Monografia Juliana Muller - Exame Biologico Completo

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN
UFPR
JULIANA MLLER
QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DESCARTADA POR

DESTILADORES E SEU POTENCIAL PARA REUSO
Monografia de concluso de curso apresentada como

requisito parcial para obteno do grau de Bacharel
em Cincias Biolgicas, Universidade Federal do
Paran.
Orientadora: Profa. Dra. Patricia R. Dalzoto
Co-orientadora: Profa. Dra. Ida Chapaval Pimentel
CURITIBA
2011
JULIANA MLLER
QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DESCARTADA POR

DESTILADORES E SEU POTENCIAL PARA REUSO
Monografia de concluso de curso apresentada como

requisito parcial para obteno do grau de Bacharel
em Cincias Biolgicas, Universidade Federal do
Paran.
Orientadora: Profa. Dra. Patricia R. Dalzoto
Co-orientadora: Profa. Dra. Ida Chapaval Pimentel
CURITIBA
2011
A gua de boa qualidade como a sade ou a liberdade:

S tem valor quando acaba (Joo Guimares Rosa)
RESUMO
A escassez de gua um dos graves problemas que vem ocorrendo no mundo todo.
Portanto, a adoo de medidas que poupem este recurso de grande importncia
nos dias de hoje. Uma das alternativas o reaproveitamento da gua descartada de
destiladores, uma vez que esta apresenta potencial para reuso, embora
normalmente seja descartada diretamente para a rede coletora de esgoto. Este
trabalho teve como objetivos principais estimar a quantidade de gua descartada no
processo de destilao, avaliar a qualidade microbiolgica de guas de descarte de
quatro destiladores de diferentes laboratrios do Setor de Cincias Biolgicas da
Universidade Federal do Paran UFPR e propor a reutilizao destas guas de
descarte. Alm disso, foram avaliadas as condies microbiolgicas destas guas
por meio da contagem e isolamento de bactrias heterotrficas, colimetria e
contagem, isolamento e identificao de fungos. Verificou-se que para a produo
de um litro de gua destilada h um descarte de 25,12 litros de gua. As amostras
de gua de descarte dos quatro destiladores apresentaram-se contaminadas com
bactrias heterotrficas, porm apenas uma delas apresentou valores superiores ao
limite de 500 UFC/mL institudo pela Portaria 518 (2004) da ANVISA, que estabelece
padres para a qualidade da gua para consumo humano e seu padro de
potabilidade. As mdias, em UFC/mL, das bactrias heterotrficas isoladas em cada
amostra avaliada foram de 1388,5, 49, 129 e 26 UFC/mL. O exame colimtrico
resultou em ausncia de coliformes Totais e Termotolerantes para as quatro
amostras estudadas. Foram isolados fungos filamentosos pertencentes aos gneros
Aspergillus sp., Penicillium sp. e Phoma sp. Atravs da comparao dos resultados
das anlises microbiolgicas com os valores mximos permitidos pela Portaria 518
(2004), percebeu-se que todas as amostras de gua de descarte esto de acordo
com a Portaria em relao a Coliformes Totais e Termotolerantes. Em relao a
bactrias heterotrficas apenas uma amostra de gua de descarte est fora do
recomendado pela mesma Portaria. Assim, com exceo da gua de descarte de um
dos destiladores analisados, todas as outras amostras mostraram ter potencial para
reutilizao em atividades, tais como na lavagem de vidrarias, nas limpezas em geral
e na irrigao de jardins e gramas.
Palavras-chave: gua de reuso. Descarte de destilao. Bactrias heterotrficas.

Coliformes.
ABSTRACT
Water scarcity is one of the serious problems that have occurred worldwide.
Therefore, the adoption of measures that save this resource is of great importance
today It is therefore necessary to adopt methods to conserve water as a natural
resource for beneficial uses. The reuse of discharge water from distillers is an
alternative, since this water presents potential for reuse, even though it is normally
discharged directly into the sewage system. This paper had the main goals of
estimating the amount of water discharged in the process of distillation, evaluate the
microbiological quality of the discharged water from four distillers from different
laboratories of the Biological Sciences Division of the Federal University of Parana
UFPR and propose a system to reuse these discharged waters. Moreover, the
microbiological condition of these waters was evaluated through counting and
isolating heterotrophic bacteria; colimetry and counting, isolation and identification of
fungi. It was verified that for the production of 1 liter of distilled water 25,12 liters of
water are discharged. The samples of discharged water from the four distillers were
contaminated with heterotrophic bacteria; however only one of them presented
amounts of this bacteria superior to the limit of 500 UFC/mL established by the
Ordinance 518 (2004) of ANVISA, which presents the standards for water quality for
human consumption and its standard of potability. The averages, in UFC/mL, of
heterotrophic bacteria in each sample evaluated were 1388, 5; 49; 129 and 26
UFC/mL. In addition to the heterotrophic bacteria, yeast from water samples was
isolated. The colimetric test resulted in absence of coliforms for the studied samples.
Were isolated filamentous fungi belonging to the genders Aspergillus sp., Penicillium
sp. e Phoma sp, were isolated from the analyzed samples. Through the comparison
of results of the microbiological analysis with maximum values allowed by the
Ordinance 518, it was noticed that all water samples from distillers discharge are in
conformance with the Ordinance regarding total and thermotorelant coliforms. For
heterotrophic bacteria, only a sample of discard water is outside the recommended
by the same Ordinance.Therefore, except for the water of discharge from one of the
distillers analyzed, all the other samples showed to have potential to be reused in
activities such as glassware washing, general cleaning and grass and yard irrigation.
Key words: Water of reuse. Discharge of distillers. Heterotrophic bacteria. Coliforms.
LISTA DE ILUSTRAES
FIGURA 1 - RELAO ENTRE O VOLUME DE GUA SALGADA E GUA DOCE

NO MUNDO ................................................................................................................ 4
FIGURA 2- DISTRIBUIO DE GUA NO MUNDO ................................................... 5
FIGURA 3 EQUIPAMENTO DE DESTILADOR DE GUA ....................................... 6
FIGURA 4 - RELAO ENTRE GUA DESCARTADA E GUA DESTILADA NO
EQUIPAMENTO
DE
MICROBIOLOGIA
DESTILADOR
BIOLOGIA
DE
GUA
MOLECULAR
DO
DO
LABORATRIO
DE
DEPARTAMENTO
DE
PATOLOGIA BSICA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN ........................ 18

FIGURA 5 FREQUNCIA DE MORFOTIPOS DE BACTRIAS ISOLADOS NAS
AMOSTRAS
DE
GUA
DE
DESCARTE
DOS
DESTILADORES
DE
LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR ...................... 23

FIGURA 6 MORFOLOGIA COLONIAL DE BACTRIAS ISOLADAS DE GUAS DE
DESCARTE DE DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS
BIOLGICAS UFPR, APS CRESCIMENTO A 28oC POR 48 HORAS. (a)
Morfotipo T1. (b) Morfotipo T2. (c) Morfotipo T3. (d) Morfotipo T4. (e) Morfotipo T5. (f)
Morfotipo T6. (g) Morfotipo T7. .................................................................................. 26
FIGURA 7 MICROMORFOLOGIA DAS BACTRIAS ISOLADAS DA GUA DE
REUSO DE DESTILADORES DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR,
CORADAS POR MEIO DE COLORAO DE GRAM, APS CRESCIMENTO A
28OC POR 48 HORAS. (a) Morfotipo T1. (b) Morfotipo T2. (c) Morfotipo T3. (d)
Morfotipo T4. (e) Morfotipo T5. (f) Morfotipo T6. (g) Morfotipo T7. Aumento 1000 x. 29
FIGURA 8 - EXAME COLIMTRICO DAS AMOSTRAS DE GUA DE DESCARTE
DOS
DESTILADORES
DE
LABORATRIOS
DO
SETOR
DE
CINCIAS
BIOLGICAS UFPR .............................................................................................. 30

FIGURA 9
FREQUNCIA DE
GNEROS
FNGICOS
FILAMENTOSOS
ISOLADOS DAS AMOSTRAS DE GUA DE DESCARTE DOS DESTILADORES DE

LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICA - UFPR.......................... 36
FIGURA 10 (1) Aspergillus sp. 1, (2) Aspergillus sp. 2, (3) Penicillium sp., (4)
Aspergillus sp. 3 e (5) Phoma sp. EM MEIO BDA, CRESCIDO POR 7 DIAS A 28C.
(a) Verso. (b) Reverso. (c) Micromorfologia. Aumento 400 x. .................................... 39
LISTA DE TABELAS
TABELA 1 - PADRO MICROBIOLGICO DE POTABILIDADE DA GUA PARA

CONSUMO HUMANO ................................................................................................. 9
TABELA 2 - CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS (UFC/mL) EM
GUAS DESCARTADAS PELOS QUATRO DESTILADORES ANALISADOS DE
LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR ...................... 20
TABELA
MEDIAS
DE
BACTRIAS
HETEROTRFICAS
(UFC/mL)
ENCONTRADAS NAS QUATRO AMOSTRAS ANALISADAS DE DESTILADORES

DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR ................ 20
TABELA 4 - DADOS TRANSFORMADOS DE CONTAGEM DE BACTRIAS
HETEROTRFICAS (UFC/mL) ISOLADAS DE GUAS DESCARTADAS PELOS
QUATRO DESTILADORES ANALISADOS DE LABORATRIOS DO SETOR DE
CINCIAS BIOLGICAS UFPR............................................................................. 21
TABELA 5 - ANLISE DE VARINCIA DA CONTAGEM DE BACTRIAS
HETEROTRFICAS ISOLADAS DE GUA DE DESCARTE DE DESTILADORES
DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, A PARTIR
DE DADOS TRANSFORMADOS COM LOG(X+2) ................................................... 21
TABELA 6 - MDIAS DE CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS NOS
DIFERENTES DESTILADORES ............................................................................... 22
TABELA 7 - MORFOTIPOS BACTERIANOS ENCONTRADOS EM AMOSTRAS DE
CADA DESTILADOR ANALISADO (UFC/mL). Continua. ......................................... 24
TABELA 8 - EXAME COLIMTRICO DE GUAS DE DESCARTE DOS
DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR ........................................................................................................................ 30
TABELA 9 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE
BIOLGICAS UFPR .............................................................................................. 34
TABELA 10 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE
BIOLGICAS UFPR, DADOS TRANSFORMADOS COM LOG(X+2) ................... 34
TABELA 11
- ANLISE
DE
VARINCIA DA CONTAGEM
DE
FUNGOS
FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE DE DESTILADORES DE
LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, A PARTIR DE

