Braz. J. vet. Res. anim. Sci.

,
So Paulo, v. 38, n. 5, p. 229-232, 2001.

CORRESPONDNCIA PARA:
Mara Iolanda Batistella Rubin
Departamento de Clnica de
Grandes Animais do Centro de
Cincias Rurais da Universidade
Federal de Santa Maria
97105-900 Santa Maria RS
e-mail: mrubin@lince.hcv.ufsm.br

Abordagem laparoscpica na gua como meio

auxiliar nas tcnicas de reproduo assistida
Laparoscopic approach of the mare as an aid in
reproductive assisted technology

1- Programa de Ps-Graduao em
Medicina Veterinria da UFSM RS
2- Laboratrio de Embriologia e
Reproduo Animal da UFSM RS

Sergio da Silva FIALHO 1; Giuliano Moraes FIGUEIR1;

Ricardo Coelho LEHMKHL 1; Marta PASIN1; Mara Iolanda Batistella RUBIN 2;
Carlos Antonio Mondino SILVA2

RESUMO
A laparoscopia uma ferramenta pouco explorada nas tcnicas assistidas da reproduo em eqinos, ao contrrio do que j ocorre com o
homem, animais de zoolgicos e domsticos. Este estudo objetivou verificar a possibilidade de oferecer bases para a canulao do
oviduto e sua futura aplicao em programas de transferncia de gametas e embries nesta espcie. Foram realizadas 17 laparoscopias em
10 guas mantidas em estao onde cada ovrio foi abordado pelo flanco ipsolateral. Aps identificao da tuba uterina, o infundibulum
foi gentilmente tracionado e um cateter avanado em direo ao stio abdominal da tuba uterina para a ampola, onde foram depositados 250
l de meio de cultivo (Dulbeccos - PBS). A utilizao da tcnica laparoscpica em reproduo assistida na gua pode ser considerada
pioneira e tem o potencial de diminuir os custos de manuteno de receptoras atravs do aproveitamento de ciclos repetidos, o que no
possvel pela abordagem convencional atravs de laparotomia. Este custo um dos principais entraves aplicao comercial das tcnicas
assistidas da reproduo em eqinos.

UNITERMOS: Laparoscopia; guas; Reproduo.

INTRODUO
ez anos antes da introduo da ultra-sonografia transretal
em reproduo eqina14, a laparoscopia permitiu que se
confirmasse o stio e se determinasse o horrio da ovulao na gua24,25. Outras aplicaes da laparoscopia na reproduo
assistida em eqinos referem-se ao teste de patncia das tubas
uterinas7 e inseminao no oviduto11. Encontram-se descritos na
gua procedimentos de ligadura tubrica em cirurgia ginecolgica11 e ovariectomia2,10,15,16,18.
A laparotomia de flanco em eqinos continua sendo a
abordagem de eleio para a transferncia cirrgica de embrio21,
transferncia intrafalopiana de gametas13,17 e, mais recentemente,
para inseminao no oviduto12,19. J em outras espcies animais a
laparoscopia vem sendo utilizada h mais tempo, obtendo-se, nas
tcnicas assistidas da reproduo, ndices mais elevados de concepo quando comparados laparotomia4,9,18. A primeira prenhez
obtida atravs da transferncia intrafalopiana de gametas (GIFT)
em humanos s foi possvel graas abordagem translaparoscpica1. Tendo em vista a questo tica envolvendo o bemestar animal, aliada a um aproveitamento mais racional das guas,
tcnicas de invaso mnima, como a laparoscopia, devem ser consideradas.
Com os recentes avanos das tcnicas assistidas aplicadas na reproduo humana, o interesse no desenvolvimento de

1
2

outras tcnicas no cavalo tem aumentado drasticamente. Proprietrios e criadores no aceitam que uma gua no venha a produzir
potros atravs dos mtodos convencionais (incluindo a transferncia de embries) e cobram do veterinrio outras alternativas. A
transferncia intrafalopiana de gametas (GIFT) tem sido utilizada
recentemente para produzir prenhez3.
Este trabalho tem o propsito de descrever o procedimento
laparoscpico em guas. Alm disso, verificar sua eficincia e
aplicao para avaliao dos rgos genitais e seu uso como ferramenta para procedimentos em reproduo assistida.

