Universidade Federal de São Carlos

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS
CENTRO DE CINCIAS EXATAS E DE TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE QUMICA
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA
APLICAO DE NANOPARTCULAS EM FILMES

UTILIZADOS EM EMBALAGENS PARA ALIMENTOS
Mrcia Regina de Moura Aouada*
Tese apresentada como parte dos requisitos

para obteno do ttulo de DOUTORA EM
CINCIAS, rea de concentrao: FSICOQUMICA.
Orientador: Luiz Henrique Capparelli Mattoso

* bolsista CNPq
So Carlos - SP
2009
Ficha catalogrfica elaborada pelo DePT da

Biblioteca Comunitria/UFSCar
A638an
Aouada, Mrcia Regina de Moura.

Aplicao de nanopartculas em filmes utilizados em
embalagens para alimentos / Mrcia Regina de Moura
Aouada. -- So Carlos : UFSCar, 2009.
119 f.
Tese (Doutorado) -- Universidade Federal de So Carlos,
2009.
1. Fsico-qumica. 2. Quitosana. 3. Filmes comestveis. 4.
Hidroxipropil metilcelulose. 5. Propriedades de barreira. I.
Ttulo.
CDD: 541.3 (20a)
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS

Centro de Cincias Exatas e de Tecnologia
Departamento de Qumica
PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM QUMICA
Curso de Doutorado
Assinaturas dos membros da banca examinadora que avaliaram e

aprovaram a defesa de tese de doutorado da candidata Marcia Regina de
Moura Aouada realizada em 30 de abril de 2009:
~~
Dr. Luiz Henrique Capparelli Mattoso
. uenritte Monteiro Cordeiro de Azeredo
/~k~M
Prof. Dr. Leonardo Femandes Fraceto
Eu vos louvarei de todo o corao, Senhor, porque ouvistes as minhas palavras. Na

presena dos anjos eu vos cantarei. Ante vosso santo templo prostrar-me-ei, e louvarei o
vosso nome, pela vossa bondade e fidelidade, porque acima de todas as coisas, exaltastes o
vosso nome e a vossa promessa. Quando vos invoquei, vs me respondestes; fizestes
crescer a fora de minha alma. Ho de vos louvar, Senhor, todos os reis da terra, ao
ouvirem as palavras de vossa boca. E celebraro os desgnios do Senhor:
Verdadeiramente, grande a glria do Senhor. Sim, excelso o Senhor, mas olha os
pequeninos, enquanto seu olhar perscruta os soberbos. Em meio adversidade vs me
conservais a vida, estendeis a mo contra a clera de meus inimigos; salva-me a vossa
mo. O Senhor completar o que em meu auxlio comeou. Senhor, eterna a vossa
bondade: no abandoneis a obra de vossas mos.
SALMO 137 - Agradecimento
Dedico esta tese aos meus

pais, PAULO RAIMUNDO e
OLIVIA TEREZINHA, pelos maiores
e valiosos ensinamentos.
Por ter vocs, nenhuma
dificuldade impedimento e toda
alegria completa.
Dedico esta tese ao meu amor

FAUZE AOUADA, pelo carinho,
ateno, fora e por sempre estar ao meu
lado.
AGRADECIMENTOS
A DEUS, pela vida e pela presena constante nela, que me d fora para ir cada vez
mais longe.
Ao Dr. LUIZ MATTOSO, pela orientao, incentivo, confiana, amizade e por
acreditar em mim na realizao do trabalho. Meus sinceros agradecimentos.
Aos meus irmos ANA PAULA e LUIZ GUSTAVO, pela amizade e confiana, por
acreditarem em mim, me mostrando que posso alcanar tudo que desejo.
Aos pesquisadores Dr. JOHN M. KROCHTA, Dra. TARA H. MCHUGH e Dr.
ROBERTO J. AVENA-BUSTILLOS do USDA, Estados Unidos, Albany-Califrnia,
pela infra-estrutura disponibilizada, por compartilharem seus conhecimentos comigo e por
todo auxlio e ensinamento dado a mim e ao trabalho.
A Dra. HENRIETTE MONTEIRO CORDEIRO DE AZEREDO da EmbrapaCNPAT, pela amizade e disponibilidade a mim dispensada em vrios momentos.
A professora e Dra. LCIA HELENA MASCARO da UFSCar, pela ateno e
incentivo dado na correo do projeto de Doutorado e relatrios.
Aos professores Dr. LEONARDO FRACETO e RENATA DE LIMA pela amizade,
partilha de conhecimentos e estudo toxicolgico das nanoestruturas.
Aos secretrios, bibliotecrios, telefonistas, pesquisadores, tcnicos, etc, a todos os colegas
da EMBRAPA-CNPDIA sempre atenciosos e prestativos.
A EMBRAPA INSTRUMENTAO AGROPECURIA, pela infra-estrutura e pelo
excelente ambiente de trabalho.
Ao Departamento de Qumica, da UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS,
pela oportunidade dada na realizao do Doutorado e apoio na pesquisa.
Aos amigos da EMBRAPA-CNPDIA que de uma maneira ou de outra contriburam para
meu aprimoramento e fizeram parte do meu dia-a-dia.
Ao CNPq pelo apoio financeiro.
PRODUO CIENTFICA
Publicaes em Peridicos:
- MOURA, Mrcia R. de; AOUADA, Fauze A.; AVENABUSTILLOS, Roberto J.; MCHUGH, Tara H.; KROCHTA, John M.; MATTOSO,
Luiz Henrique C. Improved barrier and mechanical properties of novel
hydroxypropyl methylcellulose edible films with chitosan/tripolyphosphate
nanoparticles. Journal of Food Engineering, 92: 448-53; 2009.
- MOURA, Mrcia R. de; AVENA-BUSTILLOS, Roberto J.;
MCHUGH, Tara H.; KROCHTA, John M.; MATTOSO, Luiz Henrique C.
Properties of novel hydroxypropyl methylcellulose films containing chitosan
nanoparticles. Journal of Food Science, 73: 31-7; 2008.
- MOURA, Mrcia R. de; AOUADA, Fauze A.; MATTOSO, Luiz
Henrique C. Preparation of chitosan nanoparticles using methacrylic acid.
Journal of Colloid and Interface Science, 321: 477-83; 2008.
- AZEREDO, Henriette M.C.; MOURA, Mrcia R. de; OLSEN, Carl;
DU, Wen-X.; MATTOSO, Luiz Henrique C.; AVENA-BUSTILLOS, Roberto J.;
McHUGH, Tara H. Performance of mango puree edible films as affected by
chitosan submicronparticles and high methoxyl pectin. International Journal of
Food Science & Technology, submetido.
- MOURA, Mrcia R. de; AOUADA, Fauze A.; FRACETO,
Leonardo F.; LIMA, Renata de; MATTOSO, Luiz Henrique C. Evaluation of
toxicity of chitosan nanoparticles. Journal of Colloid and Interface Science, a ser
submetido.
- MOURA, Mrcia R. de; AZEREDO, Henriette M. C.; McHUGH,

Tara H.; MATTOSO, Luiz Henrique C. Thickness effects of hydroxypropyl
methylcellulose films with chitosan nanoparticles on their properties. Journal of
Food Engineering, a ser submetido.
Publicaes em Anais e Participao em Congressos

- MOURA, M. R. de; AOUADA, Fauze A.; CATTELAN, Alexandre
J.; MOSCARDI, Flvio; MUNIZ, Edvani C.; VAZ, Carlos M. P.; MATTOSO,
Luiz Henrique C. Desenvolvimento de nanopartculas e hidrogis para sistemas de
liberao controlada de insumos agrcolas para a cultura de soja. IV Congresso
Brasileiro de Soja, 2006, Londrina-PR, Brasil.
- MOURA, M. R. de; AOUADA, Fauze A.; MATTOSO, Luiz
Henrique C. Preparation of chitosan with controlled nanoparticles sizes.
ISNAPOL, 2007, Gramado-RS, Brasil.
- MOURA, M. R. de; AOUADA, Fauze A.; MATTOSO, Luiz
Henrique C. Nanopartculas de quitosana para aplicao na sntese de filmes
utilizados na indstria de alimentos. 3 Workshop de Rede de Nanotecnologia
Aplicada ao Agronegcio, 2007, Londrina- PR, Brasil.
- MOURA, M. R. de; AVENA-BUSTILLOS, Roberto J.; MCHUGH,
Tara H.; MATTOSO, Luiz Henrique C. Mechanical properties of films from
hydroxy propyl methyl cellulose and chitosan nanoparticles. SBPMat, 2007,
Natal-RN, Brasil.
- MOURA, M. R. de; AVENA-BUSTILLOS, Roberto J.; MCHUGH,
Tara H.; KROCHTA, John M.; MATTOSO, Luiz Henrique C. Barrier and
mechanical properties of hydroxypropyl methylcellulose edible films containing

chitosan nanoparticles. IFT Annual Meeting & Food Expo, 2008, New OrleansLA, USA.
-AZEREDO, H. M. C.; MOURA, M. R. de; OLSEN, C.; MATTOSO,
L.H.C.; AVENA-BUSTILLOS, R. J.; McHUGH, T. H. Influence of chitosan
submicronparticles and pectin on mechanical and barrier properties of mango puree
edible films.IFT Annual Meeting & Food Expo, 2008, New Orleans-LA, USA.
- MOURA, M. R. de; MCHUGH, Tara H.; KROCHTA, John M.;
MATTOSO, Luiz Henrique C. Influence of particle size on the thermal and water
vapor barrier properties of HPMC films containing chitosan nanoparticles. Nano
9th: International Conference on Nanostructured Materials, 2008, Rio de JaneiroRJ, Brasil.
-AZEREDO, H. M. C.; MOURA, M. R. de; MATTOSO, Luiz
Henrique
C.;
AVENA-BUSTILLOS,
Roberto
J.;
MCHUGH,
Tara
H.
Propriedades mecnicas e de barreira de filmes nanocompsitos de quitosana e

celulose microcristalina. 18 Congresso Brasileiro de Engenharia e Cincia dos
Materiais, 2008, Porto de Galinhas-PE, Brasil.
-MOURA, Mrcia R. de; AOUADA, Fauze A.; AVENABUSTILLOS, Roberto J.; MCHUGH, Tara H.; KROCHTA, John M.; MATTOSO,
Luiz Henrique C. Preparao e caracterizao mecnica de filmes comestveis
sintetizados a partir de hidroxipropil metilcelulose e nanopartculas. 18
Congresso Brasileiro de Engenharia e Cincia dos Materiais, 2008, Porto de
Galinhas-PE, Brasil.
LISTA DE ABREVIATURAS
Tenso
ANOVA
Anlise de Varincia
DSC
Calorimetria Diferencial de Varredura
Mdulo de Elasticidade
FT-IR
GS
Espectroscopia no Infravermelho com

Transformada de Fourier
Grau de Substituio
HPMC
Hidroxipropil Metilcelulose
KCl
Cloreto de Potssio
MET
Microscopia Eletrnica de Transmisso
MEV
Microscopia Eletrnica de Varredura
NPs
Nanopartculas
O2P
Permeabilidade ao Oxignio
PMAA
Poli(cido metacrlico)
QS
Quitosana
RH
Umidade Relativa
RMN
Td
Espectroscopia de Ressonncia
Magntica Nuclear
Temperatura de Degradao
TG
Termogravimetria
TPP
Tripolifosfato de Sdio
WVP
Ingls (Water Vapor Permeability)

Permeabilidade ao Vapor de gua
ix
Lista de Tabelas
TABELA 2.1: Trs diferentes tipos de nanopartculas QS-TPP formadas, com diferentes
concentraes dos reagentes.......................................................................................................... 29
TABELA 2.2: Valores de tamanho mdio para as diferentes NPs de quitosana em pH = 4,0. .... 39
TABELA 2.3: Valores de H para as diferentes NPs de quitosana.............................................. 50
TABELA 2.4: Influncia da concentrao de QS e TPP no tamanho de partcula. ...................... 54
TABELA 2.5: Influncia da concentrao de QS e TPP nos valores de potencial zeta................ 55
TABELA 3.1: Valores de tamanho mdio para as diferentes NPs de quitosana em pH = 4,0. .... 69
TABELA 3.2: Solubilidade em gua dos filmes com e sem nanopartculas incluso. ................... 71
TABELA 3.3: Tenso para filmes de HPMC com diferentes concentraes e tamanhos de
partculas........................................................................................................................................ 75
TABELA 3.4: Efeito da formulao e tamanho de partculas no mdulo de elasticidade, e % de
elongao nos filmes de HPMC. ................................................................................................... 76
partculas, aps sete meses de estocagem...................................................................................... 77
TABELA 3.6: Permeabilidade ao oxignio para filmes de HPMC contendo nanopartculas
inclusas. ......................................................................................................................................... 81
TABELA 3.7: Temperatura de degradao dos filmes de HPMC e HPMC com nanopartculas. 82
TABELA 4.1: Efeito da presena e tamanho de partculas, no mdulo de elasticidade e elongao
dos filmes contendo nanopartculas de QS-TPP............................................................................ 96
partculas, aps sete meses de estocagem...................................................................................... 96
TABELA 4.3: Efeito da presena e tamanho de partcula no WVP dos filmes de HPMC.......... 97
TABELA 4.4: Temperaturas de degradao de filmes de HPMC sem e com nanopartculas. .. 101
Lista de Figuras
FIGURA 1.1: Diferenciao estrutural entre nanoesferas e nanocpsulas...................................... 7
FIGURA 1.2: Representao esquemtica da polimerizao em molde tipo I. (POLOWINSKI,
2002)................................................................................................................................................ 9
FIGURA 1.3: Representao esquemtica da polimerizao em molde tipo II. (POLOWINSKI,
2002).............................................................................................................................................. 10
FIGURA 1.4: Gelatinizao da quitosana com tripolifosfato de sdio......................................... 11
FIGURA 1.5: Representao da estrutura primria da quitosana (a) e quitina (b) onde n o grau
de polimerizao............................................................................................................................ 12
FIGURA 1.6: Esquema da obteno da quitina e quitosana. ........................................................ 14
FIGURA 1.7: Estrutura qumica da hidroxipropil metilcelulose, onde n o grau de
polimerizao. (R = -CH2CH(OH)CH3, CH3 ou H) ...................................................................... 17
FIGURA 1.8: Representao grfica das propriedades mecnicas de tenso versus deformao.
FONTE: (WARD e HARDLEY, 1998). ....................................................................................... 22
FIGURA 2.1: Fotografia da sntese das nanopartculas. ............................................................... 27
FIGURA 2.2: Foto das solues: com ausncia (soluo transparente) e presena (soluo
opalescente) de nanopartculas. ..................................................................................................... 28
FIGURA 2.3: Equipamentos utilizados na sntese das nanopartculas QS-TPP. .......................... 29
FIGURA 2.4: Mecanismo proposto de preparao das nanopartculas (MOURA et al., 2008). .. 35
FIGURA 2.5: Espectro de FT-IR da quitosana (2a) e nanopartculas (2b-d)................................ 36
FIGURA 2.6: Espectro de C13 VACP-MAS: a) quitosana pura; b) 0,2% (m/v) de quitosana na
sntese das nanopartculas; c) 0,5% (m/v) na sntese e d) 0,8% (m/v) na sntese. * Corresponde ao
grupo CH3 acetil residual. .............................................................................................................. 38
FIGURA 2.7: Distribuio do tamanho mdio de nanopartculas de QS-PMAA com 0,5 % (82
nm) e 0,2 % m/v (110 nm) de quitosana. ...................................................................................... 40
FIGURA 2.8: Dependncia do tamanho de partcula com a variao de pH para concentraes de
0,2; 0,5 e 0,8% m/v de QS utilizadas na sntese............................................................................ 41
FIGURA 2.9: Micrografia de MET de nanopartculas de QS-PMAA preparadas com 0,2% (m/v)
de QS na sntese, equilibrada em pH 8,0....................................................................................... 42
FIGURA 2.10: Dependncia do potencial zeta com a variao do pH em suspenses de
nanopartculas preparadas com 0,2; 0,5 e 0,8 % (m/v) de QS. As anlises foram realizadas na
temperatura de 25 C. .................................................................................................................... 45
FIGURA 2.11: Micrografias de MET das nanopartculas de quitosana preparadas com (a) 0,2; (b)
0,5 e (c) 0,8 (m/v) de quitosana a pH 4. ..................................................................................... 47
FIGURA 2.12: Micrografias de MET de nanopartculas de Q sintetizadas com 0,2% (m/v) em pH
= 4,0 e equilibradas aps a sntese em a) pH= 7,0 e b) pH= 8,0. .................................................. 48
FIGURA 2.13: Curva de DSC para quitosana pura e nanopartculas sintetizadas com 0,2; 0,5 e
0,8% (m/v) de QS. A programao utilizada para todas as anlises foi: rampa de aquecimento de
20 at 450 C; razo de 5 C/min sob atmosfera de nitrognio com vazo de 50 mL/min. ........ 49
FIGURA 2.14: Curvas de TG para (a) QS, nanopartculas de QS com (b) 0,2; (c) 0,5 e (d) 0,8 %
(m/v). As curvas foram obtidas nas seguintes condies: rampa de aquecimento de 20 at 500 C,
com razo de aquecimento de 10 C/min para cada amostra; vazo de nitrognio mantida em 60
cm3/min.......................................................................................................................................... 51
FIGURA 2.15: Espectro de FT-IR da quitosana (A); TPP (B) e nanopartculas QS-TPP(C)...... 52
xi
FIGURA 2.16: Micrografia eletrnica de transmisso de nanopartculas sintetizadas a partir de

3,00 mg L-1 de QS e 1,2 mg L-1 de TPP (85 nm). ......................................................................... 56
FIGURA 3.1: Fotografia do esquema de preparao do filme de HPMC..................................... 62
FIGURA 3.2: Micrografias de MEV: (a) filme controle (somente HPMC); (b) QS-PMAA
nanopartculas com 0,2 % (m/v) de quitosana; (c) filme de HPMC contendo 6,3 % de
nanopartculas com 110 nm; (d) o mesmo que (c) em 20.000 X de magnificao. ...................... 70
FIGURA 3.3: Curva de tenso-deformao para filmes de HPMC com 6,3 % (110 nm), 14,3%
(82 nm) e 20,7% (59 nm) de nanopartculas QS-PMAA adicionadas e com uma curva de filme
contendo somente quitosana sem nanopartculas (QS-MAA)....................................................... 72
FIGURA 3.4: Tenso dos filmes de HPMC com diferentes concentraes e tamanhos de
nanopartculas. Os valores mdios so apresentados e as barras indicam os erros das medidas. . 74
FIGURA 3.5: Dependncia da permeabilidade dos filmes de HPMC com a concentrao de
nanopartculas para diferentes tamanhos de partculas: (a) 59 nm; (b) 82 nm e (c) 110 nm.
Diferentes letras sobre as barras indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c................. 78
FIGURA 3.6: Representao esquemtica do modelo de permeao proposto. ........................... 79
FIGURA 3.7: Representao esquemtica do modelo de permeao proposto. ........................... 80
FIGURA 3.8: Curva de DSC para filme de HPMC puro. A curva foi obtida nas seguintes
condies: vazo de nitrognio de 50 mL min-1, razo de aquecimento de 10 C min-1, porta
amostra de alumnio com tampa.................................................................................................... 84
FIGURA 4.1: Efeito da incorporao de nanopartculas na tenso de filmes de HPMC. As
colunas mostram os valores mdios e as barras de erro indicam os desvios. As diferentes letras
nas colunas indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c. ................................................ 95
FIGURA 4.2: Curva TG dos filmes de HPMC (A) e do filme de HPMC com NPs de 110 nm (B).
As anlises foram realizadas em atmosfera de nitrognio com vazo de 60 cm3 min-1, amostra
com massa de 6-7 mg e porta amostra de platina. ....................................................................... 100
FIGURA 4.3: Micrografias eletrnicas de varredura de filmes de HPMC puro (a) e filme de
HPMC contendo nanopartcula de QS-TPP com 221 nm (b)...................................................... 102
xii
Resumo
APLICAO DE NANOPARTCULAS EM FILMES UTILIZADOS
EM EMBALAGENS PARA ALIMENTOS: Nanopartculas formadas a partir de
quitosana (QS) foram obtidas pelo mtodo de polimerizao em molde (QSPMAA) e gelatinizao ionotrpica (QS-TPP). As nanopartculas foram analisadas
atravs de anlises de FT-IR, tamanho de partcula, potencial zeta, microscopias
eletrnicas (transmisso e varredura) e medidas de TGA. As nanopartculas
sintetizadas apresentaram morfologia homognea, ou seja, tamanho uniforme e
forma esfrica. O tamanho das partculas e o potencial zeta foram dependentes da
concentrao de quitosana utilizada no mtodo de preparao e do pH. As
diferentes partculas foram incorporadas em filmes de hidroxipropil metilcelulose
(HPMC) a fim de melhorar suas propriedades. Para isso, uma soluo de HPMC
com 3% m/v foi preparada e sobre esta foi adicionada soluo de nanopartculas de
ambas as snteses. Nos filmes foram realizadas anlises de propriedades mecnicas
(tenso, elongao e mdulo de elasticidade), propriedades de barreira [vapor de
gua (WVP) e oxignio], anlise de espessura, microscopia eletrnica de varredura
e anlises trmicas. O filme controle de HPMC sem nanopartcula apresenta um
valor de WVP de 0,79 g mm/ kPa h m2. Com a incorporao das nanopartculas de
QS-PMAA os valores de WVP do filme decrescem para 0,64; 0,59 e 0,47 g mm/
kPa h m2 com a incorporao de nanopartculas de 59; 82 e 110 nm,
respectivamente. Com a incorporao de nanopartculas de QS-TPP os valores de
WVP decrescem para 0,58; 0,45 e 0,33 g mm/ kPa h m2 com a incorporao de
nanopartculas com 220; 110 e 85 nm, respectivamente. Da mesma forma, as
propriedades mecnicas dos filmes de HPMC foram significativamente melhoradas
com a insero de nanopartculas de quitosana. Este trabalho demonstrou que os
filmes contendo nanopartculas podem ser considerados como extremamente
promissores para serem aplicados em embalagens na conservao de alimentos.
xiii
Abstract
APPLICATION OF NANOPARTICLES IN FILMS USED FOR
FOOD PACKAGING: Dispersions composed of chitosan (CS) were obtained by
the template polymerization (CS-PMAA) and ionotropic gelatinization (CS-TPP).
The nanoparticles were analyzed by FT-IR analysis, particle size, zeta potential,
electron microscopy (transmission and scanning), and TGA analysis. The
nanoparticles obtained presented a very homogeneous morphology showing a quite
uniform particles size distribution and a rather spherical shape. The particle size
and zeta potential were dependent on the chitosan concentration used during the
preparation method and pH. Different particles were incorporated in the
hydroxypropyl methylcellulose (HPMC) films in order to improve their properties.
For this, a 3% HPMC (in w:v %) solution was prepared and added in this
nanoparticles solutions of both syntheses. The films were characterized by
mechanical (tensile, elongation and elastic modulus), barrier [water vapor (WVP)
and oxygen], thickness, morphological, and thermal properties. The WVP of the
control HPMC film was 0.79 g mm/kPa h m2. The WVP decreased significantly
when CS-PMAA nanoparticles were incorporated to HPMC films. For example,
WVP decreased to 0.64; 0.59 and 0.47 g mm/kPa h m2 for films containing 59, 82
and 110 nm, respectively. For CS-TPP nanoparticles the WVP decreased to 0.58;
0.45 and 0.33 g mm/kPa h m2 for films containing nanoparticles with 220, 110 and
85 nm, respectively. The same way, the mechanical properties of the HPMC films
were strongly improved when CS nanoparticles were incorporated. In this way,
HPMC films containing nanoparticles could be considered as promising materials
for application in packaging for preservation of foods.
xiv
SUMRIO
INTRODUO .............................................................................................................................1
CAPTULO I: Reviso Bibliogrfica .....................................................................................5
1.1. Nanotecnologia aplicada em embalagens............................................................................. 6
1.2. Nanopartculas polimricas .................................................................................................. 6
1.2.1. Polimerizao em molde ............................................................................................... 8
1.2.2. Gelatinizao Ionotrpica............................................................................................ 10
1.3. Quitosana ............................................................................................................................ 11
1.4. Matrizes polissacardicas.................................................................................................... 15
1.5. Hidroxipropil metilcelulose (HPMC)................................................................................. 17
1.6. Formao de filmes ............................................................................................................ 18
1.7. Propriedades dos filmes...................................................................................................... 20
CAPTULO II: Sntese e Caracterizao de Nanopartculas de Quitosana
Sintetizadas Por Diferentes Mtodos ...............................................................................24
2.1. Introduo........................................................................................................................... 25
2.2. Materiais e Mtodos ........................................................................................................... 26
2.2.1. Materiais ...................................................................................................................... 26
2.2.1.1. Sntese 1................................................................................................................ 26
2.2.1.2. Sntese 2................................................................................................................ 26
2.2.2. Mtodos ....................................................................................................................... 26
2.2.2.1. Preparao das Nanopartculas............................................................................. 26
2.2.2.1.1. Mtodo de polimerizao do cido metacrlico (QS-PMAA) - Sntese 1 ..... 26
2.2.2.1.2. Mtodo de gelatinizao ionotrpica (QS-TPP) - Sntese 2.......................... 28
2.2.2.2. Caracterizao de nanopartculas QS-PMAA ...................................................... 30
2.2.2.2.1. Anlise por FT-IR.......................................................................................... 30
2.2.2.2.2. Anlise por RMN........................................................................................... 30
2.2.2.2.3. Tamanho mdio e distribuio do tamanho das partculas............................ 31
2.2.2.2.4. Anlise por Potencial Zeta............................................................................. 31
2.2.2.2.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)............................................ 31
2.2.2.2.6. Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC)............................................... 32
2.2.2.2.7. Termogravimetria (TG) ................................................................................. 32
2.2.2.3. Caracterizao nanopartculas QS-TPP................................................................ 32
2.2.2.3.1. Anlise por FT-IR.......................................................................................... 32
2.2.2.3.2. Tamanho de partculas e distribuio do tamanho das partculas ................. 33
2.2.2.3.3. Anlise por Potencial Zeta............................................................................. 33
2.2.2.3.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)............................................ 34
2.3. Resultados e Discusses ..................................................................................................... 34
2.3.1. Nanopartculas QS-PMAA .......................................................................................... 34
2.3.1.1. Sntese das nanopartculas .................................................................................... 34
2.3.1.2. Anlise de FT-IR .................................................................................................. 36
2.3.1.3. Anlise de RMN ................................................................................................... 37
2.3.1.5. Anlise do potencial zeta das partculas............................................................... 43
2.3.1.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)................................................... 46
2.3.1.6. Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC)...................................................... 48
2.3.1.7. Termogravimetria (TG) ........................................................................................ 50
xv
2.3.2. Nanopartculas QS-TPP............................................................................................... 52

