Estrutura do DNA e

Replicação

Professora Denise Monnerat Nogueira

Departamento de Genética – ICBS/UFRRJ
  São moléculas de caráter ácido encontradas
primeiramente no núcleo das células.

Ácidos  Atualmente sabemos que o DNA ou ácido

desoxirribonucleico também ocorre nas
Nucleicos mitocôndrias e clororoplastos.
 e que o ácido ribonucleico ou RNA além do
núcleo também se encontra é encontrado no
nucléolo, nos ribossomos, no citoplasma, nas
mitocôndrias e nos cloroplastos.
Esta Foto de Autor Desconhecido está licenciado em CC BY-SA-NC
Estrutura do DNA

 O DNA e o RNA são moléculas poliméricas.

Um polímero é uma molécula de cadeia longa que contém

inúmeras unidades individuais, chamadas monômeros,
unidas em série.

Os nucleotídeos – são os monômeros no DNA e no RNA.

 São constituídos de três componentes:
▪ açúcar
▪ base nitrogenada
▪ ácido fosfórico
 Estrutura do DNA
• O açúcar é uma pentose (que contém 5 átomos de carbono)
chamada 2’-desoxirribose, com estrutura anelar., tendo em
vista que contém apenas um átomo de hidrogênio nesta
posição.

edisciplinas.usp.br

• Na ribose, outra pentose, apresenta um grupo hidroxila

(OH) naquela posição e é o açúcar do RNA – outro ácido
nucleico.
 Estrutura do DNA
• Quatro tipos de bases nitrogenadas —
adenina, guanina, citosina e timina.

• A complementaridade é dada pela ligação

entre as bases A /T com duas ligações de
hidrogênio entre elas e C/G com três
ligações de hidrogênio.

• A soma de bases purinas é igual a soma de

bases pirimidinas. No entanto, a
porcentagem de C/G não é
necessariamente igual a porcentagem A/T.

• O pareamento das bases fornece o meio

pelo qual a informação é copiada sem
ser alterada.

• No RNA abase timina é substituída por

uracila
 Estrutura do DNA

• As ligações fosfodiester
conectam os nucleotídeos
na mesma cadeia.

• Uma ligação fosfodiéster

conecta o átomo de carbono
5′ de uma desoxirribose ao
átomo de carbono 3′ da
desoxirribose adjacente.

• Cada base está ligada ao

carbono 1’ do açúcar – por
ligações covalentes N-
glicosídicas.
 Estrutura do DNA

• As pontes de hidrogênio
são as únicas forças
atrativas entre os dois
polinucleotídeos e servem
para manter a estrutura
unida.

• Os dois polímeros de
dupla-hélice têm sentidos
opostos. Um
polinucleotídeo aponta
para a direção
• 5’→3’ e o outro, para a
direção 3’→5’.
alemdasaulas.press.com
Estrutura do DNA

• Os dois polinucleotídeos são complementares e as

cadeias são anti-paralelas.

• A complementaridade é dada pela ligação entre as

bases A /T com duas ligações de hidrogênio entre
elas e C/G com três ligações de hidrogênio.

• A soma de bases purinas é igual a soma de bases

pirimidinas. No entanto, a porcentagem de C/G não
é necessariamente igual a porcentagem A/T.

• O pareamento das bases fornece o meio pelo qual a

informação é copiada sem ser alterada.
 Estrutura do
DNA

https://slideplayer.com.br/slide/3049049/
 • Na forma-B descrita por
Watson e Crick o giro da
hélice é para a direita (hélice
dextrógira).
Estrutura da
dupla-hélice • Há aproximadamente 10
pares de base por giro
do DNA completo.

• A cavidade ou sulco maior e

cavidade ou sulco menor são
regiões importantes para
ligação de proteínas que
mantêm a estrutura da
molécula de DNA e regulam a
atividade dos genes.
 Hélice dextrogira – forma B – ao centro.

https://pt.wikipedia.org/wiki/Z-DNA

Na forma A (à esquerda) o giro é para a direita também, é mais compacta com 11 pares
de bases a cada giro completo, com ângulo de 23 Ao entre cada par. Essa forma prevalece
em condições de alta salinidade e desidratação. Na forma Z (à direita) o giro é para a
esquerda, há aproximadamente 12 pares de base por giro, com um ângulo de 18 Ao
dando uma forma de ziguezague à molécula.
 Replicação do DNA
• É um processo semi-conservativo

• Para a replicação são necessários:

1. Fita-molde (cada uma das fitas da molécula de DNA) –
são necessárias enzimas para desfazer o giro, desnaturar
a dupla-fita e mantê-las desnaturadas)
2. Primase – adiciona o primer (sequência iniciadora –
com aproximadamente com uma sequência de 10 nt de
RNA)
3. DNA polimerase (enzima que faz polímeros de DNA –
sintetiza as novas fitas após a adição dos primers, outras
DNA polimerases para remover os primers, ligase para
concluir os reparos)
4. 4 tipos de nucleotídeos (dNTPs – desoxinucleotídeos
trifosfatados – dATP, dTTp, dCTp e dGTP)
 Replicação do DNA em Procariotos
• Inicia com a formação da bolha de replicação,
ori-C • pela interação das proteínas pré-iniciadoras
DnaA à 4 repetições de 9 pb em oriC
• A separação dos filamentos começa nas três
repetições consecutivas de 13 pb em oriC
criando a bolha de replicação.
• A DNAB (helicase) rompe as ligações de
hidrogênio e as SSBs mantêm a desnaturação.
• A DNA girase (uma topoisomerase que
catalisam quebras transitórias no DNA) evita o
superenrolamento do DNA
• A Primase adiciona uma sequência de
aproximadamente 10 nt de RNA na direção 5’-
3’ que é a direção da polimerização das novas
cadeias.
Snustad et al. 2013
 Replicação do DNA em Procariotos
• A Primase adiciona o primer uma sequência
de aproximadamente 10 nt de RNA na direção
ori-C 5’-3’ que é a direção da polimerização das
novas cadeias.
• O primer fornece a OH3’ livre para a DNA
polimerase prosseguir a polimerização das
novas fitas.
• Há 3 DNA polimerases em procariotos
DNApolI, II e III
• A DNApolIII é a replicase e contêm muitas
subunidades com aproximadamente 20
polipeptídeos.

Snustad et al. 2013

 Replicação do DNA em Procariotos

• A subunidade beta mantém a DNApolIII ligada à fita parental

permitindo que ela deslize.
• DNApolI – Reparo do DNA e atividade exonucleásica 3’-5’ e 5’-3’
(importante para a remoção dos primers)
• DNapolII – Reparo do DNA também em ambos os sentidos
• DNApolIII – principal enzima replicadora atividade polimerase
5’-3’ e exonuclease 3’-5’.
• Há também DNApolIV e V
Replicação do DNA
Em eucariotos – Múltiplas DNA polimerases

 Pelo menos 15 diferentes:

1. DNApol alfa- forma um complexo estável com a primase
(inicia a replicação – a primase acrescenta aproximadamente
10 nt de RNA seguidos por nt de DNA acrescentados pela DNA
polα),
2. DNApol delta- (alonga a fita retardatária) ,
3. DNApol épsilon- (síntese da fita líder) ambas têm função de
exonuclease 3’-5’ ,beta-β (reparo do DNA nuclear),
4. DNApol gama- (replicação e reparo do DNA mitocondrial),
5. Duas ribonucleases FEN1 e Rnase H removem os primers do
início da fita líder e do início dos fragmentos de Okazaki
6. DNA pol  preenche as lacunas e a ligase fecha os cortes
gerando ligações covalentes.
DNA pol também precisa de uma OH3’livre. Acrescenta os
nucleotídeos na direção 5’-3’.
Em eucariotos – Origens de Replicação

https://slideplayer.com.br/slide/1468508/
Replicação do DNA em Eucariotos
DNA
Fita líder polimerase

Helicase
RNA polimerase
Fita retardatária
SSBs

pt.slideshare.net
DNA polimerase em fita
retardatária

• Forquilha de replicação – região da síntese de DNA onde as fitas

parentais se separam e se alongam em duas novas fitas. Marca a
origem da replicação.
 OH3’ livre para início da atividade da DNA pol

Primer
O nucleotídeo acrescentado com o grupamento
fosfato ligado ao carbono 5’

Fita molde de DNA

2 fosfatos liberados pela ação da pirofosfatase.

Início da
Replicação 5’ para 3’
A replicação de cada uma das
fitas do DNA em eucariotos

Fita líder

Fita retardatária

https://auxfisio.wordpress.com/2017/11/11/o-que-e-o-fragmento-de-okazaki/
Direção da replicação

direção do movimento
de replicação
Fita molde tardia da porção
Fita
Fitamolde
moldelíder
líderda
daporção
porção direita da forquilha
esquerda
esquerdada daforquilha
forquilha

Fita molde tardia da porção

esquerda da forquilha Fita molde líder da porção
direita da forquilha
Replicação dos telômeros

Mecanismos especiais são necessários para replicar o

DNA dos telômeros.

A telomerase é uma transcriptase reversa que

sintetiza o DNA a partir de um molde de RNA.

Ela carrega o seu próprio molde de RNA que é

complementar a sequência repetida nos telômeros.
Replicação
nos telômeros
 Progéria
• Síndrome de Hutchinson-Gilford – mutação
autossômica dominante. Senescência inicia
logo após o nascimento e morte na
adolescência. Mais grave.

• Síndrome de Werner – mutação autossômica

recessiva - senescência começa na
adolescência e a morte ao redor dos 40 anos.
Menos grave

• A mutação é no gene codificador da lâmina A

responsável pelo controle do formato das
células.

• Não se sabe como esta mutação promove o

envelhecimento, porém nas duas formas de
progéria as células somáticas têm telômeros
mais curtos.

• Embora não haja evidência direta de que o

encurtamento dos telômeros cause wikipedia

envelhecimento, a correlação é surpreendente.

1953 –Watson e Crick (O segredo da vida)

• A dupla hélice é realmente uma molécula extraordinária. O

homem moderno tem talvez 50 mil anos, a civilização existe
há apenas 10 mil anos. Mas o DNA e o RNA existem há pelo
menos vários bilhões de anos. Durante todo esse tempo, a
dupla hélice esteve por aí, ativa. No entanto, somos as
primeiras criaturas sobre a Terra a nos tornarmos
conscientes da sua existência.

Francis Crick -- Decifrando o genoma –

A corrida para desvendar o DNA humano
(Kevin Davies) Ed. Companhia das Letras, 2001.

Por hoje é só!