Biologia e Geologia - 11° Ano

Relatório científico .MARIi

. Titulo-Extração de DNA de células vegetais.
" Autor -
Data
" Introdução
Esta atividade experimental tem como objectivos:
- extrair o DNA das células de banana,
- visualizar ao vivo o material genético.
" conheeer a
o e bres estnitua da membrana celular.
-relacionar as etapas da extracção do DNA com a respectiva estrutura e a das clulas
cucarióticas.
Toda a infonação necessárin para criar um organismo encontra-se no DNA. Esta molécua
processoe ealTodo correm conanism par omodoinstruçoes Pformacões
CStUd essas
são comunicadas å cëlula os cientista isolaram o DNA.
Para isolar o DNA é necessário separi-lo dos outros cormponentes celulares; as membranas
celulares c os invölucros nuclearcs sâo fragmentadas c o DNA &separado das membranas das
celulas e dos organitos.
Utilizando procedimentos e instrumentos muito simples » possivel extrair o DNA e
visualizá-lo sob a forma de filamentos brancos.

" Protocolo experimental

Materlal utilizado:
Banuna Detergente - Erlenmeyer
Sal Ålcool ctilico frio Funil
Ågua fria Misturadora - Gaze
Gela Vareta de vidro - Espátula
Procedimento:
I. Introduzir no copo da misturadora a banana, 2 espátulas de sal, 200 ml de água fra, cubos de
gelo.
2. Triturar duranteIminuto, na potencia máxima.
3. Colocar num balo de Erlenmeyer ou matraz um furnil grande com gaze.
4. Verter a mistura resultante da trituração no funil.
5. Medir 40 ml de filrado para unm novo balão Erlenmeye.
6. Adicionar ao filtrado 2 ml de detergente.
7. Misturar lentamente sem fazer espuma.
8. Retirar S ml do preparado anierior e transferi-los para um tubo de ensaio.
9. Sem agitar o tubo e mantendo-o ligeiramente inclinado, adicionar, muito lentamente junto å

10. Distinguir uma fase alcoólica (sobrenadante) e uma fase aquosa (inferior).
I1. Deixar repousar cerca de S minutos.
12. Observar os filamentos de cor branca que se precipitaram no limite da camada de álcool.
13. Com um palilo retirar os filamcntos observados.
 " Resultados obtidos
Neste itenm faz us registo do que observas-te sob a fura de um esquema legendade,

-Filametos de DNA

Fase alcoolica
(sobrenadante)

Fase aquosa

Figura | -Esquema dos resultados obtidos após a finalização da experiencia

" Discussão dos resultados / Conclusão

Neste item não te esqueças de referir:
impartäncia do DNA,
funcle de cada um dos reauentes uados ns experiência (o sal, a álcol e o detergente,
epapel desempenhado pela rituraçãomaceração bem como a finalidade du fltração,
uma pessived esplicaçãe para a ascemo dodaDNA a salucão,
molecula de DNA
ue ne não e pode ver a estrutura
B c o decorreu

O DNA das celulas eucarióticas localiza-se fundamentalmente no núclco.

O DNA contem a informação gentica que controla toda a atividade celular e que se
transmite de geração em geração. Toda a informação necessária para criar um organismo
encontra-se no ADN.

A trituração realizou-se para romper as paredes celulares e membranas

citoplasmáticas, libertando o conteúdo celular, Contudo, as pås da misturak
iradora não conseguem
remover os núcleos e libertar o DNA, porque estes são demasiado pequenos.
A filtração pemite separar as paredes celulares e as membranas citoplasmáticas do
restante conteúdo cclular, nomeadamente dos núcleos.
Uma vez que a misturadora não conseguiu romper os núücleos, recorreu-se à
emulsificação, através da aplicação de detergente. 0 detergente penetra na estrutura das
membranas e separa as grandes moléculas de fosfolipidos, provocando a destruição das
membraas. Consequentemente o conteúdo nuclear (DNA e proteinas) dispersa-se na solução.
A adição do sal (NaCI) no inicio da experiência proporcionou ao DNA um ambiente
favorável. O sal contribui com iðes positivos (Na) que neutralizam a carga negativa do DNA
(devida à ionização do grupo fosfato), estabilizando-o. Adicionalmente, as moléculas de DNA
agregam-se, formando filamentos espessos e compridos e consequentemente mais visiveis.

Biologio e Gtologia - 1 Ane- Ano letive 2012/13-Escola Secundiria D. Maria II- Broga
 O DNA não se dissolve no álcool etilco à concentração e temperatura utilizadas na
experiência. Como resultado o DNA precipitou c, conscquentemente, separou-se da solução
tornando possivel a sua visualização e recolha. O álcool, como é menos denso do que a água,
muilo
ua wolucio a ensaio.
fundo Oubo de quc a água
e. portanto, Nutun na superficie do álcool.
Apesar de o DNA ser a maior molécula da célula, a sua estrutura não se pode observar a
olho nu, devido ao seu tamanho microscópico. Tal como não podemos observar a maior parte
também nào nodemo podemoS observi como
verificamos na experincia, milhões de cadeias de DNA aglomeradas

Biologig e Geologig - " Ang - Ano letivo 2012/13 -Escols Secundórig D. Morig f-Brogg 3/2