ESCOLA SECUNDÁRIA DE CANEÇAS

RELATÓRIO CIENTÍFICO

Extração de DNA de células vegetais

Disciplina de Biologia e Geologia

Professora: Raquel Barros

Ana Carolina Cabral Pereira

Nº2, 11CT3

Data de entrega: 4 de outubro de 2023

ÍNDICE

Introdução ................................................................................................................................................ 3
Fundamentação Teórica .......................................................................................................................... 4
→ Importância do estudo do DNA em pesquisa biológica e genética ......................................... 4
→ Estrutura do DNA ..................................................................................................................... 4
→ Técnicas e reagentes comuns usados na extração de DNA ..................................................... 5
→ Aplicações práticas da extração de DNA de células vegetais .................................................. 5
Procedimento experimental .................................................................................................................... 6
→ Material: ................................................................................................................................... 6
→ Metodologia ............................................................................................................................. 6
Registo de resultados ............................................................................................................................... 7
Discussão .................................................................................................................................................. 8
Conclusão ................................................................................................................................................. 9
Introdução

O DNA (ácido desoxirribonucleico) é uma molécula presente no núcleo das células

formado por uma fita dupla em forma de espiral (dupla hélice), composta por
nucleótidos.

Todas as informações genéticas de um individuo encontram-se no DNA. Este ácido

nucleico é responsável pelo armazenamento dessas mesmas informações.

O primeiro passo para poder analisar o DNA é isolá-lo e extrai-lo.

A extração de DNA é uma técnica fundamental em biologia molecular, permitindo a

obtenção de material genético para análises posteriores.

A experiência realizada teve como objetivos conhecer técnicas de extração de DNA

das células e compreender o processo necessário à extração do mesmo.

Nesta experiência foram utilizados kiwis para a extração, o procedimento envolveu a

homogeneização das células, a rutura das suas membranas celulares e a
precipitação do DNA em álcool etílico.

Como resultado foi possível observar a formação de um precipitado esbranquiçado

na fase alcoólica.

Esta experiência ilustrou o processo de extração do DNA em células vegetais e a

sua aparência característica.
Fundamentação Teórica

→ Importância do estudo do DNA em pesquisa biológica e

genética

O DNA foi descoberto por Johann Friedrich Miescher, em 1869. O conhecimento

desta molécula foi essencial para o progresso da biotecnologia moderna.

Tem sido utilizado na agricultura, com modificações genéticas em diversas culturas

importantes, que pode servir para aumentar a resistência das plantas contra
doenças ou para aumentar a produtividade.

O DNA também é útil para a ciência forense, pois tem ajudado a resolver casos
criminais. Ao colher amostras de DNA presentes no local do crime é possível
identificar o autor do crime.

Os testes de DNA podem ajudar também a determinar a paternidade, resolvendo

casos legais, a gravar códigos genéticos com centenas de anos, podendo ser
utilizados por investigadores para experiências futuras, a estudar a origem de
diferentes espécies e na área de medicina estes testes servem para a deteção de
possíveis doenças hereditárias, na deteção de vírus e mutações que ocorrem nas
células.

→ Estrutura do DNA

O DNA, ou ácido desoxirribonucleico, é o material genético das células, onde estão

armazenadas todas as informações e instruções que determinam as características
de um organismo e as suas respetivas funções.

Todos os seres vivos apresentam DNA. Nos procariontes, este é encontrado no

citoplasma, no nucleoide. Nas células eucarióticas a maior parte desta molécula
encontra-se no núcleo, mas no caso das células animais também pode ser
encontrada nas mitocôndrias e nas células vegetais nos cloroplastos.

A molécula de DNA possui uma dupla hélice longa e em espiral. Esta é um polímero
de nucleótidos, que são monómeros constituintes de todos os ácidos nucleicos.
Cada nucleótido é composto por uma molécula de
desoxirribose, um grupo fosfato e uma base
nitrogenada característica. As bases nitrogenadas
podem ser purinas (com dois anéis), a adenina e a
guanina, ou pirimidinas (com um anel), a citosina e a
timina. A adenina é emparelhada com timina e
guanina é emparelhada com citosina. Cada par de
bases é mantido unido por uma ligação de
hidrogênio.

→ Técnicas e reagentes comuns usados na extração de DNA

Antes de extrair o DNA é necessário isolá-lo, para isso tira-se partido das
propriedades físicas e químicas do DNA.
Nesse processo é utilizado detergente, este serve para romper as membranas
celulares e filtrar o DNA ao destruturar as moléculas dos lípidos presentes nessas
membranas. A adição de sal proporciona um ambiente favorável à sua extração,
pois contribui com iões positivos para neutralizar a carga negativa do grupo fosfato
do DNA.
O álcool é utilizado para desidratar o DNA o que permite que não se dissolva no
meio aquoso, uma vez que este tende a não se dissolver com o álcool, assim as
suas moléculas agrupam-se e formam um precipitado, o facto de este álcool se
encontrar gelado permite a esse precipitado ter uma cor esbranquiçada.

