Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA . 15 de Março de 2011 1 . Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió.CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II.

Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina. e idade da amostra. agricultura. Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. 2 . entre outras. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos. e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento. criminalística. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha. quantidade.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa.

..................................................................................9 CONCLUSÃO......................................................................................................................................................4 OBJETIVOS.......................................................10 BIBLIOGRAFIA............................................................................................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA.......................................................................................................................7 MATERIAIS E MÉTODOS...................11 3 .............................................................................................................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES.....................

e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. citosina ou timina e um grupo fosfato. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. uma base que pode ser adenina. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. como. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. por exemplo. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. etc. nas quais o DNA fica solto dentro da célula. Com exceção das bactérias. desnaturando as moléculas de DNA. fungos e bactérias. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. incluindo plantas. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. Separação do DNA dos demais componentes celulares. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. expondo o material genético das células. denominado núcleo. impedindo que elas precipitem com o DNA. utiliza-se o álcool. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. Para o desmembramento. realiza-se o corte ou esmagamento do material. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes. frutas. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. outros animais e vegetais). temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. Finalmente. saliva. pois o 4 . tecidos. guanina. seres humanos.. como amostras de sangue. Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. Para que haja a ruptura da parede celular.

A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados.DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas. 5 . Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento. Quanto mais gelado estiver o álcool. menos solúvel o DNA vai estar.

OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração. 6 .

Água filtrada. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. 4.MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Pipetas de 3mL. Bastão de vidro. Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Fruta (Ameixa). 3. Detergente. Sal. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. 1 Colher. utilizando funil e gaze. 2 Tubos de ensaio. Estante para tubos de ensaio. 7 . durante 5 minutos. 2. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra. Pipetador. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Saco plástico do tipo ziploc. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo.

adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio. 8 .5. Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio.

Figura 1 . Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. Isto evidencia que o DNA é. Figura 2 .RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio.Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado. e. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 . no caso do isolamento com álcool gelado. de fato. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. menos solúvel no álcool gelado.Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente.

As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. Em outras palavras. logo. por sua vez. Entretanto. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. desta forma. 10 . incluindo as proteínas e o DNA. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. atua na separação do DNA. dos demais componentes celulares. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. é liberado. O álcool.separado dos demais componentes celulares. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. que é menos denso. o conteúdo das células de ameixa.

O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado. Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. 11 .CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente.

pdf>.usp. Universidade Federal de Alagoas. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min. [2] CIENCIAMAO. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Extração de DNA de Morangos. Disponível em: <http://www.bioinfo.br/difusao/pdf/extracaodednademorango.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR.pdf>. 2011. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. Maceió-AL. Disponível em: <http://educar. Extração do DNA da cebola. A.pdf>.sc. S. Disponível em: <http://educar.ufpb. 12 .sc.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.usp. [4] ABUD. K. Extração do DNA do morango. [3] BIOINFO.

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