MATERIAL E MTODO
Dez guas (2 Brasileiras de Hipismo, 2 Crioulas e 6 sem
raa definida), com idade variando entre 5 e 14 anos, foram utilizadas para a realizao de 17 procedimentos laparoscpicos.
Para tal, foram submetidas a um jejum alimentar e hdrico de
24 horas para diminuir o contedo intestinal e permitir maior
visibilidade. A tricotomia da regio dos flancos foi realizada
do bordo caudal da ltima costela at a tuberosidade coxal e,
ventralmente, at 30 cm dos processos transversos das vrtebras lombares. A sedao foi obtida atravs da administrao
endovenosa de cloridrato de xilazina1 (0,5 mg/kg) em combinao com tartarato de butorfanol2 (0,05 mg/kg). A pele e a musculatura do flanco foram infiltradas com 40 a 60 ml de lidocana

Sedazine (Laboratrio Fort Dodge).

Torbugesic (Laboratrio Fort Dodge).

229

FIALHO, S. S.; FIGUEIR, G. M.; LEHMKHL, R. C.; PASIN, M.; RUBIN, M. I. B.; SILVA, C. A. M. Abordagem laparoscpica na gua como meio auxiliar nas tcnicas de
reproduo assistida. Braz. J. vet. Res. anim. Sci. So Paulo, v. 38, n. 5, p. 229-232, 2001.

sem vasoconstritor3 no padro L-invertido. As guas foram

posicionadas em um brete de conteno e, aps preparao para
cirurgia assptica, os panos de campo foram posicionados de
forma a permitir acesso a ambos os flancos. O monitor de vdeo
foi posicionado atrs do animal e o cirurgio e o assistente,
posicionados, inicialmente, ao lado esquerdo do animal. Cada
ovrio foi abordado individualmente pelo lado ipsolateral, comeando sempre pelo flanco esquerdo.
Fez-se uma inciso de 1 cm na pele e fscia do msculo
abdominal oblquo externo sob o nvel horizontal do aspecto ventral da tuberosidade coxal, no ponto mdio entre o aspecto caudal
da ltima costela e tuberosidade coxal. Uma cnula metlica (:
3mm) foi introduzida atravs da inciso em direo articulao
fmuro-tbio-rotuliana contralateral at que o som de entrada de
ar no abdmen confirmasse a sua penetrao no espao peritoneal.
Neste momento, a cnula foi acoplada a um insuflador mecnico4
e o abdmen insuflado para manter uma presso intra-abdominal
de 12 a 15 mm de Hg.
Aps distenso do abdmen, um conjunto primrio
trocarte com bainha5 era introduzido atravs de uma inciso de
7,5 mm, 5 a 10 cm crnio-dorsal cnula de insuflao. O trocarte
era removido, o manguito de insuflao acoplado bainha, e um
laparoscpio6 de 7 mm inserido por ela. O laparoscpio foi conectado a uma fonte de luz7 e videocmera8. Aps uma explorao
inicial, a cnula de insuflao foi substituda por um conjunto trocarte-cnula acessrio9. Um terceiro conjunto trocarte-cnula foi
inserido 5 a 10 cm caudoventral cnula de insuflao.
Aps identificao do ovrio, este foi fixado utilizandose uma pina atraumtica10, sendo manipulado de maneira a expor
as fmbrias e a fossa de ovulao. Uma cnula metlica com um
cateter11 em sua extremidade distal foi introduzida e posicionada
no infundibulum. O cateter, previamente siliconizado com spray
lubrificante12, foi introduzido pelas fmbrias em direo ao interior da ampola do oviduto, onde eram depositados 250 l de meio
de cultivo (D-PBS = Dulbeccos soluo salina fosfatada). Procedimento idntico foi realizado no flanco direito. O que serviu como
treinamento para cateterizao do oviduto.
Ao trmino dos procedimentos, o pneumoperitnio foi
interrompido, as bainhas removidas e as incises suturadas com
pontos em X, utilizando fio mononilon 2-0. Todas as guas
submetidas a laparoscopia foram retiradas imediatamente do jejum alimentar e hdrico aps remisso dos efeitos da sedao. O
curativo das feridas cirrgicas foi realizado com gua oxigenada, at a remoo dos pontos no stimo dia ps-operatrio. Os
animais foram mantidos em observao at a retirada dos pontos. Neste perodo, foram registrados o tempo para fechamento
da ferida, a temperatura corporal e as freqncias cardaca e respiratria.

