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EXTERNATO RIBADOURO

Atividade Laboratorial de Biologia - Relatrio

Extrao de ADN de clulas vegetais

Trabalho realizado pela aluna:


M Beatriz Andrade n 21 11 A6
no mbito da disciplina de Biologia e Geologia
Prof Ise Machado

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Extraco de ADN das clulas da banana

Introduo

O ADN, ou cido desoxirribonucleico, composto de vrios nucletidos, constitudo essencialmente por


aminocidos; inanimado, ou seja, no reactivo e quimicamente inerte. Controla a funo das clulas e
responsvel pela existncia de vida, pois contm o seu esquema.

Em organismos vivos, o ADN no existe como uma molcula nica mas sim como um par de molculas firmemente
associadas. As duas longas fitas de ADN enrolam-se formando uma dupla hlice. Os nucletidos esto presentes
em ambas as fitas da dupla hlice, unidos com nucletidos da mesma fita por ligaes fosfodister e fita
complementar, atravs de pontes de hidrognio formadas pelas suas bases.
A dupla hlice do ADN estabilizada por pontes de hidrognio, entre as bases presas s duas fitas. As quatro bases
encontradas no ADN so a adenina (A), a citosina (C), a guanina (G) e a timina (T).
A dupla hlice uma espiral dextra. Contm as bases do plano gentico que copiam as mensagens biolgicas e as
transferem para molculas muito mais geis conhecidas por RNA (a transmisso dos nossos pais para ns, onde
metade do nosso ADN ser materno e a outra metade paterno)

Sendo o ADN inerte e quimicamente inactivo ele pode ser extrado de uma srie de fontes, mesmo que secos h
milhares de anos.

Objectivo

Esta actividade laboratorial tem como objectivos conhecer as tcnicas de extraco de ADN das clulas e
compreender o processo necessrio sua extraco para que nos seja possvel a visualizao do material gentico.

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Material

- Banana;
- Almofariz;
- Bisturi;
- Banho-maria (37);
- Gaze;
- Proveta;
- Lminas e lamelas;
- Tubo de ensaio;
- gua destilada;
- Detergente da loua;
- Cloreto de sdio;
- Etanol;
- Fucsina bsica;
- Microscpio ptico.

Procedimento Experimental

1. Depois de ter descascado uma banana, cortamos 3 rodelas;


2. Maceramos a banana num almofariz at obter uma pasta quase homognea;
3. Adicionamos uma soluo composta por:
- 100 ml de H2O;
- 10 ml de detergente da loua;
- 3 g de NaCl.
4. Colocmos a preparao em banho-maria (37) durante 15 minutos;
5. Colocamos uma gaze sobre um copo limpo e filtramos a mistura para retirar os pedaos de banana que
restaram;
6. Transferimos cerca de 5ml de lquido para um tubo de ensaio;
7. Adicionamos lentamente preparao, 5 ml de etanol 96% a 5C.
8. Deixamos repousar cerca de 3 minutos at observarmos a ascenso de uma camada gelatinosa;
9. Observmos ao microscpio, utilizando a fucsina bsica.

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Discusso de Resultados

A banana ao ser esmagada levou ao rompimento da parede celular para que houvesse um extravasamento celular.
Depois de se derramar o lcool na mistura de banana, deixou-se repousar durante 15 minutos e a partir da
comeou a observar-se, acima da camada do extracto, um outro extracto gelatinoso, constitudo por fitas
brancas muito finas o ADN.

O porqu da utilizao do sal

O sal utilizado para ajudar a manter as protenas dissolvidas no lquido extrado, impedindo que elas precipitem
com o ADN.
O sal tambm d um ambiente favorvel ao ADN, e contribui com ies positivos que neutralizam a carga negativa
impedindo a repulso elctrica entre as molculas de ADN, permitindo a sua agregao de modo a formar
filamentos mais espessos e compridos que so mais facilmente visveis.

O porqu da utilizao do detergente

O detergente ajuda a dissolver e a desagregar as membranas nucleares constitudas pela bicamada fosfolipdica
que compe a membrana plasmtica e as membranas dos organelos. Desta forma, todo o contedo celular
inclusive o ADN fica disperso na soluo.

O porqu da utilizao do lcool (etanol)

Utilizamos o lcool porque o ADN no solvel neste composto, agrupando-se. O lcool possibilita assim a
separao do ADN, levando os filamentos de ADN a ascenderem na camada de lcool, surgindo mais prximos da
superfcie. As bolhas de ar que se desenvolveram devido ao choque trmico colaboraram na ascenso do ADN.
Quanto mais gelado o lcool, menos solvel ser o ADN

Concluso

Com esta experincia podemos concluir que o ADN uma molcula existente nas clulas de todos os seres-vivos e
tambm que pode ser extrado. Para tal necessrio a utilizao de certos componentes: sal, lcool e detergente.
O sal proporciona um ambiente considerado favorvel s molculas de ADN das clulas, pois contribui com ies
positivos que neutralizam, a carga negativa ADN.
Por sua vez o detergente intervm no rompimento e na desestruturao das membranas celulares.
O lcool desidrata as molculas de ADN, aglutinando-as e ao mesmo tempo tornando-as visveis a olho nu. Isto s
ocorre porque o ADN aparece como uma massa branca e filamentosa (cromatina).

Recorrendo a um determinado nmero de processos, realizados em funo da composio e estrutura


do ADN, possvel a extraco desta molcula e sua posterior visualizao.