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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PELOTAS


Programa de Ps-Graduao em Fitossanidade

Tese

Caracterizao da resistncia de gentipos de berinjela


murcha bacteriana

Ivani Teixeira de Oliveira

Pelotas, 2011

Ivani Teixeira de Oliveira

Caracterizao da resistncia de gentipos de berinjela


murcha bacteriana

Tese apresentada ao Programa de PsGraduao em Fitossanidade, da


Universidade Federal de Pelotas como
requisito obteno do ttulo de Doutor
em Cincias (rea do conhecimento:
Fitopatologia).

Orientadora: Dra. Andra Bittencourt Moura


Co-orientador: Dr. Carlos Alberto Lopes

Pelotas, 2011

Dados de catalogao na fonte:


( Marlene Cravo Castillo CRB-10/744)
O48c Oliveira, Ivani Teixeira de
Caracterizao da resistncia de gentipos de berinjela
murcha bacteriana / Ivani Teixeira de Oliveira ; orientador
Andra Bittencourt Moura; co-orientador Carlos Alberto Lopes Pelotas,2012.-82f. : il..- Tese (Doutorado ) Programa de PsGraduao em Fitossanidade. Faculdade de Agronomia Eliseu
Maciel . Universidade Federal de Pelotas. Pelotas, 2012.
1.Ralstonia solanacearum 2.Solanum melongena
3.Resistncia 4.Interao patgeno-hospedeiro 5.Perda de
produo I.Moura, Andra Bittencourt(orientador) II. Ttulo.
CDD 635.646

Banca Examinadora:

Dra. Andra Bittencourt Moura (Orientadora)

Dr. Valmir Duarte

Dr. Willian Silva Barros

Dr. Carlos Rogrio Mauch

Dra. Danielle Ribeiro de Barros

A meus filhos,
Gabriel, Miguel e Ana Rosa,
DEDICO

Agradecimentos

A Deus por ter me dado sade e fora para esta longa jornada;
A minha me Dalva Teixeira de Oliveira, pelo exemplo e incentivo que sempre me
acompanham;
A Professora Dra. Andra Bittencourt Moura, pela orientao, disposio, apoio,
amizade, confiana e oportunidade de concluso deste trabalho na UFPel;
Ao Dr. Carlos Alberto Lopes, pela orientao, disposio, apoio e todos os
ensinamentos e exemplos transmitidos durante o trabalho na Embrapa Hortalias;
Ao Dr. Leonardo de Brito Giordano pela orientao, apoio e convvio;
Aos amigos Valcia Lemes, Murillo Lobo, Luciana Pozzer, Gilmar Henz e Adriana
Nascimento pelo convvio na Embrapa e UnB;
Aos amigos Ismail, Tnia, Jaqueline, Bianca, Dediel, Carine e Monalize pelo apoio e
carinho em minha estada em Pelotas;
Aos funcionrios da Embrapa Hortalias e UnB pelo apoio e carinho;
Aos funcionrios Mariane, Rosria e Srgio, do Laboratrio de Patologia de
Sementes, pela amizade e auxlio durante meu trabalho em Pelotas;

Aos professores da UnB e da UFPel, pelo convvio e ensinamentos;


A Embrapa Hortalias, pelo suporte estrutural e pessoal para realizao do trabalho
experimental;
Ao CNPq e Capes pelo apoio financeiro em Braslia e Pelotas;
A todos que de alguma forma contriburam para a realizao deste trabalho;
Agradeo.

Resumo

OLIVEIRA, Ivani Teixeira de. Caracterizao da resistncia de gentipos de


berinjela murcha bacteriana. 2011. 82f. Tese (Doutorado). Programa de PsGraduao em Fitossanidade. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas.
A murcha bacteriana, causada por Ralstonia solanacearum, uma das doenas mais
importantes para a cultura da berinjela e no existem variedades resistentes a esta
doena disponveis para comercializao no Brasil. Neste trabalho foram avaliadas
fontes de resistncia murcha bacteriana, dentre gentipos previamente existentes
no banco de germoplasma da Embrapa Hortalias e gentipos depositados,
oriundos do AVRDC (Asian Vegetable Research and Development Center
Taiwan), utilizando-se as estirpes CHPH19 e CNPH152 de R. solanacearum, raa 1,
ambas pertencentes biovar I, selecionados em ensaio de virulncia com estirpes
de diversas procedncias e de trs diferentes biovares (I, II e III), todos
pertencentes raa 1. As avaliaes da doena foram por notas aos 10 e 21 dias
aps a inoculao (DAI) e alterao de massa seca da parte area em relao
testemunha no inoculada (AMS). Com a utilizao de anlise multivariada, com
agrupamento por dissimilaridade, baseada nas notas aos 10 e 21 DAI e alterao
de AMS, as respostas dos gentipos estirpe CNPH19 permitiram a separao em
cinco grupos de diferentes nveis de resistncia, e dois grupos para o isolado
CNPH152. Em ensaio para estudo de interao isolado-gentipo, foram inoculados
seis isolados em oito gentipos, cujos resultados obtidos confirmaram a existncia
de interao patgeno-hospedeiro e evidenciaram virulncia elevada da estirpe
CNPH19 e alto nvel de resistncia dos gentipos CNPH778 e CNPH785. Estes
gentipos e outros quatro (CNPH006, CNPH171, CNPH658 e CNPH783) foram
cultivados em solo naturalmente infestado por Ralstonia solanacearum, raa 1, biovar
III, para quantificao de perdas causadas pela infeco bacteriana e observao
dos sintomas apresentados. Com exceo do gentipo CNPH778, todos
apresentaram ao menos uma planta com murcha tpica da doena. Alm de
murcha, foram observados os sintomas de seca e morte de plantas, nos gentipos
CNPH006 e CNPH658, amarelecimento de folhas, no gentipo CNPH785; e menor
crescimento de plantas, em todos os gentipos. A ocorrncia de fluxo bacteriano foi
constatada em todas as plantas cultivadas nos canteiros infestados, inclusive as
que no apresentaram sintomas. Foi calculada a perda percentual de produo de
cada gentipo conduzido em solo infestado em relao produo da rea sem
ocorrncia de murcha.
Os gentipos foram agrupados (Scott-Knott

