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RELATÓRIO 1 - Extração de DNA

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Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA . Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II.CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA. 15 de Março de 2011 1 .

Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. entre outras. e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento. quantidade. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina. Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. e idade da amostra. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. 2 . agricultura. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. criminalística. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos.

..............9 CONCLUSÃO....SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA............................................................................................................................................................................................................................7 MATERIAIS E MÉTODOS.........................................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES............................................................................................................................................4 OBJETIVOS............................................11 3 ........................................................................................................................................10 BIBLIOGRAFIA................................................

seres humanos. Finalmente. nas quais o DNA fica solto dentro da célula. como amostras de sangue. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. incluindo plantas. uma base que pode ser adenina. outros animais e vegetais). Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas. etc. Com exceção das bactérias. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. fungos e bactérias. por exemplo. saliva. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. como.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. impedindo que elas precipitem com o DNA. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. realiza-se o corte ou esmagamento do material. tecidos. utiliza-se o álcool. frutas. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. Para o desmembramento. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes. expondo o material genético das células. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. Para que haja a ruptura da parede celular. desnaturando as moléculas de DNA. pois o 4 . denominado núcleo. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. Separação do DNA dos demais componentes celulares. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. citosina ou timina e um grupo fosfato. guanina..

A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados.DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. 5 . menos solúvel o DNA vai estar. Quanto mais gelado estiver o álcool. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento.

6 .OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração.

Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. Pipetador. utilizando funil e gaze. 7 . Pipetas de 3mL. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. Detergente. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Água filtrada. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. 2 Tubos de ensaio. Estante para tubos de ensaio. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra.MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Saco plástico do tipo ziploc. Sal. 3. Fruta (Ameixa). 1 Colher. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Bastão de vidro. 4. 2. durante 5 minutos.

adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio.5. 8 . Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio.

Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. menos solúvel no álcool gelado.Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado. Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente. Figura 2 . Figura 1 . de fato. Isto evidencia que o DNA é. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 . e. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio.RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. no caso do isolamento com álcool gelado. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio.

a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. 10 . O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e.separado dos demais componentes celulares. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma. que é menos denso. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. é liberado. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. Em outras palavras. por sua vez. atua na separação do DNA. incluindo as proteínas e o DNA. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. Entretanto. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. o conteúdo das células de ameixa. dos demais componentes celulares. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. desta forma. O álcool. logo.

Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado. O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado.CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente. 11 .

K. Extração do DNA da cebola.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Maceió-AL. [2] CIENCIAMAO. Extração de DNA de Morangos. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min.pdf>.usp.pdf>.bioinfo. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II. Disponível em: <http://educar.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR. Universidade Federal de Alagoas. [4] ABUD.sc. S. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. Extração do DNA do morango. [3] BIOINFO. Disponível em: <http://educar. 2011.br/difusao/pdf/extracaodednademorango.ufpb.sc.usp. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min.pdf>. Disponível em: <http://www. A. 12 .br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.

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