aerbicos) o oxignio
suprido ao biorreator, via de regra, como bolhas de ar,
atravs de um compressor
Nosbioprocessos anaerbicos, os microrganismos
obtm o oxignio metablico atravs de substncias que
contm oxignio ligado molecularmente.
Agentes de fermentao:
Nos bioprocessos aerbicos, o suprimento adequado de oxignio
para atender a demanda da clula imperativo, assim como a
manuteno de condies anaerbias estritas no segundo caso. Se
essas exigncias no forem atendidas o processo ter seu potencial
limitado, podendo haver desvios no metabolismo celular ou mesmo
sua interrupo, com a conseqente morte da clula.
Fungos algas e algumas bactrias so aerbicos obrigatrios ;
Algumas bactrias so anaerbicas estritas ;
Leveduras e muitas bactrias podem desenvolver-se em ambas as
condies, so aerbicas facultativas.
Tipos de fermentao:
Processos de fermentao em meio lquido e na superfcie
So aqueles em que a biomassa situa-se na superfcie do meio lquido, em
contato direto com o ar atmosfrico, que fornece o oxignio necessrio
produo microbiana.
A diminuio da concentrao de nutrientes nas camadas superficiais faz
com que cheguem superfcie, por difuso, os nutrientes das camadas
mais profundas. Tambm, por difuso, o(s) produto(s) do metabolismo se
dispersa(m) no meio em fermentao. Portanto, a difuso ea relao entre
a rea oferecida e o volume de meio desempenham papel importante em
bioprocessos operados em superfcie.
O meio de cultivo colocado em recipientes rasos, de modo a oferecer
grande rea ao desenvolvimento do agente. Como as taxas de
transferncia de massa de nutrientes so lentas, os tempos de
fermentao so consideravelmente longos.
Os processos em superfcie so de operao difcil e soconsiderados
antieconmicos, devido ao alto custo de produo resultante da
manipulao custosa da esterilizao (incluindo ambiente), enchimento,
esvaziamento e limpeza das vrias bandejas necessrias a produo em
larga escala. Este tipo de processo limita-se, via de regra, aos fungos
filamentosos, que tendem a formar pelcula micelial na superfcie do
meio.
Tipos de fermentao:
Processos de fermentao em meio lquido submersos
So aqueles em que o microrganismo produtor se desenvolve no
interior do meio de fermentao, geralmente agitado. No caso de
fermentaes aerbias, o oxignio necessrio populao em
desenvolvimento suprido, atravs de um compressor, por
borbulhamento de ar.
A maioria das fermentaes industriais importantes realizada por
processo submerso. Pode-se citar que uma determinante reduo
no preo de muitos produtos, anteriormente obtidos por processos
em superfcie, foi a possibilidade de adapt-los aos processos
submersos.
Tipos de fermentao:
Comparados com os processos em superfcie, os processos
submersos oferecem uma srie de vantagens:
- pode-se manipular, com maior facilidade, maiores volumes de
meio;
- a massa de microrganismos responsveis pela transformao fica
totalmente submersa no meio nutriente de maneira uniforme, o que
pode ser ajustado para fornecer as condies ideais de crescimento
e produo;
- a absoro de nutrientes e excreo de metablitos so
executadas com maior eficincia, levando a menores tempos de
fermentao e,
consequentemente, melhor produtividade;
Tipos de fermentao:
Fermentao em estado slido
Processo que refere-se a cultura de microrganismos sobre ou no
interior de partculas em matriz slida, onde o contedo de
lquido ligado a ela est a um nvel de atividade de gua que,
assegure o crescimento e metabolismo das clulas e, por outro lado,
no exceda a mxima capacidade de ligao da gua com a matriz
slida.
A fermentao em estado slido, tambm denominada de
Fermentao em meio semi-slido, o mais antigo processo
fermentativo.
Tipos de fermentao:
Evoluo da fermentao semi-slida(estado slido)
2.600 a.C. Produo de po pelos egpcios
2.500 a.C. Produo de koji no Japo
Sculo XVIII Produo de vinagre de polpas
1.900 -1920 Produo de enzimas fngicas
1.920 -1940 Enzimas fngicas, c.ctrico
1.940 -1.950 Produo de penicilina
1.950 -1.960 Produo de esteris
1.960 -1980 Micotoxinas e alimentos enriquecidos
1.990 -.... Vrios outro produtos, enzimas, lcool
Tipos de fermentao:
Fermentao em estado slido remete idia de dois tipos de
materiais insolveis em gua, sobre os quais os microrganismos
iro crescer: quando o suporte slido atua ele prprio como fonte
nutrientes e e no caso em que os nutrientes so solveis em gua e
os microrganismos esto aderidos a uma matriz slida, inerte ou
no, que ir absorver o meio de cultura lquido. A maioria dos
processos utilizam o princpio em que o suporte slido atua tambm
como fonte de nutrientes.
Os Substratos tradicionalmente utilizados so produtos agrcolas
como o arroz, o trigo, a cevada, o milho e a soja, alm de
substratos no convencionais como os resduos agro-industriais e
florestais, destacando-se: o bagao de cana-de- acar, o sabugo
de milho, o farelo de trigo e a palha de arroz.
O grande interesse nesses processos decorre do fato dessas
matrias-primas no possurem custos de produo associados
diretamente, sendo uma forma de se agregar valor a resduos que
se formam em abundncia.
