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RESUMO
Objetivo
O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da dieta suplementada com isoflavonas sobre o
metabolismo de ratas ovariectomizadas.
Mtodos
Foram utilizadas 27 ratas adultas, com 3 meses de idade, pesando aproximadamente 200 gramas e foram
divididas em 3 grupos: Grupo Controle (GC) - Ratas pseudo-ovariectomizadas que receberam dieta
padro; Grupo Dieta Padro (GDP) - Ratas ovariectomizadas que receberam dieta padro; Grupo Dieta
Isoflavona (GDI) - Ratas ovariectomizadas que receberam dieta padro suplementada com Isoflavona
de Soja e todos os grupos receberam gua ad libitum. Os animais foram sacrificados em jejum, por
decapto, colhidos os rgos, tecidos e soro para dosagens bioqumicas.
Resultados
Foram analisados peso dos tecidos adiposos brancos, fgado e rim, a evoluo do peso corporal e as
concentraes sricas de colesterol total, HDL-colesterol, triglicerdeos e glicose.
Os resultados demonstraram que a administrao de isoflavonas em ratas ovariectomizadas reduziu o
ganho de peso, o peso dos tecidos adiposos e as concentraes de colesterol e triglicerdeos
desencadeadas pela cirurgia, alm de aumentar a concentrao de HDL colesterol.
Concluso
A administrao de isoflavonas em ratas ovariectomizadas reduziu o ganho de peso, o peso dos tecidos
adiposos e as concentraes de colesterol e triglicerdeos desencadeadas pela cirurgia, alm de aumentar
a concentrao de HDL colesterol. H controvrsias quanto a dose ideal de isoflavonas para
administrao segura.
Palavras-chave: Isoflavonas; metabolismo lipdico; glicemia; ratas ovariectomizadas.
Introduo
A menopausa caracterizada pela suspenso irreversvel da funo ovariana, com o declnio da
secreo estrognica8 . Apresenta mudanas neuropsicolgicas, no perfil lipdico, em particular, aumento
das lipoprotenas de baixa densidade (c-LDL) e reduo das lipoprotenas de alta densidade (c-HDL)7.
MTODOS
Foram utilizadas vinte e sete Ratas Wistar adultas, virgens pesando aproximadamente 20015
gramas e trs meses idade no incio do experimento, provenientes do Biotrio Central da Universidade
para o Desenvolvimento do Estado e Regio do Pantanal- UNIDERP e mantidos no Biotrio da
UNIDERP, num regime de luz (12 horas claro e 12 horas escuro) e temperatura controlada (25 2C).
Os animais foram distribudos aleatoriamente em trs grupos contendo nove ratas em cada
grupo, conforme esquema experimental abaixo descrito:
Grupo Controle (GC) - Ratas pseudo-ovariectomizadas que receberam dieta comercial padro
(nuvilab) e gua ad libitum.
Grupo Dieta Padro (GDP) - Ratas ovariectomizadas que receberam dieta comercial padro
(nuvilab) e gua ad libitum
Grupo Dieta Isoflavona (GDI) - Ratas ovariectomizadas que receberam dieta comercial padro
(nuvilab) suplementada com Isoflavona de Soja e gua ad libitum.
Os animais dos grupos GDP e GDI foram submetidos ovariectomia sendo anestesiados via
intraperitoneal com soluo de cloridrato de xilazina (20 mg/Kg) e ketamina (100mg/Kg). Foram
realizadas duas incises bilaterais paralelas ultima costela, para a exposio e retirada dos ovrios. Na
regio do corte dos ovrios foi realizada cauterizao para preveno de hemorragias. Os animais do
grupo controle(GC) foram submetidos aos mesmos procedimentos cirrgicos dos grupo dieta
padro(GDP) e grupo dieta isoflavonas (GDI) no entanto, no foram retirados os ovrios.
No ps-operatrio, todos os animais receberam a mesma quantidade de gua e rao. No Grupo
GDI foi acrescentado dieta padro isoflavo nas isoladas da soja, na proporo de 1.66 mg/kg/dia
durante onze semanas aps o procedimento cirrgico. Os grupos GC e GDP receberam dieta padro.
Durante todo o processo experimental a evoluo do peso corporal de todas as ratas foi registrada uma
vez por semana, sempre nos mesmos dias e horrios.
Na dcima primeira semana ps-operatro, os animais foram sacrificados por decapitao, em
jejum, entre 10:00 e 12:00 horas da manh. Imediatamente aps a decapitao, foram retirados e
pesados os tecidos adiposos brancos parametrial (PAR) e retroperitoneal (RET), fgado e rins.
Para a anlise das concentraes de metablitos e hormnios, os animais foram mantidos em
jejum das 22:00h s 10:00h. O sangue foi coletado imediatamente aps o sacrifcio, atravs de um funil
diretamente no tubo de ensaio, foi centrifugado e o soro utilizado para determinao das concentraes
de triglicerdeos, colesterol, HDL-colesterol e glicose atravs de kits colorimtricos enzimticos
(Labtest Diagnstica S.A).
Os resultados foram expressos como mdia das variveis. Para anlise estatstica foi utilizada a
anlise de varincia de trs vias Anova three way para a comparao dos efeitos da ovariectomia e do
tratamento com isoflavonas. Para a comparao entre as mdias dos resultados obtidos foi aplicado o
teste de comparaes mltiplas de Duncan, utilizando como nvel de significncia (p 0,05).
