UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARAN

CENTRO DE ENGENHARIAS E CINCIAS EXATAS

CURSO DE ENGENHARIA QUMICA
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL








ANLISES MICROBIOLGICAS DE ALIMENTOS












Toledo, PR
Junho, 2014


UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARAN
CENTRO DE ENGENHARIAS E CINCIAS EXATAS
CURSO DE ENGENHARIA QUMICA
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL


Bruna Lariane de Medeiros





ANLISES MICROBIOLGICAS DE ALIMENTOS

Trabalho acadmico
apresentado como mtodo de
avaliao parcial da disciplina de
Microbiologia Industrial do curso de
Engenharia Qumica da instituio
de ensino UNIOESTE - Universidade
Estadual do Oeste do Paran.
Prof.: Mnica L. Fiorese





Toledo, PR
Junho, 2014



SUMRIO
1. INTRODUO ................................................................................ 4
2. PRINCIPAIS ANLISES MICROBIOLGICAS .............................. 5
3. MTODOS UTILIZADOS PARA ANLISES MICROBIOLGICAS 6
3.1. Mtodos Tradicionais ............................................................... 6
3.2. Mtodos Rpidos ................................................................... 10
4. CONCLUSO ............................................................................... 18
5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ............................................. 19

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1. INTRODUO
Os microorganismos esto por toda parte. No nosso corpo, na pele, no
ar, nos utenslios, nos equipamentos, e at mesmo nos alimentos que
ingerimos, em pequenas quantidades. O problema que esses
microorganismos tm a capacidade de crescer e se multiplicar muito
rapidamente se as condies forem favorveis. Por isso, a forma como
manipulamos os alimentos essencial para lhes conferir segurana e
qualidade.
As principais causas que originam um alimento imprprio para consumo
dentro da indstria de alimentos so a falta de higiene pessoal dos
manipuladores, contaminao dos utenslios e equipamentos utilizados no
processo de fabricao ou nvel alto de contaminao ambiente onde o
alimento produzido, manipulado e envasado (ALMEIDA, s.d.).
A anlise microbiolgica de alimentos vem sendo utilizada h muito
tempo com o uma forma de controle e monitoramento da matria-prima e do
produto industrializado. Esse controle de extrema importncia, j que permite
assegurar a qualidade do alimento, para que este no oferea riscos sade
do consumidor, e tenha as suas caractersticas fsico-qumicas e
organolpticas garantidas no consumo (NERO et al., 2000).
Este trabalho tem por objetivo apresentar as principais anlises
microbiolgicas que so realizadas em indstrias de alimentos, bem como os
mtodos utilizados para as anlises e sua classificao, em mtodos
tradicionais e mtodos rpidos.

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2. PRINCIPAIS ANLISES MICROBIOLGICAS
Entre os vrios parmetros que indicam a qualidade e a inocuidade de
alimentos, os mais importantes so aqueles que definem as suas
caractersticas microbiolgicas.
Sendo assim, as anlises microbiolgicas so necessrias para a
obteno de informaes sobre as condies de higiene durante sua produo,
processamento, armazenamento e distribuio para o consumo, sobre sua vida
de prateleira e sobre o risco que representa sade (FRANCO, 2010).
Para que os resultados da anlise microbiolgica de um alimento reflitam
de forma fiel as condies microbiolgicas do alimento analisado, vrios
requisitos devem ser atendidos, como o uso de mtodos adequados para a
anlise. As principais anlises microbiolgicas que so realizadas em alimentos
so a de Bacillus cereus, Listeria sp. e monocytogenes, Clostridium sulfito
redutores, Clostridium perfringens, Coliformes totais, Coliformes
termotolerantes, Bolores e leveduras, Contagem padro (Mesfilos),
Staphylococcus aureus, Salmonella sp., Enterobactrias, Escherichia coli, entre
outros (LABORATRIO A3Q, s.d.).
Muitos mtodos e variaes de diferentes mtodos que podem ser
utilizados para deteco quantitativa e qualitativa de microrganismos em
alimentos, esto relatados na literatura. Entretanto, desejvel utilizar mtodos
que tenham sido aprovados por rgos reguladores. Estes podem ser mtodos
padres ou recomendados. Atualmente esses mtodos so comumente
divididos em mtodos tradicionais e mtodos rpidos (SILVA, 2002).

