MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

UNIVERSIDADE FEDERAL DO DELTA DO PARNAÍBA (UFDPar)

COORDENAÇÃO DO CURSO DE BACHARELADO EM BIOMEDICINA
DISCIPLINA: BIOLOGIA MOLECULAR
DOCENTE: Michely Laiany Vieira Moura

RELATÓRIO DA EXTRAÇÃO DE DNA DE MATERIAL VEGETAL

PARNAÍBA-PI
2023
 DISCENTE: Jayssila Gomes de Andrade

RELATÓRIO DA EXTRAÇÃO DE DNA DE MATERIAL VEGETAL

Relatório de práticas em
extração de DNA de material
vegetal como parte dos
requisitos para a obtenção
de nota e aprovação na
disciplina.

PARNAÍBA
2023
SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO…………………………………………………………………...…03
2. OBJETIVO…………………………………………………………………………..04
3. METODOLOGIA……………………………………………………………………05
3.1 MATERIAIS…………………………………………………………………......05
4. DESENVOLVIMENTO…………………………………………………………......06
5. RESULTADOS E DISCUSSÕES……………….………………………….….….07
6. CONCLUSÃO……………………………………………………………………….08
7. REFERÊNCIAS …….………………………………………………………………10
1 INTRODUÇÃO

Toda a informação necessária para criar um organismo encontra-se no DNA.

Esta molécula é usada durante o período de vida de um organismo para fornecer
instruções para milhões de processos celulares que ocorrem constantemente. Para
estudar o modo como essas informações são comunicadas à célula, os cientistas
isolaram o DNA. Para isolar o DNA é necessário separá-lo dos outros componentes
celulares; as membranas celulares e os invólucros nucleares são fragmentados e o
DNA é separado das membranas das células e dos organismos. Utilizando
procedimentos e instrumentos muito simples é possível extrair o DNA e visualizá-lo
sob a forma de filamentos brancos.
2. OBJETIVO

O objetivo da aula prática juntamente com a técnica de extração de DNA é

realizar atividade em foco do aprendizado de como extrair o material genético do
vegetal, seguindo o passo a passo orientado pela professora a fim de desenvolver
atividade e obter o resultado final que é verificar a existência de moléculas de DNA
em amostra de vegetais através da visualização a olho nu.
3. METODOLOGIA

3.1 MATERIAIS

Para a realização da aula prática referente a extração de DNA de células vegetais,

utilizou-se os seguintes materiais:

1. Água destilada
2. Álcool etílico a 95% gelado
3. Balança analítica
4. Banana
5. Banho-maria (60 °C)
6. Bastão de vidro
7. Papel de filtro
8. Gelo
9. Béquer
10. Detergente
11. Funil de vidro
12. NaCl (sal de cozinha)
13. Proveta de 100 mL
14. Vidro de relógio
4. DESENVOLVIMENTO

O método do procedimento é desenvolvido da seguinte forma, com um material

vegetal, como por exemplo o que foi utilizado, a banana com um bastão de vidro é
amassada, após isto em um béquer com 100 ml de água destilada adicionou-se 60
ml de detergente com finalidade de desnaturar a bicamada lipídica e 5 g de NACL
para neutralizar as cargas negativas por meio de seus cátions, diminuir sua
solubilidade e facilitar a aglomeração de moléculas. Medidos respectivamente com a
proveta e balança analitica e mexendo essas soluções após adicionando a banana
amassada misturando e levando para o banho maria por quinze minutos
cronometrados promovendo a desnaturação ao contemplar tempo levando para o
isopor que contém gelo para resfriar rapidamente por cinco minutos após finalizar
esta etapa é necessário filtrar, o filtrado é inserido colocar 100 ml de álcool 70
gelado para facilitar o seu agrupamento e impedindo que ele fique dissolvido no
meio líquido, deixando o escorrer pela a borda.
Finalizada essa parte do procedimento, agora é apenas visualizado a olho nu
pode-se observar que o material genético subiu formando uma espuma no meio da
proveta pode- se concluir que o resultado ocorreu dentro do esperado.
O DNA das células eucarióticas localiza-se fundamentalmente no núcleo. O
DNA contém a informação genética que controla toda a atividade celular e que se
transmite de geração em geração. Toda a informação necessária para criar um
organismo A trituração realizou-se para romper as paredes celulares e as
membranas encontra-se no ADN. citoplasmáticas, libertando o conteúdo celular.
Contudo, as pás da misturadora não conseguem remover os núcleos e libertar o
DNA, porque estes são demasiado pequenos. A filtração permite separar as
paredes celulares e as membranas citoplasmáticas do restante conteúdo celular,
nomeadamente dos núcleos. Uma vez que a misturadora não conseguiu romper os
núcleos, recorreu-se à emulsificação, através da aplicação de detergente. O
detergente penetra na estrutura das membranas e separa as grandes moléculas de
fosfolipidos, provocando a destruição das membranas. Consequentemente o
conteúdo nuclear (DNA e proteinas) dispersa-se na solução. A adição do sal (NaCl)
no inicio da experiência proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O sal
contribui com ides positivos (Na) que neutralizam a carga negativa do DNA (devida
à ionização do grupo fosfato), estabilizando-o. Adicionalmente, as moléculas de
DNA agregam-se, formando filamentos espessos e compridos e consequentemente
mais visiveis.
5. RESULTADOS E DISCUSSÕES