2.3.2.1. Anlise de FT-IR .................................................................................................. 52
2.3.2.2. Tamanho mdio de Partculas .............................................................................. 53
O efeito da concentrao de QS e TPP no tamanho final das NPs e parmetros que afetam
o tamanho de partculas j foram relatados na literatura. CALVO et al. (1997) relataram
que o tamanho dessas partculas depende de ambas as concentraes, tanto de QS quanto
de TPP. GAN et al. (2005) estudaram a diferena entre partculas associadas com
protena, tipo albumina do soro bovino (BSA) e partculas sem BSA. Partculas
carregadas com BSA apresentam tamanho maior que partculas sem o carregamento. Esse
fato ocorre devido alta massa molar e tamanho das molculas de protenas.................. 54
2.3.2.3. Potencial Zeta ....................................................................................................... 54
2.3.2.4. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)................................................... 55
2.4. Concluses.......................................................................................................................... 57
CAPTULO III: Sntese e Caracterizao de Filmes de Hidroxipropil
Metilcelulose Contendo Nanopartculas de Quitosana e Poli(cido metacrlico) ..59
3.1. Introduo........................................................................................................................... 60
3.2.1. Materiais ...................................................................................................................... 62
3.2.2. Mtodos ....................................................................................................................... 62
3.2.2.1. Preparao dos filmes........................................................................................... 62
3.2.2.2. Caracterizao dos Filmes .................................................................................... 63
3.2.2.2.1. Determinao da espessura............................................................................ 63
3.2.2.2.2. Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV) ............................................... 63
3.2.2.2.3. Solubilidade do filme em gua ...................................................................... 64
3.2.2.2.4. Propriedades Mecnicas ................................................................................ 64
3.2.2.2.5. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP).................................................... 65
3.2.2.2.6. Permeabilidade ao Oxignio (O2P) ............................................................... 67
3.2.2.2.8. Anlise Estatstica.......................................................................................... 68
3.3.1. Determinao do Tamanho Mdio .............................................................................. 68
3.3.2. Morfologia do Filme.................................................................................................... 69
3.3.3. Solubilidade do filme em gua .................................................................................... 70
3.3.4. Propriedades mecnicas............................................................................................... 72
3.3.5. Permeabilidade ao Vapor da gua (WVP).................................................................. 77
3.3.6. Permeabilidade ao Oxignio (O2P).............................................................................. 81
3.3.7. Anlise da degradao ................................................................................................. 82
3.3.8. Estudos de Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) .......................................... 83
3.4. Concluses.......................................................................................................................... 85
CAPTULO IV: Sntese e Caracterizao de Filmes de Hidroxipropil
Metilcelulose Contendo Nanopartculas de Quitosana e Tripolifosfato de Sdio.
.......................................................................................................................................................86
4.1. Introduo........................................................................................................................... 87
4.2.1. Materiais ...................................................................................................................... 88
4.2.2. Mtodos ....................................................................................................................... 88
xvi
4.2.2.1. Preparao dos filmes........................................................................................... 88

4.2.2.2. Caracterizao dos Filmes .................................................................................... 89
4.2.2.2.1. Determinao da espessura............................................................................ 89
4.2.2.2.2. Propriedades Mecnicas ................................................................................ 89
4.2.2.2.3. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP).................................................... 90
4.2.2.2.4. Permeabilidade ao Oxignio (O2P) ............................................................... 91
4.2.2.2.6. Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV) ............................................... 92
4.2.2.2.7. Anlise Estatstica.......................................................................................... 92
4.3.1. Propriedades Mecnicas .............................................................................................. 93
4.3.2. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP).................................................................. 97
4.3.3. Permeabilidade ao Oxignio (O2P).............................................................................. 99
4.3.4. Degradao Trmica.................................................................................................. 100
4.3.5. Morfologia dos Filmes .............................................................................................. 102
4.3.6. Estudos de Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC) ........................................ 103
4.4. Concluses........................................................................................................................ 103
CAPTULO V: Consideraes Finais .................................................................................105
5.1. Concluses Gerais ............................................................................................................ 106
5.2. Sugestes para trabalhos futuros ...................................................................................... 107
CAPTULO VI: Referncias Bibliogrficas....................................................................108
xvii
INTRODUO
A conservao dos alimentos exige em geral tratamentos fsicos ou
qumicos para manter ou aumentar a sua vida de prateleira.
A utilizao de
embalagens, rgidas ou flexveis, imprescindvel, visto que esta tem que agir
como uma barreira entre o ambiente externo e o alimento. Atualmente, a maioria
das embalagens flexveis produzida com plsticos, isto , de materiais sintticos
de fonte no renovvel, que apesar de possurem excelentes propriedades
funcionais, so consideradas no biodegradveis e esto envolvidas em problemas
ambientais (SOARES et al., 2005).
Recentemente surgiu um grande interesse pelo desenvolvimento de
embalagens biodegradveis, principalmente, devido demanda por alimentos
ecologicamente corretos, de alta qualidade e devido, tambm, s preocupaes
ambientais sobre o descarte desses materiais no renovveis que levam milhares de
anos para serem degradados (LE HELLAYE et al., 2008; MARCOS et al., 2008;
CAO et al., 2009).
Uma das solues encontradas para amenizar este problema,
particularmente na rea de embalagens de alimentos, o desenvolvimento de
filmes ou biofilmes a partir de materiais renovveis que possam substituir os
materiais sintticos. Porm o maior desafio da utilizao destes filmes
biodegradveis substituir as embalagens convencionais, mantendo, com a mesma
eficcia, a qualidade do produto, garantindo sua vida de prateleira atravs do
controle de caractersticas mecnicas e de permeabilidade (KESTER e
FENNEMA, 1986; KROCHTA et al., 2002; YAKIMETS et al., 2007;
SRINIVASA et al., 2007; OLIVAS e BARBOSA-CANOVAS, 2008).
Alguns sistemas promissores desenvolvidos pelo nosso grupo para
melhorar as caractersticas dos filmes biodegradveis sintetizados envolvem a
incorporao de nanoestruturas nos filmes (MOURA et al., 2008; MOURA et al.,

2009).
O agronegcio brasileiro tem ocupado uma posio de lder mundial,
entre outros aspectos, devido s pesquisas e investimentos neste setor. Para que os
pases continuem crescendo e abrindo novos mercados, vrios setores ainda
requerem agregao de valor aos seus produtos, o que s pode ser feito pela
incorporao contnua de novas tecnologias.
As perdas ps-colheita de frutas frescas so enormes, cerca de 25 a
40%, dependendo do tipo de fruta e do uso de tecnologias de operaes pscolheita. Isso reflete a falta de conhecimento dos manipuladores de frutas sobre os
fatores biolgicos e as condies do ambiente envolvido na deteriorao, ou a falta
de uso de tecnologias ps-colheita requeridas na preservao da qualidade das
frutas.
Muita pesquisa atualmente vem sendo realizada com o objetivo de
explorar o potencial dos filmes e coberturas comestveis e/ou biodegradveis em
manter e estender a qualidade e a vida til de produtos frescos e reduzir a
quantidade de embalagens descartveis no biodegradveis. As coberturas so
formadas diretamente sobre a superfcie do alimento, enquanto os filmes so prformados e posteriormente aplicados. Entretanto comum que os termos coberturas
e filmes sejam utilizados indistintamente.
Tradicionalmente, os filmes so usados para reduzir a perda de peso,
alterando a permeabilidade e criando um efeito de atmosfera modificada sobre as
frutas frescas. Coberturas j foram aplicadas em frutas como bananas, mas,
mangas, pras, morangos, goiabas entre outras. As coberturas e filmes sintetizados
apresentaram influncia na fisiologia das frutas, no atraso do amadurecimento e no
metabolismo do fruto ps-colheita. Filmes sintetizados podem tambm sofrer
modificao, com o intuito de melhorar ainda mais as propriedades e desempenho

desse filmes, frente ao seu uso.
Neste contexto a aplicao da nanotecnologia para aumentar a
competitividade e a sustentabilidade do agronegcio pelo desenvolvimento de
novos usos de produtos de origem agropecuria pode se tornar uma soluo.
O presente trabalho busca a melhoria das propriedades mecnicas e de
barreiras de filmes comestveis para a indstria de embalagens pela insero de
materiais nanoestruturados em filmes de polissacardeos. A utilizao de
polissacardeo como matriz muito importante, visando diminuio da poluio
ambiental causada pelo excesso de embalagens plsticas descartadas no ambiente.
Alm disso, o aprimoramento na sntese e caracterizao de nanopartculas de
quitosana extremamente promissor na utilizao em embalagens.
Para uma melhor apresentao e discusso dos resultados obtidos, essa
tese ser subdividida como descrito a seguir:
- Captulo 1: Onde foi apresentada uma reviso geral da literatura
sobre os aspectos principais da tese.
- Captulo 2: Contm o mtodo de sntese e caracterizao de
nanopartculas de quitosana baseado em dois mtodos de sntese: polimerizao em
molde e gelatinizao ionotrpica.
- Captulo 3: Contm a preparao e caracterizao dos filmes de
HPMC contendo nanopartculas sintetizadas com base na polimerizao em molde.
- Captulo 4: Contm a preparao e caracterizao dos filmes de
HPMC contendo nanopartculas sintetizadas com base na gelatinizao ionotrpica.
- Captulo 5: apresentado um resumo das principais concluses da
tese, em um item denominado consideraes finais.
O principal objetivo da tese a incorporao de nanopartculas

polimricas em matrizes polissacardicas de fontes renovveis, derivadas de
celulose, atuando como reforo nas propriedades mecnicas e melhoria nas
propriedades de barreira.
Esse trabalho compreendeu ainda os seguintes objetivos especficos:
1) Determinar o tamanho de partculas variando a concentrao de
polmeros na sntese, a fim de se obter sistemas com possvel controle de tamanho.
2) Caracterizar as nanopartculas quanto morfologia, potencial zeta,
distribuio de tamanho, FT-IR, anlise trmica, dando nfase principalmente para
o sistema de sntese desenvolvido por este grupo, baseado na polimerizao em
molde.
3) Determinar a melhor condio de preparo dos filmes, a fim de se
obter filmes homogneos.
4) Caracterizar os filmes quanto s propriedades mecnicas e de
barreira com o objetivo de se otimizar as propriedades dos filmes.
CAPTULO I: Reviso Bibliogrfica
1.1. Nanotecnologia aplicada em embalagens

A nanotecnologia, a manipulao da matria na escala dos tomos e
molculas (um nanmetro [nm] um bilionsimo de metro), est rapidamente
convergindo com a biotecnologia e tecnologia da informao para alterar
radicalmente os sistemas da alimentao e agricultura.
A nanocincia e a nanotecnologia so consideradas atualmente, como
um dos mais fascinantes avanos nas tradicionais reas do conhecimento e
constituem um dos principais focos das atividades de pesquisa, desenvolvimento e
inovao em todos os pases industrializados (CHAVES, 2002; PIRES, 2004).
Atualmente, a embalagem e o monitoramento de alimentos constituem
o foco principal de pesquisa e desenvolvimento nanotecnolgico da indstria de
alimentos. As embalagens que incorporam nanomateriais podem ser ativas, o que
significa que podem responder a condies ambientais ou se autoconservarem, ou
inteligente, significando que podem alertar o consumidor sobre contaminao,
condies inadequadas de estocagem e/ou presena de patgenos.
Existem vrios tipos diferentes de nanoestruturas, onde dependendo do
material de composio e tipos de snteses, podem variar suas caractersticas.
Dentre os materiais nanoestruturados as nanopartculas merecem destaque, devido
ao grande nmero de estudos realizados nesses sistemas. As nanopartculas podem
ser divididas em orgnicas (nanopartculas polimricas, que sero aplicadas em
nosso trabalho) e inorgnicas (nanopartculas metlicas e xidos).
1.2. Nanopartculas polimricas

O termo nanopartcula inclui as nanocpsulas e as nanoesferas, as
quais diferem entre si segundo a composio e organizao estrutural (FIGURA
1.1). As nanocpsulas so constitudas por um invlucro polimrico disposto ao
redor de um ncleo oleoso, ou seja, h diferenciao de ncleo. Por outro lado, as
6
nanoesferas, que no apresentam leo em sua composio, so formadas por uma

matriz polimrica, onde a diferenciao de ncleo no observada, trata-se de uma
matriz mais homognea.
FIGURA
1.1:
Diferenciao
estrutural
entre
nanoesferas
nanocpsulas.
As nanopartculas polimricas podem ser sintetizadas a partir de
polmeros sintticos como poliacrilatos e policaprolactona (PCL) ou polmeros
naturais como gelatina e quitosana (PANYAM e LABHASETWAR, 2003;
QURRAT-UL-AIN et al., 2003). Vrios mtodos de preparao so encontrados
na literatura. Esses mtodos podem ser classificados em duas principais categorias:
(1) as que requerem uma reao de polimerizao ou (2) as que utilizam
diretamente uma macromolcula, ou um polmero pr-formado (SCHAFFAZICK
et al., 2003).
No caso da sntese de nanopartculas polimricas, um material que est
sendo bastante utilizado a quitosana. Uma grande variedade de mtodos de
sntese e aplicaes de nanopartculas de quitosana encontrada na literatura
(BORGES et al., 2007; AJUN et al., 2009; DU et al., 2009). No presente trabalho
foram utilizados dois mtodos de sntese: polimerizao em molde e gelatinizao
ionotrpica.
1.2.1. Polimerizao em molde

A polimerizao em molde ocorre atravs de interaes cooperativas
(interaes hidrofbicas, ligaes de hidrognio e foras eletrostticas) entre os
grupos complementares de molculas de monmeros e o molde, formando um
complexo polieletroltico (Polowinski, 2002). Interaes de van der Waals no
especficas em combinao com interaes estereoqumicas do polmero em
formao com o molde, tambm pode levar polimerizao em molde. De modo
geral, forma-se um gel interpolimrico compacto ou um precipitado de complexo
polimrico agregado. A presena de um molde normalmente afeta vrias
caractersticas da polimerizao, tais como a cintica, a massa molar e a
microestrutura do polmero formado.
O mecanismo de polimerizao em molde depende do grau de
adsoro ou complexao do monmero (M) pelo molde:
M + -T- -T(M)onde -T- significa um stio do molde. A constante de equilbrio de
adsoro, KM , depende de alguns fatores tais como o modo de interao, a
temperatura e o solvente. Dois casos extremos podem ser discutidos: KM = e KM
= 0. Quando KM se aproxima do (tipo I), o monmero est completamente
adsorvido por todos os stios do molde por foras eletrostticas ou ligaes de
hidrognio. Uma forte preferncia do molde pelo monmero indica que o molde
pode ser insolvel no solvente na ausncia do monmero. Se o molde solvel em
um solvente apropriado, ento o solvente pode competir com o monmero pelos
stios T, reduzindo KM. Deste modo, apenas variando o solvente, pode-se ajustar o
KM e portanto, o modo de propagao do molde. Quando KM se torna muito
pequeno, a propagao do molde se procede s custas da reao com o monmero

adsorvido adjacentemente.
Com KM = 0 (tipo II) as macromolculas do molde esto praticamente
solvatadas pelo solvente. Um pr-requisito para a propagao em molde sob esta
condio que o oligmero formado na soluo (ou seja, a polimerizao se inicia
fora do molde) se complexa com o molde, depois de atingido um tamanho crtico.
A partir da, a propagao procede ao longo do molde pela adio de molculas de
monmero advindo da soluo, presente na vizinhana do molde. Esses dois tipos
de reaes podem ser ilustrados pelos esquemas apresentados nas FIGURAS 1.2 e
1.3.
FIGURA 1.2: Representao esquemtica da polimerizao em molde

tipo I. (POLOWINSKI, 2002)
FIGURA 1.3: Representao esquemtica da polimerizao em molde

tipo II. (POLOWINSKI, 2002)
1.2.2. Gelatinizao Ionotrpica

Uma propriedade da quitosana, muito interessante, sua habilidade de
gelatinizar em contato com polinions especficos. Esse processo de gelatinizao
se deve formao de reticulao inter- e intramolecular mediada por esses
polinions. O mtodo de gelatinizao ionotrpica (FIGURA 1.4) um dos
mtodos mais utilizados na obteno de nanopartculas de quitosana (CALVO et
al., 1997; GAN et al., 2005). Essa tcnica envolve a adio, temperatura
ambiente, de uma fase alcalina (pH 7-9) contendo tripolifosfato (TPP) em uma fase
cida (pH 4-6) contendo quitosana. As nanopartculas so formadas imediatamente
aps a mistura das duas fases atravs de ligaes inter- e intramoleculares formadas
entre os fosfatos do TPP e os grupos amino da quitosana.
10
FIGURA 1.4: Gelatinizao da quitosana com tripolifosfato de sdio.

