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DNA: MECANISMOS DE REPARO

Apesar de mutaes genticas serem de extrema importncia para a evoluo de uma


espcie, a sobrevivncia do indivduo depende da estabilidade do seu genoma. A estabilidade
resulta no s de um acurado mecanismo de replicao, mas tambm de mecanismos que
reparem os danos que ocorrem continuadamente no DNA.
Entende-se por reparo a capacidade da maquinaria celular de corrigir os erros causados
por mutaes. Muitos danos sofridos pelo DNA podem ser reparados porque a informao
gentica preservada em ambas as fitas da dupla-hlice, de tal forma que a informao perdida
em uma fita pode ser recuperada a partir da fita complementar.
Os mecanismos existentes e conhecidos de reparao do DNA lesado so provavelmente
universais e uma clula pode ter vrios sistemas capazes de atuar ao mesmo tempo no DNA
lesado. Como os sistemas de reparao so mais bem compreendidos e estudados na E. coli,
muitos mecanismos discutidos faro referncia a esta bactria.
REPARO POR FOTORREATIVAO ENZIMTICA
Um dos mecanismos de reparo melhor estudados a remoo dos dmeros de pirimidina,
formados pela exposio do DNA luz ultravioleta. Este dmero no se encaixa bem na estrutura
de dupla-hlice e, assim, a replicao e a expresso gnica so bloqueadas at que a leso seja
removida.
Esse tipo de leso pode ser reparado de diferentes formas. A forma mais direta envolve
enzimas que simplesmente revertem modificao qumica que originou o dano. Dmeros de
pirimidina so o alvo universal da enzima fotoliase, que se liga ao dmero e catalisa uma
segunda reao fotoqumica, desfazendo o anel formado pela luz UV e refazendo as bases
pirimdicas individuais. Esse processo chamado fotorreativao e envolve as seguintes etapas:
Inicialmente, a enzima reconhece e liga-se ao dmero (mesmo na ausncia de luz
visvel);
Depois a absoro de luz fornece energia para converter o dmero em monmero de
pirimidina;
Enzima dissocia-se do DNA.
A reao depende do gene que codifica a fotoliase e ocorre especificamente em
procariotos.
REPARO DE BASES ALQUILADAS
A base nitrogenada primariamente afetada pelos agentes alquilantes a guanina. Na E.
coli, esta leso removida pela enzima O6-metilguaninametiltransferase, que reconhece a
alterao no DNA e remove o grupamento metila causador da mutao. A mesma enzima
tambm pode remover grupamentos metila dos fosfatos que possivelmente interrompem a cadeia
de DNA. Uma caracterstica importante dessa reao que cada grupamento metila removido
consome uma enzima O6-metilguanina-metiltransferase, a qual no pode ser recuperada para
nova utilizao.

REPARO POR EXCISO DE BASES


Ocorre quando a remoo da base defeituosa feita pela clivagem da ligao base
nitrogenada desoxirribose, seguida pelo preenchimento da regio com a base correta por ao
da DNA-polimerase. Um exemplo comum de reparo por exciso de base o que acontece na
correo da desaminao da citosina uracila. O sistema de reparao reconhece a uracila
como uma base estranha ao DNA. Primeiramente, a uracila-DNA-glicosilase hidrolisa a ligao
entre a uracila e a molcula de desoxirribose. Nesse estgio, a cadeia de DNA est intacta, mas
a base perdida. A enzima AP endonuclease reconhece, ento, essa fenda e cliva a cadeia em
regies adjacentes base perdida. A DNA-polimerase insere novamente uma citosina, de acordo
com a orientao fornecida pela fita complementar no-danificada, que contm uma guanina.
Finalmente, a integridade da fita corrigida restaurada pela DNA-ligase. Existem outras
glicosilases que reconhecem e removem hipoxantina, 3-metil-adenina e purinas com anel
imidazol aberto por radiao ionizante ou pH elevado.
REPARO POR EXCISO DE NUCLEOTDEOS (REN)
Ocorre quando a remoo da base defeituosa feita pela inciso endonucleoltica nos dois
lados da leso, com liberao dos nucleotdeos, seguida pelo preenchimento da regio por ao da
DNA-polimerase. Em todos os organismos onde j foi estudado, o processo de REN consiste em
cinco etapas:
Reconhecimento da leso por um complexo multienzimtico;
Inciso da fita anormal em ambos os lados da leso a alguma distncia desta;
Exciso do segmento contendo a leso;
Sntese de um novo segmento de DNA utilizando a fita no-danificada como molde, por ao
da DNA-polimerase;
Ligao/restaurao da molcula de DNA por ao da enzima DNA-ligase.

