MEDICINA VETERINÁRIA

Módulo I
Ciências da Saúde e a Formação do Médico Veterinário na Sociedade

GENÉTICA BÁSICA

REPLICAÇÃO DO DNA
Aula 9

Prof.a MSc. Thais Estruc

thaisestruc@souunisuam.com.br
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

A informação contida no DNA é transcrita na forma de RNA

mensageiro e este, por sua vez, é traduzido em uma proteína.

REPLICAÇÃO SEMICONSERVATIVA:
● Determina que cada fita do DNA serve de molde
para a síntese de uma nova hélice.
● A fita dupla será desenrolada e a nova fita será
produzida por meio da incorporação de
nucleotídeos contendo bases complementares à
fita molde.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

O DNA é replicado por meio da deselicoidização dos dois filamentos da

dupla-hélice e da construção de um novo filamento complementar em cada um
dos filamentos separados da dupla-hélice original.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
FORQUILHA DE REPLICAÇÃO: as fitas da hélice são desenroladas no local onde
ocorrerá a replicação. Surgirá inicialmente no ponto de origem da síntese e depois
se moverá ao longo da hélice dupla de DNA.
REPLICON: unidade do DNA onde está ocorrendo um evento de replicação.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

● Eucariontes: múltiplas origens de replicação

● Procariontes: uma única origem de replicação

Eucarionte
Procarionte
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

HELICASE: é a primeira enzima de replicação a se ligar na origem de replicação.

Sua função é "desenrolar" o DNA, quebrando as pontes de hidrogênio entre os
pares de bases nitrogenadas.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

PROTEÍNAS DE LIGAÇÃO À FITA SIMPLES (SSBs): ligam-se às cadeias

simples, mantendo-as na forma unifilamentar estendida para a replicação. No
entanto, elas o fazem de forma a deixar as bases livres para a associação dos
nucleotídeos.

Helicase À medida que essas

associações ocorrem e a
nova cadeia, denominada
Forquilha de replicação cadeia complementar, é
sintetizada, essas proteínas
desprendem-se do DNA.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

TOPOISOMERASE: evita que a dupla hélice de DNA à frente da forquilha de

replicação torne-se muito estreitamente enrolada à medida que o DNA é aberto.
Ela age fazendo cortes temporários na hélice para liberar tensão, depois fecha os
cortes para evitar dano permanente.

Topoisomerase

SSB
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

A formação de um novo filamento de DNA ocorre no sentido 5’→3’.

Uma dupla hélice de DNA é

sempre antiparalela.
Fita contínua

Fita descontínua A nova fita que se forma no sentido 5’→3’

é contínua (fita líder).

A síntese do outro filamento também ocorre na extremidade em crescimento 3′, mas

no sentido “errado”. Esta fita é descontínua (fita tardia), feita em pedaços
(fragmentos de Okazaki) porque não pode prosseguir por muito tempo à medida
que se afasta da forquilha. A síntese se movimenta de volta para a extremidade 5′,
onde a forquilha expôs o novo molde e inicia o processo novamente. Posteriormente
esses fragmentos serão unidos.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

PRIMASE: uma enzima do tipo RNA polimerase que sintetiza um trecho curto (~ 8 a
12 nucleotídeos) de RNA complementar, o primer. É o componente principal de um
conjunto de proteínas denominado primossomo.
PRIMER: uma cadeia curta de nucleotídeos, que se liga ao filamento-molde para
formar um segmento de ácido nucleico.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

No filamento contínuo, é necessário apenas um primer inicial, pois os

nucleotídeos são adicionados de forma contínua. Entretanto, no filamento
descontínuo, cada fragmento de Okazaki necessita de seu próprio primer. A
cadeia de RNA que compõe o primer em seguida é estendida como uma cadeia
de DNA.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

DNA POLIMERASE III: enzima responsável pela síntese do DNA; adiciona

nucleotídeos, um por um, à fita crescente de DNA, incorporando somente aqueles
que são complementares à fita molde.

DNA polimerase III sempre

adiciona nucleotídeos na
extremidade 3′ em
crescimento.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

Algumas características das DNA polimerases III:

● Sempre precisam de uma fita molde.

● Adicionam nucleotídeos somente na terminação 3' de uma fita de DNA.
● Não conseguem dar início à formação de uma fita de DNA; requerem uma
cadeia pré-existente ou uma pequena sequência de nucleotídeos chamada
de primer.
● Elas revisam (ou conferem) seu trabalho, removendo a maior parte dos
nucleotídeos erroneamente adicionados à cadeia.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

REPLISSOMO:
Grande complexo multienzimático o qual se
desloca com a forquilha de replicação. É
formado por duas DNA polimerases III (uma
da fita contínua e a outra da fita
descontínua) associadas a um subcomplexo
enzimático chamado primossomo.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
Fita descontínua
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
Fita descontínua
DNA POLIMERASE I: remove os primers de RNA e preenche as lacunas com sua
atividade de polimerase 3′ → 5′.
DNA LIGASE: une a extremidade 3′ do DNA que preencheu a lacuna à
extremidade 5′ do fragmento de Okazaki.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
Problema da replicação nas extremidades

A replicação da molécula de DNA em um cromossomo eucariótico linear ocorre em

ambas as direções a partir de várias origens. Esse processo ocorre na maior parte
do DNA eucariótico, mas há um problema ao replicar as extremidades dos
cromossomos, nas regiões terminais chamadas de telômeros.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA

A síntese no filamento contínuo pode

prosseguir até a ponta do molde. Entretanto, a
síntese do filamento descontínuo necessita
de primers à frente do processo; assim,
quando o último primer é removido, faltam
sequências no final daquele filamento.
❖ Consequência: uma ponta unifilamentar
permanece em uma das fitas-filhas de
DNA. Se o cromossomo-filho com essa
molécula de DNA fosse replicado
novamente, o filamento com sequências
ausentes na extremidade se tornaria uma
molécula bifilamentar encurtada após a
replicação, e assim sucessivamente.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
REPLICAÇÃO DO DNA
Solução da replicação nas extremidades
A enzima telomerase adiciona múltiplas cópias de uma sequência não
codificadora simples ao DNA nas pontas do cromossomo. Portanto, cada vez que
um cromossomo é duplicado, ele fica mais curto e apenas essas sequências
repetidas, que não contêm informações, são perdidas. As repetições perdidas
são, em seguida, adicionadas novamente às extremidades do cromossomo.

A telomerase carrega uma

pequena molécula de RNA,
parte da qual atua como um
molde para a síntese da
unidade de repetição
telomérica.
 Prof.a MSc. Thais Estruc

A telomerase tem um RNA associado que complementa a fita

TELOMERASE
3' no final do cromossomo.

Em todos os vertebrados, incluindo

seres humanos, a sequência de
O molde de RNA é usado para sintetizar a fita complementar. RNA 3′-AAUCCC-5′ atua como o
molde para a unidade de repetição
5′-TTAGGG-3′.

A telomerase muda e o processo é repetido.

Primase e DNA polimerase sintetizam a fita complementar.

 Prof.a MSc. Thais Estruc

TELOMERASE
A telomerase tem um RNA associado que complementa a fita
3' no final do cromossomo.

● Parte da sequência de RNA se pareia

O molde de RNA é usado para sintetizar a fita complementar.
A telomerase muda e o processo é repetido.
com a terminação do DNA e o restante do
RNA se estende além dessa projeção.
● Em seguida, essa sequência estendida
atua como molde para a síntese de DNA,
de forma a aumentar a fita molde rica em
G na extremidade 3’.
● A lacuna na fita complementar, rica em C,
pode então ser preenchida por
DNA-primase e DNA-polimerase

Primase e DNA polimerase sintetizam a fita complementar.

 Prof.a MSc. Thais Estruc
TELOMERASE

Os telômeros preservam a integridade cromossômica por meio da associação

com proteínas para formar capuzes protetores.

O prolongamento 3′ é “escondido” quando desloca um filamento de DNA em uma

região na qual as repetições teloméricas são bifilamentares.
 A replicação é semiconservativa tanto em procariotos quanto em eucariotos. Uma dupla-hélice é
replicada para formar duas hélices idênticas, cada uma com seus nucleotídeos na ordem linear idêntica;
cada uma das duas novas duplas-hélices é composta por um filamento antigo e um filamento
recém-polimerizado de DNA.
A dupla-hélice de DNA é desenrolada pela helicase em uma forquilha de replicação e os dois
filamentos únicos assim produzidos atuam como moldes. Os nucleotídeos são adicionados pela enzima DNA
polimerase III, apenas à extremidade 3′ de uma cadeia de DNA em crescimento. A polimerização em um
molde é contínua, produzindo o filamento contínuo e, no outro, é descontínua em trechos curtos
(fragmentos de Okazaki), produzindo o filamento descontínuo. A síntese do filamento contínuo e de cada
fragmento de Okazaki é iniciada por um primer de RNA curto (sintetizado pela primase) que fornece uma
extremidade 3′ para a adição de desoxirribonucleotídeos.
O replissomo é complexo proteico inclui duas unidades de DNA polimerase III, uma para atuar no
filamento contínuo e uma para atuar no filamento descontínuo. A síntese é mais demorada nos fragmentos
de Okazaki devido a união dos em um filamento contínuo. Onde e quando a replicação ocorre é
cuidadosamente controlado pela montagem ordenada do replissomo em determinados locais nos
cromossomos, denominados origens. Os genomas eucarióticos podem apresentar dezenas de milhares de
origens.
As extremidades dos cromossomos lineares (telômeros) apresentam um problema para o sistema de
replicação, tendo em vista que sempre há um trecho curto em um filamento que não pode ser iniciado. A
telomerase adiciona várias sequências curtas e repetitivas para manter o comprimento. A telomerase
carrega um RNA curto que atua como o molde para a síntese das repetições teloméricas. Essas repetições
teloméricas não codificadoras associam-se a proteínas para formar um revestimento telomérico.
 Prof.a MSc. Thais Estruc
EXERCÍCIOS

❖ O ponto onde as duas cadeias de uma hélice de DNA se separam, em

decorrência da formação de novas cadeias, é chamado ________________.
❖ A polimerização de curtas sequências de nucleotídeos, que são posteriormente
unidos para formar uma cadeia de DNA, é chamada ________________.
❖ A denominação ________________ para a replicação do DNA deve-se ao fato de
uma das cadeias filhas ser fabricada aos pedaços enquanto que a outra é
fabricada continuamente.
OBRIGADA!
thaisestruc@souunisuam.com.br