A formao de nanopartculas de quitosana-TPP de alto rendimento
com tamanho nanomtrico e densidade de carga predeterminada, pode ser
simplesmente manipulada e controlada variando-se as condies de processo como
concentrao de quitosana, razo em massa de quitosana e TPP e valores de pH.
1.3. Quitosana
A quitina um polissacardeo natural que se destaca do ponto de vista
qumico por apresentar um grupo acetamido. Sua desacetilao conduz a um novo
biopolmero denominado quitosana (KUMAR et al., 2000).
Durante os ltimos trinta anos, estes biopolmeros vm despertado
bastante interesse junto comunidade cientfico mundial, devido principalmente ao
grande potencial de aplicao apresentado por estes materiais em diversas reas
(SHAHIDI e ARACHCHI, 1999). Este fato observado tanto para formas
naturais como para os derivados. Entretanto, o reconhecimento cientfico, como j
comentado anteriormente, no se deu imediatamente aps a descoberta, mas s veio
depois do reconhecimento das propriedades qumicas e fsicas.
11
A confirmao de presena de glucasamida na estrutura desses

polissacardeos, que possui como caracterstica bsica um grupo amino no carbono
2, os tornaram especiais do ponto de vista qumico, fsico e biolgico (HIRANO et
al., 1999).
Sendo assim, a quitosana um polissacardeo derivado da quitina,
cujas estruturas so mostradas nas FIGURAS 1.5a e 1.5b, respectivamente.
Apresenta, em maior proporo na cadeia polimrica, unidades de - (1 - 4) 2
amino 2 desxi D glicose e, em menor nmero, unidades de - (1 4) 2
acetamido 2 desxi D glicose da quitina. Possui semelhana na sua estrutura
qumica com a celulose, porm exibe propriedades diferenciadas devido presena
dos grupos amnicos (BELITZ e GROSCH, 1992).
(a)
(b)
FIGURA 1.5: Representao da estrutura primria da quitosana (a) e
quitina (b) onde n o grau de polimerizao.
A quitosana pode ser encontrada naturalmente na parede celular de
fungos, mas sua maior fonte disponvel obtida atravs do processo de
12
desacetilao da quitina, polissacardeo encontrado abundantemente na natureza e

que constitui o exoesqueleto de insetos e crustceos (SOLOMONS, 1996).
A prtica industrial mais comum, utilizada no processo de
desacetilao, e que tambm bastante empregada em laboratrio de pesquisas
aquela na qual a desacetilao da quitina realizada em suspenso de soluo
aquosa de hidrxido de sdio, sendo que a concentrao dessa soluo, o excesso
de lcali, o tempo e a temperatura da reao so variveis, conforme o
procedimento adotado (FIGURA 1.6). Assim, no se pode definir uma condio
padronizada para a realizao dessa reao. Entretanto, NO et al. (1992) afirmam
que a eficincia da desacetilao e as caractersticas da quitosana so afetadas pelos
seguintes fatores:
a) temperatura e tempo de reao;
b) concentrao da soluo de lcali e adio de diluente (lcoois de
cadeia curta e cetonas so empregados);
c) razo quitina/lcali;
d) tamanho das partculas de quitina;
e) atmosfera da reao e presena de agentes que evitem a
despolimerizao.
Quitina
quitosana
so
polmeros
atxicos,
biodegradveis,
biocompatveis e produzidos por fontes naturais renovveis, cujas propriedades

vm sendo exploradas em aplicaes industriais e tecnolgicas h quase setenta
anos (ROBERTS e GOOSEN, 1996).
Devido as suas caractersticas atxicas e de fcil formao de gis, a
quitosana tem sido considerada, h dcadas, como um composto de interesse
industrial e especialmente de uso farmacutico (CAMPANA-FILHO et al., 2000).
Recentemente, contudo, uma srie de estudos tem sido publicada, caracterizando o
13
uso da quitosana como cobertura de alimentos ou revestimentos protetores em

frutas e legumes processados (COMA et al., 2002; EUSABEE et al., 2008).
FIGURA 1.6: Esquema da obteno da quitina e quitosana.
Estes trabalhos enfocam, essencialmente, as propriedades antifngicas

e antibacterianas da quitosana, conforme demonstrado por NO et al. (2007),
indicando, por conseguinte, o seu uso potencial sobre superfcies cortadas ou sobre
frutos com alta taxa de maturao ps-colheita. Como a quitosana se constitui de
fibras no-digerveis, no apresenta, portanto, valor calrico, independentemente da
quantidade ingerida, o que mais um atrativo para a indstria alimentar.
14
DEVLIEGHERE
et
al.
(2004)
investigaram
atividade
antimicrobiana da quitosana, suas interaes com os componentes alimentcios e

sua aplicabilidade no recobrimento de frutas e vegetais. Neste estudo verificou-se
que o retardamento do crescimento microbiano ficou limitado a produtos com baixa
concentrao de protenas e NaCl. Com relao ao recobrimento de frutas e
verduras, no entanto, o efeito foi promissor quanto s frutas, porm, foi verificada a
adio de um leve gosto amargo para as verduras.
CHIEN et al. (2007), trataram fatias de manga com solues de
quitosana, a diferentes concentraes, armazenadas a 6 C. As coberturas no
afetaram o sabor natural da manga em fatias e a caracterstica de cor no diferiram
das amostras in natura. Alm disso, inibiram crescimento de microrganismos e
prolongaram a qualidade e a vida de prateleira da manga.
1.4. Matrizes polissacardicas

A utilizao de revestimentos comestveis ou biodegradveis com o
intuito de retardar a desidratao no recente. J no sculo XVI, os europeus
protegiam a carne da perda de umidade atravs da aplicao de gordura animal
(LABUZA e CONTRERAS, 1981).
Dentre as principais classes de materiais que so utilizados na
formao de filmes esto: polissacardeos, lipdios e protenas. Dentre esses os
polissacardeos merecem destaque.
Os polissacardeos apresentam caractersticas coloidais e, quando em
contato com o solvente apropriado ou agente de intumescimento, produzem gis ou
suspenses de elevada viscosidade mesmo em baixas concentraes. Apresentam
uso consagrado na indstria alimentcia e farmacutica, atuando como agentes
filmgenos, espessantes, emulsionantes, estabilizantes, formadores de matrizes
15
hidroflicas e hidrogis, entre outras aplicaes, principalmente devido a suas

caractersticas biodegradveis (WHISTLER e MILLER, 1997).
O grande crescimento na utilizao de polmeros biodegradveis e
sistemas polimricos aquosos, observado nas ltimas duas dcadas, esto
diretamente relacionados reduo do impacto ambiental. Por exemplo, o
crescente aumento na quantidade de materiais plsticos desperdiados e
descartados, sendo que uma parte disso oriunda das embalagens, tm levado
vrios pases a se mobilizarem para minimizar e tentar solucionar problemas
ambientais. As embalagens produzidas com polmeros sintticos convencionais so
consideradas inertes ao ataque imediato de microrganismos. Essa propriedade faz
com que esses materiais apresentem um longo tempo de vida til e,
conseqentemente, provoquem srios problemas ambientais, visto que, aps o seu
descarte, demoram em mdia 100 anos para se decomporem totalmente (ROSA,
2001).
Plsticos ou polmeros biodegradveis so aqueles que degradam sob a
ao de organismos vivos, e tambm por meio de reaes abiticas tais como fotodegradao, oxidao e hidrlise, que podem alterar o polmero devido a fatores
ambientais (RAGHAVAN, 1995; AMASS et al., 1998). Dentre estes materiais,
polissacardeos, como derivados de celulose, quitina/quitosana, alginato e
carragenina so extensivamente usados em alimentos, cosmticos e na medicina,
devido s suas diferentes propriedades e biodegradabilidade. A hidroxipropil
metilcelulose (HPMC), um ter de celulose no qual os hidrognios e grupos
hidroxilas da celulose foram parcialmente substitudos por alquil ou por grupos
alquil substitudos, para modificar as caractersticas da celulose nativa. um
polmero altamente solvel em gua e de fcil obteno de filmes, e j largamente
aplicado na indstria alimentcia.
16
1.5. Hidroxipropil metilcelulose (HPMC)

A celulose formada por unidades D-glicopiranosdicas, unidas por
ligaes 14 numa cadeia longa e no-ramificada, as quais levam a formao de
uma cadeia linear. Os trs grupos hidroxilas por unidade monomrica formam
fortes
ligaes
secundrias
entre
as
cadeias,
impedindo
sua
fuso
(CANEVAROLO, 2002). Devido sua infusibilidade e insolubilidade, a celulose

geralmente convertida em derivados para tornar-se mais processvel. O nmero
mdio de hidroxilas que so substitudas em um determinado produto conhecido
como grau de substituio (GS). Todos os derivados da celulose importantes so
produtos da reao de um ou mais dos trs grupos hidroxilas, que esto presentes
em cada unidade glicopiranosdica (CHANDRA e RUSTGI, 1998). A estrutura do
HPMC encontrada na FIG. 1.7 (PEKEL et al., 2004).
Derivados de celulose so principalmente utilizados em embalagens,
devido sua biodegradabilidade. Uma limitao destes materiais sua
sensibilidade gua, produzindo uma perda de propriedades quando o grau de
hidratao aumenta (COMA et al. 2003).
FIGURA 1.7: Estrutura qumica da hidroxipropil metilcelulose, onde n

o grau de polimerizao. (R = -CH2CH(OH)CH3, CH3 ou H)
BALASUBRAMANIAM et al. (1997) utilizaram filmes de HPMC no
recobrimento de almndegas de frango fritas em leo de amendoim. Este filme
17
reduziu a perda de umidade e a quantidade de leo absorvida a partir de 40

segundos de fritura, entre 50 a 90 C.
HIREMATH et al. (2002) estudaram a miscibilidade entre polivinil
pirrolidona (PVP) e HPMC. Os resultados mostraram que os polmeros formaram
blendas miscveis em toda faixa de composio. Atravs de infravermelho, os
autores demonstraram que ocorre forte ligao de hidrognio intermolecular entre o
grupo carbonila do PVP e grupos hidroxila do HPMC.
Apesar da grande capacidade do HPMC em formar filmes, a
elaborao do mtodo de sntese dos filmes e mtodos para melhoria das
propriedades, tanto de barreira quanto mecnicas, so etapas que devem ser levadas
em considerao no estudo.
1.6. Formao de filmes

Existe diferena em relao a recobrimentos comestveis e filmes. Os
recobrimentos so aplicados ou confeccionados diretamente sobre o produto ou
alimento a ser protegido enquanto filmes so estruturas independentes que podem
ser utilizadas para envolv-los, aps sua fabricao (AZEREDO, 2003). Os filmes
podem localizar-se na superfcie ou como finas camadas entre diferentes partes do
produto. No nosso trabalho estamos desenvolvendo a produo de filmes e no de
recobrimentos. Ou seja, a preparao do filme feita em separado ao produto que
este vai proteger.
O processo de revestimento de uma matriz por um filme polimrico
envolve foras de coeso, que atuam entre as cadeias do polmero formador do
filme, e foras de adeso, que atuam entre o filme e o suporte (CARVALHO,
1996). Entre os materiais que constituem os suportes, so citados na literatura: o
acrlico (TPIA-BLACIDO et al., 2005), o poliestireno (AUDIC e CHAUFER,
18
2005), o vidro (GODBILLOT et al., 2006), o polietileno (CARVALHO, 1996) e

o poli(tetrafluoretileno), Teflon (HOSNY et al., 1998).
Duas tcnicas podem ser usadas, basicamente, para a obteno de
filmes polimricos livres: o processo de nebulizao (spraying) e o processo
conhecido como evaporao do solvente (solvent casting). Durante o processo de
spraying, o filme formado por deposio de gotculas atomizadas, formando
camadas homogneas de filmes (KFURI, 2003). O processo de evaporao do
solvente envolve a disperso do polmero em um solvente ou mistura de solventes
adequados, formando um sistema relativamente viscoso. A disperso ento
vertida sobre uma superfcie no adesiva (suporte) e levada para uma estufa para
que o solvente evapore.
Depois que todo o solvente foi evaporado, o filme seco pode ser
retirado do suporte. Alguns fatores, tais como o tipo do solvente utilizado e as
condies de evaporao (temperatura), exercem forte influncia nas propriedades
finais de filmes polimricos (CARVALHO, 1996).
Alteraes estruturais nos filmes podem ser obtidas se as disperses de
polmeros so preparadas com solventes adequados ou no, ou se so preparadas
com uma mistura desses solventes. Pode-se dizer que um solvente adequado para
um polmero quando os valores dos parmetros de solubilidade do solvente e do
polmero forem semelhantes. Em solventes adequados, as molculas polimricas
apresentam uma conformao em hlice de forma expandida. Durante a evaporao
do solvente, h um aumento da concentrao da disperso. Assim, as foras
intermoleculares, entre os segmentos das cadeias de uma molcula polimrica e
tambm entre os segmentos das cadeias das molculas polimricas da vizinhana,
tornam-se cada vez mais eficazes e o filme resultante formado por uma estrutura
densa e forte, devido ao entrelaamento das cadeias.
19
Uma outra situao ocorre se o polmero for colocado em uma soluo

diluda contendo solventes adequados ou solventes no adequados. As hlices
polimricas so compactas e interagem somente superficialmente quando o
solvente evaporar. O filme resultante heterogneo, pois sua estrutura apresentar
microporos. Se o polmero for preparado com uma mistura de solventes, devido s
diferentes taxas de evaporao de cada componente da mistura, uma situao
crtica ocorrer durante a formao do filme, na qual a separao do polmero a
partir da soluo acontecer (formao do gel).
A estrutura do filme polimrico dependente do estgio no qual ocorre
a separao de fases. Se a separao ocorrer precocemente, por exemplo, antes da
formao do gel, ento ser obtido um filme com poros abertos em sua estrutura.
De uma outra forma, se a separao ocorrer em um estgio posterior da formao
do filme, quando as molculas do polmero j estiverem interagindo fortemente
(aps a formao do gel), ento filmes contendo poros fechados em sua estrutura
sero formados. E se nenhuma separao ocorrer, filmes com estrutura densa sero
formados de maneira similar aos filmes preparados com bons solventes
(KROCHTA et al., 1994; JONES e MEDLICOTT, 1995).
Uma das preocupaes na tcnica de evaporao do solvente manter
constante para todos os filmes que sero sintetizados e analisados, as mesmas
condies de preparao, como: temperatura, solvente, tempo de evaporao e
suporte.
1.7. Propriedades dos filmes

Os filmes utilizados em alimentos no devem apresentar sabor para
no serem detectados durante o consumo do produto alimentcio que foi coberto ou
embalado. Quando os filmes apresentarem um aroma ou sabor particular, suas
20
caractersticas sensoriais devem ser compatveis ao alimento (DEBEAUFORT et

al., 1998).
Os filmes para embalagens devem apresentar os seguintes requisitos:
alta eficincia barreira (vapor de gua e gs) e mecnica; estabilidade trmica,
obteno por tecnologia de processamento simples, no poluente e de baixo custo,
tanto de matrias primas como de processo (DEBEAUFORT et al., 1998).
A eficincia barreira de gua desejvel para retardar a desidratao
da superfcie de produtos frescos (carne, frutas e verduras) ou congelados. Muitos
produtos requerem embalagens que sejam barreira ao vapor de gua para evitar
ganho ou perda de umidade. A migrao de vapor de gua um dos principais
fatores de alterao da qualidade sensorial, caractersticas microbiolgicas, fisicoqumicas e sensoriais bem como estabilidade de estocagem.
Filmes preparados com polissacardeos apresentam alta taxa de
permeabilidade ao vapor de gua, devido principalmente, a grande solubilidade
apresentada por esses. Assim esse um parmetro que necessita ser melhorado.
O controle das trocas gasosas, particularmente do oxignio, permite o
melhor controle da maturao das frutas ou a reduo da oxidao de alimentos
sensveis ao oxignio. A transferncia de vapores orgnicos deve ser diminuda a
fim de reter os compostos de aroma no produto durante a estocagem ou prevenir a
penetrao de solventes no alimento, o que pode envolver toxicidade ou sabor no
caracterstico (off-flavor) (GENNADIOS e WELLER, 1990). A deteriorao
dos alimentos causada principalmente pelo crescimento microbiano nas
superfcies dos alimentos (TORRES e KAREL, 1985). A utilizao das pelculas
que apresentam baixa taxa de permeabilidade a gases, como as sintetizadas por
polissacardeos, reduz o acesso do oxignio aos tecidos, minimizando tais
alteraes (KESTER e FENNEMA, 1986).
21
Para que as embalagens no percam sua proteo pelo manuseio ou

armazenamento necessrio que os filmes apresentem uma certa resistncia
ruptura, abraso e tambm uma certa flexibilidade, que permita a deformao do
filme sem a sua ruptura (VICENTINI e CEREDA, 1999).
Assim, uma importante propriedade dos filmes polimricos sua
resposta aplicao de uma fora, indicada por dois tipos principais de
comportamentos: o elstico e o plstico. Materiais elsticos iro retornar sua
forma original desde que a fora seja removida. Materiais plsticos no retomam
sua forma. Nestes, o fluxo ocorre semelhantemente a um lquido altamente viscoso.
A maioria dos filmes polimricos sintticos demonstra uma combinao dos
comportamentos elstico e plstico, apresentando comportamento plstico aps o
limite elstico ter sido excedido. A FIGURA 1.8 exemplifica o comportamento de
um material viscoelstico sob tenso.
FIGURA 1.8: Representao grfica das propriedades mecnicas de

tenso versus deformao. FONTE: (WARD e HARDLEY, 1998).
Uma das propriedades mecnicas apresentadas pelos filmes so
resistncia trao e elongao. A resistncia trao a mxima tenso suportada
pelo filme at o momento de sua ruptura. A elongao a medida de maleabilidade
do filme e pode ser considerada como uma caracterstica que define a habilidade do
22
filme em deformar antes de ocorrer sua ruptura. Baixos valores de elongao

implicam em filmes quebradios (MACLEOD et al., 1997). Outra propriedade
mecnica avaliada em filmes polimricos o mdulo de elasticidade (mdulo de
Young), que a relao linear entre a tenso aplicada e a deformao sofrida e
determinado pela inclinao da curva de tenso versus deformao na regio
elstica.
23
CAPTULO II: Sntese e Caracterizao de

Nanopartculas de Quitosana Sintetizadas Por
Diferentes Mtodos
24
2.1. Introduo
A quitosana (QS) um biopolmero obtido da desacetilao da quitina,
que o maior constituinte de exoesqueletos de crustceos e outros animais
marinhos (BOONSONGRIT et al., 2006). Atualmente a quitosana vem sendo
utilizada no tratamento de guas, produo de cosmticos, drogas e medicamentos,
aditivos alimentcios, membranas semipermeveis e no desenvolvimento de
biomateriais (JIANG et al., 2006; ALMENAR et al., 2009; XIAO et al., 2009).
A abundncia (baixo custo), biodegradabilidade, no toxicidade e
origem natural, fazem da quitosana um material bastante vivel na utilizao na
agricultura.
O estudo de nanopartculas (NPs) de quitosana j algo bem difundido
no meio cientfico. S que a cada ano, vem crescendo o nmero de descobertas
inovadoras na rea de nanotecnologia utilizando a quitosana (NASCIMENTO et
al., 2001; WU et al., 2005; BODNAR et al., 2005; DOUGLAS et al., 2006). As
nanopartculas (NPs) tem sido desenvolvidas visando inmeras aplicaes, tais
como: aumentar a capacidade de armazenamento e processamento de dados dos
computadores; criar novos mecanismos para a liberao de medicamentos mais
seguros e menos prejudiciais ao paciente dos que os disponveis de hoje; criar
materiais mais leves e mais resistentes do que metais e plsticos, para aplicao em
construes, automveis e avies; e diversas outras inovaes.
Novos meios de energia, proteo ao meio ambiente, menor uso de
matrias primas escassas so possibilidades concretas dos desenvolvimentos em
nanotecnologia que esto ocorrendo.
A literatura relata vrias maneiras diferentes de snteses de
nanopartculas, com diferentes tamanhos (JANES e ALONSO, 2003; LIU et al.,
2005). Entretanto, as nanopartculas de quitosana na maioria dos trabalhos
apresentam tamanhos maiores que 125 nm, usualmente na faixa de 175 600 nm.
25
A obteno de nanopartculas de quitosana com tamanhos menores

algo realmente inovador no campo da nanotecnologia.
Essa etapa teve como objetivo, sintetizar nanopartculas de quitosana a
partir de dois mtodos diferentes: i) polimerizao em molde atravs da
polimerizao de cido metacrlico em soluo de quitosana (QS-PMAA); ii)
gelatinizao ionotrpica da quitosana com tripolifosfato de sdio (QS-TPP).
2.2. Materiais e Mtodos

2.2.1. Materiais
2.2.1.1. Sntese 1
- Quitosana; a quitosana utilizada foi da Polymar, (Fortaleza-Brasil).
(MW= 71,3 kDa, grau de desacetilao 94%, fornecido pelo fabricante).
- Persulfato de potssio (K2S2O8); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
- cido metacrlico (MAA); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
2.2.1.2. Sntese 2
- Quitosana; Polymar, Fortaleza-Brasil. (MW= 71,3 kDa, grau de
desacetilao 94%).
- Tripolifosfato de sdio (TPP); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
2.2.2. Mtodos
2.2.2.1. Preparao das Nanopartculas
2.2.2.1.1. Mtodo de polimerizao do cido metacrlico
(QS-PMAA) - Sntese 1
As nanopartculas foram preparadas por polimerizao do cido
metacrlico em soluo de quitosana, a partir de duas etapas (MOURA et al.,
26
2008). Na primeira etapa, a quitosana foi solubilizada em soluo de cido

metacrlico (0,5% v/v) por 12 horas, sob agitao magntica. As concentraes de
quitosana utilizada na sntese foram de 0,2; 0,5 e 0,8 (% m/v). Na segunda etapa,
adicionou-se sob a soluo previamente solubilizada 0,2 mmol de K2S2O8 com
agitao mecnica. O sistema foi fechado e mantido a 70 C por 1 hora, para que
ocorresse a polimerizao do cido metacrlico (FIGURA 2.1). Com o aumento de
poli(cido metacrlico) na soluo, essa muda de clara para uma suspenso
opalescente, indicando a formao de nanopartculas QS-PMAA.
FIGURA 2.1: Fotografia da sntese das nanopartculas.
Finalmente, aps 1 hora de reao, a suspenso foi imersa em banho

de gelo por 30 minutos. As nanopartculas foram centrifugadas e ento resuspensas em gua deionizada (Mili-Q). Na FIGURA 2.2, apresentada uma foto
da soluo de nanopartculas antes e aps a formao das nanoestruturas.
27
FIGURA 2.2: Foto das solues: com ausncia (soluo transparente)

e presena (soluo opalescente) de nanopartculas.
2.2.2.1.2. Mtodo de gelatinizao ionotrpica (QS-TPP) Sntese 2