A extenso mdia do fragmento de DNA removido de 12 nucleotdeos, razo pela qual


esse modelo chamado de reparao de regies curtas ( uma funo constitutiva da clula).
Em caso de grandes quantidades de leses, em que a substituio envolve de 1500 a 9000
nucleotdeos, o modelo conhecido como reparao de regies longas (induzido por leses
no DNA pelo menos no que diz respeito clula bacteriana).
O modelo proposto para o sistema de REN em mamferos o seguinte:
As protenas XPB, XPD e XPA esto envolvidas na deteco da leso, sendo que as duas
primeiras percorrem a hlice e a segunda reconhece a leso;
Aps encontrar a leso, o DNA do local do dano desnaturado e as endonuclease XPF e
XPG fazem a dupla inciso na cadeia;
O oligonucleotdeo contendo a leso removido pelas DNAs-polimerases de e pelos seus
cofatores PCNA e RF-C, que tambm so responsveis pelo passo seguinte;
Ocorre uma nova sntese do DNA utilizando a fita no danificada como molde;
Ligao da extremidade 5 da regio recm-sintetizada seqncia original, pela DNAligase.
Outro exemplo muito interessante de REN o sistema de reparao global X genes ativos.
Foi demonstrado em E. coli que, embora stios distintos contenham o mesmo tipo de leso, o
sistema pode diferenciar um gene ativo de uma regio no-codificadora; assim, os stios crticos do
genoma so os primeiros a ser reparados. Em mamferos, onde a quantidade de DNA presente no
ncleo muito maior do que na E. coli, a reparao preferencial de seqncias transcritas tambm
ocorre.