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P0,05) quanto sua capacidade de manter a produo de frutos em uma rea
com solo naturalmente infestado por R. solanacearum. O gentipo CNPH785 foi
considerado o mais resistente por no ter apresentado perda na produo em
relao mdia obtida em rea livre do patgeno, seguido dos gentipos
CNPH783, CNPH778 e CNPH171, com perdas mdias em relao mdia obtida
na rea livre do patgeno de 19,3, 11,4 e 10,1%, respectivamente. Os gentipos
CNPH658 e CNPH006 foram os mais suscetveis, com perda quase total. Para
complementar a caracterizao de resistncia dos gentipos CNPH785 e
CNPH785, foram avaliadas curvas de titulao de resistncia, utilizando-se
suspenses bacterianas das estirpes CNPH19 e CNPH182, com concentraes de
104 a 109, e tambm a capacidade de colonizao pelas estirpes CNPH19 e
CNPH182 (isolada do solo do ensaio de campo) de R. solanacearum aos tecidos
destes gentipos, em um perodo de zero a 48h. O gentipo CNPH778 foi o mais
resistente estirpe CNPH182, mas no manteve sua posio como gentipo
resistente estirpe CNPH19, previamente observada, pela titulao de resistncia.
O gentipo CNPH785 apresentou menor resistncia quando comparado ao
gentipo CNPH778, destacando-se apenas em relao estirpe CNPH19. Os
gentipos CNPH778 e CNPH785 apresentaram o mesmo desempenho quanto
colonizao de tecidos do caule, alcanando valores de log(ufc/g) de 7,83 e 7,95,
respectivamente, segundo anlise de regresso, e valores de 8,63 e 8,36 para os
gentipos CNPH171 e CNPH658, respectivamente, para o perodo estudado.
Palavras-chave: Ralstonia solanacearum, Solanum melongena, resistncia, interao
patgeno-hospedeiro, perda de produo

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Abstract

OLIVEIRA, Ivani Teixeira de. Characterization of resistance of eggplant


genotypes to bacterial wilt. 2011. 82p. Tese (Doutorado) - Programa de Psgraduao em Fitossanidade. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas
The bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum is one of the most important
diseases for the eggplant and no commercial resistant varieties to this disease are
available in Brazil. In this work, brinjal genotypes resistance reactions to inoculating
CHPH19 and CNPH152 strains of R. solanacearum, biovar I, race 1, were evaluated.
The evaluated accessions belong to Embrapa Hortalias germplasm collection,
including recently accessions arrived from AVRDC (Asian Vegetable Research and
Development Center - Taiwan). The strains used in this assay were selected by
virulence and collected from different Brazil locations and biovars I, II and III, race 1.
The wilt severity was recorded following a grade scale at 10 and 21 days after
inoculation (DAI) and alteration shoot dry mass of inoculated plants compared with
noninoculated (AMS). Using multivariate analysis, based on the bacterial wilt index at
10 and 21 DAI and AMS, the genotypes inoculated with CNPH19 strain were
discriminated in five groups of different levels of resistance, and in two groups when
inoculated with CNPH152 strain. To investigate strain-genotype interaction, six
strains were inoculated into eight genotypes, whose results confirmed the existence
of strain-genotype interaction and showed high virulence of CNPH19 strain and high
resistance of the genotypes CNPH778 and CNPH785. These and four other
genotypes (CNPH006, CNPH171, and CNPH658 CNPH783) were grown in soil
naturally infested with R. solanacearum, race 1, biovar III to quantify the losses caused
by bacterial colonization and observing symptoms in this condition. With the
exception of genotype CNPH778, all had at least one plant with typical wilt disease.
In addition to wilting, were observed symptoms of leaves fall and death of plants to
CNPH006 and CNPH658, leaf yellowing, to CNPH785, and low development of
plants in all genotypes. The occurrence of bacterial flow was found in all plants grown
in infested plots including those that showed no symptoms. The percentage of yield
loss in the plant cultivated on infested soil in relation to the production on free
bacterial soil was calculated. The genotypes were grouped by Scott-Knott test,
p0.05, for its ability to maintain fruit yield in naturally infested soil by R. solanacearum.
CNPH785 genotype was considered the best one for not having shown loss in fruit
yield compared to the average obtained in the free pathogen soil, followed by
CNPH783, CNPH778 and CNPH171 with average losses of 19.3, 11.4 and 10.1%,

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respectively. CNPH658 and CNPH006 accessions were the most susceptible, with
almost total loss. To complement CNPH785 and CNPH785 resistance
characterization, these accessions were evaluated for resistance titration, using
CNPH19 and CNPH182 strains at 104 to 109 cfu/mL, and also the ability of CNPH19
and CNPH182 tissue colonization by R. solanacearum after zero to 48h after
inoculation. CNPH778 was the most resistant accession to CNPH182 strain, but not
maintained the same behavior
show resistance to CNPH19 strain by resistance titration, at despite of to had shown
resistance to CNPH19 strain previously. CNPH785 showed resistance to CNPH19
strain, only, in despite of to had shown resistance to CNPH182 strain previously.
CNPH778 and CNPH785 accessions showed the same performance as the
colonization of stem tissue, according to regression analysis, reaching values of log
(cfu/g) of 7.83 and 7.95, respectively, and values of 8.63 and 8,36 for genotypes
CNPH171 and CNPH658, respectively, for the assayed period.
Key words: Ralstonia solanacearum, Solanum melongena, resistance, pathogen-host
interaction, loss yield

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Lista de Figuras

Figura 1

Dendrogramas de dissimilaridade das distncias de Malahanobis


das reaes de gentipos de berinjela inoculados com as estirpes
CNPH19 (A) e CNPH152 (B) de Ralstonia solanacearum, expressas
pelo ndice de murcha bacteriana aos 10 e 21 dias aps a
inoculao e alterao de massa seca na parte area em relao
testemunha no inoculada aos 21dias aps a inoculao.................. 33

Figura 2

Dendrograma de dissimilaridade das distncias de Mahalanobis das


reaes de oito gentipos de berinjela causadas pela inoculao de
seis estirpes de Ralstonia solanacearum (CNPH13, CNPH19, CNPH47,
CNPH56, CNPH71 e CNPH152) e expressas pelo ndice de murcha
bacteriana aos 10 e 21 dias aps a inoculao e alterao de
massa seca na parte area em relao testemunha no inoculada
aos 21 dias aps a inoculao............................................................. 38