Lidocana Geyer 2% (Geyer Medicamentos S.A.).

Insuflador mecnico, modelo IS-10 (H. Strattner & Cia. Ltda.).
5
Bainha tipo janela p/trocarte, 7.5mm, c/vlvula de CO2 (EDLO).
6
Endoscpio rgido Hopkins, 7mm, cd.: 26031B (Karl Storz - Germany).
7
Endolux 150W (H. Strattner & Cia. Ltda.).
8
Edwards Camera System, modelo AR6500 (Baxter - U.S.A.).
9
Bainha tipo janela p/ trocarte, 10mm, c/vlvula de CO2 (EDLO).
10
Pina atraumtica Babcock, giratria 10mm, com vdea (EDLO).
11
Sovereign 3Tom Cat Catheter (Sherwood Medical - U.S.A.).
4

230

RESULTADOS
No foram observados sinais de desconforto abdominal
nos animais aps os procedimentos. A tcnica de medicao
anestsica empregada revelou-se eficiente, permitindo a realizao segura do procedimento laparoscpico.
As complicaes que ocorreram durante os procedimentos foram a formao de hematoma de parede muscular (n=2) e
enfisema subcutneo (n=4). A temperatura retal dos animais foi
medida diariamente, no sendo verificada qualquer alterao. O
enfisema subcutneo que ocorreu aps a realizao de dois procedimentos foi de grau leve e regrediu em, no mximo, trs dias. Da
mesma forma, os hematomas de parede abdominal, provocados
no momento da insero do trocarte, regrediram rapidamente.
Todas as 10 guas apresentaram evoluo cicatricial satisfatria
das incises executadas para a realizao dos 17 procedimentos.
O jejum prvio de 24 horas foi suficiente para obter-se
uma visualizao adequada do trato reprodutivo das guas. No
flanco esquerdo houve ntida visualizao da borda caudal do bao,
partes do intestino delgado, mesentrio do intestino delgado, clon maior, clon menor, ovrio esquerdo, tero, bexiga e reto. No
flanco direito observou-se a base do ceco, duodeno descendente,
partes do intestino delgado, clon maior, reto, ovrio direito e tero,
reconhecidos por suas caractersticas morfolgicas macroscpicas.
O tempo mnimo utilizado desde a introduo da tica
at o trmino do procedimento laparoscpico foi de 45 minutos.
O tempo mdio do exame foi de aproximadamente 60 minutos.
Em duas guas, at trs procedimentos laparoscpicos foram realizados em intervalos no maiores que 23 dias. O fluxo de gs
carbnico durante a insuflao abdominal foi em mdia de 4 litros/minuto e, dependendo do tamanho da gua, 30 a 40 litros de
CO2 foram necessrios para se alcanar uma presso intra-abdominal de 12 mm de Hg. Foram gastos, em mdia, 80 litros de CO2
por procedimento. A mdia de consumo de CO2, no incluindo o
volume da insuflao inicial, foi de 40 l/hora.
Foram realizadas 17 laparoscopias e um total de 27
canulaes do oviduto. A simulao de transferncia de gametas
atravs da laparoscopia foi obtida atravs de uma abordagem envolvendo dois portais para instrumentos acessrios e um para a
tica. A tuba uterina foi identificada e cuidadosamente alongada
de maneira que o stio e a ampola fossem alinhados com o cateter. O cateter foi avanado em direo ao interior da ampola atravs da puno abdominal ventral, e os 250 l de D-PBS depositados no interior da tuba. O mesmo procedimento foi realizado na
tuba contralateral. Quando houve dificuldade na canulao, o procedimento foi interrompido para minimizar danos ao oviduto bem
como exposio prolongada do peritnio ao CO2. Nesses casos, o
D-PBS era depositado sobre o stio abdominal da tuba.