REPARO DE BASES MALPAREADAS


Algumas bases incorretamente pareadas conseguem escapar da reviso realizada pela
DNA-polimerase durante o processo de replicao. Por isso, na E. coli, a etapa final que confere
preciso ao processo de replicao de responsabilidade do sistema de correo de erro, que
consiste em vrias protenas codificadas pelos genes mut. Esse sistema percorre o DNA
recentemente sintetizado procura de pares de base mal pareadas e remove os segmentos de
fita simples contendo nucleotdeos incorretos. Isso permite que a DNA-polimerase insira a
base correta na lacuna formada. A dificuldade que surge, aparentemente, a de distinguir qual
das bases de um par erroneamente formado a incorreta, porque ambas so componentes
naturais do DNA. Se a remoo de uma das bases fosse ao acaso, haveria a probabilidade de 50%
de a base correta ser removida e a mutao poderia ser perpetuada, ao invs de ser corrigida.
Existe, porm, um sinal especfico que direciona o sistema de exciso do erro exclusivamente para
a fita recm-sintetizada: o reconhecimento de seqncias GATC prximas ao erro. GATC
metiladas indicam a fita parental, enquanto que ausncia de metilao nestas seqncias
caracteriza a fita recm-sintetizada. O sistema de correo detecta no somente pares nicos
de bases mal pareadas, mas tambm adies e delees, o que reduz a incidncia de
mutaes por modificao no mdulo de leitura, alm daquelas envolvendo substituio de
bases.
REPARO POR RECOMBINAO
No processo de reparao por recombinao, a fita complementar no danificada
utilizada como molde na substituio do fragmento lesado. Algumas vezes, porm, esse molde
no est disponvel, por motivos diversos. A DNA-polimerase, ento, forada a passar pela leso
sem replicar aquela regio. Uma lacuna com um tamanho considervel deixada na fita recmsintetizada. Toda a informao do stio danificado perdida e somente pode ser recuperada pela
utilizao de outra molcula idntica de DNA. Como as clulas de organismos superiores so
geralmente diplides, elas possuem a mesma seqncia, ou praticamente a mesma, em cada um
dos cromossomos homlogos. Uma fonte apropriada de DNA, portanto, pode ser encontrada na
clula. Assim, como esquematizado na figura abaixo, aps uma mutao, a fita 1 do homlogo A
(1A) no est disponvel; a fita 2 do homlogo A (2A) possui uma lacuna. As fitas 1 e 2 do homlogo
A (1A e 2A, respectivamente) esto ntegras. No reparo por recombinao, a fita 1A permutada
pela fita 2A, de modo que 1A sirva de molde para reconstruo de 1A; e 2A sirva de molde para
2A. Na E. coli, de fundamental importncia a protena RecA, pois s ela capaz de parear
duas molculas de DNA homlogas e catalisar as reaes de trocas de fitas, permitindo
reparao e recuperao de leses.
REPARO ATRAVS DO SISTEMA SOS
Uma vez que a clula pode regular a expresso gnica de acordo com sua necessidade,
muitas enzimas envolvidas no reparo do DNA so induzidas pelo prprio defeito da molcula de
DNA. As enzimas mais importantes desse processo so derivadas dos genes SOS, cuja expresso
induzida por um defeito severo o bastante a ponto de impedir a sntese de DNA. Estes genes
do origem a protenas de reparo como, por exemplo, endonucleases de exciso, helicases,
entre outras. Os dmeros de pirimidinas constituem um exemplo tpico desse tipo de dano.
Quando a forquilha de replicao encontra um dmero, a sntese pra e s reiniciada a alguma
distncia alm do dmero, ficando uma lacuna no DNA na qual a enzima de recombinao RecA se
liga. Essa ligao ativa em RecA uma atividade enzimtica completamente independente da
recombinao: ela destri o repressor dos genes SOS (repressor LexA). Dessa maneira, a

protena RecA promove reparao do material gentico de duas formas: por recombinao, com
troca das fitas, e por induo dos genes SOS.
REPARO SUJEITO A ERRO
Existem ocasies em que o dano no DNA to extremo que no h como os mecanismos
celulares de reparo corrigirem de forma precisa a molcula. Nesses casos, a clula utiliza como
ltimo recurso o sistema de reparo sujeito a erro, no qual qualquer uma das quatro bases
inserida no local lesado, a fim de garantir a continuidade do processo de replicao. Devido ao fato
de no haver a informao precisa (molde), o prprio mecanismo de reparo acaba sendo o
causador de uma mutao, pois a chance de introduzir uma base incorreta na cadeia grande. De
qualquer forma, para a clula prefervel incorporar uma base incorreta e permitir que a replicao
continue, do que no replicar mais. Na E. coli, esse sistema de reparao envolve dois genes
principais: umuC e umuD. Esses genes so tambm genes SOS e, portanto, seus produtos esto
em abundncia somente aps a clula ter o sistema SOS ativado. Devido a isso, a protena RecA
tambm necessria no sistema de reparo sujeito a erro, a fim de comandar a induo dos genes
umuC e umuD.
REPARO POR UNIO DE EXTREMIDADES NO-HOMLOGAS
Quebras nas duas fitas de uma mesma molcula de DNA ocorrem nas clulas em diversas
circunstncias e constituem uma das principais ameaas integridade do genoma. Se no forem
reparadas, podem causar a morte celular e, em organismos multicelulares, podem causar o cncer.
Uma grande variedade de agentes exgenos, incluindo a radiao ionizante e um nmero
considervel de quimioterpicos (como a bleomicina), causam essas quebras, bem como agentes
endgenos, a exemplo dos radicais livres. O principal mecanismo de reparao dessas quebras
duplas, que ocorre comumente em mamferos, chamado de unio de extremidades nohomlogas. Neste mecanismo, as extremidades de uma molcula de DNA, apesar de terem
perdido alguns nucleotdeos por degradao espontnea, so justapostas para recombinar. O
mesmo complexo enzimtico realiza o processo de ligao entre as duas extremidades. Desta
forma, a seqncia original de DNA acaba sendo alterada.
REPARO POR UNIO DE EXTREMIDADES HOMLOGAS
O segundo mecanismo reparador de quebras na dupla-fita a unio de extremidades
homlogas. O processo bem mais comum em bactrias e leveduras, e tambm mais preciso.
Por este mecanismo, o cromossomo homlogo quele lesado faz uma cpia da seqncia de
nucleotdeos perdida com quebra da dupla-fita e transfere esta seqncia para o stio de quebra no
cromossomo lesado; este cromossomo lesado, ento, tem sua seqncia original restaurada.