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3. MTODOS UTILIZADOS PARA ANLISES MICROBIOLGICAS
3.1. Mtodos Tradicionais
Foram desenvolvidos h mais de um sculo e, desde ento, vm sendo
utilizados como mtodos de rotina nos Laboratrios de Microbiologia de
Alimentos.
Mtodos tradicionais so trabalhosos, demorados, exigem mo de obra
intensiva e treinada, e requerem preparo de material, gerando resduo. Alm
disso, esto sujeitos a falhas humanas, devido s etapas de preparo do
material, execuo da anlise, leitura e interpretao dos resultados. H vrias
razes para isto, dentre elas, que o micro-organismo pode estar presente em
baixas concentraes em relao flora competidora existente e o alimento ser
uma matriz complexa causando interferncia. Sendo assim, os mtodos
tradicionais utilizam as tcnicas de pr-enriquecimento, para elevar a
populao vivel, enriquecimento seletivo, para selecionar o micro-organismo
alvo e a semeadura, para obter colnias isoladas e detectar o alvo
(TASSINARI, 2013).
O mtodo convencional de contagem de microrganismos consiste
basicamente no plaqueamento de alquotas do produto homogeneizado e de
suas diluies em meios de cultura slidos, adequadamente selecionados em
funo do microrganismo a ser enumerado (GOLDBECK, 2008).
Vejamos alguns mtodos tradicionais para anlises microbiolgicas:
3.1.1. Tcnicas bsicas de contagem de microrganismos em placa
O mtodo de contagem de microrganismos em placas um mtodo
geral, que pode ser utilizado para contagem de grandes grupos microbianos,
como aerbios mesfilos, aerbios psicrotrficos, termfilos, bolores e
leveduras, variando-se o tipo de meio, a temperatura e o tempo de incubao.
Por este mtodo, amostras de alimentos so homogeneizadas, diludas
em srie, em diluente apropriado, plaqueadas com ou sobre um meio de gar
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apropriado e incubadas, aps o que todas as colnias visveis so contadas, ou
seja, o procedimento se baseia na premissa de que cada clula microbiana
presente em uma amostra ir formar uma colnia separada e visvel, quando
fixada com meio que lhe permita crescer.
Como as clulas microbianas podem ocorrer em agrupamentos (pares,
ttrades, cachos, cadeias entre outros), no possvel estabelecer uma
relao direta entre o nmero de colnias e o numero de clulas. A relao
correta feita entre o nmero de unidades formadoras de colnias (UFC), que
podem ser tanto clulas individuais como agrupamentos caractersticos de
certos microrganismos, por mililitro ou grama de amostra.
Essa metodologia certamente a mais utilizada nos laboratrios de
anlise de alimentos, pois diferentes grupos de microrganismos podem ser
enumerados de acordo com o meio de cultura e/ou as condies de incubao
(tempo, temperatura e atmosfera) empregadas (SILVA, 2002).
O plaqueamento das amostras pode ser por:
o Plaqueamento em profundidade (pour plate)
o Plaqueamento em superfcie (spread plate)
o Plaqueamento em gotas (drop plate)
o Filtrao em membrana

3.1.2. Contagem de microrganismos pelo Nmero Mais Provvel
A tcnica do Nmero Mais Provvel, tambm chamada tcnica dos
tubos mltiplos, outra maneira bastante utilizada pelos laboratrios de
microbiologia de alimentos para estimar a contagem de alguns tipos de
microrganismos, como coliformes totais, coliformes fecais, E. coli e
Staphylococcus aureus
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O NMP estimado de respostas onde resultados so relatados como
positivo ou negativo em uma ou mais diluies decimais da amostra. Por
exemplo, cinco tubos de meio para cada uma de trs diluies so inoculados
e incubados, e produo de gs observada para cada tubo. Diferentemente
da contagem de aerbios em placas, o NMP no fornece uma medida direta de
contagem bacteriana.
O nmero de microrganismos na amostra original determinado pelo
uso de tabelas de NMP. O mtodo estatstico na natureza e os resultados de
NMP so geralmente maiores que os resultados da contagem padro em
placas.
Por esta tcnica pode-se obter informaes sobre a populao
presuntiva de coliformes (teste presuntivo), sobre a populao real de
coliformes (teste confirmativo) e sobre a populao de coliformes de origem
fecal (SILVA, 2002).
3.1.3. Contagem total de microrganismos mesfilos aerbios
Esta contagem detecta, em um alimento, o nmero de bactrias
aerbias ou facultativas e mesfilas (35-37C), presentes tanto sob a forma
vegetativa quanto esporulada.
O nmero de microrganismos aerbios e mesfilos (contagem em placa)
encontrado em um alimento tem sido um dos indicadores microbiolgicos da
qualidade dos alimentos mais comumente utilizados, indicando se a limpeza, a
desinfeco e o controle de temperatura durante os processos de tratamento
industrial, a desinfeco e o controle de temperatura durante os processos de
tratamento industrial, transporte e armazenamento foram realizados de forma
adequada. Esta determinao permite tambm obter informao sobre a
alterao incipiente dos alimentos, sua provvel vida til, a falta de controle no
descongelamento dos alimentos ou desvios na temperatura de refrigerao
estabelecida (SILVA, 2002).