Figura 3

Dendrograma de dissimilaridade das distncias de Mahalanobis da


severidade de murcha bacteriana causada por seis estirpes de
Ralstonia solanacearum em oito gentipos de berinjela (CNPH006,
CNPH171, CNPH407, CNPH658, CNPH778, CNPH782, CNPH783
e CNPH785), expressa pelo ndice de murcha bacteriana aos 10 e
21 dias aps a inoculao e alterao de massa seca na parte
area em relao testemunha no inoculada................................... 38

Figura 4

Manuteno na produo (peso) de frutos por gentipos de


berinjela em plantas cultivadas em solo naturalmente infestado por
Ralstonia solanacearum, raa 1, biovar 3, em relao mdia de
produo em uma rea livre do patgeno. Os valores das colunas
com mesmas letras formam grupos que no se diferenciam entre si,
segundo o teste de agrupamento de Scott-Knott (P 0,05)................. 48

13
Figura 5

Reaes dos gentipos CNPH171, CNPH658, CNPH778 e


CNPH785 de berinjela inoculao no caule e nas razes com as
estirpes CNPH19 e CNPH182 de Ralstonia solanacearum, expressas
na forma de rea abaixo da curva de progresso da doena
(AACPD), alterao percentual de massa seca da parte area em
relao testemunha no inoculada (AMS) e nmero de plantas
mortas (NPM) aos 30 (inoculao no caule) e 50 (inoculao nas
razes) dias aps a inoculao com concentraes crescentes de
suspenses bacterianas...................................................................... 60

Figura 6

Colonizao de tecidos de quatro gentipos de berinjela, inoculados


com os isolados R19, biovar I, e R182, biovar III, ambos da raa 1
de Ralstonia solanacearum ao longo do tempo........................................ 66

14

Lista de Tabelas

Tabela 1

Tabela 2

Tabela 3

Tabela 4

Tabela 5

Tabela 6

Hospedeiro, instituio doadora, estado brasileiro de coleta e


biovar das estirpes de Ralstonia solanacearum, raa 1, avaliados
quanto virulncia em Solanum melongena..........................................

25

Denominaes, pases de origem e reaes previamente


conhecidas de resistncia murcha bacteriana de gentipos de
Solanum melongena...............................................................................

27

Virulncia de estirpes de Ralstonia solanacearum (raa 1) em plantas


de berinjela dos gentipos CNPH110 (suscetvel) e CNPH171
(resistente), expressa em ndice de murcha bacteriana aos 10 e 21
dias aps a inoculao (IMB10 e IMB21, respectivamente) e
alterao de massa seca na parte area em relao testemunha
no inoculada (AMS) aos 21 DA.......................................................

30

Severidade de murcha bacteriana em plantas de 21 gentipos de


berinjela, expressa pelo ndice de murcha bacteriana aos 10 e 21
dias aps a inoculao (IMB10 e IMB21, respectivamente) com as
estirpes CNPH19 e CNPH152 de Ralstonia solanacearum (raa 1,
biovar I) e alterao de massa seca na parte area em relao
testemunha no inoculada (AMS) aos 21 dias aps a inoculao...

32

Grupos de classificao de gentipos de berinjela obtidos por


anlise de agrupamento multivariada para as estirpes CNPH19 e
CNPH152 e suas respectivas faixas de ndice de murcha
bacteriana aos 10 e 21 dias aps a inoculao (IMB10 e IMB21) e
alterao de massa seca na parte area em relao testemunha
no inoculada (AMS).........................................................................

34

Virulncia de seis estirpes de Ralstonia solanacearum, raa 1, em oito


gentipos de berinjela, expressa em logaritmo do ndice de murcha
bacteriana aos 10 e 21 dias aps a inoculao (IMB10 e 21), e
alterao de massa seca na parte area em relao testemunha
no inoculada (AMS) aos 21 dias aps a inoculao........................

37

15
Tabela 7
Tabela 8

Tabela 9

Tabela 10

Tabela 11

Tabela 12

Tabela 13

Tabela 14

Gentipos de Solanum melongena avaliados em campo: procedncia


e reaes a trs estirpes de Ralstonia solanacearum, raa 1.................

45

Incidncia de sintoma de murcha (S) e morte (M) de plantas de


seis gentipos de berinjela, em percentagem, aos 10, 50, 90 e 130
dias aps o transplantio em rea infestada naturalmente com
Ralstonia solanacearum, raa 1, biovar 3................................................

47

Produo (kg de frutos/planta sobrevivente) de seis gentipos de


berinjela em rea livre e em rea infestada por Ralstonia
solanacearum, raa 1, biovar 3.............................................................

47

Gentipos de Solanum melongena avaliados em casa de vegetao e


a campo: procedncia e reaes a duas estirpes de Ralstonia
solanacearum, raa 1............................................................................

54

Resistncia dos gentipos CNPH171, CNPH658, CNPH778 e


CNPH785 de berinjela murcha-bacteriana, expressa por
coeficientes de curvas de resposta de rea abaixo da curva de
progresso da doena (AACPD), aps inoculao por ferimento no
caule ou nas razes da estirpe CNPH19, biovar I ou CNPH182,
biovar III, ambas pertencentes raa 1 de Ralstonia solanacearum......

61

Resistncia dos gentipos CNPH171, CNPH658, CNPH778 e


CNPH785 de berinjela murcha-bacteriana, expressa por
coeficientes de curvas de resposta1 de alterao percentual de
massa seca da parte area em relao testemunha no
inoculada (AMS), aps inoculao por ferimento no caule ou nas
razes da estirpe CNPH19, biovar I ou CNPH182, biovar III, ambas
pertencentes raa 1 de Ralstonia solanacearum..................................

62

Resistncia dos gentipos CNPH171, CNPH658, CNPH778 e


CNPH785 de berinjela murcha-bacteriana, expressa por
coeficientes de curvas de resposta1 de contagem de plantas
mortas (NPM), aps inoculao por ferimento no caule ou nas
razes da estirpe CNPH19, biovar I ou CNPH182, biovar III, ambas
pertencentes raa 1 de Ralstonia solanacearum, aos 30 (caule) ou
50 dias (razes) da inoculao...........................................................

63

Colonizao de tecidos de plantas de berinjela de quatro


gentipos, expressa em logaritmo do nmero de unidades
formadoras de colnia por grama de tecido log(ufc/g), nos dois
centmetros acima do ponto de inoculao no caule, em plantas
inoculadas com os isolados R19, biovar I, e R182, biovar III,
ambos da raa 1 de Ralstonia solanacearum..........................................