Para a preparao de nanopartculas de quitosana e tripolifosfato de
sdio, utilizou-se o mtodo de gelatinizao inica de grupamentos da QS com
TPP.
As nanopartculas foram obtidas de acordo com o procedimento,
reportado primeiramente por CALVO et al. (1997). Na primeira etapa, solubilizouse a quitosana em soluo de cido actico nas concentraes de 3,0 e 4,4 mg/mL.
Deixou-se a quitosana solubilizando em cido, por cerca de 6 horas. Aps esse
perodo, a soluo foi alocada em um homogenizador (Polytron PT 3000Brinkmann). Sob agitao de 4500 rpm, 28 mL de soluo de TPP com
concentrao de 1,2 e 2,1 mg/ mL foram adicionados em 70 mL das solues de
QS (TABELA 2.1). A taxa de adio da soluo de TPP foi de 1 mL/min. A zona
de suspenso opalescente, que apareceu no sistema aps a adio do TPP, foi
atribuda as nanopartculas formadas.
28
TABELA 2.1: Trs diferentes tipos de nanopartculas QS-TPP

formadas, com diferentes concentraes dos reagentes.
Concentrao de
Concentrao de
Quitosana (mg/mL)
TPP (mg/mL)
3,15
0,6
2,14
0,6
2,14
0,3
Na Figura 2.3, apresentado uma fotografia dos equipamentos

utilizados na sntese das nanopartculas.
FIGURA 2.3: Equipamentos utilizados na sntese das nanopartculas

QS-TPP.
29
2.2.2.2. Caracterizao de nanopartculas QS-PMAA

2.2.2.2.1. Anlise por FT-IR
A partir das nanopartculas sintetizadas, estas foram centrifugadas,
congeladas em nitrognio lquido e liofilizadas, para s depois serem misturadas
com brometo de potssio (KBr) e prensadas em alta presso, formando pastilhas.
Espectros de FT-IR foram obtidos registrando 128 varreduras de 4000 a 400 cm-1,
com resoluo de 2 cm-1, em um Perkin Elmer Spectrum, modelo Paragon 1000.
As anlises de FT-IR foram realizadas na quitosana pura e nas NPs
com diferentes quantidades de QS. As anlises de FT-IR foram importantes para
analisar o mecanismo pelo quais as NPs so formadas. Permitir tambm, a
caracterizao estrutural e composio qumica dos diferentes tipos de polmeros e
dos materiais, elucidando os tipos de ligaes qumicas e os grupos funcionais
presentes nos polmeros utilizados no trabalho.
2.2.2.2.2. Anlise por RMN

Os ensaios de RMN C13 VACP-MAS foram realizados em um
espectrmetro Varian Inova 400, com campo de 9,4 T. Os espectros de RMN no
estado slido foram obtidos utilizando os seguintes parmetros: pulso de /2,
tempo de aquisio de 12,8 ms, e tempo de repetio de 1 ms.
Foram utilizados aproximadamente 200 mg de amostra em rotores de
zircnio com 5 mm de dimetro.
As amostras foram analisadas com frequncia de rotao de 6.500 Hz.
Todos os espectros foram filtrados usando funo de decaimento exponencial
(lb=10).
30
2.2.2.2.3. Tamanho mdio e distribuio do tamanho das

partculas
A distribuio do tamanho das partculas foi determinada no aparelho
Fiber Optic Quasi Elastic Light Scattering (FOQELS) (Brookhaven, USA), que
opera pelo princpio de difrao de raios laser. As medidas foram realizadas em
triplicata, na temperatura de 25 C. As anlises foram feitas, em solues com
diferentes concentraes de QS na sntese das nanopartculas (0,2; 0,5 e 0,8 %
m/v). Para nanopartculas obtidas a partir do mtodo de polimerizao em molde,
foram realizadas medidas de tamanho em diferentes pHs na faixa entre 3,0 - 9,0.
2.2.2.2.4. Anlise por Potencial Zeta

A carga superficial das partculas foi analisada por um Zeta Potencial
Analyzer (Brookhaven, USA). Nessas medidas, o KCl foi adicionado fase
dispersora, de modo que sua concentrao foi de 10-4 mol L-1, a fim de manter
constante a fora inica do meio. As medidas foram realizadas a temperatura
ambiente (25 C). Para nanopartculas obtidos a partir do mtodo de polimerizao
em molde, foram realizadas medidas de potencial zeta em diferentes pHs, onde a
faixa analisada foi pH 3,5 - 9,0. Todas as anlises foram realizadas em triplicata.
2.2.2.2.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)

As suspenses de partculas foram caracterizadas quanto forma das
partculas e homogeneidade da suspenso, atravs de Microscopia Eletrnica de
Transmisso (MET). O microscpio utilizado foi um Philips CM200. As amostras
foram sonificadas por 2 min, para obter melhor disperso e prevenir a aglomerao
das NPs. Uma gota da suspenso foi adicionada sobre uma grade de cobre e seca a
temperatura ambiente, para ento ser analisada por MET.
31
2.2.2.2.6. Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC)

Todas as medidas de Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC)
realizadas nas nanopartculas foram feitas utilizando um equipamento de DSC da
marca TA Instruments Q100.
Aproximadamente, 4 mg de amostra foram pesadas em panelas de
alumnio, essas panelas foram seladas e alocadas no equipamento. A programao
utilizada para todas as anlises foi: rampa de aquecimento de 20 at 450 C; razo
de 5 C/min sob atmosfera de nitrognio com vazo de 50 mL/min.
2.2.2.2.7. Termogravimetria (TG)

As
anlises
foram
realizadas
no
aparelho
TGA
Q-500.
Aproximadamente 5-6 mg da amostra foram analisados em panela de platina. Os

experimentos foram programados com rampa de aquecimento de 20 at 500 C,
com razo de aquecimento de 10 C/min para cada amostra. A vazo de nitrognio
foi mantido em 60 cm 3/min. Todas as anlises foram feitas em triplicatas.
2.2.2.3. Caracterizao nanopartculas QS-TPP

2.2.2.3.1. Anlise por FT-IR
As solues de nanopartculas foram centrifugadas, congeladas em
nitrognio lquido e liofilizadas (12 horas), para s depois serem misturadas com
brometo de potssio (KBr) e prensadas em alta presso, formando pastilhas.
Espectros de FT-IR foram obtidos registrando 128 varreduras de 4000
a 400 cm-1, com resoluo de 2 cm-1, em um Perkin Elmer Spectrum, modelo
Paragon 1000. As anlises de FT-IR foram realizadas na quitosana pura e nas NPs
com diferentes concentraes de materiais na sntese. A anlise permitir a
caracterizao estrutural e composio qumica dos diferentes tipos de polmeros e
32
dos materiais, elucidando os tipos de ligaes qumicas e os grupos funcionais

presentes nos polmeros utilizados no trabalho.
2.2.2.3.2. Tamanho de partculas e distribuio do

tamanho das partculas
A distribuio do tamanho das partculas foi medida no equipamento
Horiba LA 900, (Horiba Instruments Inc., Irvien, CA, USA), que opera pelo
princpio de difrao de raios laser. As medidas foram realizadas em triplicata na
temperatura de 25 C e pH 4,5.
2.2.2.3.3. Anlise por Potencial Zeta

A carga superficial das partculas foi analisada por um Zeta Potencial
Analyser (Brookhaven, USA). KCl foi adicionado fase dispersora, de modo que
sua concentrao foi de 10-4 mol L-1, a fim de manter constante a fora inica do
meio. As partculas foram analisadas na temperatura de 25 C e pH 4,5. Todas as
anlises foram realizadas em triplicata.

O procedimento foi similar ao descrito no item 2.3.2.7. As anlises
foram realizadas no aparelho TGA Q-500. Aproximadamente 5-6 mg da amostra
foram analisados em panela de platina. Os experimentos foram programados com
rampa de aquecimento de 20 at 500 C, com razo de aquecimento de 10 C/min
para cada amostra. A vazo de nitrognio foi mantida em 60 cm3/min. Todas as
anlises foram feitas em triplicatas.
33
2.2.2.3.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)

O procedimento foi similar ao descrito no item 2.2.2.2.5. As
suspenses de partculas foram caracterizadas quanto forma das partculas e
homogeneidade da suspenso, atravs de Microscopia Eletrnica de Transmisso
(MET). O microscpio utilizado foi um Philips CM200. As amostras foram
sonificadas por 2 min, para obter melhor disperso e prevenir a aglomerao das
NP. Uma gota da suspenso foi adicionada sobre uma grade de cobre e seca a
temperatura ambiente, para s ento ser analisada por MET.
2.3. Resultados e Discusses

2.3.1. Nanopartculas QS-PMAA
2.3.1.1. Sntese das nanopartculas
A quitosana um polmero que apresenta a caracterstica de um
polieletrlito positivo quando em soluo. Essa caracterstica faz com que a
quitosana apresente interao eletrosttica com o cido, o que provoca a formao
das nanopartculas, a partir, da polimerizao do cido na soluo.
O mecanismo de preparao das nanopartculas est presente na
FIGURA 2.4. Em se tratando de um mtodo de polimerizao em molde, a
quitosana insolvel em gua pura, atingindo uma completa solubilizao quando
o MAA adicionado na soluo. Isso indica que, tal como ocorre com o cido
actico nas solues comuns de quitosana, o MAA protonou os grupos NH2 da
quitosana. Quando a polimerizao comeou, a propagao das cadeias de PMAA
resultou em um aumento da densidade de carga, de modo que, ao tornar-se crtica,
os complexos polieletrlitos insolveis entre a quitosana e o poli(cido metacrlico)
so formados atravs de interaes eletrostticas. Naturalmente, as interaes
hidrofbicas e as ligaes de hidrognio no podem ser desconsideradas.
34
CH3
CH2
iniciador
70 C , 1 h
C O
OH
C O
OH
O )
N H2
OH
COO COO -
+ NH
COO
)n
CH 2 O H
CH3
)
Quitosana
( CH2
OH
cido Metacrlico
( CH2
CH3
+ NH
+ NH
COO COO - + NH3

COO
COO COO COO
+ NH
+ NH
+ NH
+ NH
- + NH3
COO COO - + NH3
COO
+ NH
+ NH
FIGURA 2.4: Mecanismo proposto de preparao das nanopartculas

(MOURA et al., 2008).
35
2.3.1.2. Anlise de FT-IR

A fim de estudar a interao existente entre o grupamento amina da
QS e o grupamento cido do PMAA foram realizadas as anlises de FT-IR.
O espectro de FT-IR pode ser observado na FIGURA 2.5 e foi
realizado nas nanopartculas contendo 0,2, 0,5 e 0,8 % (m/v) de quitosana e na
quitosana pura. O espectro da quitosana pura (FIG. 2.5a) apresenta picos
caractersticos: 1649 cm1 correspondente ao estiramento da ligao C=O de amina
I; 1083 1020 cm-1 devido ao estiramento do C-O e 620 cm-1 devido s vibraes
dos anis piranosdicos, de acordo com a literatura (TONHI e PLEBIS, 2002).
80
70
(a)
QS
Transmitncia (%)
60
(b)
50
40
0,2%
(c)
0,5%
30
20
(d)
0,8%
10
-10
2000
1500
1000
500
-1
Nmero de onda (cm )
FIGURA 2.5: Espectro de FT-IR da quitosana (2a) e nanopartculas

(2b-d).
Na FIG. 2.5b observamos que a banda em 1649 cm-1, que aparece
claramente no espectro da quitosana pura, diminui surgindo duas novas bandas em
1638 cm-1 (grupo COO-) e 1545 cm-1 (grupo NH3+), indicando a interao inica
entre PMAA e QS, caracterizando a formao de nanopartculas.
36
As bandas em 1703 e 1264 cm1 (C=O) confirmam a presena de

PMAA nas nanopartculas (AZHGOZHINOVA et al., 2004). O aumento da
quantidade de quitosana nas NPs (FIG. 2.5b-d) provoca uma mudana qumica
significativa, pois bandas em 1703 e 1264 cm-1 decrescem drasticamente, com
aumento concomitante das bandas em 1638 cm-1 e 1545 cm-1. Esse fato est
relacionado diretamente com o decrscimo na quantidade de PMAA, e aumento nas
interaes inicas entre PMAA e quitosana que passam a existir no sistema.
2.3.1.3. Anlise de RMN

A FIGURA 2.6, apresenta o espectro de RMN das nanopartculas de
QS-PMAA com 0,2, 0,5 e 0,8 % m/v de quitosana na sntese. Os picos C1 (105,7),
C2 (57,6), C3 (75,5), C4 (82,9), C5 (76,1) e C6 (61,5), que aparecem no
espectro da FIG. 2.6a correspondem estrutura da quitosana, estando de acordo
com a literatura (SILVA et al., 2007).
Os picos caractersticos do poli(cido metacrlico) reportados na
literatura so: C1 (183,6), C2 (43), C3 (57) e C4 (18,7). Para as nanopartculas
QS-PMAA os picos de RMN obtidos, esto prximos dos picos apresentados pela
QS e PMAA. Isto mostra que essa pequena diferena no deslocamento dos picos
acontece devido formao de nanopartculas, ou seja, a interao entre os dois
sistemas (FIG. 2.6b 2.6d).
Nos espectros das nanopartculas, o pico do C1 (183,6), referente ao
grupamento COO- do cido, se desloca para uma regio de campo mais baixo
(0,2% - 184,0; 0,5% - 188,5; e 0.8% - 190,8). Isso ocorre devido mudana na
massa relativa da razo dos grupos COO- / COOH, que reflete nas diferenas da
frequncia de vibrao. Os picos em 49 e 20 ppm so atribudos ao C2 e C4 do
PMAA, respectivamente. tambm observado um decrscimo na intensidade de
ambos os picos, quando a concentrao de quitosana na sntese das nanopartculas
37
aumentada. Com o aumento na quantidade de quitosana, uma maior quantidade de

cido utilizada para solubiliz-las. Os outros picos, presentes nos espectros das
nanopartculas, so atribudos estrutura da quitosana.
6
4
3
( C H2
CH2OH
C H3
1C
QS_C3
OH
2
O )
OH
NH2
QS_C4
cido poli(m etacrlico)
QS_C5
QS_C1
QS
Quitosana
QS_C1
QS_C2
(a)
PMAA_C2
NP 0,2%
PMAA_C3
PMAA_C4
(b)
PMAA_C1
(c)
NP 0,5%
(d)
NP 0,8%
200
150
100
50
Deslocamento Qumico (ppm)
FIGURA 2.6: Espectro de C13 VACP-MAS: a) quitosana pura; b)

0,2% (m/v) de quitosana na sntese das nanopartculas; c) 0,5% (m/v) na sntese e
d) 0,8% (m/v) na sntese. * Corresponde ao grupo CH3 acetil residual.
2.3.1.4. Anlise do tamanho mdio das partculas
Na TABELA 2.2, apresentada dependncia entre a quantidade de

quitosana na sntese e o tamanho mdio das nanopartculas.
Nesta tabela observa-se que o dimetro das partculas est diretamente
relacionado com a quantidade de quitosana utilizada na sntese. Nas mesmas
condies de preparao, quanto menor a massa de quitosana maior o tamanho
38
mdio das partculas, variando de 111 nm quando foi utilizado 0,2 % m/v de
quitosana at 60 nm para a massa de 0,8 % m/v.
TABELA 2.2: Valores de tamanho mdio para as diferentes NPs de
quitosana em pH = 4,0.
Nanopartcula
Tamanho mdio (nm)
0,2 % m/v de QS
111 4
0,5 % m/v de QS
82 2
0,8 % m/v de QS
60 4
A literatura mostra casos em que ocorre o aumento e tambm a

diminuio do tamanho de partculas com a adio de maior quantidade de
polmero na sntese.
No nosso trabalho a explicao foi baseada na determinao da razo
molar COOH/NH2. Para COOH/NH2 = 4,8/1, o tamanho de partcula foi de 110
nm (0,2 % m/v). Entretanto, quando a razo de COOH/NH2 = 1,2/1, o tamanho
mdio das partculas fica em torno de 60 nm (0,8% m/v). As partculas de QSPMAA so formadas por ligaes inter e intra-moleculares, entre grupamentos
carboxil do cido e aminos protonados da quitosana. Quando as nanopartculas so
formadas atravs da razo COOH/NH2 = 1,2/1, praticamente toda a quantidade do
cido MAA que remanescer na soluo (sem ser utilizado para solubilizar a
quitosana) interage com os grupos protonados da quitosana. Nesse caso o tamanho
das cadeias de PMAA que esto interagindo com as de QS menor. Com o
aumento da razo COOH/NH2, o tamanho das cadeias de PMAA dever aumentar,
resultando em expanso do volume da partcula (ver Fig. 2.4). Assim, os maiores
tamanhos de partculas foram observados para razes de COOH/NH2 maiores.
39
Explicao similar apresentada por HU et al. (2002), onde partculas menores

formadas a partir de QS e cido acrlico (AA) foram obtidas quando a razo
AA/QS 1/1.
Um fator interessante na pesquisa o fato de que, na maioria dos
trabalhos que sintetizam nanopartculas de quitosana, o tamanho mdio dessas
partculas foi superior a 125 nm (LIU et al., 2005; TANG et al., 2003). No
presente trabalho obteve-se o tamanho de 60 nm, com possibilidade de controle de
tamanho variando-se a quantidade de quitosana na sntese. Esse um outro fator de
grande importncia, pois o campo da pesquisa se expande para vrias outras
aplicaes que necessitam de partculas menores que 100 nm.
A distribuio do tamanho mdio das partculas unimodal com baixa
polidispersidade, como pode ser observado na FIGURA 2.7.
82 nm
25
110 nm
Intensidade
20
15
10
5
0
0
100
200
300
400
500
Tamanho mdio (nm)
FIGURA 2.7: Distribuio do tamanho mdio de nanopartculas de

QS-PMAA com 0,5 % (82 nm) e 0,2 % m/v (110 nm) de quitosana.
40
Informaes
relevantes
sobre
estabilidade
de
suspenses
nanoparticuladas podem ser obtidas mediante o monitoramento do pH, em funo

do tempo. Por exemplo, a alterao do pH pode ser indcio de degradao do
polmero (SCHAFFAZICK et al., 2003). Em um trabalho realizado por CALVO
et al. (1997), foi verificado uma diminuio da massa molar do polmero
policaprolactona em suspenses de nanocpsulas e de nanoesferas, aps 6 meses de

armazenamento, com conseqente diminuio do pH destas formulaes.
Outras informaes so a respeito da variao de tamanho mdio das
partculas, que pode ser obtido com a variao do pH nas solues.
A FIGURA 2.8 apresenta a relao entre tamanho mdio de partculas
Tamanho de Partcula (nm)
e pH, para suspenses de nanopartculas.

900
800
NP com 0,2%-m/v QS
NP com 0,5%-m/v QS
NP com 0,8%-m/v QS
300
200
100
pH
FIGURA 2.8: Dependncia do tamanho de partcula com a variao de

pH para concentraes de 0,2; 0,5 e 0,8% m/v de QS utilizadas na sntese.
Os tamanhos das nanopartculas aumentam com o aumento nos valores
do pH da soluo. Nanopartculas preparadas com 0,2 % m/v de quitosana
41
apresentam um aumento de tamanho de 99 para 218 nm com o aumento no pH da

soluo de 3,0 para 8,0. H duas razes possveis para essa transio. A primeira
que o aumento no pH aumenta o grau de ionizao e densidade de carga das
molculas de PMAA e como consequncia, as foras de repulses eletrostticas
inter- e intra-moleculares aumentam. Atravs disso, por efeito de intumescimento,
as partculas aumentam de volume. A segunda razo o aumento da insolubilidade
da quitosana com o aumento nos valores de pHs. Com o aumento da insolubilidade,
a quitosana comea a se agregar na suspenso, aumentando os valores de tamanho
mdio medido no aparelho.
As nanopartculas com tamanho menor, com 0,5 e 0,8% (m/v) de QS,
apresentam maior elevao de tamanho em pHs acima de 6. Esse fato ocorre
devido a serem sistemas menores, com maior proximidade dos grupos carregados
que fazem com que uns sentem mais a presena dos outros. Com isso, ocorre um
aumento de tamanho maior devido a maior repulso nesses sistemas.
Uma maior agregao das partculas em pH mais alcalino pode ser
observada na micrografia representada na FIGURA 2.9.
FIGURA 2.9: Micrografia de MET de nanopartculas de QS-PMAA

preparadas com 0,2% (m/v) de QS na sntese, equilibrada em pH 8,0.
42
2.3.1.5. Anlise do potencial zeta das partculas