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3.1.4. Coliformes totais, coliformes fecais e Escherichia coli
Muitos mtodos tm sido utilizados para detectar coliformes. A
fermentao da lactose em um meio o primeiro requerimento para um
microrganismo ser considerado um coliforme. O procedimento sugerido pela
Food and Drug Administration consiste do uso do mtodo NMP pela inoculao
de tubos com caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), sendo a tcnica mais utilizada
para contagem de bactrias do grupo coliforme. A avaliao dos resultados d-
se via utilizao de uma tabela de NMP com intervalo de confiana ao nvel de
95% de probabilidade, para as diversas combinaes de tubos positivos nas
sries de trs ou cinco tubos.
o Teste presuntivo para coliformes totais: O meio de cultura
utilizado permite um enriquecimento seletivo dos coliformes,
recuperando clulas injuriadas. Crescimentos com produo de
gs no tudo de Durhan evidenciam um teste positivo.
o Teste confirmativo para coliformes totais: O meio de cultura
utilizado apresenta sais biliares que inibem o crescimento de
microrganismos Gram positivos e a lactose utilizada como
substrato para produo de gs pelos coliformes. Crescimentos
com produo de gs no tudo de Durhan evidenciam um teste
positivo.
o Teste para coliformes fecais: O meio de cultura utilizado seletivo
para microrganismos Gram negativos em funo da presena de
sias biliares. A temperatura de incubao (44,5-45,5C) permite
evidenciar a presena de coliformes fecais, pois eles apresentam
a capacidade de fermentao da lactose com produo de gs a
temperaturas mais elevadas. A produo de gs ocorre nos tubos
de fermentao.
Alquotas de tubos que apresentam resultados positivos para
coliformes fecais e/ou tubos positivos para coliformes totais
devem ser semeadas com ala de platina atravs de estrias na
superfcie do meio de cultura Eosina Azul de Metileno. Colnias
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caractersticas de E. coli (nucleadas, com centro preto e brilho
verde metlico) devem ser isoladas e submetidas s provas
bioqumicas do IMViC (Indol, Vermelho de Metila, Voges-
Proskauer e Citrato) (SILVA, 2002).