65

16

Sumrio

RESUMO ..................................................................................................................... 8
ABSTRACT ............................................................................................................... 10
LISTA DE FIGURAS ................................................................................................. 12
LISTA DE TABELAS ................................................................................................ 14
1 INTRODUO ....................................................................................................... 18
2 CAPTULO I - RESISTNCIA EM GENTIPOS DE BERINJELA MURCHA
BACTERIANA ........................................................................................................... 20
2.1 RESUMO .......................................................................................................... 20
2.2 INTRODUO ................................................................................................. 21
2.3 MATERIAL E MTODOS ................................................................................ 23
2.3.1 Seleo de estirpes .................................................................................... 23
2.3.2 Avaliao de gentipos .............................................................................. 26
2.3.3 Interao gentipos e estirpes ................................................................... 28
2.3.4 Procedimentos estatsticos ........................................................................ 28
2.4 RESULTADOS ................................................................................................. 29
2.4.1 Seleo de estirpes .................................................................................... 29
2.4.2 Avaliao de gentipos .............................................................................. 31
2.4.3 Estudo da interao entre gentipos e estirpes ......................................... 35
2.5 DISCUSSO .................................................................................................... 39
2.6 CONCLUSES ................................................................................................ 41
3 CAPTULO II - PRODUO DE FRUTOS E SINTOMAS EM GENTIPOS DE
BERINJELA CULTIVADOS EM SOLO INFESTADO POR Ralstonia solanacearum .. 42
3.1 RESUMO .......................................................................................................... 42
3.2 INTRODUO ................................................................................................. 43
3.3 MATERIAL E MTODOS ................................................................................ 44
3.3.1 rea dos ensaios e gentipos avaliados .................................................... 44
3.3.2 Registro de plantas sintomticas, fluxo bacteriano e produo de frutos .. 45
3.3.3 Procedimento estatstico ............................................................................ 45
3.4 RESULTADOS ................................................................................................. 46
3.4.1 Descrio sintomatolgica e diagnose ....................................................... 46
3.4.2 Produo de frutos ..................................................................................... 47
3.5 DISCUSSO .................................................................................................... 49
3.6 CONCLUSES ................................................................................................ 50
4 CAPTULO III - TITULAO DE RESISTNCIA E COLONIZAO DE TECIDOS
POR DUAS ESTIRPES DE Ralstonia solanacearum
EM GENTIPOS DE
BERINJELA COM DIFERENTES NVEIS DE RESISTNCIA ................................. 51

17
4.1 RESUMO .......................................................................................................... 51
4.2 INTRODUO ................................................................................................. 52
4.3 MATERIAL E MTODOS ................................................................................ 54
4.3.1 Titulao de resistncia.............................................................................. 54
4.3.1.1 Gentipos de berinjela e estirpes do patgeno .................................... 54
4.3.1.3 Avaliao .............................................................................................. 55
4.3.1.4 Procedimentos estatsticos .................................................................. 56
4.3.2 Estudo da colonizao de tecidos .............................................................. 57
4.3.2.1 Gentipos de berinjela e estirpes do patgeno .................................... 57
4.3.2.2 Inoculao ............................................................................................ 57
4.3.2.3 Avaliao .............................................................................................. 57
4.3.2.4 Procedimentos estatsticos .................................................................. 58
4.4 RESULTADOS ................................................................................................. 58
4.4.1 Titulao de resistncia.............................................................................. 58
4.4.2 Colonizao de tecidos .............................................................................. 64
4.5 DISCUSSO .................................................................................................... 67
4.6 CONCLUSES ................................................................................................ 69
5 CONCLUSES ...................................................................................................... 70
6 REFERNCIAS ...................................................................................................... 71
APNDICES ............................................................................................................. 78

18

1 Introduo
A berinjela (Solanum melongena L.) uma planta solancea nativa de regies
tropicais do Oriente, cultivada h sculos por chineses, indianos e rabes. Foi
introduzida no Brasil no sculo XVI durante a colonizao portuguesa (RIBEIRO;
BRUNE; REIFSCHNEIDER, 1998). uma planta autgama (FILGUEIRA, 2000) com
taxa de polinizao cruzada natural de 0,7 a 30%, ocasionada pela ao de insetos
(KALLOO, 1993)
A cultura tem perodo de 57 a 90 dias entre o transplantio e o incio da
frutificao e requer temperaturas elevadas para o crescimento da planta e
desenvolvimento dos frutos, com timo de 27C e limite inferior de 16C
(GRANBERRY, 1990). S. melongena uma planta arbustiva de caule semilenhoso e
ereto, que alcana 0,5 a 1,8 m de altura apresenta frutos do tipo baga, geralmente
brilhantes que apresentam ampla variao de tamanho, formato e cor (RIBEIRO,
2007). Entre as variedades da espcie se apresentam frutos de tamanho pequeno a
grande, com variaes de 6 a 30 cm de comprimento e 3 a 10 cm de dimetro
(GRANBERRY, 1990), colorao branca, rosada, zebrina, amarela, prpura ou preta
e formato oval, oblongo, redondo, oblongo-alongado ou alongado (RIBEIRO, 2007).
Sua produtividade, no Brasil, alcana 30 a 65 t/ha no campo e 60 a 95 t/ha em
cultivo protegido (MOREIRA et al., 2006). A preferncia do mercado brasileiro pelo
fruto roxo escuro com formato alongado a oblongo (RIBEIRO; BRUNE;
REIFSCHNEIDER, 1998). No Brasil, cultivada em maior escala nos estados de
So Paulo, Minas Gerais e na regio Sul (RIBEIRO, 2007).
O volume de comercializao de frutos de berinjela vem aumentando
continuamente nas ltimas dcadas, em virtude da divulgao de seu valor como
alimento funcional, que entre diversos benefcios alegados, atuaria na reduo do
colesterol (DERIVI et al., 2002). A rea plantada da cultura em So Paulo, maior

