domingo, 7 de abril de 2019

Replicação de DNA
Complexo enzimático:

• Helicase - rompe pontes de Hidrogênio entre bases nitrogenadas

• Topoisomerase - evita a supertorção das fitas de DNA ao promover a quebra transitória de
pontes de Hidrogênio
• SSBs - ligam-se ao complexo aberto, garantindo que as fitas permaneçam separadas e
protegendo-as da ação de nucleases
• Primase - sintetiza o primer de RNA, que dará início à polimerização
• Polimerase - catalisa a adição de nucleotídeos a fitas pré-existentes, requerendo: fita molde,
primer, Mg++ e nucleotídeos livres
• Ligase - unem os fragmentos de Okazaki da fita lagging

Em E. coli

Início:

DnaA liga-se à origem única (oriC), atuando nas sequências de 13 pB, ricas em A e T.
DnaB (helicase) rompe as pontes de hidrogênio e inicia o complexo aberto, gerando a bolha de
replicação.

As SSBs ligam-se às fitas simples, protegendo-as de nucleases e garantindo a conformação

ideal à replicação (separadas)

A Dna Girase (topoisomerase) atua em ambas as forquilhas, evitando a supertorção das fitas de
DNA.

A Dna Primase sintetiza o primer de RNA (iniciador), a fim de iniciar a atuação da DnaPol(III)

Alongamento:

DnaPol(III) é posicionada de forma a adicionar nucleotídeos complementares à fita molde,

gerando as novas fitas de DNA.
Ela trabalha no sentido 5’—> 3’, de forma que a fita molde ideal é a 3’—>5’, chamada também
de fita líder, ou leading. Nessa fita, só é necessária a adição de um primer de RNA, sendo sua
replicação contínua.

Entretanto, por as fitas serem anti-paralelas, a outra fita possui sentido 5’—> 3’, inviável à ação
da Dna Pol (III). Ela é conhecida como fita tardia, ou lagging. Nela, a replicação ocorre de
maneira descontínua, com inserção de vários primers de RNA, gerando os fragmentos de
Okazaki.

Término:

Na fase de término da replicação do DNA, há o desacoplamento da Dna Pol, bem como

remoção dos primers de RNA. A Dna Pol (I) substitui tais iniciadores por nucleotídeos de DNA.
Na fita tardia, a junção dos fragmentos de Okazaki se dá por meio da enzima Dna Ligase,
formando a fita em si.
Além disso, a Dna Pol (II) realiza a ação de “proofreading”, garantindo que não há erros na nova
fita. Caso haja, são acionadas proteínas de reparo, de forma a nova fita seja fiel à original.
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O término é sinalizado de algumas maneiras, como na região terminal (TER), com sequências
de nucleotídeos que agem como “armadilhas" para a enzima polimerase.

OBS.: Nos eucariotos a síntese é bem semelhante, com algumas diferenças: possui várias
origens; ribonucleases substituem os primers de RNA por nucleotídeos de DNA.

Os telômeros:

Os telômeros são sequências de DNA repetitivo presentes somente em cromossomos

eucariotos, como forma de proteção das extremidades, mantendo os genes codificantes
intactos. São sintetizados pela enzima Telomerase, quando a célula ainda está em processo de
diferenciação. Ao longo das replicações do material genético, tais sequências teloméricas vão
diminuindo, sinalizando o envelhecimento celular.