→ Aplicações práticas da extração de DNA de células vegetais

Como já foi referido anteriormente a extração do DNA tem diversas aplicações

práticas.
Mais especificamente, a extração em células vegetais pode ser útil para a análise
genética de plantas, a pesquisa de marcadores genéticos e a modificação genética
das plantas.

Procedimento experimental

→ Material:

• Um Kiwi
• Saco de plástico com fecho hermético
• Gobelés de 250 ml
• Gaze
• Tubos de ensaio e respetivo suporte
• Proveta de 100 ml
• Pipeta de Pasteur
• Vareta de vidro
• Álcool etílico a 96% (arrefecido no congelador)
• Água da torneira
• Detergente da loiça líquido
• Sal de cozinha
• Papel absorvente
• Palitos de madeira

→ Metodologia:

1. Começou-se por cortar o Kiwi em pequenos pedaços

 2. Em seguida colocou-se a fruta cortada dentro de um saco de plástico e
removeu-se o ar no seu interior antes de fechar o saco.
3. Esmagou-se a fruta, ao pressionar o saco repetidamente com as duas mãos,
até o Kiwi ficar completamente desfeito.
4. Transferiu-se a pasta da fruta para um dos gobelés.
5. No outro gobelé misturou-se 50 ml de água, 5 gotas de detergente e uma
colher de chá de sal de cozinha.
6. Mexeu-se bem, mas devagar para não criar espuma, com a ajuda de uma
vareta de vidro.
7. Depois de bem mexida colocou-se a mistura sobre o macerado de fruta.
8. De seguida voltou-se a misturar levemente com a vareta de vidro.
9. Esperaram-se 20 minutos, mexendo de vez em quando com a mesma vareta
de vidro.
10. Passados esses 20 minutos filtrou-se a mistura através de uma gaze para a
proveta.
11. Distribui-se o filtrado obtido por 2 tubos de ensaio.
12. Adicionou-se, com a ajuda da pipeta de Pasteur, cerca de 50 ml de álcool
etílico arrefecido, deixando-o escorrer lentamente pela parede do tubo de
ensaio ligeiramente inclinado.
13. Aguardaram-se 3 minutos para que o DNA começasse a precipitar.
14. Após esses 3 minutos começou-se a observar a formação de um precipitado
esbranquiçado na fase alcoólica.
15. Recolheu-se do álcool, com um palito de madeira, uma amostra de DNA.

Registo de resultados
Discussão

Os resultados desta experiência, da extração de DNA das células do Kiwi, revelaram

a eficiência deste procedimento, bem como informações sobre o processo de
extração.
Inicialmente observou-se um precipitado visível e esbranquiçado no tubo de ensaio
após a adição do álcool etílico. Este resultado é compatível com a teoria
apresentada na Fundamentação Teórica, onde se descreveu como o DNA pode ser
precipitado a partir de uma solução usando álcool arrefecido. A presença deste
precipitado confirma que o DNA foi extraído com sucesso das células vegetais do
kiwi.
É importante referir que a eficiência deste processo de extração pode variar
dependendo de diversos fatores. Uma das razões pode ser a quantidade de células
presentes na amostra de Kiwi utilizada, pois afetaria também a quantidade de DNA
possível de extrair. Outro fator seria a técnica de homogeneização, uma
homogeneização mais completa provavelmente levaria a uma maior eficiência na
extração do que uma menos completa. A qualidade dos reagentes também pode
influenciar os resultados obtidos.
Comparando estes resultados com outras experiências semelhantes, e com os
resultados de outros colegas, encontramos coerência no aspeto do DNA precipitado,
o que sugere que esta extração foi bem-sucedida.
Embora tenhamos observado o precipitado de DNA, este procedimento não permite
determinar a concentração exata do mesmo. Para melhor avaliar a extração do DNA
sugeria proceder à quantificação exata deste, em estudos futuros.

Conclusão

Resumindo, esta experiência demonstrou com sucesso a extração do material

genético das células do kiwi, com base nos princípios teóricos discutidos
anteriormente.
No entanto, é importante reconhecer as limitações e as possíveis variação dos
resultados, o que destaca a importância de técnicas cuidadosas e futuras melhorias
no procedimento.

Bibliografia

Páginas web:
FUJIFILM WAKO CHEMICALS U.S.A. CORPORATION, A extração do DNA, uma
técnica essencial para a biologia moderna atual (publicado a 31-08-2017)

Disponível em URL: https://pt.wakolatinamerica.com/blog/post/a-extracao-do-dna-

uma-tecnica-essencial-para-a-biologia-moderna-atual/

VIDA E SAUDE.ORG - TUDO PARA O SEU BEM ESTAR, A importância do DNA

Disponível em URL: https://vidaesaude.org/biologia-vida/a-importancia-do-dna.html

MANUAL MSD, A estrutura do DNA

Disponível em URL: https://www.msdmanuals.com/pt-

pt/profissional/multimedia/figure/estrutura-do-dna

Livros:

REIS, jorge, et al, Odisseia - 1º parte - Biologia, Biologia e Geologia 11º Ano,
Porto Editora, Porto, 2023, páginas 11, 14 e 15.