17
produtor e consumidor de berinjela, subiu de 559 ha, em 1984, para 1.946 ha, em
2008, elevando a comercializao no estado de 15.534 t para 51.185 t (IEA/CATI SAAESP, 2010).
Entre as doenas de importncia econmica para a berinjela, a murcha
bacteriana, causada por Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et al., um dos
fatores limitantes para a produo em regies tropicais e subtropicais no mundo (LI;
GOTH; BARKSDALE, 1988) e no Brasil (COELHO NETTO et a., 2004).
A bactria R. solanacearum apresenta grande variabilidade na patogenicidade
e virulncia, o que fez com que, ao longo de mais de um sculo, fossem propostos
diferentes sistemas de classificao desse patgeno, de maior ou menor
complexidade, aos nveis especfico e sub-especfico. Dois sistemas so
amplamente utilizados para diferenciao de isolados, por serem simples e prticos:
um sistema que separa cinco raas, baseado em diferenas na gama de espcies
hospedeiras (BUDDENHAGEN; SEQUEIRA; KELMAN, 1962; HE, SEQUEIRA;
KELMAN, 1983); e o outro que separa seis biovares, baseado na capacidade de
utilizao ou oxidao de diferentes fontes de carbono (HAYWARD, 1964, 1991,
1994a, b).
Embora a identificao por raa e biovar seja muito utilizada, novas formas
de

classificao

foram

apresentadas,

em

funo

da

heterogeneidade

complexidade encontrada nesta espcie bacteriana. Foi proposta em 2005, a diviso


da espcie em quatro filotipos e 23 sequevares. A separao em filotipo se
fundamenta em filogenia por anlise de sequncia gentica de regies determinadas
do genoma da espcie e tem correspondncia com o provvel local de origem. Cada
filotipo se divide em sequevares, cuja separao se baseia em agrupamentos de
isolados com semelhanas em sequncias do gene de endoglucanase (FEGAN;
PRIOR, 2005).
No Brasil, a bactria est amplamente distribuda em todo territrio nacional,
onde ocorrem as raas 1, 2 e 3 e as biovares I, II e III (COELHO NETTO et al., 2004;
MARIANO; MICHEREFF, 1994; REIFSCHNEIDER; TAKATSU, 1985; SILVEIRA et
al., 2005). A berinjela atacada pela raa 1 e pelas trs biovares que ocorrem no
Brasil (LOPES, 1992; MORGADO; LOPES; TAKATSU, 1992a; b).
O patgeno penetra na planta por meio de ferimentos do sistema radicular e
nos pontos de emergncia de razes secundrias, vindo a colonizar o xilema
(KELMAN, 1953). Existem variaes nos sintomas que diferem da murcha tpica. A

18
diagnose da murcha bacteriana geralmente feita cortando-se uma seo
longitudinal contendo tecido vascular infectado e colocando-o em um recipiente
transparente contendo gua em repouso (teste-do-copo). Em poucos minutos,
finos fios esbranquiados fluem das margens do tecido, sendo esta a resposta
positiva para a doena (LOPES; QUEZADO-SOARES, 1997; LOPES, 2009).
O controle da murcha bacteriana muito difcil, principalmente quando as
condies ambientais so favorveis doena. No caso da cultura da berinjela, as
condies de crescimento da cultura coincidem com as condies ambientais
favorveis doena, o que aumenta sua gravidade para a cultura. O controle
tambm dificultado pela grande capacidade de sobrevivncia da bactria no solo e
por seu amplo crculo de hospedeiras (BUDDENHAGEN; KELMAN, 1964). Vrias
estratgias de controle tm sido estudadas nos diferentes hospedeiros e,
potencialmente, o controle mais eficiente seria a utilizao de variedades resistentes
(BI-HAO et al., 2009).
Fontes de resistncia em berinjela j so conhecidas h bastante tempo
(NOLLA, 1931), entretanto, a reao de resistncia de diferentes gentipos podem
se alterar em funo da extrema variabilidade do patgeno (GRIMAULT; PRIOR,
1994) e da interao do gentipo com um ambiente muito conducivo murcha
bacteriana (SHARMA; KUMAR, 2007). H relatos de que a gentica da resistncia
de berinjela murcha bacteriana pode ser simples, com a ao de um gene
dominante (AKIBA et al., 1972; GOPINATH; MADALAGERI, 1986; YANG et al.,
2006), mas tambm h aqueles que a descrevem como de herana complexa,
envolvendo vrios genes com dominncia parcial ou recessiva (LI; GOTH;
BARKSDALE, 1988; TANIMOTO; NAKASONE, 2002), com interferncia por fatores
citoplasmticos (GOUSSET et al., 2004, citado por BI-HAO et al., 2009).
A forma de avaliao da murcha bacteriana para resistncia de plantas
doena mais utilizada a escala de notas, adaptada de Nielsen e Haynes (1960),
utilizada em quase todos os estudos. Outras formas propostas de avaliao de
resistncia so a titulao de resistncia e ndice de colonizao. No caso da
titulao, observam-se o DE50 (dose mdia efetiva), em termos de concentrao
bacteriana da suspenso inoculada, e a inclinao da curva de resposta
(ERCOLANI, 1984; KNOCHE; CLAYTON; FULTON, 1987). No caso do ndice de
colonizao, observam-se a quantidade de crescimento de R. solanacearum nos
tecidos e a tolerncia das plantas a este crescimento (PRIOR et al., 1996).

19
Com o propsito de obter mais informaes sobre a resistncia de berinjela
a estirpes de R. solanacearum de diversas localidades do Brasil e suas implicaes no
processo de melhoramento, este trabalho visou: I) Avaliao de virulncia e seleo
de estirpes de R. solanacearum para utilizao na caracterizao da resistncia de
gentipos de S. melongena, em busca de fontes de resistncia; II) Avaliao da
resistncia dos materiais selecionados em campo naturalmente infestado com R.
solanacearum;

III) Titulao de resistncia murcha bacteriana e avaliao da

colonizao de tecidos de plantas de berinjela por R. solanacearum.