Após a finalização da etapa de precipitação do DNA, foi possível notar que o

álcool 70% permitiu a ocorrência da precipitação da molécula de DNA; segundo
Rodrigues et al. (2008), "o álcool gelado diminui a solubilidade do DNA com a ajuda
do sal adicionado inicialmente. O DNA, menos solúvel em álcool, formará um
aglomerado que precipitará junto com outras moléculas, assim, ao adicionarmos o
álcool gelado lentamente irá auxiliar na eficiência de precipitação do DNA". Dessa
forma, além da precipitação do DNA, pode ocorrer a precipitação de outra molécula,
muito semelhante ao ácido nucleico. Essa molécula é denominada pectina, que é
caracterizada como um carboidrato complexo sendo amplamente utilizada na
indústria para promover a liga na estrutura de doces e compotas. Diante disso, ao
fim da prática foi revisado os conceitos sobre a estrutura tridimensional da molécula
de DNA, ressaltando o grupo fosfato, a pentose (desoxirribose) e as bases
nitrogenadas (adenina, timina, citosina e guanina). Comentar também, o importante
papel de fluxo de informação genética que o DNA desempenha nas células, sendo o
grande responsável por armazenar a informação genética e permitir sua
transmissão hereditária aos descendentes. É interessante ressaltar que mesmo
vendo uma nuvem, não conseguimos enxergar a dupla hélice de DNA, assim,
segundo Dessen e Oiakawa (2012), a molécula de DNA pode ser extremamente
longa, mas seu diâmetro é de apenas 2 nanômetros, visível apenas em microscopia
eletrônica. Assim sendo, o que se vê após a precipitação com adição do álcool
gelado 70% é um emaranhado formado por milhares de moléculas de DNA. Além
disso, enxergamos junto a este emaranhado, as proteínas denominadas histonas,
que estão ligadas no DNA, auxiliando no processo de compactação do material
genético.
6. CONCLUSÃO

Com esse experimento, comprovou-se a existência do DNA através dos

resultados obtidos. Foi possível extrair e identificar o DNA da banana através de um
método simples e com várias etapas se obteve a extração dessa molécula. A partir
dos conceitos básicos da genética, adquiriu-se conhecimentos sobre outros temas
relacionados ao que foi abordado na prática. Desse modo, o método da extração de
DNA tem como finalidade separar o DNA presente do núcleo das células de outros
componentes celulares, purificando o material para realizar uma análise adequada.
QUESTÕES

1. Por que o material precisa ser macerado para isolar o DNA?

O alimento deve ser macerado com o objetivo de romper componentes celulares
como as proteínas, as paredes celulares e a membrana plasmática.

2. Qual o papel do detergente presente no processo de extração do DNA?

A membrana plasmática e a membrana nuclear são compostas principalmente por
lipídeos (gorduras). A função do detergente é desestruturar as moléculas de lipídio
das membranas biológicas. Dessa maneira, as membranas sofrem ruptura e todo o
conteúdo celular e inclusive o DNA, fica disperso na solução.

3. De que é composta a molécula de DNA?

É formada por fita dupla de unidades menores chamadas nucleotídeos e estas
estruturas são formadas por uma pentose (açúcar de cinco carbonos) associada a
um ou mais grupos fosfato e a uma base nitrogenada (adenina, guanina, timina e
citosina). As duas cadeias unem-se através de pontes de hidrogênio entre as bases
nitrogenadas dos nucleotídeos.

4. Visto que o DNA não é solúvel em álcool, o que ocorre com suas moléculas
quando colocadas neste meio?
As moléculas se agrupam, pois o álcool desidrata o DNA, de forma que este não
mais fica dissolvido no meio aquoso. Como o DNA tem menor densidade que os
outros constituintes celulares, ele surge na superfície do extrato. Quanto mais
gelado o álcool, menos solúvel será o DNA.
8. REFERÊNCIAS

CHAVES, J. M. F.; HUNSCHE, S. Atividades experimentais demonstrativas no

ensino de Física: panorama a partir de eventos da área. Trabalho de Conclusão de
Curso - Universidade Federal do Pampa, Dom Pedrito, 2014.

FURLAN, C. M.; ALMEIDA, A. C.; RODRIGUES, C. D. N.; TANIGUSHI, D. G.;

SANTOS, D. Y. A. C.; MOTTA, L. B.; CHOW, F. Extração de DNA vegetal: o que
estamos realmente ensinando em sala de aula? Química Nova na Escola, v. 33, nº
1, 2011.