FIALHO, S. S.; FIGUEIR, G. M.; LEHMKHL, R. C.; PASIN, M.; RUBIN, M. I. B.; SILVA, C. A. M. Abordagem laparoscpica na gua como meio auxiliar nas tcnicas de
reproduo assistida. Braz. J. vet. Res. anim. Sci. So Paulo, v. 38, n. 5, p. 229-232, 2001.

DISCUSSO
H poucos relatos contendo a descrio anatmica e
aplicaes da laparoscopia em eqinos6. Uma descrio detalhada e completa da anatomia laparoscpica do eqino, para
fins de explorao diagnstica, foi feita recentemente por
Galuppo et al.8.
Laparoscpios com um dimetro externo de 10 mm e fontes de luz com potncia de 300 W so utilizados para a maioria
dos procedimentos em animais de grande porte11. Neste trabalho,
tendo em vista o aproveitamento do material disponvel e custos
relacionados aquisio de novos equipamentos, optou-se pela
utilizao de uma tica com dimetro externo de 7 mm e uma
fonte de luz com 150 W de potncia. Portanto, imagens claras s
foram obtidas quando do posicionamento prximo ao objeto a ser
examinado, o que foi um fator limitante ao desenvolvimento da
tcnica.
Para completar o procedimento, a administrao da
xilazina foi repetida conforme necessrio. Foi observada reao
dolorosa associada provavelmente entrada de ar frio sob presso
diretamente no ovrio bem como sua trao e manipulao. A
preveno deste tipo de reao pode vir a ser feita atravs da utilizao de insufladores com controle de temperatura, anestesia
epidural11, bloqueio anestsico do pedculo ovariano2 ou infiltrao anestsica do ligamento largo do tero15.
A experincia prtica foi essencial para a identificao
rpida e para o exame dos ovrios. A abordagem utilizada na
canulao do oviduto foi determinada atravs de simulaes prvias em caixa-preta com peas de abatedouro. Em 16 dos 17 procedimentos, em que houve uma exposio adequada da extremidade tubrica, os 250 l de PBS foram depositados sobre o stio
abdominal da tuba. A canulao do oviduto ofereceu extrema dificuldade tcnica, tendo em vista a disposio anatmica das tubas uterinas na gua e no apresentou repetibilidade, provavelmente devido pouca flexibilidade do cateter utilizado. O ponto
ideal para deposio do PBS para garantir que no haveria refluxo
seria 2-3 cm para o interior da ampola do oviduto12. O avano do
cateter para o interior da tuba uterina foi interrompido no momento em que foi encontrada resistncia, aproximadamente 1 cm aps
penetrar na ampola.
A maioria dos instrumentos existentes no mercado foram desenvolvidos para utilizao em pacientes em decbito
dorsal e, portanto, no beneficiam as abordagens de flanco com
animal em estao. Atualmente esto sendo introduzidos no
mercado instrumentos especficos, articulveis (45-90) que permitiro um direcionamento mais facilitado para o interior do
oviduto.
Em duas guas foram realizados at trs procedimentos
com intervalos no superiores a 23 dias, o que corrobora a afirmao de Wildt et al.22 de que a laparoscopia permite exames repetidos com sobrecarga orgnica mnima ou trauma cirrgico reduzido ao animal. Wishart et al.23 no observaram efeitos negativos na
fertilidade subseqente em vacas submetidas a laparoscopia por
diversos exames repetidos, embora Fischer et al.6 descrevam au-