20

2 Captulo I
Resistncia em gentipos de berinjela murcha bacteriana

2.1 Resumo
A murcha bacteriana uma das doenas mais importantes para a cultura da
berinjela e no existem variedades resistentes a esta doena disponveis para
comercializao. Neste trabalho foram avaliadas as reaes de 21 gentipos de
berinjela a dois isolados de Ralstonia solanacearum. As avaliaes da doena foram por
notas aos 10 e 21 dias aps a inoculao (DAI) e alterao de massa seca da parte
area em relao testemunha no inoculada (AMS) aos 21 DAI. Para seleo das
estirpes utilizadas para a avaliao de resistncia foi avaliada a virulncia de 21
estirpes de diversas procedncias e de trs diferentes biovares (I, II e III), todos
pertencentes raa 1, inoculados em plantas dos gentipos CNPH110 (suscetvel) e
CNPH171 (resistente). A variao de virulncia foi independente da biovar, do local
de procedncia ou do hospedeiro de origem. Dentre as estirpes testadas foram
selecionadas CNPH19 e CNPH152 (raa 1, biovar I), para identificao e
caracterizao de resistncia murcha bacteriana em berinjela. Com a utilizao de
anlise multivariada, com agrupamento por dissimilaridade, baseada nas notas aos
10 e 21 DAI e alterao de AMS, as respostas dos gentipos estirpe CNPH19
permitiram a separao em cinco grupos: Grupo 1 (muito suscetveis) - CNPH777,
CIA, PROVS75, CNPH006, CNPH130, CNPH658 e CNPH171; Grupo 2
(suscetveis) - CNPH780, CNPH783, CNPH786, CNPH784, CNPH781, CNPH782,
CNPH407 e CNPH779; Grupo 3 (medianamente suscetvel) - PROVTS3; Grupo 4
(medianamente resistentes) - CNPH788, CNPH778, CNPH787 e CNPH776; Grupo 5
(resistente) - CNPH785, e dois grupos para a estirpe CNPH152: Grupo 1 (suscetvel)
- CNPH658, CNPH777 e PROVS75; Grupo 2 (resistentes) - CNPH407, CNPH171,
CNPH781, CNPH784, CNPH785, CNPH006, PROVTS3, CNPH779, CNPH788,
CNPH783, CNPH782, CNPH778, CNPH780, CNPH786, CNPH776 e CNPH787. Em
ensaio para estudo de interao estirpe-gentipo, foram inoculadas seis estirpes em
oito gentipos, cujos resultados obtidos confirmaram a existncia de interao
estirpe-gentipo e evidenciaram virulncia elevada da estirpe CNPH19 e a alto nvel
de resistncia dos gentipos CNPH778 e CNPH785.
Palavras-chave: Ralstonia solanacearum, Solanum melongena, interao patgenohospedeiro

21
2.2 Introduo
A murcha bacteriana, causada por Ralstonia solanacearum (Smith) Yabuuchi et
al., uma das doenas mais importantes para berinjela (Solanum melongena L.) nas
regies tropicais e subtropicais. considerada a principal doena de origem
bacteriana no mundo (HAYWARD, 1991). No Brasil, esta bacteriose tem-se
apresentado como um srio problema principalmente nas regies Nordeste e Norte
(REIFSCHNEIDER; TAKATSU, 1985; COSTA; FERREIRA; LOPES, 2007). Na
regio Amaznica, se constitui uma limitao para o cultivo de solanceas e a
produo local fica quase que restrita a pequenas hortas caseiras (COELHO NETTO
et al., 2004; LIMA et al., 2010).
O controle da murcha bacteriana difcil devido ao grande crculo de
hospedeiros do patgeno, sua diversidade gentica e prolongada sobrevivncia
no solo (BUDDENHAGEN; KELMAN, 1964). Medidas de controle qumico so
inviveis economicamente, alm de nocivas ao ambiente e ao homem (LOPES,
2009). O uso de microrganismos antagonistas e proteo cruzada so medidas que
podem contribuir para o controle da murcha bacteriana (TRIGALET; FREY;
TRIGALET-DEMERY, 1994; FREY et al., 1994). A escolha de terrenos bem
drenados e poca de plantio, correo do solo, utilizao de gua no contaminada,
manejo da gua de irrigao e rotao de culturas so medidas utilizadas para
reduzir a incidncia de murcha bacteriana em solos infestados (HARTMAN;
ELPHINSTONE, 1994; MARIANO; SILVEIRA; MICHEREFF, 1998). No entanto, a
utilizao de variedades com elevado nvel de resistncia, como parte das medidas
de manejo integrado seria a estratgia de controle mais promissora para a murcha
bacteriana.
Todo hospedeiro tem algum nvel de resistncia no especfica que efetiva
contra seus patgenos. Essa resistncia chamada de parcial, inespecfica,
quantitativa, polignica, adulto planta-campo, resistncia durvel, mas ou horizontal.
Em geral, a resistncia parcial no protege as plantas contra a infeco pelo
patgeno, mas atrasa a sua colonizao, diminuindo a propagao da doena e o
desenvolvimento de epidemias. Todavia, variedades ou gentipos de uma espcie
hospedeira podem se apresentar muito resistentes a uma raa do patgeno, mas
suscetveis a uma outra raa, em geral, dependendo das condies ambientais.
Essa resistncia chamada de forte, raa especfica, qualitativa, diferencial ou

22
vertical. O hospedeiro pode parecer imune, responder com uma reao de
hipersensibilidade ou inibir a reproduo do patgeno. A resistncia raa especfica
pode inibir o desenvolvimento de epidemias, limitando o inculo inicial ou limitando a
reproduo aps a infeco (AGRIOS, 2005). A resistncia vertical e horizontal
coexistem e podem ocorrer em qualquer proporo mista (VANDERPLANK, 1982).
Existem poucos relatos sobre a natureza e a gentica da resistncia de
berinjela murcha bacteriana. Alguns trabalhos indicam que o controle da
resistncia deve-se ao de um nico gene dominante (AKIBA et al., 1972;
GOPINATH; MADALAGERI, 1986); outros mencionam uma ao complexa
envolvendo vrios genes com dominncia parcial ou recessiva (LI et al., 1988). Tem
sido observada a ocorrncia de segregao transgressiva em cruzamentos
envolvendo linhagens resistentes murcha (GOTH; HAYNES; BARKSDALE, 1991),
indicando que esta caracterstica seria controlada por um nmero maior de genes de
resistncia, sendo necessria a utilizao de mtodos mais complexos de
melhoramento para a obteno de variedades resistentes.
No Brasil, ainda no existem variedades resistentes de berinjela disponveis
para uso comercial. Com a inteno de desenvolver variedades resistentes sob
condies brasileiras, foram iniciados trabalhos de pesquisa com berinjela visando
resistncia murcha bacteriana na Embrapa Hortalias. Para tanto, 15 gentipos de
vrios pases, anteriormente classificados como medianamente resistentes ou
resistentes (CHEN; LI; WANG, 1997), foram cedidos pelo Asian Vegetable Research
and Development Center (AVRDC - Taiwan) e integrados ao banco de germoplasma
da Embrapa Hortalias. Assim, este trabalho teve como objetivo selecionar estirpes
de R. solanacearum adequadas para o estudo de resistncia em berinjela, avaliar a
reao dos gentipos provenientes do AVRDC e do banco de germoplasma da
Embrapa Hortalias quando inoculados com estirpes com diferentes nveis de
virulncia, bem como verificar a existncia ou no de interao entre gentipos e
estirpes.

