Mecanismo de replicao do DNA

O DNA sintetizado na direo 53 e utiliza como molde uma cadeia

de DNA preexistente. Neste processo intervm enzimas. A enzima helicase separa
as duas cadeias de DNA. Estas enzimas desenrolam as duas cadeias que compem a
dupla hlice, quebrando as ligaes hidrognio estabelecidas entre as bases azotadas
complementares de cada cadeia.
As DNA polimerases agregam os sucessivos nucletidos na extremidade 3' da cadeia
em crescimento. As DNA polimerases possuem duas caractersticas fundamentais:
Todas sintetizam DNA apenas no sentido 5' 3';
Nenhuma capaz de iniciar a sntese de novo de uma cadeia de DNA, o que implica
a necessidade de formao de sequncias iniciadoras da cadeia-filha (RNA iniciador
ou RNA primer).
Na replicao, as duas cadeias do DNA separam-se totalmente sendo ambas
so usadas como molde e, como as cadeias-filhas ficam junto das progenitoras, estas
obviamente no se tornam a juntar. Consequentemente, a partir da dupla hlice de uma
molcula de DNA originam-se duas molculas de DNA duas duplas hlices
ambas compostas por uma cadeia herdada do DNA progenitor e uma cadeia recmsintetizada. Como cada clula-filha recebe molculas de DNA cujas duplas hlices esto
integradas por uma cadeia original (preexistente) e uma cadeia nova (recmsintetizada), diz-se que o mecanismo da replicao do DNA semiconservador.
A duplicao do DNA produzida a partir de vrias origens da replicao
Se o DNA comeasse a sua replicao por uma das extremidades da molcula e
avanasse uniformemente ao longo desta, o processo de sntese demoraria, at estar
concludo, pelo menos 30 dias. No entanto, o tempo que o DNA demora para se
duplicar de aproximadamente 7 horas. A rapidez com que o faz, deve-se ao
aparecimento, ao longo do DNA, de vrias origens da replicao. Cada origem de
replicao formada quando se separam localmente as duas cadeias do DNA, evento
que ocorre em vrios pontos da molcula ao mesmo tempo.

A replicao do DNA um processo bidirecional

Quando a dupla hlice se abre, forma-se uma estrutura chamada bolha de replicao
(figura 1 e 2), cujo tamanho aumenta medida que avana a separao das duas
cadeias de DNA, fenmeno que se produz simultaneamente nos dois extremos da bolha.
Estabelece-se, desta forma, em cada um destes extremos, uma estrutura em forma de
Y - chamada forquilha de replicao cujos dois braos representam as cadeias do
DNA j separadas e o tronco representa a dupla hlice em vias de separao
Deste modo, cada bolha tem duas forquilhas de replicao que, a partir de um ponto de
origem comum, avanam em direes opostas. As forquilhas desaparecem quando se
integram com as suas similares nas bolhas contguas, ao colidirem, aps aproximao
progressiva.

Fig. 1

Fig.2

Existem diferenas no modo como so sintetizadas as duas novas cadeias de DNA

As cadeias de DNA so antiparalelas, o que cria uma primeira dificuldade
durante a sntese de novas molculas de DNA.
Ao nvel de cada forqulha de replicao, conforme a separao das duas cadeias
progride, uma apresenta os seus nucletidos na direo 5' 3"e a outra na direo
3' 5', de modo que a primeira, ao ser copiada, deveria gerar uma cadeia-filha
que crescesse na direo 3' 5', algo que nenhuma DNA polimerase pode fazer.
A clula resolve esta situao usando estratgias distintas na construo das
duas novas cadeias. A cadeia-filha que adota como molde a cadeia progenitora que
corre na direo 3' 5' construda, ao crescer na direo 5' 3', de forma
contnua, por intermdio da agregao de nucleotdeos na sua extremidade 3',
medida que avana a forquilha de replicao. Por outro lado, a outra cadeia-filha cujo
molde a cadeia progenitora que corre na direo 5' 3', sintetizada de um
modo singular, j que, para crescer nesta direo, a sua sntese deve ocorrer na direo
oposta ao avano da forquilha de replicao. O problema supera-se fazendo com que a
sntese seja descontnua, o que implica que a nova cadeia seja construda em pequenos
segmentos fragmentos de Okazak que se ligam entre si, medida que so
produzidos (figura 3).
A cadeia sintetizada de forma contnua conhecida pelo nome de adiantada
(leading) e a descontnua denominada atrasada (lagging).
A replicao do DNA um processo bidireccional no s porque se produz em
duas direes divergentes, a partir de uma mesma bolha de replicao, mas tambm,
porque as cadeias da dupla hlice so sintetizadas em direes opostas. Alm disso,
assimtrica, j que, tomando como referncia uma das duas cadeias do DNA, de um
lado da bolha a replicao contnua, enquanto, no outro lado, descontinua. A sntese
contnua avana na mesma direo em que o faz a forquilha de replicao, enquanto a
descontnua avana na direo contrria.

Fig. 3
A cadeia de DNA sintetizada de forma contnua comea a replicar-se a
partir de um primer
Para iniciar a sntese de uma cadeia complementar de DNA, alm da cadeiamolde, a DNA polimerase necessita de um primer (RNA iniciador), 0 RNA
iniciador tem como funo permitir a ligao cadeia nascente, da DNA polimerase,
para que esta continue a sntese da cadeia-filha na direo 5' - 3'. (Figura 4)

Fig. 4