12

mento na contagem de clulas brancas e fibrinognio em cavalos,

caractersticas de peritonite.
A laparoscopia uma ferramenta auxiliar que pode vir,
como ocorre em outras espcies, a colaborar para o incremento
dos ndices de concepo4,9,18, oferecendo alternativas para os
casos de infertilidade em humanos e para a manuteno da diversidade gentica em animais de zoolgico, onde se concentram hoje os maiores investimentos em pesquisa. Nestas espcies, a laparoscopia, para fins de reproduo assistida, uma
tcnica muito bem desenvolvida e estabelecida; vem se testando, ultimamente, a substituio desta tcnica por procedimentos
menos invasivos, como o caso da microlaparoscopia5, histeroscopia20 e, mais recentemente, procedimentos guiados por ultrasonografia26.
Devido ao tempo necessrio cicatrizao das incises, a
abordagem convencional utilizada atualmente no pode ser realizada mais do que uma vez durante uma temporada, o que se reflete em custos altssimos na manuteno de guas receptoras11. A
transferncia intrafalopiana de gametas e a transferncia de embries atravs de laparoscopia representam um desafio tcnico que
pode vir a constituir uma ferramenta confivel para tentativas repetidas de fecundao. A abordagem laparoscpica minimiza as
complicaes associadas a laparotomia de flanco, como a deiscncia de suturas, ruptura de bao e ceco durante a introduo da
mo no flanco atravs do peritnio21.
A tcnica laparoscpica de canulao do oviduto encontra-se ainda em estgio de desenvolvimento, tendo somente uma
breve descrio em livro-texto feita por Hendrickson11. A transferncia intrafalopiana de gametas (GIFT), inseminao ovidutal (IO)
e transferncia de zigotos (ZIFT) so benefcios importantes que
podem ser obtidos com o desenvolvimento de uma tcnica
confivel. Outra aplicao da laparoscopia na reproduo assistida em eqinos seria a transferncia cirrgica de embries atravs
da abordagem transmiometrial.

CONCLUSES
As tentativas de canulao do oviduto descritas neste trabalho permitiram adquirir a experincia e a segurana necessrias
para o acesso rpido e seguro atravs da laparoscopia visando a
manipulao do trato genital das guas. Concluiu-se que:

O mtodo laparoscpico um procedimento eficiente para

a visualizao direta dos rgos da cavidade plvica em
guas;

A abordagem laparoscpica de flanco nas guas em estao, com vistas canulao do oviduto, um procedimento pouco agressivo, rpido e bem tolerado pelas
guas;

A laparoscopia um procedimento invasivo muito bem

tolerado que poder vir a ser uma ferramenta valiosa para
aplicao nas tcnicas assistidas da reproduo eqina por
promover excelente observao dos rgos plvico-abdominais nos aspectos dorsais do abdmen da gua em
estao.

SILKOSPRAY. Universal silicone spray. (Willy Rsch - Germany).

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FIALHO, S. S.; FIGUEIR, G. M.; LEHMKHL, R. C.; PASIN, M.; RUBIN, M. I. B.; SILVA, C. A. M. Abordagem laparoscpica na gua como meio auxiliar nas tcnicas de
reproduo assistida. Braz. J. vet. Res. anim. Sci. So Paulo, v. 38, n. 5, p. 229-232, 2001.

SUMMARY
Laparoscopy is a poorly explored tool for equine assisted reproduction techniques, despite its use in man, zoo and domestic animals. This
study had the objective to evaluate the possibility and offer basis for cannulation of the oviduct and its future application in gamete and
embryo transfer programs in this species. Seventeen standing laparoscopies were accomplished in ten mares, each ovary approached from
its ipsolateral flank. After identification of the uterine tube, the infundibulum was gently tractioned and a catheter advanced in direction
of the abdominal ostium of the uterine tube to the ampulla where 250 L of culture medium (Dulbeccos - PBS) were deposited. The
laparoscopic technique associated with assisted reproduction in the mare can be considered pioneer and have the potential of lowering
costs with maintenance of receptors by taking advantage of repetitive cycles, which is impossible by means of the conventional approach
through laparotomy. This cost is one of the main obstacles for the commercial application of assisted reproduction techniques in horses.

UNITERMS: Laparoscopy; Mares; Reproduction.

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Recebido para publicao: 25/08/2000

Aprovado para publicao: 31/01/2002

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