RESULTADOS E DISCUSSO
figura 1 Evoluo semanal do peso corporal (g) de ratas controle (GC),
ovariectomizadas dieta isoflavona, e (GDI), ovariectomizadas dieta padro (GDP)
300
290
285
280
270
284
244
245
243
228
229
229
278
274
270
268
268
289
284
260
255
250
242
240
230
242
220
238
230
228
227
224
221
221
217
214
210
241
233
232
229
243
239
200
1
GC
GDI
8
GDP
10
11
Este estudo procurou mimetizar o perodo feminino conhecido como menopausa, caracterizada
principalmente pela reduo de estrgenos, que pode, segundo.(Zarrow12 ) Ser observada em ratas
submetidas a ovariectomia bilateral, constituindo modelo animal para o estudo das alteraes psmenopusicas como as mudanas do perfil lipdico 12.
A FIGURA I apresenta os dados relativos evoluo do peso corporal entre os grupos estudados.
Podemos observar que no houve diferenas significativas entre o grupo controle (GC) e o grupo
ovariectomizado tratado com isoflavonas de soja (GDI), que apresentaram ganho percentual de 7,11% e
6,11%, respectivamente. Por outro lado, o grupo ovariectomizado tratado com dieta padro (GDP)
apresentou um ganho percentual de peso corporal de 19,42%. Aps a menopausa, comum entre
mulheres o ganho de peso corporal devido aos efeitos da reduo de estrgenos no metabolismo
energtico. A manuteno do peso corporal resultante da ingesto de isoflavonas demonstra o papel
inibitrio destas substncias nas vias lipognicas, assim como suas atividades semelhantes aos
estrgenos10, 22.
figura 2 - Peso relativo (g/100g de peso corporal) do rim e tecido adiposo retroperitoneal (RET) de ratas
controle (GC), ovariectomizadas dieta padro (GDP) e ovariectomizadas dieta isoflavona (GDI).
+
1,40
1,23
1,20
1,00
0,83
0,95
GC
0,80
GDP
GDI
0,60
0,29
0,29
0,28
0,40
0,20
0,00
RIM
RET
figura 3 - Peso relativo (g/100g de peso corporal) do fgado (FIG) e tecido adiposo parametrial (PAR)
de ratas controle (GC), ovariectomizadas dieta padro (GDP) e ovariectomizadas dieta isoflavona
(GDI).
2,97
2,85
3,00
2,62
2,80
2,60
2,40
1,99
2,20
GC
1,96
GDP
2,00
GDI
1,80
1,42
1,60
1,40
1,20
FIG
PAR
Podemos observar nas figuras 2 e 3 que no houve diferenas estatisticamente significantes no peso do
fgado e rim em nenhum dos grupos estudados. Tal resultado importante para a manuteno da
homeostase dos animais, uma vez que estes dois tecidos regulam a concentrao de um grande nmero
de agentes metabolicamente ativos, como enzimas, hormnios e nutrientes 23, 24. Ainda em relao a
figuras 2 nota-se um aumento significante estatisticamente no peso do RET dos animais do GDP em
relao aos animais do GC. Estes resultados so compatveis com a literatura, que demonstra um maior
acmulo de gordura em mulheres a partir da menopausa 25 , investigando a prevalncia de obesidade e
fatores de risco associados em 1035 indivduos, na faixa etria entre 20 e 69 anos, residentes em Pelotas,
RS, verificaram que esta prevalncia aumenta consideravelmente com a idade, sendo cerca de quatro
vezes mais elevada aps os 40 anos, em relao ao grupo entre 20 e 29 anos, e duas vezes superior nas
mulheres, em relao aos homens, a partir da quarta dcada de vida.
Tal adaptao no foi observada no GDI, onde o valore do tecido adiposo branco retroperitoneal
foi igual e o parametrial menor que o GC. Isto sugere uma inibio das vias lipognicas e da captao de
lipdios da dieta por estes tecidos acarretadas pelas isoflavonas, atuando como estrgenos. Neste sentido
(VANDER DER SCHOUW, et. al.27 ), avaliaram a evidncia dos benefcios e riscos cardiovasculares
associados aos fitoestrgenos que desempenham atividade similar ao estrognio. Para (MAKELA et.
al.,199826 ).alguns desses compostos (isoflavonas) so agentes estrognicos por si, podendo atuar como
estrgeno endgeno.
figura 4 - Concentrao srica (mg/dl) de glicose e colesterol total de ratas controle (GC),
ovariectomizadas dieta padro (GDP) e ovariectomizadas dieta isoflavona (GDI).
100
95,64
95
+
91,28
91,61
88,7
90
GC
80,14
85
GDP
GDI
80
75,38
75
70
GLICEMIA
COLESTEROL
6
+
87,88
90
85
* 76,65
75,47
80
75
70
GC
59,4
65
60
GDP
GDI
55
46,38
50
45,9
45
40
HDL
TG
estrognios presentes no fgado. Como conseqncia melhora o perfil lipdico, o que favorece o
catabolismo de colesterol. A estimulao desses receptores proporciona a inibio da lipase heptica,
implicando no metabolismo do colesterol HDL e ocasionando seu incremento 5 .
Os resultados deste estudo demonstram que a administrao de isoflavonas em ratas
ovariectomizadas reduziu o ganho de peso, o peso dos tecidos adiposos e as concentraes de colesterol
e triglicerdeos, alm de aumentar a concentrao de HDL colesterol dos animais.
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