COLEGIADO DE

FACULDADE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA DA BAHIA EFERMAGEM

2024.1

EXTRAÇÃO DE DNA DE FRUTAS/MUCOSA ORAL / Genética Humana

1. INTRODUÇÃO

O objetivo dessa aula prática é introduzir conceitos básicos sobre a extração de DNA. Nesta prática,
junto com o DNA são extraídos moléculas de RNA e algumas proteínas, e é possível ver a olho nu o
aglomerado dessas moléculas.
Este procedimento é feito com reagentes de cozinha com a intenção de mostrar que o procedimento é
simples e facilitar a memorização dos passos de extração. O DNA extraído não é apropriado para
procedimentos de pesquisa moleculares, mas é facilmente visualizado por estar associado a proteínas e
restos celulares.

- O detergente da solução de lise quebra as membranas lipídicas das células e dos núcleos, liberando
DNA para a solução aquosa. Também, rompe as ligações não-covalente das proteínas, causando sua
desnaturação.
- O sal (NaCl; Na+) interage com o DNA, que tem carga negativa, tornando-o apolar, favorecendo a
sua precipitação da fase aquosa.
- A adição lenta de álcool cria duas fases polares e o DNA precipita entre elas.

2. MATERIAIS

Materiai Reagentes
s
- Morango, banana ou kiwi
- Saco plástico do tipo zip lock (saco - 100 ml solução de lise composta:
comum também funciona, mas deve ser - Água destilada
resistente e não ter furos) - Detergente líquido, preferencialmente
- 2 béqueres incolor
- Papel filtro ou filtro de café - Cloreto de sódio (sal de cozinha)
- Funil - Álcool etílico 95% gelado
- Tubos de ensaio
- Água quente (50-70°C – pode ser obtido
esquentando uma chaleira de água e
desligando antes de ferver, ou utilizando uma
chapa quente)
- Caixa com gelo
- Pedaço de arame fino
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FACULDADE CIÊNCIAS E TECNOLOGIA DA BAHIA EFERMAGEM
2024.1

3. PROCEDIMENTOS

3.1. EXTRAÇÃO DNA FRUTAS

1. Colocar a fruta em saco plástico e esmagá-la até ficar homogêneo.

2. Adicionar 100 ml de solução de lise à fruta amassada e misturar tudo, até ficar uma solução
homogênea.
3. Colocar a mistura em um frasco de vidro e levar à banho-maria quente (50-70°C) por 15 min,
misturando frequentemente a solução.
4. Filtrar a mistura.
5. Transferir o filtrado para um tubo de ensaio até quase a metade do volume do tubo.
6. Adicionar lentamente o álcool absoluto gelado no tubo de ensaio, deixando-o escorrer vagarosamente
pela parede interna, a fim de formar duas fases, a superior, alcoólica e a inferior, aquosa. O volume de
álcool adicionado deve ser aproximadamente o mesmo volume do extrato filtrado. Misture lentamente e
observe a formação de um precipitado em forma de fios entre as fases.

3.2. EXTRAÇÃO MUCOSA ORAL

1. Adicionar 250 ml de água em um béquer

2. Adicionar 1 colher de sopa com sal
3. Homogenizar a mistura, após exugar a mucosa oral por 1 minuto e adicionar em béquer
4. Adicionar detergente na mistura adquerida após o enxague
5. Misturar delicadamente a mistura
6. Adicionar lentamente o álcool absoluto gelado no tubo de ensaio, deixando-o escorrer vagarosamente
pela parede interna, a fim de formar duas fases, a superior, alcoólica e a inferior, aquosa. O volume
de álcool adicionado deve ser aproximadamente o mesmo volume do extrato filtrado. Misture
lentamente e observe a formação de um precipitado em forma de fios entre as fases.

4. QUESTÕES

É provável que você tenha visto na mídia que, hoje em dia, é muito fácil fazer um teste de paternidade e obter
resultados confiáveis, ou que o mapeamento e sequenciamento do genoma humano pode “abrir portas” para a
cura de muitas doenças. Para ter acesso a todas as informações contidas no DNA, o primeiro procedimento a
ser realizado é seu isolamento. A técnica de isolamento foi desenvolvida há mais de 50 anos e foi a partir dela
que os cientistas conseguiram desvendar a estrutura da molécula de DNA em 1953.

Questões para anexar no relatório, após a realização do experimento:

1. Por que o tecido precisa ser macerado para isolar o DNA?
2. Qual o papel do detergente presente na solução de lise no processo de extração do DNA?
3. Qual a composição da molécula de DNA?
4. Quais as características químicas da molécula de DNA?
5. Porque o DNA se torna hidrofóbico ficando visível após adicionar álcool gelado?
6. Qual o papel da solução salina no processo de extração do DNA?