Instituto de Química de São Carlos – IQSC

Universidade de São Paulo

Replicação, Transcrição e Tradução

Disciplina: Bioquímica II
Docente: Profa. Dra. Fernanda Canduri
Conteúdo
• O DNA
• Do gene ao genoma
• Os genes são parte dos cromossomos
• Os genes direcionam a síntese proteica
• O dogma central da biologia molecular
• Replicação
• Trancrição
• Processamento de RNA
• Tradução
• Processamento pós-traducional
Do gene ao genoma
Genoma
• O genoma de um organismo –
conteúdo específico de DNA –
pode estar distribuído em
diversos cromossomos, cada um
contendo uma molécula de DNA
separada.
• Vários organismos são diplóides –
dois conjuntos equivalentes de
cromossomos.
• Devido ao seu comprimento, as
moléculas de DNA são descritas
em termos do número de pares
de bases (pb ou kb).
• Os genes são partes do genoma
 • Dogma central da biologia molecular:
Os genes
O DNA dirige sua própria replicação e
direcionam a transcrição, formando um RNA de sequência
síntese de complementar
A sequência de bases no RNA é então
proteínas traduzida na sequência correspondente de
aminoácidos, formando uma proteína
A conversão da informação do DNA em informação proteica não é direta

Quando a célula se divide, cada fita de DNA atua

como molde para a síntese da sua fita complementar
 O processo nas bactérias, é contínuo

O DNA é replicado, transcrito à uma molécula de RNA complementar a ele, que por sua vez é traduzido
O DNA humano não é todo transcrito
O RNA sofre o processo denominado splicing
Dogma central da
biologia molecular
• A replicação do DNA é
semiconservativa:
• Watson e Crick observaram que um
dos filamentos de cada molécula
filha de DNA é sintetizado, enquanto
o outro é passado inalterado vindo
da molécula original de DNA.
• A replicação de DNA é feita por uma
interação complexa e coordenada de
mais de 20 proteínas, dentre elas, as
DNA polimerases I, II e III são
importantes na replicação do DNA,
além da primase, helicase,
topoisomerase e DNA ligase.
 A replicação do DNA é semiconservativa

Cada fita de DNA pode atuar como um molde para a síntese de sua fita complementar e,
consequentemente, a informação hereditária está codificada na sequência de bases em
qualquer fita.
 Replicação

Topoisomerase

Helicas
e

http://www.johnkyrk.com/DNAreplication.html
http://www.youtube.com/watch?v=teV62zrm2P0
 A replicação do DNA é bidirecional: uma "bolha" de
Replicação replicação com duas forquilhas que se movimentam em
sentidos opostos

Em eucariotos, devido ao tamanho, há várias origens de replicação

Em procariotos
existe uma
única origem
de replicação
 A helicase

3´

Replicação 5´

• RNA primase: sintetiza os iniciadores de RNA, pois a

síntese de DNA inicia-se na terminação 5’

• Helicase: enzima dependente de ATP com a função de 5´

desenrolar a dupla hélice

• Topoisomerase: promove o desenrolamento contínuo

na forquilha de replicação

• “Single-stranded-binding (SSB)” – proteína ligadora de

fita simples: impede que as fitas de DNA se reanelem,
mantendo a fita simples em estado não-pareado.
 DNA polimerases
• DNA polimerase I (DNA Pol I): é uma enzima
processiva, pois catalisa vários passos sucessivos na
polimerização de nucleotídeos
• Função essencial: síntese da fita descontínua, onde
remove os iniciadores de RNA e substitui por DNA
• Possui atividade exonucleásica 5´  3´ e 3´  5’
• A atividade 3´  5’ permite que a DNA Pol I corrija
erros, como mutações: esse mecanismo de correção de
erros de leitura explica a alta fidelidade da replicação do
DNA pela DNA Pol I
• DNA Pol II participa no reparo do DNA, mas também
pode replicar DNA quando o filamento molde é
danificado
• DNA Pol III é denominada de replicase. É capaz de
sintetizar uma fita de DNA complementar a um molde
de fita simples e corrigir a reação de polimerização para
aumentar a fidelidade da replicação.
Polimerização da nova fita pela DNA polimerase III
A DNA polimerase
 Replicação

• A atividade exonucleásica 5’ 3’ da

DNA Pol I liga-se à fita dupla de
DNA em locais de abertura na fita
simples (quebras). A fita simples
com quebras é clivada em uma
região pareada além da quebra
liberando mononucleotídeos
• A DNA Pol I repara a fita e a DNA
ligase promove a união da fita
descontínua.
• E como reparar o fragmento de DNA ligase

RNA que inicia a fita na term. 5´?

 • A transcrição consiste na síntese de
RNA. Ela é realizada por um complexo
enzimático cuja enzima chave é a RNA
polimerase, composta de várias
subunidades e que realiza a
polimerização do RNA a partir de um
Transcrição molde de DNA.

• Esse processo ocorre em três etapas

principais:
• a iniciação, o alongamento e o término,
cada um contendo fatores específicos
Transcrição
A RNA Polimerase
• Três passos da transcrição: iniciação
(sítio de iniciação - promotor), elongação
(síntese) e terminação (sítio de
terminação)
• Sentido da leitura: 3´  5´
• RNA transcrito: 5´  3´
 • A síntese de RNA começa em regiões do DNA chamadas de
promotoras - sequências específicas reconhecidas pela RNA
Sítio de polimerase - que direcionam a transcrição de genes.
iniciação da
• Essas sequências podem ser bastante variáveis, porém, mantêm
transcrição conservadas regiões responsáveis pela função promotora
(sequências de consenso). Nos eucariotos a principal região
promotora é conhecida como TATA box.

Sequências de consenso

Região promotora
A transcrição
A RNA
polimerase e a
elongação

• Enzima responsável pela síntese de RNA dependente de DNA

• Acopla ribonucleosídeos trifosfatos (NTPs) em moldes de DNA em uma
reação promovida pela liberação e subsequente hidrólise de PPi.

(RNA)n resíduos + NTP ↔ (RNA)n + 1 resíduos + PPi ↔ 2Pi

H2O
Transcrição
 Terminação da transcrição
• Uma série de 4 a 10 pares de bases A·T consecutivos com as As na fita molde. O RNA transcrito é terminado nessa
sequência ou logo após;
• Uma região rica em G+C com uma sequência palindrômica que imediatamente precede a série de A·T;
• O RNA transcrito dessa região pode então formar uma estrutura de grampo auto complementar terminada por
vários resíduos U.
 Os produtos imediatos da transcrição – os
produtos primários – não são
Processamento necessariamente funcionais.
pós-transcricional
Para adquirir atividade biológica, muitos
deles devem ser especificamente alterados.
 Processamento de RNAr e RNAt

• O processamento
inicial, que forma os
produtos conhecidos
como pré-RNAr, começa
enquanto o transcrito
primário ainda está
sendo sintetizado
• consiste em clivagens
endonucleolíticas
específicas pelas RNase
III, RNases P, E e F em
locais de clivagem
específicos
 • O RNA ocorre principalmente como fita
simples, em geral formando estruturas
compactas em vez de cadeias frouxas
estendidas
Ácidos • Uma fita de RNA é idêntica à fita de DNA,
nucleicos exceto pela presença de grupos 2´-OH e pela
substituição da timina por uracila
de fita • Pode parear com uma fita complementar de
simples RNA ou DNA
• O pareamento das bases é intramolecular,
formando estruturas em grampo ou
estruturas mais complexas.
 Tipos de RNA

RNAr RNAm
RNAt
A tradução
• O RNA que corresponde ao gene que codifica
uma proteína é o RNA mensageiro (RNAm)
• Este vai até o ribossomo – organela composta
em grande parte por RNA ribossômico (RNAr)
• No ribossomo cada grupo de três nucleotídeos
no RNAm pareia com três nucleotídeos
complementares em uma pequena molécula
de RNA – o RNA transportador (RNAt)
• Cada molécula de RNAt está ligada a um
aminoácido correspondente
A transcrição e a tradução em eucariotos
 • O ribossomo consiste de 2/3 de RNA e 1/3 de proteínas
A reação química que une os aminoácidos de modo covalente é
O Ribossomo catalisada pelo RNAr (RNA + peptidil transferase) – exemplo de RNA
catalítico
 • O RNAt precisa ler o RNAm corretamente
Eventos • O RNAt precisa carregar o aminoácido
correto para a sua leitura do RNAm
chaves que • Cada RNAt carrega um aminoácido
asseguram a específico e liga-se a um códon específico

síntese da
Exemplo:
proteína A região de DNA codificante para arginina é
especificada 3´-GCC-5´, a qual é transcrita, por
pareamento de bases para o códon do
pelo RNAm RNAm 5´-CGG-3´, o qual liga-se a um RNAt
com o anticódon 3´-GCC-5´
Os códons
Mudanças pós-traducionais

Modificação químicas de uma cadeia

proteica durante ou após a sua tradução.

• Glicosilação
• Fosforilação
• Formação de pontes dissulfeto
• Metilação
• Carboxilação
• Acetilação
• Remoção
• Descaboxilação

Síntese de uma proteína de membrana

Endereçamento de proteínas

Um peptídeo sinal serve como um guia para

o encaminhamento das proteínas recém
sintetizadas