MUTAO E REPARO
Entre os seres humanos aproximadamente 99,9% da seqncia do DNA nuclear igual.
Assim, este 0,01% que difere no DNA nuclear o responsvel pela variabilidade gentica. Esta
variabilidade tanto pode ser normal, quanto pode provocar srios problemas ao seu portador. Neste
ltimo caso, temos as mutaes.
Define-se por mutao qualquer alterao herdvel e permanente na seqncia do
DNA genmico, que no pode ser explicada por processos de recombinao e que pode resultar
em perda ou ganho de funes pela clula. As mutaes podem ser classificadas em trs
categorias, conforme a sua origem: genmicas, cromossmicas e gnicas.
MUTAES GENMICAS: Causadas pela m segregao de um par cromossmico durante a
meiose, resultando em uma alterao no nmero de cromossomos na clula. So as mais
freqentes em seres humanos. Como exemplo temos as aneuploidias.
MUTAES CROMOSSMICAS: Ocorrem com bem menos freqncia do que as genmicas.
Comumente so vistas nas clulas tumorais. Alteram a estrutura de cromossomos individuais.
As translocaes e as inverses so exemplos deste tipo de mutao. Tanto as mutaes
genmicas como as cromossmicas raramente so perpetuadas de uma gerao para a
seguinte, pois, em geral, so incompatveis com a sobrevida ou com a reproduo normal.
MUTAES GNICAS: Podem se originar por um de dois mecanismos bsicos: erros
introduzidos durante o processo normal de replicao do DNA ou mutaes que surgiram
por falha no reparo de danos ao DNA. Resultam em alteraes em genes individuais. Variam
de apenas um nico nucleotdeo a mudanas que podem afetar milhares de pares de bases.
Mutaes podem ocorrer em quaisquer clulas do corpo. Quando ocorrem em clulas
germinativas, podero ser transmitidas para os descendentes. Quando acontecem em
clulas somticas, no podero ser transmitidas para as geraes futuras e podem gerar
alguma forma de mosaicismo somtico, visto em vrios tipos de cncer.