Tipos de fermentao:
Em linhas gerais, a operao dos bioprocessos em meios semi-
slidos, pode ser realizada sem agitao mecnica, com agitao
ocasional ou contnua em reatores dos tipos: bandeja; tambor
rotativo; esteira rolante; reator tubular horizontal; tubular
vertical; sacos plsticos.
A fermentao em meio slido apresenta as seguintes vantagens:
- Simplicidade dos meios de fermentao. O substrato slido pode
requerer somente adio de gua, embora outros nutrientes
possam ser adicionados;
- Ausncia de requerimentos de mquinas e equipamentos
sofisticados;
- Demanda reduzida de energia;
- Baixo grau de umidade, reduzindo os problemas de contaminao;
- As condies de crescimento do microrganismo agente do
bioprocesso so similares s encontradas em seu ambiente natural;
- Ausncia de formao de espuma;
Tipos de fermentao:
Fatores limitantes:
- Menor acessibilidade e disponibilidade
de substrato;
- Problemas de transferncia de massa
(oxignio e nutrientes), calor;
- Dificuldades no Controle de variveis
fsico-qumicas: pH, temperatura, oxignio;
- Dificuldades no aumento de escala.
CINTICA:
A cintica de um bioprocesso consiste na anlise da evoluo dos
valores de concentrao de um ou mais componentes do sistema
produtivo, em funo do tempo do bioprocesso. Entende-se como
componentes, o microrganismo 9biomassa), os produtos do
processo (metablitos) e os nutrientes ou substratos que compe o
meio de cultura.
X - Biomassa
S - Substrato
P - Produto P
t Tempo
Cintica
Fase de transio
Fase exponencial
Fase estacionria
Fase de morte
Cintica
Biorreatores
Denomina-se biorreatores, reatores
bioqumicos, reatores biolgicos, os
reatores qumicos nos quais ocorre
uma sriede reaes qumicas
catalisadas por biocatalisadores
que podem ser enzimas, ou clulas vivas
( microbianas, animais ou vegetais).
Biorreatores
I. Reatores em fase aquosa (bioprocesso submerso)
I.1 Clulas/enzimas livres
Reatores agitados mecanicamente
Reatores agitados pneumaticamente
Coluna de bolhas (bubble column) Reatores air-lift
Reatores de fluxo pistonado (plug-flow)
I.2 Clulas/enzimas imobilizadas em suporte
Reatores com leito fixo Reatores com leito fluidizado Outras
concepes
I.3 Clulas/enzimas confinadas entre membranas
Reatores com membranas planas
Reatores de fibra oca (hollow-fiber)
Biorreatores
II. Reatores em fase no-aquosa
(bioprocesso semi-slido)
Reatores estticos (reatores com bandeja)
Reatores com agitao (tambor rotativo)
Reatores com leito fixo
Reatores com leito fluidizado gs-slido
Processos de Fermentao
Existem infinitas formas de se conduzir um reator
biolgico, dependendo das caractersticas prprias do
microrganismo, meio de cultivo, e dos objetivos
especficos do processo que se pretende executar.
Sero abordadas as formas mais gerais entendendo tal
estratgia permitir as particularizaes que se fizerem
necessrias:
Processos de Fermentao
Descontnuo
com um inoculo por tanque
com recirculao de clulas
Semicontnuos
sem recirculao de clulas
com recirculao de clulas
Descontnuo alimentado
sem recirculao de clulas
com recirculao de clulas
Contnuo
executado em um reator (com ou sem recirculao de clulas)
executado em vrios reatores (com ou sem recirculao de clulas)
Processos de Fermentao
Descontnuo simples
O principal problema desta forma de operar bioprocessos
decorrente de fenmenos de inibio pelo substrato, produto, ou
outros metablitos.
Concentraes elevadas de substrato inibem o agente biolgico.
Este efeito est relacionado, em clulas vivas, a fenmenos
osmticos que resultam em plasmlise celular. As possveis
razes para o fenmeno so a represso na sntese de
enzimas e a desidratao dos sistemas enzimticos, devida
perda de gua da clula ou inibio6d3 o transporte de nutrientes
para o seu interior.
fato bem conhecido que a clula viva polui seu ambiente
com produtos do seu metabolismo at fazer cessar o crescimento
e, eventualmente, perder sua viabilidade, fenmeno conhecido
como inibio pelo produto.
Processos de Fermentao
Descontnuo com recirculao de clula
Uma alternativa ao processo batelada simples a recirculao de
clulas, ou seja, ao se encerrar a batelada efetua-se a
separao das clulas por centrifugao ou mesmo
sedimentao no interior do prprio biorreator, enviando apenas o
lquido fermentado para a recuperao do produto. Com isso busca
evitar o preparo de um novo inoculo para cada batelada, reduzindo
custos e reduo de tempo para a obteno de altas concentraes
de clula no reator. Esse processo tambm conhecido como
batelada repetida.
Processos de Fermentao
Contnuo
No processo contnuo procura-se estabelecer um fluxo contnuo de
lquido atravs do reator, ou reatores dispostos em srie.
A operao de um sistema contnuo, constitudo por vrios reatores
em srie, no qual
a alimentao de um dado reator da srie o
efluente do reator anterior, visa o
estabelecimento de diferentes condies nos vrios biorreatores da
srie.