NATUREZA QUÍMICA

E ESTRUTURA
DOS
ÁCIDOS NUCLEICOS
Replicação do DNA
 Replicação do DNA
O material genético tem a capacidade de ser copiado / replicado e, assim,
transmitir as informações de geração em geração.

1956, Arthur Kornberg realiza a replicação do DNA in vitro

Três modelos de replicação do DNA:

Watson e Crick sugeriram a replicação semiconservativa

 Replicação do DNA
Previsões para as três hipóteses
Replicação do DNA
 Replicação do DNA
1958, Meselson e Stahl realizaram experiências que permitiram esclarecer
o mecanismo de replicação do DNA.

http://www.youtube.com/watch?v=blEAeGuiB1Q
 Replicação do DNA

http://www.youtube.com/watch?v=blEAeGuiB1Q

Os resultados obtidos por Meselson e Stahl apoiam a hipótese

semiconservativa de replicação do DNA.
Replicação do DNA
 Replicação do DNA
Como se processa a replicação da molécula de DNA?

Nas células eucarióticas, o processo de replicação inicia-se simultaneamente em vários pontos

(replicões) da molécula de DNA, prosseguindo em ambos os sentidos

de Replicões

Replicões
 Replicação do DNA

Cadeias complementares
Cadeias antiparalelas

Replicão

Replicão

Direção de
Direção de
crescimento da
crescimento da
nova cadeia 5´- 3´
5’ 3’ nova cadeia 5´- 3´
5’ 3’
 Replicação do DNA
antes de se começar a replicar, o DNA é localmente desnaturado, isto é, separa-se das histonas e dá-se o
desenrolamento de uma porção da molécula
as duas cadeias da dupla hélice separam-se por ruptura das ligações de hidrogénio devido à ação de DNA-
helicases
cada base separa-se da sua complementar; cada uma dessas cadeias vai servir de “molde” para a síntese
de uma cadeia complementar
os nucleótidos existentes na célula ligam-se às antigas cadeias de acordo com a regra de
complementaridade de bases
cada cadeia antiga (molde) elabora a sua cadeia complementar por outra igual à original
a molécula de DNA é constituída por duas cadeias antiparalelas: uma encontra-se orientada no sentido 3’
→ 5’ e a outra no sentido 5’ → 3’. O facto de todas as DNA polimerases promoverem a síntese do DNA
apenas no sentido 5’→ 3’, levou a considerar que as novas cadeias só poderão crescer nesse sentido. Por
este motivo, as duas cadeias que estão a ser sintetizadas irão crescer em sentidos contrários: as cadeias
que se formam devido por ação de DNA-polimerases apresentam orientação oposta mas sempre 5’  3’
a síntese da cadeia que ficará orientada de 5’ → 3’ ocorre continuamente por adição sucessiva de
nucleótidos
a cadeia complementar, o início da replicação do DNA depende da síntese de uma pequena fração de RNA
– RNA de iniciação – que é catalisada por uma enzima – RNA polimerase -. A presença deste RNA, que é
removido no final da replicação, deve-se ao facto da DNA polimerase não ser capaz de iniciar a síntese de
uma cadeia de DNA de 3’ → 5’
a cadeia complementar, orientada de 3’ → 5’, resulta da ligação de pequenos fragmentos - fragmentos de
Okazaki – sintetizados previamente no sentido 5’ → 3’. Esta ligação efetua-se na presença da enzima DNA
ligase
formam-se novas cadeias duplas, em que as novas moléculas são constituídas por uma cadeia da molécula
inicial e uma cadeia recém-formada
as duas moléculas de DNA recém-formadas são idênticas entre si e idênticas à molécula original
 Replicação do DNA
Enzimas que participam na A helicase separa a cadeias de DNA
replicação do DNA
Proteínas estabilizadoras impedem que as
cadeias separadas voltem a ligar-se
A primase adiciona um RNA de iniciação à
cadeia de DNA

Proteína
abre a estabilizadora adiciona Junta e liga os A DNA polimerase adiciona nucleótidos de
dupla mantem as curtos primers liga os fragmentos de DNA a um RNA de iniciação
cadeias aos quais se nucleótidos para Okazaky
hélice Sentido de toda a replicação
separadas ligam os formas as novas
parental
nucleótidos cadeias
de DNA
A DNA polimerase verifica e substitui as
bases incorretamente adicionadas

Prossegue a síntese contínua,

na cadeia que só tem um RNA
de iniciação, no sentido 5’  3’

A síntese descontínua, com

vários RNA iniciadores,
produz fragmentos de
Okazaky no sentido 5’  3’ Fragmento de Okazaky

Outras DNA polimerases removem os vários RNA iniciadores, substituindo-os por nucleótidos de DNA.
A ligase liga as lacunas no esqueleto pentose-fosfato
 Replicação do DNA

http://www.youtube.com/watch?v=GdaSIVHIZkI&feature=related
O modelo semiconservativo torna claro como http://www.youtube.com/watch?v=qF-BGYz7wNc
é que as células, antes de se dividirem,
http://www.youtube.com/watch?v=Ipa4bRwUTY8&feature=related
duplicam o seu DNA assegurando a
conservação do património genético ao longo http://www.youtube.com/watch?v=0KbxQ5gRQkU
das gerações. http://www.youtube.com/watch?v=4PKjF7OumYo
https://www.youtube.com/watch?v=TNKWgcFPHqw
https://www.youtube.com/watch?v=zVaPUThUdWw
 Replicação do DNA
Ação da DNA helicase e das proteínas de ligação às cadeias simples de DNA: as DNA helicases separam as duas cadeias
parentais do DNA à frente da forquilha de replicação, rompendo os pontes hidrogénio entre as bases, um esforço que
necessita de ATP.
A helicase ou DNA helicase é uma enzima que promove a abertura da hélice de DNA, separando-o em duas cadeias
simples para que possa sofrer replicação. A helicase quebra as ligações de hidrogénio entre as bases azotadas de ambas
as cadeias de DNA, fazendo com que estas se separem. Esta enzima move-se ao longo da cadeia dupla de DNA utilizando
energia da hidrólise de ATP para separar as duas cadeias da molécula.
As proteínas de ligação ao DNA, cooperam para estabilizar e estender o DNA cadeia simples, facilitando a ação de DNA
polimerases.
 Replicação do DNA
Nas células procarióticas, pelo contrário, este processo inicia-se num único ponto da molécula de DNA e prossegue
em sentidos opostos até toda a molécula se encontrar replicada. Este processo só é possível porque os seres
procariontes apenas possuem uma única molécula de DNA, circular e a replicação é mais rápida