MUTAES GNICAS
As mutaes gnicas podem se originar de dois mecanismos: erros durante o processo de
replicao do DNA ou por falhas durante o reparo de danos no DNA. Podem ainda ser
espontneas ou induzidas por mutgenos (agentes fsicos ou qumicos).
Existem trs tipos clssicos de mutaes gnicas. So eles:
Mutao de ponto: uma nica mudana de par de bases de nucleotdeos no DNA.
Deleo de bases: deleo de um ou vrios pares de bases do DNA.
Insero de bases: adio de um ou vrios pares de bases do DNA.
1) MUTAO DE PONTO
Uma nica mudana de par de bases de nucleotdeos no DNA, sem alterar o nmero de pares
de bases. Podem ocorrer em qualquer parte do genoma, mas conforme a regio produz um efeito
especfico:
Regies codificadoras: Aqui as trocas de bases podem ou no trocar o aminocido, ou
ainda, criar um cdon de parada.
Silenciosas/sinnimas: Trocam a base, mas no o AA. Em geral, na terceira base do
cdon.
Silenciosas/neutras: Trocam a base e o AA, mas esse no afeta a funo. Exemplo:
isoenzimas.
Com sentido trocado: Troca a base e o AA. Em geral, na primeira e na segunda base do
cdon.
Sem sentido: A troca da base gera um cdon de parada (UAA, UAG, UGA).
EM STIOS DE SPLICING: Aqui, pode gerar um mRNA com a falta parcial ou total de um xon
em particular, e assim codificar uma protena mutante.
EM SEQNCIAS REGULATRIAS (PROMOTORES, ENHANCERS) OU GENES DE
FATORES DE TRANSCRIO.
Aqui podem aumentar ou reduzir a expresso gnica.
2 e 3) DELEES E INSERES: Quando de bases individuais, provocam o deslocamento do
mdulo de leitura (frameshift mutation). Se a insero/deleo for de 3 bases ou de mltiplos de 3,
ser menos perigosa do que a de bases individuais. Isso porque ser a insero/deleo de um ou
mais cdons, e poder no alterar o mdulo de leitura antigo. Dessa forma teremos um AA a mais
ou um AA a menos. Assim como as mutaes de ponto, delees e inseres em stio de splicing e
em regies regulatrias podem alterar completamente estes processos. As mutaes causadas por
expanses repetidas de trinucleotdeos (CAG, CTG, CGG ou GAA) encontradas ao longo do
genoma humano so responsveis por vrias doenas genticas humanas. Como exemplo temos a
Sndrome do X Frgil. Certas seqncias de nucleotdeos so especialmente susceptveis a
mutaes. Essas so denominadas de Pontos Quentes de mutao (hot spots). O exemplo
mais bem conhecido a seqncia de duas bases (dinucleotdeo) CG. Ao lado de guanina em
repeties CG, a citosina facilmente metilada, sofrendo desaminao espontnea
freqentemente, a qual converte a citosina em uracila. Mais de 30% das substituies de um s
nucleotdeo so deste tipo, e sua taxa de ocorrncia 25 vezes maior do que qualquer outra
mutao de um nico nucleotdeo. Com que freqncia ocorrem mutaes espontneas? Ao nvel
do nucleotdeo, a taxa de mutao normalmente estimada em cerca de 10-9 por par de bases por
diviso celular, considerando que 3 bilhes de pares de base devem ser replicados em cada diviso

