Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II. 15 de Março de 2011 1 .CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA.UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA .

RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. entre outras. e idade da amostra. agricultura. criminalística. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina. e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento. 2 . Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. quantidade. Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos.

............................................................................11 3 ................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA...............................................................................4 OBJETIVOS.............................................................................................................................................................................................................................................................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES............................................................................10 BIBLIOGRAFIA...9 CONCLUSÃO......7 MATERIAIS E MÉTODOS..........................................................................................................................................

Finalmente. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes. Para que haja a ruptura da parede celular. como. desnaturando as moléculas de DNA. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. saliva. citosina ou timina e um grupo fosfato. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. Separação do DNA dos demais componentes celulares.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. tecidos. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. nas quais o DNA fica solto dentro da célula. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. impedindo que elas precipitem com o DNA. Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. realiza-se o corte ou esmagamento do material.. outros animais e vegetais). uma base que pode ser adenina. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. por exemplo. pois o 4 . guanina. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. seres humanos. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. incluindo plantas. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. expondo o material genético das células. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. frutas. Com exceção das bactérias. fungos e bactérias. Para o desmembramento. utiliza-se o álcool. como amostras de sangue. etc. denominado núcleo. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas.

A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados. menos solúvel o DNA vai estar. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento. Quanto mais gelado estiver o álcool. 5 .DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas.

6 .OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração.

Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. utilizando funil e gaze. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. Pipetador. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Saco plástico do tipo ziploc. 3. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Sal. Pipetas de 3mL. 7 . Bastão de vidro. Água filtrada. durante 5 minutos. Fruta (Ameixa).MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Detergente. 2. 4. 2 Tubos de ensaio. 1 Colher. Estante para tubos de ensaio. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra.

8 . Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio.5. adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio.

RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2.Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado. menos solúvel no álcool gelado. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio. Isto evidencia que o DNA é. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. Figura 2 . Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que.Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. no caso do isolamento com álcool gelado. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 . Figura 1 . e. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente. de fato.

os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. desta forma. incluindo as proteínas e o DNA. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. dos demais componentes celulares. a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. atua na separação do DNA. Em outras palavras. Entretanto. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. por sua vez. 10 .separado dos demais componentes celulares. é liberado. o conteúdo das células de ameixa. O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. logo. O álcool. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. que é menos denso. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma.

O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado.CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente. Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. 11 .

usp. Disponível em: <http://educar.usp. Extração do DNA do morango.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR.pdf>. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min. [2] CIENCIAMAO. A. Disponível em: <http://educar.br/difusao/pdf/extracaodednademorango. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min. Universidade Federal de Alagoas.sc. K. [3] BIOINFO. Disponível em: <http://www. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. S.bioinfo. 2011.pdf>.pdf>. [4] ABUD. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Extração de DNA de Morangos. Maceió-AL.sc. 12 . Extração do DNA da cebola.ufpb.