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EXTRAÇÃO DE

DNA DE CÉLULAS
VEGETAIS
Relatório científico

Biologia e Geologia 11ºano

Aluno: Rita Dores Nº28 11ºCT2


Professor: Raquel Barros
Localidade: Caneças
Data: 4/10/23

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¨ Índice

• Introdução –––––––––––––––––––––––––––––––––––– 1

• Fundamentação teórica –––––––––––––––––––––––––– 2

• Procedimento experimental ––––––––––––––––––––––– 2-3


- Material
- Procedimento

• Registo de resultados –––––––––––––––––––––––––––– 3

• Discussão dos resultados / Conclusão ––––––––––––––– 4

• Bibliografia / Referências bibliográficas –––––––––––––– 4

¨ Introdução

Esta atividade experimental tem como objetivos:


- Extrair o DNA das células de kiwis;
- Visualizar ao vivo o material genético;
- Conhecer a localização celular do DNA;
- Aplicar conhecimentos obtidos sobre a estrutura da membrana celular;
- Relacionar as etapas de extração do DNA com a respetiva estrutura e a da
célula eucariótica.
Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta
molécula é usada durante o período de vida de um organismo para fornecer
instruções para milhões de processos celulares que ocorrem constantemente. Para
estudar o modo como essas informações são comunicadas à célula isolámos o
DNA.
Para isolar o DNA é necessário separá-lo dos outros constituintes celulares; as
membranas celulares e os invólucros nucleares são fragmentadas e o DNA é
separado das membranas das células e dos organitos.
Utilizando procedimentos e instrumentos muito simples é possível extrair o DNA e
visualizá-lo sob a forma de filamentos brancos.

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¨ Fundamentação Teórica

O ácido desoxirribonucleico, DNA, é a molécula que transporta a informação


genética para o desenvolvimento e funcionamento de um organismo. O DNA é
constituído por duas cadeias complementares que se enrolam uma em torno da
outra como uma escada em espiral; esta forma é conhecida como dupla hélice.
Cada cadeia tem uma estrutura principal composta por grupos alternados de uma
pentose (desoxirribose), um grupo fosfato e uma base azotada. Cada base azotada
é constituída por uma de quatros bases: adenina (A), citosina (C), guanina (G) ou
timina (T). As duas cadeias estão ligadas por ligações de hidrogénio entre as bases:
a adenina liga-se à timina e a citosina liga-se à guanina. A sequência de bases ao
longo da estrutura principal do DNA codifica a informação biológica, por exemplo, as
instruções para a produção de uma proteína ou de uma molécula de RNA.

¨ Procedimento experimental

Þ Material utilizado:
- Quivis (maduros)
- Saco de plástico com fecho hermético
- Gobelés de 250 mL
- Gaze
- Tubos de ensaio e respetivo suporte
- Provetas de 100 mL
- Pipetas de Pasteur
- Varetas de vidro
- Álcool etílico a 96% (arrefecido no congelador)
- Água da torneira
- Detergente da loiça líquido
- Sal de cozinha
- Papel absorvente
- Palitos de madeira

Þ Procedimento:
1. Colocar a fruta em pedaços pequenos (descascada) dentro de um
saco de plástico e remover o ar do seu interior, antes de o fechar
hermeticamente.
2. Esmagar o kiwi, pressionando o saco entre as duas mãos, até ficar
completamente desfeito.
3. Transferir a pasta da fruta para um gobelé.
4. Numa proveta misturar 50 mL de água, 5 gotas de detergente e
uma colher de chá de sal de cozinha.
5. Mexer bem com a vareta de vidro, mas devagar para não formar
espuma.
6. Colocar esta mistura sobre o macerado da fruta.
7. Misturar levemente com a vareta de vidro.

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8. Esperar cerca de 20 minutos mexendo, de vez em quando, com a
mesma vareta de vidro.
9. Filtrar através de uma gaze a mistura anterior para um novo copo
de precipitação.
10. Distribuir o filtrado obtido por tubos de ensaio.
11. Adicionar, com a ajuda da pipeta de Pasteur, cerca de 50 mL álcool
etílico arrefecido, deixando-o escorrer lentamente pela parede do
tubo de ensaio, ligeiramente inclinado.
12. Aguardar cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar.
13. Observar a formação de um precipitado esbranquiçado na fase
alcoólica.
14. Recolher do álcool, com um palito de madeira, uma amostra de
DNA (opcional).

¨ Registo de resultados

Fase alcoólica

Filamentos de DNA

Fase aquosa

Figura 1 – Esquema dos resultados ob=dos após a finalização da experiência

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¨ Discussão dos resultados / conclusão

O DNA das células eucarióticas localiza-se fundamentalmente no núcleo. Contém a


informação genética que controla toda a atividade celular e que se transmite de
geração em geração. Toda a informação necessária para criar um organismo
encontra-se no DNA.
A trituração realizou-se para romper as paredes celulares e as membranas
citoplasmáticas, libertando o conteúdo celular. A filtração permite separar as paredes
celulares e as membranas citoplasmáticas do restante conteúdo celular,
nomeadamente dos núcleos. O detergente é utilizado para penetrar na estrutura das
membranas e separar as grandes moléculas de fosfolípidos, provocando a
destruição das membranas. Consequentemente o conteúdo nuclear dispersa-se na
solução. A adição do sal (NaCl) no início da experiência proporciona ao DNA um
ambiente favorável. O sal contribui com iões positivos (Na+) que neutralizam a carga
negativa do DNA (devida à ionização do grupo fosfato), estabilizando-o.
Adicionalmente as moléculas de DNA agregam-se, formando filamentos espessos e
compridos e consequentemente mais visíveis. O DNA não se dissolve no álcool
etílico à concentração e temperatura utilizados na experiência. Assim o DNA
precipita e, consequentemente, separa-se da solução tornando possível a sua
visualização e recolha. O álcool, como é menos denso que a água, flutua numa
camada acima desta. A maior parte das estruturas celulares são muito densas,
permanecendo na solução aquosa no fundo do tubo de ensaio. O DNA é menos
denso que a água e, portanto, flutua na superfície da mesma.
Apesar do DNA ser a maior molécula da célula, a sua estrutura não se pode
observar a olho nu, devido ao seu tamanho microscópico. Tal como não podemos
observar a maior parte das células a olho nu mas podemos observar um organismo
constituído por milhões de células, também não podemos observar uma molécula de
DNA mas podemos observar, como verificamos na experiência, milhões de cadeias
de DNA aglomeradas.

¨ Bibliografia / Referências bibliográficas

National Human Genome Research Institute (revisto em 4-10-2023). Disponível em:


https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/%C3%81cido-desoxirribonucleico

Biologia net. Disponível em: https://www.biologianet.com/biologia-celular/dna.htm

GONÇALVES, Tiago Maretti. Extraindo o DNA de vegetais: uma proposta de aula


prática para facilitar a aprendizagem de Genética no Ensino Médio. Revista
Educação Pública, v. 21, nº 15, 27 de abril de 2021. Disponível em:
https://educacaopublica.cecierj.edu.br/artigos/21/15/extraindo-o-dna-de-vegetais-
uma-proposta-de-aula-pratica-para-facilitar-a-aprendizagem-de-genetica-no-ensino-
medio

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