3.1.5. Contagem de bolores e leveduras
A presena de bolores e leveduras viveis e em ndice elevado nos
alimentos pode fornecer vrias informaes, tais como, condies higinicas
deficientes de equipamentos, multiplicao do produto em decorrncia de
falhas no processamento e/ou estocagem e matria prima com contaminao
excessiva.
A contagem de bolores e leveduras aplicvel principalmente, na
anlise de alimentos cidos, com pH menor que 4,5, alimentos parcialmente
desidratados e farinhas (SILVA, 2002).
3.2. Mtodos Rpidos
Os mtodos rpidos surgiram a partir da dcada de 70 em conseqncia
da necessidade de se reduzir o tempo de anlise nos laboratrios de
microbiologia, aumentando-se a produtividade do trabalho realizado. Tais
mtodos apresentam uma srie de vantagens como reduo do tempo de
anlise, significando menor reteno do produto na indstria, diminuio dos
custos, simplificao nas tarefas de realizao da anlise, facilidade de leitura
dos resultados e especificidade, alm de maior sensibilidade de alguns
mtodos quando comparados com os mtodos convencionais.
Parmetros como preciso, custo, tempo de anlise, aceitabilidade pelos
rgos oficiais, simplicidade de operao, assistncia tcnica oferecida pelos
fabricantes e disponibilidade de espao no laboratrio, devem ser considerados
na escolha e implantao dos mtodos rpidos (SILVA, 2002).
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So utilizados, geralmente, como tcnicas de seleo e a fim de garantir
a segurana dos consumidores. Sob viso geral, a maioria desses mtodos
consiste em um dispositivo descartvel que contm 15 a 30 meios ou carcaas,
projetados especificamente para identificar um grupo ou uma espcie
bacteriana. Os testes so similares no formato e no desempenho e possuem
exatido de 90 99% quando comparados a mtodos convencionais
(GOLDBECK, 2008).
Os mtodos rpidos podem ser divididos em dois grupos: mtodos para
avaliar a qualidade e mtodos para avaliar a inocuidade. Os mtodos que
avaliam a qualidade do alimento esto mais relacionados aos microrganismos
deteriorantes, aqueles no patognicos, j os mtodos que avaliam a
inocuidade, quantificam/identificam microrganismos patognicos.
3.2.1. Mtodos para avaliar a qualidade
Tcnica de membrana filtrante
Utilizada h bastante tempo para enumerao de coliformes totais,
fecais e Escherichia coli em gua, porm, seu uso em alimentos mais
recente. A mistura alimento-diluente filtrada atravs de membranas filtrantes
de acetato de celulose ou de nitrocelulose que tem porosidade suficiente
(0,45m) para reteno dos microrganismos presentes nessa mistura. Em
seguida as membranas so transferidas para a superfcie de placas contendo
gar ou cartes absorventes saturados com meio de cultura. Aps o tempo de
incubao adequado para cada microrganismo, faz-se a enumerao das
colnias que surgiram na superfcie das membranas. A contagem pode ser
facilitada pelo emprego de membranas quadriculadas e pelo uso de contadores
automticos (GOLDBECK, 2008).
A tcnica das membranas filtrantes apresenta as seguintes vantagens:
o Remove os componentes do alimento que podem interferir no
crescimento microbiano (slidos em suspenso ou agentes
antimicrobianos);
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o Microrganismos presentes em pequeno nmero, por vezes no
detectveis em outras tcnicas, podem ser concentrados pela
filtrao de volume maior da amostra;
o Permite a contagem de 1 at 1,6x10
-3
UFC por membrana, o que
elimina a necessidade de diluio;
o As colnias so coradas para facilitar a visualizao.

Tcnica de epifluorescncia direta
Tcnica rpida de contagem de microrganismos que no depende de
seu cultivo e consequente formao de colnias. Os microrganismos viveis e
no viveis so enumerados por microscopia, sendo uma das tcnicas que
oferece resultados mais rapidamente. A amostra devidamente homogeneizada
tratada com enzimas e tensoativos, se necessrio, filtrada atravs de uma
membrana de policarbonato, que retm os microrganismos. Essa membrana
ento corada com fluorocromo nucleoflico (alaranjado de acridina) e observada
em um microscpio de fluorescncia. O corante permite a diferenciao das
clulas viveis, pois o DNA e RNA corados apresentam fluorescncia de
colorao diferente, em funo da fase de crescimento microbiano. As clulas
viveis apresentam fluorescncia laranja-avermelhado, enquanto clulas
mortas tm fluorescncia verde. A epifluorescncia direta tem boa
sensibilidade, resultante da concentrao das clulas na superfcie da
membrana filtrante. Tem sido bastante usada em leite (GOLDBECK, 2008).
Essa tcnica, porm, apresenta algumas desvantagens:
o Tcnica muito cansativa;
o Injria de bactrias devido ao calor pode alterar a fluorescncia;
o O custo elevado dos equipamentos torna seu uso limitado a
grandes laboratrios.



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Tcnica fluorognica
Os testes baseados na adio de MUG (4-metil-umbeliferil--D-
glicuronideo) a um caldo de cultura para deteco de Escherichia coli., so
exemplos desta tcnica. A enzima -glicuronidase produzida pela grande
maioria das cepas desse microrganismo transforma o MUG em umbeliferona,
fluorescente quando observado sob luz ultravioleta de onda longa. A
observao do nmero de tubos turvos, com gs e fluorescentes aps 24 ou
48h, permite o clculo do nmero mais provvel de E. coli por grama (ou mL)
do produto (GOLDBECK, 2008).
Este mtodo oferece como vantagens:
o Rapidez e facilidade de usar;
o Identificao direta e enumerao de Escherichia coli ou
enterococos em 36 horas (em comparao com 3 ou 4 dias
usando mtodos tradicionais);
o Dispensa a preparao de meio de cultura;
o Emprega microplacas estreis e prontas para uso;
o Padronizao do preparo, incubao e tcnica de leitura para E.
coli e Enterococcus;
o Deteco da atividade de uma enzima especfica de cada
bactria por microplaca;
o Resultados confiveis;
o Economia de tempo e material.

