Replicação do DNA

Processo de duplicação da molécula de DNA que origina duas

moléculas exatamente iguais à molécula-mãe.

O DNA necessita de se auto-

duplicar de modo a
transmitir a informação
genética de geração em
geração.
  Replicação conservativa

Nesta hipótese a molécula de DNA progenitora

mantinha-se intacta, servindo apenas de molde
para a formação da molécula-filha, formada por
duas cadeias novas de nucleótidos.

 Replicação dispersiva

Nesta hipótese cada molécula-filha seria formada

por porções da molécula inicial e por regiões
sintetizadas de novo, a partir de nucleótidos
presentes na célula.
 REPLICAÇÃO SEMICONSERVATIVA

Segundo Watson e Crick, a complementaridade

das bases do DNA permitia que esta molécula se
auto-duplicasse de forma semiconservativa:

◦ cada uma das cadeias serviria de molde para

uma nova cadeia;

◦ cada uma das novas moléculas de DNA seria

formada por uma cadeia antiga e uma cadeia
nova.
1957, Matthew Meselson e Franklin Stahl

 Demonstraram, experimentalmente, o modelo da

replicação do DNA.
 Cultivaram bactérias (Escherichia coli) ao longo de
várias gerações, num meio rico em 15N (isótopo de
N, não radioativo, que torna as moléculas mais
densas).

Todo o DNA das bactérias era denso (P)

 Cultivaram bactérias, seguindo o mesmo

procedimento anterior, mas num meio com 14N

O DNA das bactérias descendentes era pouco denso

(L)
 Cultivaram bactérias num meio contendo 15N,
transferindo-as de seguida para um meio com 14N,
onde as bactérias replicavam o seu DNA a cada
ciclo de 20 minutos. Em cada geração recolheram
amostras.

- Aos 0 minutos (logo após a transferência) o DNA

era denso;
- Após 20 minutos (1ª geração) o DNA das
bactérias era intermédio (constituído por 2 cadeias
com 15N e 14N);
- Após 40 minutos (2ª geração) o DNA das
bactérias é pouco denso (constituído por uma
cadeia com 15N e 14N e a outra com 14N e 14N).
Resultados:

 O DNA da geração parental (P) era mais denso do

que o DNA da 1ª geração (F1), e por sua vez, o DNA
da 2ª geração (F2) era ainda menos denso do que
os anteriores.

 Estes resultados são explicados com base no

modelo semiconservativo da replicação do DNA,
rejeitando os outros 2 modelos.
O mecanismo de replicação semiconservativa
envolve:

 O DNA é localmente desnaturado, quebrando-se as

ligações por pontes de hidrogénio, com
intervenção de enzimas;

 A abertura da dupla cadeia, torna-as acessíveis a

outras enzimas – DNA polimerases, que sintetizam
as 2 novas cadeias, obedecendo à
complementaridade das bases.
 Devido ao antiparalelismo da cadeia de DNA
parental, as 2 novas cadeias crescem de forma
diferente:

- A que copia a cadeia 3´- 5´forma-se de modo

contínuo no sentido 5´- 3´;

- A que copia a cadeia 5´- 3´forma-se de modo

descontínuo, em pequenas porções, que são
ligadas pela enzima DNA ligase.
 5´

3´

Cadeias
complementares 5´
desenrolam e
afastam-se por
ação de 3´
enzimas.
3´

As cadeias de polinucleótidos de
DNA originais são complementadas
por ação de enzimas, DNA
polimerases.

A síntese de cadeias complementares

ocorre no sentido 5´- 3´.
Cadeia polinucleotídica que pode apresentar, sob o ponto de vista de
estrutura e função, três formas distintas:

 RNA mensageiro (mRNA);

 RNA ribossómico (rRNA);
 RNA de transferência (tRNA).
Molécula de vida curta, sintetizada no núcleo, a partir de uma
porção de DNA (gene);
Migra depois para o citoplasma, onde participa na síntese de uma
proteína e depois se desintegra.

 Molécula que se apresenta enrolada;

Em conjunto com proteínas constitui os ribossomas (onde
ocorre a fase final da síntese proteica).
Molécula de estrutura tridimensional, o que se deve ao facto da
cadeia se enrolar e, em determinados locais, estabelecer ligações por
pontes de hidrogénio entre bases complementares de nucleótidos.

Há vários tRNA no citoplasma das células, pois cada um deles liga-se

a um único aminoácido.
 A estrutura típica do tRNA apresenta 2 locais:
 A extremidade 3´onde se liga o aminoácido (sequência CCA);

 Um conjunto de 3 nucleótidos, anticodão, que difere em cada

tRNA e que determina o aminoácido que se pode ligar.

Local de ligação
do aminoácido

Local da união Local de fixação

das enzimas ao ribossoma

É através do anticodão que o

tRNA se liga temporariamente
Anticodão
ao mRNA.