A estabilidade de uma suspenso depende das propriedades fsicas das
partculas coloidais que as constituem, sendo necessrio determin-las para a
compreenso das interaes individuais de cada partcula que podem levar a
desestabilizao de uma suspenso. Em geral, busca-se maximizar as foras
repulsivas entre as partculas a fim de minimizar as interaes que levam a
formao de agregados, os quais desestabilizam as suspenses coloidais. Dessa
forma, as foras de interao nas superfcies dos colides so as responsveis pelo
comportamento das suspenses, sendo as foras eletrostticas repulsivas uma das
vias pelas quais as partculas podem resistir agregao.
A maior parte dos materiais macroscpicos ou particulados em contato
com um lquido adquire uma carga eltrica superficial, a qual pode ser gerada
devido dissociao de grupos ionognicos presentes na superfcie das partculas,
ou devido adsoro diferencial de ons da soluo na superfcie do colide. Esta
carga superficial influencia a distribuio dos ons prximos superfcie (SHAW,
1975). Considerando-se uma partcula carregada negativamente, ons de carga
positiva (contra-ons) so atrados pela superfcie e formam uma rgida camada

adjacente ao redor da mesma, conhecida como camada de Stern. Outros contra-ons
so tambm atrados pela partcula negativa, no entanto, so repelidos pela camada
de Stern. Isto resulta em uma camada difusa de contra-ons caracterizada pela alta
concentrao de ons positivos prximos partcula negativa e pela diminuio
gradual desta concentrao com o afastamento em relao partcula carregada, at
que seja atingido o equilbrio com a concentrao dos contra-ons em soluo. De
forma oposta, os ons negativos (co-ons) so repelidos pela superfcie da partcula
carregada negativamente, de maneira que na camada difusa h uma pequena
concentrao de co-ons prxima a partcula carregada. No entanto, a concentrao
de ons negativos tende a aumentar com o afastamento em relao partcula
43
carregada, em funo da diminuio do efeito repulsivo, at que o equilbrio com a

concentrao dos co-ons em soluo seja atingido (HUNTER, 1988).
Assim se constitui uma dupla camada eltrica a qual est dividida em
duas regies: uma interna que inclui ons fortemente ligados superfcie e uma
regio externa, onde a distribuio dos ons determinada pelo equilbrio entre
foras eletrostticas e movimento trmico (HUNTER, 1988). Quando um campo
eltrico aplicado a uma suspenso, cada partcula e os ons mais fortemente
ligados mesma se movem como uma unidade eletrocintica, e o potencial
determinado na superfcie de cisalhamento (superfcie imaginria constituda pelos
contra-ons ligados superfcie da partcula, bem como por algumas molculas do
solvente tambm ligada superfcie) chamado de potencial zeta (HUNTER,
1988), o qual pode ser utilizado para prever a tendncia das partculas coloidais a
agregao.
Na FIGURA 2.10 apresentada dependncia dos valores de
potencial zeta com variao no pH. As variaes dos valores de potencial zeta com
o pH resultam em mudanas na densidade de carga ao redor da partcula.
O potencial zeta positivo encontrado na superfcie das partculas
devido s caractersticas catinicas das cadeias de quitosana, em pH baixo. Com
um aumento na concentrao de quitosana, h um excesso de grupamento NH3+ em
relao aos grupamentos COO-, o que resulta em nanopartculas com valores
maiores de potencial zeta.
Com o aumento do pH para valores maiores que 4,6, um aumento nas
cargas superficiais negativas observado. Esse fato ocorre devido ionizao dos
grupamentos COO- do cido PMAA e a neutralizao dos grupamentos NH2 da QS.
Os resultados de potencial zeta so extremamente interessantes. Alm
de mostrarem que as nanopartculas QS-PMAA so sensveis ao pH, mostram que
controlando o pH a carga da superfcie pode ser alterada de positiva para negativa.
44
Essa caracterstica muito importante, pois pode servir para entender e aplicar
essas nanopartculas em sistemas como filmes de self-assembled, derivados de
vrios materiais de diferentes naturezas (BORATO et al., 2006; WU et al., 2006).
60
0,2 % (m/v)
0,5 % (m/v)
0,8 % (m/v)
Potencial Zeta (mV)
40
20
7,7
5,8
4,6
0
-20
-40
-60
10
11
pH
FIGURA 2.10: Dependncia do potencial zeta com a variao do pH

em suspenses de nanopartculas preparadas com 0,2; 0,5 e 0,8 % (m/v) de QS. As
anlises foram realizadas na temperatura de 25 C.
Com base nesses dados comprovamos que nossos resultados de
potencial zeta, esto de acordo com dados j relatados, de que o potencial zeta sofre
variao com mudanas no pH de positivo para negativo. E, alm disso, passa por
uma regio onde o sistema se torna instvel, ou seja, valores prximos de potencial
igual zero.
Outro fato interessante no nosso trabalho a grande estabilidade das
solues preparadas, ou seja, por um perodo de quatro meses nossa suspenso est
estvel, no apresentando indcio do aparecimento de agregados. Esse tempo
45
ainda maior para partculas preparadas com 0,2% de quitosana e que apresentam
tamanho de 110 nm.
2.3.1.5. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)

No Microscpio Eletrnico de Transmisso (MET), os eltrons
transmitidos so usados para formar a imagem de microestrutura da amostra,
resultante da interao entre os eltrons incidentes e a matria. Este fenmeno
ocorre devido ao espalhamento elstico dos eltrons pelo ncleo dos tomos da
amostra, com a mesma energia do eltron incidente, mas com uma alterao na
direo.
Todas
as
nanopartculas
analisadas
apresentam
morfologia
homognea, com uniforme distribuio de tamanho de partculas e esfricos

formatos, como apresentado na FIGURA 2.11.
Os tamanhos de partcula determinados pelas imagens de MET foram
de 38, 50 e 78 nm para sistemas contendo 0,8; 0,5 e 0,2 % (m/v) de quitosana na
sntese. Os tamanhos so menores que os medidos por FOQELS (60-110 nm em
pH = 4,0). Para a anlise de MET a suspenso de nanopartcula gotejada sobre
uma grade e deixada evaporar na temperatura ambiente, para s depois ser
realizada a anlise. Com a evaporao, a gua presente na nanopartcula
eliminada e esta sofre uma contrao, diminuindo de tamanho. Assim a anlise de
MET no muito recomendada para a determinao do tamanho das nanopartculas
em soluo, mas sim no estado seco indicando tambm a homogeneidade e forma
das NPs.
46
(b)
(a)
(c)
FIGURA 2.11: Micrografias de MET das nanopartculas de quitosana
preparadas com (a) 0,2; (b) 0,5 e (c) 0,8 (m/v) de quitosana a pH 4.
Com o objetivo de avaliar a caracterstica morfolgica das
nanopartculas variando-se o pH, foram analisadas as micrografias da NP com
0,2% (m/v) de QS no pH 7. As micrografias de MET das nanopartculas de QS so
mostradas nas FIGURA 2.12a e 2.12b (em pH 7,0 e 8,0 respectivamente).
Pode ser observado que em altos valores de pHs, as nanopartculas
apresentam maior facilidade de aglomerao. As nanopartculas de QS-PMAA so
formadas por interao entre as cargas positivas da quitosana e negativas do cido.
47
Por essa razo, como discutido anteriormente, com um aumento do pH alguns

fatores contribuem para a aglomerao. O primeiro fator a insolubilidade da
quitosana em pHs bsicos, o que ocasiona uma separao de fases no sistema, e um
segundo fator o maior nmero de carga negativa no sistema, que passa a
apresentar foras repulsivas, diminuindo a estabilidade e aumentando a facilidade
de aglomerao.
(a)
(b)
FIGURA 2.12: Micrografias de MET de nanopartculas de Q

sintetizadas com 0,2% (m/v) em pH = 4,0 e equilibradas aps a sntese em a) pH=
7,0 e b) pH= 8,0.
2.3.1.6. Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC)

Na FIGURA 2.13 apresentado um termograma de DSC para os trs
diferentes tamanhos de partculas e quitosana pura.
A curva de DSC da quitosana pura apresenta dois picos. O primeiro
um pico endotrmico em 123 C, que atribudo evaporao da gua absorvida
pelo material atravs de ligaes de hidrognio com os grupamentos hidroxilas da
quitosana.
48
QS
endo
0,8 % (m/v)
0,5 % (m/v)
0,2 % (m/v)
50
100
150
200
250
300
350
400
Temperatura ( C)
FIGURA 2.13: Curva de DSC para quitosana pura e nanopartculas

sintetizadas com 0,2; 0,5 e 0,8% (m/v) de QS. A programao utilizada para todas
as anlises foi: rampa de aquecimento de 20 at 450 C; razo de 5 C/min sob
atmosfera de nitrognio com vazo de 50 mL/min.
Nas
demais
curvas
que
descrevem
as
caractersticas
das
nanopartculas, a temperatura referente a esse pico depende da composio das

nanopartculas. Um decrscimo na quantidade de quitosana utilizada na sntese das
partculas ocasiona uma diminuio no valor de temperatura referente a esse pico.
Ou seja, menor quantidade de quitosana, menor nmero de hidroxilas que entram
em contato com a gua, conseqentemente diminuio na temperatura do pico
endotrmico.
O segundo pico, exotrmico em 295 C corresponde ao processo de
decomposio. As nanopartculas sintetizadas a partir de soluo contendo 0,2%
(m/v) de QS apresentaram pico endotrmico de desidratao em 98 C. A medida
que aumentada a concentrao de quitosana observado um deslocamento nos
49
valores dos picos de desidratao: para 0,5% (m/v) em 107 C e 0,8% (m/v) em 117
C. Assim com o aumento de QS na sntese das NPs ocorre um deslocamento dos
valores do pico de desidratao em direo aos valores apresentados para QS pura.
Na literatura BORGES et al. (2005) reportam que picos na regio de
180 a 290 C so atribudos quebra da interao entre grupamentos NH3+ da QS e
COO- do cido. Portanto, a rea total dessa regio nos fornece o calor necessrio
(H) para romper essa interao.
Na TABELA 2.3 so apresentados os valores de H para as diferentes
nanopartculas sintetizadas. Nas nanopartculas contendo 0,2% (m/v), o valor de
H de 188 J g-1. Para NP com 0,5% (m/v) obteve-se H igual a 64,3 J g-1. J NP
sintetizadas a partir de 0,8% (m/v) o valor de H de 36,8 J g-1.

TABELA 2.3: Valores de H para as diferentes NPs de quitosana.
Nanopartcula
H (J g-1)
0,2 % m/v de QS
188,0
0,5 % m/v de QS
64,3
0,8 % m/v de QS
36,8
Dessa forma nanopartculas sintetizadas com menor quantidade de QS,

apresentam maior estabilidade trmica. Isto devido maior estabilidade do
PMAA e baixa carga superficial quando comparada a NP sintetizada com alta
quantidade de QS.
2.3.1.7. Termogravimetria (TG)

Anlises de TG so eficientes tcnicas para avaliar a estabilidade
trmica das nanopartculas. Curvas de TG da quitosana e nanopartculas esto
demonstradas na FIGURA 2.14.
50
No incio das curvas mostrada a diferena da eliminao de volteis

em cada amostra. Essa eliminao praticamente a mesma para as nanopartculas e
um pouco maior para QS pura, devido interao forte de pontes de hidrognio
entre molculas de quitosana e gua.
medida que a temperatura aumenta a massa se mantm constante at
cerca de 240 C para QS pura. Essa temperatura corresponde ao incio da
temperatura de degradao (Td).
A temperatura de degradao (Td) para QS e nanopartculas de QS
sintetizadas com 0,2 % (m/v) de QS foi de 240 2,0 C e 241 2,3 C,
respectivamente.
Perda de Massa (%)
100
80
60
a
40
20
c
d
100
200
300
400
500
Temperatura (C)
FIGURA 2.14: Curvas de TG para (a) QS, nanopartculas de QS com

(b) 0,2; (c) 0,5 e (d) 0,8 % (m/v). As curvas foram obtidas nas seguintes condies:
rampa de aquecimento de 20 at 500 C, com razo de aquecimento de 10 C/min
para cada amostra; vazo de nitrognio mantida em 60 cm3/min.
51
Com um aumento na quantidade de QS utilizada na sntese das

nanopartculas, um aumento na Td foi observado. Para nanopartculas sintetizadas
com 0,5 e 0,8 % (m/v) de quitosana na sntese os valores de Td encontrados foram
de 242 2,5 e 251 2,3 C, respectivamente. Esses resultados indicam que
nanopartculas de QS-PMAA so mais estveis termicamente, que o polmero
quitosana puro.
2.3.2. Nanopartculas QS-TPP

2.3.2.1. Anlise de FT-IR
As caractersticas moleculares da QS, TPP e nanopartculas de QS-
Transmitncia (%)
TPP esto demonstradas no espectro de FT-IR representado na FIGURA 2.15.
(C )
(B )
(A )
4000
3000
2000
1000
-1
Nm ero de Onda (cm )
FIGURA 2.15: Espectro de FT-IR da quitosana (A); TPP (B) e

nanopartculas QS-TPP(C).
52
O espectro da quitosana pura (Fig. 13.2a) apresenta picos

caractersticos: 3435 cm-1 correspondente ao estiramento do NH2 e grupo OH; 1649
cm1 correspondente ao estiramento da ligao C=O de amina I; 1083 1020 cm-1
devido ao estiramento do C-O e 620 cm-1, devido s vibraes dos anis
piranosdicos, de acordo com a literatura (TONHI e PLEBIS, 2002). No espectro
referente as nanopartculas QS-TPP (C) o pico em 3430 cm-1 indica que ocorrem no
sistema ligaes de hidrognio (JIA-HUI et al. 1999). O pico em 1530 cm-1 no
espectro das nanopartculas um indicativo da interao entre grupos NH3+ da
quitosana e grupos fosfatos do TPP. No espectro das NPs pode ser visto ainda, o
estiramento referente ao grupamento P=O, do TPP que aparece em 1219 cm-1 . O
aparecimento desse pico no espectro das NPs um indicativo da formao dessas,
uma vez que aparecem tanto caractersticas da quitosana quanto do TPP.
2.3.2.2. Tamanho mdio de Partculas

A
variao
na
concentrao
dos
materiais
formadores
das
nanopartculas influencia no tamanho final dessas partculas. Na TABELA 2.4

apresentada a influncia das concentraes finais de QS e TPP no tamanho das
NPs.
Um aumento no tamanho da partcula foi observado com um aumento
na concentrao de QS e TPP. Com um aumento na concentrao de QS, ocorre um
pequeno aumento da viscosidade na soluo de sntese, o que favorece a formao
de partculas maiores (JAWAHAR e BALASUBRAMANIAN, 2006). O lquido
mais viscoso dificulta as interaes entre os materiais que formam as NPs,
favorecendo a formao de partculas maiores, ou seja, que no necessitam de
energia favorvel formao. As NPs com tamanho menor (85nm) foram s
obtidas com a utilizao de menor concentrao de QS e TPP na sntese das
partculas.
53
TABELA 2.4: Influncia da concentrao de QS e TPP no tamanho de

partcula.
Concentrao de QS
Concentrao de TPP
Tamanho de
(mg mL-1)
(mg mL-1)
Partcula (nm)
2,14
0,3
85
2,14
0,6
110
3,15
0,6
221
O efeito da concentrao de QS e TPP no tamanho final das NPs e

parmetros que afetam o tamanho de partculas j foram relatados na literatura.
CALVO et al. (1997) relataram que o tamanho dessas partculas depende de ambas
as concentraes, tanto de QS quanto de TPP. GAN et al. (2005) estudaram a

diferena entre partculas associadas com protena, tipo albumina do soro bovino
(BSA) e partculas sem BSA. Partculas carregadas com BSA apresentam tamanho
maior que partculas sem o carregamento. Esse fato ocorre devido alta massa
molar e tamanho das molculas de protenas.
2.3.2.3. Potencial Zeta

Para analisarmos a estabilidade dos sistemas coloidais dessas NPs,
determinamos os valores de potencial zeta, para as trs composies sintetizadas.
Na anlise de potencial zeta, verificou-se que as partculas tm carga
superficial positiva, em pH cido (pH 4,5) e que a carga superficial das partculas
no variou significativamente com mudanas na composio como mostra a
TABELA 2.5.
54
TABELA 2.5: Influncia da concentrao de QS e TPP nos valores de

potencial zeta.
Concentrao de QS
(mg mL-1)
Concentrao de TPP
(mg mL-1)
Potencial zeta
(mV)
2,14
0,3
+ 43
2,14
0,6
+ 40
3,15
0,6
+ 40
De acordo com dados da literatura (LPEZ-LEN et al., 2005), as

partculas de QS-TPP apresentam um decrscimo nos valores de potencial zeta com
aumento do pH, com ponto isoeltrico prximo do pH = 8,0. Esses dados foram
relatados tambm por outros autores na literatura (GAN et al., 2005).
A carga positiva, como relatada anteriormente, uma caracterstica das
NPs de QS. A estabilidade do sistema comprovada, uma vez que o valor de
potencial zeta de um sistema considerado estvel eletrostaticamente deve ter um
valor (em mdulo) maior que 20 mV.
2.3.2.4. Microscopia Eletrnica de Transmisso (MET)

As micrografias de MET tm sido muito empregadas na obteno de
informaes relativas forma e ao tamanho das NPs. A MET pode permitir
tambm a diferenciao entre nanocpsulas e nanoesferas, possibilitando, inclusive,
a determinao da espessura da parede das nanocpsulas (SCHAFFAZICK et al.,
2006).
Na FIGURA 2.16 pode-se avaliar a forma e tamanho das suspenses

de nanopartculas QS-TPP atravs de anlise de MET.
55
Atravs da anlise da micrografia podemos observar que as NPs

apresentam tamanho de partcula de cerca de 45nm (devido anlise em sistema
seco) e forma esfrica. Alm disso, comprova que realmente o sistema apresenta
partculas de tamanho nanomtrico.
FIGURA
2.16:
Micrografia
eletrnica
de
transmisso
de
nanopartculas sintetizadas a partir de 3,00 mg L-1 de QS e 1,2 mg L-1 de TPP (85

nm).
A anlise de MET muito importante em sistemas nanomtricos, pois
como medidas de tamanho em soluo, nos d uma idia da quantidade de
partculas e tamanho nanomtrico do sistema. A nica peculiaridade que, como as
medidas de tamanho so realizadas em sistemas secos, aps a evaporao da gua
existente na suspenso, os valores de tamanho analisados representam valores da
amostra seca e no equivale aos em soluo. Uma vez que a gua presente em
suspenses de nanopartculas evaporada, essas sofrem um processo de
murchamento, pois uma certa quantidade de gua retida pela partcula, causando
uma diminuio de tamanho em relao ao tamanho normal dessa em soluo.
56
2.4. Concluses
As nanopartculas QS-PMAA foram sintetizadas com sucesso, atravs
da polimerizao de cido metacrlico na presena de soluo de quitosana.
Anlises de espectroscopia FT-IR e de
13
C VACP-MAS das NPs, indicaram a
presena de sinais atribudos a grupos da quitosana e de PMAA. O que mostra o

sucesso nas snteses das nanopartculas, atravs da formao do complexo de
polieletrlito.
O tamanho de partcula foi dependente da concentrao de quitosana
utilizada na preparao das nanopartculas e fortemente influenciada pela variao
de pH na soluo. Essa variao de tamanho devido ao grau de ionizao e
densidade de carga das molculas de PMAA, que resultam em um aumento no
tamanho mdio das nanopartculas por efeito de intumescimento.
Anlises de potencial zeta viabilizam a aplicao dessas NPs (QSPMAA) nas mais diversas reas, pela variao de potencial zeta com o pH que o
sistema nos proporciona. Microscopias eletrnicas de transmisso (MET)
mostraram que nanopartculas de QS-PMAA apresentaram morfologia homognea
em forma e distribuio de tamanho, com predominncia da forma esfrica. A
partir dos resultados de DSC, nas diferentes condies estudadas, obtiveram-se
alguns parmetros interessantes, da dependncia da quantidade de quitosana na
sntese com a maior estabilidade das NPs. Maior quantidade de quitosana resulta
em NPs com menor estabilidade.
Resultados adquiridos atravs de anlises de TGA indicaram que
nanopartculas de QS-PMAA so mais estveis termicamente que o polmero
quitosana puro.
A sntese das nanopartculas de QS-TPP pelo mtodo de gelatinizao
ionotrpica foi realizada com sucesso.
57
A partir das anlises de FT-IR, atribuiu-se a formao das

nanopartculas a gelatinizao inica ocorrida entre o grupamento catinico da
quitosana (NH3+) e aninico do TPP (POO-). O tamanho mdio das partculas
fortemente dependente da concentrao de QS e TPP utilizada na sntese.
No observou-se mudanas significativas nos valores de potencial zeta
com variao nas concentraes de QS e TPP. As micrografias de MET
demonstraram que as partculas esto distribudas de forma homognea em
tamanho e forma.
A possibilidade de sintetizar nanopartculas com diferentes tamanhos,
variando a concentrao do material na sntese de grande importncia, pois isso
permite otimizar as propriedades e o campo de aplicao dessas nanopartculas.
58
CAPTULO III: Sntese e Caracterizao de

Filmes de Hidroxipropil Metilcelulose Contendo
Nanopartculas de Quitosana e Poli(cido
metacrlico)
59
3.1. Introduo
A pesquisa em nanotecnologia uma rea multidisciplinar e alguns
resultados esto sendo aplicados em produtos j comercializados, aps testes
(JANG e LEE, 2008; RIMANN et al., 2008). O aumento da demanda por
produtos de alta qualidade, juntamente com capacidade de vida longa de prateleira,

fora o setor de alimentos a desenvolver novas estratgias em alimentos (DOGAN
e MCHUGH, 2007; SOTHORNVIT et al., 2009; SOZER e KOKINI, 2009).
Com esses objetivos a indstria vem aplicando vrios polmeros biodegradveis

(protenas, polissacardeos e lipdios) em filmes comestveis, que com base na
literatura, devem servir como materiais para embalagens (CHEN et al., 2009;
MONEDERO et al., 2009).
H cerca de 10 anos, muitos pesquisadores em todo mundo esto

focalizando suas pesquisas e desenvolvendo filmes comestveis e embalagens para
alimentos, cada vez mais sofisticadas em termos de qualidade (KROCHTA e
MULDER-JOHNSTON, 1997; SUBRAMANIAN et al., 2007; CONCETTA et
al., 2007; LEE et al., 2008; DEL NOBILE et al., 2008). Com base nessas
pesquisas, polissacardeos como hidroxipropil metilcelulose (HPMC) e quitosana

(QS) esto sendo largamente estudados (BELALIA et al., 2008).
O derivado de celulose HPMC um promissor material para ser
aplicado em filmes para alimentos. HPMC um polmero solvel em gua,
utilizado na indstria de alimentos como agente gelificante e estabilizante.
Entretanto filmes de HPMC apresentam pobres propriedades mecnicas e de
barreira de gua (PREZ et al., 2008).
Filmes comestveis so camadas finas de materiais formados
diretamente na superfcie do produto, sendo usados para substituir o revestimento
de cera de proteo natural e para reduzir a perda de gua de frutas e hortalias.
Nem sempre eles podem substituir materiais de embalagem sinttica, no
60
comestvel, mas servem como adjunto para proporcionar maior qualidade,

estendendo a vida-de-prateleira e possibilitando economia com materiais de
embalagem (AZEREDO et al., 2000; SOBRAL, 2000; MIN et al., 2008). Filmes
comestveis e para revestimentos devem ajudar a manter a qualidade dos alimentos
depois que a embalagem sinttica aberta, protegendo contra mudanas de
umidade, oxignio e perda de aroma. Os filmes devem apresentar resistncia
adequada ruptura e abraso permitindo uma boa proteo do alimento sem
perder qualidade por manuseio. Eles tambm devem ser flexveis o suficiente para
se adaptar s eventuais deformaes dos alimentos, sem danos mecnicos.
Um problema da agroindstria de alimentos a perda de qualidade
durante o armazenamento, transporte e distribuio de alimentos frescos, prcortados e embalados ( 30% do produto perdido). Muitas embalagens flexveis
so feitas com plsticos, isto , materiais sintticos, que apesar de possurem
excelentes propriedades funcionais, so considerados no-biodegradveis e esto
envolvidos em problemas de gerenciamento de resduos slidos municipais. A
biodegradao do polietileno, por exemplo, estimada em 200 anos (TORRES,
1994). Por isso, a produo de embalagens biodegradveis comestveis ou no para
alimentos um fato extremamente importante no mundo atual. Por esses fatores, a

pesquisa em nanotecnologia aplicada em embalagens algo de extrema
importncia e interesse no campo mundial, pois a exigncia dos consumidores
cada vez maior, assim como o interesse em trabalhar e desenvolver materiais no
prejudiciais ao ambiente, mas para uma maior preservao.
Essa etapa do trabalho tem como objetivo, incorporar nanopartculas
de quitosana em filmes de HPMC, a fim de melhorar propriedades mecnicas e de
barreira desses filmes, alm da obteno de um filme biodegradvel.
61

