Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

15 de Março de 2011 1 . Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II.UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA .CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA.

2 . e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento. e idade da amostra. Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha. entre outras. quantidade. agricultura. criminalística.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa.

.....................................................................................................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA..................................................7 MATERIAIS E MÉTODOS......................................................................................................................................................10 BIBLIOGRAFIA..................................................................9 CONCLUSÃO..................................................................................................................................................................11 3 ........................4 OBJETIVOS.......................................................................................8 RESULTADOS E DISCUSSÕES.......

Para o desmembramento. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. frutas. outros animais e vegetais). Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. Para que haja a ruptura da parede celular. Separação do DNA dos demais componentes celulares.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. como amostras de sangue. como. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. etc. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. pois o 4 . nas quais o DNA fica solto dentro da célula. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. denominado núcleo. fungos e bactérias. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. desnaturando as moléculas de DNA. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes. impedindo que elas precipitem com o DNA. citosina ou timina e um grupo fosfato. utiliza-se o álcool. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. guanina. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. saliva. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. realiza-se o corte ou esmagamento do material. Com exceção das bactérias. por exemplo. Finalmente. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. expondo o material genético das células.. tecidos. seres humanos. incluindo plantas. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas. uma base que pode ser adenina. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias.

Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas.DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. Quanto mais gelado estiver o álcool. A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados. menos solúvel o DNA vai estar. 5 . Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento.

OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração. 6 .

7 . Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. Sal. Pipetador. Fruta (Ameixa). 3. 2 Tubos de ensaio. utilizando funil e gaze.MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos. Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. durante 5 minutos. Água filtrada. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. Pipetas de 3mL. 2. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. 4. Estante para tubos de ensaio. 1 Colher. Saco plástico do tipo ziploc. Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Bastão de vidro. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra. Detergente. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente.

adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio. Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio. 8 .5.

Figura 1 . no caso do isolamento com álcool gelado.Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente. Figura 2 . e.RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. menos solúvel no álcool gelado. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. Isto evidencia que o DNA é. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 . de fato. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente.Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado.

pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. que é menos denso. o conteúdo das células de ameixa. dos demais componentes celulares. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. Entretanto. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas. 10 . O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. desta forma. atua na separação do DNA. logo. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. é liberado. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma. O álcool. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. Em outras palavras. por sua vez. incluindo as proteínas e o DNA. a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados.separado dos demais componentes celulares. as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir.

O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado. 11 .CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente.

br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano. Maceió-AL. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min.sc. Disponível em: <http://educar.usp. [2] CIENCIAMAO.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. Disponível em: <http://educar.pdf>. [3] BIOINFO. [4] ABUD.pdf>.bioinfo.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.sc.br/difusao/pdf/extracaodednademorango.ufpb. Extração do DNA do morango. Disponível em: <http://www. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min. Universidade Federal de Alagoas. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II. 2011.usp. S. K. 12 .pdf>. Extração de DNA de Morangos. A. Extração do DNA da cebola.

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