DADOS TRANSFORMADOS COM LOG(X+2) ......................................................... 34
TABELA 12 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUAS
DESCARTADAS PELOS QUATRO DESTILADORES ANALISADOS. Continua. ..... 37
LISTA DE QUADROS
QUADRO 1 MORFOTIPOS BACTERIANOS ISOLADOS DE GUA DE

DESCARTE DE DESTILADORES DE QUATRO LABORATRIOS DO SETOR DE
CINCIAS BIOLGICAS UFPR............................................................................. 23
QUADRO 2 - BACTRIAS HETEROTRFICAS ISOLADAS DE DESTILADORES
DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS, CARACTERIZADAS
POR COLORAO DE GRAM ................................................................................. 28
QUADRO 3 - MORFOTIPOS DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA
DE DESCARTE DE DESTILADORES DE QUATRO LABORATRIOS DO SETOR
DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR CRESCIDOS POR 7 DIAS ........................... 35
QUADRO 4 - GNEROS DOS MORFOTIPOS DE FUNGOS FILAMENTOSOS
ENCONTRADOS
NAS
GUAS
DE
DESCARTE
DOS
DESTILADORES
ANALISADOS ........................................................................................................... 38
SUMRIO
INTRODUO .................................................................................................... 1
2 OBJETIVOS ............................................................................................................ 3
2.1 OBJETIVO GERAL ................................................................................................ 3
2.2
3
OBJETIVOS ESPECFICOS ......................................................................... 3

REVISO BIBLIOGRFICA .............................................................................. 4
3.1
IMPORTNCIA DA GUA E SUA DISTRIBUIO NO PLANETA E NO
BRASIL.........................................................................................................................4
3.2
ESCASSEZ DA GUA.................................................................................. 5
3.3
USO DE GUA DESTILADA EM LABORATRIOS ...................................... 6
3.4
GUA DE REUSO ........................................................................................ 7
3.5
IMPORTNCIA DO REUSO E CONSERVAO DA GUA ......................... 8
3.6
QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DE REUSO .............................. 8
3.6.1 COLIMETRIA .......................................................................................................... 9

3.6.2
BACTRIAS HETEROTRFICAS......................................................................... 10
3.6.3
FUNGOS ENCONTRADOS NA GUA ................................................................... 10
4
4.1
MATERIAL E MTODOS ................................................................................. 14

ESTIMATIVA DO CONSUMO DE GUA POTVEL NA FABRICAO DE
GUA DESTILADA.................................................................................................... 14
4.2 COLETAS ............................................................................................................ 14
4.3 CONTAGEM, ISOLAMENTO E CARACTERIZAO DE MICRO-ORGANISMOS
DAS GUAS DE DESCARTE DE DESTILADORES.................................................. 15
4.3.1 ISOLAMENTO DE BACTRIAS HETEROTRFICAS E FUNGOS ....................................... 15
4.3.2 CARACTERIZAO DE BACTRIAS HETEROTRFICAS .............................................. 16
4.3.3 EXAME COLIMTRICO DA GUA ............................................................................. 16
4.3.4 CARACTERIZAO E IDENTIFICAO DOS FUNGOS FILAMENTOSOS ........................... 17
4.4 ANLISE ESTATSTICA ...................................................................................... 17
5 RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 18
5.1 ESTIMATIVA DO CONSUMO DE GUA POTVEL NA FABRICAO DE GUA
DESTILADA .............................................................................................................. 18
DAS GUAS DE DESCARTE DE DESTILADORES.................................................. 20

5.2.1 CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS ........................................................ 20
5.2.2 CARACTERIZAO
DE
BACTRIAS
HETEROTRFICAS
POR
MACROMORFOLOGIA
COLONIAL .................................................................................................................... 22
5.2.3 CARACTERIZAO DE BACTRIAS HETEROTRFICAS POR MICROMORFOLOGIA .......... 28

5.2.4 EXAME COLIMTRICO DA GUA ............................................................................. 30
5.2.4 CONTAGEM E ISOLAMENTO DE FUNGOS FILAMENTOSOS .......................................... 33
5.2.5 CARACTERIZAO
DOS
FUNGOS
FILAMENTOSOS
POR
MACROMORFOLOGIA
MICROMORFOLOGIA ...................................................................................................... 35
5.3 SUGESTES DE REUSO DA GUA DESCARTADA POR DESTILADORES DE

LABORATRIOS DE LABORATRIOS DA UFPR .................................................... 41
REFERNCIAS ........................................................................................................ 43
1 INTRODUO
A gua um recurso natural renovvel em quantidade, mas no em

qualidade. um elemento de fundamental importncia para os aspectos vitais,
sociais e econmicos. Alm de ser um componente bioqumico essencial para a
sobrevivncia de todos os seres vivos, indispensvel para a sociedade, pois o uso
da gua est interligado com todos os aspectos do desenvolvimento da civilizao
humana.
Estima-se que o Brasil concentre entre 12% e 16% do volume total de
recursos hdricos do planeta (CLARKE E KING, 2005). No entanto, a distribuio
desta gua no igualitria em todas as regies do pas.
A preocupao quanto gua no est somente relacionada sua
escassez, mas tambm ao aumento de sua demanda devido ao crescimento
demogrfico e ao contnuo desenvolvimento das atividades industriais. Assim sendo,
seu uso racional em todos os setores se torna cada vez mais necessrio.
Em laboratrios, faz-se necessrio o uso de gua destilada, proveniente de
um processo de destilao que torna a gua do sistema convencional de distribuio
em uma substncia pura. Um dos equipamentos que possui maior consumo de gua
dentro dos laboratrios o destilador de gua. Esse equipamento necessita de um
grande volume de gua potvel para o processo de destilao, sendo que apenas
uma pequena parcela deste volume (em torno de 4%) transformada em gua
destilada, e o restante (aproximadamente 96%) totalmente desprezado, utilizado
apenas para o resfriamento (NUNES et al., 2006). Estima-se que, para produzir 1
litro de gua destilada, em mdia 21 litros de gua potvel so desperdiados
(MARSARO; GUIMARES, 2007).
A necessidade de usar a gua de forma sustentvel em laboratrios,
buscando a minimizao dos impactos desse setor no meio ambiente, torna-se
evidente. Para tanto, necessrio o desenvolvimento e a implantao de
tecnologias e medidas que visem o reuso e aproveitamento de gua descartada dos
destiladores para fins no potveis.
A reutilizao da gua pode propiciar uma flexibilidade no atendimento das
demandas de curto prazo, assegurando, assim, um aumento no suprimento de longo
prazo (MARSARO; GUIMARES, 2007).
Este trabalho teve como objetivos a avaliao da qualidade microbiolgica

da gua descartada por destiladores de diferentes laboratrios do Setor de Cincias
Biolgicas, da UFPR, bem como propor alternativas para reuso desta gua,
buscando, assim, uma maior preservao deste recurso natural.
2 OBJETIVOS
2.1 OBJETIVO GERAL
O objetivo geral desse trabalho avaliar a qualidade microbiolgica da gua

descartada pelos equipamentos destiladores de quatro laboratrios do Setor de
Cincias Biolgicas da Universidade Federal do Paran e propor alternativas para
reuso.
2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS
1.
Estimar o consumo mdio de gua potvel na fabricao de gua destilada,
usando como modelo o destilador recm-adquirido do Laboratrio de Microbiologia e

Biologia Molecular LabMicro - do Departamento de Patologia Bsica da
Universidade Federal do Paran e relacionar a quantidade de gua descartada no
processo de destilao e a quantidade de gua destilada produzida.
2.
Realizar contagem de bactrias heterotrficas isoladas da gua de descarte
dos destiladores, e caracteriz-las morfologicamente e por meio de colorao de

Gram.
3.
Avaliar a qualidade microbiolgica da gua descartada, por meio de exame
colimtrico.
4.
Realizar contagem de fungos filamentosos presentes na gua descartada e
caracterizar os isolados por macro e micromorfologia, visando identificao ao

nvel de gnero.
5.
Verificar
possveis
reutilizaes
da
gua
descartada,
levando
considerao os resultados das anlises biolgicas das amostras de gua.
em
3 REVISO BIBLIOGRFICA
3.1
IMPORTNCIA DA GUA E SUA DISTRIBUIO NO PLANETA E NO
BRASIL
A gua um recurso natural de importncia fundamental em todos os
aspectos vitais, sociais e econmicos do nosso planeta.
Conforme Rebouas et al. (2006), 97,5% do volume total de gua na Terra
formam os oceanos e mares e somente 2,5% so de gua doce, conforme a figura
1. No entanto, 68,9% destas guas doces esto congelados nas calotas polares do
rtico, Antrtida e nas regies montanhosas (TOMAZ, 2003). Do restante, 29, 9%
constituem as guas subterrneas doces; 0,9% representam a umidade dos solos e
as guas dos pntanos, e aproximadamente 0,3% correspondem gua doce
constituinte em rios e lagos (REBOUAS et al., 2006).
FIGURA 1 - RELAO ENTRE O VOLUME DE GUA SALGADA E GUA DOCE NO MUNDO

FONTE: O autor (2011). Adaptado de Rebouas et al. (2006).
O Brasil um pas privilegiado no cenrio mundial, pois possui uma

produo hdrica que representa 53% da produo de gua doce do continente sul
americano e 12% do total mundial (REBOUAS et al., 2006). No entanto, esse
recurso no distribudo de forma homognea em todo o pas e encontra-se
ameaado por fatores socioeconmicos diversos(CLARK; KING, 2005). Cerca de
70% desse total est na Bacia Amaznica onde a densidade populacional a menor
do pas. Por outro lado, a regio mais rida do Brasil, o nordeste, onde vivem cerca
de 28% da populao, possui somente 5% da gua doce (CASTRO; SCARIOT,
2005).
3.2
ESCASSEZ DA GUA
Atualmente, o problema da escassez de gua tem ganhado bastante

ateno e tem sido agravado pela falta do uso sustentvel e do manejo adequado da
gua.
Em mdia 500 milhes de pessoas vivem em pases com escassez crnica
de gua e outras 2,4 bilhes vivem em pases onde o sistema hdrico est
ameaado (CLARKE; KING, 2005).
Conforme Bazzarella (2005), o problema da escassez de gua oriundo da
m distribuio e m gesto deste recurso. A figura 1 mostra como as reservas de
gua doce so mal distribudas na superfcie do planeta.
FIGURA 2 - DISTRIBUIO DE GUA NO MUNDO