23
2.3 Material e Mtodos
2.3.1 Seleo de estirpes
Para avaliar resistncia em gentipos de berinjela murcha bacteriana, 21
estirpes da coleo da Embrapa Hortalias (Tab. 1) foram previamente selecionadas
quanto sua virulncia. Para isso, dois ensaios foram conduzidos em casa de
vegetao, sob temperaturas mdias dirias de 30,1 a 34,6C. Foi utilizado
aquecimento noturno para garantir temperatura mnima de 20C nos perodos
noturnos.
As estirpes utilizadas foram recuperadas da coleo da Embrapa Hortalias,
onde estavam mantidas temperatura ambiente em gua de torneira esterilizada.
As bactrias foram repicadas em meio de tetrazlio e, aps incubao por 72h
28C, colnias fluidas e com caractersticas tpicas de virulncia (KELMAN, 1954)
foram selecionadas e repicadas para placas com o mesmo meio, porm sem
tetrazlio, e incubadas por 48h na mesma temperatura. Foi preparada uma
suspenso bacteriana de cada estirpe com gua de torneira, a qual teve sua
concentrao ajustada para 108 unidades formadoras de colnias por mL (ufc/mL)
em espectrofotmetro (A600=0,5). As estirpes foram inoculadas em plantas dos
gentipos

CNPH110

CNPH171,

considerados

suscetvel

resistente,

respectivamente (MORGADO; LOPES; TAKATSU, 1992a).


A inoculao de plantas com seis folhas foi feita pela deposio de uma gota
de 10 L de suspenso bacteriana na axila da primeira folha, havendo em seguida o
trespasse da gota e do caule com um alfinete entomolgico (MORGADO; LOPES;
TAKATSU, 1994). Aos 10 e 21 dias aps a inoculao (DAI) foram feitas avaliaes
de sintomas com atribuio de notas de 1 a 5, onde: 1 ausncia de sintoma; 2
planta com um tero das folhas murchas; 3 planta com dois teros das folhas
murchas; 4 planta totalmente murcha; 5 planta morta (adaptado de NIELSEN;
HAYNES, 1960). Para cada poca de avaliao (10 e 21 DAI), as leituras foram
transformadas em ndice de murcha bacteriana (IMB) a equao:

IMB =

(C P)
N

24
onde: IMB: ndice de murcha bacteriana; C: nota atribuda a cada classe de sintoma;
P: nmero de plantas em cada classe de sintoma; N: nmero total de plantas
infectadas em cada subparcela (EMPIG et al., 1962). Desta forma, foram obtidos o
IMB10, com as notas aos 10 DAI, e o IMB21, com as notas aos 21 DAI.
Aps a atribuio das notas, aos 21 DAI, as plantas de cada subparcela
foram cortadas rente ao solo, colocadas em saquinhos de papel, secas em estufa a
60C por 72h e feitas as medidas de massa, em gramas, com trs casas decimais,
em balana digital.
Foram mantidas parcelas testemunha no inoculadas para avaliao da
alterao de matria seca da parte area das plantas inoculadas em relao
testemunha no inoculada. A alterao percentual de massa seca da parte area foi
calculada segundo a equao:

AMS =

PI PT
100
PT

onde: AMS: alterao percentual de massa seca da parte area na parcela


inoculada em relao testemunha no inoculada; PI: massa seca da parte area
na parcela inoculada; e PT: massa seca da parte area na parcela no inoculada.

25
Tabela 1 Hospedeiro, instituio doadora, estado brasileiro de coleta e biovar das
estirpes de Ralstonia solanacearum, raa 1, avaliados quanto virulncia
em Solanum melongena
Denominao

Hospedeiro

Instituio Estado de coleta

Biovar

CNPH131, 2

Solanum tuberosum

Embrapa Hortalias - DF

CNPH191, 2

Solanum lycopersicum

Embrapa Hortalias - PA

Capsicum annuum

Embrapa Amaznia Oriental - PA

III

CNPH331, 2

Solanum lycopersicum

Embrapa Hortalias - AP

III

CNPH471, 2

Solanum gilo

Embrapa Hortalias - AM

III

CNPH541, 2

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

CNPH561, 2

Solanum melongena

UFRPE - PE

III

CNPH581, 2

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

CNPH711, 2

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

II

CNPH821, 2

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

II

CNPH1042

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

CNPH1051

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

CNPH1062

Solanum melongena

Embrapa Hortalias - DF

Marsypianthes chamaedrys

Embrapa Hortalias - DF

CNPH1481

Solanum tuberosum

Instituto Biolgico - SP

CNPH1491, 2

Solanum tuberosum

Instituto Biolgico - SP

CNPH1501, 2

Solanum tuberosum

Instituto Biolgico - SP

CNPH1511, 2

Agerantum conyzoides

Instituto Biolgico - SP

CNPH1521, 2

Solanum lycopersicum

Instituto Biolgico - SP

CNPH1582

Solanum lycopersicum

Agroflora - SP

CNPH1592

Solanum lycopersicum

Agroflora - SP

CNPH201

CNPH1281, 2

1
2

Estirpe utilizada no primeiro ensaio.


Estirpe utilizada no segundo ensaio.

26
2.3.2 Avaliao de gentipos
Para avaliao de gentipos de berinjela, dois ensaios foram conduzidos em
casa de vegetao, um foi feito com a inoculao da estirpe CNPH19 e outro com a
estirpe CNPH152 (Tab. 1), sob temperaturas mdias dirias de 30,4 a 33,5C.
Foram avaliados quinze gentipos provenientes do AVRDC e outros seis da coleo
do germoplasma da Embrapa Hortalias (Tab. 2), cujas reaes foram determinadas
por Chen, Li e Wang (1997) e Morgado (1991), respectivamente. O gentipo
CNPH658 (seleo da variedade comercial Florida Market) foi o padro de
suscetibilidade. A inoculao e avaliaes (ndice de murcha bacteriana e alterao
percentual de massa seca da parte area) foram feitas como descrito no item 2.3.1.