celular. Essa estimativa representa as mutaes que escaparam ao processo de reparo. Ao nvel
de gene, a taxa de mutao muito varivel, oscilando de 10-4 a 10-7 por locus por diviso celular.
Esta variao devida variao no tamanho dos genes (genes grandes geralmente tm
maior probabilidade de sofrer mutaes do que os genes pequenos) e aos pontos quentes
de mutao (especialmente de dinucleotdeos CG metilados). Corrigir os erros no DNA,
causados pelas mutaes, a funo do que chamamos de Reparo. Para que isso acontea,
algumas dezenas de enzimas esto envolvidas no processo. Elas trabalham coletivamente
reconhecendo uma base alterada, removendo-a ao contar o filamento do DNA. Estima-se que
esses mecanismos de reparo corrijam 99,9% dos erros iniciais. O reparo do DNA tambm corrige
quebras bifilamentares no DNA e remove nucleotdeos danificados. Alguns exemplos de reparo:
Erros na replicao so corrigidos pela prpria DNA polimerase.
Desaminao da citosina a uracila corrigida pela uracila-DNA-glicosidase.
Alquilinao da guanina, corrigida pela O6-metilguaniana-metiltransferase.
Depurinao corrigida por AP endonucleases.
Reparo por exciso de bases ou de nucleotdeos.
MUTAO GNICA
Mutao uma alterao sbita e herdvel na estrutura do material gentico. Esta alterao
pode levar a uma mudana correspondente no fentipo do indivduo.
As mutaes so fontes extremamente importantes de variabilidade gentica nas populaes,
pois fornecem novas informaes genticas. A recombinao mistura de genes paternos
durante a meiose por meio de crossing over , que outra fonte de variabilidade, apenas
rearranja informaes genticas j existentes em novas combinaes.
Sem a mutao, todos os genes ocorreriam apenas em uma forma, pois no existiriam alelos.
Portanto, os organismos no seriam capazes de evoluir e adaptar-se s mudanas ambientais.
Tradicionalmente, as mutaes envolvem alteraes na molcula de DNA, podendo ocasionar
mudanas no fentipo. No entanto, as alteraes cromossmicas numricas e estruturais
tambm podem induzir alteraes fenotpicas herdveis.
Simplificadamente, uma mutao gnica ocorre em decorrncia de substituies em pares
de bases. Tais substituies originam mutaes pontuais. Como conseqncia da substituio de
um par de bases, a seqncia de aminocidos de uma protena pode ser alterada. Caso essa
mudana altere a atividade bioqumica da protena, poder interferir no fentipo. Esse o caso da
hemoglobina na anemia falciforme e da insulina na diabete, em que um aminocido da protena foi
trocado devido substituio de um par de bases de um gene. Alm disso, a substituio do par de
bases pode mudar o cdon original para um cdon finalizador, resultando em trmino precoce da
sntese de uma protena.
Sempre que bases forem adicionadas ou deletadas, ocorre uma mudana de matriz de
leitura, alterando a composio dos aminocidos de toda a protena. Por outro lado, devido
redundncia do cdigo gentico, nem todas as alteraes de pares de bases levam a um
aminocido alterado na protena. Logo, quando as mutaes no promovem efeitos no fentipo
so chamadas de mutaes silenciosas. Elas podem ser identificadas atravs da comparao
de seqncias de pares de bases entre genes normais e mutantes.

Exemplo de mutao pontual : Anemia Falciforme ou Siclemia


Causada por uma alterao na cadeia da hemoglobina, decorrente da substituio de
uma adenina por uma timina (transverso) no sexto cdon do gene. Atravs dessa mutao
pontual, o cdon GAA transforma-se em GTA, provocando substituio do cido glutmico pela
valina na cadeia polipeptdica. Essa simples substituio de nucleotdeos e de um nico
aminocido na cadeia polipeptdica leva a hemoglobina a assumir uma configurao espacial
diferente, que causa a deformao das hemcias. A hemoglobina alterada em forma de foice
denominada hemoglobina S (de sickle cell anemia).
CLASSIFICAO DAS MUTAES:
1) MUTAO SOMTICA: Aquela que ocorre em genes de clulas somticas. Portanto,
permanece restrita ao indivduo que a contm, no sendo transmitida aos descendentes atravs
dos gametas.
Exemplo: Heterocromia de ris: Condio na qual as duas ris so de cores distintas ou
apenas uma poro da ris de cor diferente do restante. Se ambas as ris apresentarem
colorao distinta, a mutao ocorreu na primeira clula que originou as demais. Caso a
mutao surja em um estgio mais avanado do desenvolvimento da ris, o indivduo
apresenta apenas uma mancha em uma das ris
2) MUTAO GERMINATIVA: Aquela que ocorre em clulas que originam gametas, sendo
portanto natureza sem uma causa aparente. Podem ser devidas a erros na replicao do DNA
ou a mutagnicos qumicos e fsicos.
Exemplo: Carneiros da raa Ancon: O primeiro registro de mutao germinativa
dominante em animais domsticos foi feito por Seth Wright em 1791. Wright notou um carneiro
com pernas incomumente curtas no rebanho de carneiros de sua fazenda. Ocorreu a ele que
seria vantagem ter um rebanho inteiro de carneiros com essa caracterstica, pois impossibilitaria
que os animais pulassem os baixos muros de pedra de sua vizinhana em New England.
Wright, ento, cruzou seu novo carneiro de pernas curtas com 15 ovelhas na estao seguinte.
Nasceram 15 carneiros dos quais 2 tinham pernas curtas. Estes foram cruzados, dando origem
a uma nova linhagem na qual a caracterstica expressava-se em todos os indivduos.
AGENTES MUTAGNICOS:
I) AGENTES FSICOS:
- TEMPERATURA: O aumento da temperatura promove a quebras das ligaes entre os tomos.
- RADIAES: Incluem radiaes ionizantes de alta energia, tais como raios X, raios gama,
nutrons, e partculas beta e alfa, bem como radiao no-ionizante de baixa energia, luz
ultravioleta, cada uma induzindo mutaes por sua ao sobre o DNA.
RADIAO IONIZANTE: O espectro de radiao eletromagntica muito amplo e estendese desde longas ondas de rdio at os raios csmicos, que podem ter 10-14 cm. Quanto menor o
comprimento de onda, maior a energia dos ftons eletromagnticos, resultando em
penetrao nas clulas e tecidos. Nesse processo, os ftons podem colidir com um dos eltrons
do tomo e faz-lo mudar de rbita. Assim, um tomo previamente neutro torna-se carregado
positivamente, pois existe maior carga positiva no ncleo do tomo do que cargas negativas nos
eltrons orbitais. Ento, esse tomo, agora carregado positivamente, e o eltron formam um par de
ons. Os raios X de alta energia e os raios gama produzem trilhas de pares de ons em sistemas
biolgicos.