Sistemas prontos para uso
Existem diferentes sistemas disponveis comercialmente, com princpios
distintos, nos quais os meios de cultura j vm prontos para uso, muitas vezes
j na prpria placa de petri. Entre esses, destacam-se as Placas de Petrifilm-
3M, Placas de Simplate e diversos gares adicionados de substratos
cromognicos ou fluorognicos.
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As placas Petrifilm
TM
so produzidas e comercializadas pela 3M, so
filmes de papel quadriculado revestido com polietileno, recobertos de nutrientes
desidratados e gis hidrossolveis a frio. Cada placa tem ainda um filme
superior de polipropileno, que na face voltada para o filme inferior revestido
por gis hidrossolveis a frio e um corante indicador (cloreto de trifeniltetrazolio
TTC), com exceo daquelas usadas para contagem de fungos.
As placas devem ser armazenadas em temperaturas inferiores a 8C,
antes do uso necessitam estar em temperaturas ambientes. A exposio das
mesmas a temperaturas superiores a 25C e/ou umidade superior a 50%
podem afetar seu desempenho.
As placas Petrifilm so prontas para uso, isto , basta erguer o filme
superior e inocular 1mL do produto a ser analisado, voltar o filme para a
posio inicial e aplicar um difusor plstico a fim de distribuir uniformemente o
inoculo pela placa, atravs de leve presso manual. Os agentes gelificantes
so solveis em gua e a frio. A gua de diluio contida na amostra, em
contato com os componentes da placa provoca a hidratao dos nutrientes e a
geleificao da mistura.
Aps a geleificao (1 min) as placas so incubadas na temperatura e
tempo adequados, fazendo-se em seguida a enumerao de colnias. As
colnias apresentam-se vermelhas devido ao indicador que quando reduzido
pelo microrganismo passa de incolor para vermelho.
A tecnologia Petrifilm pode ser usada para a enumerao de: bactrias
aerbias totais, coliformes totais e fecais, E. coli, enterobactrias, leveduras e
bolores e ainda bactrias lticas.
Os resultados podem ser obtidos em 24 horas sendo, em alguns casos,
necessrio incubar por 48 horas. Leveduras e bolores podem ser enumerados,
sendo a incubao pelo perodo de 3-5 dias a 25C (GOLDBECK, 2008).
Entre as vantagens desse sistema, tem-se:
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o Ser um sistema pronto para uso;
o Execuo fcil e rpida, que dispensa a necessidade de preparo
de meios de cultura, do uso de placas de Petri e de equipamentos
laboratoriais especiais;
o Custo baixo;
o Obteno rpida dos resultados.

Bioluminescncia
Esta tcnica est baseada no princpio de que a quantidade de
Adenosina Trifosfato (ATP) presente em um sistema est relacionada ao
numero de clulas metabolicamente ativas, inclusive microrganismos. Uma das
formas mais simples de se medir a quantidade de ATP atravs do sistema
luciferina-luciferase, inicialmente obtido da cauda de vagalumes ou extrado de
peixes e, mais recentemente, obtido por manipulao gentica de
microrganismos. ATP reage com a enzima luciferase, na presena de luciferina
e ons Mg
++
, formando um complexo que, em contato com o oxignio, sofre
uma descarboxilao, com emisso simultnea de luz.
A luz emitida pode ser medida em luminmetro, um fluormetro ou em
um espectrofotmetro de cintilao lquida, podendo ser expressa atravs da
seguinte reao:
Mg+
2
E + LH
2
+ ATP E - LH
2
- AMP + PP
E - LH
2
- AMP + O
2
oxiluciferina + CO
2
+ AMP + luz
E = enzima luciferase, LH
2
= luciferina, E - LH
2
- AMP = complexo
luciferase-luciferina-AMP.
Equao 1. Reaes que ocorrem durante o ensaio de
bioluminescncia.
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Uma das grandes aplicaes dessa tcnica o monitoramento da
eficincia de procedimentos de limpeza e higienizao em plantas
processadoras de alimentos.
Esta tcnica bastante conveniente no monitoramento de programas de
APPCC (anlise de perigos e pontos crticos de controle) (GOLDBECK, 2008).
Apresenta como vantagens:
o Fcil leitura, com valores mximos e mnimos;
o Resultados em minutos;
o Sistema porttil, fcil transporte;
o Fcil utilizao, qualquer pessoa pode usar;
o Capacidade de armazenamento de dados (memria);
o No necessita adio de solues;
o Medio exata da quantidade de ATP.

