Procedimento Operacional Padrão

Unidade POP
Vit. da Conquista
Número
Processo Versão
Identificação de folhas
EXTRAÇÃO DE DNA VEGETAL nº01
POP 002 03

1. OBJETIVO
Este POP representativo para fins didáticos, apresenta todas as etapas e os procedimentos
necessários para extrair DNA - Ácido Desoxirribonucleico vegetal (Morango).

2. CAMPO DE APLICAÇÃO
Esta norma se aplica no entendimento prático didático da técnica de extração de DNA, afim de
simular os protocolos usados na rotina laboratorial de diagnóstico molecular. Esta instrução
deverá ser aplicada nos estudos iniciais práticos das disciplinas de citologia, genética e biologia
molecular do curso técnico de análises clínicas.

3. RESPONSABILIDADES
A execução da técnica é da responsabilidade dos usuários sob a supervisão do instrutor.

4. DEFINIÇÕES
Toda célula possui um núcleo que contêm informações genéticas codificadas na molécula de
DNA (Genoma). As células dos seres humanos apresentam duas cópias – 2n de cromossomos
(DNA compactado) e algumas células vegetais podem apresentar mais cópias. O processo de
extração é uma técnica inicial que permite a investigação e análise destas informações
codificadas afim de buscar conhecer funcionalidades celulares ou diagnósticas.

5. REFERÊNCIAS
GRIFFITHS, Anthony J. F. et al. Introdução à genética. 11. ed. ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 2016.
UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO, Centro de estudos do Genoma Humano: Extração caseira de
DNA morango. Disponível em: <https://genoma.ib.usp.br/files/upload/44/aula-
extracaodna.pdf>. Acesso em: 13 de ago. de 2021.

6. CONDIÇÃO DE BIOSSEGURANÇA
Este Procedimento deve ser executado com o uso de jaleco, luvas e óculos de proteção com
usuários devidamente instruídos.

7. PROCEDIMENTO
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7.1 Materiais, reagentes e equipamento
7.1.1. Materiais 7.1.2. Reagentes
- Candinho ou saco “Zip Loc” - NaCl (Sal)
- Morangos (frescos ou congelados) - Detergente sem cor
- Funil - Água quente (Aprox. 65ºC)
- Aparato filtrante (Papel filtro) - Álcool etílico gelado 96%
- Bastão de Vidro/Madeira - Corante
- Tubo de ensaio de vidro 7.1.3. Equipamento
- Espátulas/colheres - Banho-maria

8.2. Descrição da Técnica

8.2.1. Desinfecção da bancada com álcool 70%

8.2. Extração de DNA do Morango

• Coloque 2 morangos, previamente lavados e sem as sépalas no cadinho ou
saco plástico.
• Colocar os morangos dentro de um saco plástico e macerá-los pressionando os
morangos com os dedos até obter uma pasta quase homogênea. Transferir a
pasta de morango para um becker.
• Em outro Becker misturar 150 ml de água, uma colher (sopa) de detergente e
uma colher (chá) de sal de cozinha. Mexer bem com o bastão de vidro, porém
devagar para não fazer espuma.
• Colocar cerca de 1/3 da mistura de água, sal e detergente sobre o macerado
de morango. Misturar levemente com o bastão de vidro.
• Incubar em temperatura ambiente por 30 minutos. Mexer de vez em quando
com o mesmo bastão.
• Colocar o filtro sobre um becker limpo e passar a mistura pelo filtro para
retirar os pedaços de morango que restaram.
• Colocar metade do líquido peneirado em um tubo de ensaio. Colocar apenas
cerca de 3-7ml no fundo do tubo.
• Despejar delicadamente no tubo (pela parede do mesmo), sobre a solução,
dois volumes de álcool comum. Não misturar o álcool com a solução. Aguardar
cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar na interfase.
• Passo opcional. Usar um palito de vidro, plástico ou madeira para enrolar as
moléculas de DNA. Gire o palito na interface entre a solução e o álcool.

8.2.4. Extração de DNA Humano

• Colocar 500ml de água no becker

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 • Coloque no recipiente com água uma colher de sal
• Separe três colheres desta solução em um copo descartável
• Bocheche por 1 minuto e despeje no copo
• Coloque na solução duas gotas de detergente e misture sem formar espuma
• Em outro becker coloque 250ml de álcool
• Coloque algumas gotas de corante na solução anterior
• Coloque a solução com álcool na solução com as células
• Espere 2 minutos para o DNA aparecer.

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