tomos ionizados e as molculas em que eles ocorrem so quimicamente muito mais


reativos do que os neutros. Alm disso, os eltrons perdidos por um tomo nesse processo se
movem em alta velocidade, fazendo com que outros tomos tambm se tornem ionizados. Cada
eltron perdido por um tomo ganho por outro, tornando-o negativamente carregado. O resultado
desse repetido processo de ionizao uma cadeia de pares de ons ao longo da trilha de ftons
de alta energia. Os efeitos mutagnicos resultam das reaes qumicas sofridas pelos ons
medida que suas cargas so neutralizadas.
Um resultado do processo de ionizao a quebra das ligaes acar-fosfato do DNA.
Caso a quebra do filamento ocorra em dois ou mais pontos prximos, pares de nucleotdeos podem
ser perdidos e a matriz de leitura do mRNA transcrito alterada. O resultado final pode consistir
em protenas ou enzimas com capacidade funcional reduzida ou mesmo inoperantes. Este ltimo
evento pode ser letal, particularmente em homozigotos.

AS RADIAES IONIZANTES PODEM CAUSAR:


FORMAO DE TAUTMEROS RAROS: Tautmeros so formas alternativas das purinas e
pirimidinas no DNA e no RNA. A tautomerizao ocorre pelo rearranjo de eltrons e prtons na
molcula. Os Tautmeros raros de adenina, citosina, guanina e timina diferem das formas comuns
pelas posies de tomos de hidrognio e, como resultado, algumas ligaes simples tornam-se
duplas.
SUBSTITUIO DE UMA BASE POR OUTRA: Consistem em transio e transverso.
TRANSIES: a substituio de uma base purina (A e G) por outra purina ou de uma
pirimidina (T e C) por outra pirimidina,
TRANSVERSES a troca de uma base purina por uma pirimidina ou vice-versa.