3.2.1. Materiais
- Quitosana; a quitosana utilizada foi da Polymar, Fortaleza-Brasil.
(MW= 71,3 kDa, grau de desacetilao 94%).
- Persulfato de potssio (K2S2O8); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
- cido metacrlico (MAA); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
- Hidroxipropil Metilcelulose (HPMC); obtido apartir da Dow
Chemical Co. (Midland,Mich.,U.S.A.).
3.2.2. Mtodos
3.2.2.1. Preparao dos filmes
Para o preparo dos filmes foi empregada a tcnica de casting, que
consiste no preparo de soluo coloidal composta de gua, HPMC com e sem
nanopartculas, depositado em um suporte, seguida de secagem conforme mostra a
FIGURA 3.1.
FIGURA 3.1: Fotografia do esquema de preparao do filme de

HPMC.
62
A soluo de HPMC (filme controle) foi obtida dissolvendo-se 3,0g de

HPMC em 100 mL de gua destilada sob agitao magntica por 12 horas. A fim
de estudar o efeito do tamanho e concentrao de partculas na formao dos
filmes, diferentes tamanhos e concentraes de partculas foram adicionadas na
soluo de HPMC. Depois das solues filmognicas preparadas, esta foi
acondicionada em temperatura ambiente por 6 horas para degasagem. A soluo foi
colocada sobre uma placa de vidro (30 x 30 cm) recoberta com um filme de
polietileno. As espessuras dos filmes foram ajustadas com uma barra de nvel (0,5
mm) e as placas deixadas sobre uma superfcie plana em temperatura ambiente por
24 horas. Aps os filmes secos, esses foram retirados das placas e alocados em
sacos plsticos, para proteo de agentes externos.
3.2.2.2. Caracterizao dos Filmes

3.2.2.2.1. Determinao da espessura
As medidas das espessuras dos filmes foram realizadas utilizando um
micrmetro digital (No. 7326, Mitutoyo Manufacturing, Japan) em 5 diferentes
pontos ao redor do filme. Os valores obtidos foram utilizados para calcular a
permeabilidade de vapor de gua e propriedades mecnicas.
3.2.2.2.2. Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV)

Foi utilizado um microscpio Hitachi S-4700 (Hitachi High-Tech
Corp., Tokyo, Japan), para analisar propriedades morfolgicas dos filmes contendo
nanopartculas. As amostras dos filmes foram depositadas em um porta amostras,
contendo fita de carbono (Ted Pella Inc., Redding, CA, U.S.A.) e recobertas com
ouro (Denton Vacuum Inc., Moorestwon, NJ, U.S.A.) por 45 s em 20 mA. Todas as
amostras foram examinadas utilizando 1,5 kV. As magnificaes foram de 10, 20 e
60k.
63
3.2.2.2.3. Solubilidade do filme em gua

Para determinao da solubilidade do filme em gua utilizou-se um
procedimento modificado por GONTARD et al. (1992). Aproximadamente 150
mg da amostra foram pesadas e secas em forno (100 2 C, 24 h) para obter a
massa seca inicial do filme. O filme seco aps pesagem foi imerso em 50 mL de
gua deionizada contendo 0,02 % (mm) de azida de sdio (para prevenir o
crescimento de microorganismo) e agitada vagarosamente (20 2 C, 24 h). Os
filmes em gua foram monitorados de tempo em tempo, no final de 24 horas, a
parte de filme insolvel foi separada por centrifugao a 5000 rpm e retirada da
soluo para secagem (100 2 C, 24 h), a fim de determinar a massa seca que no
foi solubilizada. A massa de filme que solubilizou foi calculada com base na
equao 3.1 e tratada como sendo a percentagem de filme que solubiliza-se em
gua (PREZ-GAGO e KROCHTA, 2001):
Solubilidade em gua (%) =
massa seca inicial massa do filme no solubilizado
X 100
(3.1)
massa seca inicial
3.2.2.2.4. Propriedades Mecnicas

O teste mais comumente realizado para a determinao da resistncia
mecnica de filmes o teste de tenso x deformao sob trao. As propriedades
mecnicas dos filmes foram determinadas pelos testes de trao. Os filmes foram
deixados em ambiente com 30% umidade relativa a 24 C por 48 horas, antes dos
testes de trao. Os filmes foram cortados em forma retangular nas dimenses de
acordo com o mtodo ASTMD882-97: 15 mm de largura e 100 mm de
comprimento. O equipamento utilizado para a anlise foi um Instron Universal
Testing Machine (Model 1122, Instron Corp., Canton, Mass., U.S.A.).
A
64
propriedade mecnica dos filmes foi avaliada com base na concentrao e tamanho
de partculas. As propriedades mecnicas dos filmes foram avaliadas com relao
tenso () e mdulo de elasticidade (E) em temperatura ambiente, de acordo com o
mtodo ASTM D882-97. A velocidade de tracionamento utilizada foi de 50
mm/min.
A deformao () dos filmes foi determinada pela equao abaixo:
= ln(
L
)
L0
(3.2)
onde L e L0 so os comprimentos de elongao do filme durante o experimento e o

comprimento inicial do filme, respectivamente.
A tenso () foi determinada medindo-se a fora necessria para
romper o filme. Os valores de foram calculados utilizando a equao abaixo:
F
S
(3.3)
onde F o valor da fora de ruptura exercida e S a rea seccional do filme.

O mdulo de elasticidade (E) foi calculado a partir da inclinao
inicial da curva obtida tenso-deformao ( vs ). As propriedades mecnicas
foram avaliadas com base na concentrao e tamanho das partculas.
3.2.2.2.5. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP)

Uma das mais importantes propriedades de um filme comestvel a
permeabilidade ao vapor de gua (WVP), que definida pelo "Annual Book of
Standards" (ASTM E96-80), como a taxa de transmisso de vapor de gua por
65
unidade de rea de um material delgado, de espessura conhecida, induzida por uma

diferena de presso entre duas superfcies especficas, sob condies de
temperatura e umidade relativa. Valores de permeabilidade ao vapor de gua foram
determinados a partir do mtodo modificado ASTM E96-92, utilizado para
determinar a umidade relativa (RH) do filme, descrito na literatura por MCHUGH
et al. (1993). Para cada tratamento so utilizados quatro filmes (4 replicatas) que
so cortados em forma circular (15,5 cm de dimetro). Na parte interna de placas

de Teflon adicionaram-se 6 mL de gua destilada. Sobre a gua, o filme foi fixado
na placa com cola de silicone, outra placa foi colocada sobre a primeira e fixada
com quatro parafusos. As placas fora, alocadas em um gabinete com controle de
umidade utilizando sulfato de clcio (0 % RH) (W.A. Hammond Drieritr Co.,
Xenia, Ohio, U.S.A.). As massas das placas foram pesadas periodicamente e
anotadas para o clculo das propriedades requeridas.
A umidade relativa foi calculada com base nas equaes de 3.4 at
3.6:
Veloc. de transmisso
do vapor de gua (WVTR)
WVTR =
perda de massa por tempo
(3.4)
rea do filme
mw.P.D.ln[(P p 2 ) /(P p1 )]
R.T.z
RH underside =
p2
x100
p1
(3.5)
(3.6)
onde mw a massa molar da gua (18 g /g mol), P a presso total (1 atm), D a

difusividade de vapor de gua atravs do ar a 298 K (0,102 m2 /s), p1 a presso
saturada de vapor a 298 K (0,0313 m2/ s), p2 a presso parcial da face inferior do
66
filme, R a constante dos gases (82,1 106 m3 atm/g mol K), e z a altura mdia
atingida pelo gs inerte.
Permeabilidade ao vapor de gua (WVP) foi calculada com base na
seguinte equao 3.7:
WVP =
WVTR
y
(p 2 p3 )
(3.7)
onde y a espessura mdia dos filmes e p3 presso parcial de vapor do lado

superior do filme.
3.2.2.2.6. Permeabilidade ao Oxignio (O2P)

A taxa de transmisso de oxignio foi determinada utilizando um
aparelho OX-TRAN 2/20 (Modern Controls Inc., Minneapolis, MN) a 25 C a
partir do mtodo padro D3985 (ASTM, 1995) com uma umidade relativa de 55
1% . Cada filme foi fixado em um suporte com uma rea de abertura de 5 cm2. As
amostras do filme, no instrumento de medida, foram submetidas a 100% de gs
oxignio de um lado e de um gs de arraste contendo 98% de nitrognio e 2% de
hidrognio do outro lado. O equilbrio foi programa para 10 horas de experimento.
A permeabilidade ao oxignio foi calculada, dividindo a taxa de transmisso de O2
pela diferena da presso parcial de O2 entre ambos os lados do filme e
multiplicando pela mdia das espessuras dos filmes. Quatro replicatas de cada
filme foram avaliadas. A unidade utilizada para as medidas de O2P cm3 m/m2 d
kPa.

A temperatura de degradao foi analisada em um TGA Q-500.
Utilizou-se uma massa de amostra de 6-7 mg. Os experimentos foram realizados na
67
faixa de temperatura de 20 500 C com razo de aquecimento de (10 C min-1)

para cada amostra. A vazo de nitrognio foi mantida em 60 cm3 min-1. O porta
amostra utilizado foi de platina. As anlises foram realizadas em triplicata.
3.2.2.2.8. Anlise Estatstica

As anlises de varincia (ANOVA) foram realizadas utilizando-se o
programa Minitab verso 14.12.0 (Minitab Inc., State College, Penn., USA). As
diferenas significativas entre as mdias foram identificadas atravs do teste de
Tukey (p<0,05).

As temperaturas de transio vtrea (Tg) dos filmes de HPMC e
nanopartculas foram determinadas por calorimetria diferencial de varredura (DSC)
atravs do equipamento DSC da marca TA Instruments Q100. Aproximadamente
4-6 mg de amostra foram colocadas em panelas de alumnio, sob atmosfera de
nitrognio a uma vazo de 50 mL/minuto, com uma razo de aquecimento de 10 C
/minuto at 180 C. A temperatura de transio vtrea (Tg) foi obtida no ponto de
inflexo entre as linhas bases pela variao da capacidade calorfica da amostra.

3.3.1. Determinao do Tamanho Mdio
De acordo com o captulo anterior apresentada a TABELA 3.1 onde
aparece dependncia entre a quantidade de quitosana na sntese e o tamanho
mdio das nanopartculas. Pode ser observado que aumentando a quantidade de
quitosana na sntese das nanopartculas, o tamanho mdio das NPs apresentam um
decrscimo. Estas diferentes partculas foram inseridas nos filmes.
68
TABELA 3.1: Valores de tamanho mdio para as diferentes NPs de

quitosana em pH = 4,0.
Nanopartcula
Tamanho mdio (nm)
0,2 % m/v de QS
1114
0,5 % m/v de QS
822
0,8 % m/v de QS
604
3.3.2. Morfologia do Filme

Visualmente o filme apresentou boas propriedades, apresentando
transparncia e aspecto tctil no quebradio.
Antes das anlises de morfologia e tambm das demais anlises foram
medidas as espessuras dos filmes. As espessuras de praticamente todos os filmes se
encontravam entre 0,030 e 0,033 mm.
A morfologia dos filmes de HPMC contendo nanopartculas foi
analisada atravs de microscopia eletrnica de varredura (FIGURA 3.2).
O filme controle foi sintetizado a partir de uma soluo de 3% m/v de
HPMC (hidroxipropil metilcelulose) em gua (FIGURA 3.2a).
Como pode ser observado o filme controle apresenta alto grau de
porosidade. Na FIGURA 3.2b apresentada a micrografia das nanopartculas de
QS-PMAA preparadas com 0,2% m/v, uma homogeneidade de tamanho e forma
observada.
Na FIGURA 3.2c apresentada uma maior compactao do filme de
HPMC com adio das nanopartculas de QS-PMAA. As nanopartculas passam a
ocupar os poros desses filmes aumentando assim sua compactao. O efeito desse
aumento na compactao do filme pode ser analisado nos resultados dos prximos
captulos.
69
(a)
(b)
(c)
(d)
FIGURA 3.2: Micrografias de MEV: (a) filme controle (somente

HPMC); (b) QS-PMAA nanopartculas com 0,2 % (m/v) de quitosana; (c) filme de
HPMC contendo 6,3 % de nanopartculas com 110 nm; (d) o mesmo que (c) em
20.000 X de magnificao.
3.3.3. Solubilidade do filme em gua

A solubilidade em gua uma propriedade importante dos filmes
baseados em HPMC. Algumas aplicaes podem precisar de filmes que apresentem
certa insolubilidade, ou seja, que sejam resistentes na presena de gua. A
TABELA 3.2 apresenta a solubilidade dos filmes com e sem nanopartculas. A
70
diferena na solubilidade pode ser devido diferena no tamanho das partculas

incorporadas no filme de HPMC. Na TABELA os valores de concentrao
apresentados so em relao quantidade de NPs ou quitosana, em relao de
HPMC. Ou seja, filmes com 6,3 % de QS-PMAA apresentam 0,2g de quitosana em
soluo de nanopartculas mais 3g de HPMC. Assim tambm, para as outras
formulaes.
TABELA 3.2: Solubilidade em gua dos filmes com e sem
nanopartculas incluso.
% QS-PMAA
Solubilidade
em filmes de HPMC
(%)
6,3 (sem nanopartculas) A
100 c
100 c
99,7 c
6,3 (contendo nanopartculas de 110 nm) B
94,5 a
14,3 (contendo nanopartculas de 82 nm ) B
96,4 b
20,7 (contendo nanopartculas de 59 nm) B
97,3 c
(A) MAA: Somente cido metacrlico na gua para solubilizar a quitosana.
(B) QS-PMAA: Nanopartculas de quitosana em diferentes tamanhos.
*Diferentes letras na coluna dos valores de solubilidade indicam significncia a P < 0,05.
Ou seja, a b c.
As trs primeiras linhas da TABELA 3.2 apresentam os dados de

filmes sintetizados somente com quitosana solubilizada em cido metacrlico. Os
filmes que contm somente quitosana (QS-MAA), ou seja, sendo MAA o cido
metacrlico, apresentam uma maior solubilidade em gua. De acordo com dados de
ANOVA a adio de nanopartculas significativamente (p < 0,05) decresce a
71
solubilidade dos filmes de HPMC. observado que a solubilidade dos filmes

decresce significativamente com o aumento no tamanho de partculas.
Esse fato muito importante na rea de filmes, pois em muitos
alimentos a gua provoca decrscimo na qualidade e tempo de conservao. A
baixa solubilidade dos filmes um fator desejvel em muitas aplicaes em
alimentos.
3.3.4. Propriedades mecnicas

A FIGURA 3.3 apresenta uma curva tpica tenso deformao para os
filmes.
70
60
Tenso (MPa)
50
6,3
(110 nm)
40
30
20
14,3
(82 nm)
20,7
(59 nm)
10
0
QS/MAA
10
12
14
16
18
Deformao (%)
FIGURA 3.3: Curva de tenso-deformao para filmes de HPMC com

6,3 % (110 nm), 14,3% (82 nm) e 20,7% (59 nm) de nanopartculas QS-PMAA
adicionadas e com uma curva de filme contendo somente quitosana sem
nanopartculas (QS-MAA).
72
A utilizao de embalagens fortemente dependente das propriedades

mecnicas e de barreira dos materiais. Tenso, elongao e mdulo elstico so
parmetros que esto relacionados com as propriedades mecnicas dos filmes e
suas estruturas qumicas. Os filmes de HPMC que contm nanopartculas com
tamanho maior, apresentam alto valor de tenso de ruptura. Os filmes com tamanho
de partcula de 59 nm (6,3) apresentam menor resistncia mecnica, pois sua tenso
de ruptura menor que para os outros filmes. Um fator importante que os filmes
que no apresentam nanopartculas em sua composio (QS/MAA) possuem menor
resistncia mecnica que os demais, comprovando assim, melhora nas propriedades
dos filmes de HPMC com a adio de nanopartculas.
Na FIGURA 3.4 pode ser observado o efeito do tamanho das
partculas e da concentrao dessas na resistncia dos filmes.
Quando nanopartculas com 59 nm so includas nos filmes de HPMC,
a tenso dos filmes aumenta significativamente de 28,3 1,0 para 58,0 1,8 MPa.
Esse aumento na tenso, devido ao aumento na concentrao de nanopartculas na
soluo. Para os filmes contendo nanopartculas com 82 nm, a tenso aumenta de
28,3 1,0 para 58,4 2,0 MPa. Com o aumento na concentrao das
nanopartculas (110 nm) de 0 para 6,3%, observado um aumento nos valores de
tenso de 28,3 1,0 para 66,9 2,1 MPa. O aumento na resistncia dos filmes, que
contm nanopartculas inclusas, devido a maior compactao que essas partculas
causam no filme, resultando no reforamento da sua matriz. As nanopartculas nos
filmes atuam como agentes de reforamento do filme. Na literatura, o mesmo efeito
tem sido observado em diferentes matrizes. Por exemplo, AVROUS et al. (2001)
observou esse efeito com fibras de celulose reforando amido termoplstico,
ANGLS et al. (1999) observou reforamento de compsito de polipropileno
reforados com resduos de fibras de madeira.
73
70
59 nm
82 nm
110 nm
Tenso (MPa)
60
50
40
30
20
10
0
3,1
6,3
11,5
20,7
% QS-PMAA nanopartculas em filmes de HPMC
FIGURA 3.4: Tenso dos filmes de HPMC com diferentes

concentraes e tamanhos de nanopartculas. Os valores mdios so apresentados e
as barras indicam os erros das medidas.
Os valores de tenso para os filmes sintetizados somente com HPMC
(sem nanopartculas) foram de 30,7 1,8, 39,7 1,6 e 38,5 1,4 MPa para 6,3,
14,3 e 20,7 % da concentrao de quitosana QS-MAA, respectivamente, como
mostrado na TABELA 3.3.
Em adio, a tenso para os filmes de HPMC contendo somente
PMAA (sem quitosana ou nanopartcula) foi de 27,8 1,2 MPa. Assim, o aumento
na tenso foi significativo com a adio de nanopartculas nos filmes. Dados de
ANOVA indicam que a adio de nanopartculas aumenta a tenso dos filmes de
HPMC, tornando-os mais resistentes.
A dependncia da tenso com o tamanho de partcula, para duas
diferentes concentraes (6,3 e 3,1 %) de nanopartculas est representada na
FIGURA 3.4. A tenso fortemente dependente da variao do tamanho de
partcula que foi inserido no filme e sintetizado com o polissacardeo HPMC. Os
74
valores de tenso aumentam com o aumento do tamanho de partculas, em ambas

as concentraes. Em adio, nos filmes sintetizados com 6,3 % de nanopartculas,
um maior aumento significativo nos valores de tenso com o aumento do tamanho
das partculas foi observado. Nessa formulao, os poros dos filmes so mais
compactos que os filmes com uma menor concentrao. As nanopartculas com
tamanhos maiores ocupam os espaos vazios nos poros do filme de HPMC,
aumentando o colapso dos poros nos filmes, resultando em um aumento nas
propriedades de ruptura dos filmes, tornando esses mais resistentes.
TABELA 3.3: Tenso para filmes de HPMC com diferentes
concentraes e tamanhos de partculas.
% QS-PMAA em
Tamanho de partculas
Tenso
(MPa)
filmes de HPMC
(nm)
6,3
sem nanopartcula
30,7 1,8 a
14,3
sem nanopartcula
39,7 1,6 b
20,7
sem nanopartcula
38,5 1,4 b
6,3
110
66,9 2,1 d
14,3
82
58,4 2,0 c
20,7
59
58,0 1,8 c
*As diferentes letras nas colunas indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c.
A porcentagem de elongao aumenta significativamente com o

aumento no tamanho de partcula, observado na TABELA 3.4. Atravs de uma
anlise de varincia, concluiu-se que um aumento na concentrao de
nanopartculas com o mesmo tamanho de partcula, aumenta o mdulo de
elasticidade. Aumentando somente a concentrao de nanopartculas, nos filmes
75
com tamanhos de 59 nm e 82 nm, observou-se que no houve variao na

elongao dos filmes.
O aumento na elongao provoca melhora na tenacidade dos filmes.
Os dados da TABELA mostram tambm que os filmes no perderam a elasticidade,
com a adio das nanopartculas de QS-PMAA.
Anlises de ANOVA mostraram que as adies de nanopartculas
apresentaram uma grande influncia nas propriedades finais do filme,
demonstrando claramente o efeito de reforamento dos filmes provocado pelas
nanopartculas.
TABELA 3.4: Efeito da formulao e tamanho de partculas no
mdulo de elasticidade, e % de elongao nos filmes de HPMC.
% QS-PMAA
Tamanho de
Mdulo de
nos filmes de
Partcula (nm)
elasticidade
HPMC
Elongao (%)
(MPa)
(sem nanopartcula)
900 34 a
8,1 0,7 a
3,1
59
1212 150 b
8,8 1,0 a
3,1
82
1249 120 b
9,7 2,1 ab
3,1
110
1240 92 b
11,1 1,0 b
6,3
59
1245 140 b
8,3 1,0 a
6,3
82
1472 112 c
10,7 0,8 b
6,3
110
1426 59 c
16,8 1,6 c
11,5
59
1313 75 bc
8,1 1,0 a
14,3
82
1389 41 c
11,3 0,8 b
20,7
59
1364 45 c
8,1 0,8 a
*As diferentes letras nas colunas indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c.
76
Um dos desafios dos filmes biodegradveis estudados atualmente

alcanar um tempo de vida til controlada, ou seja, o material deve manter-se
estvel e manter suas propriedades durante o armazenamento.
Sendo assim, aps um perodo de sete meses foram medidos
novamente os valores das resistncias dos filmes. Na TABELA 3.5 so
apresentados os dados de tenso mxima dos filmes aps sete meses de estocagem.
concentraes e tamanhos de partculas, aps sete meses de estocagem.
% QS-PMAA
Tamanho de Partcula
Tenso (MPa) aps
nos filmes de HPMC
(nm)
7 meses de estocagem
6,3
110
60,8 2,0
14,3
82
55,0 1,1
20,7
59
49,3 2,1
Com isso foi observado que os filmes apresentaram estabilidade e

conservao das propriedades de tenso ao longo de sete meses.
3.3.5. Permeabilidade ao Vapor da gua (WVP)

