UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO

FACULDADE DE ARQUITETURA, ENGENHARIA E

TECNOLOGIA
DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL
ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL







RELATRIO DA AULA PRTICA N 02:
Colorao GRAM





Disciplina: Biologia Aplicada
Docente: Joo Batista Lima
Discente: Joo Manoel Mundel de Souza






Cuiab, MT
2011
1. INTRODUO

Nos primrdios da Bacteriologia as coloraes comumente usadas
baseavam-se apenas no fato de que a maior parte das bactrias se corava
pelas cores da anilina. Assim que uma soluo de Fucsina bsica sobre uma
lmina com esfregao, durante 2 ou 3 minutos, era o mtodo de colorao
corrente. As bactrias, no primeiro caso, coravam-se em azul e no segundo,
em vermelho.
Christian Gram (1884) introduziu novo mtodo de colorao diferencial e os
seus trabalhos resultaram, sem dvida, em considervel avano na
Bacteriologia.
O seu mtodo consiste na colorao das bactrias pela Violeta de Genciana
ou cristal violeta (corantes da anilina), na ao do Lugol como mordente ou
fixador de colorao, no uso de lcool como elemento de descolorao
(diferenciador) e na aplicao da Fucsina como elemento de contra-colorao
ou corante de fundo.
O mtodo de Gram se fundamenta no fato de que quando certas bactrias
so coradas pela violeta de genciana e depois tratadas pelo Iodo (soluo iodo-
iodetada ou Lugol), forma-se um composto de colorao escura entre o iodo e
o corante (Iodopararosanilina), o qual fortemente retido pelas bactrias.
So Bactrias Gram Positivas as que tomam o Gram, ou seja, as que coram
em roxo pela violeta de genciana e no perdem essa colorao quando
tratadas subseqentemente pelo lcool.
So Bactrias Gram Negativas as que no tomam o Gram, ou seja, as que
perdem a colorao inicial da Violeta de Genciana e do Lugol quando tratadas
pelo lcool. Adquirem a colorao vermelha da Fucsina ou corante de fundo.
REGRA GERAL:
- Os COCOS, geralmente so Gram Positivos, com exceo ao Gnero
Neisseria
- Os BACILOS, geralmente so Gram Negativos, com exceo aos Gneros
Corynebacterium (Bacilo Difrrico), Bacillus e Clostridium.

2. OBJETIVOS

- Execuo da Tcnica de Gram;
- Morfologia Bacteriana.
3. MATERIAIS UTILIZADOS

- Iorgute
- Bico de Bunsen;
- Lminas para Microscopia,
- Suportes para colorao;
- Violeta de Genciana
- Lugol
- lcool/Cetona
- Microscpios.

4. PROCEDIMENTO

- Inicialmente, fazer assepsia da lmina;
- A seguir, proceder a feitura do esfregao bacteriano, conforme
demonstrao.

Colorao
Aps a feitura do esfregao, fazer a flambagem do mesmo na chama do bico
de bunsen e aplicar os elementos da Bateria de Gram;
1.Violeta de Genciana deixar agir por 1 minuto; escorrer o excesso.
2. Lugol deixar agir por 1 minuto; escorrer o excesso.
3. lcool/cetona com a lmina inclinada colocar o lcool/cetona at cessar o
desprendimento da colorao roxa. Aps isso, lavar a lmina em gua
corrente;
4. Fucsina (ou Safranina) deixar agir por 30 segundos ou mais;
5. Lavar a lmina em gua corrente, secar e fazer a observao microscpica
em objetiva de imerso.



5. RESULTADOS

Atravs da lente do microscpio, utilizando-se a tcnica de colorao de
GRAM, foi possvel observar as bactrias presentes no iogurte, bactrias do
gnero Streptococcus, que so GRAM positivas, ou seja, que tomaram a
colorao de GRAM, ficando roxas quando observadas na objetiva de imerso,
conforme a Figura 1.
Em outra lmina, que o docente deixou preparado, proveniente de gua
de esgoto, havia bacilos gram negativos, que se tornam vermelhos/rosas com a
tcnica de GRAM, como mostra a Figura 2.


Figura 1 Bactrias Gram-Positivas do gnero Streptococcus

Figura 2 Bacilos Gram-Negativos

6. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

http://pt.wikipedia.org/wiki/Colorao_de_Gram
acessado em 23/05/2011