DELEO OU ADIO DE UMA BASE EM UMA DAS FITAS DE DNA:


Adies e delees so referidas coletivamente como frameshift mutations, porque alteram a
estrutura de leitura de todas as trincas de pares de bases no gene a partir do ponto em que
surgem. Isso ocorre porque o trecho deixa de ser mltiplo de 3, mudando a leitura do seg mento de
DNA, o que resulta em aminocidos alterados a partir daquele ponto e, freqentemente, no
aparecimento de um cdon de terminao.
INVERSO DA SEQNCIA DE PARES DE BASES DE NUCLEOTDEOS DENTRO DA MOLCULA DE DNA.
FORMAO DE PERXIDOS.
RADIAO NO IONIZANTE:
A radiao UV, embora no possua energia suficiente para ionizar o DNA, capaz de causar mutaes na molcula. O comprimento de onda especfico que absorvido pelo DNA de
254nm e, embora no seja profundamente penetrante no tecido, eficiente para matar bactrias,
fungos e aumentar a incidncia de cncer de pele em animais. A mais conhecida ao da UV no
DNA a formao de dmeros de pirimidina, ligaes carbono-carbono entre pirimidinas
adjacentes, sendo comum com a timina. Isto resulta na distoro da molcula ou ligao entre
molculas adjacentes, cessando a replicao do DNA temporariamente.
MECANISMOS DE REPARO DO DNA:
1) MECANISMO DE REPARO POR FOTORREATIVAO: Uma enzima fotorreativadora ativada
na presena de luz. Ela liga-se aos dmeros de pirimidina e utiliza a energia da luz para quebrar as
ligaes que formam o mesmo, restaurando a estrutura original da molcula.
2) MECANISMO DE REPARO POR EXCISO: Consiste em um processo multienzimtico dividido
em 4 etapas.
Etapa de inciso: Inicialmente, uma enzima endonuclease reconhece a distoro causada
pelo dmero e corta um dos filamentos prximo ao mesmo.
Etapa de sntese de reparo: a DNA-polimerase I sintetiza um novo filamento, deslocando o
filamento velho que contm o dmero.
Etapa de exciso: um segundo corte alm do dmero feito pela exonuclease, removendoo da molcula de DNA.
Etapa de sntese: finalmente, o filamento recm sintetizado unido ao filamento original
pela DNA-ligase.

3) MECANISMO DE REPARO POR RECOMBINAO PS-REPLICATIVA:


Quando a replicao chega a um dmero, ela bloqueada devido distoro da molcula.
Eventualmente a replicao continua, mas pulando a regio do dmero. Isto resulta em falhas no
filamento filho correspondentes ao dmero no filamento parental. Essas falhas podem ser fechadas
por sntese de reparo. O dmero no excisado ou quebrado, mas sim retido na molcula de DNA
parental.
II) AGENTES QUMICOS:
ANLOGOS DE BASES: Consistem em molculas com estrutura parecida com uma base
nitrogenada natural e que s vezes so incorporadas ao DNA durante a replicao. Ento,
anlogo pareia-se com a base errada, induzindo uma mutao por substituio de bases.
REAGENTES PARA PURINAS E PIRIMIDINAS: So substncias que reagem com o DNA e
alteram diretamente a estrutura da base, em vez de se incorporar molcula. Esses reagentes
desaminam adenina, citosina e guanina, resultando em mutaes por pareamento errado ou
substituio de pares de bases. O cido nitroso (HNO 2) uma dessas substncias
mutagnicas. Ela causa alteraes nas bases do DNA por substituir um grupamento amina
(NH2) por uma hidroxila (OH-).
CORANTES ACRIDNICOS: Classe de substncias qumicas que se intercalam entre as bases
do DNA. Isso aumenta a rigidez e altera a conformao da dupla hlice, distorcendo a molcula
e rompendo o alinhamento e o pareamento das bases. Devido a isso, ocorrem delees ou
adies de pares de base durante a replicao.
AGENTES ALQUILANTES: Reagem com o DNA adicionando grupamentos etil ou metil s
bases. Isto tem como conseqncia o mau pareamento ou total perda da base afetada, criando
uma falha. A principal base afetada a guanina, embora outras tambm possam ser alquiladas.
Exemplos: EMS (etilmetanossulfonato), DES (dietilsulfato), enxofre nitrogenado e gs mostarda.
Este ltimo foi um dos primeiros grupos de mutagnicos qumicos descobertos atravs de
estudos envolvendo operaes militares durante a 2 Guerra Mundial.