Impedncia/Condutncia
So baseadas na propriedade que os microrganismos tm de alterar a
transmisso da corrente eltrica atravs de um meio de cultura. Essas
alteraes ocorrem como consequncia da mudana da composio qumica
desse meio devido atividade metablica dos microrganismos presentes.
Durante a multiplicao microbiana, molculas grandes (protenas, lipdeos,
carboidratos) so transformadas em molculas menores (aminocidos, cidos
graxos, cidos orgnicos), quimicamente mais ativas; o acmulo desses
metablitos finais resulta em alteraes mensurveis na condutncia e
impedncia eltrica do meio.
So exemplos de equipamentos o Bactometer (bioMurieux), RABIT
(Don Whitley Scientific) e o Malthus 2000 (Malthus Instrumments)
(GOLDBECK, 2008).

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Placas SIMPLATE
TM

Tcnica alternativa para a enumerao de bactrias totais, coliformes,
Escherichia coli, bolores e leveduras em alimentos. As placas so plsticas e
apresentam 84 ou 198 cmaras, s quais se adicionam alquotas da amostra
em anlise e o meio de cultura Simplate. As placas so incubadas a 35C por
24 horas. A contagem de bolores e leveduras e bactrias mesfilas so
realizadas enumerando-se as cmaras que apresentam fluorescncia sob luz
UV. Colorao prpura indica presena de coliformes totais e fluorescncia sob
luz UV presena de Escherichia coli. O nmero de microrganismos
determinado atravs de uma tabela, expressando-se o NMP.g
-1
ou mL
-1
de
alimento analisado (GOLDBECK, 2008).
3.2.2. Mtodos para avaliar a inocuidade
Mtodos Bioqumicos
So baseados na avaliao da capacidade dos microrganismos de
utilizarem determinados substratos ou de produzirem determinados
metablitos. Existem no mercado, diversos kits, na maioria miniaturizados,
onde os testes so executados com pequenos volumes de meio de cultura, os
quais se encontram na forma desidratada ou liofilizada, e so reidratados pela
adio de pequeno volume da amostra a ser testada. Aps a incubao faz-se
a leitura dos resultados, normalmente atravs de uma combinao de nmeros
obtida de acordo com o resultado de cada um dos testes que faz parte do
sistema. Cada combinao de nmeros corresponde a um microrganismo
diferente (GOLDBECK, 2008).
Mtodos Imunolgicos
Esses mtodos apresentam grande sensibilidade e elevada
especificidade e, em funo disso, vm sendo empregados cada vez mais em
microbiologia de alimentos. So baseados em reaes especficas entre
antgenos e anticorpos, os quais podem ser poli ou monoclonais (GOLDBECK,
2008).
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4. CONCLUSO
A partir do estudo realizado, observou-se que o controle e segurana da
qualidade dos alimentos tem sido um dos grandes desafios colocados
indstria alimentar. Logo, a anlise microbiolgica uma ferramenta que surgiu
com o intuito de controlar e monitorar a matria-prima e o produto
industrializado. Para realizar esta anlise, dispomos de vrios mtodos, como
os mtodos tradicionais e mtodos rpidos que surgiram devido necessidade
de rapidez dos resultados.
Os mtodos devem ser escolhidos adequadamente para que os
resultados da anlise microbiolgica de um alimento reflitam de forma fiel as
condies microbiolgicas do alimento analisado.

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5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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http://foodsafetyblog.3m.com.br/?p=248>. Acesso em: 22 de jun. 2014.
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NERO, L. A.; BELOTI, V.; BARROS, M. A. F. Mtodos rpidos e
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