FONTE: Bazzarella (2005)
Embora o Brasil esteja em primeiro lugar em disponibilidade hdrica em rios

do mundo, a poluio e o uso inadequado comprometem esse recurso em vrias
regies do Pas (COMPANHIA DE TECNOLOGIA DE SANEAMENTO AMBIENTAL,
2008). Segundo Castro e Scariot (2005), a alta densidade populacional, a poluio e

a agricultura, aliadas falsa viso de que a gua um recurso infinito, j
provocaram o aumento na escassez de gua de melhor qualidade para as regies
Sul e Sudeste do pas, onde vivem 60% da populao.
Tais fatos deixam clara a necessidade da preservao da gua de melhor
qualidade para o consumo humano. Nos laboratrios, onde h o uso de gua
destilada, possvel fazer um reaproveitamento da gua descartada pelos
equipamentos de destilao em finalidades no potveis, evitando assim o uso de
gua potvel em atividades que no dependem de gua com to boa qualidade.
3.3
USO DE GUA DESTILADA EM LABORATRIOS
Nos processos laboratoriais, quaisquer impurezas e sais dissolvidos contidos

na gua devem ser eliminados para que os resultados de experimentos no sejam
prejudicados pela presena das mesmas. Sendo assim, a destilao da gua,
processo no qual as impurezas so separadas, necessria. O aparelho onde este
processo ocorre denomina-se destilador (Figura 2).
FIGURA 3 EQUIPAMENTO DE DESTILADOR DE GUA

FONTE: Marsaro e Guimares (2007)
Este equipamento necessita de um grande volume de gua para o processo

de destilao, sendo que uma pequena parte se transforma em gua destilada e o
restante utilizado para resfriamento (NUNES et al., 2006). No processo de
destilao, a gua vinda da rede de abastecimento entra no destilador atravs de
uma mangueira e aquecida at seu ponto de ebulio (100C), at que evapore. O
vapor da gua vai para um condensador onde se resfria e se condensa,
transformando-se em gua lquida, sendo esta a gua destilada. A parte utilizada no
processo de resfriamento normalmente descartada diretamente para a rede
coletora de esgoto, sem que haja qualquer reaproveitamento.
A destilao tem como base de funcionamento as temperaturas de ebulio
de cada substncia presente na gua. Todas elas diferem na temperatura de
ebulio podendo, assim, ser separadas uma a uma (MARSARO; GUIMARES,
2007).
3.4
GUA DE REUSO
gua de reuso aquela proveniente do tratamento de algum efluente, para

posterior reutilizao em uma determinada finalidade, que pode ser interna ao
prprio empreendimento, ou outra externa, para uma finalidade distinta da primeira
(SAUTCHK et. al, 2005). Tem-se como exemplo a prtica de reuso de efluentes
urbanos tratados para fins agrcolas.
Conforme o Manual de Orientaes para o Setor Industrial, o reuso de gua
traz benefcios sociais e ambientais, tais como:
Reduo do lanamento de efluentes industriais em cursos de gua,
possibilitando melhorar a qualidade das guas.
Reduo
da
captao
de
guas
superficiais
subterrneas,
possibilitando uma situao ecolgica mais equilibrada.
Aumento da disponibilidade de gua para usos mais exigentes, como
abastecimento pblico, por exemplo.
Mudanas nos padres de produo e consumo.
Reduo dos custos de produo.
Habilitao para receber incentivos e coeficientes redutores dos fatores
da cobrana pelo uso da gua.

Para que seja possvel o reaproveitamento da gua de resfriamento dos
destiladores pode-se construir um sistema de armazenagem de gua com
tubulaes que levem a gua que seria descartada at um reservatrio. Em seguida,
pode-se fazer o reuso desta gua em atividades que no exijam o uso de gua
potvel proveniente da rede pblica de abastecimento. Porm, necessrio um
controle de sua qualidade para verificao da necessidade de tratamento especfico.
Alguns possveis reusos de gua so: rega de jardins e hortas; lavagem de roupa;
lavagem de veculos; lavagem de vidros, caladas e pisos (NUNES et al., 2006).
3.5
IMPORTNCIA DO REUSO E CONSERVAO DA GUA
O crescimento demogrfico com consequente crescimento na demanda de

gua, aliado a outros motivos, como a limitao de reservas de gua doce no
planeta, e a variedade da distribuio de recursos hdricos, vm exigindo ateno
maior no que diz respeito conservao da gua. Desta forma, as prticas
conservacionistas como o uso eficiente e o reuso da gua, constituem uma maneira
importante de se poder preservar este recurso natural.
Alm da escassez quantitativa da gua, o que constitui fator limitante ao
desenvolvimento, existe tambm a escassez qualitativa proveniente da grande
poluio, que engloba problemas muito mais srios sade publica, economia e
ao ambiente em geral (REBOUAS et al., 2006). Esses fatores corroboram com a
importncia da conservao da gua.
3.6
QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DE REUSO
As caractersticas de qualidade das guas derivam dos ambientes naturais e

antrpicos onde se originam, circulam, percolam ou ficam estocadas (REBOUAS et
al., 2006). Na avaliao da qualidade de uma gua, considera-se a composio de
uma amostra, cujos constituintes so referidos em termos de caractersticas fsicas,

microbiolgicas e qumicas, a depender do objetivo a ser alcanado.
Atualmente o desenvolvimento econmico e social intensificou o uso de
insumos qumicos e o lanamento de efluentes, trazendo problemas de escassez
qualitativa de gua para o consumo humano (SHUBO, 2003).
3.6.1 Colimetria
Segundo a Portaria 518 (2004) da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria

(ANVISA), que dispe sobre a qualidade da gua para consumo humano e seu
padro de potabilidade, a gua potvel deve estar em conformidade com o padro
microbiolgico, de acordo com a Tabela 1.
TABELA 1 - PADRO MICROBIOLGICO DE POTABILIDADE DA GUA PARA CONSUMO

HUMANO
(1)
PARMETRO
VMP
(2)
gua para consumo humano
Escherichia coli ou coliformes termotolerantes
(3)
Ausncia em
100ml
Coliformes totais
Ausncia em
100ml
Bactrias Heterotrficas
500 UFC/mL
FONTE: Portaria 518 da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (2004)

NOTAS:
(1) Valor Mximo Permitido.
(2) gua para consumo humano em toda e qualquer situao, incluindo fontes individuais como
poos, minas, nascentes, dentre outras.
(3) a deteco de Escherichia coli deve ser preferencialmente adotada.
De acordo com as definies contidas na Portaria 518 (2004) da Agncia

Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA), coliformes totais so bacilos gramnegativos, aerbios ou anaerbios facultativos, no formadores de esporos, que
fermentam a lactose com produo de cido, gs e aldedo a 35,0 0,5oC em 24-48
horas, e que podem apresentar atividade da enzima -galactosidase. A maioria das
bactrias do grupo coliforme pertence aos gneros Escherichia, Citrobacter,
10
Klebsiella e Enterobacter, embora vrios outros gneros e espcies pertenam ao

grupo. Coliformes termotolerantes fazem parte de um subgrupo das bactrias do
grupo coliforme que fermentam a lactose a 44,5 0,2oC em 24 horas; tendo como
principal representante a Escherichia coli, de origem exclusivamente fecal. A E. coli
uma bactria do grupo coliforme que fermenta a lactose e manitol, com produo de
cido e gs a 44,5 0,2oC em 24 horas, produz indol a partir do triptofano, oxidase
negativa, no hidrolisa a uria e apresenta atividade das enzimas galactosidase e
glucoronidase, sendo considerada o mais especfico indicador de contaminao
fecal recente e de eventual presena de organismos patognicos (PORTARIA 518,
2004).
3.6.2 Bactrias heterotrficas
Em relao s bactrias heterotrficas, a Portaria 518 (2004) da Agncia

Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) as define como um grupo capaz de
produzir unidades formadoras de colnias (UFC), na presena de compostos
orgnicos contidos em meio de cultura apropriado, sob condies pr-estabelecidas
de incubao: 35,0, 0,5oC por 48 horas. A contagem de bactrias heterotrficas em
uma amostra de gua no pode exceder 500 UFC/mL (PORTARIA 518, 2004).
A contagem de bactrias heterotrficas fornece informaes sobre a
qualidade bacteriolgica da gua de uma forma ampla. Apesar da maioria das
bactrias heterotrficas no ser patognica, estas podem representar riscos a

sade, como tambm deteriorar a qualidade da gua, provocando o
aparecimento de odores e sabores desagradveis (DOMINGUES et al., 2007).
A Portaria 518 (2004) limita a contagem de bactrias heterotrficas na
gua potvel em 500 UFC/mL.
3.6.3 Fungos encontrados na gua
Os fungos so micro-organismos eucariticos, aclorofilados e que se

reproduzem por esporos assexuais ou sexuais (LACAZ et al., 1998). Os fungos so
11
caracterizados
morfologicamente
como
leveduriformes
(unicelulares)
ou
filamentosos (VIEGAS, 2010). Os filamentos formam uma rede conhecida como

miclio que caracteriza o seu aspecto macroscpico (MIDGLEY et al., 1998).
Apresentam nutrio heterotrfica e podem viver como saprobiotas,
parasitas ou comensais em uma variedade de substratos orgnicos e em uma ampla
variao de habitats, sugerindo sua distribuio ubiquitria na natureza (MIDGLEY
et al., 1998). Em funo da variabilidade enzimtica possuda pelos fungos, estes
conseguem habitar os mais variados substratos (TEPARELLO, 2010).
Os fungos dispersos pelo ar atmosfrico so denominados de anemfilos e
os mais frequentes no Brasil pertencem aos gneros: Cladosporium sp., Aspergillus
sp.,
Fusarium sp.,
Penicillium sp.,
Cephalosporium sp.,
Rhodotorula
sp.,
Aureobasidium sp., Candida sp., Curvularia sp., Rhizopus sp., Helminthosporium sp.
e Trichoderma sp. (TRABULSI et al., 2008).
Segundo Trabulsi et al. (2008), os fungos anemfilos so frequentemente
encontrados como componentes da microbiota transitria do homem e animais
domsticos, como contaminantes de alimentos, deteriorantes de acervos e madeiras
e em gua doce e salgada.
Os fungos possuem uma alta capacidade de degradao de substncias
complexas, tais como corantes de indstrias txteis (SOUZA; ROSADO, 2009). So
utilizados em processos industriais de fabricao de po, cervejas, vinhos e queijos,
sendo tambm utilizados na produo comercial de cidos orgnicos, frmacos e
antibiticos, como por exemplo, a penicilina (VIEGAS, 2010).
Alguns trabalhos demonstram a existncia de fungos na gua. Varo et al.
(2007) em um estudo de gua utilizada em uma unidade de hemodilise em So
Paulo, verificaram a presena de vrios fungos, com prevalncia de Trichoderma sp,
Cladosporium sp, Aspergillus sp e Fusarium sp. Figel (2011) tambm encontrou
fungos nos sistemas de gua de dilise em Curitiba, Paran. Das amostras
analisadas, 66% apresentaram fungos, sendo estes dos gneros Acremonium spp.,
Aspergillus spp., Fusarium spp., Penicillium spp. e Trichoderma spp. Em estudo
sobre gua potvel da rede de abastecimento pblico e dentro do hospital na cidade
de Thessalonini, Grcia, foram isolados fungos, cujos gneros prevalentes foram
Aspergillus e Penicillium (ARVANITIDOU et al., 1999 apud FIGEL, 2011).
12
Sessegolo et al. (2011) avaliaram amostras de gua potvel e de esgoto

