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Escola Secundária D.

Sancho II, Alijó

Investigação
da presença de
DNA em
células
eucarióticas
Tomás Rodrigues 11ºA 2022/2023

Introdução:
A extração de DNA presente, sobretudo, no núcleo
das células, exige a execução de procedimentos que
permitam a sua separação de outros componentes
celulares.
O processo de maceração permite a desagregação
dos tecidos vegetais, visando sobretudo destruir as
paredes celulares que são muito resistentes, e a adição
de detergente tem como função desagregar as
membranas, nomeadamente, o invólucro nuclear de
natureza fosfolipídica.
O cloreto de sódio permite a neutralização da
carga negativa conferida ao DNA pelo grupo fosfato (o
Na+ liga-se ao grupo fosfato). Assim, impede-se a
repulsão elétrica entre as moléculas de DNA,
permitindo-se a sua agregação de modo a formar
filamentos mais espessos e compridos (mais facilmente
visíveis).
Quando se adiciona lentamente etanol ao filtrado,
os filamentos de DNA ascendem lentamente na camada
de etanol. Este processo é auxiliado pela formação de
bolhas de ar resultantes do "choque térmico".
Material
 Kiwi ou morangos;
 Almofariz;
 Bisturi (ou faca);
 Banho-maria (37 °C);
 Gaze (ou pano);
 Proveta de 100 mL;
 Tubo de ensaio ou gobelé;
 Água destilada;
 Detergente de loiça;
 Cloreto de sódio;
 Etanol frio (a 5°C);
 Fucsina básica1;
Corante que se liga aos ácidos nucleicos.
1

Procedimento:
1. Descascar um kiwi, cortá-lo em pequenos cubos
e esmagá-lo num almofariz (em alternativa, usar
morangos).
2. Adicionar uma solução composta por:
- 100 ml. de H,0
- 10 mL de detergente de loiça
- 3 g de NaCl
3. Continuar o processo de esmagamento.
4. Colocar o preparado em banho-maria (37°C)
durante 15 minutes.
5. Filtrar, através da gaze (ou pano), de forma a
obter 5 mL de líquido para um tubo de ensaio ou
gobelé.
6. Adicionar 5 mL de etanol 96% a 5°C.
7. Deixar repousar até se observar a ascensão de
uma camada gelatinosa.
8. Observámos os resultados.

Não foi possível observar


a dupla hélice do DNA
uma vez que esta é
demasiado pequena para
tornar
possível a sua
observação a olho nu. Foi
executável a observação
dos filamentos do DNA,
uma vez que
temos um aglomerado
de milhões de cadeias.
Não foi possível observar
a dupla hélice do DNA
uma vez que esta é
demasiado pequena para
tornar
possível a sua
observação a olho nu. Foi
executável a observação
dos filamentos do DNA,
uma vez que
temos um aglomerado
de milhões de cadeias.
Interpretação dos resultados
Não foi possível observar a dupla hélice do DNA
uma vez que esta é demasiado pequena para tornar
possível a sua observação a olho nu. Foi executável a
observação dos filamentos do DNA, uma vez que temos
um aglomerado de milhões de cadeias.
Uma vez que o DNA é menos denso que a água,
ascende rapidamente e acumula-se na parte superior,
ascendendo depois lentamente na camada de álcool,
tornando possível a sua visualização.

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