Em adio as propriedades mecnicas, as propriedades de barreira do
vapor de gua dos filmes um fator importante para vrias aplicaes na indstria
de alimentos.
A permeao de gua atravs do filme controle de HPMC foi de 0,79
0,03 g mm/ kPa h m2.
A permeabilidade decresceu quando nanopartculas
foramadicionadas na matriz do filme de HPMC. O efeito da concentrao e

tamanho das nanopartculas sobre WVP dos filmes apresentado na FIGURA 3.5.
77
Por exemplo, a permeabilidade decresceu para 0,64 0,04; 0,59 0,06

e 0,47 0,07 para filmes com 20,7% (59 nm); 14,3% (82 nm) e 6,3% (110 nm) de
nanopartculas QS-PMAA, respectivamente. DOGAN e MCHUGH, (2007)
mostraram um decrscimo no coeficiente de difuso da gua com adio de fibras
de celulose nos filmes de HPMC. Esse efeito similar ao efeito das nanopartculas
Permeabilidade (g mm/KPa h m )
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0,0
6,3
3,1
11,5
0,9
0,7
b
a
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
3,1
6,3
14,3
% QS-PMAA em filmes de HPMC
82 nm (b)
0,8
0,0
20,7
110 nm (c)
0,8
0,9
59 nm (a)
na reduo da difusividade da gua.
0,7
0,6
a
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0,0
3,1
6,3
FIGURA 3.5: Dependncia da permeabilidade dos filmes de HPMC

com a concentrao de nanopartculas para diferentes tamanhos de partculas: (a)
59 nm; (b) 82 nm e (c) 110 nm. Diferentes letras sobre as barras indicam
significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c.
78
Uma das causas desse decrscimo na permeabilidade com a insero

das NPs o caminho mais tortuoso que a gua tem que percorrer para permear. Um
esquema dessa permeao est representado na FIGURA 3.6. Outros fatores
tambm podem influenciar, como aqueles associados interface matriz-partcula.
FIGURA 3.6: Representao esquemtica do modelo de permeao

proposto.
Nas FIGURAS 3.5a e 3.5b no so observadas mudanas na
permeao da gua dos filmes, com variao da concentrao de QS-PMAA em 59
nm e em 82 nm. Por outro lado, dados de permeabilidade mostram que os filmes
com nanopartculas de 110 nm (FIGURA 3.5c), mostram decrscimo significante
na permeabilidade, com o aumento da concentrao de nanopartculas nos filmes.
Esse efeito resultado do decrscimo do coeficiente de solubilidade e de
difusividade da gua nos filmes que possuem alta concentrao de nanopartculas
com 110 nm. A permeao de molculas de gua atravs desses filmes
dificultada, pela maior presena no filme de partculas com tamanhos maiores.
79
Este efeito devido a maior agregao (e talvez devido ao

preenchimento dos poros causado pelas nanopartculas) das partculas menores, ou
seja, quanto maior a quantidade de partculas menores, maior a interao das que j
existiam no sistema o que no altera os valores de permeabilidade. Com as
partculas maiores (110 nm), a adio de uma maior concentrao de partculas
gera uma distribuio mais homognea. Talvez um dos efeitos possa ser uma maior
repulso existente entre essas partculas, com tamanhos maiores. O que favorece
uma maior disperso, dificultando a permeao do vapor de gua (FIGURA 3.7).
FIGURA 3.7: Representao esquemtica do modelo de permeao

proposto.
80
3.3.6. Permeabilidade ao Oxignio (O2P)

O resultado das anlises de permeabilidade dos filmes de HPMC com
e sem nanopartculas, esto apresentados na TABELA 3.6. A O2P do filme de
HPMC controle foi de 182,3 0,5 cm3 m/m2 d kPa. Com a adio de
nanopartculas nos filmes com tamanhos de 59, 82 e 110 nm, os valores de O2P
decresceram para 110,0; 136,1 e 142,3 respectivamente.
A adio de nanopartculas afeta a permeao de oxignio atravs do
filme. Esse fato mostra que, filmes de HPMC que contem nanopartculas em sua
matriz so boas barreiras para oxignio. De acordo com dados da anlise de
ANOVA a adio de nanopartculas significante (p < 0.05) para o decrscimo da
permeao de oxignio pelo filme. Outro fato interessante que, a permeao do
gs diminui com a diminuio no tamanho de partcula incluso no filme.
TABELA 3.6: Permeabilidade ao oxignio para filmes de HPMC
contendo nanopartculas inclusas.
Tamanho de partculas
Permeabilidade ao O2
em filmes de HPMC
(cm3 m / m2 d k Pa)
(sem nanopartcula)
182,3 0,5 d
110 nm (0,2% QS)
142,3 4,0 c
82 nm (0,5% QS)
136,1 1,0 b
59 nm (0,8% QS)
110,7 0,9 a
* Diferentes letras nas colunas indicam diferena significativa entre os resultados a P < 0,05. Ou
seja, a b c
O O2 para permear tem que abrir espao entre a matriz, pois um vapor mais
apolar, necessita de maior volume livre entre as cadeias e menor densidade coesiva.
J o vapor de gua fora a abertura entre as cadeias, mais polar, no afetado por
81
maior densidade coesiva e menor volume livre. Devido a isso, filmes com
partculas menores apresentam maior solubilidade em gua, maior permeabilidade
ao vapor de gua e menor permeabilidade ao O2.
3.3.7. Anlise da degradao

A mobilidade de uma cadeia polimrica determina as caractersticas
fsicas do produto, seja este um plstico duro e frgil, borrachoso e tenaz, ou um
fluido viscoso. A mobilidade funo da agitao dos tomos nas molculas, sendo
esta diretamente proporcional temperatura. Portanto as caractersticas trmicas do
polmero, principalmente no caso de materiais utilizados em embalagens, de
extrema importncia. Uma vez que esses materiais podero em escala industrial
serem produzidos em temperatura elevada, a fim de diminuir o tempo de
processamento, desde que se saiba de antemo que a temperatura de degradao do
material no ser atingida.
A TABELA 3.7 mostra valores da temperatura de degradao (Td)
para filmes de HPMC, com e sem nanopartculas, obtidos atravs de curvas de TG.
TABELA 3.7: Temperatura de degradao dos filmes de HPMC e
HPMC com nanopartculas.
Filme
Tamanho de partcula
Td (C)
(nm)
HPMC
sem nanopartculas
232
HPMC + nanopartculas
110
350
82
362
59
369
(0,2% QS)
(0,5% QS)
(0,8% QS)
82
Os filmes que contm somente HPMC apresentam temperatura de

degradao trmica em 232 C. Nos filmes que apresentam nanopartculas em sua
composio, a temperatura de degradao trmica aumenta para 350 (110 nm), 362
(82 nm) e 369 C (59 nm). Esse fato muito importante para o processamento de
filmes na indstria, pois a temperatura de degradao influencia na temperatura de
processamento dos filmes.
3.3.8. Estudos de Calorimetria Diferencial de Varredura

(DSC)
A Tg apresentada pelos filmes de HPMC puros est representada no
grfico da FIGURA 3.8.
O principal objetivo da tcnica de anlise por DSC registrar
temperaturas de transio, atravs da comparao de temperaturas da amostra e de
uma referncia que totalmente inerte dentro da faixa de temperatura ensaiada.
Observando como esta diferena de temperatura varia com o aquecimento a uma
taxa constante, possvel registrar as transies importantes, como a temperatura
de transio vtrea (Tg) e a temperatura de incio de degradao, que resultam em
picos endotrmicos ou exotrmicos no grfico de quantidade de calor versus
temperatura (REGIANE, 2000).
A Tg o valor mdio da faixa de temperatura que, durante o
aquecimento de um material polimrico, permite que as cadeias da fase amorfa
adquiram mobilidade. Abaixo da Tg, o polmero no tem energia interna suficiente
para permitir o deslocamento de uma cadeia em relao outra por mudanas
conformacionais. Ele est no estado vtreo, em que se apresenta duro, rgido e
quebradio. Acima da Tg a cadeia polimrica sofre rotao e movimentos
difusionais, estando o polmero no estado elstico (CANEVAROLO, 2002).
83
Como qualquer outra transio fsica, esta tambm conseqncia de

um aumento da temperatura do sistema (REGIANE, 2000).
De acordo com a FIGURA 3.8 a Tg do filme de HPMC puro est em
torno de 169 C.
Para os filmes contendo nanopartculas com 110 nm o valor mdio da
Tg foi de 185 C e para os filmes contendo nanopartculas de 59 nm foi de 170 C.
Devido insero das partculas na matriz do filme, como essa apresenta uma
grande rea superficial, uma quantidade grande de segmentos do polmero tem
interao com a superfcie das partculas.
A interao dificulta o movimento das cadeias polimricas, com o
acrscimo da temperatura o que favorece um aumento nos valores da Tg. Pelo
aumento da rigidez dentro das cadeias polimricas.
FIGURA 3.8: Curva de DSC para filme de HPMC puro. A curva foi
obtida nas seguintes condies: vazo de nitrognio de 50 mL min-1, razo de
aquecimento de 10 C min-1, porta amostra de alumnio com tampa.
84
Outro fator que contribui para elevar a Tg a presena de grupos

volumosos na matriz de HPMC, como no nosso caso as NPs. A presena desses
grupos tende a ancorar a cadeia polimrica, exigindo maiores nveis de energia para
que a cadeia adquira mobilidade, isto , aumentando a Tg do polmero.
3.4. Concluses
Em concluso, esse estudo foi o primeiro a investigar a incorporao
de nanopartculas de quitosana em filmes de HPMC. O estudo sugere que filmes
de HPMC com nanopartculas de quitosana inclusas oferecem grande potencial
para serem aplicados em alimentos no futuro. Foram observadas as redues em
WVP e O2P, e aumento nas propriedades mecnicas dos filmes de HPMC com a
incorporao de nanopartculas. A resistncia mecnica dos filmes foi mantida por
um perodo de at sete meses, prazo em que foi realizada nova medida da
propriedade do material.
A presena das nanopartculas nos filmes pode ser observada em
imagens de MEV, atravs da mudana na compactao do filme. Alm disso, um
fato interessante um pequeno aumento na estabilidade trmica nos filmes com a
presena de nanopartculas, que foi observado pelo aumento na temperatura de
degradao. Os valores de Tg dos filmes aumentam com a insero de
nanopartculas de quitosana.
Por fim, com o auxlio da nanotecnologia esse trabalho auxilia no
incio dos estudos que podem buscar a melhoria de qualidade de vrios tipos de
filmes de interesse comercial para utilizao como embalagens de alimentos.
85
CAPTULO IV: Sntese e Caracterizao de

Filmes de Hidroxipropil Metilcelulose Contendo
Nanopartculas de Quitosana e Tripolifosfato
de Sdio.
86
4.1. Introduo
Recentemente, surgiu um grande interesse no desenvolvimento de
filmes comestveis. Principalmente devido demanda por alimentos de alta
qualidade, preocupaes ambientais em relao ao descarte de embalagens no
renovveis e oportunidades para criar novos mercados para matrias-primas
formadoras de filme, provenientes de produtos agrcolas (WU et al., 2002; SEBTI
et al., 2007; DENAVI et al., 2009).
Filmes comestveis so filmes preparados com polissacardeos,

protenas, lipdios e derivados. Entre as protenas que podem formar filmes esto a
zena do milho, o glten do trigo, as protenas do leite e da soja, entre os
polissacardeos esto os derivados de celulose, amido, alginatos, pectinas e
diferentes gomas e entre os lipdios, esto ceras, cidos graxos e monoglicerdeos
(SOTHORNVIT et al., 2007; NO et al., 2007; OLIVAS e BARBOSACANOVAS, 2008).
As vantagens dos filmes comestveis e/ou biodegradveis que tem

despertado interesse em funo de suas possibilidades so: controlar a migrao de
vapor de gua; permeabilidade ao oxignio e dixido de carbono. Alm disso,
existe a possibilidade de incorporao de aditivos nos filmes (antioxidantes,
aromas, agentes antimicrobianos e nanomateriais) melhorando com isso a
qualidade do produto (KESTER e FENNEMA, 1986; LAGARN et al., 2005;
SINHA RAY e BOUSMINA, 2005; BERTUZZI et al., 2007; SORRENTINO et
al., 2007).
A utilizao dos filmes como embalagem nos alimentos exige que os

mesmos possuam adequada barreira umidade e gases, propriedades mecnicas
que garantam a integridade durante o manuseio, transporte e consumo (GARCIA
et al., 2009; HAMBLETON et al., 2009).
87
Com base nisso o objetivo dessa etapa preparar filmes contendo

nanopartculas (NPs) de quitosana (QS) e TPP (tripolifosfato de sdio), que so
materiais aprovados pelo FDA (Food and Drug Administration) para uso em
alimentos e incorporar essas Nps em filmes de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC),
polissacardeo comestvel j utilizado na indstria de alimentos. Com a
incorporao das nanopartculas busca-se a obteno de filmes com propriedades
melhores que os filmes de HPMC puro.

4.2.1. Materiais
- Quitosana; a quitosana utilizada foi da Polymar, Fortaleza-Brasil.
(MW= 71,3 kDa, grau de desacetilao 94%).
- Tripolifosfato de Sdio (TPP); obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
- cido actico; obtido da Aldrich (St. Louis, USA).
-Hidroxipropil Metilcelulose (HPMC); obtido apartir da Dow
Chemical Co. (Midland, Mich., U.S.A.).
4.2.2. Mtodos
4.2.2.1. Preparao dos filmes
Para o preparo dos filmes foi empregada a tcnica de casting, como
descrito no captulo anterior. Os filmes com nanopartculas de QS-TPP foram
obtidos atravs da adio de 3,0 g de HPMC em 100 mL de soluo de
nanopartcula (recentemente sintetizada, captulo II). Aps a adio a soluo foi
deixada sob agitao magntica por 12 horas. Depois das solues filmognicas
preparadas, esta foi acondicionada em temperatura ambiente por 6 horas para
degasagem. A soluo foi colocada sobre uma placa de vidro (30 x 30 cm)
recoberta com um filme de polietileno e o filme foi obtido. As espessuras dos
88
filmes foram ajustadas com uma barra de nvel (0,5 mm) e as placas deixadas sobre
uma superfcie plana em temperatura ambiente por 24 horas. Aps os filmes secos,
esses foram retirados das placas e alocados em sacos plsticos.
4.2.2.2. Caracterizao dos Filmes

4.2.2.2.1. Determinao da espessura
As medidas das espessuras dos filmes foram realizadas utilizando um
micrmetro digital (No. 7326, Mitutoyo Manufacturing, Japan) em 5 diferentes
pontos ao redor do filme. Os valores obtidos foram utilizados para calcular os
valores de permeabilidade ao vapor de gua e propriedades mecnicas.
4.2.2.2.2. Propriedades Mecnicas

As propriedades mecnicas dos filmes foram determinadas pelos testes
de trao. Os filmes foram deixados em ambiente com 30% umidade relativa a 24
C por 48 horas, antes dos testes de trao, como os do captulo anterior (item
3.2.2.2.4). Os filmes foram cortados em forma retangular nas dimenses de acordo
com o mtodo ASTMD882-97: 15 mm de largura e 100 mm de comprimento. O
equipamento utilizado para a anlise foi um Instron Universal Testing Machine
(Model 1122, Instron Corp., Canton, Mass., U.S.A.). As propriedades mecnicas
dos filmes, avaliadas em funo do tamanho de partculas foram avaliadas com
relao tenso () e mdulo de elasticidade (E) em temperatura ambiente. A
velocidade de tracionamento utilizada foi de 50 mm/min.
A deformao () dos filmes foi determinada pela equao (4.1):
= ln(
L
)
L0
(4.1)
89
onde L e L0 so os comprimentos de elongao do filme durante o experimento e o

comprimento inicial do filme, respectivamente.
A tenso () foi determinada medindo-se a fora necessria para
rasgar o filme. Os valores de foram calculados utilizando a equao (4.2):
F
S
(4.2)
onde F o valor da fora de ruptura exercida e S a rea seccional do filme.

O mdulo de elasticidade (E) foi calculado a partir da inclinao
inicial da curva obtida tenso-deformao ( vs ). As propriedades mecnicas
foram avaliadas em funo da concentrao e tamanho das partculas.
4.2.2.2.3. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP)

Valores de permeabilidade ao vapor de gua foram determinados a
partir do mtodo modificado ASTM E96-92, utilizado para determinar a umidade
relativa (RH) do filme, descrito na literatura por MCHUGH et al. (1993). Para
cada tratamento so utilizados quatro filmes (4 replicatas) que foram cortados em
forma circular (15,5 cm de dimetro). Na parte interna de placas de Teflon
adicionou-se 6 mL de gua destilada. Sobre a gua, o filme foi fixado na placa com
cola de silicone, outra placa foi colocada sobre a primeira e fixada com quatro
parafusos. As placas foram alocadas em um gabinete com controle de umidade
utilizando sulfato de clcio (0 % RH) (W.A. Hammond Drieritr Co., Xenia, Ohio,
U.S.A.). As massas das placas foram pesadas periodicamente e anotadas para o
clculo da % RH e valores de WVP.
90
Permeabilidade ao vapor de gua (WVP) foi calculada com base na

seguinte equao 4.3:
WVP =
WVTR
y
(p 2 p3 )
(4.3)
onde y a espessura mdia dos filmes e p3 presso parcial de vapor do

lado superior do filme.
4.2.2.2.4. Permeabilidade ao Oxignio (O2P)

A taxa de transmisso de oxignio foi determinada utilizando um
aparelho OX-TRAN 2/20 (Modern Controls Inc., Minneapolis, MN) a 25 C a
partir do mtodo padro D3985 (ASTM, 1995), com uma umidade relativa de 55
1% . Cada filme foi fixado em um suporte com uma rea de abertura de 5 cm2. As
amostras do filme, no instrumento de medida, foram submetidas a 100% de gs
oxignio de um lado e de um gs de arraste contendo 98% de nitrognio e 2% de
hidrognio do outro lado. O equilbrio foi programa para 10 horas de experimento.
A permeabilidade ao oxignio foi calculada, dividindo a taxa de transmisso de O2
pela diferena da presso parcial de O2 entre ambos os lados do filme e
multiplicando pela mdia das espessuras dos filmes. Quatro replicatas de cada
filme foram avaliadas. A unidade utilizada para as medidas de O2P cm3 m/m2 d
kPa.

A temperatura de degradao foi analisada em um TGA Q-500.
Utilizou-se uma massa de amostra de 6-7 mg. Os experimentos foram realizados na
faixa de temperatura de 20 500 C com razo de aquecimento de (10 C min-1)
91
para cada amostra. A vazo de nitrognio foi mantida em 60 cm3 min-1. O porta
amostra utilizado foi de platina. As anlises foram realizadas em triplicata.
4.2.2.2.6. Microscopia Eletrnica de Varredura (MEV)

O microscpio eletrnico Hitachi S-4700 (Hitachi, Toronto, Ontario,
Canada) foi utilizado para analisar a morfologia dos filmes contendo NPs. As
amostras foram fixadas em corpos de prova de alumnio, com ajuda de fita de
carbono (Ted Pella Inc., Redding, CA, USA) e recobertas com ouro (Denton
Vacuum Inc., Moorestown, NJ, USA), por 45s a 20 mA. Todas as amostras foram
examinadas com uma voltagem de 1,5 kV com ampliaes de 40,000 x e 60,000 x.
4.2.2.2.7. Anlise Estatstica

As anlises de varincia (ANOVA) foram realizadas utilizando-se o
programa Minitab verso 14.12.0 (Minitab Inc., State College, Penn., USA). As
diferenas significativas entre as mdias foram identificadas atravs do teste de
Tukey (p<0,05). Esse recurso foi adotado para avaliar a significncia da diferena
entre as mdias.