27
Tabela 2 Denominaes, pases de origem e reaes previamente conhecidas de
resistncia murcha bacteriana de gentipos de Solanum melongena
Denominao Denominao de
Embrapa
origem

Pas de origem
Empresa/instituio

Reao1
Casa de
Campo
vegetao

CIA

Brasil (Embrapa Hortalias)

MS2

CNPH006

Campinas

Brasil (Agroflora)

MR2

R2

CNPH130

MS2

S2

CNPH171

P12

Frana (INRA)

R2

CNPH407

Nantou Nasu

China

R2

CNPH658

Flrida Market

USA (Topseed)

S2

S2

CNPH776

TS7

Malsia (AVRDC)

R3

MR3

CNPH777

EG014

Itlia (AVRDC)

R3

MR3

CNPH778

EG219

ndia (AVRDC)

R3

R3

CNPH779

TS47A

Malsia (AVRDC)

R3

R3

CNPH780

TS56B

Indonsia (AVRDC)

MR3

R3

CNPH781

TS64

Holanda (AVRDC)

MR3

MR3

CNPH782

TS69

Indonsia (AVRDC)

R3

R3

CNPH783

TS87

Indonsia (AVRDC)

R3

R3

CNPH784

TS90

Indonsia (AVRDC)

R3

R3

CNPH785

EG190

ndia (AVRDC)

R3

R3

CNPH786

EG193

ndia (AVRDC)

R3

R3

CNPH 787

EG195

ndia (AVRDC)

R3

R3

CNPH788

EG203

ndia (AVRDC)

R3

R3

PROVTS3

TS3

Malsia (AVRDC)

R3

R3

PROVS75

TS75

Tailndia (AVRDC)

MR3

MR3

R: resistente; MR: medianamente resistente; MS: medianamente suscetvel; S: suscetvel.


Inoculado com a estirpe Pss 97 (raa 1, biovar III). Fonte: CHEN; LI; WANG, 1997.
3
Inoculado com a estirpe CNPH056 (raa 1, biovar III). Fonte: MORGADO, 1991.
2

28
2.3.3 Interao gentipos e estirpes
Para avaliao da ocorrncia ou no de interao entre gentipos de
berinjela e estirpes de R. solanacearum, foi conduzido ensaio em casa de vegetao,
sob temperaturas mdias dirias de 29,5 a 34,7C. Oito gentipos (CNPH006,
CNPH171, CNPH407, CNPH658, CNPH778, CNPH782, CNPH783 e CNPH785)
foram inoculados com as estirpes CNPH13, CNPH19, CNPH47, CNPH56, CNPH71
e CNPH152. A inoculao e avaliaes (ndice de murcha bacteriana e alterao
percentual de massa seca da parte area) foram feitas como descrito no item 2.3.1.

2.3.4 Procedimentos estatsticos


Foi utilizado delineamento em blocos inteiramente casualizados em todos os
ensaios, sendo feita a diviso de parcelas (estirpes) em subparcelas (gentipos) nos
ensaios para seleo de estirpes e no estudo de interao gentipos e estirpes, com
trs e quatro blocos, respectivamente. Nos ensaios para avaliao de gentipos
foram constitudos trs blocos no ensaio com a estirpe CNPH152 e cinco blocos no
ensaio com a estirpe CNPH19. As unidades experimentais foram constitudas de
dois vasos de 1,5 litros com quatro plantas por vaso.
As anlises de varincia foram feitas utilizando o programa estatstico
Winstat 1.0 (MACHADO; CONCEIO, 2002), sendo feita neste mesmo aplicativo a
anlise de resduos para verificao das pressuposies da anlise de varincia:
grfico de caixa, distribuio normal e disperso do erro. Para a varivel AMS foi
adicionada a constante 1000, por haver resultados negativos e positivos. No caso do
ensaio para verificao de interao foi necessria transformao logartmica
decimal dos dados IMB10 e IMB21 para atendimento das pressuposies da
anlise.
O teste de agrupamento de Scott-Knott e a anlise de agrupamento
multivariada foram feitas com a utilizao do programa GENES (CRUZ, 2006). A
anlise de agrupamento foi feita por dissimilaridade, baseada na distncia euclidiana
mdia com nvel de discriminao de 50%, pelo mtodo UPGMA (ligao mdia
entre grupos Unweighted Pair-Group Method using arithmetic Averages), de
acordo com os resultados de IMB10, IMB21 e AMS.

29
2.4 Resultados
2.4.1 Seleo de estirpes
As estirpes estudadas apresentaram diferentes nveis de virulncia nos dois
ensaios realizados e com variao independente da biovar ou procedncia (Tab. 3).
Na anlise de varincia foi observada interao significativa entre estirpes e
gentipos (P0,01), o que significa que a virulncia das estirpes variou conforme o
gentipo inoculado. No primeiro ensaio, as estirpes CNPH148, CNPH149 e
CNPH152 foram as que levaram as plantas do gentipo mais suscetvel (CNPH110)
a murchar mais rapidamente (IMB10 e IMB21), o mesmo tendo ocorrido para as
estirpes CNPH150 e CNPH152, no segundo ensaio. As estirpes CNPH104 e
CNPH105 apresentaram-se avirulentas aos dois gentipos estudados, ressaltando o
fato de ter ocorrido aumento de massa seca na parte area (AMS) para o gentipo
CNPH110.
Para

gentipo

CNPH171

(resistente),

estirpe

CNPH19

foi

destacadamente a mais virulenta, nos dois ensaios. O comportamento esperado de


maior suscetibilidade do gentipo CNPH110 e de maior resistncia do gentipo
CNPH171 se manteve para todas as estirpes, com exceo da estirpe CNPH19.
Nos dois ensaios foi possvel observar que ocorreram outros sintomas alm
da murcha, como encarquilhamento (Apndice 1), amarelecimento e queda
prematura de folhas, assim como subcrescimento das plantas. A avaliao de AMS
refletiu as perdas e alteraes ocasionadas pela colonizao dos tecidos pela
bactria de modo a complementar o IMB, uma vez que outras manifestaes da
doena, alm da murcha, no tm como ser caracterizadas nas notas.
As estirpes CNPH152 e CNPH19 foram as selecionadas para a avaliao de
gentipos, em funo do elevado nvel de virulncia e sua diferena de efeitos sobre
os dois gentipos, respectivamente.