domstico, sendo que 18,7% estavam contaminadas com o gnero Penicillium,
18,7% apresentavam leveduras e 6,2% continham o gnero Aspergillus. J o esgoto
domstico teve 50% do material positivo para leveduras, 12,5 % para Penicillium sp.,
e 6,2% para Aspergillus sp e Geotrichum sp.
Existem vrias maneiras de fungos causarem doenas no homem. Essas
incluem a invaso dos tecidos pelos patgenos e pela resposta alrgica no
hospedeiro (MIDGLEY et al., 1998). As doenas ocorrem aps a invaso tecidual e,
segundo Midgley et al. (1998), so classificadas como micoses superficiais,
subcutneas e sistmicas, e a penetrao do fungo pode ocorrer pelas seguintes
maneiras: diretamente pela epiderme; por implantao transcutnea atravs de um
trauma superficial, por inalao ou a partir de um foco profundo de infeco
preexistente no organismo.
Fungos do gnero Aspergillus so conhecidos como patgenos humanos
que podem causar uma grande variedade de processos patolgicos dependendo do
fator predisponente, sendo as principais espcies envolvidas A. fumigatus, A. flavus
e A. niger (MIDGLEY et al., 1998). Espcies de Aspergillus so componentes
comuns da microbiota de disperso area, portanto, a exposio a esses fungos
generalizada (MIDGLEY et al., 1998).
O gnero Aspergillus constitudo por 185 espcies, sendo a principal
patologia relacionada a pacientes imunodeficientes, a aspergilose invasiva, que
uma infeco area, adquirida por inalao, porm estudos tm sugerido que a gua
seja fonte de infeco por estes fungos (VARO et al., 2007).
Como exemplo de infeces exgenas tem-se as dermatofitoses, as
micoses subcutneas e a aspergilose (MIDGLEY et al., 1998). A aspergilose
causada por fungos do gnero Aspergillus e comum em pacientes com doena
pulmonar crnica como enfisema ou sinusite crnica (MIDGLEY et al., 1998).
A aspergilose pulmonar, na sua forma aguda, causa febre, mal estar,
dispnia
e disseminao hematognica (TAPARELLO, 2010). Em indivduos
imunodeprimidos, a evoluo rpida, com leses necrticas no crebro e
meningites. Aspergilose cutnea apresenta leses constitudas por ppulas, pstulas
e ulceraes (LACAZ; PORTO; MARTINS,1991).
13
Durante o processo de degradao dos nutrientes, os fungos liberam

micotoxinas que causam irritao da pele e mucosas, nuseas, cefalias e efeitos
cancergenos, dependendo do tipo, natureza e contato com o fungo (VIEGAS, 2010).
As micotoxinas de Aspergillus sp. so altamente txicas e carcinognicas para o
homem e outros animais (SESSEGOLO et al., 2011).
Conforme Viegas (2010), ao nvel da pele, a micose por fungo s
desencadeada se estiverem presentes condies suficientes para que ela exista,
pois depende de variveis ligadas ao agente, ao hospedeiro e ao ambiente.
Normalmente
ocorrem
infeces
em
indivduos
que
esto
debilitados,
imunocomprometidos ou que tem dispositivos protsicos implantados ou cateteres

vasculares (VIEGAS, 2010).
Fungos do gnero Penicillium sp. so espcies saprfitas, amplamente
difundidas na natureza, normalmente contaminantes de alimentos e produtores de
micotoxinas. (VIDOTTO, 2004). Fungos como o Penicilium so importantes
decompositores que reciclam matria orgnica no solo (TORTORA; FUNKE; CASE,
2005). Existem, aproximadamente, 225 espcies de Penicillium. (TAPARELLO,
2010). Por vezes, esses fungos esto associados a infeces pulmonares,
otomicoses, queratites, endoftalmites e infeces do trato urinrio (MARTINS;
MELO; HEINS-VACCARI, 2005).
Segundo Richardson e Warnock (1993), os esporos de Penicillium podem
ser encontrados em todos os ambientes espalhados pelo ar, portanto apresentando
uma grande distribuio. Fungos do gnero Penicillium so frequentemente isolados
em laboratrios de micologia (SIDRIM; MOREIRA, 1999).
Em indivduos debilitados, a inalao de esporos de Peniciliium pode
desencadear uma patologia conhecida como penicilose, caracterizada por uma
doena pulmonar, que pode se espalhar pelos vasos sanguneos vizinhos,
disseminando-se pelo liquido cefalorraquidiano (LCR), rins e endocrdio, sendo esta
forma disseminada geralmente fatal. (KERN; BLEVINS, 1999)
14
4 MATERIAL E MTODOS
4.1
ESTIMATIVA DO CONSUMO DE GUA POTVEL NA FABRICAO DE
GUA DESTILADA
O consumo mdio de gua potvel na fabricao de gua destilada foi

avaliado usando como modelo o destilador recm-adquirido do Laboratrio de
Microbiologia e Biologia Molecular LabMicro - do Departamento de Patologia
Bsica da Universidade Federal do Paran. Este destilador regulado de forma que
a vazo de gua descartada seja de 4 litros por minuto. A regulagem dessa vazo
feita atravs de um cronmetro e de um frasco Erlenmeyer de 4 litros, at que seja
atingida a vazo pretendida. Sabendo-se disso, calculou-se a quantidade de gua
consumida na fabricao de 1 litro de gua destilada e fez-se uma relao entre o
consumo de gua descartada e a quantidade de gua destilada produzida. O clculo
envolveu uma regra de trs simples. Contabilizou-se o tempo obtido para que o
destilador fabrique 1 litro de gua destilada e ento multiplicou-se esse valor pela
vazo de gua descartada, obtendo-se o resultado da quantidade de gua potvel
descartada na produo de 1 litro de gua destilada.
4.2 COLETAS
Foram selecionados quatro destiladores para a anlise microbiolgica da

gua de descarte, localizados nos laboratrios de Neurobiologia, de Parasitologia
Molecular e de Microbiologia e Biologia Molecular, pertencentes ao Departamento de
Patologia Bsica e do Laboratrio de Gentica Molecular Humana, localizado no
departamento de Gentica da UFPR. As coletas foram feitas em frascos de vidro,
previamente esterilizados em autoclave.
As anlises microbiolgicas foram realizadas no laboratrio de Microbiologia
e Biologia Molecular LabMicro - do Departamento de Patologia Bsica da
Universidade Federal do Paran.
15
Todas as coletas foram realizadas na parte da manh, pois supe-se que

neste perodo haja um maior nmero de micro-organismos, j que o equipamento
manteve-se sem funcionamento durante todo o perodo noturno.
Todas as anlises foram realizadas com materiais autoclavados a 121oC a 1
atm, durante 40 minutos; a desinfeco das bancadas foi feita com lcool 70% e
meios de cultura foram autoclavados a 121oC a 1 atm, por 20 minutos.
Por fim, os resultados obtidos foram comparados com os valores previstos
na Portaria 518 (2004) da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) e com
a Resoluo do Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA) 357/2005.

DAS GUAS DE DESCARTE DE DESTILADORES
4.3.1 Isolamento de bactrias heterotrficas e fungos
Para o isolamento de bactrias e fungos, foi empregada a tcnica de

espalhamento em superfcie. O mtodo baseia-se na inoculao de 0,1 mL de gua
na superfcie do meio de cultura solidificado, contidos em placas de Petri, com
posterior espalhamento do inculo com ala de Drigalski (TORTORA; FUNKE;
CASE, 2005).
Os meios de cultura utilizados foram o gar Simples (5g Peptona DIFCO, 3g
extrato de levedura OXOID, 5g NaCl e 15g gar microbiolgico VETEC para 1000mL
de meio) para bactrias e o Batata Dextrose Agar BDA (200 gramas de batata, 50
gramas de dextrose BIOTEC e 15 gramas de gar gar VETEC, para 1000 mL de
meio) para fungos. Aps a coleta de gua descartada do destilador, semeou-se 0,1
mL da amostra de gua em cada placa de Petri. Aps a semeadura incubou-se as
placas invertidas em estufa a 28C, onde permanecer am por sete dias at o
crescimento, no caso de fungos e 48 horas no caso de bactrias. Aps essa etapa
realizou-se a contagem das bactrias e fungos nas placas e, posteriormente, foram
feitos os isolamentos dos diferentes morfotipos de bactrias e de fungos. O
isolamento foi feito em tubos inclinados com os respectivos meios de cultura para
16
fungos e bactrias. Posteriormente incubou-se os isolados em estufa a 28C,

durante 48 horas no caso das bactrias, e 7 dias no caso dos fungos.
4.3.2 Caracterizao de bactrias heterotrficas
As bactrias heterotrficas isoladas foram caracterizadas morfologicamente

atravs das caractersticas coloniais e da colorao de Gram, conforme Stighen
(2009), sendo classificadas em gram positivas e gram negativas.
4.3.3 Exame colimtrico da gua
O exame colimtrico da gua foi realizado pela tcnica dos Tubos Mltiplos
de acordo com o descrito em Standard Methods For The Examination of Water And
Wastewater (AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, 2005).
Inoculou-se as diluies de 10 mL, 1 mL e 0,1 mL em uma srie de cinco
tubos para cada diluio. Em seguida levou-se incubadora sob temperatura de
35C +- 0,5. Aps 24 horas examinou-se a turbidez d o meio e a formao de gs.
Como no houve produo de gs, esperou-se mais 24 horas e verificou-se
novamente a ocorrncia de gs nos tubos. Quando h formao de gs, anota-se o
nmero de tubos positivos e negativos. Os tubos com produo de gs devem ser
submetidos a um teste de confirmao, no qual so repicados para o caldo
lactosado bile verde brilhante a 2%, com incubao 35C 0,5 num perodo de 24
a 48 +- 3 horas. Verifica-se novamente a produo de gs para um resultado
positivo. Em seguida feito o ensaio diferencial para coliformes fecais, realizado a
partir dos tubos positivos do ensaio inicial. De cada tubo positivo, inoculado um tubo com meio
EC e incubado em banho-maria a 44,5C 0,2 durante 24 2 horas com agitao
constante. A p r o d u o d e g s d e n t r o d e 2 4 h o r a s c o n s i d e r a d a
p o s i t i v a p a r a a p r e s e n a d e coliformes fecais.
A densidade de coliformes expressa como NMP de coliformes por 100 mL, o qual
obtido atravs de tabelas, em que so dados limites de confiana de 95% para cada valor de
NMP calculado.
17
4.3.4 Caracterizao e identificao dos fungos filamentosos
A caracterizao dos isolados fngicos por macromorfologia foi realizada por

inspeo visual do verso e reverso das colnias.
A caracterizao micromorfolgica dos isolados foi feita por meio da tcnica
do microcultivo (KERN; BLEVINS, 1999). Foram utilizadas placas de Petri com duas
lminas cruzadas em seu interior e pedaos de algodo. Sobre uma das lminas foi
colocado um cubo de meio BDA com 1 cm2. Um fragmento da colnia retirada do
tubo de estoque foi inoculado nos 4 lados do cubo e uma lamnula foi colocada
sobre ele. O algodo foi umedecido com gua destilada esterilizada e o material
incubado a 28C. As lminas foram observadas period icamente em microscpio
tico e quando a maturao foi evidente, retirou-se a lamnula da lmina e colocouse sobre uma lmina limpa com uma gota de lactofenol azul de algodo ou lactofenol
de Amann e observou-se ao microscpio tico. As margens da lmina foram
vedadas com esmalte incolor para torn-las permanentes.
4.4 ANLISE ESTATSTICA

Os
experimentos
foram
realizados
em
Delineamento
Inteiramente
Casualisado (DIC), com 4 tratamentos (4 destiladores de 4 laboratrios distintos) e

10 repeties. Os dados de crescimento bacteriano e fngico, respectivamente,
obtidos por meio de contagem, foram transformados de acordo com a frmula
log(x+2). Posteriormente, os dados foram submetidos a uma anlise de varincia, ao
nvel de probabilidade p< 0,01.
Quando necessrio, as mdias foram comparadas por meio do Teste de
Tuckey.
18
5 RESULTADOS E DISCUSSO
5.1 ESTIMATIVA DO CONSUMO DE GUA POTVEL NA FABRICAO DE GUA

DESTILADA
O tempo para a fabricao de 1 litro de gua destilada a uma vazo de 4

litros/minuto no destilador do Laboratrio de Microbiologia e Biologia Molecular
LabMicro - do Departamento de Patologia Bsica da Universidade Federal do
Paran foi de 6,28 minutos. Sendo assim, a quantidade de gua potvel consumida
na fabricao de 1 litro de gua destilada foi de 25,12 litros de gua, conforme pode
ser observado do grfico 1.
FIGURA 4 - RELAO ENTRE GUA DESCARTADA E GUA DESTILADA NO EQUIPAMENTO DE

DESTILADOR DE GUA DO LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA E BIOLOGIA MOLECULAR DO
DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA BSICA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN
FONTE: O autor (2011)
Com o resultado da estimativa da quantidade gua descartada (25,12 litros)

para a fabricao de 1 litro de gua destilada, percebe-se a importncia em reutilizar
essa gua descartada, j que evidente que o desperdcio grande. No entanto,
esses valores variam conforme o destilador. Marsaro e Guimares (2007),
estimaram o desperdcio de gua em dois destiladores, o qual foi de 17 e 21 litros de
gua, respectivamente, na produo de 1 litro de gua destilada. Embora ocorram
19
variaes nas quantidades de gua descartada, verifica-se que, independente disso,

os valores so sempre altos.
Devido a essa grande perda de gua no processo de destilao
necessria a observao de mtodos que tornem os destiladores mais eficientes, de
modo que haja uma economia de gua. Conforme Silva e Gonalves (2004),
algumas alternativas evitam o desperdcio de gua durante a destilao, tais como a
correta regulagem da vazo da gua de entrada dos destiladores e a centralizao
da produo de gua destilada. Esta soluo exige uma logstica adequada de
entrega da gua aos pesquisadores, respeitando-se suas necessidades quanto
qualidade, volume e horrio de entrega da gua (SILVA; GONALVES, 2004). De
acordo com Marsaro e Guimares (2007), tambm importante controlar a
temperatura da gua de resfriamento, pois quanto menor esta temperatura, menor
vai ser a quantidade de gua destilada produzida e maior a quantidade de gua
descartada.
Outra opo a substituio de gua destilada por gua deionizada quando
possvel, pois no processo de deionizao de gua no h desperdcios.
O Laboratrio de Microbiologia e Biologia Molecular LabMicro - do
Departamento de Patologia Bsica da Universidade Federal do Paran utiliza em
mdia 15 litros de gua destilada por semana. Sendo assim so descartados em
torno de 376,8 litros de gua semanalmente. Ao ms esses nmeros contabilizam
em 1507,2 litros e ao ano em 18086,6 litros de gua totalmente desperdiados.
Caso houvesse um reaproveitamento de gua dentro da Universidade Federal do
Paran poderia haver uma economia de R$ 119,89 reais por ano no Laboratrio de
Microbiologia e Biologia Molecular, conforme a tabela de tarifas da Companhia de
Saneamento do Paran Sanepar, vlida a partir de maro de 2011. Vale ressaltar
que esses clculos referem-se a apenas um destilador. Levando em conta todos os
destiladores existentes em todos os laboratrios da Universidade e suas demandas,
essa economia em dinheiro torna-se relevante ao longo dos anos. Economia tal que
poderia ser investida em melhorias dentro da Instituio. Mais importante ainda que
a economia financeira a responsabilidade social alcanada pela Instituio de
Ensino, em vista ao problema de escassez de gua que vem ocorrendo no mundo.
20

DAS GUAS DE DESCARTE DE DESTILADORES
5.2.1 Contagem de bactrias heterotrficas
A partir das amostras obtidas dos 4 destiladores, foram realizadas contagens

de bactrias heterotrficas, conforme tabela 2. As mdias de 10 repeties da
contagem de bactrias encontradas nos quatro laboratrios analisados podem ser
vistas na tabela 3.
TABELA 2
CONTAGEM
DE
BACTRIAS
HETEROTRFICAS
(UFC/mL)
EM
GUAS
DESCARTADAS PELOS QUATRO DESTILADORES ANALISADOS DE LABORATRIOS DO

SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR
Repeties
Lab.
Neurobiologia
Lab.
Parasitologia
Molecular
Lab. Gentica
Molecular
Humana
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
968
1186
1314
1258
1533
1571
1433
1637
1437
1548
0
70
0
0
190
0
230
0
0
0
0
70
0
40
30
40
40
20
20
0
Lab.
Microbiologia e
Biologia
Molecular
0
0
400
390
0
0
20
480
0
0

NOTA: UFC Unidades Formadoras de Colnias
TABELA 3 - MEDIAS DE BACTRIAS HETEROTRFICAS (UFC/mL) ENCONTRADAS NAS

QUATRO AMOSTRAS ANALISADAS DE DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE
CINCIAS BIOLGICAS UFPR
Destilador
Laboratrio de Neurobiologia DPAT- UFPR
Laboratrio de Parasitologia Molecular - DPAT
Laboratrio de Microbiologia e Biologia Molecular - DPAT
Laboratrio de Gentica Molecular Humana - DGEN

NOTA: UFC Unidades Formadoras de Colnias
UFC/mL (mdia de
10 repeties)
1388,5
49
129
26
21
Os dados obtidos por contagem direta foram transformados de acordo com a

frmula log (x+2) (Tabela 4) de modo que uma anlise de varincia pudesse ser
realizada, conforme pode ser observado na tabela 5.
TABELA 4 - DADOS TRANSFORMADOS DE CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS

(UFC/mL)
ISOLADAS
DE
GUAS
DESCARTADAS
PELOS
QUATRO
DESTILADORES
ANALISADOS DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR
Repeties
Lab.
Neurobiologia
Lab.
Lab. Gentica
Parasitologia
Molecular
Molecular
Humana
1
2,9868
0,3010
2
3,0748
1,8573
3
3,1193
0,3010
4
3,1004
0,3010
5
3,1861
2,2833
6
3,1967
0,3010
7
3,1569
2,3655
8
3,2146
0,3010
9
3,1581
0,3010
10
3,1903
0,3010
NOTA: Dados transformados com a frmula log (x+2).
Lab. Microbiologia e
Biologia Molecular
0,3010
1,8573
0,3010
1,6232
1,5051
1,6232
1,6232
1,3424
1,3424
0,3010
0,3010
0,3010
2,6042
2,5933
0,3010
0,3010
1,3424
2,6830
0,3010
0,3010
TABELA 5 - ANLISE DE VARINCIA DA CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS

ISOLADAS DE GUA DE DESCARTE DE DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE
CINCIAS BIOLGICAS UFPR, A PARTIR DE DADOS TRANSFORMADOS COM LOG(X+2)
F.V
G.L.
S.Q.
Q.M.
Tratamentos
33.30866
11.10289
18.2265**
Resduo
36
21.92988
0.60916
Total
39
55.23854
** significativo ao nvel de 1% de probabilidade (p < .01)

F-crit. 4.3783 p<0.001
NOTA: F.V. fonte de variao; G.L. graus de liberdade; S.Q. soma dos quadrados; Q.M.
quadrados mdios
De acordo com o resultado obtido por meio da anlise de varincia, h

diferena entre os tratamentos, ou seja, a gua de descarte dos diferentes
destiladores apresenta diferentes contagens de bactrias heterotrficas, como pode
ser visto na tabela 5, em que o valor de F excede o valor tabelado (p<0,01).
22
A partir destas diferenas, foi realizado um teste de mdias (teste de Tukey),

conforme tabela 6.
TABELA 6 - MDIAS DE CONTAGEM DE BACTRIAS HETEROTRFICAS NOS DIFERENTES
DESTILADORES
Tratamento
Mdia
Teste de Tukey
3.13840
0.86131
1.18198
1.10289
Diferena mnima significativa DMS = 0.93953

Coeficiente de variao CV% = 49.67645
p<0,05%
NOTA: 1 Lab. Neurobiologia; 2 Lab. Parasitologia Molecular; 3 Lab. Gentica Molecular
Humana; 4 Lab. Microbiologia e Biologia Molecular. As mdias seguidas pela mesma letra no
diferem estatisticamente entre si. Foi aplicado o Teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.
Na tabela 6 possvel observar que a mdia de bactrias heterotrficas

isoladas da gua de descarte do destilador do Laboratrio de Neurobiologia
estatisticamente diferente da mdia obtida para os demais destiladores analisados.
Estes, por sua vez, apresentaram mdias de bactrias heterotrficas que no
diferem estatisticamente entre si.
O alto valor do coeficiente de variao (C.V.% =49,67) pode ser devido
grande diferena encontrada entre a mdia obtida no Laboratrio de Neurobiologia e
as mdias dos outros destiladores analisados.
5.2.2 Caracterizao de bactrias heterotrficas por macromorfologia colonial

As bactrias isoladas a partir da gua dos quatro destiladores foram classificadas em
seis morfotipos, conforme descrito no quadro 1. As frequncias dos morfotipos esto
representadas na figura 4.
23
Nmero de
Morfotipo
Descrio morfolgica
isolados
(UFC/mL)
T1
T2
T3
T4
T5
T6
T7
Cor laranja; Homogneas; Colnias circulares;

Borda lisa; Com viscosidade; Opaca; Dimetro 1 mm.
Cor amarela; Homogneas; Colnias circulares; Borda lisa;
Sem viscosidade; Opaca; Dimetro 1 mm.
Cor transparente; Homogneas; Colnias circulares; Borda
lisa; Sem viscosidade; Dimetro <1mm.
Cor transparentes; Homogneas; Colnias circulares; Borda
lisa; Sem viscosidade; Dimetro 2 ou 3 mm.
Cor branca; Homogneas; Colnias circulares; Borda lisa;
Sem viscosidade; Dimetro 2 mm.
Cor branca; Gelatinosas; Homogneas; Colnias circulares;
Mucosa; Borda ondulada; Com viscosidade; Dimetro 1cm.
Cor vermelha; Homogneas; Colnias circulares; Borda lisa;
Sem viscosidade; Dimetro 1 ou 2 mm.
2528
212
11012
379
16
480
QUADRO 1 MORFOTIPOS BACTERIANOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE DE

DESTILADORES DE QUATRO LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR
FIGURA 5 FREQUNCIA DE MORFOTIPOS DE BACTRIAS ISOLADOS NAS AMOSTRAS DE

GUA DE DESCARTE DOS DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS
BIOLGICAS UFPR
24
A quantidade de bactrias heterotrficas de cada morfotipo, em cada um dos

destiladores dos quatro laboratrios analisados pode ser vista na tabela 7.
TABELA 7 - MORFOTIPOS BACTERIANOS ENCONTRADOS EM AMOSTRAS DE CADA

DESTILADOR ANALISADO (UFC/mL). Continua.
Morfotipos\
Lab.
Lab.
Lab.
Destiladores
Neurobiologia
Parasitologia
Molecular
Gentica
Lab.
Microbiologia
Molecular
Humana
Biologia
Molecular
T1
T2
T3
T4
Placa 1
77
Placa 2
208
Placa 3
231
Placa 4
199
40
Placa 5
280
Placa 6
312
20
Placa 7
260
10
Placa 8
384
Placa 9
369
Placa 10
208
Placa 1
16
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
15
20
Placa 6
10
Placa 7
22
10
30
Placa 8
16
10
Placa 9
14
Placa 10
24
Placa 1
868
Placa 2
960
400
Placa 3
1054
Placa 4
1040
350
Placa 5
1216
Placa 6
1232
470
Placa 7
1132
Placa 8
1204
Placa 9
1014
Placa 10
1292
Placa 1
Placa 2
10
25
Morfotipos\
Lab.
Lab.
Lab.
Gentica
Lab.
Destiladores
Neurobiologia
Parasitologia
Molecular
Microbiologia
Molecular
Humana
Biologia
Molecular
T4
T5
T6
T7
Placa 3
18
Placa 4
Placa 5
18
190
Placa 6
20
Placa 7
19
Placa 8
26
Placa 9
40
Placa 10
24
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
Placa 2
70
70
Placa 3
Placa 4
40
Placa 5
30
Placa 6
30
Placa 7
220
20
Placa 8
10
Placa 9
20
Placa 10
26
A morfologia colonial das bactrias isoladas pode ser observada na figura 5.
FIGURA 6 MORFOLOGIA COLONIAL DE BACTRIAS ISOLADAS DE GUAS DE DESCARTE DE

DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, APS
o
CRESCIMENTO A 28 C POR 48 HORAS. (a) Morfotipo T1. (b) Morfotipo T2. (c) Morfotipo T3. (d)
Morfotipo T4. (e) Morfotipo T5. (f) Morfotipo T6. (g) Morfotipo T7.
27
Os resultados dos parmetros microbiolgicos foram comparados com os

valores mximos permitidos pela Portaria 518 (2004) da ANVISA, que estabelece
padres para a qualidade da gua para consumo humano e seu padro de
potabilidade. Verificou-se, em relao a bactrias heterotrficas, que das quatro
amostras analisadas, apenas a amostra referente ao Laboratrio de Neurobiologia
apresenta-se fora do padro estabelecido pela Portaria 518 (2004), que de no
mximo 500 UFC/mL. Conforme visto, foram encontradas tanto bactrias gram
negativas quanto bactrias gram positivas. Domigues et al. (2007) encontraram um
nmero excedente de bactrias heterotrficas, em relao ao estabelecido na

Portaria 518: de 43 amostras analisadas, 23 (53,5%) resultaram em mais de 500
UFC/mL, sendo estas guas provenientes fontes naturais, poos artesianos,
poos rasos e caixas dgua. Ritter e Tondo (2009) avaliando guas minerais em
Porto Alegre RS, encontraram bactrias heterotrficas em suas amostras, com
uma mdia acima do que a Portaria 518 (2004) da Anvisa recomenda. Em seu
trabalho, perceberam que uma higienizao com cloro nos tanques de
armazenamento de gua reduziu significativamente o nmero de bactrias
heterotrficas.
Verificou-se que os destiladores apresentaram diferenas em relao aos
morfotipos de bactrias, ou seja, algumas bactrias foram encontradas em uma
amostra e na outra no. Alm disso, averiguou-se que a gua descartada do
destilador do Laboratrio de Neurobiologia foi a que mais apresentou bactrias, tanto
em morfotipos presentes, quanto em quantidades dos mesmos. A mdia entre as
dez repeties para a gua descartada neste destilador foi de 1388,5 UFC/mL.
A presena de um grande nmero de bactrias heterotrficas na gua de
descarte do destilador do Laboratrio de Neurobiologia pode ser devida ao seu
tempo de uso e falta de manuteno adequada. Isso poderia acarretar inclusive,
num menor rendimento na produo de gua destilada e um maior desperdcio de
gua descartada durante o processo.
Marsaro e Guimarres (2007) verificaram que limpezas nos destiladores
trazem resultados quantitativos e qualitativos em relao gua de descarte, pois
constataram que, aps uma higienizao de um destilador analisado, houve um
aumento de eficincia de produo de gua destilada e uma melhora na qualidade
28
da gua. Porm, ressalta-se que Marsaro e Guimares averiguaram uma evoluo

da qualidade da gua em relao a parmetros fsico-qumicos.
5.2.3 Caracterizao de bactrias heterotrficas por micromorfologia
Um exemplar de cada morfotipo bacteriano foi selecionado para anlise da

morfologia microscpica, por meio da colorao de Gram, conforme figura 6 e
quadro 2.
Verificou-se que o morfotipo 3 foi o mais numeroso dentre os isolados. Em
seguida, o morfotipo isolado com maior frequncia foi o T1, composto por bacilos
gram positivos.
QUADRO
Morfotipo
Resultado
T1
Bacilos gram positivos
T2
Estafilococos gram positivos
T3
Bacilos gram negativos
T4
T5
T6
Bacilo gram positivo
T7
Bacilos gram positivos
BACTRIAS
HETEROTRFICAS
ISOLADAS
DE
DESTILADORES
DE
LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS, CARACTERIZADAS POR COLORAO

DE GRAM
29
FIGURA 7 MICROMORFOLOGIA DAS BACTRIAS ISOLADAS DA GUA DE REUSO DE

DESTILADORES DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, CORADAS POR MEIO DE
O
COLORAO DE GRAM, APS CRESCIMENTO A 28 C POR 48 HORAS. (a) Morfotipo T1. (b)
Morfotipo T2. (c) Morfotipo T3. (d) Morfotipo T4. (e) Morfotipo T5. (f) Morfotipo T6. (g) Morfotipo T7.
Aumento 1000 x.
30
5.2.4 Exame colimtrico da gua
As guas descartadas de cada destilador analisado foram submetidas ao

exame colimtrico (figura 7) e os resultados podem ser vistos na tabela 8.
FIGURA 8 - EXAME COLIMTRICO DAS AMOSTRAS DE GUA DE DESCARTE DOS

DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR
TABELA 8 - EXAME COLIMTRICO DE GUAS DE DESCARTE DOS DESTILADORES DE

LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS - UFPR
Parmetros
Coliformes
Totais
Destilador
Neurobiologia
Destilador
Parasitologia
Molecular
Destilador
Gentica
Destilador
Molecular
Microbiologia
Humana
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Ausentes
Coliformes
Termotolerantes
e E. Coli
Referncia
Portaria 518
(2004)
Ausncia
em 100mL
Ausncia
em 100mL
Em todas as anlises realizadas no houve formao de gs e, portanto, os

resultados foram negativos para a presena de coliformes totais, fecais e
termotolerantes, conforme a portaria 518 (2004) da ANVISA.
Segundo a Portaria 518 (2004) da ANVISA, a gua potvel para consumo
humano deve ter o seguinte padro microbiolgico: os coliformes termotolerantes e
31
totais devem estar ausentes nas amostras de 100 ml. Observando-se as anlises
colimtricas dos quatro destiladores, percebe- se que no h presena destas
bactrias nas respectivas amostras, estando de acordo com a determinao da
Portaria. Nunes et al. (2006) fizeram um estudo sobre o potencial de reuso de gua
em equipamentos de anlises clnicas. Em seus resultados tambm encontraram
ausncia de Coliformes Totais e Termotolerantes em seu trabalho, indicando uma
possvel reutilizao de gua em atividades como lavagem de pisos e de vidrarias,
irrigao de jardins, limpeza de ambientes, entre outras.
Coliformes totais e coliformes fecais foram encontrados em guas
bebedouros do Campus I da Faculdade de Medicina do Tringulo Mineiro, indicando
contaminao na gua (OLIVEIRA; TERRA, 2004).
A resoluo n 357 do Conselho Nacional do Meio Ambiente (2005) dispe
sobre a classificao dos corpos de gua e diretrizes ambientais para o seu
enquadramento, bem como estabelece as condies e padres de lanamento de
efluentes. A resoluo classifica as guas em guas doces, salobras e salinas. As
guas doces, salobras e salinas do Territrio Nacional so classificadas, segundo a
qualidade requerida para os seus usos preponderantes.
Segundo a resoluo 357 do CONAMA as guas doces so classificadas em:
Classe especial: guas destinadas ao abastecimento para consumo humano,
com desinfeco; a preservao do equilbrio natural das comunidades aquticas; e,

a preservao dos ambientes aquticos em unidades de conservao de proteo
integral.
Classe 1: guas que podem ser destinadas ao abastecimento para consumo
humano, apos tratamento simplificado; a proteo das comunidades aquticas; a

recreao de contato primrio, tais como natao, esqui aqutico e mergulho; a
irrigao de hortalias que so consumidas cruas e de frutas que se desenvolvam
rentes ao solo e que sejam ingeridas cruas sem remoo de pelcula; e a proteo
das comunidades aquticas em Terras Indgenas.
humano, apos tratamento convencional; a proteo das comunidades aquticas; a

recreao de contato primrio, tais como natao, esqui aqutico e mergulho; a
irrigao de hortalias, plantas frutferas e de parques, jardins, campos de esporte e
32
lazer, com os quais o publico possa vir a ter contato direto; e a aquicultura e a
atividade de pesca.
humano, apos tratamento convencional ou avanado; a irrigao de culturas

arbreas, cerealferas e forrageiras; a pesca amadora; a recreao de contato
secundrio; e a dessedentao de animais.
Classe 4: guas que podem ser destinadas: a navegao e a harmonia
paisagstica.
Esta resoluo exige que para guas de classe I para o uso de recreao de
contato primrio devero ser obedecidos os padres de qualidade de balneabilidade
em relao a coliformes termotolerantes, previstos na Resoluo CONAMA n 274,
de 2000, que subdivide as guas nas seguintes categorias:
Excelente: quando em 80% ou mais de um conjunto de amostras obtidas em
cada uma das cinco semanas anteriores, colhidas no mesmo local, houver, no
mximo, 250 coliformes fecais (termotolerantes) ou 200 Escherichia coli ou 25
enterococos por l00 mililitros;
Muito Boa: quando em 80% ou mais de um conjunto de amostras obtidas em
mximo, 500 coliformes fecais (termotolerantes) ou 400 Escherichia coli ou 50
enterococos por 100 mililitros;
Satisfatria: quando em 80% ou mais de um conjunto de amostras obtidas em
mximo 1.000 coliformes fecais (termotolerantes) ou 800 Escherichia coli ou 100
enterococos por 100 mililitros.
Segundo as indicaes de qualidade de gua que constam na resoluo
CONAMA n274 (2000), em relao a coliformes, a gu a de descarte dos
destiladores analisados neste estudo poderia ser considerada de qualidade
excelente, pois obteve-se resultado negativo para presena de coliformes totais e
termotolerantes em todas as amostras, estando, assim, abaixo dos valores previsto
na resoluo. Porm, necessrio que se faa uma anlise contnua para confirmar
e acompanhar a qualidade de gua de descarte destes destiladores por no mnimo
cinco semanas anteriores, conforme orienta a legislao.
33
De acordo com o Conama n357 (2005), a gua avaliad a pelo Conama

n274 (2000) como gua de excelente, muito boa ou s atisfatria qualidade, pode ser
empregada para uso de recreao de contato primrio. Os destinos desta gua
podem ser: ao abastecimento para consumo humano, aps tratamento simplificado;
a proteo das comunidades aquticas; a recreao de contato primrio, tais como
natao, esqui aqutico e mergulho; a irrigao de hortalias que so consumidas
cruas e de frutas que se desenvolvam rentes ao solo e que sejam ingeridas cruas
sem remoo de pelcula; e a proteo das comunidades aquticas em Terras
Indgenas.
Em virtude da presena de bactrias heterotrficas nas guas de descarte
de destiladores importante que haja uma desinfeco da mesma antes de seu
reuso, para assegurar que a sade das pessoas que tenham contato com esta gua
no seja comprometida. Os processos de desinfeco tm como objetivo a
destruio ou inativao de organismos patognicos, capazes de produzir doenas,
ou de outros organismos indesejveis (MEYER, 1994). Segundo Meyer (1994) a
desinfeco pode ser feita com a adio de cloro na gua.
5.2.4 Contagem e isolamento de fungos filamentosos
A contagem de fungos filamentosos em guas de descarte dos destiladores

analisados encontra-se descrita na tabela 9. Os dados foram transformados de
acordo com a frmula log (x+2) (tabela 10) e foi realizada uma anlise de varincia
(tabela 11).
34
TABELA 9 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE DE

DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR
Repeties
Lab.
Neurobiologia
Lab.
Lab. Gentica
Parasitologia
Molecular
Molecular
Humana
0
0
0
0
0
4
1
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
1
0
2
0
3
0
4
0
5
1
6
1
7
3
8
1
9
1
10
1
Biologia Molecular
1
0
0
0
0
3
0
0
0
0
TABELA 10 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE DE

DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, DADOS
TRANSFORMADOS COM LOG(X+2)
Repeties
Lab.
Neurobiologia
1
0,3010
2
0,3010
3
0,3010
4
0,3010
5
0,4771
6
0,4771
7
0,6990
8
0,4771
9
0,4771
10
0,4771
Lab.
Lab. Gentica
Parasitologia
Molecular
Molecular
Humana
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,7782
0,4771
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,4771
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
Biologia Molecular
0,4771
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
0,6990
0,3010
0,3010
0,3010
0,3010
TABELA 11 - ANLISE DE VARINCIA DA CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS

DE GUA DE DESCARTE DE DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS
BIOLGICAS UFPR, A PARTIR DE DADOS TRANSFORMADOS COM LOG(X+2)
F.V
G.L.
S.Q.
Q.M.
F
Tratamentos
3
0.06237
0.02079
1.3597 ns
Resduo
36
0.55042
0.01529
Total
39
0.61279
ns no significativo (p >= 0.05)
F-crit. 4.3783 p<0.001
F.V. fonte de variao; G.L. graus de liberdade; S.Q. soma dos quadrados; Q.M. quadrados
mdios
35
Os dados demonstrados na Tabela 11 indicam que no h diferena

estatstica entre a quantidade de fungos isolados da gua de descarte dos diferentes
destiladores analisados.
O nmero de fungos filamentosos isolados das amostras de gua de
descarte dos destiladores foi bem menos expressivo que o nmero de bactrias
presentes nas mesmas.
5.2.5
Caracterizao
dos
fungos
filamentosos
por
macromorfologia
micromorfologia
Foram encontrados cinco morfotipos, sendo estes codificados como TF1,

TF2, TF3, TF4 e TF5, os quais esto descritos no quadro 3.
Morfotipo
Descrio morfolgica
Nmero de isolados (UFC/mL)
Colnia verde no centro com halo branco ao redor,

TF1
veludosa, apiculada.
Reverso: Amarelo bem claro

Colnia verde, pulverulenta, apiculada.
TF2
Reverso: Amarelo
Colnia verde, pulverulenta, apiculada
TF3
Reverso: Amarelo
Colnia verde, pulverulenta, apiculada
TF4
Reverso: Amarelo
Colnia bege, glabrosa, cerebriforme
TF5
Reverso: Azul
QUADRO 3 - MORFOTIPOS DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE

DE DESTILADORES DE QUATRO LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS
UFPR CRESCIDOS POR 7 DIAS
As frequncias dos gneros fngicos isolados neste trabalho encontram-se

na figura 8.
36
FIGURA 9 - FREQUNCIA DE GNEROS FNGICOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DAS

AMOSTRAS DE GUA DE DESCARTE DOS DESTILADORES DE LABORATRIOS DO SETOR DE
CINCIAS BIOLGICA - UFPR
Segundo BAGAGLI et al. (2009), colnias arenosas ou pulverulentas so

aquelas que lembram areia de praia; colnias veludosas so aquelas que
apresentam o aspecto de tecido aveludado; colnias glabrosas so aquelas com
aspecto compacto, coriceo, podendo ter superfcie lisa ou irregular e sempre com
ausncia de filamento, ou seja, no algodonosa; colnias cerebriformes apresentam
topografia de altos e baixos, fazendo circunvolues que lembram as observadas no
crebro; e colnias apiculadas caracterizam-se pela presena de uma salincia na
parte central lembrando um pequeno cume.
As quantidades de cada morfotipo fngico filamentoso encontradas em

cada amostra analisadas esto relacionadas na tabela 12.
37
TABELA 12 - CONTAGEM DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUAS DESCARTADAS

PELOS QUATRO DESTILADORES ANALISADOS. Continua.
TF1
TF2
TF3
TF4
Morfotipos\
Lab.
Destiladores
Neurobiologia
Lab.
Parasitologia
Molecular
Lab.
Lab.
Gentica
Microbiologia
Molecular
e Biologia
Humana
Molecular
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
1
-
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
Placa 5
Placa 6
38
TF4
Morfotipos\
Lab.
Destiladores
Neurobiologia
Parasitologia
Molecular
Lab.
Lab.
Gentica
Microbiologia
Molecular
e Biologia
Humana
Molecular
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Placa 1
Placa 2
Placa 3
Placa 4
TF5
Lab.
Placa 5
Placa 6
Placa 7
Placa 8
Placa 9
Placa 10
Com base nas anlises morfolgicas e com o auxlio de literatura apropriada

(HOOG et al., 2004; KLICH; PITT, 1998; BARNETT; HUNTER, 1987) os isolados
foram identificados como Aspergillus sp. 1, Aspergillus sp. 2, Penicillium sp,
Aspergillus sp. 3 e Phoma sp., conforme o quadro 4.
Morfotipo
Gnero
TF1
Aspergillus sp. 1
TF2
Aspergillus sp. 2
TF3
Penicillium sp.
TF4
Aspergillus sp. 3
TF5
Phoma sp.
QUADRO 4 - GNEROS DOS MORFOTIPOS DE FUNGOS FILAMENTOSOS ENCONTRADOS NAS

GUAS DE DESCARTE DOS DESTILADORES ANALISADOS
Cada morfotipo foi analisado por meio de microcultivo, visando

identificao dos mesmos ao nvel de gnero. A macromorfologia colonial (verso e
reverso) e a micromorfologia dos isolados podem ser observadas na figura 9.
39
FIGURA 10 (1) Aspergillus sp. 1, (2) Aspergillus sp. 2, (3) Penicillium sp., (4) Aspergillus sp. 3 e (5)
Phoma sp. EM MEIO BDA, CRESCIDO POR 7 DIAS A 28C. (a) V erso. (b) Reverso. (c)
Micromorfologia. Aumento 400 x.
40
Os fungos filamentosos encontrados nas amostras de gua dos destiladores

analisados pertencem aos seguintes gneros: Aspergillus sp., Penicillium sp. e
Phoma sp. O gnero Aspergillus sp. foi o mais frequentemente isolado, seguido por
Penicillium sp. e Phoma sp. O gnero Aspergillus foi isolado por Varo et al. (2007)
em amostras de gua de hemodilise. Figel (2011) e Arvanitidou et al. (1999, apud
FIGEL, 2011) tambm encontraram em gua de hemodilise fungos do gnero
Aspergillus e Penicillium. Segundo Silva (2005), condies de alta umidade e
temperatura aumentam a probabilidade de desenvolvimento do Aspergillus e de
produo de aflatoxinas. Como a gua de descarte de destiladores possui uma
temperatura mais alta, pode ocorrer o favorecimento do crescimento de fungos do
gnero Aspergillus.
Sessegolo et al. (2011) encontraram fungos do gnero Aspergillus e
Penicillium em amostras de gua potvel e de esgoto domstico.
O gnero Aspergillus pode produzir aflatoxinas que, quando ingeridas junto a
alimentos, podem estar relacionadas ao desenvolvimento de cncer heptico
(CALDAS, 2002). Aspergillus tambm pode causar a aspergilose, uma micose
oportunista. Essa doena ocorre em indivduos que esto debilitados devido a
doenas nos pulmes ou cncer e que inalaram esporos de Aspergillus (TORTORA;
FUNKE; CASE, 2005).
As micoses, ao nvel da pele, ocasionadas por fungos filamentosos s se
desencadeiam se estiverem presentes condies suficientes para que elas existam.
As infeces ocorrem, normalmente, em indivduos que esto debilitados,
imunocomprometidos ou que tem dispositivos protsicos implantados ou cateteres
vasculares (VIEGAS, 2010). Segundo Tortora, Funke e Case (2005) esses fungos
oportunistas normalmente no infectam indivduos imunocompetentes.
Segundo Kern e Blevins (1999), a existncia de Penicillium e de seus
esporos pode gerar a doena pulmonar conhecida como penicilose em pessoas
debilitadas.
Portanto, ao reutilizar a gua de descarte de destiladores, onde ocorre o
contato primrio, importante que as pessoas que iro manusear esta gua no
estejam imunodeprimidas.
O gnero Phoma sp, encontrado na gua de descarte dos destiladores,
causador de uma doena que incide sobre folhas, frutos e ramos de cafeeiros,
41
produzindo leses necrticas que causam queda de folhas e frutos ou, quando
incidentes sobre os ramos, acarreta seca total dos tecidos (CHALFOUN et al., 2000).
No foram encontradas referncias que relatem que o gnero Phoma sp cause
alguma patologia em seres humanos.
Penicillium sp., Aspergillus sp. e Phoma sp. foram os gneros mais
frequentemente isolados em gros de feijo, no trabalho de Costa e Scussel (2006,
apud Silva, 2005).
5.3 SUGESTES DE REUSO DA GUA DESCARTADA POR DESTILADORES DE

LABORATRIOS DE LABORATRIOS DA UFPR
A ideia deste trabalho elaborar um sistema de reaproveitamento da gua

descartada na fabricao de gua destilada. No entanto, torna-se necessrio a
construo um ou mais reservatrios para o armazenamento da gua que seria
descartada. Alm disso, preciso uma tubulao que leve a gua antes descartada
at o reservatrio e tubulaes de abastecimento que levem a gua armazenada at
os pontos de consumo (NUNES et al, 2006). Conforme Nunes et al. (2006), o
tratamento para este tipo de gua exige apenas uma desinfeco com cloro, para
garantir a sade dos usurios, caso estes venham a ingerir esta gua.
A proposta de reuso desta gua dentro da prpria Universidade Federal do
Paran seria para lavagem de vidrarias nos laboratrios, para limpeza do ambiente
em geral, tal como a limpeza de pisos e janelas ou para rega de reas verdes.
Prope-se tambm uma explicao aos usurios dessa gua sobre a sua origem,
seu novo uso e sobre a importncia da reutilizao de gua nos dias de hoje. De
acordo com Nunes et al.(2006), essa medida importante para a conscientizao de
um maior nmero de pessoas, e, assim, os resultados tendem a ser mais
satisfatrios. Alm disso, estes autores destacam a importncia em existir uma
absoluta separao do sistema a ser implantado e do sistema de gua j existente,
bem como, dever ser feita identificao de todos os componentes do novo
sistema implantado. Essas atitudes so importantes para evitar possveis enganos
dos usurios em relao ao destino do uso desta gua.
42
6 CONCLUSO
Conclui-se que, para a fabricao de um litro de gua destilada no destilador

do Laboratrio de Microbiologia e Biologia Molecular do Departamento de
Patologia Bsica da Universidade Federal do Paran, descartado em torno de
25,12 litros de gua. Estes nmeros deixam evidente a importncia em
desenvolver um sistema de reutilizao desta gua descartada.
Foram encontrados seis morfotipos de bactrias heterotrficas nas guas de

descarte dos destiladores analisados, sendo que em apenas uma amostra de
gua a quantidade de Unidades Formadoras de Colnia por mL UFC/mL
excedeu o estabelecido na Portaria 518 de 2004 do Ministrio da Sade que
de 500 UFC/mL.
As mdias de bactrias heterotrficas encontradas nas amostras de gua de

descarte foram 1388,5 para o Laboratrio de Neurobiologia, 49 para Laboratrio
de Parasitologia Molecular, 129 para o Laboratrio de Microbiologia e Biologia
Molecular e 26 para Laboratrio de Gentica Molecular Humana.
A colorao de gram resultou em bacilos gram positivos, estafilococos gram

positivos e bacilos gram negativos.
As amostras de gua de descarte foram submetidas ao exame colimtrico e

tiveram como resultado ausncia de Coliformes Totais e Termotolerantes,
estando de acordo com o estabelecido na Portaria 518 de 2004 do Ministrio da
Sade.
Os fungos filamentosos encontrados nas guas de descarte dos destiladores

foram identificados como Aspergillus sp., Penicillium sp. e Phoma sp.
A gua descartada de destiladores pode ser reaproveitada em diversas tarefas,

tais como nas lavagens de vidrarias nos prprios laboratrios, nas limpezas de
vidros, paredes e pisos da Universidade e na irrigao de reas verdes. Sugerese uma desinfeco da gua antes de seu reuso.
43
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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN

QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DESCARTADA POR

Monografia de concluso de curso apresentada como

QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DESCARTADA POR

Monografia de concluso de curso apresentada como

A gua de boa qualidade como a sade ou a liberdade:

Palavras-chave: gua de reuso. Descarte de destilao. Bactrias heterotrficas.

Key words: Water of reuse. Discharge of distillers. Heterotrophic bacteria. Coliforms.

FIGURA 1 - RELAO ENTRE O VOLUME DE GUA SALGADA E GUA DOCE

PATOLOGIA BSICA DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN ........................ 18

LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR ...................... 23

BIOLGICAS UFPR .............................................................................................. 30

ISOLADOS DAS AMOSTRAS DE GUA DE DESCARTE DOS DESTILADORES DE

TABELA 1 - PADRO MICROBIOLGICO DE POTABILIDADE DA GUA PARA

ENCONTRADAS NAS QUATRO AMOSTRAS ANALISADAS DE DESTILADORES

FILAMENTOSOS ISOLADOS DE GUA DE DESCARTE DE DESTILADORES DE

LABORATRIOS DO SETOR DE CINCIAS BIOLGICAS UFPR, A PARTIR DE

QUADRO 1 MORFOTIPOS BACTERIANOS ISOLADOS DE GUA DE

OBJETIVOS ESPECFICOS ......................................................................... 3

IMPORTNCIA DA GUA E SUA DISTRIBUIO NO PLANETA E NO

USO DE GUA DESTILADA EM LABORATRIOS ...................................... 6

GUA DE REUSO ........................................................................................ 7

IMPORTNCIA DO REUSO E CONSERVAO DA GUA ......................... 8

QUALIDADE MICROBIOLGICA DA GUA DE REUSO .............................. 8

3.6.1 COLIMETRIA .......................................................................................................... 9

FUNGOS ENCONTRADOS NA GUA ................................................................... 10

MATERIAL E MTODOS ................................................................................. 14

DAS GUAS DE DESCARTE DE DESTILADORES.................................................. 20

5.2.3 CARACTERIZAO DE BACTRIAS HETEROTRFICAS POR MICROMORFOLOGIA .......... 28

5.3 SUGESTES DE REUSO DA GUA DESCARTADA POR DESTILADORES DE

A gua um recurso natural renovvel em quantidade, mas no em

Este trabalho teve como objetivos a avaliao da qualidade microbiolgica

2.1 OBJETIVO GERAL

O objetivo geral desse trabalho avaliar a qualidade microbiolgica da gua

2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS

Estimar o consumo mdio de gua potvel na fabricao de gua destilada,

usando como modelo o destilador recm-adquirido do Laboratrio de Microbiologia e

Realizar contagem de bactrias heterotrficas isoladas da gua de descarte

dos destiladores, e caracteriz-las morfologicamente e por meio de colorao de

Avaliar a qualidade microbiolgica da gua descartada, por meio de exame

Realizar contagem de fungos filamentosos presentes na gua descartada e

caracterizar os isolados por macro e micromorfologia, visando identificao ao

considerao os resultados das anlises biolgicas das amostras de gua.

FIGURA 1 - RELAO ENTRE O VOLUME DE GUA SALGADA E GUA DOCE NO MUNDO

O Brasil um pas privilegiado no cenrio mundial, pois possui uma

Atualmente, o problema da escassez de gua tem ganhado bastante

FIGURA 2 - DISTRIBUIO DE GUA NO MUNDO

Embora o Brasil esteja em primeiro lugar em disponibilidade hdrica em rios

2008). Segundo Castro e Scariot (2005), a alta densidade populacional, a poluio e

USO DE GUA DESTILADA EM LABORATRIOS

Nos processos laboratoriais, quaisquer impurezas e sais dissolvidos contidos

FIGURA 3 EQUIPAMENTO DE DESTILADOR DE GUA

Este equipamento necessita de um grande volume de gua para o processo

gua de reuso aquela proveniente do tratamento de algum efluente, para

Reduo do lanamento de efluentes industriais em cursos de gua,

possibilitando melhorar a qualidade das guas.

possibilitando uma situao ecolgica mais equilibrada.

Aumento da disponibilidade de gua para usos mais exigentes, como

abastecimento pblico, por exemplo.

Mudanas nos padres de produo e consumo.

Reduo dos custos de produo.

Habilitao para receber incentivos e coeficientes redutores dos fatores

da cobrana pelo uso da gua.