Universidade Federal de Alagoas - UFAL Centro de Tecnologia - CTEC Curso de Engenharia Química

MÁGDA CORREIA DOS SANTOS

EXTRAÇÃO DE DNA

DISCIPLINA: LABORATÓRIO DE ENGENHARIA QUÍMICA II PROFESSORA: ANA KARLA DE SOUZA ABUD

MACEIÓ / 2011 0

UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS – UFAL CENTRO DE TECNOLOGIA . Orientadora: Ana Karla de Souza Abud Maceió. apresentado à disciplina Laboratório de Engenharia Química II. 15 de Março de 2011 1 .CTEC MÁGDA CORREIA DOS SANTOS Extração de DNA Relatório descritivo sobre o experimento: Extração de DNA.

2 . entre outras. Na prática realizada com o objetivo de extrair o DNA da ameixa. agricultura. sendo observado a formação de um emaranhado branco de filamentos de DNA da ameixa. quantidade. O DNA (ácido desoxirribonucléico) é uma molécula orgânica que contêm a “informação” que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos. foi realizada uma extração com objetos e reagentes de uso cotidiano e que podem ser encontrados em qualquer cozinha. e idade da amostra. criminalística. Existem inúmeras técnicas de extração de DNA e a escolha dessa técnica depende da fonte. e os resultados foram satisfatórios para o objetivo proposto pelo experimento.RESUMO O presente relatório descreve o experimento de extração de material genético (DNA) da ameixa. A extração do material genético possui inúmeras aplicações em áreas como medicina.

...................................SUMÁRIO FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA..............................................4 OBJETIVOS......................................................................................................7 MATERIAIS E MÉTODOS.....................................................................................................................................................................................................................................................9 CONCLUSÃO....................................................................10 BIBLIOGRAFIA.........11 3 ............8 RESULTADOS E DISCUSSÕES..................................................................................................................................

uma base que pode ser adenina. cujas seqüências contêm o código para a ordenação específica de aminoácidos de uma cadeia polipeptídica que formarão as proteínas. Para que haja a ruptura da parede celular. Separação do DNA dos demais componentes celulares. guanina.FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA O DNA é o responsável pelo armazenamento e transmissão da informação genética que é expressa pela produção das variadas proteínas que compõem um ser vivo. denominado núcleo. expondo o material genético das células. Para comprovar que realmente existe DNA em todas as células vias. nas quais o DNA fica solto dentro da célula. Para o desmembramento. temos que tentar retirá-lo e visualizá-lo. como amostras de sangue. Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas. Esta informação é copiada ou transcrita nas moléculas de RNA. fungos e bactérias. seres humanos. Finalmente. Existem apenas esses quatro tipos de bases no DNA: adenina e guanina pertencem ao grupo das purinas. Protocolos similares são usados nas extrações de DNA de várias fontes.. desnaturando as moléculas de DNA. as moléculas de detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares e o aquecimento favorece a reação. No caso de organismos eucariotos (aqueles que possuem núcleo individualizado por ser envolto por uma membrana. para conseguir isolá-lo dos demais componentes. em muitos outros seres vivos ele fica acomodado dentro de um compartimento existente. Com exceção das bactérias. Uma molécula de DNA é constituída por duas cadeias que se organizam em uma estrutura de dupla-hélice. enquanto que timina e citosina são do grupo das pirimidinas. saliva. sendo que cada cadeia simples de DNA é formada por uma molécula do açúcar desoxirribose. A adição de sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. pois o 4 . utiliza-se o álcool. etc. frutas. incluindo plantas. impedindo que elas precipitem com o DNA. outros animais e vegetais). citosina ou timina e um grupo fosfato. grande parte do DNA está justamente dentro do núcleo das células. realiza-se o corte ou esmagamento do material. tecidos. e consistem de: Ruptura (física e química) das membranas celulares para liberação do material genético. por exemplo. como. As moléculas de DNA são encontradas dentro das células de todos os seres vivos.

Quanto mais gelado estiver o álcool.DNA é insolúvel nele e tem menor densidade que os outros constituintes celulares. A estrutura de dupla-hélice só pode ser enxergada de modo indireto e com o auxílio de aparelhos sofisticados. menos solúvel o DNA vai estar. Milhares de fitas emaranhadas de DNA podem ser observadas em um experimento de extração de material genético de plantas ou frutas. Por isso é tão importante que o etanol seja mantido no freezer ou em um banho de gelo até o momento do experimento. 5 .

OBJETIVOS Verificar como acontece a extração do DNA da ameixa e identificar a função de cada um dos reagentes utilizados no procedimento de extração. 6 .

