Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA . 15 de Março de 2011 1 .CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II. Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió.

foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos. Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. criminalística. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina. entre outras. e idade da amostra. e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. agricultura. quantidade. 2 . Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte.

...................................................................................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA..............................................................................................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES........7 MATERIAIS E MÉTODOS..................10 BIBLIOGRAFIA.................................................................................................................................9 CONCLUSÃO.....................................................................................................................11 3 ...4 OBJETIVOS...................................................................................................................................................................................................

como amostras de sangue. Para que haja a ruptura da parede celular. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. guanina. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. expondo o material genético das células. por exemplo. Para o desmembramento. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas. como. denominado núcleo. utiliza-se o álcool. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. Finalmente. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. uma base que pode ser adenina. desnaturando as moléculas de DNA. impedindo que elas precipitem com o DNA. Separação do DNA dos demais componentes celulares. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. citosina ou timina e um grupo fosfato. realiza-se o corte ou esmagamento do material. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. incluindo plantas.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. outros animais e vegetais). seres humanos. Com exceção das bactérias. tecidos. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. nas quais o DNA fica solto dentro da célula.. etc. saliva. pois o 4 . No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. fungos e bactérias. frutas. Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes.

DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. menos solúvel o DNA vai estar. Quanto mais gelado estiver o álcool. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas. A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento. 5 .

6 .OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração.

Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Estante para tubos de ensaio. Fruta (Ameixa). Sal. 2 Tubos de ensaio. 1 Colher. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Detergente. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. 2. 4. 7 .MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. utilizando funil e gaze. durante 5 minutos. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. Saco plástico do tipo ziploc. Água filtrada. Pipetador. 3. Pipetas de 3mL. Bastão de vidro. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra. Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1.

adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio. Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio. 8 .5.

RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. e. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio. menos solúvel no álcool gelado. de fato. Figura 1 . Figura 2 .Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado. no caso do isolamento com álcool gelado. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 .Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. Isto evidencia que o DNA é. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente.

Entretanto. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. logo. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. dos demais componentes celulares. desta forma.separado dos demais componentes celulares. incluindo as proteínas e o DNA. Em outras palavras. é liberado. 10 . a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. o conteúdo das células de ameixa. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. por sua vez. O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. atua na separação do DNA. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. que é menos denso. O álcool. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma.

CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente. O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado. 11 .

Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min. Extração do DNA da cebola.usp.br/difusao/pdf/extracaodednademorango. Universidade Federal de Alagoas. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR. Maceió-AL. S. Extração do DNA do morango. Disponível em: <http://www. [2] CIENCIAMAO.pdf>. [3] BIOINFO.usp.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.sc. Disponível em: <http://educar. [4] ABUD.pdf>.sc.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Extração de DNA de Morangos. 2011.pdf>. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. Disponível em: <http://educar.bioinfo. 12 .ufpb. K. A. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II.

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