As anlises de DSC foram realizadas de acordo com o procedimento
apresentado no Captulo III.
O equipamento utilizado foi da marca TA Instruments, modelo Q100.
Aproximadamente 4-6 mg de amostra foram colocadas em panelas de alumnio,
sob atmosfera de nitrognio a um vazo de 50 mL/minuto, com uma razo de
aquecimento de 10 C/minuto at 180 C. A temperatura de transio vtrea (Tg) foi
obtida no ponto de inflexo entre as linhas bases pela variao da capacidade
calorfica da amostra.
92

4.3.1. Propriedades Mecnicas
Os filmes foram obtidos com sucesso pelo mtodo proposto. A
aparncia desses foi satisfatria, uma vez que se apresentou transparente e com boa
maleabilidade para manuseio. Com base nisso, partiu-se para anlises das
propriedades a serem pesquisadas.
Para manter a integridade e a propriedades de barreira, os filmes
devem ser capazes de resistir ao estresse normal encontrado durante sua aplicao
subseqente. Normalmente, uma alta resistncia mecnica requerida, mas os
valores de deformao devem ser ajustados de acordo com a aplicao
(CALLEGARIN et al., 1997). Segundo CALLEGARIN et al., (1997), as
propriedades mecnicas dos filmes dependem das interaes entre os componentes,

ou seja, da formao de ligaes moleculares fortes ou numerosas entre as cadeias.
O efeito da adio de nanopartculas de QS-TPP nas propriedades
mecnicas dos filmes de HPMC pode ser avaliado na FIGURA 4.1.
Pode ser observado que a incorporao de NPs nos filmes de HPMC
modifica significativamente a resistncia do filme. A tenso de ruptura da matriz
dos filmes de HPMC sem nanopartcula inclusa de 28,3 1,0 MPa. Com a
introduo de NPs com tamanho mdio de 85 nm a tenso aumentou para 62,6
1,0 MPa. A adio de nanopartculas na matriz apresentou um efeito reforante, o
que foi coerente com trabalhos da literatura publicados previamente para outros
sistemas nanoestruturados (PEREIRA DE ABREU et al., 2007).
O aumento na concentrao de solvente (gua) provoca uma reduo
das interaes moleculares entre as cadeias adjacentes, aumentando a interao
entre as macromolculas e o solvente (VRENTAS e DUDA, 1978; SOBRAL,
2000). Dessa forma, com a adio de nanopartculas ocorre um aumento das
interaes moleculares entre as cadeias adjacentes, devido diminuio na

93
concentrao de solvente. Com o aumento das interaes, entre as partculas e o

material formador do filme, um maior reforamento do filme observado.
(FACKHOURI, 2002; JAWAHAR e BALASUBRAMANIAN, 2006) .
O estudo revela que com a insero de partculas menores de QS-TPP,
nos filmes ocorre uma interao dessas partculas com a matriz de HPMC. Essas
partculas so assim distribudas de forma homognea e com a evaporao da gua
durante a formao do filme, o compsito formado QS-TPP/HPMC estabilizado.
As partculas maiores nesse caso causam uma diminuio nas propriedades
mecnicas devido interao no homognea na matriz. Segundo DEBEAUFORT
e
VOILLEY
(1995),
um
filme
com
estrutura
heterognea
apresenta
descontinuidades na rede, que aumentam a fragilidade do filme, devido a pontos

preferenciais de quebra.
Uma segunda explicao que partculas maiores possuem maior
quantidade de grupamento do tripolifosfato, assim como em meio cido esses
grupamentos tambm esto protonados como a matriz de HPMC pode estar
ocorrendo uma repulso entre os materiais o que prejudica as propriedades
mecnicas do filme. Outros fatores podem atuar tambm, como agregao das
partculas na matriz.
Anlises de ANOVA mostraram que a adio de nanopartculas
apresentou uma grande influncia nas propriedades finais do filme, demonstrando
claramente o efeito de reforamento dos filmes provocado pelas nanopartculas.
A elongao corresponde mxima variao no comprimento da
amostra antes da quebra ou ruptura, ou seja, mede a capacidade de esticar.
A percentagem de elongao do filme varia quando NPs so
adicionadas na matriz do filme. Elongao geralmente obtida no ponto de ruptura
e expressa como porcentagem de aumento do comprimento original da amostra.
Essa variao nos valores de elongao pode ser observada na TABELA 4.1. O
94
aumento na elongao aumenta a tenacidade dos filmes. Assim observado que

filmes contendo NPs com tamanho mdio de 85 nm apresentam maior tenacidade
que os filmes sem NPs. Esse fato devido a menor rigidez que esse a matriz com
insero desse tipo de NP apresentou.
70
a
Tenso (MPa)
60
50
c
40
30
20
10
0
85 nm
110 nm
221 nm
somente HPMC
sem NPs
Filme HPMC
FIGURA 4.1: Efeito da incorporao de nanopartculas na tenso de
filmes de HPMC. As colunas mostram os valores mdios e as barras de erro
indicam os desvios. As diferentes letras nas colunas indicam significncia a P <
0,05. Ou seja, a b c.
O mdulo de elasticidade ou mdulo de Young mede a rigidez do
filme. De acordo com a TABELA 4.1 o mdulo de elasticidade no apresentou
variao significativa com os diferentes tamanhos de NPs. O que se observou foi
um pequeno acrscimo com a adio de NPs.
95
TABELA 4.1: Efeito da presena e tamanho de partculas, no mdulo

de elasticidade e elongao dos filmes contendo nanopartculas de QS-TPP.
Tamanho de
Mdulo de
Elongao
partcula (nm)
elasticidade
(%)
(MPa)
900 34 a
8,1 0,7 a
85
1264 65 b
11,1 1,0 c
110
1190 93 b
5,2 2,1 a
221
1204 64 b
5,7 1,0 a
(sem
nanopartcula)
* As diferentes letras nas colunas indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c.
Como no captulo anterior, foram medidos os valores de resistncia

dos filmes aps um perodo de sete meses (TABELA 4.2).
concentraes e tamanhos de partculas, aps sete meses de estocagem.
Tamanho de Partcula
Tenso (MPa) aps
(nm)
7 meses de estocagem
85
57,6 1,5
110
46,7 1,0
210
33,1 2,0
Com essas medidas comprovou-se que esses filmes tambm

mantiveram suas propriedades de tenso sem alterao com o armazenamento.
96
4.3.2. Permeabilidade ao Vapor de gua (WVP)

Muitos estudos na rea da cincia de alimentos tm se empenhado na
produo de embalagens comestveis, que apresentam propriedades de atuar como
barreira para a transferncia de gua atravs dessa embalagem (HONG e
KROCHTA, 2004; KIM et al. 2003; PREZ-GAGO e KROCHTA, 2001). Um
dos problemas com filmes compsitos na indstria de alimentos est relacionado

com a alta permeabilidade ao vapor de gua. A permeabilidade em filmes
controlada por difusividade e solubilidade de gua da matriz do filme.
Com o uso de nanocincia, novas formas de organizao dessa matriz
podem prevenir a migrao de vapor de gua atravs dela. Com base nisso, na
TABELA 4.3 apresentado os valores de WVP para filmes de HPMC e
nanopartculas com diferentes tamanhos.
TABELA 4.3: Efeito da presena e tamanho de partcula no WVP dos
filmes de HPMC.
Tamanho de
WVP
RH (parte de baixo
Partcula
(g mm K-1 Pa-1 h-1 m-2)
do filme) (%)
(sem nanopartcula)
0,794 0.03 c
78,2 0,7 a
85
0,331 0.06 a
79,6 0,3 a
110
0,451 0.05 a
79,4 0,5 a
221
0,587 0.05 b
79,5 0,9 a
(nm)
* As diferentes letras nas colunas indicam significncia a P < 0,05. Ou seja, a b c.
97
Os valores de WVP dos filmes podem ser representativos como

mtodo de comparao entre eles, se for utilizada a mesma direo da fora para a
difuso do vapor de gua para cada filme (McHUGH et al. 1993). A umidade
relativa (RH) da face inferior do filme foi mantida semelhante para todos os filmes
(79,2 0,6 %) da TABELA 4.3.
De acordo com anlises de varincia, observou-se que a presena de
nanopartculas de QS-TPP nos filmes, provoca um decrscimo nos valores de WVP
desses filmes. Esse fato muito importante no campo da nanotecnologia. O valor
de WVP para filmes sem nanopartculas de 0,794 g mm kPa-1 h-1 m-2. O
decrscimo nos valores de WVP atribudo formao de ligaes de hidrognio
entre a quitosana e a matriz de HPMC, o que influencia na difuso do vapor de
gua. A estrutura dos filmes contendo nanopartculas mais compacta o que
dificulta a difuso do vapor atravs do filme. Alm disso, h a influncia do
aumento dos obstculos encontrados pelo vapor ao atravessar a matriz do filme, ou
seja, o caminho para permear se torna mais tortuoso.
Nanopartculas com tamanho pequeno induzem um maior decrscimo
nos valores de WVP, quando comparado com os valores calculados para partculas
maiores. Isso ocorre, porque com a adio de partculas de tamanho menor nos
filmes, essas apresentam maior habilidade em ocupar os espaos vazios, os poros,
do filme. O que resulta em filmes com maior potencialidade de utilizao como
barreira ao vapor de gua. Ou seja, essas partculas menores nesse caso no tm a
caracterstica de se agregarem e sim de total disperso na matriz.
No trabalho descrito por LOTTI et al. (2008) observado que filmes
nanocompsitos (HDPE + argila organoflica) apresentaram um decrscimo
significativo nas propriedades de barreira (vapor e oxignio) em comparao ao
filme de HDPE puro. A eficincia do reforo e controle da permeabilidade
provocado por celulose microcristalina em tamanho nanomtrico incorporada em
98
filmes de HPMC, relatada por DOGAN e MCHUGH, (2007). RHIM et al.,

(2006) estudaram a influncia de nanoestruturas nos valores de WVP de filmes de
quitosana. Os valores de WVP dos filmes de quitosana so de 1,31 0,07 g mm K-1

Pa-1 h-1 m-2. Dependendo do tipo de NP os valores de WVP nos filmes
nanocompsitos decrescem significativamente em 25-30%. Isto atribudo
presena de camadas dispersas de nanopartculas na matriz polimrica, o que
contribui para que o vapor de gua percorra o filme por um caminho mais tortuoso
em torno das nanopartculas, aumentando, assim, a dificuldade da difuso. Uma
vantagem do nosso sistema que o decrscimo nos valores de WVP chegaram a
60% (QS-TPP com 85 nm de tamanho) quando comparado com o filme sem NPs.
4.3.3. Permeabilidade ao Oxignio (O2P)

O resultado das anlises de permeabilidade dos filmes de HPMC com
e sem nanopartculas, foram avaliados com base nos parmetros citados nos
mtodos experimentais. A O2P do filme de HPMC controle foi de 182,34 1,11
cm3 m/m2 d kPa. Com a adio de nanopartculas nos filmes com tamanhos de 85;
110 e 210 nm, os valores de O2P decresceram para 179,5 1,0; 175,7 1,2 e 175,0
1,2 cm3 m/m2 d kPa respectivamente.
Com a adio de nanopartculas de QS-TPP a permeao de oxignio
atravs do filme no alterada consideravelmente. Esses resultados podem ou no
ser considerados bons, uma vez que se a finalidade de utilizao do filme no
necessitar de grande melhoria nas propriedades de barreira contra gs oxignio, o
filme pode ser utilizado sem nenhum problema. Em alguns casos a nica
preocupao com propriedades mecnicas do HPMC, sendo assim a utilizao
desse filme sem alterao na permeabilidade de gs oxignio no descartada.
99
4.3.4. Degradao Trmica

Esta tcnica foi utilizada para avaliar a estabilidade trmica dos filmes
de HPMC, considerando a possibilidade de utiliz-los como coberturas, envoltrio
ou como embalagens de alimentos, que podem ser submetidos a processos trmicos
durante a preparao, processamento ou mesmo no consumo (BARRETO, 2003).
Na FIGURA 4.2 so apresentadas as curvas de TG dos filmes de
HPMC contendo as nanopartculas de QS-TPP.
Perda de Massa (%)
100
232 C
(A)
80
271 C
(B)
60
40
20
0
0
100
200
300
400
500
600
Temperatura (C)
FIGURA 4.2: Curva TG dos filmes de HPMC (A) e do filme de

HPMC com NPs de 110 nm (B). As anlises foram realizadas em atmosfera de
nitrognio com vazo de 60 cm3 min-1, amostra com massa de 6-7 mg e porta
amostra de platina.
O incio das curvas representa a diferena na eliminao de volteis
pelos materiais. Como todas as amostras foram preparadas e analisadas da mesma
forma, a diferena na eliminao de volteis representativa. A amostra de filme
de HPMC que contm NP apresenta uma eliminao maior de voltil, que a
100
amostra que contm somente HPMC. Uma das possibilidades que esses volteis
sejam gua adsorvida na estrutura do filme. Assim o filme com NPs possuem maior
capacidade de reter vapor de gua. Esse fato est de acordo com os dados do item
anterior, onde mostra que filmes com NPs apresentam menor capacidade de
permeao de gua.
medida que a temperatura aumenta a massa se mantm constante at
cerca de 232 C para o filme de HPMC puro. Com a adio de NPs a massa se
mantm constante at cerca de 271 C, para filmes com NPs de 110 nm.
Essas temperaturas correspondem ao incio da temperatura de
degradao (Td). A temperatura de degradao foi similar para todos os filmes que
contm NPs, como pode ser observado na TABELA 4.4.
TABELA 4.4: Temperaturas de degradao de filmes de HPMC sem
e com nanopartculas.
Filme
Tamanho de Partcula
TD (C)
(nm)
HPMC
Sem nanopartcula
232
HPMC + nanopartcula
85
279
HPMC + nanopartcula
110
271
HPMC + nanopartcula
221
276
A adio de nanopartculas nos filmes modificou sua caracterstica

trmica. A presena das NPs aumentou a estabilidade trmica dos filmes. Esse fato
relevante para a sntese por casting desses filmes. Uma mquina de escala
laboratorial, para a preparao de filmes comestveis, pode operar em escala piloto
101
para secagem dos filmes calibrada em 100-132 C, que leva cerca de 12 min para a
secagem (DU et al. 2008).
4.3.5. Morfologia dos Filmes

Vrios estudos envolvendo a avaliao de biofilmes tm utilizado a
micrografia eletrnica de varredura (MEV) como ferramenta, buscando
correlacionar as propriedades dos mesmos com a estrutura morfolgica (SOUZA,
2001). Em funo da grande profundidade de foco e da alta resoluo, tais anlises
podem permitir a visualizao da estrutura do filme e dos constituintes adicionados

(CARVALHO, 2002).
MEV foi utilizada para avaliar a morfologia dos filmes de HPMC puro
e dos filmes que contm NPs. Na FIGURA 4.3 apresentada micrografia do
filme de HPMC puro (FIG.4.3a) e filme de HPMC com NP (FIG.4.3b).
(a)
(b)
FIGURA 4.3: Micrografias eletrnicas de varredura de filmes de

HPMC puro (a) e filme de HPMC contendo nanopartcula de QS-TPP com 221 nm
(b).
102
O filme controle preparado a partir da soluo contendo 3% (m/v) de

HPMC em gua apresenta alto grau de porosidade distribuda atravs do filme.
Com a adio de nanopartculas de quitosana no filme (FIG. 4.3b) foi
observado que o filme apresentou maior compactao e rugosidade na sua
superfcie. Devido a essa compactao, foram observados anteriormente diferentes
valores de WVP e propriedades mecnicas para filmes com e sem nanopartculas.
4.3.6. Estudos de Calorimetria Diferencial de Varredura

(DSC)
A FIGURA de DSC para clculo da Tg dos filmes de HPMC puro,
est representada no Captulo III na FIGURA 3.6.
A Tg dos filmes de HPMC puro est em torno de 169 C. Para os
filmes contendo nanopartculas de QS-TPP os valores da Tg no apresentaram
grande variao. Com a adio de nanopartculas com 85, 110 e 221 nm os valores
de Tg calculados foram de 174, 172 e 168 C, respectivamente. Apesar de um leve
aumento, os valores permaneceram sem muita variao. Uma maior temperatura de
Tg foi apresentada para nanopartculas com menor tamanho. Talvez a interao
dessas com matriz do polmero HPMC seja mais favorecida, o que pode ser
explicado pela maior tenso apresentada por esses filmes nas anlises de
propriedades mecnicas. Os fatores que influenciam nesse pequeno aumento so
tambm os que foram discutidos no captulo anterior (item 3.3.8): aumento da
rigidez das cadeias moleculares, novos grupos volumosos, aqui representados pelas
NPs, inseridos no filmes, entre outros fatores.
4.4. Concluses
Os filmes elaborados com HPMC e nanopartculas de QS-TPP,
apresentaram-se manuseveis e visivelmente homogneos.
103
A presena de NPs melhora significativamente as propriedades de

barreira (WVP) e propriedades mecnicas dos filmes. A resistncia mecnica dos
filmes foi preservada por um perodo de sete meses. A diferena de tamanho das
nanopartculas tambm resultou em filmes com diferena nessas propriedades. As
nanopartculas menores foram as que apresentaram filmes melhores (menor
transferncia de vapor de gua atravs do filme e melhor propriedade mecnica).
A temperatura de degradao trmica aumentou nos filmes contendo
nanopartculas de 232 C para 271 C. A importncia disso, que a presena de
NPs nos filmes de HPMC resulta em filmes com uma maior termo-estabilidade.
As imagens de MEV revelaram que os filmes de HPMC contendo
NPs, apresentaram estrutura mais densa e compacta que os filmes puros. Os valores
de transio vtrea no apresentaram diferena significativa nos filmes com
nanopartculas inclusas.
Assim, o uso de nanotecnologia pode melhorar a funcionalidade desses
filmes na aplicao como em alimentos que necessitam de embalagens com baixa
permeabilidade de gua e maior resistncia.
104
CAPTULO V: Consideraes Finais
105
5.1. Concluses Gerais

O principal resultado alcanado pelo presente trabalho foi sintetizar
nanopartculas de quitosana e aplicar essas na melhoria das propriedades de filmes
sintetizados a partir de hidroxipropil metilcelulose.
As nanopartculas de quitosana foram sintetizadas com sucesso,
utilizando os mtodos aplicados de polimerizao em molde e gelatinizao
ionotrpica.
A obteno de nanopartculas de tamanhos diferentes para posterior
comparao de propriedades foi efetiva para ambas as snteses.
Obteve-se com xito, filmes de HPMC contendo nanopartculas de
quitosana.
As propriedades mecnicas e de barreira dos filmes de HPMC foram
significativamente melhoradas com a insero de nanopartculas de ambas as
snteses.
Os filmes com as melhores propriedades, foram obtidos a partir da
incorporao de nanopartculas obtidas pelo mtodo de polimerizao em molde,
utilizando 0,2% m/v de quitosana na sntese inicial. Essas nanopartculas
apresentam maior estabilidade e melhores propriedades dos filmes onde foram
inseridas.
O estudo contribuiu para o desenvolvimento de metodologia de
incluso da nanotecnologia no setor de embalagens para alimentos.
106
5.2. Sugestes para trabalhos futuros

As concluses finais deste trabalho sugerem propostas para trabalhos
futuros.
Uma das propostas a continuidade do estudo das propriedades
mecnicas e de barreira dos filmes, utilizando como varivel a espessura e tempo
de secagem dos filmes, e a anlise toxicolgica destes sistemas.
Outra possibilidade de trabalho futuro a realizao de testes da
estabilidade das propriedades dos filmes com o tempo de armazenamento, e a
comparao com filmes contendo outros tipos de nanoestruturas.
Outra proposta consiste na realizao de testes com o recobrimento de
frutos pelas embalagens, e monitoramento do tempo de conservao desse fruto.
Alm de frutos e hortalias, outros tipos de alimentos poderiam ser beneficiados
pelo revestimento c/ os filmes estudados, especialmente produtos que requeiram
embalagem com boa barreira umidade, como biscoitos, produtos desidratados,
queijos, etc. Testes de biodegradabilidade dos filmes tambm podem ser feitos.
107
CAPTULO VI: Referncias Bibliogrficas
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APLICAO DE NANOPARTCULAS EM FILMES

Mrcia Regina de Moura Aouada*

Tese apresentada como parte dos requisitos

Orientador: Luiz Henrique Capparelli Mattoso

Ficha catalogrfica elaborada pelo DePT da

Aouada, Mrcia Regina de Moura.

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO CARLOS

Assinaturas dos membros da banca examinadora que avaliaram e

Dr. Luiz Henrique Capparelli Mattoso

. uenritte Monteiro Cordeiro de Azeredo

Prof. Dr. Leonardo Femandes Fraceto

Eu vos louvarei de todo o corao, Senhor, porque ouvistes as minhas palavras. Na

Dedico esta tese aos meus

Dedico esta tese ao meu amor

- MOURA, Mrcia R. de; AZEREDO, Henriette M. C.; McHUGH,

Publicaes em Anais e Participao em Congressos

mechanical properties of hydroxypropyl methylcellulose edible films containing

Propriedades mecnicas e de barreira de filmes nanocompsitos de quitosana e

Calorimetria Diferencial de Varredura

Espectroscopia no Infravermelho com

Microscopia Eletrnica de Transmisso

Microscopia Eletrnica de Varredura

Ingls (Water Vapor Permeability)

FIGURA 2.16: Micrografia eletrnica de transmisso de nanopartculas sintetizadas a partir de

2.3.2. Nanopartculas QS-TPP............................................................................................... 52

4.2.2.1. Preparao dos filmes........................................................................................... 88

incorporao de nanoestruturas nos filmes (MOURA et al., 2008; MOURA et al.,

modificao, com o intuito de melhorar ainda mais as propriedades e desempenho

O principal objetivo da tese a incorporao de nanopartculas

CAPTULO I: Reviso Bibliogrfica

1.1. Nanotecnologia aplicada em embalagens

1.2. Nanopartculas polimricas

nanoesferas, que no apresentam leo em sua composio, so formadas por uma

1.2.1. Polimerizao em molde

pequeno, a propagao do molde se procede s custas da reao com o monmero

FIGURA 1.2: Representao esquemtica da polimerizao em molde

FIGURA 1.3: Representao esquemtica da polimerizao em molde

1.2.2. Gelatinizao Ionotrpica

FIGURA 1.4: Gelatinizao da quitosana com tripolifosfato de sdio.

A confirmao de presena de glucasamida na estrutura desses

desacetilao da quitina, polissacardeo encontrado abundantemente na natureza e

biocompatveis e produzidos por fontes naturais renovveis, cujas propriedades

uso da quitosana como cobertura de alimentos ou revestimentos protetores em

FIGURA 1.6: Esquema da obteno da quitina e quitosana.

Estes trabalhos enfocam, essencialmente, as propriedades antifngicas

antimicrobiana da quitosana, suas interaes com os componentes alimentcios e

1.4. Matrizes polissacardicas

hidroflicas e hidrogis, entre outras aplicaes, principalmente devido a suas

1.5. Hidroxipropil metilcelulose (HPMC)

(CANEVAROLO, 2002). Devido sua infusibilidade e insolubilidade, a celulose

FIGURA 1.7: Estrutura qumica da hidroxipropil metilcelulose, onde n

reduziu a perda de umidade e a quantidade de leo absorvida a partir de 40

1.6. Formao de filmes

2005), o vidro (GODBILLOT et al., 2006), o polietileno (CARVALHO, 1996) e

Uma outra situao ocorre se o polmero for colocado em uma soluo

1.7. Propriedades dos filmes

caractersticas sensoriais devem ser compatveis ao alimento (DEBEAUFORT et

Para que as embalagens no percam sua proteo pelo manuseio ou

FIGURA 1.8: Representao grfica das propriedades mecnicas de

filme em deformar antes de ocorrer sua ruptura. Baixos valores de elongao

CAPTULO II: Sntese e Caracterizao de