Fruta (Ameixa). 2. Pipetador. Colocou-se cerca de 5 mL de água em um copo. 7 . Filtrou-se a solução obtida em outro copo. Saco plástico do tipo ziploc. Estante para tubos de ensaio. 3. Detergente. 4. Adicionou-se 1/2 colher (chá) de sal e 1/2 colher (chá) de detergente neutro. b) MÉTODOS: Para a extração de DNA da ameixa: 1. Transferiu-se a amostra para um saco do tipo ziploc e amassou-se a amostra. Adicionou-se ameixa picada em pedaços bem pequenos à solução anterior. Bastão de vidro. utilizando funil e gaze. Misturou-se bem com uma colher até dissolver completamente. Sal. Água filtrada. Álcool gelado e Álcool a temperatura ambiente. durante 5 minutos. 2 Tubos de ensaio. 1 Colher. Pipetas de 3mL.MATERIAIS E MÉTODOS a) MATERIAIS: 2 Copos.

8 . adicionando-se 5 mL de álcool gelado em tubo de ensaio e álcool a temperatura ambiente no outro tubo de ensaio.5. Colocou-se 3 mL da solução obtida em cada um dos 2 tubos de ensaio.

Cumpriram-se as três etapas do método para extração de DNA de células de ameixa e o resultado obtido foi à formação de um emaranhado branco de filamentos que. Isto evidencia que o DNA é. de fato. e. Figura 2 .RESULTADOS E DISCUSSÕES O DNA da ameixa foi extraído e pôde ser visualizado conforme as figuras 1 e 2. ficou mais próximo ao fundo do tubo de ensaio. no caso do isolamento com álcool à temperatura ambiente. menos solúvel no álcool gelado. ficou mais próximo à superfície do tubo de ensaio. Figura 1 . no caso do isolamento com álcool gelado. pois a formação do emaranhado mais próximo à superfície do tubo de ensaio indica que o DNA está mais 9 .Tubo contendo DNA extraído com álcool gelado.Tubo contendo DNA extraído com álcool à temperatura ambiente.

as moléculas individuais de DNA tendem a se repelir. 10 . o conteúdo das células de ameixa. Entretanto. permitindo que estas se condensem quando em contato com uma solução alcoólica. é liberado. os quais são mais densos e carregam o DNA para o fundo quando associados a ele. As moléculas de DNA possuem carga negativa devido à presença do grupo fosfato. A utilidade prática de cada um dos reagentes utilizados no experimento foi identificada. os lipídeos formam complexos com o detergente e precipitam. O sal também atua fornecendo íons de carga positiva que neutralizam a carga negativa das moléculas de DNA. incluindo as proteínas e o DNA. a estrutura de dupla-hélice só pode ser visualizada de modo indireto e através de aparelhos sofisticados. por sua vez. O procedimento experimental seguido é relativamente simples e permite a visualização clara do emaranhado de filamentos de DNA que se forma.separado dos demais componentes celulares. O detergente é aplicado com a finalidade de desconstruir as moléculas de lipídeos que constituem as membranas celulares e. O sal ajuda a manter as proteínas dissolvidas no líquido extraído. atua na separação do DNA. dos demais componentes celulares. logo. evitando que as mesmas precipitem junto com o DNA. pois o DNA é praticamente insolúvel no álcool. O álcool. Em outras palavras. que é menos denso. desta forma. O que se observou a olho nu foram milhares de fitas de DNA juntas.

O álcool à temperatura ambiente não separa o DNA dos outros componentes celulares mais densos tão eficientemente quanto o álcool gelado. O emaranhado branco de filamento de DNA que se forma fica mais próximo à superfície do tubo de ensaio no caso da extração com álcool gelado. 11 . Existem diversos métodos de extração de DNA e pudemos realizar um desses métodos de forma simples e satisfatória com materiais que podem ser encontrados em qualquer cozinha.CONCLUSÃO O resultado obtido evidenciou que o DNA das células de ameixa é menos solúvel no álcool gelado do que no álcool à temperatura ambiente.

Extração de DNA de Morangos.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.pdf>.BIBLIOGRAFIA [1] EDUCAR.bioinfo. S.ufpb. [2] CIENCIAMAO. Disponível em: <http://educar. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h. Extração do DNA do morango. [3] BIOINFO. K. 2011.pdf>. Universidade Federal de Alagoas. Extração do DNA da cebola. Disponível em: <http://educar. 12 .usp. Acesso em 03 de Março de 2011 às 21h15min.usp. [4] ABUD. Acesso em: 03 de Março de 2010 às 21h30min.pdf>. Notas de Aula de Laboratório de Engenharia Química II.br/licenciatura/2003/siteprojeto/2003/2_extracao_DNA_cebola_com_pl ano.sc. A. Maceió-AL. Disponível em: <http://www.sc.br/difusao/pdf/extracaodednademorango.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful