d

Relatrio do Monitoramento da prevalncia e do perfil

de suscetibilidade aos antimicrobianos em enterococos
e salmonelas isolados de carcaas de frango congeladas
comercializadas no Brasil
Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia
Bacteriana em Frango - PREBAF

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - Anvisa

Janeiro/2008

e da

Resistncia

Relatrio de Pesquisa em
Vigilncia Sanitria de Alimentos
Monitoramento da prevalncia e do perfil de suscetibilidade aos
antimicrobianos em enterococos e salmonelas isolados de carcaas
de frango congeladas comercializadas no Brasil

Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia

Resistncia Bacteriana em Frango - PREBAF

e da

Copyright 2008. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria

permitida a reproduo total ou parcial desta obra, desde que citada a fonte.
1 edio
Diretor-Presidente
Dirceu Raposo de Mello
Adjunto de Diretor-Presidente
Norberto Rech
Diretores
Cludio Maierovitch P. Henriques
Maria Ceclia Martins Brito
Jos Agenor lvares da Silva
Agnelo Santos Queiroz Filho
Chefe de Gabinete
Aldima de Ftima Oliveira Mendes
Coordenao Geral do PREBAF
Gerencia-Geral de Alimentos:
Cleber Ferreira dos Santos (at agosto de 2006)
Denise de Oliveira Resende (aps setembro de 2006)
Gerente de Aes de Cincia e Tecnologia de Alimentos
Lucas Medeiros Dantas
Gerente de Produtos Especiais
Antonia Maria de Aquino
Gerente de Inspeo e Controle de Risco de Alimentos
Diana Carmem Almeida Nunes de Oliveira
Coordenao Tcnica do PREBAF:
1. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade INCQS/FIOCRUZ (at abril/2005)
2. Gerncia Geral de Laboratrios de Sade Pblica/ANVISA (a partir de maio/2005)
Assessoria de Divulgao e Comunicao Institucional
Assessora-Chefe: Pedro Ivo Sebba Ramalho
Projeto grfico e diagramao
Camila Medeiros

Relatrio de Pesquisa em
Vigilncia Sanitria de Alimentos
Monitoramento da prevalncia e do perfil de suscetibilidade aos
antimicrobianos em enterococos e salmonelas isolados de carcaas
de frango congeladas comercializadas no Brasil

Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia

Resistncia Bacteriana em Frango - PREBAF
Agncia Nacional de Vigilncia santria - Anvisa
Braslia | 2008

e da

Apresentao
O presente relatrio foi elaborado pela Gerncia Geral de Alimentos GGALI/ANVISA que contou
com a colaborao de especialistas da Gerncia Geral de Laboratrios de Sade Pblica GGLAS/ANVISA, do Instituto Oswaldo Cruz da Fundao Oswaldo Cruz - IOC/FIOCRUZ e do Instituto Adolfo Lutz
- IAL/SP, em sua redao. O documento aborda diversos aspectos de anlise de risco no contexto do
Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango PREBAF, implementado entre 2004 e 2006 numa exitosa parceria com as Vigilncias Sanitrias Estaduais
e Laboratrios Centrais de Sade Pblica de vrios estados, como parte do conjunto de estratgias
de ao definidas pela ANVISA para a rea de alimentos.
Incumbe ANVISA, por Lei, regulamentar, controlar e fiscalizar os produtos e servios que envolvam
risco sade pblica, tais como alimentos, inclusive bebidas, guas envasadas, seus insumos, suas
embalagens, aditivos alimentares, limites de contaminantes orgnicos, resduos de agrotxicos e
de medicamentos veterinrios. Estes ltimos, em especial os antimicrobianos, quando usados em
animais de produo de alimentos com fins teraputicos, profilticos ou como aditivos nas raes,
passam a ser alvo de avaliao de risco em todo o mundo, tanto pelos resduos dessas substncias
que podem ficar nos produtos de consumo, como pela possibilidade do seu uso vir contribuir para a
disseminao da resistncia microbiana.
O Codex Alimentarius, organismo formado pela Organizao Mundial de Sade (OMS) e pela Organizao das Naes Unidas para Agricultura e Alimentao (FAO), principal referncia internacional
em normas sobre segurana de alimentos, tem encorajado os paises membros, a exemplo do Brasil,
a desenvolverem programas de vigilncia e controle sobre o tema acima, num esforo mundial para
reduzir a resistncia microbiana aos antimicrobianos, tanto na medicina veterinria quanto humana. Dada a relevncia do assunto, em 2005 foi aprovado pela Comisso do Codex Alimentarius um
Cdigo de Prticas para Minimizar e Conter a Resistncia Antimicrobiana, alertando-se para as responsabilidades especficas que tm a indstria farmacutica, produtores, distribuidores, autoridades
regulatrias e profissionais que atuam como responsveis tcnicos.
Nesse contexto um passo importante foi dado com a implementao do PREBAF a partir de amostras
de carcaas congeladas de frango colhidas no comrcio, com uma cobertura significativa em relao
as reas de procuo e consumo do alimento em questo. Nele foram gerados dados de pesquisa em
vigilncia sanitria at ento inexistentes e suas concluses e recomendaes apontam para a necessidade de mais aporte de recursos da Agncia, visando replicar o monitoramento de enterococos e
salmonelas com um novo enfoque e estender a pesquisa para outras bactrias com forte envolvimento em contaminaes microbiolgicas de alimentos, como Campylobacter e Listerias.
Maria Ceclia Martins Brito
Diretora da ANVISA

Resumo
Este um documento tcnico-cientfico que apresenta no s o resultado de uma ao planejada de
monitoramento em vigilncia sanitria relacionada ao risco microbiolgico atribudo ao consumo de
frango, como tambm uma abordagem sobre o problema da resistncia microbiana traduzida em
uma pesquisa sobre o perfil de resistncia de Salmonella sp e Enterococcus sp a vrios antimicrobia
nos utilizados na atividade avcola. Essas duas bactrias, so consideradas, dentre outras, como de
eleio para programas de vigilncia e monitoramento sobre o tema.
Esse trabalho uma apresentao do PREBAF em toda a sua dimenso, cuja implementao se deu
em etapas, ou seja: Etapa 1: Definio das metodologias ou dos Procedimentos Operacionais Padro
(POPs); Etapa 2: Elaborao do Manual de Procedimentos; Etapa 3: Treinamento de VISA e LACEN;
Etapa 4: Colheita de amostras e anlises laboratoriais; e Etapa 4: Relatrio final. Durante o perodo
de execuo ocorreram vrias avaliaes parciais com a participao da equipe envolvida em todos
os nveis.
Antes de expor as informaes detalhadas sobre o PREBAF e seus resultados, o relatrio aborda a
contextualizao tcnica das caractersticas gerais e epidemiolgicas de Salmonella e Enterococcos,
seus mecanismos de resistncia antimicrobiana e as conseqncias para a sade humana.
Carcaas de frango congeladas coletadas no comrcio foram definidas como matriz de anlise.
Outro aspecto abordado pelo trabalho foi a verificao da adequao da rotulagem de frango em
relao Resoluo RDC n. 13, de 02/01/01. Os resultados apresentados indicam baixa prevalncia
de Salmonella, alta prevalncia de Enterococcus, ocorrncia de resistncia dessas bactrias a vrios
antimicrobianos e que a maioria dos estabelecimentos produtores j se adequaram rotulagem.
O estudo foi conduzido em 14 Estados, em um total de 2.710 unidades amostrais de frango analisadas
no perodo de 2004 a 2006, e traa um perfil preliminar da resistncia bacteriana aos antimicrobianos
utilizados na produo de frango. Em relao Salmonella, foi encontrada a prevalncia mdia de
3,03%. O total de 250 cepas foi submetido anlise de caracterizao antignica, chegando-se a 18
sorovales isolados, destacando-se maior freqncia para S. Enteritidis em 48,8% das cepas, seguido
de S. Infantis (7,6%), S. Typhimurium (7,2%), S. Heidelberg (6,4%), S. Mbandaka (4,8%) e 15 (5,2%)
cepas caracterizadas como Salmonella sp.
Quanto a Enterococos, 98,7% amostras foram positivas para esta bactria e o total de 8.188
colnias foi submetido anlise de identificao de espcie e do perfil de resistncia. Entre as
diferentes espcies j descritas no gnero Enterococcus, doze delas puderam ser identificadas entre
colnias caracterizadas. Contudo, pode-se observar que houve predominncia de quatro espcies,
uniformemente distribudas entre as cinco regies: E. faecalis (61,4%), E. gallinarum (28,7%), E.
casseliflavus (5,06%) e E. faecium (2,2). Foram avaliadas 262 amostras quanto ao perfil de susce
tibilidade aos antimicrobianos, encontrando-se vrios nveis de resistncia a alguns antibiticos de
importncia na medicina humana.

Lista de Abreviaturas
ANVISA
DNA
DTA
FAO
g/t
IAL
IBGE
IOC
LACEN
MAPA
MIC
OIE
PBP
POF
RDC
TGI
UF
UFC/g
VISA
VRE

Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria

cido Desoxirribonuclico
Doenas Transmitidas por Alimentos
Food and Agriculture Organization of the United Nations
gramas/ tonelada
Instituto Adolfo Lutz
Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica
Instituto Oswaldo Cruz
Laboratrios Centrais de Sade Pblica
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento OMS Organizao Mundial de Sade
Concentrao Inibitria Mnima (CIM)
Organizao Mundial para Sade Animal (antiga Organizao Internacional de
Epizootias)
Protenas ligadoras de penicilina
Pesquisa de Oramentos Familiares
Resoluo de Diretoria Colegiada
Trato gastrintestinal
Unidades Federadas
Unidade Formadora de Colnia/ grama
Vigilncias Sanitrias Estaduais
Vancomycin-resistant Enterococci

11

SUMRIO
Apresentao......................................................................................................................................................... 7
Resumo ................................................................................................................................................................. 9
Lista de Abreviaturas............................................................................................................................................ 11
Introduo............................................................................................................................................................ 19
Parte I
Caractersticas Gerais e Epidemiologia de Salmonella e Enterococcus.............................................................. 21
I. GNERO SALMONELLA.................................................................................................................................. 21
1. CARACTERSTICAS GERAIS, NOMENCLATURA E CLASSIFICAO:................................................... 21
2. HABITAT NATURAL...................................................................................................................................... 22
3. CARACTERSTICAS CLNICAS E PATOGENIA ........................................................................................ 23
4. SALMONELLA EM ALIMENTOS.................................................................................................................. 23
II. GNERO ENTEROCOCCUS.......................................................................................................................... 25
1. CARACTERSTICAS GERAIS, NOMENCLATURA E CLASSIFICAO.................................................... 25
2. HABITAT NATURAL...................................................................................................................................... 28
3. CARACTERSTICAS CLNICAS E PATOGENIA......................................................................................... 29
4. ENTEROCOCOS NOS ALIMENTOS........................................................................................................... 30
III. RESISTNCIA MICROBIANA......................................................................................................................... 31
1. CARACTERSTICAS GERAIS E CONCEITOS........................................................................................... 31
2. MECANISMOS DE RESISTNCIA.............................................................................................................. 32
3. CONSEQNCIAS PARA A SADE HUMANA........................................................................................... 32
4. SALMONELLA E RESISTNCIA AOS ANTIMICROBIANOS...................................................................... 33
5. ENTEROCOCCUS E RESISTNCIA AOS ANTIMICROBIANOS................................................................ 35
Parte II
Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango PREBAF..... 41
1. HISTRICO.................................................................................................................................................. 41
2. INFORMAES TCNICAS........................................................................................................................ 42
3. OBJETIVOS................................................................................................................................................. 42
3.1 Geral...................................................................................................................................................... 42
3.2 Especficos............................................................................................................................................. 42
4. MATERIAL E MTODOS............................................................................................................................. 43
4.1 Plano amostral....................................................................................................................................... 43
4.1.1 Cobertura e perodo de execuo................................................................................................ 43
Mapa do Brasil e rea de cobertura do PREBAF........................................................................................ 43
4.1.2 Nmero e tipo de amostras........................................................................................................... 44
4.2 Procedimentos de Amostragem e de Anlise........................................................................................ 44
4.3 Plano de Anlise de Salmonela ............................................................................................................ 46
4.3.1 Recepo das cepas, reisolamento e identificao bioqumica................................................... 46
4.3.2 Caracterizao antignica............................................................................................................ 47
4.3.3 Fagotipagem................................................................................................................................. 47
4.3.4 Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos............................................................................... 47
4.4 Plano de Anlise de Enterococos ......................................................................................................... 47
4.4.1 Recebimento das amostras.......................................................................................................... 47
4.4.2 Identificao.................................................................................................................................. 47
4.4.3 Ensaios de determinao............................................................................................................. 47
4.4.4 Caracterizao gentica............................................................................................................... 48
5. RESULTADOS E DISCUSSO.................................................................................................................... 48
5.1 Situao Extrada dos Relatrios dos Estados (Visa e Lacen).............................................................. 48
5.1.1 Alagoas......................................................................................................................................... 48
5.1.2 Amap........................................................................................................................................... 50
5.1.3 Cear............................................................................................................................................ 53
5.1.4 Distrito Federal.............................................................................................................................. 55
5.1.5 Esprito Santo............................................................................................................................... 57
5.1.6 Gois............................................................................................................................................. 59
5.1.7 Mato Grosso do Sul...................................................................................................................... 61
5.1.8 Minas Gerais................................................................................................................................. 63

13

 5.1.9 Paran.......................................................................................................................................... 65
5.1.10 Rio de Janeiro............................................................................................................................. 67
5.1.11 Rio Grande do Norte................................................................................................................... 69
5.1.12 Rio Grande do Sul...................................................................................................................... 71
5.1.13 Santa Catarina............................................................................................................................ 74
5.1.14 So Paulo - Capital..................................................................................................................... 76
5.1.15 So Paulo Ribeiro Preto........................................................................................................ 78
5.2. RESULTADO CONSOLIDADO DOS ESTADOS (VISA e LACEN)....................................................... 80
5.3 ANLISES ESPECFICAS REALIZADAS PELOS LABORATRIOS
DE REFERNCIA - IOC E IAL/SP......................................................................................................... 89
5.3.1 Salmonella spp............................................................................................................................. 89
5.3.2 Enterococcus sp........................................................................................................................... 95
6. CONCLUSES.............................................................................................................................................. 107
7. RECOMENDAES...................................................................................................................................... 108
8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS................................................................................................................111

FIGURAS
Figura 1: N laudos enviados pelas Visas para a Anvisa PREBAF.................................................................. 81
Figura 2: Nmero de marcas produzidas no estado e avaliadas PREBAF....................................................... 82
Figura 3: Nmero de marcas comercializadas nos Estados e avaliadas ........................................................... 83
Figura 4: Anlise dos dizeres de rotulagem de acordo com a RDC n 13/2001.................................................. 84
Figura 5: Resultados de notificaes sobre rotulagem - PREBAF . .................................................................... 85
Figura 6: Presena e ausncia de Enterococos em meio com vancomicina em
amostras de frango colhidas nos Estados .......................................................................................................... 86
Figura 7: Presena e ausncia de Enterococos em meio com vancomicina em
amostras de frango colhidas nos Estados .......................................................................................................... 87
Figura 8: Presena e ausncia de Salmonella spp detectadas nas amostras coletadas.................................... 88
Figura 9: Distribuio e freqncia dos diferentes sorovares de Salmonella...................................................... 90
Figura 10. Freqncia dos fagotipos de S. Enteritidis e S.Typhimurium.............................................................. 91
Figura 11: Distribuio do total de cepas de Salmonella spp. de acordo com a
resistncia a diferentes classes de drogas.......................................................................................................... 92
Figura 12. Distribuio dos sorovares multirresistentes de Salmonella a diferentes
classes de antimicrobianos.................................................................................................................................. 93
Figura 13. Freqncia e distribuio dos marcos de resistncia nas 250 cepas de
Salmonella no perodo de 2004 a 2006............................................................................................................... 94
Figura 14: N de colnias de enterococos recebidas por estado participante IAL 2004 - 2006 - PREBAF 2007......................................................................................................................... 96
Figura 15: Perfil de suscetibilidade de 2.135 colnias de Enterococcus sp....................................................... 101
Figura 16: Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de 1.630 colnias de
Enterococcus spp excluindo as espcies que apresentam resistncia
intrnseca para vancomicina (E. gallinarum e E. Casseliflavus)......................................................................... 102
Figura 17: Perfil de suscetibilidade antimicrobiana de 506 colnias de E. gallinarum e E. casseliflavus. ........ 103

14

QUADROS
Quadro 1. Distribuio do nmero de sorovares de Salmonella de acordo com a espcie.................................21
Quadro 2. Caractersticas bioqumicas utilizadas na diferenciao de subespcies de
S. bongori e S. subterranea.................................................................................................................................22
Quadro 3. Caractersticas fenotpicas utilizadas para a identificao presuntiva de
Enterococcus e gneros relacionados.................................................................................................................27
Quadro 4. Caractersticas fenotpicas utilizadas para a identificao das espcies de Enterococcus
e gneros relacionados........................................................................................................................................28
Quadro 5. Nmero de amostras em funo da prevalncia de resistncia esperada na populao...................44
Quadro 6. Distribuio e freqncia dos diferentes sorovares de Salmonella..................................................... 89
Quadro 7. Freqncia dos fagotipos de S. Enteritidis e S.Typhimurium.............................................................. 90
Quadro 8. Distribuio do total de cepas de Salmonella spp. de acordo com a resistncia
a diferentes classes de drogas............................................................................................................................. 91
Quadro 9. Distribuio dos sorovares multirresistentes de Salmonella a diferentes
classes de antimicrobianos.................................................................................................................................. 93
Quadro 10. Freqncia e distribuio dos marcos de resistncia nas 250 cepas de
Salmonella no perodo de 2004 a 2006............................................................................................................... 94
Quadro 11: Distribuio do perfil de suscetibilidade de 2.135 colnias de
Enterococcus sp - PREBAF 2007...................................................................................................................... 100
Quadro 12: Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de 1.630 colnias de
Enterococcus spp excluindo as espcies que apresentam resistncia
intrnseca para vancomicina (E. gallinarum e E. Casseliflavus)........................................................................ 101
Quadro 13: Perfil de suscetibilidade antimicrobiana de 506 colnias de E. gallinarum e E. casseliflavus. ...... 102
Quadro 14: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas............................................................................................................ 103
Quadro 14a: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas (continuao)...................................................................................... 104
Quadro 14b: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas (continuao)...................................................................................... 104
Quadro 15: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas, por estado......................................................................................... 104
Quadro 15a: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas, por estado (continuao)................................................................... 105
Quadro 15b: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais
espcies de Enterococcus identificadas, por estado (continuao)................................................................... 106

15

TABELAS
Tabela 1: ESTADO: ALAGOAS VARIVEL AVALIADA SALMONELLA.........................................................48
Tabela 2: ESTADO: ALAGOAS VARIVEL AVALIADA: ENTEROCOCCUS.....................................................49
Tabela 3: ESTADO: AMAP - VARIVEL AVALIADA SALMONELLA...............................................................50
Tabela 4: ESTADO: AMAP VARIVEL AVALIADA: ENTEROCOCCUS.........................................................52
Tabela 5: ESTADO: CEAR - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA................................................................53
Tabela 6: ESTADO: CEAR - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS.........................................................54
Tabela 7: DISTRITO FEDERAL - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA..........................................................55
Tabela 8: DISTRITO FEDERAL - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS....................................................56
Tabela 9: ESTADO: ESPRITO SANTO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA..............................................57
Tabela 10: ESTADO: ESPRITO SANTO - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS.....................................58
Tabela 11: ESTADO: GOIS - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA............................................................... 59
Tabela 12: ESTADO: GOIS - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS........................................................ 60
Tabela 13: ESTADO: MATO GROSSO DO SUL - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA................................. 61
Tabela 14: ESTADO: MATO GROSSO DO SUL - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS.......................... 62
Tabela 15: ESTADO: MINAS GERAIS - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA................................................ 63
Tabela 16: ESTADO: MINAS GERAIS - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS......................................... 64
Tabela 17: ESTADO: PARAN - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA............................................................ 65
Tabela 18: ESTADO: PARAN - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS..................................................... 66
Tabela 19: ESTADO: RIO DE JANEIRO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA............................................. 67
Tabela 20: ESTADO: RIO DE JANEIRO - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS...................................... 68
Tabela 21: ESTADO: RIO GRANDE DO NORTE - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA............................... 69
Tabela 22: ESTADO: RIO GRANDE DO NORTE - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS........................ 70
Tabela 23: ESTADO: RIO GRANDE DO SUL - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA..................................... 71
Tabela 24: ESTADO: RIO GRANDE DO SUL - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS.............................. 73
Tabela 25: ESTADO: SANTA CATARINA - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA............................................ 74
Tabela 26: ESTADO: SANTA CATARINA - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS..................................... 75
Tabela 27: ESTADO: SO PAULO (CAPITAL) - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA................................... 76
Tabela 28: ESTADO: SO PAULO (CAPITAL) - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS............................. 77
Tabela 29: ESTADO: SO PAULO: RIBEIRO PRETO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA..................... 78
Tabela 30: ESTADO: SO PAULO: RIBEIRO PRETO - VARIVEL AVALIADA ENTEROCOCCUS.............. 79
Tabela 31: Nmero de laudos e de unidades amostrais colhidas e analisadas . ................................................ 80
Tabela 32: Nmero de marcas de frango produzidas no estado e avaliadas - PREBAF..................................... 81
Tabela 33: Nmero de marcas comercializadas nos Estados e avaliadas PREBAF........................................ 82
Tabela 34: Anlise dos dizeres de rotulagem dos laudos encaminhados pelas Visas Anvisa - PREBAF........ 83
Tabela 35: Resultados de notificaes sobre rotulagem - PREBAF (2004-2005-2006)...................................... 84
Tabela 36: Presena e ausncia de Enterococos em meios com vancomicina nas amostras coletadas . ......... 86
Tabela 37: Presena e ausncia de Enterococos em meios sem vancomicina nas amostras coletadas . ......... 87
Tabela 38: Presena e ausncia de Salmonella spp detectadas nas amostras coletadas ................................. 88
Tabela 39: Nmero de colnias do gnero Enterococcus recebidas pelo Instituto Adolfo Lutz,
no perodo de 2004 a 2006.................................................................................................................................. 95
Tabela 40: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus das amostras enviadas
pelos Lacen ao IAL, no perodo de 2004 a 2006................................................................................................. 96
Tabela 41: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus das amostras enviadas
pelos Lacen ao IAL, no perodo de 2004 a 2006 (continuao)........................................................................... 97
Tabela 42: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus por regio geogrfica,
recebidas no perodo de 2003 a 2006.................................................................................................................. 97
Tabela 42a: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus por regio geogrfica,
recebidas no perodo de 2004 a 2006 (continuao)........................................................................................... 98
Tabela 43: Distribuio do perfil de susceptibilidade antimicrobiana das 2.135 colnias
de Enterococcus spp, considerando os Estados produtores de frango para consumo humano......................... 99
Tabela 43b: Distribuio do perfil de susceptibilidade antimicrobiana das 2.135 colnias de
Enterococcus spp, considerando os Estados produtores de frango para consumo humano (continuao)..... 100

16

PROCEDIMENTOS OPERACIONAIS PADRO

POP - 001 Colheita de carcaas congelada de frango...................................................................................... 125
RECEPO E PROCESSAMENTO INICIAL DE AMOSTRAS DE CARCAAS CONGELADAS
DE FRANGO E EMISSO DO LAUDO DE ANLISE 65.3210.043................................................................. 127
PESQUISA E CONTAGEM DE Salmonella SP EM CARCAAS CONGELADAS DE FRANGO...................... 135
DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE FRANGO CONGELADAS......................................... 152
ASMI5-01 - MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA ............................................................................................................................................................. 163
Transporte de substncias infecciosas para o Laboratrio de Referncia (Territrio Nacional) PSMIB2-01..... 169
Encaminhamento das cepas de Salmonella spp, para caracterizao antignica e
avaliao da suscetibilidade antimicrobiana..................................................................................................... 174

17

Introduo
Entre os patgenos que so reconhecidos pela OMS como os mais significativos em termos de impacto a sade das populaes e que podem ser utilizados como indicadores da qualidade dos alimentos esto includos as salmonelas, os enterococos, e os coliformes. Corroborando isso, organismos
internacionais como a FAO, OMS, OIE e Codex Alimentarius, vm discutindo amplamente o impacto
sade pblica resultante do uso de agentes antimicrobianos em animais de produo. Um exemplo foi a aprovao pela Comisso do Codex Alimentarius de um cdigo internacional de prticas
para minimizar e conter a resistncia antimicrobiana. Esse documento traz diretrizes sobre o uso
responsvel e prudente dessa classe de medicamentos, bem como recomendaes aos governos,
encorajando-os a implantar seus prprios programas de monitoramento e vigilncia ante relevncia
do problema.
No Brasil so observadas flutuaes na qualidade dos alimentos devido s dimenses continentais do
pas, que dificultam o amplo conhecimento sobre a circulao e o seu real impacto na disseminao
de microrganismos patognicos. Acrescenta-se ainda sua configurao geoclimtica, a qual permite
um amplo espectro de produo de alimentos de origem animal e vegetal, dificultando o conhecimento a respeito da veiculao de patgenos. Nessas circunstncias, podem ocorrer situaes de
risco em virtude das complexas operaes de transporte, armazenamento, comercializao e heterogeneidade das condies observadas em todas as regies do pas.
Entre os alimentos de origem animal, a produo de aves no Brasil ocupa o terceiro lugar no mundo
(USDA, 2005). De acordo com dados da FAO, no perodo de 1993 a 2003, a produo de frango
cresceu 146%, enquanto a de sunos, apenas 22% e a de bovinos, 56,5%. Esse maior crescimento
na produo de frango em relao a carne de outras espcies deu-se em decorrncia da queda dos
preos no mercado. Atualmente o Brasil ainda continua sendo o terceiro maior produtor de carne de
frango, onde, em 2006, produziu 10.035 mil toneladas, perdendo para China e Estados Unidos onde
os mesmos produzem 10.350 e 16.233 mil toneladas respectivamente. Entretanto, nas exportaes
o Brasil assumiu o primeiro lugar em 2006 com 2.900 mil toneladas de carne de frango exportadas
(ANUALPEC, 2006)
Com a tarefa de avaliar o impacto sade pblica associado ao uso de medicamentos veterinrios
em animais de produo, foi criado um Grupo de Trabalho (RDC Anvisa N 05/2000), que contou
com a participao do MAPA e de setores organizados da sociedade civil, incluindo a indstria farmacutica veterinria, universidades e institutos de pesquisa, rgos estaduais de vigilncia sanitria
e laboratrios oficiais de sade pblica.
Um dos eixos das recomendaes deste grupo esteve voltado questo da resistncia aos antimicrobianos e a necessidade de implementao de um projeto para o monitoramento e vigilncia de
bactrias isoladas a partir de alimentos de origem animal. Nesse particular, a Anvisa houve por bem
implantar o Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em
Frango PREBAF, cujos resultados constam deste relatrio.
Posteriormente, os padres microbiolgicos de alimentos no Brasil foram estabelecidos pela Resoluo RDC Anvisa N 12/2001. No entanto, esse regulamento tcnico no fixou o parmetro de
Salmonella spp em carnes in natura de aves (ausncia em 25 gramas), at que fosse implementado
um programa de monitoramento e vigilncia capaz de determinar a prevalncia de Salmonella spp.
no alimento em questo. Atravs da Resoluo RDC Anvisa N 13/2001 foi exigida, na rotulagem
de carnes de aves embaladas, instrues para o consumidor sobre o adequado preparo, conservao
e uso desses produtos, visando prevenir surtos de salmonelose.
Com o propsito de buscar subsdios para a definio de medidas de interveno, o PREBAF foi ini

CAC/RCP 61-2005, http://www.codexalimentarius.net/search/advancedsearch.doc

19

ciado em agosto de 2004 numa parceria entre Anvisa, VISA e LACEN de 14 UF. O Programa realizou
um diagnstico, com metodologias padronizadas, sobre a prevalncia e o perfil de susceptibilidade
aos antimicrobianos de Enterococcus sp e Salmonella spp, bem como a quantificao desta ltima,
isolados a partir de carcaas congeladas de frango comercializadas no Brasil. Essa anlise verificou
ainda a adequao dos dizeres de rotulagem s exigncias da Resoluo RDC Anvisa N 13/2001.
Na sua implementao, o PREBAF contou com o envolvimento de uma equipe multidisciplinar composta pela Anvisa, o IOC/FIOCRUZ e o IAL/SP, e as VISA e os LACEN de Alagoas, Amap, Cear, Distrito
Federal, Esprito Santo, Gois, Minas Gerias, Mato Grosso do Sul, Paran, Rio de Janeiro, Rio Grande
do Norte, Rio Grande do Sul, Santa Catarina e So Paulo (capital e Ribeiro Preto).
Com vistas a facilitar a exposio do tema, bem como sua compreenso, este relatrio foi subdividido
em: caractersticas gerais e epidemiologia de Salmonella e Enterococcus; descrio de todas as etapas
do PREBAF, que vo desde os objetivos do programa aos seus resultados; discusso, concluses e
recomendaes.

20

Parte I
Caractersticas Gerais e Epidemiologia de
Salmonella e Enterococcus
I. GNERO SALMONELLA
1. CARACTERSTICAS GERAIS, NOMENCLATURA E CLASSIFICAO:
O gnero Salmonella foi inicialmente caracterizado em 1885, tendo sua denominao em homenagem ao patologista Daniel Salmon. Pertencente famlia Enterobacteriaceae, um bastonete Gram
negativo, geralmente mvel, forma cido e gs a partir da glicose, excetuando-se os sorovares S.
Pullorum e S. Gallinarum, que so imveis e no mximo 5% produzem gs. O gnero apresenta ainda
como caractersticas metablicas bem definidas a capacidade de descarboxilao da lisina, produo
de gs sulfdrico e utilizao do citrato como fonte nica de carbono.
Sua nomenclatura, baseada na homologia do DNA, efetivou a incluso do gnero Arizona e atualmente, com base em caractersticas fenotpicas, o gnero dividido em trs espcies: S. enterica,
S. bongori e S. subterranea. Particularmente S. enterica subdivide-se em seis subespcies: enterica,
salamae, arizonae, diarizonae, houtenae e indica.
Em cada subespcie reconhecido diferente nmero de sorovares com base na caracterizao de
seus antgenos capsular (Vi), somticos (O) e flagelares (H), perfazendo atualmente mais de 2.500
sorovares (Quadro 1). A subespcie S. enterica apresenta maior nmero de sorovares, sendo responsvel por 99% dos isolamentos do gnero. Usualmente tais sorovares so isolados a partir de animais
de sangue quente.
S.enterica

Espcies
Subespcies

enterica

salamae

arizonae

diarizonae

houtenae

indica

Sorovares

1490

500

94

329

72

12

S.bongori

S.subterranea

22

Quadro 1. Distribuio do nmero de sorovares de Salmonella de acordo com a

espcie
Em 2002 foram includos 18 novos sorovares reconhecidos pelo WHO Collaborating Centre for
Reference and Research on Salmonella, sendo doze pertencentes a S. enterica subespcie enterica;
duas, subespcie salamae; duas, subespcie diarizonae; uma, houtenae; e uma, a S. bongori.
Mais recentemente uma nova espcie, S. subterranea, teve seu primo isolamento a partir de sedimento
subterrneo e foi validada em 2005.
As caractersticas bioqumicas que permitem diferenciar as distintas subespcies dentro da espcie
enterica e as espcies S. bongori e S. subterranea so apresentadas no Quadro 2. Entretanto os
sorovares S. Typhi e S. Paratyphi A, pertencentes a subespcie enterica, apresentam algumas caractersticas diferenciais no apontadas.

21

Quadro 2: Caractersticas bioqumicas utilizadas na diferenciao de subespcies

de S. bongori e S. subterranea.
S.enterica

salamae

diarizonae

houtenae

Indica

S.bongori

S.subterranea

Dulcitol

ONPG(2h)

Subespcies

Caractersticas

arizonae

enterica

Espcies

Malonato

Gelatinase

Sorbitol

Crescimento KCN

L(+)Tartarato(a)

+c

Galacturonato
-glutamyl
transferase
-glucuronidase

ND

+(b)

ND

ND

Mucato

- (70%)

ND

Salicina

ND

Lactose

- (75%)

Lise-fago O1

+
(75%)
+

ND

Habitat normal

Animais de sangue
quente

Animais de sangue frio e meio ambiente

a: d-tartarato
b: S.Typhimurium, S.Dublin (-)
c: cresce sem produo de cido
D: diferentes reaes (sorovares)
ND: No determinado
+: 90% positivas
-: 90% negativas

2. HABITAT NATURAL
As salmonelas podem ser divididas em trs categorias, com base na especificidade do hospedeiro e
padro clnico por elas determinado: salmonelas altamente adaptadas ao homem, incluindo os agentes etiolgicos da febre entrica (febre tifide e paratifide), que so S. Typhi e S. Paratyphi A, B e C;
salmonelas altamente adaptadas aos animais, representadas por S. Dublin (bovinos), S. Choleraesuis
e S. Typhisuis (sunos), S. Pullorum e S. Gallinarum (aves), responsveis pelo paratifo dos animais.
Contudo, em particular os sorovares S. Dublin e S. Choleraesuis, podem provocar no homem em determinadas situaes (jovens, idosos, pacientes com doenas crnicas e imunocomprometidos), um
quadro septicmico, isto , mais grave do que o causado por S. Typhi (Lax et al., 1995); e salmonelas
zoonticas, que incluem a maioria dos sorovares, e atingem indiferentemente o homem e animais,
sendo responsveis por gastrenterites (comumente enterocolites) e doenas transmitidas por alimentos (DTA). Sua distribuio mundial, sendo os alimentos os principais veculos de sua transmisso.
So responsveis por significantes ndices de morbidade e mortalidade, tanto nos pases emergentes
como desenvolvidos, determinando pequenos e grandes surtos envolvendo, principalmente, o consumo de alimentos de origem animal como ovos, aves, carnes e produtos lcteos.
22

Na epidemiologia da doena humana h predomnio de somente poucos sorovares, alguns se mantendo disseminados em estgio contnuo (S. Typhimurium), ou emergentes como S. Hadar, S. Heidelberg, S.Infantis e S.Enteritidis (Khakhria et al., 1997; Caffer et al., 1997; Mansuy & Schlegel, 1997;
Velge et al., 2005).
Duas maiores mudanas na epidemiologia das salmoneloses no tifides na Europa e Estados Unidos, ocorreram na segunda metade do sculo XX: a emergncia de infeces humanas de origem
alimentar, determinadas por S. Enteritidis e a multirresistncia a antimicrobianos em cepas de S.
Typhimurium (Rabsch et al., 2001; OBrien, 2002).
No Brasil, tambm se constatou a prevalncia no nmero de S. Enteritidis isolados durante 19911995 em fontes humanas e no-humanas, particularmente em ovos, aves (matrizes), amostras ambientais e matrias-primas de rao comercial (Reis, 1994; Tavechio et al, 1996, Hofer et al.1997 e
1998, Seki, 2000).
No computo geral, relatrios apresentados por Rodrigues (2000 a 2006) Coordenao Geral de
Laboratrios de Sade Pblica (CGLAB/DEVEP/SVS/MS), bem como a Organizao Panamericana de
Sade de 1999 a 2003, apontaram o aumento na incidncia de diferentes sorovares de Salmonella
spp. em nosso meio.

3. CARACTERSTICAS CLNICAS E PATOGENIA

A dose infectante varia de 105 a 108 clulas, porm em pacientes imunocomprometidos tm sido
observadas doses 103 clulas para alguns sorovares, envolvidos em surtos de DTA. A manifestao
clnica inclui quadros entricos agudos ou crnicos, alm de localizao extraintestinal, como infeces septicmicas, osteomielite, artrite, hepatite, etc. Alguns sorovares so reconhecidos por seu
potencial patognico como S. Typhimurium, o qual alm do quadro gastrentrico pode determinar
infeco septicmica nos animais jovens e homem e S. Infantis e S. Agona altamente envolvidos em
infeces graves em crianas (Fonseca et al., 2006).
Os microrganismos penetram por via oral invadindo a mucosa intestinal, disseminando-se para a
submucosa, resultando em enterocolite aguda. Normalmente o quadro diarrico moderado, sem a
presena de sangue entretanto, em alguns quadros clnicos, pode ocorrer perda de pequeno volume
de fezes associado a tenesmo e sangue. Seu transporte, atravs do sistema retculo-endotelial e a capacidade de multiplicao no interior dos macrfagos, possibilitam sua manuteno e disseminao
no organismo. Indivduos subnutridos ou com deficincias do sistema imune podem apresentar infeces de extrema gravidade, como por exemplo, a incidncia de bacteremia em pacientes aidticos,
dos quais 20 a 60% relatam infeco gastrintestinal prvia (Lax et al. 1995).
Sua virulncia multifatorial, incluindo mobilidade, habilidade de penetrar e replicar nas clulas
epiteliais, resistncia ao do complemento, produo de entero, cito e endotoxina, sendo desconhecido o exato papel de cada um, para a manifestao da doena. Em alguns sorovares a virulncia
mediada por um plasmdeo, em uma regio do operon de 8 Kb que contm os genes spvR ABCD,
cuja origem ainda encontra-se desconhecida (Libby et al. 2000, Oliveira et al. 2003). A relao entre
a presena deste plasmdeo de virulncia e sorovar j se encontra bem estabelecida em S. Dublin, S.
Gallinarum e S. Choleraesuis (Rotger & Casadess, 1999).

4. SALMONELLA EM ALIMENTOS:
A salmonelose uma das zoonoses mais complexas em sua epidemiologia e controle, cujos padres
diferem de uma regio para outra. Isto se deve a diferenas nos hbitos alimentares, prticas de elaborao de alimentos, criao de animais e padres de higiene e saneamento. Seu controle um
trabalho rduo, tendo em vista a emergncia de novos sorovares e a reemergncia de outros em
determinadas reas, tanto nos pases emergentes quanto naqueles industrializados (OMS, 1988).

23

Considerando que sua principal via de transmisso est na cadeia alimentar, sua presena em animais, criados com objetivo comercial, aponta este microrganismo como o mais incidente e relevante
agente etiolgico de enteroinfeces. Isto resulta em milhes de dlares em perdas para a indstria,
particularmente de bovinos, sunos e aves, tanto para o mercado interno quanto para exportao,
onde em alguns pases, a rigidez na inspeo representa uma necessidade constante de qualidade
(Jay, 2000; Humphrey, 2000).
Particularmente nas aves, a transmisso de Salmonella pode ser do tipo vertical ou horizontal. Por
sculos o consumo de ovos sem coco era uma prtica comum do homem, porm na atualidade
o reconhecimento, a partir de diferentes surtos, determinados pelo sorovar S. Enteritidis e mais
recentemente outros sorovares (S. Heidelberg, S. Agona e S. Virchow) levaram ao reconhecimento
de sua capacidade de transmisso transovariana, levando a disseminao para o homem atravs de
alimentos onde so utilizados sem a devida coco, como tortas, maioneses, omeletes, etc (White
et al. 2006).
A transmisso horizontal envolve todos os sorovares, os quais apresentam caractersticas ubquas,
pode se dar atravs do meio ambiente, onde roedores assumem o papel de portador assintomtico,
por longos perodos (superior a 10 meses) disseminando tais microrganismos entre diferentes reas.
Outra via, a qual ainda objeto de especulao est representada pelas raes. Embora, na literatura
nacional, durante o sculo XX entre as dcadas de 80 e 90, seja apontada ausncia dos sorovares
adaptados s aves em raes ou suas matrias primas de origem animal, algumas medidas tm sido
adotadas pelos criadores, no sentido de minimizar possveis contaminaes, tendo em vista a impossibilidade de sua eliminao total (In: Back et al. 2006).
Os produtos agrcolas no processados como hortalias, frutas e os alimentos de origem animal,
como carnes cruas, leite e ovos, so veculos freqentes de salmonelas. A contaminao de origem
fecal geralmente a fonte para os produtos agrcolas, pela exposio gua contaminada; para o
leite e ovos, atravs da exposio direta e para a carne, usualmente durante as operaes de abate
(OMS, 1988).
A carne de aves tem se convertido em um alimento amplamente consumido mundialmente e em
pases emergentes, entre eles o Brasil, representando uma fonte relativamente barata de protena de
boa qualidade, cuja produo de aves em grande escala resulta mais fcil que a de outros animais
empregados como alimento.
Por outro lado, quase todos os plantis de aves podem estar contaminados devido s caractersticas
zoonticas do microrganismo com a necessidade de extensa atividade de controle por parte dos responsveis pela sua produo. As infeces determinadas por estes microrganismos so comumente
associadas a um sistema de criao intensiva, atingindo aves jovens (at duas semanas de idade),
sendo os adultos portadores assintomticos, por longo perodo (Hofer et al., 1997). Embora todas as
salmonelas possam ser reconhecidas como um patgeno potencial, algumas responsveis por infeco no homem, esto presentes no intestino de aves sadias, sem detrimento para o hspede sendo,
porm, capazes de contaminar o meio ambiente e outras aves, atravs das fezes (Poppe, 2000). O
nmero de bactrias pode ser baixo em princpio, porm a contaminao dos produtos pode ocorrer
alm da cadeia produtiva, durante o transporte, processamento, embalagem, estocagem, distribuio e preparo para o consumo, aumentando substancialmente o risco de infeco (OMS, 1988 e
2002; Logue et al., 2003).
A contaminao cruzada o fator principal no caso de alimentos elaborados como cereais, chocolate, doces, produtos a base de soja, produtos a base de ovos pasteurizados, leite em p, ingredientes
de raes para animais (farinha de peixe, de penas e de ossos) e condimentos. A contaminao durante a elaborao ou preparo pode resultar do contato direto com alimentos antes de sua coco ou
proveniente do meio ambiente, como no caso de superfcies contaminadas em cozinhas ou indstrias
(OMS, 1988; DANMAP, 2003).
Comparando com outros bastonetes Gram negativos, as salmonelas so relativamente resistentes a
vrios fatores ambientais. A adaptabilidade fisiolgica de Salmonella demonstrada por sua habili-

24

dade de crescer na presena ou ausncia de ar, bem como atmosfera modificada como por exemplo,
em nitrognio embora apresente crescimento reduzido, do mesmo modo que em presena de 80%
CO2. Entretanto multiplica-se facilmente 8-11C em presena de 20-50% CO2. Prolifera em pH entre
7.0 e 7.5 (extremos 3.8 9.5), temperatura de 35 43C (extremos 5 a 46C) e uma atividade hdrica
(0,94 a 0,99), ocorrendo variaes entre sorovares e/ ou cepas ou ainda de acordo com a interrelao
entre diferentes fatores. capaz de sobreviver por longos perodos em refrigerao e particularmente
em alimentos de origem animal sobrevive ao congelamento.
Nos produtos secos como o chocolate, o cacau em p, as especiarias ou o leite em p e em produtos
congelados como os sorvetes, o normal a sobrevivncia por perodos de tempo prolongados. A
bactria sensvel ao calor, no sobrevivendo temperatura superior a 70C, no entanto a termorresistncia pode incrementar-se com menor coeficiente de atividade de gua, como por ex. inativao
que ocorre rapidamente em temperatura de pasteurizao em alimentos com atividade de gua
0,95 (OMS, 1988, Franco & Landgraf, 1996, Forsythe, 2002).
A associao entre tolerncia ao sal e cido resistncia so interdependentes. Certos processos como
salmoura (9,0%) e defumao tm efeito limitado na sobrevivncia das salmonelas, podendo sobreviver por vrios meses na salmoura com cerca de 20% de sal, em produtos de elevado teor protico ou de gordura. Como exemplos podem ser citados a carne seca defumada e o pescado, onde
apresentam capacidade de sobrevivncia de vrias semanas a meses. A relativa resistncia que estes
microrganismos apresentam dessecao, congelamento, salmoura e defumao, explica porque
sobrevivem em muitas classes de alimentos. O efeito bactericida das condies cidas varia de acordo
com a natureza do cido utilizado no processo, onde os cidos actico e propinico so mais inibitrios que os cidos ltico e ctrico. Deve ser salientado que, em alimentos com elevado teor lipdico,
como ovos e chocolate, as salmonelas ficam dentro dos glbulos de gordura, protegidas, no sendo
afetadas pelas enzimas digestivas ou pela acidez gstrica, fato este que reduz a dose infectante (Forsythe, 2002).

II. GNERO ENTEROCOCCUS

1. CARACTERSTICAS GERAIS, NOMENCLATURA E CLASSIFICAO
Enterococos so bactrias amplamente distribudas na natureza sendo encontrados no solo, alimentos, gua, animais, pssaros e insetos, fazendo parte, tambm, da microbiota dos tratos gastrintestinal e geniturinrio de humanos e de outros animais. Podem ser encontrados nas fezes de adultos
humanos, sendo E. faecalis e E. faecium, as principais espcies isoladas (Teixeira & Facklam, 2003).
Enterococos tem sido reconhecido como patgeno humano, em potencial, desde a virada do sculo
XX. A partir de 1912, esta bactria tem sido associada com uma srie de doenas como endocardites,
infeces do trato urinrio, dentria, abdominal, de feridas (principalmente durante a Primeira Guerra Mundial), sepsis puerperale osteomielite. Infeco do trato urinrio a mais comum patologia
enterocccica humana, normalmente ocorrendo em pacientes hospitalizados, seguida pela infeco
intra-abdominal e plvica, neonatal, bacteremia e endocardite. (Moellering Jr et al., 1970; Murray,
1990; Miranda, Singh, Murray, 1991; Hall et al., 1992).
A importncia do enterococo como agente etiolgico de infeces hospitalares bem documentada,
sendo, portanto, difcil estabelecer a fonte de infeco, j que este organismo pode ter como origem
a auto infeco (Dunne & Wang, 1997; Mcdonald et al., 1997).
Como causa de infeco hospitalar, os enterococos foram classificados como o terceiro agente mais
comum pelo National Nosocomial Infection Surveillance System (NNISS) em 1984 nos EUA, passando para segundo lugar no perodo de 1986 a 1989. Os enterococos so responsveis por cerca
de 10% de todas as infeces hospitalares, das quais 17% correspondem ao trato urinrio e 7%, s
bacteremias (Schaberg, Culver, Gaynes, 1991; Boyle et al., 1993).

25

Os fatores de risco associados infeco hospitalar por enterococos podem ser: o uso de antibiticos
aos quais a bactria resistente (cefalosporinas e aminoglicosdeos); o uso de mltiplas vias de acesso
vascular, cateter urinrio e outros materiais invasivos; a gravidade da doena e indivduos debilitados;
o uso de antibiticos que no possuem ao efetiva sobre enterococos; os pacientes transplantados;
e a combinao de um ou mais fatores (George & Uttley, 1989; Boyce, 1997; Eliopoulos, 1997).
A resistncia vancomicina, em amostras de Enterococcus isoladas na clnica, foi primeiramente descrita em 1988 e, desde ento, tm sido reportados em todo o mundo como responsveis por surtos
de infeco hospitalar (Frieden et al., 1993; Kjerulf, Pallesen, Westh, 1996; Melhus & Tjernenberg,
1996; Uttley et al., 1988).
A vancomicina tem sido escolhida para o tratamento de infeces desde 1950, e seu uso foi moderado at a dcada de 1980, quando, a partir de ento, passou a ser extensivamente utilizada
(Woodford, 1998). Mltiplos genes esto envolvidos na gerao da resistncia vancomicina e seis
fentipos esto descritos: VanA, VanB, VanC, VanD, VanE e VanG, sendo estes associados com diferentes ligases e stios alvos da vancomicina na parede celular dos enterococos (Leclercq et al., 1988;
Lai & Kirsch, 1996; Perichon, Reynolds, Couvarlin, 1997; Fines et al., 1999).
A mltipla resistncia dos enterococos aos antimicrobianos poder refletir em dificuldades teraputicas, devido a sua habilidade de adquirir novas caractersticas de resistncia a altas concentraes
de gentamicina, penicilina e vancomicina (Murray, 1991; Frieden et al., 1993; Leclercq & Couvarlin,
1997; Murray, 1998).
Taxinomicamente o nome entrocoque foi primeiramente utilizado em uma publicao francesa
em 1899, sendo proposto para enfatizar a origem intestinal destas bactrias Gram-positivas (Thiercelin, apud Murray, 1990). Em 1906, o nome Streptococcus faecalis foi dado a uma bactria isolada de
um caso de endocardite, por Andrewes & Horder (apud Murray, 1990). No incio da dcada de 1930,
Sherman (1937) props um esquema de classificao que dividiu os estreptococos em quatro grupos
taxonmicos: piognicos, viridans, lcticos e enterococos, sendo essa classificao correlacionada
com o esquema sorolgico criado por Lancefield. A motilidade do enterococo foi notada em 1935
e, como se assemelhava a um Streptococcus faecium, ficou conhecido como S. faecium subespcie
mobilis (Langston, Gutierrez e Bouma, 1960). Em 1955, foi descrito um enterococo denominado
malodoratus devido ao seu mau-cheiro (Collins et al., 1984). Em 1957 Gradual observou a produo de um pigmento amarelo por alguns desses enterococos mveis, os quais posteriormente foram
chamados de S. faecium variao casseliflavus (Mundt & Graham, 1968).
Desde o incio do sculo XX, vrias espcies de enterococos passaram a ser reconhecidas sendo, em
meados de 1960, incorporadas para as nomenclaturas oficiais. Em adio as espcies mais conhecidas como S. faecalis, S. bovis, S. durans, S. zymogenes e S. liquefaciens, outras espcies passaram a
ser isoladas no somente de humanos como tambm de animais, alimentos e plantas.
Estudos de hibridizao DNA-DNA e DNA-rRNA, realizados na dcada de 1980, mostraram diferenas entre enterococos e estreptococos e, em 1984, essas evidncias genotpicas demonstraram claramente que essas bactrias deveriam ser classificadas separadamente, sugerindo a criao do gnero
Enterococcus (Schleifer & Kilpper-Blz, 1984). Os trabalhos publicados que deram suporte para a
criao deste novo gnero so citados no Manual de Bergey em 1984, aceitando a incorporao do
Enterococcus na nomenclatura oficial (Schleifer, 1984).
Atualmente o gnero formado por 21 espcies: E. avium, E. gilvus, E. malodoratus, E. pallens, E.
pseudoavium, E. raffinosus, E. saccharolyticus, E. faecalis, E. faecium, E. casseliflavus, E. gallinarum,
E. mundtii, E. dispar, E. durans, E. hirae, E. porcinus, E. ratti, E. asini, E. cecorum, E. sulfureus e E.
columbae, sendo que a maioria dessas so de ocorrncia rara na clnica humana (Teixeira & Facklam,
2003).
O gnero Enterococcus consiste de cocos Gram-positivos, anaerbios facultativos e que podem se
apresentar na forma de cadeias curtas, aos pares ou como clulas nicas. Os enterococos no possuem enzimas citocrmicas e, portanto, so catalase-negativo, salvo algumas cepas que podem

26

produzir uma pseudocatalase (Scheifler, 1984; Facklam & Carey, 1985). Em laboratrios clnicos,
o gnero tem sido identificado presuntivamente, por muitos anos, pela sua morfologia atravs da
colorao de Gram, pela capacidade de crescimento na presena da bile, hidrlise da esculina e crescimento em meio lquido contendo 6,5% de NaCl. Atualmente, esta identificao presuntiva precisa
ser complementada com outros testes bioqumicos, pois cepas do gnero Lactococcus, Leuconostoc
e Pediococcus, que apresentam reao positiva para os testes presuntivos acima citados, j foram
isolados de infeces humanas (Facklam, 1972; Facklam, 1980; Facklam, Sham, Teixeira, 1999). O
Quadro 3 mostra os principais testes utilizados na rotina laboratorial para a identificao presuntiva
do gnero Enterococcus (Facklam, Sham, Teixeira, 1999).

Quadro 3. Caractersticas fenotpicas utilizadas para a identificao presuntiva

de Enterococcus e gneros relacionados
Crescimento em
Suscetibilidade Produo
Teste da
vancomicina
da PYR Bile-esculina 6,5% NaCl
10oC
Enterococcus
R ou S
+
+
+
+
Leuconostoc
R
v
v
+
Pediococcus
R
v
+
Vagococcus
S
+
+
+
+
Streptococcus
S
v
v
Lactococcus
S
v
v
+
+
Gneros

45oC
+
v
v
v
v
v

PYR: pyrrolidonyl-arylamidase
+: >90% positivo
-: <10% positivo
v: varivel
R: resistente
S: sensvel
Fonte: Facklam, Sham, Teixeira, 2003

A identificao das espcies do gnero Enterococcus, atravs dos testes bioqumicos convencionais
foi inicialmente proposta por Facklam & Collins (1989), modificada por Facklam & Sham (1995) e recentemente atualizada por Teixeira & Facklam (2003). As espcies do gnero Enterococcus so divididas em cinco grupos (I-V) com base em trs provas bioqumicas: fermentao do manitol, da sorbose,
e dehidrolao da arginina. Outras caractersticas fenotpicas tambm so avaliadas para caracterizar
as diferentes espcies de enterococos e gneros relacionados, como mostra a Quadro 4.

27

Quadro 4. Caractersticas fenotpicas utilizadas para a identificao das espcies

de Enterococcus e gneros relacionados
Espcies
MAN SOR
Grupo I
+
+
E. avium
+
+
E. gilvus
+
+
E. malodoratus
+
+
E .pallens
+
+
E. raffinosus
+
+
E. pseudoavium
+
+
E. saccharolyticus
Grupo II
+*
E. faecalis
+
Lactococcus ssp
+*
E. faecium
+
E. casseliflavus
+
E. mundtii
+*
E. gallinarum
Grupo III
E. dispar
E. durans
E. hirae
E. porcinus
E. ratti
Grupo IV
E. asini
E. cecorum
E. sulfureus
Grupo V
+
E. columbae
+
Vagococcus sp.

ARG

ARA

SBL

RAF

TEL

MOT

PIG

SUC

PYU MGP

+*

+*

-b

+*

+*

-*

+*

+*

+*

+*

MAN: manitol; SOR: sorbose; ARG: arginina; ARA: arabinose; SBL: sorbitol; RAF: rafinose; TEL: telurito a 0:04%;
MOT: motilidade; PIG: pigmento; SUC: sucrose; PYU: piruvato; MGP: metil--glicopiranosida; +: >90% positivo;
-: <10% positivo; v: varivel; *: excees ocasionais (<3% das cepas apresentam reaes discordantes);
R: resistente; S: sensvel.
Fonte: Teixeira & Facklam, 2003.

2. HABITAT NATURAL
Enterococos so habitantes da microbiota intestinal, podendo ser encontrados em quase todos os
animais, desde insetos domsticos a humanos. Esta bactria pode ser isolada da vegetao e de
superfcies de guas, que provavelmente foram contaminadas por excrementos de animais ou por
gua de esgoto no tratado (Moellering Jr, 1992; Jett, Huycke, Gilmore, 1994). Em humanos, a
concentrao de enterococos nas fezes de aproximadamente 108 UFC/g (Rice et al., 1995). Embora
a cavidade oral e o trato vaginal possam estar colonizados por enterococos, esta bactria isolada
destes stios com uma menor freqncia (Beragie et al., 1975; Kurrie et al., 1981; Smyth et al.,1987;
Rice et al., 1995). E. faecalis a principal espcie isolada do trato gastrointestinal humano, sendo
que as espcies E. faecium, E. gallinarum e E. casseliflavus, tambm podem ser encontradas, porm
em propores variadas (Teixeira & Facklam, 2003).
28

3. CARACTERSTICAS CLNICAS E PATOGENIA

Enterococcus tem sido reconhecido como patgeno humano em potencial desde a virada do sculo
XX. Em 1912 essa bactria comeou a ser associada a uma srie de infeces e, a partir de 1920,
passaram a ser publicadas vrias revises (Sherman, 1937). A publicao original da presena desse
microrganismo em pacientes com enterites, apendicites e meningites foi realizada por Thiercelin em
1899 (apud Murray, B.E., 1990).
O papel dos enterococos nas infeces urinrias foi primeiramente reportado em 1906, sendo confirmado, posteriormente, por outros pesquisadores (Sherman, 1937; Evans & Chin, 1947). Durante
a Primeira Guerra Mundial, alguns autores relataram a associao dos enterococos com infeces
de feridas, embora no tenha sido estabelecido se a bactria estava colonizando ou causando a
infeco. Outras infeces por enterococos foram reportadas no incio de 1930 como quadros de
osteomielite e infeces dentrias, entre outras (Evans & Chin, 1947). Recentemente, os enterococos
tm sido reconhecidos como causa de infeco hospitalar, em pacientes recebendo antibioticoterapia
(Murray, 1990).
A presena dos enterococos no trato urinrio, por muitas vezes, pode ocorrer como uma colonizao
assintomtica, sendo a urina a principal fonte de isolamento em humanos (Moellering Jr, 1992; Murray
& Mederski-Samaroj, 1983). Na maioria das vezes essas infeces so hospitalares e podem levar a
casos de prostatite e abcessos perinfricos (Gross et al., 1976; Morrison & Wenzel, 1986; Eldestein
& Mccabe, 1988). Essas infeces podem estar associadas com instrumentao ou anormalidades
estruturais do trato urinrio, com infeces urinrias recorrentes e com antibioticoterapia prvia
(Warren, Tenney, Hoopes, 1982; Musher, 1990; Moellering Jr, 1992).
Infeces intra-abdominais e plvicas por enterococos so as mais prevalentes aps as infeces
urinrias. Quando so isolados a partir desses locais, freqentemente fazem parte de uma infeco
polimicrobiana e nem sempre possvel estabelecer o seu papel como causa primria da infeco
(Musher, 1990; Moellering Jr, 1992). Entretanto, j de conhecimento que este microrganismo
pode contribuir para a formao de abcessos abdominais e plvicos levando a um quadro de sepsis
(Hoffman & Mollering Jr, 1987; Musher, 1990; Murray, 1990; Mollering Jr, 1992).
A bacteremia o terceiro tipo mais comum de infeco (Moellering Jr, 1992), sendo nos pacientes
com endocardite, decorrente de infeces do trato urinrio, intravenosas e intra-arteriais, e infeces
intra-abdominais (Evans & Chin, 1947; Maki, 1981; Shlaes, Levy, Wolinsky, 1981; Malone et al.,
1986; Gulberg, Homann, Phair, 1989). A alta taxa de mortalidade associada com bacteremia
por enterococos pode estar associada ao comprometimento clnico do hospedeiro (Maki, 1981;
Whiteside, Moore, Ratzan, 1983; Hoffman & Moellering Jr, 1987; Maki & Agger, 1988; Gullberg,
Homann, Phair, 1989).
Enterococos causam cerca de 10 a 20% das endocardites bacterianas, principalmente em idosos.
Diferente da bacteremia, a endocardite freqentemente adquirida na comunidade (Kaye, 1982;
Musher, 1990; Moellering Jr, 1992), e suas principais portas de entrada so o trato geniturinrio e a
via biliar (Mandell et al., 1970; Wilson et al., 1984). Um outro grupo de risco importante que pode
adquirir endocardite o usurio de drogas (Reiner, Gopalakrishna e Lerner, 1976).
Outras infeces, como meningite, so raras, sendo principalmente encontradas em recm-nascidos
em estado grave. Em adultos, infeco do sistema nervoso central ocorre em pacientes com histria
de cirurgia e ou quimioterapia, assim como osteomielite e infeces pulmonares (Murray, 1990);
Moellering Jr, 1992; Scharberg, Culver, Gayness, 1991; Emori & Gayness, 1993, Teixeira & Facklam,
2003).

29

4. ENTEROCOCOS NOS ALIMENTOS

Os enterococos esto amplamente distribudos no ambiente e principalmente no trato gastrintestinal
dos homens e animais. Enterococcus faecalis (E. faecalis) a espcie predominante no homem, embora alguns indivduos em alguns pases apresentem a espcie predominante Enterococcus faecium
(E. faecium) (Devriese & Pot, 1995). Entretanto, Mundt (1986) demonstrou que comum a presena
de E. faecalis em diversos alimentos e que nem sempre a presena do mesmo est associada com
a contaminao fecal do alimento. Em 1992, a Unio Europia estabeleceu um nvel mximo para
a presena de Coliformes e Escherichia coli, ambos considerados indicadores de higiene, quando
no havia limites estabelecidos para a presena dos enterococos. Verificou-se que a deteco desta
bactria, no processamento dos alimentos de uma forma em geral, apresentou pouca importncia
como parmetro de indicao de higiene (Birollo et al., 2001). Isto se deu devido os E. faecalis, E.
faecium e Enterococcus duran estarem presentes na maioria dos animais de produo tais como, sunos, ovinos, bovinos e tambm encontrarem-se distribudos no solo, gua, plantas, vegetais e insetos
(Mundt, 1986). Ainda segundo o mesmo autor, a resistncia dos enterococos s temperaturas de
pasteurizao, e sua adaptabilidade diferentes substratos e condies de crescimento (baixa e altas
temperaturas, pHs extremos e salinidade) implica que os mesmos podem ser encontrados em qualquer alimento de origem animal (carne ou leite) ou no, alimentos processados crus ou que tenham
sido submetidos tratamento trmico. Isto significa que estas bactrias podem ser encontradas em
qualquer ponto do fluxograma de produo de diversos tipos de alimentos.
Segundo Vancanneyt et al. (2002) e Franz et al. (2003) os enterococos tm apresentado significativa
importncia na tecnologia do processamento dos alimentos, devido capacidade que os mesmos
tm de promover a fermentao devido produo do cido ltico (por exemplo: em salames, salsichas e queijos) e produzir bacteriocinas (enterocinas). Recentemente, h a publicao de pesquisas
com a utilizao de enterococos como culturas iniciadoras starters ou co-starters sendo neste
ltimo adjuvantes de processos fermentativos. A maior parte deste tipo de pesquisa foi focada na
anlise bioqumica e tecnolgica de cepas de enterococos para serem utilizados no processamento
tecnolgico de queijos e em produtos crneos fermentados. Entretanto, a seleo de cepas de enterococos para serem utilizados no processamento de alimentos tem sido uma difcil tarefa devido ao
potencial risco que esses microrganismos oferecem sade humana.
O risco potencial sade humana est no fato de algumas cepas de enterococos apresentarem
resistncia vrios antibiticos, podendo ser resistncia natural (intrnseca) e/ ou adquirida (transferncia). Exemplos de resistncia intrnseca encontram-se a resistncia vancomicina (Tipo VanC)
em Enterococcos gallinarum, e resistncia para estreptomicina em E. faecalis, bem como a resistncia para isoxazolylpenicilinas, cefalosporinas, monobactmicos, aminoglicosdeos (baixas concentraes), lincosamidas (maioria) e polimixinas. A resistncia para ampicilina (especialmente em E.
faecium), tetraciclinas, macroldeos e aminoglicosdeos (altas concentraes), cloranfenicol, trimetropin/ sulfamethozaxole, quinolonas e estreptomicina (em E. faecium e outras espcies relatadas)
so adquiridas, bem como a resistncia para glicopeptdeos (vancomicina, sendo que esta possui os
genes de resistncias tipos vanA, vanB, vanD e vanE ). Sendo assim, a ampicilina, a vancomicina e a
gentamicina so os antibiticos de eleio para tratamento de infeces clnicas, com vrias cepas de
enterococos resistentes a essas bases.
Os enterococos resistentes antibiticos encontram-se amplamente distribudos nos alimentos. Eles
tm sido detectados em carnes e produtos derivados, leites e produtos lcteos derivados, dentre
outros tipos de alimentos destinados ao consumo humano (Foulqui Moreno et al., 2006). Franz et
al., (2001) encontraram traos de resistncia adquirida em alimentos oriundos da Europa, entretanto
estes mesmos autores verificaram que em geral as cepas no apresentaram resistncia antibiticos
relevantes em clnica. Giraffa (2002) enfatiza ainda o possvel papel desempenhado pelos enterococos resistentes aos antibiticos, principalmente os resistentes vancomicina, como sendo os alimentos um reservatrio natural na disseminao de traos de resistncia antibiticos no ambiente. Este
mesmo autor verificou ainda a existncia de ligao entre antibiticos utilizados em animais de produo e a presena em humanos de enterococos resistentes a antibiticos, sendo esta transmisso
ocorrida via cadeia alimentar. Logo, a presena destes microrganismos nos alimentos podem carrear
ao homem potenciais fatores de virulncia que podem comprometer a sade humana.

30

III. RESISTNCIA MICROBIANA

1. CARACTERSTICAS GERAIS E CONCEITOS
A resistncia microbiana pode ser classificada como natural ou intrnseca, e adquirida. A resistncia
natural decorre de uma propriedade comum aos microrganismos da espcie, tal qual ocorre com os
bacilos Gram-negativos (Escherichia coli, Proteus) resistentes penicilina G. Essas bactrias sintetizam
enzimas que clivam esse antibitico, denominadas beta-lactamases, e possuem, alm disso, envoltrios que dificultam o acesso da penicilina ao seu alvo molecular. A resistncia adquirida resultante
da aquisio de mecanismos normalmente ausentes nas bactrias da espcie em questo. A maioria
dos isolados de Staphylococcus aureus no apresentava resistncia penicilina G a princpio. Porm,
j nos primeiros anos de uso desse antimicrobiano, foram detectadas linhagens resistentes. Outro
exemplo de resistncia adquirida foi observado nos enterococos resistentes vancomicina, objeto
de grande preocupao na rea da sade (Monroe & Polk, 2000; Palermo-Neto & Titze-de-Almeida,
2002; Alekshun & Levy, 2007).
Antimicrobianos so medicamentos que atuam causando a morte ou a inibio do crescimento de
microrganismos. Podem ser administrados em animais para tratar ou prevenir a ocorrncia de doenas infecciosas e, tambm, como aditivos, neste caso visando melhorar o desempenho zootcnico de
animais de produo. O uso dessas substncias objeto de grande preocupao na rea da sade,
considerando-se os riscos de resduos nos produtos derivados dos animais e de desenvolvimento de
resistncia bacteriana, conforme ser abordado a seguir.
A resistncia microbiana pode ser conceituada como a habilidade de um microrganismo continuar
a multiplicar-se ou persistir na presena de nveis teraputicos de determinado agente antimicrobiano.
As conseqncias desse fenmeno biolgico natural, de valor evolutivo, podem ser interpretadas a
partir das vises de diferentes reas do conhecimento (Titze-de-Almeida & Palermo-Neto, 2005), a
saber:
Viso microbiolgica: linhagens de bactrias resistentes apresentam uma
concentrao inibitria mnima (MIC) superior quela normalmente encontrada
em sua espcie. Entenda-se MIC como a menor concentrao de um agente
antimicrobiano capaz de prevenir o crescimento visvel de um microrganismo em
meios de cultura para testes de sensibilidade;
Viso clnica: a infeco no ser mais controlada, pois a bactria sobreviver
antibioticoterapia;
Viso farmacolgica: o antimicrobiano, mesmo atingindo nveis adequados nos
diversos compartimentos orgnicos, no ser efetivo, pois seu mecanismo de
ao est prejudicado;
Viso molecular: a bactria resistente apresenta genes que codificam
protenas envolvidas em mecanismos moleculares que interferem na ao dos
antimicrobianos;
Viso evolutiva: a bactria resistente apresenta material gentico que lhe
confere vantagem competitiva e que garante sua sobrevivncia e proliferao de
linhagem na presena do antimicrobiano, condio esta normalmente limitante
para os indivduos sensveis desta populao.

31

2. MECANISMOS DE RESISTNCIA
As bactrias podem apresentar resistncia microbiana em funo de trs mecanismos principais: inativao enzimtica da molcula do antimicrobiano, alterao do alvo celular deste agente e reduo
do nvel intracelular do antimicrobiano (Alekshun & Levy, 2007).
A inativao enzimtica decorre da ao de enzimas bacterianas sobre o princpio ativo do antimicrobiano, como ocorre em S. aureus produtores de enzimas beta-lactamases (penicilinase e cefaloporinase) que hidrolisam o anel beta-lactmico de penicilinas e cefalosporinas. O segundo mecanismo
de resistncia consiste em alterar (camuflar) a estrutura da molcula-alvo do antimicrobiano. Como
exemplo, citam-se os enterococos resistentes vancomicina que substituem o resduo de alanina por
lactato, reduzindo a afinidade da vancomicina pelo seu alvo bacteriano. Finalmente, bactrias podem
apresentar resistncia quando possuem mecanismos para reduzir a concentrao intracelular do antimicrobiano, como as bombas de efluxo. Este mecanismo utilizado por estafilococos resistentes a
antibiticos macroldios, como a eritromicina (Walsh, 2000; Wright, 2003).

3. CONSEQNCIAS PARA A SADE HUMANA

A possvel transferncia da resistncia microbiana dos animais para o homem um tema de grande
importncia e que tem mobilizado esforos de controle por parte de vrias instituies internacionais, incluindo OMS, OIE e Codex Alimentarius. Nesse sentido, as duas principais preocupaes so a
transferncia do(s) microrganismo(s) resistente(s) que pode(m), assim, causar uma infeco de difcil
controle, e a transferncia do(s) gene(s) de resistncia do(s) microrganismo(s) de origem animal para
o(s) microrganismo(s) de origem humana.
Quanto ao primeiro aspecto, sabe-se que doenas infecciosas de origem alimentar ocorrem quando
bactrias patognicas do hospedeiro ou oportunistas so ingeridas e, posteriormente, superam barreiras orgnicas como, por exemplo, o pH e as enzimas gstricas, o muco, a microbiota normal do
TGI e a ao de leuccitos do sistema imune, podendo, assim, causar intoxicao ou infeco. As infeces so a primeira preocupao no que se refere ingesto de alimentos contaminados com bactrias resistentes, uma vez que a terapia antimicrobiana pode ser ineficaz. Porm, a instalao de um
processo infeccioso causado por bactrias resistentes um processo que depende de vrias etapas
sucessivas. Assim, uma vez selecionada, uma bactria resistente dever contaminar a carcaa durante o processamento, ultrapassar as barreiras que surgem durante a preparao dos alimentos (calor,
condimentos, etc.), ser consumida pelo ser humano, vencer as barreiras naturais do TGI humano,
multiplicar-se e produzir a infeco e, finalmente, resistir aos tratamentos convencionais, comprometendo o sucesso da teraputica. Deve-se considerar que infeces alimentares podem de fato ocorrer,
trazendo, assim, conseqncias para a sade do ser humano. A segunda preocupao, conforme
citado, seria a transferncia de genes de resistncia das bactrias de origem animal para aqueles presentes na microbiota humana que, posteriormente, poderiam causar a infeco. A transferncia de
genes entre bactrias j foi demonstrada experimentalmente, mas a magnitude deste fenmeno, em
termos de sade publica, ainda no foi estabelecida (Appley et al., 2001; Barton, 1998).
Cabe finalmente destacar que o risco de ocorrncia de uma infeco a partir da ingesto de alimentos varia de acordo com o microrganismo em questo. Assim, a OMS dividiu os agentes microbianos
considerados prioritrios para monitoramento de resistncia em duas categorias, aqueles zoonticos, incluindo Salmonella spp. e Campylobacter spp. e aqueles indicadores de contaminao, que
compreendem Enterococcus e Escherichia coli. Apesar destes quatro gneros possurem potencial de
causar infeces a partir de alimentos de origem animal, o risco est melhor caracterizado para os
zoonticos. As infeces alimentares causadas por linhagens de Salmonella spp. e de Campilobacter
spp. com resistncia a antimicrobianos j esto devidamente caracterizadas na literatura cientfica
(WHO/FAO, 2000; WHO/FAO, 2001).
Apesar dos enterococos apresentarem pouca virulncia, importante ressaltar que essa bactria
est sendo gradativamente reconhecida como causa de srios problemas sade, especialmente em

32

pacientes hospitalizados. Esse fato tem como explicao, a capacidade desse microrganismo resistir ao de muitos antimicrobianos. Os enterococos apresentam notvel habilidade de adquirir e
transferir novos determinantes de resistncia (Sapico et al., 1989; Murray, 1990; Moellering Jr, 1992;
Arthur & Couvarlin, 1993; Poyart, Celli, Trieu-Cuot, 1995).
A resistncia aos antimicrobianos pode ser de dois tipos: intrnseca ou adquirida. A resistncia intrnseca baseada em genes presentes no cromossomo, que tipicamente no so transferveis e incluem
resistncia s penicilinas semi-sintticas, cefalosporinas, baixo nvel de resistncia aos aminoglicosdeos e baixo nvel de resistncia clindamicina, lincomicina, fluorquinolonas e trimetoprim-sulfametoxazol. A resistncia adquirida normalmente resulta de uma mutao no DNA ou pela aquisio
de um novo gene. Esta aquisio pode ocorrer por transformao, transduo ou conjugao. Os
enterococos podem apresentar a resistncia ao cloranfenicol, tetraciclina, macroldeos, lincosaminas e estreptograminas, o alto nvel de resistncia aos aminoglicosdeos, aos beta-lactmicos, aos
glicopeptdeos e mais recentemente s quinolonas.(Teixeira & Facklam, 2003; Moellering Jr, 1992;
Huyche, Sham, Gilmore, 1998; Cetinkaya et al., 2000).

4. SALMONELLA E RESISTNCIA AOS ANTIMICROBIANOS

Considerando que a principal via de transmisso de Salmonella spp. est na cadeia alimentar, a presena em animais, criados com objetivo comercial, mostra que esse microrganismo considerado
como o mais incidente e relevante agente causal de enfermidade entrica. Contudo, a salmonelose
uma zoonose e seu controle um trabalho rduo, tendo em vista a emergncia de novos sorovares
e a reemergncia de outros em determinadas reas, tanto nos pases em desenvolvimento quanto
naqueles industrializados.
Soma-se neste contexto, o aumento da resistncia de Salmonella sp. aos antimicrobianos, com o
percentual elevando-se de 17% na dcada de 1970 para 31% ao final dos anos 1980 (WHO, 1997;
Neto, 2001), incluindo-se quelas de ltima gerao, como por exemplo, a resistncia s quinolonas
(Molbak, 1999, NARMS, 2006).
A incidncia de resistncia bacteriana a antimicrobianos representa risco sade humana e animal.
Esse tema de extrema importncia tem sido objeto de ateno de instituies como a OMS, OIE e
Codex Alimentarius, que vm discutindo solues globais para o problema.
A fiscalizao de produtos de uso veterinrio est prevista na legislao brasileira desde o final da
dcada de 1960 e regulamentada no que diz respeito utilizao, fabricao e comercializao.
Entre os produtos veterinrios de uso autorizado no Brasil, destaca-se o grupo dos antimicrobianos,
frmacos utilizados para preveno e tratamento de doenas infecciosas, bem como para melhorar
o desempenho de animais produtores de alimentos.
A utilizao dos antimicrobianos tem como base informaes cientficas e tcnicas, e devem-se respeitar as boas prticas de uso de medicamentos veterinrios. Na escolha devem-se considerar a eficcia, aplicabilidade, segurana e custo. De acordo com Bottezini (2003) os antibiticos so tambm
estimulantes do crescimento, atuando no intestino, de modo a selecionar a microbiota intestinal e
eliminar microrganismos produtores de toxinas, alm de melhorar o aproveitamento dos alimentos.
Sua introduo nas raes, visando benefcios para o crescimento, iniciou-se a partir dos trabalhos de
Moore et al., (1946) e Stockstad & Jukes (1950). A partir de ento, vm sendo utilizados continuamente na alimentao animal como promotores de crescimento, na melhoria da converso alimentar
e para diminuir o desperdcio na produo, alm de auxiliar na teraputica e profilaxia de infeces
bacterianas, tendo mostrado ao longo do tempo resultados positivos inclusive no controle de infeces prevalentes em fazendas e estaes experimentais de criao (Lopes et al, 2006).
Devido a crescente demanda de produo, na avicultura industrial imprescindvel o uso de tcnicas
e/ou aes que diminuam a incidncia de doenas no plantel avcola. Por muitas dcadas, os promotores de crescimento tiveram e ainda tm grande importncia na produo de protena animal
devidos s inmeras vantagens que oferecem, neutralizando ou amenizando com isto os efeitos
prejudiciais desses produtos.
33

Contudo a utilizao rotineira e indiscriminada dos antibiticos tem levado ao aparecimento de populaes bacterianas resistentes, resultantes do compartilhamento e transferncia de genes de resistncia entre microrganismos da microbiota normal e tambm para diferentes patgenos, incluindo
os de natureza zoontica.
Entre os frmacos empregados, reconhecido que alguns (bacitracina de zinco, clortetraciclina,
oxitetraciclina, penicilina, estreptomicina, eritromicina, oleandomicina, virginamicina, flavomicina e
lincomicina), favorecem em torno de 10% o ganho de peso, e, de 10% uma melhor converso alimentar. Usualmente as raes avcolas contm 2, 4, 10 ou 40 g/t de algum tipo de antibitico, para
estimular o crescimento e melhorar a converso alimentar.
O uso na teraputica tambm requer o conhecimento ou suspeita quanto ao agente infeccioso e o
seu perfil de sensibilidade, assim como a avaliao das condies clnicas do animal. Contempla um
regime posolgico, cuja dosagem e durao possibilitam o controle do processo infeccioso, reduzindo-se riscos de desenvolvimento de resistncia bacteriana.
Entretanto, seu uso feito, muitas vezes, de forma desordenada, tanto no setor agrcola, em que
utilizado atravs de asperso direta, quanto na cadeia de produo de alimentos de origem animal,
na qual so incorporados s raes. Tal condio leva seleo de um pool de genes, transferveis
para bactrias comensais presentes no TGI humano ou enteropatgenos, levando a uma presso
seletiva, que favorece a sobrevivncia e disseminao atravs da cadeia alimentar (Hasman, 2005).
A resistncia antimicrobiana usualmente extracromossmica, cuja disseminao pode ocorrer a
nvel clonal, associada replicao cromossmica, atravs de replicons, transferncia de plasmdeos
ou migrao de genes com replicao de transposons, os quais coexistem na natureza e se multiplicam de forma exponencial, tendo em vista que durante a duplicao do DNA podem ser associados
elementos de transposio. Resistncia a 12 drogas foi observada em um simples plasmdeo de uma
enterobactria (LeDuc,1995, In: Rodrigues, 2001).
Alguns Gram-negativos podem estar associados a metais pesados, portanto a presena de mercrio,
cdmio ou outros metais pesados no ambiente, pode encorajar a proliferao de microrganismos
que contm genes de resistncia antimicrobiana. Se por um lado estas caractersticas vm evoluindo
significativamente durante as duas ltimas dcadas, o impacto econmico na comunidade, somente
est comeando.
Embora a terapia antimicrobiana no seja recomendada na maioria das infeces diarricas humanas, ela indicada nas infeces invasivas ou ainda para pacientes imunodeprimidos. Na prtica, seu
uso se faz muitas vezes de modo indiscriminado, resultando no aumento e disseminao de cepas
resistentes aos antimicrobianos, podendo representar um grave problema de sade pblica, especialmente nos pases emergentes.
Como resultados, podem ser citados diferentes situaes como quelas observadas no sudeste da
sia, em S.Typhi com 50% de resistncia ao cloranfenicol, tetraciclina e ampicilina, levando na opo
teraputica emprica a utilizao de fluoroquinolonas, exceto em crianas nas quais estas drogas
apresentam toxicidade, sendo substitudas por cefalosporinas de terceira gerao, como, por exemplo, ceftriaxona.
Como abordagem da evoluo histrica da resistncia de Salmonella spp. aos antimicrobianos (Rodrigues, 2001), em nvel de Brasil, inmeras avaliaes individuais, relacionadas ao seu monitoramento
vm sendo efetuadas desde a dcada de 1950, tendo Cisalpino (1957) analisado a sensibilidade de
salmonelas isoladas a partir de 1947 e verificado o aumento progressivo de amostras resistentes.
Entre as dcadas de 1960 e 1970 esse percentual ascendeu, o que foi apontado por Costa et al.
(1967) e Hofer et al. (1974). Durante os anos 1980, estudos realizados em diferentes regies do pas,
com cepas de origem humana, alimentar, animal e ambiental, revelaram resistncia simples ou mltipla em Salmonella spp, bem como capacidade de transferncia desses marcos (Pessoa et al., 1980;
Queiroz et al., 1985; Rodrigues et al., 1985; Solari et al., 1986; Cmara et al.,1982; Farage, 1987).
Resultados similares foram obtidos por Solari et al. (1984) em S.Agona; Campos & Hofer (1989) em

34

658 salmonelas de diversos sorovares e Reis (1994), em S. Enteritidis, nos quais foram analisadas
cepas isoladas de vrias fontes e regies do pas.
Na atualidade, tal condio vem apontando perspectivas sombrias no tratamento de infeces determinadas por enteropatgenos nas quais so empregadas as fluoroquinolonas e cefalosporinas de
terceira gerao. Particularmente em relao s salmonelas, Fonseca (2003), apontaram produo de
beta-lactamases entre cepas de S.Infantis, isoladas no Rio de Janeiro e, entre 2000 e 2004, Mulvey
et al. (2004) revelaram o aumento de multirresistncia em S. Agona, incluindo a caracterizao de
novas beta-lactamases, do mesmo modo que Peirano et al (2006) e Fonseca et al. (2006) em outros
sorovares, incluindo a caracterizao de integrons.
Os nveis e extenso da resistncia so influenciados pelas prticas de uso de antimicrobianos no homem e animais e variam com a regio geogrfica. Nos pases desenvolvidos, fentipos de resistncia
a drogas observados em Salmonella tm sido associados com o uso de antimicrobianos em animais,
onde os perfis de resistncia geralmente refletem o tempo que uma droga est em uso e a reverso
desta caracterstica associada ao seu desuso (Aarestrup, 2004).
A emergncia da resistncia antimicrobiana em bactrias associadas com animais produtores de alimentos, particularmente naquelas de caractersticas zoonticas, e a evidncia de infeces humanas
tendo como fontes tanto alimentos de origem vegetal quanto animal, tem compelido a comunidade
cientfica e os profissionais de sade pblica a reavaliar os critrios que permitam o uso de antimicrobianos tanto na agricultura quanto na produo de alimentos de origem animal.
A fagotipagem representa uma importante ferramenta epidemiolgica apontando a flutuao, emergncia e reemergncia de alguns fagotipos e possibilitando o reconhecimento daqueles circulantes
ao longo do perodo, bem como aqueles com caractersticas epidmicas. A literatura evidencia que
a distribuio dos fagotipos de S. Enteritidis tem uma clara variao geogrfica com predomnio dos
tipos 4, 1, 6 e 8 na Europa e dos tipos 4, 8 e 13a no Canad. Nos Estados Unidos da Amrica h
predomnio dos fagotipos 8, 13a, 13 e 14b e uma baixa freqncia dos fagotipos 4 e 1. Estes dados
indicam que os isolados pertencentes ao fagotipo 1 so prprios do continente europeu, enquanto
o fagotipo 4 pode ser considerado de distribuio mundial (Gillespie et al. 2005; HPA, 2006; IASR,
2006), assumindo importncia em surtos de origem alimentar. Em relao a S. Typhimurium salientase a relevncia do fagotipo DT193 em surtos de transmisso alimentar em vrios pases (Usera et al.
2000; Gebreyes & Altier , 2002; Ghilardi et. al. 2006).
O crescente isolamento de cepas de Salmonella apresentando resistncia a um ou vrios antimicrobianos a partir de fontes humanas e animais considerado alarmante e se tem constitudo um importante problema de Sade Pblica (Schoreter et al., 2004; Larkin et al., 2004; Varma et al., 2005).

5. ENTEROCOCCUS E RESISTNCIA AOS ANTIMICROBIANOS

Os enterococos apresentam uma moderada resistncia aos aminoglicosdeos resultando em uma
MIC de 4 a 250 g/ml (Standiford, deMaine, Kirby, 1970; Zimerman, Moellering Jr, Weinberg, 1971;
Zervos, Mikesell, Scharberg, 1986). Essa classe de antibiticos, quando utilizada em conjunto com os
-lactmicos produzem um efeito bactericida.
Enterococos podem adquirir alto nvel de resistncia aos aminoglicosdeos por trs mecanismos distintos: alterao do stio-alvo no ribossomo, interferncia no transporte do antibitico e modificao
enzimtica do antibitico. Os dois primeiros mecanismos ocorrem por mutao no cromossomo,
enquanto o terceiro geralmente mediado por plasmdeo (Couvarlin, Carlier, Collatz, 1980; Leclercq
et al., 1992). Em enterococos isolados de amostras clnicas, o alto nvel de resistncia geralmente
mediado pela presena de enzimas modificadoras de aminoglicosdeos. Entretanto, algumas cepas
de E. faecalis com alto nvel de resistncia estreptomicina podem ocorrer, sendo esta resistncia
tambm resultante de mutao do gene associado ao ribossomo (Eliopoulos et al., 1984).
Enterococos com alto nvel de resistncia estreptomicina e kanamicina foram primeiramente reportados em 1970. O reconhecimento da resistncia para ambos os antimicrobianos favoreceu o uso da
gentamicina na terapia combinada com a penicilina, para os casos de infeces graves (Moellering
Jr et al., 1970).
35

O alto nvel de resistncia gentamicina foi reportado primeiramente em E. faecalis isolado na Frana
em 1979 (Horodniceanu et al., 1979), sendo agora uma resistncia prevalente nessa espcie. Cepas
com alto nvel de resistncia tm sido reportadas por centros de pesquisa na Europa, Japo, Estados
Unidos, Canad, Tailndia, Chile, Austrlia e Argentina (Murray & Mederski-Samaroj, 1983; Zervos,
Mikesell e Schaberg, 1986; Utley et al., 1988; Smyth, Stevens e Holimann, 1989). Em 1988, trs
cepas de E. faecium no relacionadas, apresentando alto nvel de resistncia a gentamicina, estreptomicina, kanamicina e tobramicina, foram reportadas pela primeira vez (Eliopoulos et al., 1988).
Os enterococos apresentam uma resistncia intrnseca moderada para penicilina e ampicilina quando comparados com os estreptococos (Murray, 1991; Gray, Stewart, Peddler, 1991; Moellering Jr,
1992). Amostras de E. faecalis apresentam uma MIC para ampicilina e penicilina que variam de 1-8
g/ml, enquanto E. faecium apresentam uma maior resistncia, com MIC variando entre 8-64 g/ml
(Moellering Jr et al., 1979; Murray, 1990; Murray, 1992). A resistncia intrnseca, principalmente s
cefalosporinas, parece ser devido a baixa afinidade das protenas ligadoras de penicilina (PBP) pelo
antimicrobiano. Essa resistncia diretamente proporcional quantidade ou afinidade da PBP5
(Fontana, 1985; Herman & Gerding, 1991; Molellering Jr, 1991; Fontana et al., 1994; Lecrercq &
Couvarlin, 1997).
Os antimicrobianos -lactmicos apresentam ao bacteriosttica contra os enterococos, necessitando da sua combinao com um aminoglicosdeo para se obter uma ao bactericida (Moellering
Jr, Wennersten, Weinberg, 1971). Os primeiros relatos de cepas altamente resistentes penicilina
comearam a surgir no final da dcada de 1980 (Bush et al., 1989; Sapico et al., 1989).
A resistncia adquirida aos -lactmicos pode ser devida alterao das PBPs, atribuindo um nvel
de resistncia mais elevado (MIC 128 g/mL) do que aquele referente resistncia intrnseca entre
os enterococos. Esse mecanismo confere resistncia a todos os -lactmicos, incluindo carbapenens
(Murray, 1990; Jones & Sader, 1993).
Um segundo mecanismo de resistncia adquirida pode ser resultante da sntese da enzima -lactamase (Lecrercq & Couvarlin, 1997). A primeira cepa de E. faecalis produtora de -lactamase foi isolada em 1981 nos Estados Unidos, sendo, posteriormente, isolada na Argentina e no Lbano (Murray,
1992). A resistncia resultante da produo desta enzima rara, normalmente mediada por plasmdeo e podendo estar associada com o alto nvel de resistncia gentamicina (Murray, 1992).
Os antibiticos glicopeptdicos inibem a sntese da parede celular em bactrias Gram-positivas, pela
interao com o grupamento terminal D-alanina-D-alanina (D-ala-D-ala), das cadeias laterais do pentapeptdeo precursor do peptdeoglicano (Dutka-Malen et al., 1990; Johnson et al., 1990; Shlaes &
Binczewski, 1990). Este grupo de antibitico bacteriosttico contra os enterococos e sua tolerncia
tem sido demonstrada (Mandell et al., 1970; Krogstad & Parquette, 1980). Semelhante aos antimicrobianos ativos em parede celular, sua atividade bactericida obtida quando este combinado a
um aminoglicosdeo (Mandell et al., 1970; Krogstad & Parquette, 1980; Moellering Jr, 1991). Essa
ao faz deste grupo de antibitico, uma escolha apropriada para o tratamento de infeces graves
por enterococos quando o uso de penicilina ou ampicilina impedido por alergia ou resistncia aos
antibiticos -lactmicos (Mandell et al., 1970; Krogstad & Parquette, 1980; Shlaes & Binczewski,
1990; Couvarlin, 1990; Moellering Jr, 1992).
Enterococos resistentes vancomicina (VRE) no eram reconhecidos at 1988 quando relatos foram
publicados na Inglaterra (Uttley et al., 1988), Frana (Leclercq et al., 1988) e Estados Unidos (Kaplan,
Gilligan, Facklam, 1988). A partir de 1989, VRE passaram a ser identificados nos Estados Unidos
atravs de um estudo realizado pelo National Nosocomial Infections Surveillance System - NNISS
(CDC, 1993), no Reino Unido, Frana, Alemanha e Espanha (Uttley et al., 1989; Woodford et al.,
1995; Woodford, 1998).
Estudos iniciais realizados com VRE classificaram esses microrganismos baseando-se nas caractersticas fenotpicas (Leclercq & Couvarlin, 1997). Primeiramente foram descritos os fentipos VanA e VanB
tanto para E. faecalis como para E. faecium. As caractersticas das cepas com fentipo VanA so: alta
resistncia vancomicina (CIM 64 g/ml) e resistncia teicoplanina variando de moderada a alta

36

(CIM 16 g/ml) (Leclercq et al., 1988; Couvarlin, 1990). Este fentipo freqentemente mediado
por um transposon, que induzido pela presena de glicopeptdeos (vancomicina, teicoplanina,
avoparcina e ristocetin) e por no-glicopeptdeos como bacitracina, polimixina B e robenidina. Estes
ltimos so antimicrobianos utilizados no tratamento de infees em frangos de granja (Lai, 1996).
O fentipo VanA tem sido ocasionalmente detectado em outras espcies, incluindo E. casseliflavus, E.
gallinarum e E. durans (Dutka-Malen et al., 1994; Cercenado et al., 1995; Jones et al., 1995).
No fentipo VanB as cepas apresentam um padro de resistncia para vancomicina cuja CIM pode
variar de 4 a 1000 g/ml, mas mantendo suscetibilidade teicoplanina (Quintiliani, Evers, Couvarli,
1993; Boyce et al., 1994). O fentipo VanB se diferencia do VanA, por sofrer induo de resistncia
somente na presena da vancomicina e no na presena da teicoplanina.
Posteriormente aos fentipos VanA e VanB, outros foram identificados como VanC, VanD e VanE. O
fentipo VanC apresenta baixo nvel de resistncia para vancomicina (CIM 4 a 32 g/ml) e so suscetveis teicoplanina, sendo uma propriedade inerente das espcies E. gallinarum e E. casseliflavus
(DutkaMalen et al., 1994). Esta propriedade no transfervel e est relacionada com a presena de
dois genes vanC-1 e vanC-2, respectiva e diretamente relacionados s espcies. Estas espcies parecem apresentar duas ligases e com isso apresentam duas terminaes para a formao do pentapeptdeo precursor da parede celular, D-ala-D-ala e D-ala-D-serina. A presena destes dois precursores
poderia explicar a ocorrncia de cepas suscetveis ou com baixo nvel de resistncia vancomicina
(Navarro & Couvarlin, 1994).
O fentipo VanD foi detectado em uma cepa de E. faecium, que apresentou resistncia moderada
e constitutiva vancomicina (CIM 64 g/ml), sendo baixo o nvel de resistncia para teicoplanina
(CIM = 4 g/ml). Esta resistncia no transfervel para outro enterococo. O seqenciamento parcial
do gene ligase deste fentipo mostrou 69% de similaridade com os genes ligase vanA e vanB (Perichon, Reynolds, Couvarlin, 1997). Recentemente trs cepas de E. faecium resistentes vancomicina
com fentipo VanD foram isoladas em Boston (Ostrowsky et al., 1999). O fentipo VanE, foi descrito
por Fines et al. (1999) e parece ser induzido e no, transfervel, sendo detectado em uma cepa de E.
faecalis que apresentou baixo nvel de resistncia vancomicina (CIM = 16 g/ml) e suscetibilidade
teicoplanina (CIM = 0,5 g/ml). Este novo fentipo tem similaridade com a resistncia intrnseca do
fentipo VanC. O fentipo VanG, descrito mais recentemente, foi detectado em uma cepa de E. faecalis, que apresentou moderado nvel de resistncia vancomicina (CIM=16 g/ml) e sensibilidade
teicoplanina, e nenhuma amplificao com a utilizao de iniciadores especficos para os demais
gentipos de resistncia vancomicina j descritos (Mc Kessar et al., 2000).
Embora muito se tenha estudado sobre a epidemiologia do enterococo resistente vancomicina
(VRE), principalmente nos recentes anos, um consenso sobre qual seria o principal reservatrio ainda
no foi definido. Tem-se sugerido que a origem dos VRE hospitalar, sendo posteriormente disseminados para a comunidade (Frieden et al., 1993). Entretanto, uma cepa de E. avium resistente
vancomicina foi isolada de uma paciente de um hospital geral, no qual este antibitico no vinha
sendo utilizado h seis meses na rotina hospitalar (Rao et al., 1992). Ademais, uma cepa de E. faecium resistente vancomicina foi isolada de um paciente sem histrico de internao ou exposio
a antibiticos (Gradon, 1994). Tais achados sugerem que a presso seletiva que ocorre nos hospitais
no necessria para o surgimento de VRE. Os enterococos fazem parte da microbiota humana,
portanto, tem sido reportado o isolamento de VRE em guas de esgoto (Klare et al., 1993; Torres et
al., 1994; Bates, Jordens & Griffiths, 1994).
Bates et al. (1993) publicaram o primeiro relato sobre o isolamento de VRE fora do ambiente hospitalar, na rea urbana da Inglaterra. Anos depois, os autores relataram o isolamento de VRE a partir
de amostras de fezes de gado e de frangos no cozidos, comprados em lojas de varejo. Klare et al.
(1993) relataram o isolamento de VRE em pequenas cidades da Alemanha, detectando-o em amostras de adubo originrio de granjas ou fazendas de sunos. Em 1995, estes pesquisadores isolaram
E. faecium VanA de carne de frangos e sunos congelados e de fezes humanas, de 12 entre 100
habitantes no hospitalizados, na rea rural (Klare, Heier, Claus, Witte, 1995).

37

Posteriormente, Klare et al. (1995) sugeriram a relao do isolamento de VRE com o uso da avoparcina, um antibitico do grupo dos glicopeptdeos, usado como promotor de crescimento no interior
da Europa. A associao entre o isolamento de VRE a partir de alimentos animais, especialmente
aves, e o uso da avoparcina tem sido confirmado por estudos epidemiolgicos na Dinamarca (Aarestrup, 1995; Aarestrup et al., 1996), Noruega (Kruse & Rorvik, 1996) e Sua (Bogaard et al., 1996). A
ligao entre colonizao de animais, utilizados para produtos alimentcios, e de humanos por VRE
foi sugerida por Bates et al. (1993), devido ao isolamento de VRE com ribotipos idnticos de amostras
humanas e de carcaa de frangos (Klare et al., 1993).
A deteco de VRE em animais, como frangos e sunos utilizados para produo de alimentos, representa um importante achado epidemiolgico da colonizao e infeco em humanos. Portanto, VRE
podem estar presentes em pessoas que no esto associadas com o ambiente hospitalar, como descrito por vrios estudos realizados na Europa (Jordens, Bates, Griffiths, 1994; Donnelly et al., 1996).
Por outro lado, nos Estados Unidos o ambiente hospitalar parece ser o maior reservatrio de VRE
em pacientes portadores no TGI (Boyce, 1997). Por sua vez, em um estudo realizado no Texas no se
isolou VRE das fezes e de carcaas de frango (Murray, 1995; Murray, 1997).
Existem poucas evidncias que sugerem a transmisso de VRE de adultos sos para a comunidade
(Murray, 1995; Bais, Freundlich, Currie, 1996; Coque et al., 1996). Entretanto, dois casos de aparente infeco urinria por VRE, adquirida na comunidade, na cidade de Nova York, foram reportados
(Friden et al., 1993).
Apesar da proibio nos Estados Unidos e em vrios pases da Europa, o uso da avoparcina como
aditivo alimentar foi liberado no Brasil por um perodo de 10 anos. A partir de 1998, a avoparcina foi
retirada da agricultura brasileira (Leme, Ferreira e Pignatari, 1999).
No Brasil h poucos estudos com o objetivo de avaliar a presena do VRE fora do ambiente hospitalar.
Recentemente foi publicada a avaliao do perfil de sensibilidade aos glicopeptdeos de enterococos
isolados de aves comerciais, realizada no perodo de 1996 a 1997, em avirios prximos a cidade
de So Paulo (Leme et al., 2000). A suscetibilidade avoparcina, teicoplanina e vancomicina foi determinada em duzentos e dezessete amostras de enterococos, isoladas de fezes de frango. No foi
detectado VRE entre as amostras analisadas, porm observou-se um porcentual alto no isolamento
de E. faecium da microbiota fecal, em 52,8% dos frangos estudados. O isolamento de VRE a partir de
fontes de alimento animal sugere que a transmisso para o homem por esta via possa ocorrer, porm
provas conclusivas ainda no foram obtidas (Witte & Klare, 1995).
Superfcies de ambiente e equipamentos mdicos do quarto aonde os pacientes se encontram freqentemente se tornam contaminados com VRE, podendo servir como um reservatrio para o microrganismo hospitalar (Boyce et al., 1994). Em poucas situaes essa bactria pode colonizar o trato
gastrintestinal de profissionais da sade, porm, o significado epidemiolgico deste achado ainda
no est claro (Handwerger et al., 1993; Jordens, Bates, Griffthis, 1994).
A transmisso de VRE por profissionais da rea da sade, cujas mos passam a estar temporariamente contaminadas com esta bactria, para pacientes possivelmente a forma mais comum de
transmisso hospitalar (Huycke, Sham, Gilmore, 1998, Moellering Jr, 1992). A despeito da fonte, a
transmisso pessoa a pessoa ou por fmites, tanto intra quanto inter-hospitalar, tem sido descrita na
literatura (Murray, 1991; Karanfil et al., 1992; Murray, 1992; Boyle, 1993).
A tetraciclina provavelmente penetra na clula bacteriana por difuso passiva e atua na subunidade
ribossmica 30S, impedindo a ligao do tRNA, bloqueando o aporte de aminocidos e resultando na
inibio da sntese protica. Um crescente nmero de espcies bacterianas tem adquirido resistncia
atividade bacteriosttica da tetraciclina (Fluit et al., 2001). Essa resistncia pode ser devido a
alteraes cromossmicas resultantes de mutao, afetando a permeabilidade da membrana externa
ou adquirida, pela transferncia de plasmdeos e transposons (Konemam, 1997; Quintiliani et al.,
1999). Diferentes genes conferindo resistncia tetraciclina tm sido encontrados, incluindo os genes

38

tetK, tetL, tetM, tetO e tetS (Burdett e col., 1982; Brunton, 1984; LeBlanc e col., 1988; Charpentier
e col., 1993).
O cloranfenicol tem ao bacteriosttica por inibio da sntese protica. O antibitico impede a ligao do RNA mensageiro ao ribossomo, por fixar-se na frao 30S do ribossomo, competindo com o
cido nuclico. Porm sua ao mais importante resulta de sua ligao a frao 50S do ribossomo,
inibindo a ao da peptidiltransferase, bloqueando a unio dos aminocidos na formao do polipeptdeo (Murray, 1990; Tavares, 1996, Fluit e col., 2001).
O cloranfenicol um antibitico ativo contra bactrias Gram-positivas e Gram-negativas. Sua ampla
atividade associada facilidade de administrao por via oral e relativo baixo custo, fizeram com
que, juntamente com as tetraciclinas, tornasse um dos antibiticos mais utilizados na clnica (Murray,
1990; Tavares, 1996, Fluit et al., 2001). O principal mecanismo qumico da resistncia ao cloranfenicol, consiste na sua inativao enzimtica, pela enzima cloranfenicol-acetiltransferase, produzida
pelo gene cat. Deteco de resistncia ao cloranfenicol por tcnicas de biologia molecular no tm
sido estudadas (Fluit et al., 2001). O segundo mecanismo de importncia na resistncia ao cloranfenicol baseia-se na impermeabilidade do microorganismo droga (Murray, 1990; Tavares, 1996).
Como os demais antibiticos macroldeos, a eritromicina bacteriosttica, podendo tornar-se bactericida em concentraes elevadas ou em contato com microorganismos extremamente sensveis.
Atua por inibio da sntese de protenas quando se ligar frao 50S do ribossomo. O principal
mecanismo de resistncia consiste na modificao da unidade 50S do ribossomo bacteriano. Em
enterococos, a resistncia eritromicina freqentemente mediada pelo gene ermB, seguido pelo
gene ermA (Fluit et al., 2001).
A quinupristina-dalfopristina uma associao de duas estreptograminas, sendo uma do grupo A e
uma do grupo B. Os componentes individuais tm ao bacteriosttica, porm quando associados
a combinao freqentemente bactericida. (Eliopoulos, 2003). Estes antimicrobianos penetram
na clula bacteriana via difuso passiva e ligam-se subunidade 50S do ribossomo. A resistncia
s estreptograminas pode ser cromossmica ou mediada por plasmdeos. Uma bomba de efluxo
conferindo resistncia dalfopristina aparenta ser uma caracterstica intrnseca de E. faecalis. Por
isso, esta combinao quinupristina-dalfopristina freqentemente menos efetiva contra E. faecalis
(Eliopoulos, 2003).
Os mecanismos de resistncia bacteriana estreptogramina B so difundidos entre os enterococos e
mediados via gene ermB. Este mecanismo resulta na resistncia da bactria a todos os macroldeos,
lincosaminas e estreptograminas do grupo B, permanecendo sensveis as estreptograminas do grupo
A. (Eliopoulos, 2003).
A linezolida o primeiro antibitico da classe da oxazolidinona, e sua ao bacteriosttica. Atua
por inibio da sntese de protenas, ao ligar-se frao 50S do ribossomo. O principal mecanismo de
resistncia consiste na modificao da unidade 50S do ribossoma bacteriano (Jones et al., 2002).

39

Parte II
Programa Nacional de Monitoramento da
Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em
Frango PREBAF
1. HISTRICO
O PREBAF Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em
frango surgiu como resultado das discusses do Grupo de Trabalho sobre Resduos de Medicamentos Veterinrios em Alimentos, institudo pela ANVISA atravs da Resoluo-RDC n 5/2000, foram
apresentadas propostas e recomendaes com foco na avaliao de risco quanto ao uso de medicamentos veterinrios em animais produtores de alimentos. Tais proposies constam do documento
de base denominado Medicamentos Veterinrios e Sade Pblica: uma Proposta de Ao para a
ANVISA, aprovada em 2001 pela Diretoria Colegiada.
Destaca-se como principal recomendao para as aes de vigilncia sanitria em relao ao assunto,
a implantao de dois programas de monitoramento, sendo um para avaliao de resduos, iniciado
em 2002 como Programa de Anlise de Resduos de Medicamentos Veterinrios em Alimentos de
Origem Animal PAMVET, e outro para avaliao do perfil de resistncia de bactrias isoladas em
carne de frango, que foi traduzido no PREBAF relatado no presente documento. Especificamente
em relao a este ltimo, deveria ser institudo um programa de abrangncia nacional, onde seria
pesquisada a resistncia de Salmonella e Enterococcus aos antimicrobianos em amostras colhidas no
ponto de exposio ao consumo.
Com aprovao da Resoluo-RDC ANVISA n 12, de 02/01/01, que excluiu a obrigatoriedade da
pesquisa de Salmonella sp em carnes in natura de aves, devido as limitaes tecnolgicas que impossibilitam garantir a ausncia desse microrganismo no produto, tornou-se necessrio implementar
um Programa Nacional capaz de determinar a prevalncia e a quantificao das espcies do gnero
Salmonella nesse tipo de carne, como subsdio para futuras opes de gerenciamento de risco microbiolgico em relao ao alimentos em questo. Como contrapartida excluso do parmetro
Salmonella sp determinou-se, por meio da Resoluo-RDC n 13, de 02/01/01, a exigncia de apor
dizeres de rotulagem, instruindo o consumidor sobre o adequado uso, preparo e conservao das
carnes de aves.
Nesse contexto, o PREBAF foi desenhado pelas gerncias envolvidas com o tema (GACTA e GICRA),
tendo por foco a determinao da prevalncia e quantificao das espcies do gnero Salmonella
em carne de frango exposta ao consumo humano, bem como a verificao do cumprimento das
disposies constantes da Resoluo-RDC ANVISA n 13/01. Ao mesmo tempo, num esforo para
racionalizar recursos e otimizar resultados, definiu-se em um nico Programa, por abordar tambm
a pesquisa de prevalncia e da resistncia bacteriana de Enterococcus spp, a partir da mesma matriz
de anlise.
Nesse sentido, o presente documento fornece um detalhamento sobre o Programa, como parte da
estratgia de ao da ANVISA para a rea de alimentos, pautada nas parcerias com os Estados por
meio das VISAs e LACENs.

41

2. INFORMAES TCNICAS
A preveno da contaminao das aves apresenta como fatores limitantes a ampla distribuio da
bactria no ambiente e a existncia freqente de portadores assintomticos. Nenhum outro processo
de tratamento, exceto irradiao ionizante, eliminar a Salmonella da carcaa mantendo as caractersticas originais da carne crua com a manuteno das caractersticas das aves cruas. No entanto, a
adoo de medidas higinico-sanitrias no manuseio e processamento de aves, o controle de raes
e alimentos desses animais, a rgida adoo de prticas higinicas na criao, transporte e abate a
distinta separao em nvel industrial das operaes com matrias-primas daquelas com produtos em
processo ou terminados, a rigorosa adoo de programas de limpeza e desinfeco das instalaes e
equipamentos e a preveno de contaminaes cruzadas so medidas importantes que contribuem
para a reduo dos nveis de contaminao.
crescente a preocupao mundial quanto ao aumento da resistncia adquirida por espcies de
bactrias a algumas molculas com ao antimicrobiana de uso humano na produo de animais,
reduzindo a disponibilidade de substncias eficazes e indispensveis ao tratamento e preveno de
doenas infecciosas. O aumento do uso dos antimicrobianos associados s inovaes na tecnologia
de produo, os novos mtodos no processamento da carne de frango e sua grande comercializao
contriburam para o aumento da produtividade e a diminuio do tempo de produo e do custo.
Por essa razo, esse alimento mais acessvel passou a integrar significativamente a dieta brasileira e,
conseqentemente, aumentou a exposio do consumidor a agentes que podem significar um risco
sade humana.
Os Enterococos, por sua vez, so bactrias consideradas agentes comensais comumente isolados
do intestino grosso dos seres humanos, animais e meio ambiente. Nos ltimos anos, entretanto,
as espcies E. faecalis e E. faecium tm provocado surtos hospitalares de difcil controle, podendo
causar infeces com limitadas opes teraputicas, notadamente no caso de cepas resistentes a
antimicrobianos tais como beta-lactmicos, aminoglicosdios e glicopeptdios. Estudos sobre a cadeia
epidemiolgica dos Enterococcus tm mostrado que animais produtores de alimento podem formar
reservatrios de Enterococcus resistentes e contribuir, assim, para a disseminao da bactria. Nesse
sentido, enterococos resistentes tm sido isolados em carne de frango expostas ao consumo humano
em diversos pases.
Qualquer alimento que contm Salmonella um risco potencial para o consumidor, cuja veiculao
facilitada, na atualidade, pela mudana nos hbitos alimentares da populao. A necessidade cada
vez mais intensa de produo/oferta de alimentos tem como fatores de risco, falhas quanto ao manuseio, transporte muitas vezes em condies inadequadas, aliados ausncia de critrios bsicos de
higiene e saneamento, os quais favorecem a disseminao (OMS,1988).

3. OBJETIVOS
3.1 Geral
Elaborao de diagnstico sobre os nveis de contaminao de Salmonella spp e Enterococcus spp
em carne de frango comercializada no Brasil e a propagao de resistncia antimicrobiana, com vistas a definio de medidas de interveno.

3.2

Especficos
Avaliar a prevalncia, o nmero de organismos e o perfil de sensibilidade a antimicrobianos
de cepas de Salmonella spp. isoladas em carcaas de frango expostas ao consumo.
Avaliar o perfil de sensibilidade a antimicrobianos de cepas de Enterococcus isoladas em
carne de frango expostas ao consumo.
Verificar a adequao dos dizeres de rotulagem do produto quanto s exigncias legais,
com destaque Resoluo - RDC ANVISA n 13/01.

42

4. MATERIAL E MTODOS
4.1 Plano amostral
4.1.1 Cobertura e perodo de execuo
O PREBAF foi executado no perodo de agosto/2004 a julho/2006 em 13 Estados e no Distrito Federal
(Alagoas, Amap, Cear, Distrito Federal, Esprito Santo, Gois, Minas Gerais, Mato Grosso do Sul,
Paran, Rio de Janeiro, Rio Grande do Norte, Rio Grande do Sul, Santa Catarina e So Paulo: Capital
e Ribeiro Preto), cobrindo, portanto, as cinco grandes regies do Brasil conforme ilustrado no mapa
do Brasil logo a seguir. Esses Estados respondem em conjunto por 83% da produo brasileira de
frango, que em 2005 foi da ordem de 4,42 bilhes de cabeas (Fonte: MAPA, IBGE). As amostras
foram colhidas pelos rgos de vigilncias sanitrias - VISAs de
NORTE
1. AP Amap

NORDESTE
2. AL Alagoas
3. CE Cear
4. RN Rio G. do
Norte

C.-OESTE

SUDESTE

5. DF Distrito
Federal
6. GO Gois
. MS Mato
Grosso do Sul

8.ES Esprito
Santo
. MG Minas
Gerais
10. RJ Rio de
Janeiro
11. SP So Paulo
(Capital) e
municpio
de Ribeiro
Preto

SUL
12. PR Paran
13. SC Santa
Catarina
14. RS Rio
Grande do
Sul

Mapa do Brasil e rea de cobertura do PREBAF

43

4.1.2 Nmero e tipo de amostras

Neste programa de monitoramento, os parmetros selecionados foram a prevalncia esperada de
10%, um nvel de confiana de 90% e margem de erro admitido de 1%. Isso significaria processar
2429 unidades amostrais utilizando-se como referncia o Quadro 5. Foi definida como meta para
cada estado a colheita de 10 unidades amostrais de frango por ms, durante um ano e meio (18 meses). Em So Paulo a meta estabelecida foi de 20 amostras/ms, distribudas entre a capital e a cidade
de Ribeiro Preto. Com isso o nmero total de unidades amostrais foi de 2710, dando-se assim uma
margem maior representatividade da pesquisa.

Quadro 5. Nmero de amostras em funo da prevalncia de resistncia esperada na populao.

Prevalncia
Esperada

10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%

Nvel de confiana
90%
Margem de erro admitida
10%
5%
1%
24
97
2429
43
173
4310
57
227
5650
65
260
6451
68
270
6718
65
260
6451
57
227
5650
43
173
4310
24
97
2429

95%
Margem de erro admitida
10%
5%
1%
35
138
3445
61
246
6109
81
323
8003
92
369
9135
96
384
9512
92
369
9135
81
323
8003
61
246
6109
35
138
3445

Fonte: OIE - 2000

4.2 Procedimentos de Amostragem e de Anlise

Os procedimentos de colheita e amostragem foram realizados pelas VISAs e estavam descritos no
POP especfico: Colheita de Amostras e Medidas de Interveno GICRA/GGALI, onde constavam as
seguintes informaes:
Marca;
Fabricante;
Endereo;
Local de coleta;
Endereo;
Adequao (ou no) aos dizeres de rotulagem;
Salmonella (ausncia ou presena);
Enterococcus em anlises com e sem vancomicina (presena ou ausncia).
Os dados recebidos foram tabelados utilizando-se o programa Epi-Info () - Database and statistics
software for public health professionals. Verso 26/04/2004.
As amostras para avaliao de Salmonella foram recebidas e processadas conforme estabelecido no
Procedimento Operacional Padro POP, do INCQS: Recepo e Processamento Inicial de Amostras
de Carcaas Congeladas de Frango. Cada unidade do produto foi analisada individualmente, no
sendo possvel a mistura das alquotas retiradas de cada unidade amostral. Uma das 05 unidades de
amostra de mesma marca foi analisada utilizando-se metodologia quantitativa conforme descrito
no POP do INCQS: Pesquisa e Contagem de Salmonella sp. em Carcaas Congeladas de Frango. As

44

demais amostras colhidas foram analisadas seguindo somente a metodologia qualitativa, descrita no
POP acima.
As amostras para avaliao de Enterococos foram analisadas utilizando-se metodologia qualitativa
conforme descrito no POP do IAL: Pesquisa de Enterococcus sp. em Carcaas Congeladas de Frango.
As cepas isoladas de Salmonella e Enterococcus foram encaminhadas, respectivamente, ao Instituto
Oswaldo Cruz IOC e Instituto Adolfo Lutz IAL, de acordo com os respectivos POPs (Manuteno
de Cepa de Enterococo para ser Enviada ao Laboratrio de Referncia e Transporte de substncias
infecciosas para o laboratrio de referncia.
Em relao rotulagem, o Laboratrio encaminhou os laudos sobre a anlise de rotulagem para a
VISA responsvel pela colheita da amostra, seguindo as instrues constantes do POP: Colheita de
Amostras e Medidas de Interveno GICRA/GGALI.
Para a anlise de Salmonella, cada laboratrio enviou mensalmente as planilhas com os resultados
das anlises quantitativas e qualitativas para a VISA do estado correspondente, que seguiu as instrues constantes do POP: Colheita de Amostras e Medidas de Interveno GICRA/GGALI. A VISA,
por sua vez, encaminhou as planilhas para GGALI/ANVISA, que consolidou os resultados. Quanto aos
resultados referentes identificao de espcies e resistncia, o Laboratrio de Enterobactrias do
IOC os encaminhou GGALI/ANVISA e ao LACEN do estado correspondente s cepas recebidas.
Na anlise de Enterococcos o fluxo foi idntico ao de Salmonella, sendo que as anlises de identificao de espcies e de perfil de foram realizadas pelo IAL/SP. A metodologia utilizada para identificao
de genes de interesse, tanto em Salmonella quanto em Enterococcos, foi realizada por PCR.
O nvel de sensibilidade a antimicrobianos, dos microorganismos Enterococcos e Salmonella, foi avaliado por meio da determinao da concentrao inibitria mnima (CIM) por microdiluio em caldo
ou diluio em agar, com base na metodologia recomendada pelo National Committee for Clinical
Laboratory Standards (NCCLS, 2003).
A escolha dos antimicrobianos testados foi baseada nos seguintes critrios:
importncia de seu uso em medicina humana;
situao de resistncia ocorrente e de interesse do pas;
utilizao de antimicrobianos em medicina veterinria que possam desenvolver resistncia
cruzada a antimicrobianos usados em medicina humana.
Para avaliao da resistncia de Salmonella sp. e Enterococcus, originalmente foram selecionados os
seguintes antimicrobianos:
Para Salmonella: ampicilina, ceftriaxona, ceftazidina, cefepime, tetraciclina, ceftazidima/c. clavulmico, cefotaxima/c. clavulmico, gentamicina, estreptomicina, cloranfenicol, florfenicol, sulfonamida, trimetoprim, sulfametoxazol/trimetoprim, c. nalidixo, ciprofloxacina, enrofloxacina, imipenem,
meropenem, nitrofurantona e aztreonam.
Para Enterococcus sp: ampicilina, vancomicina, teicoplanina, gentamicina, estreptomicina, enrofloxacina, ciprofloxacina, eritromicina, cloranfenicol, tetraciclina, linezolida, oxitetraciclina, virginamicina
e quinopristina/dalfopristina.
As cepas de Enterococcus foram armazenadas aps processo de liofilizao e as de Salmonella em
meio de caldo BHI acrescido de 15% de glicerol, a 70C.
Considerando os critrios de localizao geogrfica, capacidade operacional, recursos humanos,
equipamentos e instalaes fsicas (lay out bsico), adequao ao sistema de garantia da qualidade e
relao com a Vigilncia Sanitria, foram selecionados os seguintes laboratrios:

45

Laboratrio
IAL

Enterococcus

Salmonella

(1)

(2)

(3)

(4)

(1)

IOC
LACEN AL

LACEN AP

LACEN CE

LACEN DF

LACEN GO

LACEN MG

LACEN MS

LACEN PR

LACEN RJ

LACEN RN

LACEN ES

LACEN RS

LACEN SC

IAL Rib. Preto

(2)

(3)

(4)

Legenda: (1) Isolamento; (2) Identificao de espcies; (3) Testes de sensibilidade; (4) Identificao
de genes.

4.3 Plano de Anlise de Salmonela

Foram recebidas um total de 262 cepas resultantes da anlise de 2710 efetuadas no perodo de
22/09/2004 a 28/07/2006 pelos dezesseis Laboratrios participantes do Programa PREBAF, localizados em diferentes regies do pas, (Quadro 3) e encaminhadas ao LRNCEB/ IOC/ FIOCRUZ-RJ para
caracterizao feno e genotpica.
As cepas foram remetidas em meio de conservao Agar Nutriente Tamponado temperatura ambiente, dentro das normas internacionais de transporte de amostras para diagnstico.

4.3.1 Recepo das cepas, reisolamento e identificao bioqumica

Aps a recepo, todas as informaes recebidas foram inseridas em Banco de dados (Excel). Partindo do meio de conservao, as cepas foram inicialmente reisoladas, a partir do crescimento em
Caldo Nutriente e, aps incubao 18-24h/37C, semeadura em Agar Entrico Hektoen. Em etapa
subseqente, procedeu-se caracterizao de gnero e espcies, atravs da confirmao bioqumica
presuntiva em meio de triagem de Costa & Vernin CV e Agar Lisina-Ferro a partir dos quais foi
avaliado seu perfil metablico. Para tal foram avaliadas as caractersticas quanto a fermentao de
carboidratos e correlatos tais como: lactose, manitol, dulcitol, salicina e sacarose; descarboxilao
da lisina e ornitina; ausncia da produo de indol e produo de sulfeto de hidrognio em meio de
SIM, utilizao do citrato, tartarato, malonato, o qual permitiu a identificao conclusiva do gnero
e da espcie. Paralelamente as cepas foram transferidas para meio de conservao e mantidas a
temperatura de -70C.

46

Culturas com perfil compatvel com Salmonella foram submetidas a caracterizao antignica, reconhecendo-se a presena de fraes somticas eventualmente presentes; lisotipia, considerando os
sorovares Enteritidis e Typhimurium e teste de suscetibilidade aos antimicrobianos empregados nas
reas humana e veterinria, atravs da determinao da Concentrao Inibitria Mnima (CIM).

4.3.2 Caracterizao antignica

Realizada atravs da tcnica de soro-aglutinao rpida, em lmina, com antissoros poli e monovalentes, somticos e flagelares, preparados no Laboratrio Referncia Nacional Clera & Enteropatgenos Bacterianos - Instituto Oswaldo Cruz, FIOCRUZ, Rio de Janeiro.

4.3.3 Fagotipagem
A avaliao dos fagotipos foi realizada utilizando preparados fgicos fornecidos pelo Centro de Referncia Internacional de Fagotipagem (Colindale, Inglaterra). Para tal, as cepas foram submetidas
a crescimento em caldo Fago, Quando atingirem turbidez semelhante ao tubo n 05 da escala de
MacFarland foi efetuada a semeadura em Agar Fago e, em seguida, gotejados 10L de cada um dos
preparados fgicos especficos. Aps absoro, foi efetuada a incubao a 37C/18h e leitura da lise
(confluente, opaca, semiconfluente e nmero de placas de lise).

4.3.4 Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos

O perfil de resistncia aos antimicrobianos foi avaliado atravs da determinao da Concentrao Inibitria Mnima (CIM) por microdiluio em caldo, com base na metodologia descrita pelo CLSI (20042006), utilizando-se 18 frmacos representativos das classes de antimicrobianos: beta-lactmicos
(penicilinas, monobactmicos, cefaloporinas (1, 2 e 3 geraes); fenicis; tetraciclinas; quinolonas;
aminoglicosdeos; antifolatos e nitrofuranos (Quadro 4). O critrio de escolha tomou por base drogas
empregadas sob o ponto de vista humano e veterinrio e a orientao da OMS (CLSI, 2004-2006),
quanto aos antimicrobianos utilizados no monitoramento da resistncia bacteriana. Para o controle
na qualidade de execuo e confiabilidade dos resultados obtidos, cepas padro (Escherichia coli
ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 35218, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterococcus
faecalis ATCC 29212 e Staphylococcus aureus ATCC 25923) foram testadas sob as mesmas condies
de meios de cultivo e incubao.

4.4 Plano de Anlise de Enterococos

4.4.1 Recebimento das amostras
Um total de 11.033 colnias com identificao presuntiva para o gnero Enterococcus, foi enviado
ao Instituto Adolfo Lutz para identificao da espcie, determinao do perfil de suscetibilidade aos
antimicrobianos e pesquisa dos genes de resistncia para vancomicina.Cepas padres de referncia
foram utilizadas como controle nos testes fenotpicos e genotpicos: E. faecalis ATCC 29212, E. faecium 228 (vanA); E. faecalis ATCC 51299 (vanB); E. gallinarum NCTC 12359 (vanC-1) e E. casseliflavus
NCTC 1261 (vanC-2).

4.4.2 Identificao
A identificao das amostras em gnero e espcie segue as provas bioqumicas padronizados internacionalmente por Facklam & Carey (1985); Facklam & Collins (1989); Facklam & Sahm (1995) e
Facklam, Sham, Teixeira (1999).
Aps confirmao da espcie bacteriana, as amostras de enterococos foram liofilizadas (High Vaccum
Freeze Dryer Super Modulyo, Edwards, Sussex, Inglaterra) em leite desnatado a 20% e mantidas
tambm congeladas em freezer 20C e devidamente catalogadas.

47

4.4.3 Ensaios de determinao

Para os ensaios de determinao da CIM, utilizou-se a tcnica de microdiluio em caldo, conforme
recomendaes do CLSI (2006). As cepas foram avaliadas frente a 9 antimicrobianos: vancomicina
(VC), teicoplanina (TC), ampicilina (AM), ciprofloxacina (CI), tetraciclina (TT), eritromicina (ERI), cloranfenicol (CLO), linezolida (LNZ) e quinupristina-dalfopristina (QD). Todas as cepas foram testadas
para a deteco de alto nvel de resistncia aos aminoglicosdeos, gentamicina (GEN) e estreptomicina (STR), conforme tcnica descrita pelo manual CLSI (2006).

4.4.4 Caracterizao gentica

A caracterizao gentica das espcies E. faecalis e E. faecium, pela deteco de genes especficos
para cada espcie foi realizada pela tcnica de reao da polimerase em cadeia (PCR), utilizada para
amplificao dos genes ddl que codificam as ligases D-alanina, espcie-especficos (Dutka-Malen e
col. 1995). Para a confirmao gentica do fentipo VanA geneticamente foi tambm utilizada a
tcnica da PCR. Utilizaram-se sondas dos genes vanA (Dutka-Malen et al., 1990) assim como, as sondas para vanB (Quintiliani, Evers, Couvarlin, 1993), vanC-1 e VanC-2 especficos para E. gallinarum
(Leclercq et al., 1992), E. casseliflavus (Navarro & Couvarlin,1994), respectivamente.

5. RESULTADOS E DISCUSSO
5.1 Situao Extrada dos Relatrios dos Estados (Visa e Lacen)
5.1.1 Alagoas
Das 180 unidades amostrais coletadas pela VISAAL, 179 foram efetivamente analisadas pelo LACENAL, j que uma delas foi extraviada e/ou descartada para anlise. Os dados obtidos esto apresentados nas Tabelas 1 e 2, num total de 36 laudos emitidos, sendo observada a presena de salmonela em 8 amostras (4,46%). Em relao a rotulagem foi encontrado o seguinte resultado: anlises
satisfatrias = 77,78%; insatisfatrias = 8,33%; indefinidas = 13,89%. As anlises de enterococos
(com vancomicina) foram positivas em 109 unidades amostrais (60,55%) ao passo que, na ausncia
de vancomicina, o nmero de unidades amostrais positivas aumentou para 160 (88,88%), percentual este considerado como sendo a presena real encontrada de enterococos no monitoramento em
Alagoas.

Tabela 1: ESTADO: ALAGOAS VARIVEL AVALIADA SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.

48

AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL

Rotulagem

UF origem

Salmonella

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

RS
PR
PE
PE
MG
PE
MG
AL
SP
PE
PE
PE
MG
BA

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

Salmonella
(presena)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

Salmonella
(ausncia)
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL

satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

SP
PE
SP
PE
PE
AL
BA
PE
RS
SP
SP
BA
MT
PE
BA
PE
PE
SP
PE
PE
PE
PE

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
TOTAL

0
0
0
0
0
0
0
4
0
1
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
2
0
8

5
5
5
5
5
5
5
1
5
4
5
5
5
5
5
5
3
5
5
5
3
5
171

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

28
3
5
36

77,78
8,33
13,89
100,00

Tabela 2: ESTADO: ALAGOAS VARIVEL AVALIADA: ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
0
5
5
0
0
4
1
5
3
0
0
5

5
0
0
5
5
1
4
0
2
5
5
0

5
5
0
0
5
5
3
5
5
5
5
5

Enterococcus
sem vancomicina
(ausncia)
0
0
5
5
0
0
2
0
0
0
0
0

49

13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL
AL

TOTAL

5
2
2
4
4
2
4
0
3
5
2
1
2
3
5
4
2
4
5
5
3
4
5
5
109

0
3
3
1
1
3
1
5
2
0
3
4
3
2
0
1
3
1
0
0
2
1
0
0
71

5
5
5
5
5
2
5
4
5
5
5
3
4
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
160

180

0
0
0
0
0
3
0
1
0
0
0
2
1
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
20
180

5.1.2 Amap
Os dados obtidos no Estado do Amap, que coletou e analisou 200 unidades amostrais, portanto
acima da meta de 180 inicialmente estipulada, mostram que a salmonela foi detectada em 6 amostras (3%). Em relao rotulagem, constatou-se que todas as amostras (100%) apresentaram conformidade com a legislao de referncia. Em presena de vancomicina, 83 amostras, que corresponde
a menos da metade do total analisado (41,5%) apresentaram ausncia de enterococos, enquanto
que na ausncia de vancomicina, a presena de enterococos foi detectada em 174 amostras (87%).
Os resultados so apresentados nas Tabelas 3 e 4.

Tabela 3: ESTADO: AMAP - VARIVEL AVALIADA SALMONELLA

50

Lacen

Rotulagem

UF origem

Salmonella

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

RS
SP
PR
SC
SP
SP
PA
AP
PR
MT
PR
PR
AP

AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP

Salmonella
presena
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

Salmonella
ausncia
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.

AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
Satisfatria
satisfatria

MS
PA
PA
SP
SP
SP
SP
MT
SC
PR
SC
PA
PA
RS
SP
PR
PA
SP
SP
PA
PA
SC
SP
SP
SP
RS
SP

PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

1
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
6

TOTAL

4
5
5
5
5
5
3
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
194
200

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

40
0
0
40

100
0
0
100

51

Tabela 4: ESTADO: AMAP VARIVEL AVALIADA: ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.

AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
AP
TOTAL

52

Enterococcus
com
vancomicina
(presena)

Enterococcus
com
vancomicina
(ausncia)

Enterococcus
sem
vancomicina
(presena)

Enterococcus
sem vancomicina
(ausncia)

0
0
1
1
2
2
1
1
0
0
0
0
3
3
3
1
3
5
5
5
5
5
2
3
2
1
3
5
5
5
4
5
3
5
3
5
5
5
0
0
107

5
5
4
4
3
3
4
4
5
5
5
5
2
2
2
4
2
0
0
0
0
0
3
2
3
4
2
0
0
0
1
0
2
0
2
0
0
0
5
5
83

5
5
5
5
5
5
5
3
2
2
1
0
3
4
3
3
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
176

0
0
0
0
0
0
0
2
3
3
4
5
2
1
2
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
24

200

200

5.1.3 Cear
O Estado do Cear realizou anlises em 180 unidades amostrais. Em relao salmonela, foi detectada a presena em 5 (2,78%) amostras analisadas. Na questo rotulagem, constatou-se que 77,78%
dos laudos estavam em concordncia com a legislao de referncia. Na presena de vancomicina,
enterococos foi positivo em 71 amostras (39,44%), enquanto na ausncia de vancomicina a positividade ocorreu em 174 amostras (96,66%). Os resultados esto apresentados nas Tabelas 5 e 6.

Tabela 5: ESTADO: CEAR - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE

Rotulagem

UF origem

Salmonella

satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

PR
CE
SC
PE
PE
SP
MT
BA
RS
PE
RS
MT
SP
PR
SP
SP
PE
CE
PR
SP
PE
PR
SP
SP
PE
PR
CE
PE
PE
MG
PE
PE
PR
PR
MT
CE

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
TOTAL

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
2
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
5

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
3
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
175
180

53

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

28
8
0
36

77,78
22,22
0
100

Tabela 6: ESTADO: CEAR - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
CE
TOTAL

54

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
2
4
0
0
0
0
0
0
0
0
3
1
5
5
5
2
0
2
0
1
2
2
5
2
4
1
1
1
2
4
1
2
1
3
5
5
71

3
1
5
5
5
5
5
5
5
5
2
4
0
0
0
3
5
3
5
4
3
3
0
3
1
4
4
4
3
1
4
3
4
2
0
0
109
180

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
2
5
5
4
4
5
5
5
5
174

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
3
0
0
1
1
0
0
0
0
6
180

5.1.4 Distrito Federal

As Tabelas 7 e 8 apresentam os resultados obtidos pela coleta de amostras realizada pela VISA-DF e
as anlises realizadas pelo LACEN-DF. Constatou-se a ocorrncia de salmonela em apenas 3 das 177
amostras avaliadas (1,7%). A rotulagem foi considerada satisfatria em 100% das anlises. A presena de enterococos em meio com vancomicina foi de 123 (69,49%), contra 152 amostras (85,88%)
de positividade para as anlises realizadas no meio sem vancomicina.

Tabela 7: DISTRITO FEDERAL - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

Lacen

Rotulagem

UF origem

Salmonella

DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

MG
SP
PR
SP
PR
PR
MG
DF
PR
PR
DF
SP
MG
PR
PR
SP
SP
MG
DF
MG
MG
PR
PR
DF
PR
DF
PR
SP
MG
PR
SP
PR
MG
DF
PR
DF

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
TOTAL

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
3

4
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
5
3
5
5
5
5
5
174
177

55

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

36
0
0
36

100
0
0
100

Tabela 8: DISTRITO FEDERAL - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.

56

DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF
DF

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
3
2
1
3
3
3
3
1
4
5
2
5
0
4
4
4
5
4
4
5
4
5
5
4
5
5
5
0
5
0
2
5
2
5

1
3
4
2
2
2
2
4
1
0
3
0
5
0
1
1
0
1
1
0
1
0
0
1
0
0
0
5
0
5
3
0
3
0

4
5
4
4
4
2
1
2
5
5
2
4
4
4
4
5
4
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
4
5
1
5
5
5
5

0
0
1
1
1
3
4
3
0
0
3
1
1
0
1
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
4
0
0
0
0

35.
36.

DF
DF

2
4
123

TOTAL

3
0
54

5
5
152

177

0
0
25
177

5.1.5 Esprito Santo

O Estado do Esprito Santo coletou e analisou 140 unidades amostrais, atingindo 78% da meta estipulada para cada estado (180). Os resultados esto apresentados nas Tabelas 9 e 10. A presena de
salmonela ocorreu em 0% das anlises, ou seja, ausncia de 100%. Em meio com vancomicina, foi
constatada a presena de enterococos em 134 das 140 amostras (95,71%), sendo de 100% a positividade de enterococos em meio sem vancomicina. Em relao rotulagem, 18 laudos (64,29%) estavam em conformidade com a legislao de referncia, 9 foram consideradas insatisfatrios (32,14%),
e 1 (3,57%) teve resultado indefinido.

Tabela 9: ESTADO: ESPRITO SANTO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.

ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES

Rotulagem

UF origem

Salmonella

indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
indefinida
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

PR
PR
ES
ES
SC
ES
PR
PR
PR
ES
ES
ES
PR
ES
PR
PR
SC
PR
ES
ES
SC
PR
ES
SP
PR
ES
ES
PR

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
TOTAL

Salmonella
(presena)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

Salmonella
(ausncia)
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
140
140

57

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

18
9
1
28

64,29
32,14
3,57
100

Tabela 10: ESTADO: ESPRITO SANTO - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.

ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
ES
TOTAL

58

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
0
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
134

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
5
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
6
140

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
140

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
140

5.1.6 Gois
O Estado de Gois coletou e analisou 190 unidades amostrais, correspondendo a 38 laudos emitidos pelo LACEN-GO. Houve ausncia de salmonela em 100% das anlises. Em relao rotulagem,
os laudos foram satisfatrios em 86,84% dos rtulos analisadose, e insatisfatrios em 13,16%. Em
presena de vancomicina, detectou-se a presena de enterococcos em 29 amostras das 190 avaliadas
(15,26%). Em meio sem vancomicina, detectou-se a presena em 189 amostras (99,47%). Os resultados esto apresentados nas Tabelas 11 e 12.

Tabela 11: ESTADO: GOIS - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.

GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO

Rotulagem

UF origem

Salmonella

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria

DF
MG
MG
DF
GO
GO
MG
SC
GO
MG
GO
DF
GO
MG
DF
PR
PR
SP
SP
PR
PR
MG
GO
GO
MG
DF
SP
PR
PR
MG
DF
PR
MG
DF
PR
GO
SP
DF

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
TOTAL

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
190
190

59

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

33
5
0
38

86,84
13,16
0
100

Tabela 12: ESTADO: GOIS - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.

GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
GO
TOTAL

60

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
4
2
4
5
0
1
5
0
0
2
1
0
0
2
3
29

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
1
3
1
0
5
4
0
5
5
3
4
5
5
3
2
161
190

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
189

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
190

5.1.7 Mato Grosso do Sul

O Estado do Mato Grosso do Sul tambm colheu e analisou 190 unidades amostrais, das 180 previstas na meta do programa para cada estado. Os dados de salmonela indicam que apenas cinco das
190 amostras apresentaram sua presena (2,63%). Em relao rotulagem, todos os rtulos foram
considerados satisfatrios (100% de conformidade). Nas anlises de enterococos, em meio com
vancomicina, 136 amostras apresentaram a presena (71,58%). Em meio sem vancomicina, todas as
amostras apresentaram enterococos (100%). Os dados esto apresentados nas Tabelas 13 e 14.

Tabela 13: ESTADO: MATO GROSSO DO SUL - VARIVEL AVALIADA

SALMONELLA
Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.

MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS

Rotulagem

UF origem

Salmonella

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

PR
MT
RS
PR
MS
MT
MT
MT
MS
MT
PR
MS
PR
MS
PR
PR
MS
MS
PR
MS
MS
PR
PR
RS
MT
PR
RS
MS
PR
PR
MS
SP
PR
PR
PR
PR
MS
SP

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
TOTAL

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
1
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
5

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
5
5
5
5
4
5
5
5
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
185
190

61

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

38
0
0
38

100
0
0
100

Tabela 14: ESTADO: MATO GROSSO DO SUL - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

62

MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS
MS

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
2
0
0
3
5
2
5
4
3
0
2
5
4
4
4
1
3
5
5
5
5
4
4
5
4
5
5
4
2
5
4
5
5
5
0
4

3
5
5
2
0
3
0
1
2
5
3
0
1
1
1
4
2
0
0
0
0
1
1
0
1
0
0
1
3
0
1
0
0
0
5
1

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

37.
38.

MS
MS

4
4
136

TOTAL

1
1
54

5
5
190

0
0
0

190

190

5.1.8 Minas Gerais

Os dados de salmonela obtidos por Minas Gerais indicam que em apenas 3 das 180 amostras analisadas detectou-se sua presena (1,67%). A rotulagem foi considerada satisfatria em 26 laudos
(72,22%), insatisfatria em 9 (25%) e indefinida em 1 (2,78%), possivelmente por dificuldades na
leitura e/ou rompimento na integridade das embalagens (o fato gerador no foi reportado). Em meio
com vancomicina, a presena de enterococos foi detecatada em 140 das 180 amostras (77,78%).
Em meio sem vancomicina, a presena de enterococos foi detectada em 178 amostras (98,89%). Os
dados esto apresentados nas Tabelas 15 e 16.

Tabela 15: ESTADO: MINAS GERAIS - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.

MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

insatisfatria
satisfatria
satisfatria
indefinida
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

MG
PR
RS
PR
PR
PR
PR
MG
MG
SP
MG
MG
MG
SP
MG
RS
MG
MG
MG
PR
PR
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
RS
PR
MG

PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

63

34.
35.
36.

MG
MG
MG

satisfatria
insatisfatria
insatisfatria

RS
MG
MG

AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE

0
2
0
3

TOTAL

5
3
5
177
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

26
9
1
36

72,22
25,00
2,78
100,00

Tabela 16: ESTADO: MINAS GERAIS - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.

64

MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG
MG

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
5
0
5
4
1
5
5
0
5
5
0
5
4
1
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
2
3
3
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
4
1
5
5
0
5
0
5
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5
5
0
5

Enterococcus
sem vancomicina
(ausncia)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

33.
34.
35.
36.

MG
MG
MG
MG
TOTAL

5
1
5
5
140

0
4
0
0
40

5
5
5
5
178

0
0
0
0
2

180

180

5.1.9 Paran
Na avaliao de presena e ausncia de salmonelas em carcaas congeladas de frango, os dados do
Paran indicam que sua presena foi detectada em apenas 2 das 180 amostras analisadas (1,11%).
Na avaliao de conformidade dos rtulos, constatou-se a plena adequao Resoluo RDC n
13/2001. No meio com vancomicina, observou-se a presena de enterococos em 26 das 180 amostras analisadas (14,44%). Em meio sem vancomicina, foi observada a presena de enterococos em
135 amostras (75%). Os dados esto apresentados nas Tabelas 17 e 18.

Tabela 17: ESTADO: PARAN - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.

PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

PR
PR
MG
PR
SP
MG
MG
PR
PR
PR
PR
PR
MG
SP
PR
RS
MG
GO
PR
SC
GO
SP
SP
SP
PR
PR
PR
PR
PR
PR
SP
GO

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
5
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5

65

33.
34.
35.
36.

PR
PR
PR
PR

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

PR
PR
PR
PR

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
2

TOTAL

5
5
5
5
178
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

36
0
0
36

100
0
0
100

Tabela 18: ESTADO: PARAN - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.

66

PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR
PR

Enterococcus
com vancomicina
(presena)

Enterococcus
com vancomicina
(ausncia)

Enterococcus
sem vancomicina
(presena)

Enterococcus
sem vancomicina
(ausncia)

0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
3
2
5
0
0
0
0
2
0
0
1
0
0
0
1

5
5
3
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
2
3
0
5
5
5
5
3
5
5
4
5
5
5
4

5
2
5
0
5
4
4
0
0
2
3
2
3
2
0
3
5
5
3
4
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
3
0
5
0
1
1
5
5
3
2
3
2
3
5
2
0
0
2
1
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0

31.
32.
33.
34.
35.
36.

PR
PR
PR
PR
PR
PR

0
5
0
1
2
2
26

TOTAL

5
0
5
4
3
3
154

5
5
5
4
5
5
135

0
0
0
1
0
0
45

180

180

5.1.10 Rio de Janeiro

O Rio de Janeiro contribuiu para o programa realizando a anlise de 190 unidades amostrais, de 180
programadas. Na anlise de salmonela, constatou-se a presena em apenas 3 amostras (1,58%). Em
relao rotulagem, 29 laudos apresentaram concordncia com a legislao (76,32%), ao passo que
9 estavam em desacordo (23,68%). Em meio com vancomicina, foi observada a presena de enterococos em 126 amostras (66,32%). Em meio sem vancomicina, todas as amostras apresentaram
positividade para enterococos (100%). Os dados esto apresentados nas Tabelas 19 e 20.

Tabela 19: ESTADO: RIO DE JANEIRO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.

RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

MT
RJ
RJ
MS
RJ
SP
RJ
MG
PR
PR
MT
PR
PR
MG
PR
RJ
MG
MT
RJ
PR
MG
MG
MG
PR
PR
SP
SP
SP

AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
2
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

67

29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.

RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ

satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria
satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria

RJ
SP
PR
SP
PR
SP
DF
MG
PR
PR

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
3

TOTAL

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
187
190

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

39
9
0
38

76,32
23,68
0,00
100,00

Tabela 20: ESTADO: RIO DE JANEIRO - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.

68

RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ

Enterococcus
com vancomicina
(presena)

Enterococcus
com vancomicina
(ausncia)

Enterococcus
sem vancomicina
(presena)

Enterococcus
sem vancomicina
(ausncia)

5
5
5
5
5
2
5
5
5
0
5
3
0
3
1
5
0
2
5
4

0
0
0
0
0
3
0
0
0
5
0
2
5
2
4
0
5
3
0
1

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.

RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
RJ
TOTAL

3
5
2
2
4
2
3
5
4
1
5
4
0
5
4
5
0
2
126

2
0
3
3
1
3
2
0
1
4
0
1
5
0
1
0
5
3
64

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
190

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

190

190

5.1.11 Rio Grande do Norte

O Estado do Rio Grande do Norte colheu e analisou 180 unidades amostrais, sendo constatada a
presena de salmonelas em duas delas (1,11%). Em relao rotulagem, todos os laudos (100%)
estavam adequados Resoluo RDC n 13/2001. Quanto enterococos, em meio com vancomicina, observou-se a presena em 124 amostras (68,89%). Em meio sem vancomicina, foi detectada a
presena de enetrococos em todas as amostras analisadas (100%). Os dados esto apresentados nas
tabelas 21 e 22.

Tabela 21: ESTADO: RIO GRANDE DO NORTE - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

RS
SP
BA
RS
BA
BA
RN
RN
BA
RS
PE
PE
BA
RS
PE

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN

69

16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

RS
RN
SC
PR
RS
RS
PR
MG
PE
RS
PE
SP
BA
RN
RN
PE
MT
PE
MT
RN
BA

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
PRESENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
2
4

TOTAL

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
3
176
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

36
0
0
36

100,00
0,00
0,00
100,00

Tabela 22: ESTADO: RIO GRANDE DO NORTE - VARIVEL AVALIADA ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

70

RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
5
4
1
0
1
5
5
2
2

0
1
4
5
4
0
0
3
3

5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0
0
0
0

10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
RN
TOTAL

4
5
4
5
4
5
3
5
2
4
5
1
3
3
3
0
0
5
1
5
5
5
2
5
5
5
5
124

1
0
1
0
1
0
2
0
3
1
0
4
2
2
2
5
5
0
4
0
0
0
3
0
0
0
0
56

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
180

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

180

180

5.1.12 Rio Grande do Sul

As amostras analisadas pelo Estado do Rio Grande do Sul apresentaram ausncia de salmonela em
172 de 180 (95,56%). A rotulagem foi satisfatria em 27 laudos (75%), insatisfatria em 1 (2,78%)
e indefinida em 8 (22,22%). Em relao enterococos, em meio com vancomicina, detectou-se a
presena em 165 amostras (91,67%). Em meio sem vancomicina, constatou-se que todas as amostras apresentaram enterococos (100% de positividade). Os dados esto apresentados nas Tabelas 23
e 24.

Tabela 23: ESTADO: RIO GRANDE DO SUL - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.

RS
RS
RS
RS
RS
RS

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida
indefinida

RS
PR
MG
RS
PR
RS

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
0

5
5
5
5
5
5

71

7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS

indefinida
indefinida
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

RS
RS
RS
RS
RS
RS
PR
RS
RS
RS
RS
RS
PR
RS
RS
SP
RS
PR
MG
PR
RS
RS
SP
RS
SC
RS
MG
PR
RS
MG

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
1
0
0
0
1
0
0
0
2
1
0
0
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
8

TOTAL

180

Rotulagem

72

5
5
5
4
5
5
5
4
5
5
5
3
4
5
5
2
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
172

Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

27
1
8
36

75,00
2,78
22,22
100,00

Tabela 24: ESTADO: RIO GRANDE DO SUL - VARIVEL AVALIADA ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
RS
TOTAL

Enterococcus
com vancomicina
(presena)

Enterococcus
com vancomicina
(ausncia)

Enterococcus
sem vancomicina
(presena)

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
5
5
0
4
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
5
0
5
5
5
5
165

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
0
5
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
5
0
0
0
0
15

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
180

180

Enterococcus
sem
vancomicina
(ausncia)
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

180

73

5.1.13 Santa Catarina

O Estado de Santa Catarina foi o nico participante do programa a analisar somente marcas de
seu Estado. Os dados obtidos para salmonela indicam que sua presena foi detectada em 6 das
180 amostras analisadas (3,33%). A anlise dos rtulos mostrou que 33 laudos se apresentaram
adequados legislao (91,67%), ao passo que 3 estavam em desacordo (8,33%). Na anlise de
presena e ausncia de enterococos, em meio com vancomicina, detectou-se a presena em 69
amostras (38,33%). Em meio sem vancomicina, 169 amostras apresentaram presena de enterococos (93,89%). Os dados esto apresentados nas Tabelas 25 e 26

Tabela 25: ESTADO: SANTA CATARINA - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.

74

SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
5
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
4
0
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

35.
36.

SC
SC

satisfatria
satisfatria

SC
SC

AUSENTE
AUSENTE

0
0
6

TOTAL

5
5
174
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo
Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

33
3
0
36

Tabela 26: ESTADO: SANTA CATARINA - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.

SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC
SC

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
0
0
0
0
0
3
1
0
0
0
5
2
4
5
4
5
4
0
0
0
5
3
0
5
0
2
2
4
1
5

5
5
5
5
5
2
4
5
5
5
0
3
1
0
1
0
1
5
5
5
0
2
5
0
5
3
3
1
4
0

5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
5
4
5
3
5
5
2
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
1
0
2
0
0
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

75

31.
32.
33.
34.
35.
36.

SC
SC
SC
SC
SC
SC
TOTAL

0
4
0
5
0
0
69

5
1
5
0
5
5
111

5
5
5
5
3
4
169

0
0
0
0
2
1
11

180

180

5.1.14 So Paulo - Capital

Em So Paulo, Capital, foram colhidas e analisadas 180 unidades amostrais, das quais foi constatada
presena de salmonela em 16 delas (8,89%). A rotulagem foi considerada satisfatria em 100% dos
rtulos analisados. Em meio com vancomicina, a presena de enterococos foi constatada em 161
amostras analisadas (89,44%). Em meios sem vancomicina, todas as 180 amostras apresentaram
presena de enterococos (100%). Os resultados esto apresentados nas Tabelas 27 e 28.

Tabela 27: ESTADO: SO PAULO (CAPITAL) - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.

76

SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

MT
RS
RS
MT
PR
SP
PR
SP
PR
PR
MG
PR
PR
PR
MG
SP
SP
SP
SP
SP
MG
SP
PR
SP
RS
PR
SP
SP

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2
0
0
1
0
0
0
0
5
2
0
0
5

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
3
5
5
4
5
5
5
5
0
3
5
5
0

29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

SC
SP
RS
RS
MT
GO
PR
SP

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE

0
0
0
0
0
0
0
1
16

TOTAL

5
5
5
5
5
5
5
4
164
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria

36

100

Insatisfatria

Indefinida

Total

36

100

Tabela 28: ESTADO: SO PAULO (CAPITAL) - VARIVEL AVALIADA - ENTEROCOCCUS

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.

SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP

Enterococcus
com
vancomicina
(presena)

Enterococcus
com
vancomicina
(ausncia)

5
5
5
4
5
5
4
5
1
4
4
5
1
4
4
5
5
5
5
5

0
0
0
1
0
0
1
0
4
1
1
0
4
1
1
0
0
0
0
0

Enterococcus
Enterococcus
sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

77

21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
TOTAL

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
0
5
5
5
5
161

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
5
0
0
0
0
19

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
180

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

180

180

5.1.15 So Paulo Ribeiro Preto

Do mesmo modo que na capital, em Ribeiro Preto foram colhidas e analisadas 180 unidades amostrais, cujos laudos constaram a presena de salmonela em 10 dessas amostras (5,56%). A anlise
da rotulagem foi satisfatria em 31 laudos (86,11%) e em 5 deles foi considerada insatisfatria
(13,89%). Em meio com vancomicina, a presena de enterococos foi observada em 164 amostras
(91,11%), enquanto em meio sem vancomicina, a presena de enterococos foi constatada em 178
amostras (98,89%). Os dados esto apresentados nas Tabelas 29 e 30.

Tabela 29: SO PAULO: RIBEIRO PRETO - VARIVEL AVALIADA - SALMONELLA

Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.

78

RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP

Rotulagem

UF origem

Salmonella

Salmonella
(presena)

Salmonella
(ausncia)

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria

SP
SP
SP
SP
SP
SP
SP
MT
SP
MG
SP
SP
SP
SP
RS
SP
SP

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTO
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

5
5
5
3
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP

satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
satisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria
insatisfatria
satisfatria
satisfatria

SP
MG
SP
PR
SP
SP
SP
SP
PR
PR
SP
SP
SP
SP
DF
DF
SP
PR
SP

AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
PRESENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE
AUSENTE

0
0
0
0
0
1
5
0
0
2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
10

TOTAL

5
5
5
5
5
4
0
5
5
3
5
5
5
5
5
5
5
5
5
170
180

Rotulagem
Concluso do
Laudo

Satisfatria
Insatisfatria
Indefinida
Total

31
5
0
36

86,11
13,89
0,00
100,00

Tabela 30: SO PAULO: RIBEIRO PRETO - VARIVEL AVALIADA

ENTEROCOCCUS
Lacen
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.

RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP

Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
Enterococcus
com vancomicina com vancomicina sem vancomicina sem vancomicina
(presena)
(ausncia)
(presena)
(ausncia)
4
4
5
5
5
5
5
3
5
4
5

1
1
0
0
0
0
0
2
0
1
0

3
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5

2
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

79

12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
RP
TOTAL

5
5
5
5
5
5
4
0
5
4
5
5
5
5
5
3
5
5
5
5
3
5
5
5
5
164

0
0
0
0
0
0
1
5
0
1
0
0
0
0
0
2
0
0
0
0
2
0
0
0
0
16

5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
5
178

0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2

180

180

5.2. RESULTADO CONSOLIDADO DOS ESTADOS (VISA e LACEN)

A meta global de colheita e anlise de carcaas congeladas de frango, segundo as metodologias
definidas no Manual de Procedimentos do PREBAF, foi plenamente alcanada, cujos dados correspondentes so apresentados nas tabelas e figuras que se seguem.

Tabela 31: Nmero de laudos e de unidades amostrais colhidas e analisadas

ESTADO
Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro

80

N DE LAUDOS

N DE UNIDADES
AMOSTRAIS (*)

36
40
36
36
28
38
38
36
36
38

180
200
180
180
140
190
190
180
180
190

Rio Grande do Norte

Rio Grande do Sul
Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto
TOTAL

36
36
36
36
36
542

180
180
180
180
180
2710

(*) Cada laudo correponde a 5 unidades amostrais.

40
40

36

36

38

36

38
36

36

38

36

36

36

36

36

35

28

N de amostras

30

25

20

15

10

N de amostras
Alagoas

Amap

Cear

Distrito.Federal

Esprito.Santo

Gois

Mato.Grosso.do.Sul

Minas.Gerais

Paran

Rio.de.Janeiro

Rio.Grande.do.Norte

Rio.Grande.do.Sul

Santa.Catarina

So.Paulo.-.Capital

So.Paulo.-.Ribeiro.Preto

Figura 1: N laudos enviados pelas Visas para a Anvisa PREBAF

Tabela 32: Nmero de marcas de frango produzidas no estado e avaliadas - PREBAF

ESTADO
Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte

Marcas produzidas no prprio estado

2
1
2
4
5
3
3
19
8
1
1

81

Rio Grande do Sul

Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto

22
15
12
14

Marcas produzidas no prprio Estado

25

No de Marcas produzidas

20

15

10

0
1
Estados
Alagoas

Amap

Cear

Distrito.Federal

Esprito.Santo

Gois

Mato.Grosso.do.Sul

Minas.Gerais

Paran

Rio.de.Janeiro

Rio.Grande.do.Norte

Rio.Grande.do.Sul

Santa.Catarina

So.Paulo.-.Capital

So.Paulo.-.Ribeiro.Preto

Figura 2: Nmero de marcas produzidas no estado e avaliadas PREBAF

Tabela 33: Nmero de marcas comercializadas nos Estados e avaliadas PREBAF

ESTADO
Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte
Rio Grande do Sul

82

Marcas comercializadas no Estado

12
19
13
9
12
10
7
20
17
9
13
21

Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto

16
11
17

25
19

N de marcas

20

15

21

20
17

13

13

12

12

11

10

17

16

10

Marcas comercializadas no Estado

Alagoas

Amap

Cear

Distrito Federal

Esprito Santo

Gois

Mato Grosso do Sul

Minas Gerais

Paran

Rio de Janeiro

Rio Grande do Norte

Rio Grande do Sul

Santa Catarina

So Paulo - Capital

So Paulo - Ribeiro Preto

Figura 3: Nmero de marcas comercializadas nos Estados e avaliadas

Tabela 34: Anlise dos dizeres de rotulagem dos laudos encaminhados pelas
Visas Anvisa - PREBAF
ESTADO
Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte
Rio Grande do Sul
Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro
Preto
TOTAL
%

SATISFATRIA
28
40
28
36
18
33
38
26
36
29
36
27
33
36

INSATISFATRIA
3
0
8
0
9
5
0
9
0
9
0
1
3
0

INDEFINIDA
5
0
0
0
1
0
0
1
0
0
0
8
0
0

TOTAL
36
40
36
36
28
38
38
36
36
38
36
36
36
36

31

36

475
87,6

52
9,6

15
2,8

542
100

83

40

N de laudos enviados Anvisa

35
30
25
20
15
10
5
0

Alagoas

Amap

Cear

Distrito
Federal

Esprito
Santo

Gois

Mato
Grosso
do.Sul

Minas
Gerais

Paran

Rio.de
Janeiro

Rio
Grande
do.Norte

Rio
Grande
do.Sul

Santa
Catarina

So
Paulo.Capital

Estados participantes
SATISFATRIA

INSATISFATRIA

So
Paulo.Ribeiro
Preto

INDEFINIDA

Figura 4: Anlise dos dizeres de rotulagem de acordo com a RDC n 13/2001

Tabela 35: Resultados de notificaes sobre rotulagem - PREBAF (2004-20052006)

84

UF

N notificaes

AL
CE
DF
ES
GO
MG
MS
PE
PR
RS
SC
SP
Total

1
2
2
1
5
11
1
2
7
3
3
6
44

Adequaram as
irregularidades
0
2
2
0
2
3
1
2
5
3
2
4
26

No adequaram
1
0
0
1
3
8
0
0
2
0
1
2
18

12

11

10

8
8

7
6

4
4

3
2 2

2 2
2

1
0

3 3

3
2

2 2

1 1

0
AL

CE

DF

N notificaes

ES

GO

MG

MS

Adequaram as irregularidades

PE

PR

RS

SC

SP

No adequaram

Figura 5: Resultados de notificaes sobre rotulagem - PREBAF

A emisso de notificaes origina-se da coleta de dados de programas nacionais coordenados pela
Anvisa, como o PREBAF, e do recebimento de denncias de usurios, de entidades de defesa do consumidor, do setor produtivo, de rgos de sade, dentre outros. Definiu-se nesse programa que a
GICRA/ANVISA seria responsvel por emitir as notificaes s empresas produtoras de frango, sempre
que na anlise de rtulos fosse constatada inconformidade com a RDC n 13/2001.
Do total de rtulos avaliados no PREBAF at 2006, somando 542, verificou-se um aumento no percentual de adequao legislao de referncia (87,6%), dado que at 2005 a conformidade dos
rtulos atingiu em mdia 81,8%. Um total de 44 notificaes foram enviadas s empresas, solicitando a adequao dos respectivos rtulos, das quais 26 (59%) atenderam s disposies estabelecidas. Os laudos com os resultados insatisfatrios das 18 empresas (41%) que no responderam s
notificaes da ANVISA e/ou da VISA estadual, foram encaminhados ao Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento MAPA para providncias cabveis junto aos estabelecimentos produtores
sob inspeo daquele Ministrio. Contudo, at o fechamento deste relatrio o MAPA no havia se
manifestado quanto ao ocorrido.

85

Tabela 36: Presena e ausncia de Enterococos em meios com vancomicina nas

amostras coletadas
ESTADO

ENTEROCOCOS COM
VANCOMICINA - PRESENA

ENTEROCOCOS COM
VANCOMICINA - AUSNCIA

109
117
71
122
134
29
136
140
26
126
124
165
69
161
164
1693

71
83
109
54
6
161
54
40
154
64
56
15
111
19
16
1013

Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal*
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte
Rio Grande do Sul
Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto
TOTAL

2706

* DF analisou 177 das 180 amostras

165

180
160
134
140

164

161

126

124
111

109

109

120

154

140

122

117

N de Enterococos

136

161

83

100
69

71

80

71

64
54

54

60

56

40
29

40

26
15

19 16

20
0

Enterococos com vancomicina - presena

Enterococos com vancomicina - ausncia

Alagoas

Amap

Cear

Distrito Federal

Esprito Santo

Gois

Mato Grosso do Sul

Minas Gerais

Paran

Rio de Janeiro

Rio Grande do Norte

Rio Grande do Sul

Santa Catarina

So Paulo - Capital

So Paulo - Ribeiro Preto

Figura 6: Presena e ausncia de Enterococos em meio com vancomicina em

amostras de frango colhidas nos Estados

86

Tabela 37: Presena e ausncia de Enterococos em meios sem vancomicina nas

amostras coletadas
ENTEROCOCOS SEM
VANCOMICINA - PRESENA

ENTEROCOCOS SEM
VANCOMICINA - AUSNCIA

160
176
174
152
140
189
190
178
135
189
180
180
169
180
178

20
24
6
25
0
1
0
2
45
1
0
0
11
0
2

TOTAL

2570

137

94,94

5,06

ESTADO
Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal*
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte
Rio Grande do Sul
Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto

*DF analisou 177 das 180 amostras.

189 190

200

176 174

180

160

N de Enterococos

160

189
178

180 180
169

180 178

152
140

135

140
120
100
80
45

60
40

20

20

25

24
6

11
0

Enterococos sem vancomicina - presena

Enterococos sem vancomicina - ausncia

Alagoas

Amap

Cear

Distrito Federal

Esprito Santo

Gois

Mato Grosso do Sul

Minas Gerais

Paran

Rio de Janeiro

Rio Grande do Norte

Rio Grande do Sul

Santa Catarina

So Paulo - Capital

So Paulo - Ribeiro Preto

Figura 7: Presena e ausncia de Enterococos em meio com vancomicina em

amostras de frango colhidas nos Estados
87

Tabela 38: Presena e ausncia de Salmonella spp detectadas nas amostras coletadas
ESTADO

SALMONELA - PRESENA

SALMONELA - AUSNCIA

9
6
5
5
0
0
5
3
2
3
4
8
6
16
10
82 (4%)

171
194
175
175
140
190
185
177
178
187
176
172
174
164
170
2628 (96%)

Alagoas
Amap
Cear
Distrito Federal
Esprito Santo
Gois
Mato Grosso do Sul
Minas Gerais
Paran
Rio de Janeiro
Rio Grande do Norte
Rio Grande do Sul
Santa Catarina
So Paulo - Capital
So Paulo - Ribeiro Preto
TOTAL

2710

194

200
171

190 185

175 177

187
177 178

176

180

Dados de presena e ausncia

160

172

174

170
164

140

140
120
100
80
60
40
20

16
6

10

Salmonela - presena
Alagoas
Gois
Rio.Grande.do.Norte

Amap
Mato.Grosso.do.Sul
Rio.Grande.do.Sul

Salmonela - ausncia
Cear
Minas.Gerais
Santa.Catarina

Distrito.Federal
Paran
So.Paulo.-.Capital

Esprito.Santo
Rio.de.Janeiro
So.Paulo.-.Ribeiro.Preto

Figura 8: Presena e ausncia de Salmonella spp detectadas nas amostras

coletadas

88

Quanto as anlises para contagem de Salmonella sp, mediante a determinao do nmero mais
provvel (NMP/g), a meta era realizar esses ensaios em 25% das unidades amostrais de carcaas
congeladas de frango (01 em cada grupo de 05), ou seja, em 678 carcaas congeladas de frango. A
partir dos laudos recebidos de cada laboratrio (LACEN), foram registrados 634 ensaios realizados,
sendo que 99,56% das unidades amostrais apresentaram contagem Salmonella sp menor que 0,03
NMP/g para um limite Superior de Confiabilidade (LSC) = 0,095/g.

5.3 ANLISES ESPECFICAS REALIZADAS PELOS LABORATRIOS DE REFERNCIA

- IOC E IAL/SP.
5.3.1 Salmonella spp
Em uma anlise preliminar, a caracterizao antignica dos isolados permitiu confirmar a identificao de 250 cepas distribudas em 18 sorovares (Quadro 6, Figura 9), destacando-se maior freqncia
para S. Enteritidis em 48,8% das cepas, seguido de S. Infantis (7,6%), S. Typhimurium (7,2%), S.
Heidelberg (6,4%), S. Mbandaka (4,8%) e 15 (5,2%) cepas caracterizadas como Salmonella sp.
Na avaliao geral, efetuada entre as cepas recebidas (no apresentado em tabela), sob o ponto de
vista da regio geogrfica poltica atual, o maior nmero de isolamento de Salmonella foi obtido na
regio sudeste (126 das 250 cepas, 50,4%), sendo S. Enteritidis o sorovar mais incidente (60 cepas,
47,6). Este sorovar se apresentou disseminado em todas as regies e perodo de anlise, enquanto S.
Infantis apenas na regio sudeste, S. Typhimurium, regies sudeste, norte e centro-oeste, S. Mbandaka, norte e nordeste e S. Heidelberg na sudeste.
Na epidemiologia da doena humana h predomnio de somente poucos sorovares, alguns se mantendo disseminados em estgio contnuo (S. Typhimurium), ou se apresentando como emergentes
como S. Enteritidis, S. Heidelberg, S. Infantis e S. Hadar (WHO, 2006), destacando-se S. Typhimurium
e S. Enteritidis como os mais freqentes em casos de infeco alimentar nos pases desenvolvidos
(Khakhria et al., 1997; Threlfall, 2000; Ribot et al., 2002; CDC, 2004; Velge et al., 2005). Particularmente no Brasil, estes sorovares encontram-se entre os mais freqentemente isolados nas duas
ltimas dcadas, sendo notria sua participao em isolados de origem humana e surtos de origem
alimentar (Hofer & Reis, 1994; Hofer et al., 1997, 1998, Rodrigues, 1994- 2005).

Quadro 6 - Distribuio e freqncia dos diferentes sorovares de Salmonella.

Sorovar
S.Enteritidis
S.Typhimurium
S.Mbandaka
S.Give
S.Heidelberg
S.Infantis
S.Rissen
S.Newport
S.Panama
S.Agona
S.Schwarzenground
S.Senftenberg
S.Minnesota
S.Lexington
S.Ohio
S.Gaminara

N Sorovar
122
18
12
5
16
19
8
2
5
9
3
3
3
2
3
1

%
48,8
7,2
4,8
2,0
6,4
7,6
3,2
0,8
2,0
3,6
1,2
1,2
1,2
0,8
1,2
0,4

89

S.Saintpaul
S.Rubislaw
Salmonella spp.
Total

3
1
15
250

1,2
0,4
6,0
100,0

A elevada freqncia do sorovar Enteritidis coaduna-se com os dados reportados na literatura nacional e internacional, inclusive por seu envolvimento com doena humana, principalmente de transmisso alimentar, tendo como fontes aves e derivados e, particularmente no caso de surtos, ovos
crus ou mal cozidos. Da mesma forma destacam-se por sua importncia os sorovares Typhimurium
e Heidelberg, este ltimo, se apresentando como um sorovar emergente (Rodrigues, 1994 -2005;
Velge et al. 2005).

140

120

100

80

60

40

20

Salmonella.spp.

S.Rubislaw

S.Saintpaul

S.Gaminara

S.Ohio

S.Lexington

S.Minnesota

S.Senftenberg

S.Schwarzenground

S.Agona

S.Panama

S.Newport

S.Rissen

S.Infantis

S.Heidelberg

S.Give

S.Mbandaka

S.Typhimurium

S.Enteritidis

Figura 9: Distribuio e freqncia dos diferentes sorovares de Salmonella

A fagotipagem permitiu a identificao em S. Enteritidis dos fagotipos PT4 em 88 (74,6 %) das 118
cepas analisadas, PT1 (19,5%), PT5 (4,2%) e PT7a (1,7%), evidenciando ampla disseminao dos
fagotipos PT4 e PT1 em todas as regies e perodo de anlise. Em relao a S. Typhimurium, foram
identificados dois fagotipos, destacando-se o PT193 em 14 (82,3%) dos 17 isolados e o PT208 em
3 (17,6%) (Quadro 7, Figura 10). A elevada freqncia desses dois fagotipos (PT4 e PT193) est de
acordo com o nvel mundial de ocorrncia e refora a necessidade de estudos para avaliar a sua real
significncia em nosso meio.

Quadro 7 Freqncia dos fagotipos de S. Enteritidis e S.Typhimurium.

PT1
PT4
PT5
PT17a
PT193
PT208
90

88
23
5
2
14
3

88
90

80

70

60

50

40

23

30

14

20
5

10

0
PT1

PT4

PT5

PT17a

PT193

PT208

Figura 10. Freqncia dos fagotipos de S. Enteritidis e S.Typhimurium

O teste de suscetibilidade aos antimicrobianos atravs da determinao da concentrao inibitria
mnima, revelou que a totalidade das cepas apresentou resistncia a uma ou mais drogas, tendo sido
reconhecidos 98 perfis de multirresistncia (>2 classes de antimicrobianos) em 192 (76,8%) cepas
(Quadro 8, Figura 11). A tabela 3 evidencia que 39 perfis se apresentaram mais freqentes em 69,3%
das cepas multirresistentes, destacando-se modelos FLOR, STR, SSS, NAL em S. Enteritidis (10 cepas)
e FLR, STR, CRO, CEP, TIO, SSS, AMP, ATM, em 9 (56,2%) das 16 cepas de S. Heidelberg (dados no
apresentados em tabela). Reveste-se de importncia a presena de S. Heidelberg, resistentes s cefalosporinas, incluindo aquelas de 3a gerao (CRO e TIO), empregadas no tratamento da salmonelose
invasiva no homem e de uso teraputico e/ou profiltico em animais, respectivamente, devendo,
portanto, ser considerado um alerta face s dificuldades sob o ponto de vista teraputico, tendo em
vista que este sorovar vem se apresentando emergente, particularmente em pases da Amrica do
Norte e leste europeu, relevante a partir do ano de 2004. Um aspecto interessante refere-se a uma
cepa de S. Enteritidis resistente a 6 classes de antimicrobianos envolvendo 13 marcos de resistncia
(FOX, STR, TMP, CRO, CEP, TIO, SSS, CIP, AMP, NAL, ATM, SXT, NIT).

Quadro 8 - Distribuio do total de cepas de Salmonella spp. de acordo com a

resistncia a diferentes classes de drogas.
N de classes

N cepas

15

43

58

78

44

12

91

78

80
70
58

60
50

44

43

40
30
15

20
10
0

12

3
N.de.classes

N.cepas

Figura 11: Distribuio do total de cepas de Salmonella spp. de acordo com a resistncia a diferentes classes de drogas
Quando distribudos por numero de grupos de drogas a resistncia dos sorovares de maior prevalncia (Quadro 9, Figura 12), aponta-se um quadro extremamente preocupante especialmente em
relao a S. Enteritidis, quando 91,8% das cepas so multirresistentes ( 3 classes).
Alm das implicaes em sade pblica, onde Salmonella spp. um dos principais patgenos implicados em doenas de transmisso alimentar (DTA), particularmente a partir de produtos de origem
animal, sua presena assume significante importncia mundial, em face da ocorrncia de cepas
multirresistentes a antimicrobianos, estando muitas vezes associada a surtos de DTA em vrios pases, incluindo o Brasil (Rodrigues, 2001-2007; Fluit, 2005). O cenrio atual observado altamente
preocupante tendo em vista a transferncia concomitante de plasmdeos de virulncia e de resistncia antimicrobiana. Observaes recentes apontam que os quadros clnicos de maior gravidade
so determinados por microrganismos que apresentam fentipo de resistncia antimicrobiana (FAO,
2007).
Assim, dada a relevncia da correlao entre os agentes antimicrobianos empregados no tratamento
humano de infeces determinadas por este microrganismo e aqueles de uso na produo animal,
o teste de suscetibilidade aos antimicrobianos atravs da determinao da concentrao inibitria
mnima foi realizado empregando diferentes frmacos, sendo um grupo representado por aqueles
amplamente utilizados no passado e at os dias atuais e outro, abrangendo os antimicrobianos considerados mais recentes.
Particularizando-se os resultados, verificamos que os maiores percentuais de resistncia (Quadro 10,
Figura 13) foram obtidos para estreptomicina (89,3%), sulfonamida (72,4%), florfenicol (59,2%),
ampicilina (44,8%), cido nalidixico (44,0%), ceftiofur (22,8%), aztreonam (20,4%), enrofloxacina
(18,4%), cefoxitina (17,3%) e cefalotina (12,4%), enquanto para CHL, observou-se apenas grau intermedirio de sensibilidade em 8 (3,2%) cepas. Resistncia a esses frmacos tambm tem sido
notificada em salmonelas de origem aviria (Roy et al., 2002; Logue et al., 2003; Cui et al., 2005;
Berrang et al., 2006). Apesar da proibio do uso de nitrofurantoina em animais de produo de alimentos, pelo MAPA em 2000, ressalta-se como resultado do PREBAF a deteco de 12,2% de cepas
resistentes a este frmaco.

92

Quadro 9 - Distribuio dos sorovares multirresistentes de Salmonella a diferentes classes de antimicrobianos.

4 classes
44
3
0
1
14
5
2
0
0
0
0
2
2
5

5 classes
28
3
2
2
2
3
0
0
0
3
0
0
0
1

6 classes
7
2
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0

45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

3.classes
S.Enteritidis
S.Infantis
S.Senftenberg

4.classes
S.Typhimurium
S.Rissen
S.Minnesota

5.classes
S.Mbandaka
S.Newport
S.Lexington

S.Give
S.Panama
Salmonella.spp.

6.classes
S.Heidelberg
S.Schwarzenground

Figura 12. Distribuio dos sorovares multirresistentes de Salmonella a diferentes

classes de antimicrobianos
Os elevados percentuais de resistncia aos antimicrobianos nas cepas analisadas, alertam para uma
condio de risco sade pblica, tendo em vista as possveis implicaes no tratamento de quadros
clnicos graves de salmonelose. Enfatiza-se a importncia de dar prosseguimento ao presente estudo
no sentido de caracterizar os clones multirresistentes quanto a sua capacidade de albergar e, obviamente, disseminar genes de resistncia a antimicrobianos.

93

Quadro 10 - Freqncia e distribuio dos marcos de resistncia nas 250 cepas de

Salmonella no perodo de 2004 a 2006.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18

2004
20,5
92,9
35,9
64,1
2,6
0
15,4
17,9
56,4
0
0
79,5
20,5
0
51,3
0
0
50

FOX
FLOR
STR
ENR
TMP
CRO
CEP
TIO
SSS
CIP
GEN
AMP
TCY
CHL
NAL
ATM
SXT
NIT

2005
14,6
84,6
100
17,1
9,4
11,1
19,6
19,6
66,6
0
6
62,3
15,4
0
36,7
29,9
6,8
10,7

2006
19,1
13,8
100
1,1
15,9
8,5
2,1
28,7
86,2
1,1
0
8,5
2,1
0
50
17
14,9
4,8

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
2004

FOX

FLOR

STR

ENR

2005

TMP

CRO

CEP

TIO

SSS

CIP

2006

GEN

AMP

TCY

CHL

NAL

ATM

SXT

NIT

Figura 13. Freqncia e distribuio dos marcos de resistncia nas 250 cepas de
Salmonella no perodo de 2004 a 2006

94

5.3.2 Enterococcus sp
Um total de 542 amostras (1 amostra = 5 unidades de frango), perfazendo 2.710 unidades amostrais, foram analisadas no perodo de 2004 a 2006, quanto a presena de Enterococos e desse total, 535 (98,7%)
amostras foram positivas para esta bactria. Um total de 8.188 colnias, identificadas como gnero Enterococcus pelo Laboratrio Central dos Estados participantes no Programa, foram enviadas ao Instituto
Adolfo Lutz de So Paulo para determinao da espcie. A Tabela 39 e a Figura 14 mostram o nmero de
colnias enviadas por Estado para a identificao da espcie. Entre as diferentes espcies j descritas no
gnero Enterococcus, doze delas puderam ser identificadas entre as 8.160 colnias caracterizadas, como
mostra a Tabela 40. Contudo, pudemos observar que houve uma predominncia de quatro espcies: E.
faecalis (61,4%), E. gallinarum (28,7%), E. casseliflavus (5,06%) e E. faecium (2,2) que esto representando cerca de 97% do total das colnias identificadas. Na Tabela 41, temos a distribuio das 12 espcies
identificadas com relao a regio geogrfica, e podemos observar que as quatro principais espcies esto
uniformemente distribudas entre as cinco regies.

Tabela 39: Nmero de colnias do gnero Enterococcus recebidas pelo Instituto

Adolfo Lutz, no perodo de 2004 a 2006.
ESTADO
AL
AP
CE
DF
ES
GO
MG
MS
PR
RJ
RN
RS
SC
SP*
Total

N. DE COLNIAS RECEBIDAS
489
497
482
529
517
436
635
654
309
587
575
641
500
679 + 658
8188

* SP: laboratrios de SP e RP

95

700

635

679

654

658

641
587

575

600
529
489

497

517

500

482

500

436

400
309

300

200

100

0
AL

AP

CE

DF

ES

GO

MG

MS

PR

RJ

RN

RS

SC

SP

RP

Figura 14: N de colnias de enterococos recebidas por estado participante- IAL

2004 - 2006 - PREBAF 2007
Tabela 40: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus das amostras enviadas pelos Lacen ao IAL, no perodo de 2004 a 2006.

Estado

E. avium

AL
AP
CE
DF
ES
GO
MG
MS
PR
RJ
RN
RS
SC
SP*

1
1

Total

2 (0,024)

ESPCIES DE ENTEROCOCOS IDENTIFICADAS

E.
E. columbae E. dispar
E. durans
casseliflavus
16
2
3
34
7
30
2
13
2
13
10
8
8
3
51
8
1
2
9
1
46
1
6
28
1
56
1
4
35
5
13
69
1
5
14
413 (5,06)

1 (0,012)

17 (0,21)

77 (0,95)

E. faecalis

E. faecium

302
256
327
391
288
375
389
408
254
338
328
361
314
679
5010
(61,4)

5
24
17
18
10
8
1
4
7
31
3
5
22
24
179 (2,2)

*E. casseliflavus (5,06%) e E. gallinarum (28,7%) so espcies naturalmente resistentes vancomicina

E. faecalis (61,4%) e E.faecium (2,2%) so predominantes em material clnico porm nas carcaas de
frango foram prevalentes mas no resistentes vancomicina (1% de resistncia).

96

Tabela 41: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus das amostras enviadas pelos Lacen ao IAL, no perodo de 2004 a 2006 (continuao).
ESPCIES DE ENTEROCOCOS IDENTIFICADAS
Estado

E.
gallinarum

AL
AP
CE
DF
ES
GO
MG
MS
PR
RJ
RN
RS
SC
SP*
Total

149
153
102
73
187
42
189
226
36
152
197
209
96
532
2343
(28,7)*

E. hirae

E.
raffinosus

E. mundtii

E. ratti

Enterococcus sp

Total

5
10
2
9
4
1
7
5
10
5

1
-

1
2
1
2
1

7
10
1
8
7
2
2
3
6
2
2
1

489
495
481
527
516
436
630
652
309
585
569
640
499
1332

58 (0,71)

1 (0,012)

7 (0,09)

1
1
(0,012)

51 (0,62)

8160

Tabela 42: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus por regio geogrfica, recebidas no perodo de 2003 a 2006.
ESPCIES DE ENTEROCOCOS IDENTIFICADAS

REGIO
GEOGRFICA

E. avium

E.
casseliflavus

E.
columbae

E. dispar

E.
durans

E.
faecalis

E. faecium

NORTE

34

256

24

NORDESTE

74

957

25

CENTROOESTE

29

18

1174

30

SUDESTE

176

28

1694

66

SUL

100

18

929

34

Total (N/%)

2 (0,024)

413 (5,06)

1 (0,012)

17 (0,21)

77
(0,95)

5010
(61,4)

179 (2,2)

97

Tabela 42a: Distribuio das espcies do Gnero Enterococcus por regio geogrfica, recebidas no perodo de 2004 a 2006 (continuao)
REGIO
GEOGRFICA

ESPCIES DE ENTEROCOCOS IDENTIFICADAS

E.
gallinarum

E. hirae

E.
raffinosus

E.
mundtii

E. ratti

Enterococcus
sp

NORTE

153

10

10

NORDESTE

448

12

14

CENTROOESTE

341

10

10

SUDESTE

1060

16

11

SUL

341

10

Total (N/%)

2343
(28,7)

58
(0,71)

1
(0,012)

7
(0,09)

1
(0,012)

51
(0,62)

Total
(N/%)
495
(6,1)
1539
(18,9)
1615
(19,8)
3063
(37,5)
1448
(17,7)
8160

O critrio para seleo da amostragem para determinao do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos, foi feito baseando-se no nmeros de vezes que cada marca foi analisada para a presena
de Enterococos. Portanto, a marca que foi analisada por at 5 vezes diferentes, todas as amostras
desta marca foram selecionadas para o teste de perfil de suscetibilidade. A marca que foi analisada
por 6 at 10 vezes, 50% das amostras desta marca foram selecionadas; a marca que foi analisada
por 11 a 25 vezes, 25% das amostras foram selecionadas e a marca que foi analisada por mais de 25
vezes, 15% das amostras. Quando houve marca cujo estado produtor era mais que um, a seleo da
amostragem para o teste de suscetibilidade foi feita tambm levando em considerao a informao
do nmero de amostras por estado produtor.
Portanto, 262 (48%) amostras, representadas por 2.136 colnias, foram avaliadas quanto ao perfil
de suscetibilidade aos antimicrobianos pela tcnica de microdiluio em caldo (CIM), segundo critrios do CLSI de 2007. Os antibiticos testados foram: vancomicina (Van), teicoplanina (Tei), ampicilina (Amp), tetraciclina (Tet), ciprofloxacina (Cip), eritromicina (Eri), cloranfenicol (Co), linezolida
(Lnz), quinupristina-dalfopristina (Qda), gentamicina (Gn) e estreptomicina (St). Conforme o grfico
1, podemos observar que cerca de 75% das colnias avaliadas apresentaram suscetibilidade vancomicina, cerca de 24% apresentaram resistncia intermediria e cerca de 1% foram resistentes totais
a este antibitico (VRE). A resistncia intermediria vancomicina (24%) representada pelas 506
colnias identificadas como E. gallinarum e E. casseliflavus, cujas espcies apresentam este perfil de
resistncia de forma intrnseca na bactria. A resistncia total vancomicina (1%) foi detectada em
24 colnias que foram isoladas de dez amostras de frango enviadas por cinco laboratrios ( ES, GO,
RP, RS e SC) e esta resistncia foi detectada em duas espcies, E. faecalis e E. faecium. Todas as colnias foram suscetveis ampicilina, 98,9% teicoplanina, 96,4% linezolida, 87,5% gentamicina,
71% estreptomicina. Entretanto, um menor nvel de suscetibilidade foi detectado para ciprofloxacina (31,3%), cloranfenicol (26,9%), tetraciclina (19,6%), eritromicina (15,4%) e quinupristina-dalfopristina (4,5%).
Na Tabela 42 foi feita a distribuio do perfil de suscetibilidade aos 11 antibiticos testados para as
quatro principais espcies identificadas. Podemos observar que a espcie E. casseliflavus apresentou
maior suscetibilidade tetraciclina (50,9%) e uma menor suscetibilidade eritromicina (4,7%). A
espcie E. faecalis foi a que apresentou menor suscetibilidade quinupristina-dalfopristina (1,4%),
com relao as outras 3 espcies.
Estas 2.136 colnias avaliadas quanto ao perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos representaram 104 marcas de frango diferentes, que foram positivas para o isolamento de Enterococos. Portanto, o Quadro 11 apresenta a distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos frente

98

aos diferentes Estados produtores desse alimento. Podemos observar que as colnias resistentes
vancomicina foram isoladas de amostras de frango produzidas pelos Estados de So Paulo, Santa
Catarina, Paran, Rio Grande do Sul e Distrito Federal, representando 9 marcas diferentes. Para os
demais antimicrobianos podemos observar uma distribuio uniforme do perfil de suscetibilidade aos
antimicrobianos avaliados entre os estados produtores.

Tabela 43: Distribuio do perfil de susceptibilidade antimicrobiana das 2.135

colnias de Enterococcus spp, considerando os Estados produtores de frango
para consumo humano.
ESTADO
PRODUTOR
SP
SC
PR
MG
RS
PE
GO
MT
MS
BA
DF
RN
ES
PA
CE
RJ
AP
AL

Glicopeptdeo

Glicopeptdeo

Vancomicina

Teicoplanina

Aminoglicosdeo Aminoglicosdeo
Gentamicina

Estreptomicina

Penicilina
Ampicilina

66,3
85,1
78,3
77,8
63,6
82,4
92,4
61,5
44
67,4
83,8
68,3
77,5
89,7
73,3
60
100
66,7

31
12
21
22
36
18
39
7,6
9
33
11
32
30
10
27
40
33

2,7
2,5
0,4
0,8
5,4
-

97,3
97,5
99,6
100
99,2
100
100
100
100
100
94,6
100
100
100
100
100
100
100

2,7
2,5
0,4
0,8
5,4
-

81
91,1
77,5
90,5
83,8
97,4
94,5
94,6
100
81,4
73
97,6
100
93,1
100
100
100
100

19
8,9
22,5
9,5
16,2
2,6
5,5
5,4
18,6
27
2,4
6,9
-

69
74,3
68,5
69,8
74,7
75,2
69,2
67,4
81,1
67,4
54,1
68,3
72,5
82,8
63,3
53,3
66,7
100

31
25,7
31,5
30,2
25,3
24,8
30,8
32,6
18,9
32,6
45,9
31,7
27,5
17,2
36,7
46,7
33,3
-

100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100

Tabela 43a: Distribuio do perfil de susceptibilidade antimicrobiana das 2.135 colnias de Enterococcus spp, considerando os Estados produtores de frango para consumo humano (continuao).

SP

Tetraciclinas
Tetraciclina
S
I
R
13,5
1,5
85

Macroldeo
Erittromicina
S
I
R
17,5
21,2
61,3

Fluoroquinolona
Ciprofloxacina
S
I
R
33,3
34,5
32,3

SC

24,1

0,6

75,2

21,6

23,5

54,9

29,2

34,9

35,9

PR

31,5

1,1

67,4

13,8

36,6

49,6

29,3

45,7

25

MG

17,9

0,4

81,7

10,7

33,7

55,6

15,1

45,2

39,7

RS

8,7

0,4

90,9

17

20,6

62,5

33,6

41,9

24,5

PE

21,6

78,4

15,7

27,5

56,9

30,1

30,7

39,2

GO

13,2

1,1

85,7

17,6

15,4

67

52,7

31,9

15,4

MT

19,6

80,4

8,7

25

66,3

50

39,1

10,9

ESTADO
PRODUTOR

99

MS

13,2

86,8

11,3

18,9

69,8

45,3

20,8

34

BA

11,6

2,3

86

20,9

37,2

41,9

20,9

48,8

30,2

DF

8,1

91,9

5,4

5,4

89,2

48,6

51,4

RN

24,4

75,6

14,6

26,8

58,5

19,5

48,8

31,7

ES

27,5

72,5

32,5

67,5

25

32,5

42,5

PA

44,8

55,2

17,2

37,9

44,8

69

13,8

17,2

CE

36,7

63,3

10

43,3

46,7

10

63,3

26,7

RJ

26,7

73,3

20

20

60

33,3

6,7

6,7

AP

33,3

66,7

16,7

16,7

66,7

66,7

16,7

16,7

AL

100

33,6

66,7

33,6

66,7

Tabela 43b: Distribuio do perfil de susceptibilidade antimicrobiana das 2.135

colnias de Enterococcus spp, considerando os Estados produtores de frango
para consumo humano (continuao).
ESTADO
PRODUTOR
SP
SC
PR
MG
RS
PE
GO
MT
MS
BA
DF
RN
ES
PA
CE
RJ
AP
AL

S
43,3
16,8
29,3
27
19,4
20,9
36,3
3,3
22,6
27,9
35,1
14,6
35
41,4
16,7
80
33,3
100

Fenicol

Oxazolidinona

Cloranfenicol

Linezolida

I
32
57,8
52,5
55,1
52,2
40,5
25,3
64,1
32,1
46,5
16,2
39
27,5
27,6
56,7
13,3
50
-

R
24,6
25,4
18,1
17,9
28,5
38,6
38,5
32,6
45,3
25,6
48,6
46,3
37,5
31
26,7
6,7
16,7
-

S
93,5
98,7
99,1
86,6
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
80
100
100
100

I
2,2
0,4
0,9
9,4
13,3
-

R
4,3
0,9
4
6,7
-

Estreptogramina
QuinupristinaDalfopristina
S
I
R
11,7
6,6
81,6
5
9,5
85,6
3,4
6,3
90,3
4
1,5
94,6
0,7
10,5
88,9
4,5
3
92,5
10
90
2,2
1,1
96,7
100
6,7
13,3
80
5,4
94,6
13
87
7,7
10,3
82,1
10
90
90
10
40
6,7
53,3
100
66,7
33,3
66,7

Quadro 11: Distribuio do perfil de suscetibilidade de 2.135 colnias de Enterococcus sp PREBAF 2007.
S
75,2
98,9
100
19,6
31,3
15,4

100

I
23,7
0
0
0,7
38,2
25,9

R
1,1
1,1
0
79,7
30,6
58,7

26,9
96,4
4,5
87,5
71

45,9
2,1
6,1
0
0

27,2
1,5
89,6
12,5
29

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

Van

Tei

Amp

Tet

Cip
S

Eri

Co

Lnz

Qda

Gn

ST

Figura 15: Perfil de suscetibilidade de 2.135 colnias de Enterococcus sp

Quadro 12: Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de 1.630 colnias de Enterococcus spp excluindo as espcies que apresentam resistncia intrnseca para
vancomicina (E. gallinarum e E. Casseliflavus).
ANTIMICROBIANO
Van
Tei
Amp
Tet
Cip
Eri
Co
Lnz
Qda
Gn
ST

S
98,5
98,5
100
19,6
32,8
14,6
24,3
97,5
3,4
90
70,3

I
0
0
0
0,7
39,7
27,1
48,2
1,3
1,4
0
0

R
1,5
1,5
0
79,7
27,5
58,3
27,5
1,2
95,2
10
29,7

101

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

Van

Tei

Amp

Tet

Cip
S

Eri

Co
I

Lnz

Qda

Gn

ST

Figura 16: Perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos de 1.630 colnias de Enterococcus spp excluindo as espcies que apresentam resistncia intrnseca para
vancomicina (E. gallinarum e E. Casseliflavus).
Quadro 13: Perfil de suscetibilidade antimicrobiana de 506 colnias de E. gallinarum e E. casseliflavus.
Antimicrobiano
Van
Tei
Amp
Tet
Cip
Eri
Co
Lnz
Qda
Gn
ST

102

S
0
100
100
18,6
27,5
18,2
37,7
91,2
13,4
79,1
73,1

I
100
0
0
0,8
31,6
23,3
37
5,5
28,6
0
0

R
0
0
0
80,6
40,9
58,5
25,3
3,3
58
20,9
26,9

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

Van

Tei

Amp

Tet

Cip

Eri

Co

Lnz

Qda

Gn

ST

Figura 17: Perfil de suscetibilidade antimicrobiana de 506 colnias de E. gallinarum e E. casseliflavus.

Quadro 14: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das
principais espcies de Enterococcus identificadas.
Espcies

Glicopeptdeo
Vancomicina
S
I
R

Glicopeptdeo
Teicoplanina
S
I
R

Aminoglicosdeo
Gentamicina
S
I
R

Aminoglicosdeo
Estreptomicina
S
I
R

E. faecalis
(N=1.501)

99,7

0,3

99,7

0,3

89,9

10,1

70,2

29,8

E. faecium
(N=82)

75,6

24,4

75,6

24,4

91,5

8,5

62,2

37,8

100

100

75,3

24,7

69,8

30,3

100

100

93,4

6,6

85,8

14,2

E. gallinarum
(N=400)
E.
casseliflavus
(N=106)

103

Quadro 14a: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das

principais espcies de Enterococcus identificadas (continuao).

Espcies

Penicilina

Tetraciclinas

Ampicilina

Tetraciclina

Estreptogramina
QuinupristinaDalfopristina
S
I
R

E. faecalis
(N=1.501)

100

19,5

0,7

79,7

1,4

0,4

98,2

E. faecium
(N=82)

100

11

89

22,1

7,4

70,6

100

10

89

12,3

27,8

59,9

100

50,9

49,1

16

30,7

53,3

E. gallinarum
(N=400)
E.
casseliflavus
(N=106)

Quadro 14b: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das

principais espcies de Enterococcus identificadas (continuao).

Espcies

Macroldeo

Fluoroquinolona

Fenicol

Oxazolidinona

Erittromicina

Ciprofloxacina

Cloranfenicol

Linezolida

E. faecalis
(N=1.501)

13,9

E. faecium
(N=82)

12,2

22

E. gallinarum
(N=400)

21,8

16,3

E. casseliflavus
(N=106)

4,7

50

41,7

26,7

21,5

50,7

27,8

97,5

1,4

1,1

12,2

56,1

54,9

15,9

29,3

97,1

2,9

27,8

29,3

43

37,3

36,8

26

91,1

5,2

3,6

45,3 26,4

40,6

33

39,6

37,7

22,6

91,3

6,2

2,5

27,5 58,5 32,2

65,9 31,7
62

Quadro 15: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das principais espcies de Enterococcus identificadas, por estado.
ESTADO
PRODUTOR

104

Glicopeptdeo
Vancomicina
S
I
R

Glicopeptdeo
Teicoplanina
S
I
R

Aminoglicosdeo
Gentamicina
S
I
R

Aminoglicosdeo
Estreptomicina
S
I
R

SP

66,3

31

2,7

97,3

2,7

81

19

69

31

SC

85,1

12

2,5

97,5

2,5

91,1

8,9

74,3

25,7

PR

78,3

21

0,4

99,6

0,4

77,5

22,5 68,5

31,5

MG

77,8

22

100

90,5

9,5

69,8

30,2

RS

63,6

36

0,8

99,2

0,8

83,8

16,2 74,7

25,3

PE

82,4

18

100

97,4

2,6

75,2

24,8

GO

92,4

39

100

94,5

5,5

69,2

30,8

MT

61,5

7,6

100

94,6

5,4

67,4

32,6

MS

44

100

100

81,1

18,9

BA

67,4

33

100

81,4

18,6 67,4

32,6

DF

83,8

11

5,4

94,6

5,4

73

27

54,1

45,9

RN

68,3

32

100

97,6

2,4

68,3

31,7

ES

77,5

30

100

100

72,5

27,5

PA

89,7

10

100

93,1

6,9

82,8

17,2

CE

73,3

27

100

100

63,3

36,7

RJ

60

40

100

100

53,3

46,7

AP

100

100

100

66,7

33,3

AL

66,7

33

100

100

100

Quadro 15a: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das

principais espcies de Enterococcus identificadas, por estado (continuao).
ESTADO
PRODUTOR

Penicilina

Tetraciclinas

Ampicilina

Tetraciclina

Estreptogramina
QuinupristinaDalfopristina
S
I
R

SP

100

13,5

1,5

85

11,7

6,6

81,6

SC

100

24,1

0,6

75,2

9,5

85,6

PR

100

31,5

1,1

67,4

3,4

6,3

90,3

MG

100

17,9

0,4

81,7

1,5

94,6

RS

100

8,7

0,4

90,9

0,7

10,5

88,9

PE

100

21,6

78,4

4,5

92,5

GO

100

13,2

1,1

85,7

10

90

105

MT

100

19,6

80,4

2,2

1,1

96,7

MS

100

13,2

86,8

100

BA

100

11,6

2,3

86

6,7

13,3

80

DF

100

8,1

91,9

5,4

94,6

RN

100

24,4

75,6

13

87

ES

100

27,5

72,5

7,7

10,3

82,1

PA

100

44,8

55,2

10

90

CE

100

36,7

63,3

90

10

RJ

100

26,7

73,3

40

6,7

53,3

AP

100

33,3

66,7

100

AL

100

100

66,7

33,3

66,7

Quadro 15b: Distribuio do perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das

principais espcies de Enterococcus identificadas, por estado (continuao).
ESTADO
PRODUTOR

Fluoroquinolona

Fenicol

Oxazolidinona

Erittromicina

Ciprofloxacina

Cloranfenicol

Linezolida

17,5 21,2 61,3 33,3 34,5 32,3 43,3

24,6 93,5

2,2

4,3

SC

21,6 23,5 54,9 29,2 34,9 35,9 16,8 57,8 25,4 98,7

0,4

0,9

PR

13,8 36,6 49,6 29,3 45,7

0,9

MG

10,7 33,7 55,6 15,1 45,2 39,7

9,4

17

25

32

SP

RS

106

Macroldeo

29,3 52,5 18,1 99,1

27

55,1 17,9 86,6

20,6 62,5 33,6 41,9 24,5 19,4 52,2 28,5

100

PE

15,7 27,5 56,9 30,1 30,7 39,2 20,9 40,5 38,6

100

GO

17,6 15,4

100

MT

8,7

64,1 32,6

100

MS

11,3 18,9 69,8 45,3 20,8

22,6 32,1 45,3

100

25

67
66,3

52,7 31,9 15,4 36,3 25,3 38,5

50

39,1 10,9
34

3,3

BA

20,9 37,2 41,9 20,9 48,8 30,2 27,9 46,5 25,6

100

DF

5,4

100

RN

14,6 26,8 58,5 19,5 48,8 31,7 14,6

46,3

100

27,5 37,5

100

100

ES
PA

89,2 48,6

51,4 35,1 16,2 48,6

25

32,5 42,5

17,2 37,9 44,8

69

13,8 17,2 41,4 27,6

10

63,3 26,7 16,7 56,7 26,7

80

13,3

6,7

6,7

10

RJ

20

43,3 46,7
20

60

33,3

6,7

35

39

32,5 67,5

CE

AP

5,4

80

16,7 16,7 66,7 66,7 16,7 16,7 33,3

AL

33,6 66,7

33,6 66,7

100

31

13,3

6,7

100

50

16,7

100

100

6. CONCLUSES
- O repasse de recursos financeiros da ANVISA aos executores do PREBAF, mediante convnios, foi
da ordem de R$ 1,5 milho. Considerando o conjunto dos ensaios realizados pelos laboratrios
participantes (verificao de rotulagem, isolamento, contagem, identificao de espcies e perfil
de resistncia a antimicrobianos de salmonelas e enterococos), o custo unitrio das anlises foi em
mdia de R$ 92,34/anlises, num total de 16.244 ensaios realizados.
- Salmonella spp reconhecida como importante patgeno de natureza zoontica, que persiste
assintomaticamente nas aves, podendo ser potencializada por falhas na aplicao das ferramentas
de anlise de perigos e pontos crticos de controle e de boas prticas. Tal situao se refletiu atravs do isolamento de Salmonella spp. em 4,0% das carcaas congeladas de frango analisadas no
PREBAF, que embora sendo um nvel de positividade relativamente baixo, no entanto sua presena
em alimentos constitui-se um fator de risco para a sade humana em nosso meio.
- Sob o ponto de vista da regio geogrfica, o maior nmero de isolamento de Salmonella foi obtido na regio sudeste (50,4%), com prevalncia de S.Enteritidis, seguido de S.Typhimurium nas
regies sudeste, norte e centro-oeste. O teste de suscetibilidade aos antimicrobianos revelou que
a totalidade das cepas apresentou resistncia a uma ou mais drogas usualmente empregadas em
medicina humana e veterinria, tendo sido reconhecidos 98 perfis de multirresistncia.
- A elevada freqncia do sorovar Enteritidis coaduna-se com os dados reportados na literatura
nacional e internacional, inclusive por seu envolvimento com doena humana, principalmente de
transmisso alimentar, tendo como fontes aves e derivados e, particularmente no caso de surtos,
ovos crus ou mal cozidos.
- Tanto em relao a salmonelas quanto aos enterococos, resistncia cruzada foi observada entre
drogas de ltima gerao de uso exclusivo veterinrio, com aquelas empregadas na clnica humana, provavelmente relacionada ao emprego de antimicrobianos nos animais, com finalidades teraputicas, profilticas ou como promotores do crescimento. Os elevados percentuais de resistncia
aos antimicrobianos nas cepas analisadas alertam para uma condio de risco sade pblica,
tendo em vista as possveis implicaes no tratamento de quadros clnicos graves de salmonelose.

107

Os dados do PREBAF mostram uma elevada positividade de Enterococcus sp, prxima de 100% nas
anlises realizadas em meio sem vancomicina.
Com relao ao possvel impacto sade pblica diante da situao aqui relatada, no se pode descartar que os perfis de resistncia encontrados estejam associados ao uso, no controlado ou no
assistido, de antimicrobianos na avicultura de corte (frango), propiciando o aparecimento de cepas
resistentes dos dois microrganismos pesquisados, dificultando o seu controle.
Os antimicrobianos testados no PREBAF quanto ao perfil de suscetibilidade tm importncia na medicina humana e veterinria, embora no se disponha de dados cientficos relevantes sobre possveis
relaes entre o uso de antimicrobianos em animais de produo e o aumento de resistncia em
bactrias isoladas do ser humano, esse um aspecto de sade pblica que tem sido motivo de preocupao de organismos internacionais como a OMS, FAO, OIE e Codex Alimentarius.
A metodologia cientfica aplicada no PREBAF avaliou o perfil de suscetibilidade encontrado. Contudo,
depreende-se dos dados obtidos que multifatores possam estar contribuindo tanto para os nveis de
prevalncia, quanto para os perfis de resistncia encontrados, podendo-se destacar:
contaminao, cruzada ou no, durante uma ou mais etapas da cadeia produtiva.
particularmente em relao ao enterococos, sendo um microrganismo de origem fecal,
a elevada presena do mesmo tem relao com as Boas Prticas Agrcolas, de Produo
Animal e/ou de Fabricao;
emprego de antimicrobianos na avicultura de corte (frango), utilizados como aditivos em
rao, ou como promotores de crescimento e/ou com fins profilticos, para a preveno e
controle da sanidade do rebanho;
tratamento de carcaas, ps abate, atravs da utilizao de coadjuvantes de tecnologia
e/ou aditivos, como ferramentas que podem ser teis na reduo da contaminao.
falhas nos sistemas de controle de produo/processamento, pois existem patgenos que
necessitam de constante monitoramento, principalmente, aqueles que causam doenas
humana, com destaque para Salmonella, um dos objetivos do programa PREBAF.
Em relao verificao de adequao dos rtulos s exigncias da RDC n 13/2001, os resultados
das anlises mostram que a grande maioria dos produtores de frango atendem ao estabelecido na
legislao, que tem por objetivo instruir os consumidores quanto ao manuseio correto do produto,
como medida de preveno sobre agravos sade.

7. RECOMENDAES
- O presente documento traz dados relevantes comunidade cientfica e aos gestores de risco,
devendo a ANVISA ser motivada a divulgar o mesmo com urgncia e com a maior amplitude possvel.
- Torna-se necessrio que se d prosseguimento ao presente estudo, ampliando o seu contexto de
modo a contemplar mais uma seqncia do monitoramento de Salmonella spp e Enterococcos
sp, bem como iniciar a pesquisa sobre outros patgenos com comprovada interveno na cadeia
produtiva de frangos, de relevncia em sade pblica, com destaque para: Listeria spp. e Campylobacter spp.
- Dado que o PREBAF foi importante como instrumento de aperfeioamento das aes de controle
sanitrio de alimentos, um novo estudo a ser executado em parceria com VISA e LACEN, considerando a insero de novos Estados, se justifica pela necessidade de dar continuidade a pesquisa e
monitoramento que possam subsidiar as opes de gerenciamento de risco, em relao ao alimento em questo (frango), de grande impacto na dieta do brasileiro.

108

- Tanto em relao as Salmonelas quanto aos Enterococos, a incidncia de resistncia a diversos

antimicrobianos sinaliza a necessidade de estudos contnuos nessa linha de pesquisa, uma vez que
medidas devem ser tomadas no sentido de racionalizar o excessivo uso de antibiticos no manejo
de animais de abate, notadamente frangos.
- O novo estudo aqui proposto poder ser delineado pela prpria equipe que implementou o PREBAF, devendo o mesmo ser submetido oportunamente aprovao da ANVISA. Preliminarmente,
alguns objetivos especficos devero ser levados em conta, tais como:
Considerar a carne de frango resfriada e cortes de frango (sem temperos) como a nova matriz de anlise, em substituio a carcaa congelada de frango, pois mais fcil coletar
frango resfriado que est se tornando muito popular na dieta do brasileiro, alm do que,
no PREBAF foi relatada muita dificuldade para se encontrar carcaa congelada de frango
no comercio.
Trabalhar com a pesquisa de Salmonella spp e Enterococcos sp, alm de Listeria sp e Campylobacter spp, por tambm serem estes ultimos referncia para estudo de resistncia a
antimicrobianos.
Caracterizar os clones resistentes e multirresistentes, quanto a capacidade de albergar e,
obviamente, disseminar genes de resistncia, visando assegurar atravs do uso racional o
tratamento clinico apropriado e orientar intervenes de sade pblica.
Detectar a magnitude da resistncia aos antimicrobianos, particularmente em relao aos
frmacos de escolha teraputica humana.
Estabelecer parcerias com outras VISAs e LACENs que no participaram do PREBAF, para o
desenvolvimento, validao e aplicao de metodologias e maior representatividade dos
resultados.
Aumentar a parceria com outras VISAs e outros LACENs que no participaram desse programa, visando ampliar o desenvolvimento, validao e aplicao de metodologias e a
representatividade dos resultados.

109

8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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ZANELLA, R. C. et al. First confirmed case of vancomycin-resistant Enterococcus faecium with vanA phenotype from Brazil:
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ZANELLA, R. C.; BRANDILEONE, M. C. C.; BOKERMANN, S.; ALMEIDA, S. C.G.; VALDETARO, F.; VITRIO, F.; MOREIRA, M. DE F.
A.; VILLINS, M.; SALOMO, R.; PIGNATARI, A. C. C. Phenotypic and Genotypic Characterization of VanA Enterococcus Isolated
During the First Nosocomial Outbreak in Brazil. Microbial Drug Resistance-Mechanisms Epidemiology And Disease, Estados
Unidos, v. 9, n.3, p. 283-291, 2003.
Zervos, m. j.; mikesell, t. s.; schaberg, d. r. Heterogeneity of plasmids determining high-level resistance to gentamicin
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ZHAO, S., MCDERMOTT, P.F., FRIEDMAN, S., ABBOTT, J., AYERS, S., GLENN, A., HALL-ROBINSON, E., HUBERT, S.K., HARBOTTLE,
H., WALKER, R.D., CHILLER, T.M. & WHITE, D.G. Antimicrobial resistance and genetic relatedness among Salmonella from retail
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Zimmerman, r. a.; moellering jr, r. c.; Weinberg, a. n. Mechanism of resistance to antibiotic synergism in enterococci.
J. Bacteriol., 105: 873-9, 1971.

124

PROCEDIMENTO OPERACIONAL
Nmero:

Localizador:

Reviso:

POP - 001

GICRA/GGALI

Data da Reviso:
Data para revalidao:

Ttulo: Colheita de carcaas congelada de frango

Descrio da Reviso:

Palavra(s) chave: Salmonella Frango - Rotulagem

Elaborador:

Aprovador:

Gerncia de Inspeo e Controle de Ana Virgnia de Almeida Figueiredo

Riscos de Alimentos
Cargo: Tcnicos

1.

Cargo: gerente de Inspeo e Controle de Riscos em Alimentos

OBJETIVO

Determinar procedimentos para colheita de amostras de carcaas congeladas de frango destinadas

ao Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango PREBAF, e para a anlise de resultados e interveno.
2.

CAMPO DE APLICAO

Este Procedimento Operacional Padro estabelece os procedimentos a serem observados pelos rgos de vigilncia sanitria dos Estados envolvidos no PREBAF, para a colheita de amostras de carcaas congeladas de frango.
3.

PROCEDIMENTOS

3.1

COLHEITA DE AMOSTRAS

3.1.1 Colher, no comrcio local, duas amostras, de marcas distintas, compostas por 05 (cinco)
unidades de frango inteiro congelado e sem tempero, por ms. A seleo das amostras deve ser baseada na disponibilidade das marcas no mercado, priorizando os produtos processados em frigorficos
locais.
3.1.2 As cinco unidades da amostra devem apresentar as mesmas especificaes quanto a marca,
ao lote, data de fabricao e prazo de validade. As unidades de amostra no devem apresentar sinais
de violao na embalagem primria.
3.1.3 Colher amostras com, no mnimo, 60 dias para expirar a validade. Deve ser dispensada a
colheita da amostra sempre que o produto estiver visivelmente adulterado ou deteriorado, ou armazenado em temperatura inadequada.
3.1.4 Para cada amostra deve ser emitido um Termo de Colheita de Amostras (TCA) e especificado
o motivo de colheita (PREBAF) e a modalidade de anlise (Orientao).
3.1.5 O TCA deve ser preenchido em letra legvel, preferencialmente em letra de forma.
3.1.6 Enviar as amostras ao laboratrio devidamente identificadas, contendo as seguintes informaes:
A data, a hora da colheita, a temperatura do produto e/ou do equipamento; de exposio (gndola,
freezer) no momento da colheita, as condies da amostra no ponto de colheita e outros dados que
possam auxiliar as atividades analticas.
3.1.7 As amostras colhidas devem ser entregues no mesmo dia ao laboratrio, devidamente lacradas, sendo mantidas em caixa isotrmica, com gelo reciclvel durante o transporte.
As amostras devem permanecer congeladas desde a colheita at a entrega no laboratrio.

125

PROCEDIMENTO OPERACIONAL
Nmero:

Localizador:

Reviso:

POP - 001

GICRA/GGALI

Data da Reviso:
Data para revalidao:

Ttulo: Colheita de carcaas congelada de frango

Descrio da Reviso:

Palavra(s) chave: Salmonella Frango - Rotulagem

Elaborador:

Aprovador:

Gerncia de Inspeo e Controle de Ana Virgnia de Almeida Figueiredo

Riscos de Alimentos
Cargo: Tcnicos

Cargo: gerente de Inspeo e Controle de Riscos em Alimentos

3.1.8 Excepcionalmente, quando no for possvel entregar as amostras ao laboratrio no m e s mo dia da colheita, as mesmas devem ser mantidas em freezer garantindo a sua integridade.
3.1.9 O prazo mximo de entrega das amostras (congeladas) ao laboratrio no deve exceder a
72 horas aps colheita, respeitando os dias previamente acordados no cronograma de amostragem
entre o rgo de vigilncia sanitria e o laboratrio.

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MANUAL DA QUALIDADE
TTULO: RECEPO E PROCESSAMENTO INICIAL DE AMOSTRAS DE CARCAAS NMERO
CONGELADAS DE FRANGO E EMISSO DO LAUDO DE ANLISE
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PALAVRAS-CHAVE:

Seo do Manual
TCNICA DE ENXAGUADURA - CARCAAS DE FRANGO - 10
LAUDOS

REVISO
01

ELABORADO

VERIFICADO

APROVADO

REFERENDADO

DATA

Carla de O. Rosas

Mrcia B
Warnken

Marise S. de
Magalhes

Eduardo
Leal

Chaves 13/07/2004

SUMRIO
1. Objetivo
2. Campo de aplicao
3. Siglas
4. Condies Gerais
5. Condies Especficas
6. Bibliografia
7. Anexos
A. Meios de Cultura
B. Solues e Reagentes
1. OBJETIVO
Este Procedimento Operacional Padronizado estabelece condies e procedimentos para a recepo,
armazenamento processamento as mostras a serem submetidas pesquisa e contagem de Salmonella sp e pesquisa de Enterococcus sp. Este POP tambm padroniza os dados que devem constar
nos laudos de anlise e destinatrio de encaminhamento.
2. CAMPO DE APLICAO
Este POP aplica-se ao PREBAF e visa uniformizar as metodologias de anlise, bem como a elaborao
de laudos a serem encaminhados aos rgos de Vigilncia Sanitria, pelos laboratrios participantes.

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CONGELADAS DE FRANGO E EMISSO DO LAUDO DE ANLISE
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3. SIGLAS
So usadas no texto deste POP as seguintes siglas:
PREBAF Programa Nacional de monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango
ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
ATCC American Type Culture Collection
IAL Instituto Adolfo Lutz
INCQS Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade
4. CONDIES GERAIS
4.1 Materiais e equipamentos
a) balana com capacidade para 3000g e sensibilidade de 0,01g;
b) bandejas inox
c) bisturis
d) bolsa plstica estril com capacidade de 5 L;
e) frasco erlenmeyer com capacidade de 5 L ou frasco similar;
f) papel indicador de pH.
Nota:
Esterilizar os materiais em forno Pasteur a 180 C durante 2 horas.
4.2 Meios de cultura (ver Anexo A)
a) gua peptonada tamponada (APT)
4.3 Solues e reagentes (ver Anexo B)
a) cido clordrico 1N;
b) lcool a 70%
c) hidrxido de sdio 1N;
d) triton x-100
5. CONDIES ESPECFICAS
Duas amostras de carcaas congeladas de frango sem tempero, compostas cada uma, por cinco

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unidades so coletadas mensalmente pela Vigilncia Sanitria. As unidades de cada amostra devem
pertencer mesma marca comercial e apresentar a mesma data de embalagem e/ou prazo de validade do produto.
As amostras so acondicionadas, identificadas e enviadas ao laboratrio de anlise, sob refrigerao,
no menor perodo de tempo possvel.
Cada Termo de Colheita de Amostras corresponde a cinco unidades do produto de uma nica marca
comercial, conforme descrito acima.
5.1 Recepo e estocagem no laboratrio
Observar o aspecto geral da amostra. Verificar se o produto no contm tempero, se todas as unidades apresentam a mesma data de embalagem e/ou prazo de validade do produto e se as mesmas
esto congeladas.
Armazenar as unidades da amostra no laboratrio, em freezer. Para iniciar as anlises, proceder ao
descongelamento das mesmas em refrigerador, na embalagem original, durante 18 horas.
5.3 Enxaguadura da amostra
A etapa de enxaguadura da amostra comum para os ensaios de pesquisa e contagem de Salmonella
e tambm para pesquisa de Enterococcus sp.
Proceder a limpeza da superfcie externa da embalagem utilizando gaze embebida em 70%. Abrir a
embalagem com bisturi estril. Desprezar os midos e transferir a carcaa para saco plstico estril.
Pesar a amostra e adicionar, para cada 1 g do frango, 1 mL de APT. Fazer a enxaguadura, cuidadosamente e de maneira uniforme, em toda a superfcie da carcaa.
Transferir o caldo de enxaguadura para erlenmeyer de 5L.
Deixar em repouso durante 60 minutos temperatura ambiente. Verificar o pH do homogenato com
papel indicador de pH. Se necessrio, ajustar o pH para 6,8 0,2 utilizando cido clordrico 1N e
hidrxido de sdio 1N.
Aps o ajuste do pH, proceder semeadura dos meios para enterococos a partir do caldo de enxaguadura.
Para os ensaios de Salmonella sp, acrescentar ao caldo de enxaguadura, Triton X 100 (submetido a
vapor fluente durante 15 minutos). A utilizao desse surfactante deve ser limitada menor quantidade suficiente para iniciar a formao de espuma.

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Nota:
Cada 1 mL do caldo de enxaguadura corresponde a 1g da amostra.
Proceder pesquisa de Salmonella sp (POP INCQS n 65.3210.044) e pesquisa de Enterococcus
sp (POP IAL) nas 5 unidades da amostra. Realizar a contagem de Salmonella sp (POP INCQS n
65.3210.044) em apenas uma unidade da amostra.
5.4 Anlise de Rotulagem
Proceder anlise de rotulagem segundo a Resoluo RDC ANVISA n 13 de 02/01/2001, que estabelece a obrigatoriedade para os produtores de carnes de aves e seus midos crus, resfriados ou
congelados, de incluir na rotulagem destes produtos as instrues de uso, preparo e conservao
dos mesmos.
5.5 Laudo de anlise
5.5.1 Elaborar o Laudo de Anlise com as informaes listadas abaixo.
a)

130

informaes sobre a amostra:

Nmero de Cadastro da Amostra no Laboratrio;
Modalidade de Anlise: Orientao;
Programa;
Nome do Produto: Carcaa Congelada de Frango;
Quantidade Recebida;
Data de Fabricao;
Data de Validade;
Nmero do Lote;
Termo de Apreenso;
Motivo da Apreenso: Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango PREBAF;
Registro;
Fabricante;
Logradouro;
Pas;
Local de Coleta;
Requerente;
Pessoa de Contato;
Documento;
Data de Entrada;
Descrio da Amostra.

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b) Resultado da anlise
Nome do Ensaio: Anlise de Rotulagem:
Referncia: Resoluo RDC n. 13 de 02/01/2001-ANVISA
Resultado: Satisfatrio/Insatisfatrio
Nome do Ensaio: Pesquisa de Salmonella
Referncia : POP INCQS n 65.3210.044
Resultado: Presente/Ausente
Unidade da Amostra A________________
Unidade da Amostra B________________
Unidade da Amostra C________________
Unidade da Amostra D________________
Unidade da Amostra E________________
Nome do Ensaio: Contagem de Salmonella sp
Referncia: POP INCQS n 65.3210.044
Unidade da amostra____________
Resultado_________(NMP)
LIC = _______ ; LSC = _________
Nome do Ensaio: Pesquisa de Enterococcus sp

Referncia: POP IAL Deteco de Enterococos em Carcaas congeladas de Frango Meio
com vancomicina:

Resultado: Presente/Ausente

Unidade da Amostra A________________

Unidade da Amostra B________________

Unidade da Amostra C________________

Unidade da Amostra D________________

Unidade da Amostra E________________

Meio sem Vancomicina:

Resultado: Presente/Ausente

Unidade da Amostra A________________

Unidade da Amostra B________________

Unidade da Amostra C________________

Unidade da Amostra D________________

Unidade da Amostra E________________
5.5.2 No final do laudo de anlise deve constar a seguinte mensagem padro:
Este laudo no pode ser utilizado em publicidade, propaganda ou para fins comerciais. Os resultados deste laudo referem-se nica e exclusivamente amostra encaminhada pelo solicitante.
5.5.3

Os Laudos de Anlise devem ser encaminhados VISA responsvel pela colheita da amos-

tra.

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6. BIBLIOGRAFIA
ANDREWS, Wallace H. & June, Geraldine A. Food Sampling and Preparation of Sample. Homogenate.
In: BACTERIOLOGICAL Analytical Manual Online. [S.I]; FDA, 2003. Disponvel em: < http:www.cfsan.
fda.gov/~ebam/bam-1.html >. Acesso em 12 Jul 2004.
DETECO de Enterococos em Carcaas Congeladas de Frango. So Paulo: Instituto Adolfo Lutz.
ISO 6579:1993. Microbiology General guidance on methods for the detection of Salmonella.
MESSER, Russel S.; Midura, Thaddeus F.; Peeler, James T. Sampling plans, sample collection, shipment
and preparation for analysis. In: COMPENDIUM of Methods for the Microbiological Examination of
Foods. 4 ed. Washington, D.C: American Public Health Association (APHA), 2001. cap.2, p. 13-23.
PESQUISA e Contagem de Salmonella sp em Carcaas Congeladas de Frango. In: MANUAL da Qualidade. Rio de Janeiro: INCQS/FIOCRUZ. Seo 10 (65.3210.044).
Brasil. Resoluo RDC n 13 de 2 de janeiro de 2001 Aprova o regulamento tcnico para instrues
de uso, preparo e conservao na rotulagem de carnes de aves e seus midos crus, resfriados ou
congelados e seu anexo. Dirio Oficial da Repblica Federativa do Brasil, Braslia.

---------------------------/ANEXO A

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ANEXO A
MEIOS DE CULTURA
A.1 gua peptonada tamponada
Peptona..................................................................................................................................10 g
Cloreto de sdio........................................................................................................................5 g
Fosfato de sdio dibsico.......................................................................................................3,5 g
Fosfato de potssio monobsico.............................................................................................1,5 g
gua destilada................................................................................................................. 1000 mL
Suspender e dissolver os componentes em gua destilada. Distribuir alquotas de 3000 mL em frascos
Erlenmeyers de 5 L ou frasco similar. Esterilizar em autoclave a 121C durante 15 minutos.
pH final: 7,2 0,2 a 25C.
Nota:
O meio pronto deve ser estocado a temperatura de 15 a 30C.
Para o preparo a partir do meio desidratado, obedecer s recomendaes do fabricante.

---------------------------/ANEXO B

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ANEXO B
SOLUES E REAGENTES
B.1 cido clordrico 1N
cido clordrico concentrado............................................................................................89 mL
gua destilada q.s.p.....................................................................................................1000 mL
Esterilizar em autoclave a 121 C durante 15 minutos.
Nota: Estocar a temperatura ambiente.

B.2 Hidrxido de sdio 1N

Hidrxido de Sdio............................................................................................................. 40 g
gua destilada q.s.p.....................................................................................................1000 mL
Esterilizar em autoclave a 121 C durante 15 minutos.
Nota: Estocar a temperatura ambiente.

B.3 Triton X-100

Transferir um volume de aproximadamente 50mL de Triton X-100 para frasco escuro de 250mL ou
frasco similar. Esterilizar sob vapor fluente por 15 minutos.
Nota: Estocar a temperatura ambiente.

----------------------------

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65.3210.044
PALAVRAS-CHAVE:
SALMONELLA SP - ALIMENTOS - CARCAAS DE FRANGO

Seo do Manual
10

REVISO
00

ELABORADO

VERIFICADO

APROVADO

REFERENDADO

DATA

Carla de O. Rosas

Mrcia B
Warnken

Marise S. de
Magalhes

Eduardo
Leal

Chaves 13/07/2004

SUMRIO
1. Objetivo
2. Campo de aplicao
3. Siglas
4. Condies Gerais
5. Condies Especficas
6. Bibliografia
7. Anexos
A. Meios de Cultura
B. Solues e Reagentes
C. Tabela NMP
D. Ficha de Controle dos Ensaios de Salmonella sp.
1. OBJETIVO
Este Procedimento Operacional Padronizado (POP) estabelece as condies e procedimentos para
pesquisa e contagem de Salmonella sp em carcaas de frango sem tempero.
2. CAMPO DE APLICAO
Este POP aplica-se ao Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da ANVISA e visa uniformizar as metodologias de anlise para os laboratrios participantes.

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3. SIGLAS
So usadas no texto deste POP as seguintes siglas:
ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
ATCC - American Type Culture Collection
INCQS - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade
4. CONDIES GERAIS
4.1 Materiais e equipamentos
a) agitador de tubos;
b) ala e agulha de platina ou nquel-cromo nmero 25 (dimetro de 3 mm);
c) banho termosttico a 42 1C;
d) frascos erlenmeyers com capacidade de 250 mL; 500 mL e 1000 mL;
e) estufa bacteriolgica a 35 2C;
f) lminas de vidro;
g) palitos de madeira;
h) pipetas graduadas de 1, 5 e 10 mL;
i) placas de Petri;
j) tubos de ensaio 13 x 100 mm;
k) tubos de ensaio 16 x 160 mm.
Nota:
Esterilizar o material em forno Pasteur a 180 C durante 2 horas.
4.2 Meios de cultura (ver Anexo A)
a) gar entrico Hektoen;
b) gar lisina ferro;
c) gar nutriente;
d) gar trplice acar ferro;
e) gar xilose lisina desoxicolato;
f) gua peptonada tamponada (APT);
g) caldo tetrationato;
h) caldo uria;
i) meio Rappaport Vassiliadis.
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4.3 Solues e reagentes (ver Anexo B)
a) Antissoro polivalente para Salmonella sp;
b) soluo de iodo-iodeto de potssio;
c) soluo de verde brilhante a 0,1%;
d) soluo salina 0,85%;
e) tampo fosfato de Butterfield.
4.4 Microrganismos de referncia
a) Samonella Typhimurium - INCQS 150 (ATCC 14028);
b) Escherichia coli - INCQS 033 (ATCC 25922);
c) Proteus vulgaris - INCQS 106 (ATCC 13315).
Para a utilizao das culturas de microrganismos de referncia seguir as especificaes do POP
(65.3210.041) Utilizao de Bactrias de Referncia da Coleo de Culturas do INCQS no Controle
Microbiolgico de Alimentos - INCQS/FIOCRUZ.
5. CONDIES ESPECFICAS
Para os ensaios de pesquisa e contagem de Salmonella sp utilizar o caldo de enxaguadura obtido
a partir da metodologia descrita no POP (65.3210.043) Recepo e Processamento Inicial de
Amostras de Carcaas Congeladas de Frango INCQS/FIOCRUZ.
5.1 Pr-enriquecimento
5.1.1 Pesquisa de Salmonella sp (Ensaio qualitativo)
Transferir 25 mL do caldo de enxaguadura (volume correspondente a 25 g da amostra) para frasco
erlenmeyer contendo 225 mL de APT. Agitar com movimentos circulares, cuidadosamente.
Incubar a 35C 2C durante 18 a 24 horas.
5.1.2 Determinao do Nmero Mais Provvel de Salmonella sp (Ensaio qualitativo)
Preparar a diluio 10-1 transferindo 50 mL do caldo de enxaguadura para frasco erlenmeyer contendo 450 mL de tampo de Butterfield (diluio 10-1).
A partir da diluio 10-1 preparar diluies decimais seriadas, acrescentando 10 mL da em frasco
contendo 90 mL de tampo de Butterfield.

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DAS DE FRANGO
65.3210.044
Preparar 5 sries de diluies com 3 tubos cada (correspondendo de 10 g a 0,001 g do alimento),
como descrito abaixo:
1 srie (10 g) Distribuir alquotas de 10 mL do caldo de enxaguadura em 3 tubos de ensaio vazios
e estreis;
2 srie (1 g) Distribuir alquotas de 1 mL do caldo de enxaguadura em 3 tubos contendo 10 mL
de APT;
3 srie (0,1 g) - Distribuir alquotas de 1 mL da diluio 10-1 em 3 tubos contendo 10 mL de APT;
4 srie (0,01 g) - Distribuir alquotas de 1mL da diluio 10-2 em 3 tubos contendo 10 mL de APT;
5 srie (0,001 g) Distribuir alquotas de 1mL da diluio 10-3 em 3 tubos contendo 10 mL de APT.
Notas:
a) em cada srie de tubos identificar as diluies e classificar os tubos como A, B e C;
b) incubar os tubos a 35C 2C durante 18 a 24 horas.
5.2 Enriquecimento seletivo
Para o ensaio quantitativo, selecionar apenas os tubos que apresentarem turvao para proceder
etapa de enriquecimento seletivo.
A partir da etapa de enriquecimento seletivo aplicar o procedimento descrito abaixo tanto para a
metodologia de pesquisa (ensaio qualitativo), quanto quanto para a determinao do Nmero Mais
Provvel (ensaio quantitativo) de Salmonella sp.
Semear os meios de enriquecimento seletivo a partir da APT.
a) transferir 0,1 mL do caldo de pr-enriquecimento, previamente homogeneizado por movimentos
circulares, para tubos contendo 10 mL de meio Rappaport - Vassiliadis;
b) transferir 1 mL do caldo de pr-enriquecimento, previamente homogeneizado por movimentos
circulares, para tubos contendo 10 mL de caldo tetrationato;
Nota:
No momento da utilizao do caldo tetrationato acrescentar 0,1 mL de soluo de verde brilhante
a 0,1% e 0,2 mL de soluo iodo iodeto de potssio (Anexo B). Homogeneizar utilizando agitador
de tubos.
Incubar os tubos em banho termosttico a 42 1 C, durante 18 a 24 horas.

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5.3 Isolamento
Semear, por esgotamento, uma alada de cada uma das culturas de enriquecimento seletivo, previamente homogeneizadas em agitador de tubos, para a superfcie dos seguintes meios seletivo-indicadores: gar entrico Hektoen e gar xilose lisina desoxicolato.
Incubar as placas em posio invertida a 35C 2 C, durante 18 a 24

horas.

5.3.1 Controle dos meios seletivo-indicadores

Semear, por esgotamento, as cepas controle de Salmonella Typhimurium e E. coli (item 4.4) em placas
contendo gar entrico Hektoen e gar xilose lisina desoxicolato
Incubar a 35C 2 C, durante 18 a 24 horas.
Observar o crescimento dos microrganismos de referncia nas placas de meios que devem apresentar as caractersticas descritas a seguir:
Salmonella Typhimurium

Escherichia coli

gar Hektoen

Colnias negras ou verde-azuladas com

centro negro

Colnias vermelhas ou salmo,

com halo de precipitao

gar XLD

Colnias negras ou transparentes, da cor

do meio, com centro negro

Colnias amarelas, opacas, com

halo de precipitao

5.4 Seleo das colnias

Observar as placas de cada meio seleteivo que contenham colnias tpicas de Salmonella sp. Selecionar de duas a cinco colnias e semear em tubo contendo gar nutriente.
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas.
5.5 Triagem Bioqumica
5.5.1 Semeadura de colnias suspeitas de Salmonella sp em gar TSI e gar LIA.
Com o auxlio de uma agulha bacteriolgica tocar o crescimento do gar nutriente . Perfurar a base
do gar TSI em profundidade e realizar movimentos de estrias na superfcie. Sem flambar a agulha,
perfurar a base do gar LIA em dois diferentes pontos e, em seguida, deslizar a agulha pelo centro
da superfcie do gar.
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas.
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5.5.1.1 Controle dos meios TSI e LIA
Proceder semeadura dos microrganismos de referncia: Salmonella Typhimurium e E. coli (item 4.4),
em gar TSI e gar LIA.
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas.
Observar o comportamento bioqumico das cepas de referncia, que apresentar as caractersticas
descritas a seguir:

Salmonella Typhimurium

Escherichia coli

gar TSI

Superfcie alcalina (vermelha) e base cida

(amarela) com H2S

Superfcie cida e base cida

(amarelo)

gar LIA

Superfcie alcalina e base alcalina (violeta)

com H2S

Superfcie alcalina (violeta) e base

cida (amarela)

5.5.1.2 Leitura dos meios TSI e LIA

Selecionar as culturas com comportamento bioqumico caracterstico de Salmonella sp. Como descrito acima.
5.5.2 Semeadura das culturas suspeitas de Salmonella sp. em caldo uria. Semear o crescimento,
a partir do gar TSI em caldo uria.
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas.
5.5.2.1 Controle do caldo uria
Utilizar como controle as cepas de Salmonella Thyphimurium e P. Vulgaris (item 4.4).
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas, juntamente com o tubo contendo o meio no semeado, para controle negativo.
Salmonella Typhimurium
Caldo uria

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Urease negativa: no ocorre mudana na

colorao do meio

Proteus vulgaris
Urease positiva: a colorao do
meio lterada para rosa intenso

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5.5.2.2 Leitura da prova da urease
Selecionar as culturas com comportamento bioqumico caracterstico de Salmonella sp. como descrito acima.
5.6 Sorologia Polivalente
Submeter as culturas suspeitas de Salmonella sp. a soroaglutinao em lmina. Utilizar cepa de referncia de Salmonella Typhimurium (item 4.4), como controle.
Semear a cultura suspeita em gar nutriente inclinado, a partir do gar TSI.
Incubar a 35C 2C, durante 18 a 24 horas.
Adicionar 1,5 mL de salina 0,85% cultura de gar nutriente e suspender o crescimento. A suspenso bacteriana deve ser homognea, sem grumos e deve apresentar uma turvao que se enquadre
entre os tubos 2 e 3 da escala de McFarland.
Na extremidade de uma lmina limpa e desengordurada com lcool, depositar uma gota da suspenso e uma gota de salina 0,85%. Homogeneizar utilizando palito de madeira.
As culturas que apresentarem aglutinao com salina devem ser classificadas como auto-aglutinveis. Prosseguir o ensaio somente com as culturas que no aglutinarem com salina.
Na outra extremidade da lmina adicionar uma gota da suspenso bacteriana e uma gota do antissoro polivalente. Misturar com palito de madeira estril. Inclinar a lmina com movimentos leves e
circulares, continuamente por 1 minuto.
A formao de grumos na mistura quecontm o antissoro polivalente caracteriza o resultado como
positivo. Classificar a cultura como Salmonella sp.
5.7 Preparo e envio dos isolados para o Laboratrio de Referncia
As culturas classificadas como Salmonella sp devem ser enviadas ao Laboratrio de Enterobactrias/
IOC/FIOCRUZ para caracterizao antignica.
Enviar ao Laboratrio de Referncia somente os isolados obtidos a partir do ensaio qualitativo. Seguir
os procedimentos descritos no POP LABENT/IOC - FIOCRUZ:
Encaminhamento das cepas de Salmonella spp, para caracterizao antignica e avaliao da suscetibilidade antimicrobiana

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5.8 Expresso dos Resultados
5.8.1 Pesquisa de Salmonella sp (ensaio qualitativo)
Expressar o resultado como presena ou ausncia de Salmonella sp em 25g da amostra.
5.8.2 Determinao do NMP de Salmonella sp (ensaio quantitativo)
Avaliar os tubos positivos de cada srie. Fazer a leitura final considerando as trs ltimas iluies que
apresentarem Salmonella sp. Proceder leitura do resultado utilizando as tabelas de NMP (Anexo
C).
5.9 Preenchimento e envio da Ficha de Controle dos Ensaios de Salmonella sp
Ao trmino das anlises, preencher na Ficha de Controle dos Ensaios de Salmonella sp (Anexo D)
e envi-la Coordenao do Programa Nacional da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em Frango.
6. BIBLIOGRAFIA
ANDREWS, W. H. And HAMMACK, T.S. Salmonella. In: BACTERIOLOGICAL Analytical Arlington: AOAC/
FDA, cap. 5, p. 5.01 20; Updated: October 2001 (www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-5.html).
ENCAMINHAMENTO das Cepas de Salmonella spp. spp, para Caracterizao Antignica e Avaliao
da Suscetibilidade Antimicrobiana. Rio de Janeiro: LABENT/IOC FIOCRUZ.
FLOWERS, Russel S. et. al. Salmonella. In: COMPENDIUM of methods for the microbiological examination of food. 3 ed. Washington, D.C: American Public Health Association (APHA), 1992. 1219p.
cap. 25, p. 371-422.
RECEPO e Processamento Inicial de Amostras de Carcaas Congeladas de Frango. In :
MANUAL da Qualidade. Rio de Janeiro: INCQS/FIOCRUZ. Seo 10. (65.3210.043).
Robert Blodgett. Most Probable Number from Serial Dilutions. In: BACTERIOLOGICAL Analytical Manual. 8 ed. Revision A, 1998. Arlington: AOAC/FDA, Appendix 2, p. App 2.01 2.12; Updated:
January 2001. (www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-5.html).
UTILIZAO de Bactrias de Referncia da Coleo de Culturas do INCQS no Controle Microbiolgico de Alimentos. In : MANUAL da Qualidade. Rio de Janeiro: INCQS/FIOCRUZ. Seo 10.
(65.3210.041).

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ANEXO A
MEIOS DE CULTURA
O anexo A apresenta as formulaes dos meios de cultura aserem utilizados neste POP. Para o preparo a partir dos meios desidratados, obedecer s recomendaes dos fabricantes.
A.1 gar entrico Hektoen
Peptona............................................................................................................................... 12g
Sais de bile............................................................................................................................. 3g
Extrato de levedura................................................................................................................ 9g
Lactose................................................................................................................................ 12g
Sacarose.............................................................................................................................. 12g
Salicina.................................................................................................................................. 2g
Cloreto de sdio..................................................................................................................... 5g
Tiossulfato de sdio............................................................................................................... 5g
Citrato frrico amoniacal..................................................................................................... 1,5g
Azul de bromotimol........................................................................................................ 0,065g
Fucsina cida...................................................................................................................... 0,1g
gar.................................................................................................................................... 14g
gua destilada...............................................................................................................1000mL
Dissolver os ingredientes em banho termosttico com freqente agitao. Evitar que o meio ferva
por mais de 1 minuto. No autoclavar Distribuir alquotas de aproximadamente 20 mL em placas de
Petri estreis.
pH final 7,5 0,2 a 25C.
A.2 -gar Lisina Ferro
Peptona.............................................................................................................................. 5,0g
Extrato de levedura............................................................................................................. 3,0g
Glicose................................................................................................................................ 1,0g
L-Lisina............................................................................................................................. 10,0g
L-arginina............................................................................................................................ 10g
Citrato frrico amoniacal..................................................................................................... 0,5g
Tiossulfato de sdio.......................................................................................................... 0,04g
Prpura de bromocresol.................................................................................................... 0,02g
gar................................................................................................................................. 15,0g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
---------------------------/ANEXO A Cont.

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ANEXO A Cont.
Dissolver os ingredientes em banho termosttico com freqente agitao. Distribuir alquotas de 5
mL em tubos 13X100 mm. Esterilizar a 121C / 15 min. Inclinar os tubos de maneira a se obter uma
base de 4 cm e uma inclinao de 2,5 cm.
pH final 6,8 0,2 a 25C.
A.3 gar nutriente
Peptona................................................................................................................................. 5g
Extrato de carne..................................................................................................................... 3g
gar.................................................................................................................................... 15g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os componentes em gua destilada e dissolver em banho termosttico at a dissoluo do
gar. Distribuir alquotas de 3 mL em tubos 13 x 100 mm.
Esterilizar em autoclave a 121C durante 15 minutos e deixar o gar solidificar em posio inclinada.
pH final: 6,8 0,2 a 25C.
A.4 Agar trs acares e ferro (TSI)
Extrato de carne..................................................................................................................... 3g
Extrato de levedura................................................................................................................ 3g
Peptona de casena.............................................................................................................. 15g
Peptona de carne................................................................................................................... 5g
Lactose................................................................................................................................ 10g
Sacarose.............................................................................................................................. 10g
Glicose................................................................................................................................... 1g
Sulfato ferroso.................................................................................................................... 0,2g
Cloreto de sdio..................................................................................................................... 5g
Tiossulfato de sdio............................................................................................................ 0,3g
Vermelho de fenol........................................................................................................... 0,024g
gar.................................................................................................................................... 12g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os componentes em gua destilada e dissolver por aquecimento at a total dissoluo do
gar. Distribuir 3 mL em tubos 13 x 100 mm. Esterilizar em autoclave a 121C durante 15 minutos.
Inclinar os tubos de maneira a se obter uma base de 2 a 3 cm e uma inclinao de 4 a 5 cm.
pH final: 7,4 0,2 a 25C.
---------------------------/ANEXO A Cont.
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ANEXO A Cont.
A.5 Agar xilose lisina desoxicolato
Extrato de levedura................................................................................................................ 3g
L-lisina................................................................................................................................... 5g
Xilose................................................................................................................................ 3,75g
Lactose............................................................................................................................... 7,5g
Sacarose............................................................................................................................. 7,5g
Desoxicolato de sdio......................................................................................................... 2,5g
Citrato frrico amoniacal..................................................................................................... 0,8g
Cloreto de sdio..................................................................................................................... 5g
Tiossulfato de sdio............................................................................................................ 6,8g
Vermelho de fenol............................................................................................................... ,08g
gar.................................................................................................................................... 15g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os componentes em gua destilada e dissolver por aquecimento com agitao at a ebulio. Evitar o aquecimento excessivo. No autoclavar. Distribuir alquotas de aproximadamente 20
mL em placas de Petri.
pH final: 7,4 0,2 a 25C.
A.6 gua peptonada tamponada (APT)
Peptona............................................................................................................................... 10g
Cloreto de sdio..................................................................................................................... 5g
Fosfato de sdio dibsico.................................................................................................... 3,5g
Fosfato de potssio monobsico.......................................................................................... 1,5g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender e dissolver os componentes em gua destilada. Distribuir alquotas de 225 mL em frascos
erlenmeyers com capacidade de 500 mL e alquotas de 10 mL em tubos de ensaio.16 x 160mm.
Esterilizar em autoclave a 121C durante 15 minutos.
pH final: 7,2 0,2 a 25C.
Nota:
Omeio pronto deve ser estocado em temperatura de 15 a 30C.
-----------------------------/ANEXO A Cont.

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/ANEXO A Cont.
A.7 Caldo uria
Extrato de levedura............................................................................................................. 0,1g
Fosfato dibsico de sdio.................................................................................................... 9,5g
Fosfato monobsico de potssio.......................................................................................... 9,1g
Uria bacteriolgica.......................................................................................................... 20,0g
Vermelho de fenol............................................................................................................. 0,01g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os ingredientes em gua destilada e homogeneizar at a total dissoluo. Esterilizar por
filtrao. Distribuir alquotas de 3 mL em tubos de ensaio 13 x 100 mm.
pH final 6,8 0,2 a 25C.

A.8 Caldo tetrationato

Polipeptona........................................................................................................................... 5g
Sais biliares............................................................................................................................ 1g
Carbonato de clcio............................................................................................................. 10g
Tiossulfato de sdio (pentahidratado)................................................................................... 30g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os componentes em gua destilada e dissolver por aquecimento at a ebulio. Distribuir alquotas de 10 mL em tubos de ensaio 16 x 160 mm estreis. No autoclavar. Estocar por at
duas semanas a 5-10C.
pH final 8,4 0,2 a 25C.
No momento da utilizao do meio adicionar para cada 10 mL de caldo tetrationato 0,2 mL de
soluo de iodo-iodeto de potssio e 0,1 mL de soluo de verde brilhante a 0,1%
(Anexo B).
O meio no dever ser estocado aps o acrscimo das solues descritas acima.

-----------------------------/ANEXO A Cont.

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ANEXO A Cont.
A.9 Meio Rappaport Vassiliadis
Meio base
Triptona................................................................................................................................. 5g
Cloreto de sdio..................................................................................................................... 8g
Fosfato monobsico de potssio.......................................................................................... 1,6g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
O meio base dever ser preparado no dia da sua utilizao.
Soluo de Cloreto de Magnsio
Cloreto de magnsio hexahidratado400g
gua destilada1000 mL
Estocar em frasco escuro a temperatura ambiente por at 1 ano.
Soluo de verde malaquita oxalato
Verde malaquita oxalato...................................................................................................... 0,4g
gua destilada................................................................................................................100 mL
Estocar em frasco escuro a temperatura ambiente por at 6 meses.
Meio completo :
Para o preparo do meio completo acrescentar para cada 1000 mL do meio base : 100 mL de soluo
de cloreto de magnsio e 10 mL de soluo de verde malaquita oxalato. Dispensar alquotas de 10
mL em tubos 16 x 160 mm. Autoclavar a 115C por 15 minutos. Estocar o meio completo em refrigerador e utilizar em at 1 ms aps o preparo.
pH final 5,5 0,2 a 25C.

---------------------------/ANEXO B

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ANEXO B
SOLUES E REAGENTES
B.1 Soluo de iodo-iodeto de potssio
Iodeto de potssio................................................................................................................. 5g
Iodo ressublimado................................................................................................................. 6g
gua destilada estril........................................................................................................20 mL
Dissolver o iodeto de potssio em 5 mL de gua destilada estril. Adicionar o iodo e dissolver por
agitao. Diluir para um volume final de 20 mL.
B.2 Soluo de Verde Brilhante a 0,1%
Corante verde brilhante...................................................................................................... 0,1 g
gua destilada estril......................................................................................................100 mL
Dissolver o corante em gua estril.
B.3 Tampo de Butterfield
Soluo estoque
Fosfato dicido de potssio..................................................................................... (KH2PO4)34g
gua destilada.................................................................................................................500mL
Ajustar o pH a 7,2 com NaOH 1N. Completar o volume para 1 litro, adicionando gua destilada.
Esterilizar a 121C por 15 minutos. Estocar sob refrigerao.
Preparo
Retirar 1,25 mL da soluo estoque, descrita acima e acrescentar volume necessrio de gua destilada para completar 1 litro. Distribuir alquotas de 225 mL em frascos erlenmeyers com capacidade
de 500 mL e 90 mL em frascos erlenmeyers com capacidade de 250 mL.
Esterilizar a 121C por 15 minutos.

---------------------------/ANEXO B Cont.

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ANEXO B Cont.
B.4 Soluo salina a 0,85%
Cloreto de sdio.................................................................................................................. 8,5g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Dissolver o cloreto de sdio em gua. Autoclavar a 121C / 15 minutos. Resfriar a temperatura ambiente.

---------------------------/ANEXO C

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ANEXO C
TABELA NMP
TABELA PARA DETERMINAO DO NMERO MAIS PROVVEL (NMP)
Tabela 1 Para 3 sries de 3 tubos, contendo cada srie 0.1, 0.01 e 0.001g de inculo, correlacionados com a tabela de NMP/g e com intervalos de confiana de 95%
Tubos positivos
0.10

0.01

0.001

0
0
0
0
0
0
1
1
1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2

0
0
1
1
2
3
0
0
0
1
1
2
2
3
0
0
0
1
1
1

0
1
0
1
0
0
0
1
2
0
1
0
1
0
0
1
2
0
1
2

NMP/g

< 3.0
3.0
3.0
6.1
6.2
9.4
3.6
7.2
11
7.4
11
11
15
16
9.2
14
20
15
20
27

Limites de
confiabilidade

Tubos positivos

Inferior

Superior

0.10

0.01

0.001

-0.15
0.15
1.2
1.2
3.6
0.17
1.3
3.6
1.3
3.6
3.6
4.5
4.5
1.4
3.6
4.5
3.7
4.5
8.7

9.5
9.6
11
18
18
38
18
18
38
20
38
42
42
42
38
42
42
42
42
94

2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3
3

2
2
2
3
3
0
0
0
1
1
1
1
2
2
2
2
3
3
3
3

0
1
2
0
1
0
1
2
0
1
2
3
0
1
2
3
0
1
2
3

---------------------------/ANEXO D

150

NMP/g

21
28
35
29
36
23
38
64
43
75
120
160
93
150
210
290
240
460
1100
>1100

Limites de
confiabilidade
Inferior

Superior

4.5
8.7
8.7
8.7
8.7
4.6
8.7
17
9
17
37
40
18
37
40
90
42
90
180
420

42
94
94
94
94
94
110
180
180
200
420
420
420
420
430
1
1
2
4,1
--

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade
Av. Brasil, 4365 - Manguinhos - CEP 21045-900 - Rio de
Janeiro - RJ - Brasil
Tel: (0xx21) 3865-5151 Fax: (0xx21) 2290-0915
MANUAL DA QUALIDADE
TTULO: PESQUISA E CONTAGEM DE Salmonella SP EM CARCAAS CONGELA- NMERO
DAS DE FRANGO
65.3210.044
ANEXO D
FICHA DE CONTROLE DE ENSAIO DE SALMONELLA SP.

151

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE FRANGO

CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

SUMRIO
1. OBJETIVO................................................................................................................................ 1
2. CAMPO DE APLICAO........................................................................................................... 1
3. REFERNCIAS.......................................................................................................................... 1
3.1 Normativas...................................................................................................................... 1
3.2 Cruzadas.......................................................................................................................... 2
4. DEFINIES E SIGLAS.............................................................................................................. 2
5. PROCEDIMENTO..................................................................................................................... 2
5.1 Equipamentos.................................................................................................................. 2
5.2 Materiais.......................................................................................................................... 2
5.3 Meios de cultura.............................................................................................................. 2
5.4 Solues e reagentes........................................................................................................ 3
5.5 Microrganismo de referncia............................................................................................ 3
6. Condies especficas.............................................................................................................. 3
6.1 - Recepo e estocagem no laboratrio............................................................................ 3
6.2 - Enxaguadura da amostra............................................................................................... 3
1.
OBJETIVO
Estabelecer as condies e procedimentos para a deteco de Enterococcus sp em carcaas congeladas de frango.
2.
CAMPO DE APLICAO
Aplica-se ao Programa Nacional de Monitoramento de Enterococos em carcaas congeladas de frango (IAL/ANVISA) e visa uniformizar as metodologias de anlise para os laboratrios participantes.
3.

REFERNCIAS

3.1 - Normativas
Hartman. P. A.; Deibel, R.H.; Sieverding. M. Enterococci. In: Compendium of methods for the microbiological examination of foods. Ed. Washington, D.C.: American Public Health Association (APHA),
2001. cap. 9, p. 83-87.
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

CPIA NO CONTROLADA

152

NOME

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

3.2 - Cruzadas
Anexo 1 Meios de cultura para deteco de Enterococos em carcaas congeladas de frango.
4. DEFINIES E SIGLAS
ATCC American Type Culture Collection
ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
IAL Instituto Adolfo Lutz
5. PROCEDIMENTO
5.1 - Equipamentos
a) balana com capacidade para 3.000 g e sensibilidade de 0,01g;
b) estufa bacteriolgica a 35C 2C;
c) banho-maria a 45C 0,2C.
5.2 - Materiais
a) placas de Petri;
b) pipetas graduadas de 1, 5, 10 e 25 mL;
c) tubos de ensaio 16 X 160 mm;
d) tubos de ensaio de 12 X 120 mm;
e) erlenmeyer com capacidade de 4.000 mL;
f) erlenmeyer com capacidade de 300
mL;
g) saco plstico esterilizado com capacidade de 3k ;
h) papel indicador de pH;
i) algodo;
j) ala e agulha de nquel cromo nmero 25 (dimetro de 3 mm);
k) lminas de vidro.
Nota: Esterilizar os materiais em forno Pasteur a 170C durante 2 horas.
5.3 - Meios de cultura (Anexo - 1)
a) gua peptonada 1% (APT);
b) gar bile esculina;
c) caldo Enterococcosel;
d) Caldo Enteroccosel com vancomicina (6g/mL);
e) gar Enterococcosel;
f) gar Enterococcosel com vancomicina (6g/mL).

CPIA NO CONTROLADA

153

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

g) caldo infuso Crebro Corao (BHI);

h) caldo BHI contendo 6,5 % de NaCl.
5.4 - Solues e reagentes (Anexo-2)
a) perxido de hidrognio a 3%;
b) reagentes para colorao de Gram;
c) cido clordrico 1 N;
d) hidrxido de sdio 1 N;
e) soluo de vancomicina;
f) reagentes para a colorao de Gram.
5.5 - Microrganismo de referncia
a) Enterococcus faecalis ATCC 29212
b) S. Aureus ATCC - 25923

6. Condies especficas
Acondicionadas e enviadas caixas isotrmicas ao laboratrio, no menor perodo de tempo possvel.
Cada termo de coleta corresponde a cinco unidades do produto de uma nica marca comercial.
As cinco unidades devem apresentar a mesma data de embalagem e/ou data de vencimento do
produto.
Proceder a pesquisa de Enterococos nas 5 unidades da amostra.
6.1 -

Recepo e estocagem no laboratrio

Observar o aspecto geral das amostras. Verificar se as mesmas encontram-se congeladas e se todas
as unidades apresentam a mesma data de embalagem e/ou vencimento da validade.
Manter as amostras congeladas no laboratrio. Proceder o descongelamento das mesmas na embalagem original durante 18 horas no refrigerador.
6.2 -

Enxaguadura da amostra

Proceder a limpeza da superfcie externa da embalagem utilizando algodo embebida em lcool

70%. Transferir a amostra para saco plstico estril.
Desprezar os midos de frango. Pesar a amostra e adicionar para cada 1 g do frango 1 mL do APT.
Fazer a enxaguadura, cuidadosamente, em toda a superfcie

CPIA NO CONTROLADA

154

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

do frango de maneira uniforme. Transferir o caldo de enxaguadura para de 4.000 mL.

Deixar em repouso durante 60 minutos temperatura ambiente. Verificar o pH do homogeneizado
com papel indicador. Se necessrio, ajustar o pH para 6,8 0,2C utilizando cido clordrico 1N ou
hidrxido de sdio 1N.
Nota: Cada 1 mL do caldo de enxaguadura corresponde a 1 g da amostra.

6.3 - Deteco de Enterococos

Retirar duas alquotas de 25 mL do caldo APT e transferi-las cada uma para um frasco contendo 225
mL de caldo Enterococcosel e para um frasco de caldo Enterococcosel com vancomicina (6g/mL).
Incubar a 35C por at 48 horas.
6.3.2 - Anlise Confirmatria
Enterococcosel sem vancomicina, repicar uma semeadura por esgotamento, em uma placa de gar
Enterococcosel sem vancomicina. O mesmo procedimento deve ser realizado quando houver crescimento no caldo acrescido de vancomicina, sendo repicada uma alada para uma placa de gar Enterococcosel com vancomicina. Incubar a 35C - 24h.

6.3.3 - Seleo das colnias

Observar as placas de cada meio seletivo que contenham colnias tpicas de Enterococcus sp, colnias com halo enegrecido devido a hidrlise daesculina.
Selecionar duas colnias de cada meio, sem e com vancomicina e, repicar em caldo BHI. Incubar a
35C/18-24h e proceder aos seguintes testes:
Colorao de Gram. Preparar esfregao a partir de caldo BHI. Os enterococos so cocos Gram positivos alongados, arranjados em pares ou pequenas cadeias.
Teste de crescimento na presena de bile e hidrlise da esculina. Semear uma alada de cultura em
um tubo de gar bile esculina e incubar a 35C/24h.
Crescimento indica resistncia bile e escurecimento do gar indica hidrlise da esculina. Os enterecocos crescem na presena de bile e hidrolisam a esculina.
Teste de crescimento em 6,5% de NaCl. Semear uma alada de cultura em caldo BHI contendo 6,5%
de NaCl e incubar a 35C/72h. A maioria dos enterococos cresce em 6,5% de NaCl.

CPIA NO CONTROLADA

155

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

Teste de crescimento a 45C. Semear uma alada de cultura em caldo BHI e incubar a 45C/72h.
Todos os enterococos crescem a 45C.
Teste de catalase. Adicionar em caldo BHI, 1 mL de perxido de hidrognio 3% e observar produo
de bolhas de gs (teste positivo) ou no (teste negativo). Os enterococos apresentam reao negativa
para o teste da catalase.
Nota: Todas as etapas dos testes devem ser realizadas em paralelo com a cepa de referncia.

6.3.4 - Avaliao de resistncia antimicrobiana

As colnias identificadas como Enterococcus sp, devem ser enviadas para o Instituto Adolfo Lutz
Seo de Bacteriologia - A/C da Dra Rosemeire Zanella para avaliao de resistncia antimicrobiana,
no endereo:
Av. Dr Arnaldo, 351, 9 andar
CEP: 01246-902
Cerqueira Csar
So Paulo - Capital

CPIA NO CONTROLADA

156

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

ANEXO 1
MEIOS DE CULTURA
GUA PEPTONADA TAMPONADA 1% (APT)
Peptona............................................................................................................................ 10,0g
NaCl................................................................................................................................... 5,0g
Fosfato dissdico (Na2HPO4)................................................................................................ 3,5g
Fosfato monopotssico (KH2PO4)......................................................................................... 1,5g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro
Preparao: dissolver os ingrediente, ajustar o Ph 7,2 +/- 0,2 e esterilizar a 121C/15minutos.
GAR BILE ESCULINA
Extrato de carne.................................................................................................................. 3,0g
Peptona.............................................................................................................................. 5,0g
Sais biliares....................................................................................................................... 40,0g
Esculina.............................................................................................................................. 1,0g
Citrato frrico...................................................................................................................... 0,5g
gar................................................................................................................................. 15,0g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro
Ph final:............................................................................................................................... 6,6.
Preparao dissolver os ingredientes, ajustar o pH e aquecer at a completa fuso do gar. Distribuir
em tubos de 12 x 120 mm, esterilizar a 121C/15 min e inclinar.
CALDO ENTEROCOCCOSEL
Casena (digesto pancretica).......................................................................................... 17,0g
Peptdeo............................................................................................................................. 3,0g
Extrato de levedura............................................................................................................. 5,0g
Oxagal.............................................................................................................................. 10,0g
Cloreto de sdio.................................................................................................................. 5,0g
Citrato de sdio.................................................................................................................. 1,0g
Esculina.............................................................................................................................. 1,0g
Citrato de ferro amoniacal................................................................................................... 0,5g
Azida sdica..................................................................................................................... 0,25g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro

CPIA NO CONTROLADA

157

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
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1/11

Preparao: Dissolver os ingredientes, ajustar o Ph 7,1+/- 0,2 e esterilizar a 121C/15min.

GAR ENTEROCOCCOSEL
gar
Casena (digesto pancretica).......................................................................................... 17,0g
Peptdeo............................................................................................................................. 3,0g
Extrato de levedura............................................................................................................. 5,0g
Oxagal.............................................................................................................................. 10,0g
Cloreto de sdio.................................................................................................................. 5,0g
Citrato de sdio.................................................................................................................. 1,0g
Esculina.............................................................................................................................. 1,0g
Citrato de ferro amoniacal................................................................................................... 0,5g
Azida sdica..................................................................................................................... 0,25g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro
Preparao: Dissolver os ingredientes, ajustar o Ph 7,1+/- 0,2 e esterilizar a 121C/15min. Distribuir
em placas de Petri estreis e identificar o meio de cultura na placa. Manter em geladeira por no
mximo 15 dias.
CALDO ENTEROCOCCOSEL COM VANCOMICINA (6g/mL)
Adicionar em 225 ml do caldo 0,54 ml de vancomicina preparada na concentrao 2.500 g/mL.
Homogeneizar o meio de cultura.
Nota: adicionar a soluo de vancomicina, no meio de cultura, somente no dia que ser feita a pesquisa de Enterococo na carcaa do frango.
GAR ENTEROCOCCOSEL COM VANCOMICINA (6g/mL)
Preparar 150 ml da base e quando o gar atingir a temperatura de 45 50C adicionar 0,4 mL de
vancomicina preparada na concentrao de 2.500 g/mL. Identificar o meio de cultura na placa.
Nota: preparar o meio de cultura prximo a data de uso e mant-lo sempre em geladeira por no
mximo 15 dias e embrulhado para evitar ressecamento.
CALDO INFUSO CREBRO CORAO (BHI)
Infuso de crebro de bezerro........................................................................................... 200,0g

CPIA NO CONTROLADA

158

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

Infuso de corao de boi2............................................................................................... 50,0g

Proteose peptona.............................................................................................................. 10,0g
Dextrose............................................................................................................................. 2,0g
Cloreto de sdio.................................................................................................................. 5,0g
Fosfato dissdico (Na2HPO4)................................................................................................ 2,5g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro
Preparao: Dissolver os ingredientes, ajustar o Ph 7,4 distribuir 90 Ml em frascos de 250 Ml de capacidade e esterilizar a 121C/15min.
CALDO INFUSO CREBRO CORAO (BHI) com 6,5% de NaCl
Infuso de crebro de bezerro......................................................................................... 200,0g
Infuso de corao de boi............................................................................................... 250,0g
Proteose peptona.............................................................................................................. 10,0g
Dextrose............................................................................................................................. 2,0g
Cloreto de sdio................................................................................................................ 65,0g
Fosfato dissdico (Na2HPO4)................................................................................................ 2,5g
gua destilada.................................................................................................................. 1 litro
Preparao: Pesar 37,0g do meio desidratado Brain Heart Infusion Broth, acrescentar 65g de NaCl
e 1 litro de gua fria. Aquecer, agitando freqentemente, at completa dissoluo do meio. Distribuir
5 mL em tubos de 12 mm x 120mm. Esterilizar a 121/15min.

CPIA NO CONTROLADA

159

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

ANEXO 2
SOLUES E REAGENTES
CIDO CLORDRICO 1N
cido clordrico concentrado..............................................................................................89 ml
gua destilada q.s.p.....................................................................................................1000 mL
Esterilizar em autoclave a 121C/15 min. Estocar temperatura ambiente.
HIDRXIDO DE SDIO 1N
Hidrxido de sdio............................................................................................................... 40g
gua destilada q.s.p.....................................................................................................1000 mL
Esterilizar em autoclave a 121C/15 min. Estocar temperatura ambiente.
PERXIDO DE HIDROGNIO 3%
Perxido de hidrognio 30%............................................................................................3,0 mL
gua destilada.........................................................................................completar para100 mL
Preparao: dissolver a gua oxigenada 30% em gua destilada, completando volume para 100
mL. Cuidado! O perxido de hidrognio a 30% pode provocar queimaduras dolorosas, devendo ser
manuseado com luvas e culos protetores. Em caso de respingos na pele, lavar com etanol 70% em
abundncia. No lavar com gua.
REAGENTES PARA COLORAO DE GRAM
SOLUO DE CRISTAL VIOLETA DE HUCKER
Soluo A
Cristal violeta (90% pureza)................................................................................................. 2,0g
Etanol 95%....................................................................................................................20,0 mL
Soluo B
Oxalato de amnio monohidratado..................................................................................... 0,2g
gua destilada...............................................................................................................20,0 mL

CPIA NO CONTROLADA

160

Nmero

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

Reviso

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCAAS DE FRANGO

Pgina
1/11

Misturar as solues A e B, deixar em repouso9 por 24h e filtrar em papel de filtro comum. Estocar
em frasco escuro.
SOLUO DE IODO (LUGOL)
Iodo.................................................................................................................................... 1,0g
Iodeto de potssio (KI)........................................................................................................ 2,0g
gua destilada................................................................................................................300 mL
Colocar o iodeto de potssio num almofariz, adicionar o iodo e homogeneizar com pistilo. Adicionar,
pores de 1 mL, 5 mL e 10 mL de gua destilada, homogeneizando a soluo aps cada adio. Em
seguida, transferir a soluo para um frasco escuro, lavando o almofariz e o pistilo com o restante
da gua destilada.
SOLUO DE SAFRANINA
Safranina O....................................................................................................................... 0,25g
Etanol 95%....................................................................................................................10,0 mL
gua destilada.............................................................................................................100,0 mL
Dissolver a safranina no lcool e adicionar a soluo resultante aos 100 mL de gua destilada. Estocar
em frasco escuro.
SOLUO DE VANCOMICINA
Preparar a soluo de vancomicina, distribuir em alquotas para uso e manter em freezer -20C por
at 6 meses. Descongelar somente a alquota para o uso e a sobra deve ser desprezada.
Nota: importante verificar antes do uso a potncia do antibitico, que varia a cada lote de purificao.
Clculo para preparo da soluo
Exemplo:

Sigma : V-2002 Potncia :

1.132 g/mL

Clculo usando a frmula :

Volume x [ ] g/mL

Peso =

Potncia

P

50 mL x 2.500 g/mL
_________________
1.132 g/mg

125.000 g
_____________
1.132 g / mg

110.42 mg

0,11 g/50 mL de H2O estril

Preparo das alquotas

CPIA NO CONTROLADA
161

TTULO:

PALAVRA-CHAVE

DETECO DE ENTEROCOCOS EM CARCAAS DE

FRANGO CONGELADAS

ENTEROCOCOS ALIMENTOS CARCA AS DE FRANGO

Nmero
Reviso
Pgina
1/11

Preparar lquotas e 0,7 mL para serem utilizadas tanto para o preparo do caldo Enterococcosel como
para o preparo das placas de gar.

CPIA NO CONTROLADA

162

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER

ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

REVISO

Pgina

01

12 / 6

SUMRIO
1. OBJETIVO
2. CAMPO DE APLICAO
3. REFERNCIAS
3.1 Normativas
3.2 Complementares
3.3 Cruzadas
4. DEFINIES E SIGLAS
5. PROCEDIMENTO
5.1 Equipamentos, vidraria, material
5.2 Meios de Cultura
5.3 Procedimento

1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2

1.
OBJETIVO
Estabelecer as condies e procedimentos para a manuteno de cepas de Enterococcus sp no laboratrio at o envio para o laboratrio de referncia.
2.
CAMPO DE APLICAO:
Aplica-se ao Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia Bacteriana em
Frango (IAL / ANVISA) e visa uniformizar as metodologias de anlise para os laboratrios participantes.
3.

REFERNCIAS:

3.1
Normativas
No se aplica
3.2
Complementares:
Facklan, R.R.; Sahm, D.F.; Teixeira, M.M. Enterococcus. In: Murray, P.R.; Baron, E.J.; Pfaller, M.A.;
Tenover, F.V.; Yolken, R.H. (ed). Manual of Clinical Microbiology, th edition. American Society for
Microbiology, Washington, 1: p.2-305.
3.3 Cruzadas:
POP: Deteco de Enterococos em Carcaas Congeladas de Frango
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

163

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

REVISO

Pgina

01

2/6

ANEXO 1 Meios de cultura para deteco de Enterococos em Carcaa de Frango.

4.

DEFINIES E SIGLAS

IAL Instituto Adolfo Lutz

ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
BHI Brain heart infusion (infuso de crebro e corao)
cepa cultura pura do crescimento bacteriano.
5.

PROCEDIMENTO

5.1

Equipamentos, vidraria, material

a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)

placa de Petri;
erlemeyer com capacidade de 500ml;
tubos de 16 x 160 mm;
estufa bacteriolgica a 35
swab estril, com haste flexvel e embalados individualmente;
pipetas graduadas de 5, 10 e 25ml;
geladeira;
tubos criognicos de 2,0 ml estreis

Nota: todo o material deve ser esterilizado em forno Pasteur a 10C / 2 horas.
5.2
a)
b)

Meios de Cultura
gar BHI
meio de Amies sem carvo (meio de transporte)

5.3

Procedimento

A partir da anlise confirmatria de Enterococcus das amostras de frango, proceder a manuteno

das cepas para o envio ao laboratrio de referncia.
5.3.1. Manuteno da cepa.
Aps obteno do resultado da anlise confirmatria do gnero Enterococos, selecionar 2 colnias
isoladas do gar Enterococcosel sem vancomicina e 2
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

164

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

REVISO

Pgina

01

3/6

Encaminhadas para o Laboratrio de Referncia. A partir do crescimento obtido em gar bile-esculina, fazer um repique da cepa em tubo de gar BHI e aps o perodo de incubao a 35-36C por
18-24hs. Manter a cepa corretamente identificada em geladeira at o encaminhamento para o laboratrio de referncia. No exceder 1 ms.
Nota: identificar corretamente as colnias isoladas do gar Enterococcosel sem e com vancomicina.
5.3.2. Preparo da cepa para encaminhamento ao Laboratrio de Referncia.
A partir do tubo de gar BHI semear a cepa, com swab, em placa de gar BHI e incubar a 35-36C
por 18-24hs. Coletar todo o crescimento com auxilio de um swab e introduzi-lo no meio Amies, quebrar ou cortar a haste do swab que fica para fora do tubo, fechar, vedar e identificar adequadamente
cada cepa no prprio tubo.
Manter o tubo pronto em temperatura ambiente at o envio para o Laboratrio de Referncia, este
perodo no deve ultrapassar 3 dias. Encaminhar a cepa segundo o PSMIB2-01 TRANSPORTE DE
SUBSTNCIAS INFECCIOSAS PARA O LABORATRIO DE REFERNCIA.

-------------------ANEXO A
ANEXO A
MEIOS DE CULTURA

DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

165

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

REVISO

Pgina

01

4/6

GAR BHI (INFUSO DE CREBRO E CORAO)

Meio Base:
Infuso de crebro ........................................................................................................... 200 g
Infuso de corao ........................................................................................................... 250 g
Proteose Peptona ............................................................................................................... 10 g
Bacto dextrose ..................................................................................................................... 2 g
Cloreto de sdio................................................................................................................... 5 g
Fosfato di-bsico de sdio ................................................................................................. 2,5 g
gar .................................................................................................................................. 15 g
gua destilada .......................................................................................................................1 l
pH final ,4
+/- 0,2 a 25C
Preparar a base conforme instruo do fabricante. Autoclavar 15minutos/121C. Dispensar em tubos
de 16x160 mm o volume de 10 ml e manter o tubo deitado e inclinado at sua solidificao e preparar placas com aproximadamente 20 ml de meio de cultura.
Fazer controle de esterilidade, incubando por 24 e 48hs a 3C.Rotular e datar.
Estocar a 4C, devidamente armazenado.
Validade de aproximadamente 15 dias.
---------------------------/ANEXO A - Cont.
ANEXO A - Cont.
MEIO AMIES SEM CARVO PARA TRANSPORTE DE CEPA
Meio base:
Cloreto de sdio 3g
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

166

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

REVISO

Pgina

01

5/6

Cloreto de potssio ............................................................................................................ 0,2g

Cloreto de clcio ................................................................................................................ 0,1g
Cloreto de magnsio .......................................................................................................... 0,1g
Fosfato monobsico de potssio......................................................................................... 0,2g
Fosfato di-bsico de sdio ................................................................................................ 1,15g
Tioglicolato de sdio ............................................................................................................. 1g
Bacto gar ......................................................................................................................... ,5g
gua destilada .......................................................................................................................1L
pH final ,3 +/- 0,1 a 25C

Preparar a base conforme instruo do fabricante. Autoclavar 15 minutos/121C.

Dispensar 1,5 ml do meio nos tubos criognicos, tampar e manter o tubo em p at sua solidificao.
Fazer controle de esterilidade, incubando por 24 e 48hs a 3C. Rotular e datar.
Estocar a 4C, devidamente armazenado por 30 dias.

--------------------ANEXO B

ANEXO B
PROGRAMA NACIONAL DE MONITORAMENTO DA PREVALNCIA E DA RESISTNCIA BACTERIANA
EM FRANGO
Formulrio para o envio dos isolados de Enterococcus
sp
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

16

INSTITUTO ADOLFO LUTZ

REGISTRO DA QUALIDADE
NMERO
ASMI5-01

MANUTENO DE CEPA DE ENTEROCOCO PARA SER ENVIADA AO LABORATRIO DE REFERNCIA

Laboratrio
N da
amostra
do LACEN

Estado
Nmero
do laudo

Responsvel

Unidade
da
amostra

N do
isolado
do LACEN
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E
E

Ea
Eb
Ec
Ed
Ba
Bb
Bc
Bd
Ca
Cb
Cc
Cd
Da
Db
Dc
Dd
Ea
Eb
Ec
Ed

REVISO

Pgina

01

6/6

Rubrica

Meio de isolamento
sem vancomicina
sem vancomicina
com vancomicina
com vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
com vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina
sem vancomicina

Identificao
(preenchido
pelo Lab. De
Referncia)

A ser preenchido pelo Laboratrio de Referncia:

Data:
Assinatura do responsvel:
------------------------DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

168

Observaes

SECRETARIA DE ESTADO DA SADE

COORDENAO DOS INSTITUTOS DE
PESQUISA

TTULO

Transporte de substncias infecciosas para o Laboratrio de Referncia (Territrio Nacional)

Nmero:
PSMIB2-01

PALAVRASCHAVE

Transporte, Material infeccioso

Reviso:
00
Pgina:
1/5

SUMRIO
1. OBJETIVO: ........................................................................................................................... 1
2. CAMPO DE APLICAO....................................................................................................... 1
3. REFERNCIAS ...................................................................................................................... 1
3.1 Normativas ..................................................................................................................... 1
3.2 Complementares ............................................................................................................. 2
3.3 Cruzadas: ........................................................................................................................ 2
4. DEFINIES E SIGLAS .......................................................................................................... 2
5. PROCEDIMENTO: ................................................................................................................ 2
5.1 Equipamentos ................................................................................................................. 2
5.2 Procedimento:................................................................................................................. 3
5.3 Formulrios e documentos para remessa ......................................................................... 4
CONTROLE DAS ALTERAES:
1.OBJETIVO:
Estabelecer as condies e procedimentos para o transporte de material biolgico para o Laboratrio
de Referncia.
2.CAMPO DE APLICAO
Aplica-se ao Programa Nacional de Monitoramento de Enterococcus em carcaas congeladas de
frango (IAL/ANVISA) e visa uniformizar as metodologias que sero empregadas pelos laboratrios
participantes.

3.REFERNCIAS
3.1Normativas

DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

16

SECRETARIA DE ESTADO DA SADE

COORDENAO DOS INSTITUTOS DE
PESQUISA
Transporte de substncias infecciosas
para o Laboratrio de Referncia
(Territrio Nacional)

TTULO
PALAVRASCHAVE

Transporte, Material infeccioso

Nmero:
PSMIB2-01
Reviso:
00
Pgina:
2/5

2.2Complementares
Guia para transporte seguro de substncias infecciosas e material de diagnstico da OMS (WHO/
EMC/.3)
Regulamento de cargas perigosas (IATA seo 5, instruo 602 e 650)
Portaria n 185, de 25 de outubro de 2001- Regulamento tcnico para o transporte de substncias
infecciosas e amostras para o diagnstico, no MERCOSUL.
Recomendaes do Comit de Especialistas das Naes Unidas para o Transporte de Artigos Perigosos.
Portaria N 21E/SPL, de 1 de julho de 18.
3.3Cruzadas:
PSMIB2-02 Manuteno de cepa de Enterococcus isolada de carcaa de frango para encaminhamento ao Laboratrio de Referncia.
4.DEFINIES E SIGLAS
IAL - Instituto Adolfo Lutz
INCQS - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade
IATA - International Air Transport Association
OMS Organizao Mundial da Sade
Substncias infecciosas: So aquelas que contm microorganismos viveis, tais como bactrias, ricktesia, vrus, parasitas, fungos ou um microorganismo recombinante, hbrido ou mutante que sabidamente ou com probabilidade razovel capaz de provocar doenas no homem e nos animais,
segundo WHI/EMC/.3.
Amostra para diagnstico: Definida como qualquer material humano ou animal que incluem, porm
no se limitam a: excrementos, secrees, sangue e seus derivados, tecidos e lquidos orgnicos, e
que so coletados para fins de diagnsticos: se excluem os animais infectados vivos.
Laboratrios de Referncia: Os Laboratrios que recebero as amostras biolgicas para anlises.
5.PROCEDIMENTO:
5.1Equipamentos.
Caixa para transporte de substncias infecciosas de acordo com: Guia para transporte seguro de
substncias infecciosas e material de diagnstico da OMS.
CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

10

SECRETARIA DE ESTADO DA SADE

COORDENAO DOS INSTITUTOS DE
PESQUISA

TTULO
PALAVRASCHAVE

Transporte de substncias infecciosas

para o Laboratrio de Referncia
(Territrio Nacional)
Transporte, Material infeccioso

Nmero:
PSMIB2-01
Reviso:
00
Pgina:
3/5

5.2Procedimento:
As amostras acondicionadas e identificadas devero ser embaladas em caixas especficas para transporte de amostras biolgicas, segundo: Guia para transporte seguro de substncias infecciosas e
material de diagnstico (WHO/EMC/.3) e Regulamento de cargas perigosas (IATA seo 5, instruo 602 e 650).
O encaminhamento das amostras deve ser feito de forma segura e eficaz e no menor espao de tempo para a entrega aos Laboratrios de Referncia.
Laboratrio de Referncia para Salmonella:
Dalia dos P. Rodrigues
Laboratrio de Enterobactrias
Instituto Oswaldo Cruz-FIOCRUZ
Av. Brasil, 4365 - Pav. Rocha Lima - 3o. andar
Manguinhos- Rio de Janeiro -RJ
CEP: 21.045-00
Tel # 0 xx 21 258-42 R 316
Fax # 0 xx 21 220-15 R 331
Laboratrio de Referncia para Enterococcus:
Instituto Adolfo Lutz
Avenida Dr Arnaldo, 355 /  andar Cerqueira Cezar
CEP: 01246-02 So Paulo SP
Tel.: (xx11) 3068-284
Fax: (xx11) 3085-3505
Contato: Dra Rosemeire Zanella
email: cobo@ial.sp.gov.br
5.2.1.

Responsabilidades do procedimento:

O transporte de substncias infecciosas e amostras biolgicas para anlise em laboratrios

habili-

tados pelos Ministrios da Sade, estabelece responsabilidades para o remetente e o destinatrio.

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

11

SECRETARIA DE ESTADO DA SADE

COORDENAO DOS INSTITUTOS DE
PESQUISA

TTULO
PALAVRASCHAVE

Transporte de substncias infecciosas

para o Laboratrio de Referncia
(Territrio Nacional)
Transporte, Material infeccioso

Nmero:
PSMIB2-01
Reviso:
00
Pgina:
4/5

Do Remetente:
Com antecedncia contatar com o destinatrio (laboratrio) para as providncias necessrias para o
recebimento e processamento das amostras.
O envio ser acertado atravs do transporte mais adequado.
O envio dever ser feito pela rota mais direta e evitando sua chegada nos finais de semana e feriados
no destino.
Embalar e identificar a substncia infecciosa ou a amostra biolgica para anlise laboratorial, seguindo padres de biossegurana estabelecidas nas Recomendaes do Comit de Especialistas das
Naes Unidas para o Transporte de Artigos Perigosos.
Do destinatrio:
- Notificar imediatamente ao remetente a chegada do material enviado.
5.2.2. Embalagem e rtulo
Dever ser realizado de acordo ao prescrito no documento:
DANGEROUS GOODS REGULATIONS 40 th Edition 1 January 1.
International Air Transport Association (I.A.T.A.) Section 5 Packing Instruction N 602 y N 650.

5.3.
Formulrios e documentos para remessa
As remessas de substncias infecciosas e/ou biolgicas para anlise laboratorial entre servios de
sade, pesquisas e profissionais de sade, devem ser acompanhada da declarao de transporte
de carga perigosa impressa em duas vias e em papel timbrado da instituio remetente, conforme
modelo.

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

12

SECRETARIA DE ESTADO DA SADE

COORDENAO DOS INSTITUTOS DE
PESQUISA

TTULO
PALAVRASCHAVE

Transporte de substncias infecciosas

para o Laboratrio de Referncia
(Territrio Nacional)
Transporte, Material infeccioso

Nmero:
PSMIB2-01
Reviso:
00
Pgina:
5/5

ANEXO A
EXEMPLO
PAPEL TIMBRADO
So Paulo, 31 de julho de 2000
DECLARAO
Ao Correio -Nome da cidade
Destinatrio:
Dra. Rosemeire Cobo Zanella
Bacteriologia
Instituto Adolfo Lutz
Av. Dr. Arnaldo 351
So Paulo, SP
CEP: 01246 02
Remetente:
Dr. Fulano de Tal
Laboratrio Central do Estado XXXX
Endereo Completo
Declaramos que estamos enviando material biolgico, no comercivel, no explosivo e no voltil
para complementao cientfica necessria no Servio de Sade, sendo de uso exclusivo de pesquisa.
Trata-se de bactria acondicionada em meio de transporte especfico e contido em XX frascos devidamente fechados e acondicionados.
A embalagem contendo os frascos no deve ser aberta a fim de se evitar que se quebre e ocorra
perda do material.
Atenciosamente,
Nome do responsvel - No do CRBM/ CRB/ CRF
Encarregada Setor Tcnico
Seo de Bacteriologia
Lacen XXXXX
DATA
ELABORAO
REVISO
APROVAO

NOME
Rosemeire Cobo Zanella
Glria Regina Freitas do Valle

CPIA CONTROLADA REPRODUO PROIBIDA

13

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331

Procedimentos Operacionais Padro

Laboratrio de Enterobactrias

TITULO DA ATIVIDADE: Encaminhamento das cepas deSalmonella spp, para

caracterizao antignica e avaliao da suscetibilidade antimicrobiana

1. OBJETIVO
Estabelecer as condies e procedimento para o transporte das cepas de Salmonella sp. para o LABENT IOC FIOCRUZ Laboratrio de Referncia em Salmonella sp.
2. CAMPO DE APLICAO
Aplica-se ao Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia da Resistncia bacteriana em
Frango.
3. NVEL DE BIOSSEGURANA COM RECOMENDAES PARA A ATIVIDADE
Nvel de Biossegurana 2, na etapa de semeadura das cepas em Agar tamponado.
4. DEFINIES E SIGLAS

174

LABENT- Laboratrio de Enterobactrias

IOC Instituto Oswaldo Cruz
FIOCRUZ Fundao Oswaldo Cruz
IATA International Air Transport Association
OMS Organizao Mundial de Sade

INCQS Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331

5. CONDIES GERAIS
5.1) Material e Equipamentos
a)tubos de poliestireno com capacidade de 2 mL;
b)caixas para transporte de material para diagnstico laboratorial, OMS/IATA;
c)estufa bacteriolgica a 30-35C.
5.2) Meio de cultura (Anexo A)
a)gar nutriente tamponado.
6. CONDIES ESPECFICAS
Os isolados obtidos atravs da metodologia descrita no POP (65.3210.044) - Pesquisa e Contagem
de Salmonella sp em Carcaas Congeladas de Frango (INCQS / FIOCRUZ), devem ser encaminhados
ao LABENT IOC FIOCRUZ Laboratrio de Referncia para Salmonella sp, atravs dos procedimentos estabelecidos neste POP.
A cepa identificada presuntivamente como Salmonella spp., no dever ser submetida a sub-cultivos.
No utilizar meios de cultura que contenham carboidratos.
6.1 - Semeadura no meio de transporte
Semear cada uma das cepas identificadas em um tubo de poliestireno contendo 1,5 mL de gar nutriente tamponado, efetivando duas a trs picadas em profundidade e estriamento em superfcie.
Incubar a 37C por 18-24 horas.
Aps este perodo manter em temperatura ambiente, ao abrigo da luz solar.

Identificar o tubo de acordo com Formulrio para o Envio dos Isolados de Salmonella
sp, em anexo.

175

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331

6.2 - Controle de qualidade interno (cepas padro)

Dever ser efetivado no meio de cultura utilizado, empregando cepa de Salmonella spp., visando
garantir a qualidade dos resultados presuntivos efetivados
6.3 Preparo do isolado para encaminhamento ao Laboratrio de Referncia
O encaminhamento das cepas dever ser efetivado, com o mximo de intervalo, mensalmente.
Os isolados devidamente acondicionados e identificados devero ser embalados em caixas especficas
para o transporte de cepas para diagnstico laboratorial, de acordo: Guia para transporte seguro
de substncias infecciosas e materiais de diagnstico da OMS (WHO/EMC/97.3) e Regulamento
de cargas perigosas (IATA

seo 5, instruo 602 e 650) e Espcimes para diagnstico devem

ser assinaladas com o cdigo IATA UM 3373.

6.4 - Detalhes do processamento
Todos os isolados devero possuir identificao, compatvel com o Formulrio para o Envio dos Isolados de Salmonella sp, encaminhado em anexo.
7 RESPONSABILIDADE DO PROCEDIMENTO
O transporte de substncias infecciosas em laboratrios habilitados pelo Ministrio da Sade estabelece responsabilidade para o remetente e o destinatrio.

176

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331
Do remetente:
Com antecedncia contactar com o destinatrio (laboratrio) para as providncias necessrias para o
recebimento e processamento das amostras.
O envio dever ser efetivado mensalmente atravs do transporte mais adequado, na regio.
O envio dever ser feito pela a rota mais direta e evitando sua chegada nos finais de semana e feriados no destino.
Embalar e identificar a substncia infecciosa ou amostra biolgica para anlise laboratorial, seguindo
padres de Biossegurana estabelecidas nas Recomendaes do Comit de Especialistas das Naes
Unidas para o Transporte de Artigos Perigosos.
Do destinatrio:

Notificar imediatamente ao remetente a chegada do material enviado.

8. SOLUO DE POSSVEIS PROBLEMAS
Caso no ocorra o crescimento no meio a ser empregado para manuteno e envio das cepas, repetir
o procedimento de repique a partir do meio original de crescimento.
A empresa de transporte precisa entrar em contato com o remetente e o destinatrio, alm de informar as autoridades de sade pblica toda vez que uma remessa contendo substncias infecciosas for
danificada durante o transporte.
9. EMBALAGENS E RTULO
Dever ser realizado de acordo ao prescrito no documento: DANGEROUS GOODS REGULATIONS
40 th Edition 1 January 1999. International Air Transport Association (IATA); Section5 Packing Instruction N 602 and N 650, as quais devem apresentar as seguintes informaes:
- Especificao da amostra;
- Nvel de Biossegurana;
- Rtulo avisando perigo biolgico;

177

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331

- Rtulo com o endereo do remetente e destinatrio,inclusive telefone de contato.

10. FORMULRIOS E DOCUMENTOS PARA REMESSA
As remessas de substncias infecciosas e/ou biolgicas paraanlise laboratorial entre servios de sade, pesquisas e profissionais de sade, devem ser acompanhadas da declarao de transportes de
cargas perigosas
impressa em duas vias em papel timbrado da Instituio remetente, conforme o modelo.
11.REGISTRO DE PROCESSAMENTO E RESULTADOS
Todas as cepas encaminhadas devero conter no laboratrio de origem o mesmo registro efetivado
no encaminhamento.
12.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
Costa, G.A. & Hofer, E.. Isolamento e identificao de enterobactrias. Instituto Oswaldo Cruz, Rio
de Janeiro, 120 pp., 1972
Ewing, W. H.. Edwards & Ewings Identification of Enterobacteriaceae. 4th Ed., Elsevier Sci.Publ Co.
Inc. New York .536 pp.,1986.
Grist, N.R. Manual de Biossegurana para Laboratrios. 2 Ed. edio, Livraria Ed. Santos, pag. 4854, 1995.
PESQUISA e Contagem de Salmonella sp em Carcaas Congeladas de Frango. In: MANUAL da Qualidade. Rio de Janeiro: INCQS/FIOCRUZ. Seo 10 (65.3210.044)

178

Ministrio da Sade
Fundao Oswaldo Cruz
FIOCRUZ

Dep. Bacteriologia Laboratrio de Enterobactrias

Av. Brasil, 4365 Pav Rocha Lima Manguinhos RJ CEP 21.045-900

TEL # 0 XX 21 2598-4277 / 2270-1590 R 316 FAX # XX 21 2270-1599 R 331

ANEXO A
MEIO DE CULTURA
1)Agar nutriente tamponado
Agar nutriente.................................................................................................................... 23 g
Cloreto de sdio.................................................................................................................... 5 g
Fosfato de sdio dibsico...................................................................................................... 2 g
gua destilada..............................................................................................................1000 mL
Suspender os componentes na gua destilada. Dissolver sob agitao at a total dissoluo do Agar.
Distribuir alquotas de 1,5 mL em tubos de poliestireno.
Esterilizar a 121 C por 15 minutos.
Aps a esterilizao inclinar os tubos para a solidificao do gar.
pH final 7,0 7,2

179

Programa Nacional de Monitoramento da Prevalncia e da Resistncia

Bacteriana em Frango PREBAF Equipe Tcnica
Equipe de coordenao geral GGALI/ANVISA
Lucas Medeiros Dantas GACTA/GGALI (Coordenador)
Francisco Roberto Gomes Cardoso - GACTA/GGALI (At junho 2006)
Denilson da Silva Santos - GACTA/GGALI (a partir de junho 2006)
Paula Roberta Mendes - GACTA/GGALI (a partir de setembro 2006)
Angela Karinne Fagundes de Castro GICRA/GGALI
Rosane Maria Franklin Pinto - GICRA/GGAL
Karem Gomes Modernell - GICRA/GGALI
Laura Misk de Faria Brant - GICRA/GGALI
Equipe de coordenao tcnica - INCQS/FIOCRUZ (At abril/2005)
Mrcia Barbosa Warnken
Equipe de coordenao tcnica - GGLAS/ANVISA (A partir de abril/2005)
Andr Luiz Oliveira da Silva
Lara Cristianine Tenrio
Equipe do Laboratrio do IOC/FIOCRUZ
Dlia dos Prazeres Rodrigues (coordenadora)
Norma dos Santos Lazaro
Eliane Moura Falavina dos Reis
Wanderson Clay Porcino da Silva
Renata Garcia Costa
Equipe do Laboratrio do IAL/SP
Rosemeire Cobo Zanella (coordenadora)
Miyoko Jakabi
Marisa de Jesus de Castro Lima
Colaboradores:
Ricardo Titze Universidade de Braslia (UnB)
ngela Patrcia Santana Universidade de Braslia (UnB)

180

LISTA DOS PARTICIPANTES DO PREBAF POR ESTADO

ALAGOAS
DIREO GERAL DO LACEN/AL:
Telma Machado Lisboa Pinheiro
GERENTE DE CONTROLE DA QUALIDADE DE PRODUTOS:
Everaldo Queiroz de Campos Jnior
EQUIPE EXECUTORA:
- Anna Cristina Costa Moreira da Silva LACEN/AL
- Celi Silva do Nascimento LACEN/AL
- Elaine Cristina Pereira Barros LACEN/AL
- Ernande Rodrigues Leite Filho LACEN/AL
- Maria Tnia Bezerra Guedes VISA/AL
- Nadja Celina Cavalcante LACEN/AL
- Paulo Costa Pereira LACEN/AL
- Rejane Barros Cavalcante LACEN/AL
AMAP
EQUIPE TCNICA
- Emi Toguchi Emin Farmacutica Bioqumica; - LACEN
- Sandra Eliane Maia P. da Silva Farmacutica Bioqumica (trabalhou no PREBAF at out/05, atualmente trabalha em outra Instituio); - LACEN
- Newton Oliveira do Carmo tcnico de laboratrio; - LACEN
- Joo Soares mdico veterinrio. - VISA
CEAR
VIGILNCIA SANITRIA
- Norival Ferreira dos Santos
- ngela Maria Leite Gomes
- Fernando Rodrigues de Souza
LACEN
- Ana Claudia Lopes Aguiar
- Edna Cristina de Oliveira Brito
- Mirtis Tavares de Oliveira
- Maria Tereza Pinto da Costa
- Francisa Alexandra C. Pinto
- Elaine Pereira Macedo
- Helena Silvia F. de Arruda
- Everanne Madja Gomes
- Alisson Lima de Souza
- Marcelo Pamplona Fiuza

181

DISTRITO FEDERAL
- Patrcia Almeida Bavaresco: Chefe do Ncleo de Alimentos e responsvel junto a Coordenao Nacional pelo Programa no Lacen-DF
- Laila Chahele Miguel: analista responsvel pelas anlises laboratoriais
- Helena Michiko Yokoyama: analista responsvel pelas anlises laboratoriais
- Jane Rocha Figueiroa: apoio logstico
- Joana DArc Parente dos Reis: Chefe substituta do Ncleo de Alimentos, responsvel pelo Programa
de setembro a dezembro de 2005, perodo em que foram analisadas 20 amostras.
ESPRITO SANTO
- Ncleo de Vigilncia Sanitria Estadual
Responsvel Administrativo/Amostragem Maria Jlia Dam
Responsvel pela Coleta
- Marisa Helena Dan
- Maria Jlia Dam
- Laboratrio Central de Anlise LACEN-ES
Responsvel pela Anlise: Vera Lcia Valle
GOIS
VISA
- Angela Maria M.M.Cardoso - Superintendente Vigilncia Sanitria
- Joo Ferreira de Morais - Gerente de Fiscalizao
- Mrcia Regina de Moura Dias - Coordenao de Alimentos - Responsvel pelo Projeto na VISA
(coletas)
LACEN
- Maria Brbara Helou Rodrigues - Diretora do LACEN
- Marlucia Catlio - Chefe da da Sesso de Bromatologia
- Maria Augusta P. Paiva - Responsvel pelo projeto no LACEN
MATO GROSSO DO SUL
EQUIPE TCNICA
MICROBIOLOGISTAS
- Mriam Tokeshi Muller - LACEN
- Andria Massulo - LACEN
- Kelly Cristina S. da Silveira Salles - LACEN
- Cleide Medeiro - LACEN
COORDENAO DO PROJETO
- Snia Aparecida Viana Cmara - LACEN
- Gilmar Fonseca de Arraes - VISA
MINAS GERAIS
Gerncia de Vigilncia Sanitria de Alimentos de Minas Gerais - GVA
Gerentes:
Ligia Lindner Shereiner (antes de maro/2007)
Milton Cabral de Vasconcelos Neto (maro/2005 a maio/2007 )
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Claudia Parma Machado (a partir de maio/2007)

Coordenadora do PREBAF/ GVA:
Magda Regina Gonalves de Paula Ferreira
LACEN/FUNED:
Maria Crisolita Cabral da Silva
Karine Queiroz da Silva
Eronilda de Castro Pena
Junara Viana de Oliveira
Agentes de Vigilncia Sanitria que procederam coletas de amostras no comrcio:
GRS/ALFENAS/VISA MUNICIPAL de Poo Fundo Silnes Helena Diogo Maral
GRS/ALFENAS/VISA MUNICIPAL de Serrania Ivana Arajo
GRS/BARBACENA/VISA MUNICIPAL de Ouro Branco Marise Lopes Paiva de Moraes
GRS/ BARBACENA/ VISA MUNICIPAL Conselheiro Lafaiete Kassim G.Raslan
GRS/BARBACENA/VISA MUNICIPAL de Barbacena Marco Tlio santos Salim
GRS/BARBACENA/VISA MUNICIPAL de Piranga Aline Faria Cruz
GRS/CORONEL FABRICIANO MUNICIPAL de Ipatinga Barncio Paulo de Oliveira Cabral
GRS/BELO HORIZONTE/ VISA MUNICIPAL de Ribeiro das Neves Adaury Benicio Costa
GRS/BELO HORIZONTE/VISA MUNICIPAL Nova Lima contato: Antonio Furtado
GRS/BELO HORIZONTE/VISA MUNICIPAL de Belo Horizonte/Regional Centro Sul Leandro Esteves de
Vasconcellos
GRS/BELO HORIZONTE/VISA MUNICIPAL de Contagem Rosemere Valadares Santana
GRS/DIVINPOLIS/VISA MUNICIPAL de Par de Minas Adilson Jos Batista
GRS/DIVINPOLIS/VISA MUNICIPAL de Arcos Sebastio Alves Bitencourt
GRS/DIVINPOLIS/VISA MUNICIPAL de Divinpolis contato: Celina Maria Pires dos Santos
GRS/DIVINPOLIS Maria Cleide Freire
GRS/DIVINPOLIS Elizabeth Champion
GRS/GOVERNADOR VALADARES/VISA MUNICIPAL de Caratinga Bruno da Costa Pinto
GRS/ITABIRA/VISA MUNICIPAL de So Gonalo do Rio Abaixo Erlon Cristian Lopes
GRS/ITABIRA/VISA MUNICIPAL de Itabira Adir da Conceio Jabom
GRS/ITUIUTABA/VISA MUNICIPAL de Ituiutaba Aguinaldo Moura da Silva
GRS/MANHUMIRIM/VISA MUNICIPAL de Manhumirim Svia Francklin Mansur
GRS/MONTES CLAROS/VISA MUNICIPAL de Montes Claros Ivanilde Alves Gusmo
GRS/PASSOS/VISA MUNICIPAL de So Sebastio do Paraiso Maria Antonia de Freitas Pereira
GRS/PONTE NOVA/VISA MUNICIPAL de Viosa Luiz Roberto de Freitas da Silva
GRS/POUSO ALEGRE/VISA MUNICIPAL de Itajub Jonas Rodrigues
GRS/UBERABA/VISA MUNICIPAL de Uberaba Adilson Caetano da Silva
GRS/UBERABA Adilson Caetano da Silva
GRS/UBERLNDIA/ VISA MUNICIPAL de Uberlndia Marco Aurlio Ribeiro de S
GRS/SO JOO DEL REI/VISA MUNICIPAL de So Joo Del Rei Flavio Raimundo Soares
GRS/SETE LAGOAS/VISA MUNICIPAL de Curvelo Geraldo Moreira da Costa Filho
GRS/SETE LAGOAS/VISA MUNICIPAL de Paraopeba Maria Aparecida Aguiar S. Nogueira
GRS/SETE LAGOAS/VISA MUNICIPAL de Sete Lagoas Jorge Antnio Mansur Miranda
PARAN
EQUIPE ENVOLVIDA:
- Ana Maria Senff - SESA- LACEN- PR
- Carmen Lcia Gomes Souza - SESA- LACEN- PR
- Fernanda Nogari - PMC VISA
- Pedro Paulo Pedroso - SESA- VISA- PR
- Sonia Regina Wotkoski - SESA- LACEN- PR

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- Wanda Moscalewski Abraho - SESA- LACEN- PR

RIO DE JANEIRO
- Andra Maria Bastos Germano
Responsvel pelo PREBAF e colheitas no Estado do Rio de Janeiro
- Eliane Maria Cardoso
Representante das anlises do Laboratrio Noel Nutels
RIO GRANDE DO NORTE
Subcoordenadoria de Vigilncia Sanitria do RN - SUVISA:
Subcoordenador: Marcos Srgio de Arajo Guerra
Equipe da SUVISA - Execuo do PREBAF (Coleta de Amostra de frango):
1. Maria Clia Barbosa de Farias (Representante VISA/RN);
2. Maria Lcia Martins Cmara;
3. Maria Jos Fernandes dos Santos;
4. Waldemar Santiago Costa;
5. Carlos Frederico Paiva;
6. Renato George Dantas;
Equipe do LACEN - Execuo do PREBAF (Anlise das Amostras de frango):
1. Christiane Lira de Vasconcelos Pinheiro (Representante LACEN/RN)
2. Aglacy Rocha Maia
3. Eugnio Pacelle Dantas da Costa;
4. Maria Dulcimar de Meneses;
5. Maria do Socorro Picado;
6. Vera Lcia Bezerra de Almeida
RIO GRANDE DO SUL
VIGILNCIA SANITRIA ESTADUAL /CEVS
INSTITUTO DE PESQUISAS BIOLGICAS
LABORATRIO CENTRAL DO ESTADO DO RIO GRANDE DO SUL IPB-LACEN.
SEO DE MICROBIOLOGIA DE GUAS E ALIMENTOS / DAP:
- Suzete Lobo Saar de Almeida
Responsvel pelo setor de Alimentos
TCNICAS
- Carolina Alfama;
- Jane Mari Both;
- Laura V. Jacociunas;
- Mara L. T. Soeiro;
- Rosane C. Ramos;
- Simone Haas;
- Solange M. Longaray;
- Tatiana Tramontina
COLETA
- Maria da Graa A. da Cunha - 1 CRS/DVS/SES.

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SANTA CATARINA
VIGILNCIA SANITRIA ESTADUAL
Joo Carlos da Costa
LABORATRIO CENTRAL DO ESTADO DE SANTA CATARINA (LACEN)
BIOQUMICAS
- Cristina Matos Maia de Oliveira;
- Maria Aparecida Mendes de Souza;
- Rita de Cssia Gonalves D vila da Silva;
- Valkria Nahas vila
TCNICAS
- Adriana Couto La Porta;
- Karoline da Silva Pereira.
Setores de Recepo e Cadastro de Amostras, Meios de Cultura e Reativos, Lavagem e Esterilizao
de Materiais.
SO PAULO - CAPITAL
DIVISO DE BROMATOLOGIA E QUMICA
DIRETORA DO SERVIO DE ALIMENTOS
Dra. Deise Ap. Pinatti Marsiglia
EQUIPE TCNICA DA SEO DE MICROBIOLOGIA ALIMENTAR - IAL SO PAULO CAPITAL
COORDENADORA
Dra. Miyoko Jakabi
EQUIPE DE ANLISE
- Ana Maria Ramalho de Paula
- Christiane Asturiano Ristori Costa
- Giselle Ibette S. Lopez Lopes
- Ruth Estela Gravato Rowlands
- Ana Luiza Gomes Nicoliello
- Andrey Guimares Sacramento
- Marisa de Jesus de Castro Lima
- Luciana Soares Tegani
- Adriana Hitomi Watanabe
EQUIPE TCNICA DA SEO DE LEOS, GORDURAS E CONDIMENTOS DO INSTITUTO ADOLFO LUTZ
RESPONSVEL PELA ANLISE DE ROTULAGEM
Jussara Carvalho de Moura Della Torre;
- Regina Sorrentino Minazzi Rodrigues.
Seo de Meios de Cultura do Instituto Adolfo Lutz
Secretaria do Servio de Alimentos pelo escaneamento dos rtulos.

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SO PAULO RIBEIRO PRETO

VISA/DIR XVIII RIBEIRO PRETO / SP
- Omara Gemha Tara Engenheira de Alimentos
IAL/RIBEIRO PRETO
- Alzira Maria Morato Bergamini Pesquisador Cientfico II
IAL/RIBEIRO PRETO
- Eliana Guimares Abeid Ribeiro Pesquisador Cientfico II
IAL/RIBEIRO PRETO
- Maria Aparecida de Oliveira - Pesquisador Cientfico II
IAL/RIBEIRO PRETO
- Sonia de Paula Toledo Prado - Pesquisador Cientfico II
IAL/RIBEIRO PRETO

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