1

UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE

CENTRO DE CINCIAS E TECNOLOGIA
AGROALIMENTAR
UNIDADE ACADMICA DE AGRONOMIA E TECNOLOGIA
DE ALIMENTOS

MICROBIOLOGIA GERAL

PROFESSORA: Dra. Alfredina dos Santos Arajo

Pombal
2010

2
MDULO I
1.0 INTRODUO MICROBIOLOGIA
MICROBIOLOGIA a cincia que estuda os microrganismos e suas atividades.
Preocupa-se com a forma, estrutura, reproduo, fisiologia, metabolismo e a
identificao dos seres microscpicos. Inclui o estudo de sua distribuio natural, suas
relaes recprocas e com outros seres vivos, seus efeitos benficos e prejudiciais sobre
os homens; suas alteraes fsicas e qumicas que provocam em seu meio ambiente.
Est associada ao estudo das clulas vivas e ao seu funcionamento
O metabolismo divide-se em duas fases: Anabolismo e Catabolismo
Anabolismo (ASSIMILAO) a formao de substncias prprias e especificas do
organismo para crescer, manter-se ou reparar-se. Por este processo os alimentos
chegados s clulas so transformados em substancias idnticas s que constituem o
protoplasma (matria viva)
Catabolismo (DESASSIMILAO) consiste num processo de desintegrao de
substncias incorporadas e de sua transformao em outros compostos mais simples
chamados Catablitos , destinados a serem excretados para o interior das clulas.
A Microbiologia aborda dois grandes temas:

Aspectos de Natureza Bsica

Aspectos de Natureza Prtica ou Aplicada

2.0 DISTRIBUIO DOS MICRORGANISMOS NA NATUREZA

3.0 REAS DE APLICAO
Microbiologia Mdica
Microbiologia Aqutica
Microbiologia do Ar

3
Microbiologia do Leite
Microbiologia dos Alimentos
Microbiologia do Solo
Microbiologia Industrial
Microbiologia dos Insetos
Microbiologia Espacial
4.0 DIVISO DOS REINOS

REINO PROTISTA DE HAECKEL Em 1866 o zologo alemo E. H. Haeckel

sugeriu a criao de um terceiro reino, o qual foi denominado PROTISTA.
ANIMALLES animais
VEGETALLES vegetais
o SUPERIOR Algas, Fungos e Protozorios.
PROTISTA
o INFERIOR Bactrias e cianobactrias (cianofcias)
3

CONCEITO DOS CINCO REINOS outro sistema de classificao foi proposto por
Whittaker em 1969.

PLANTAE Plantas verdes, multicelulares e algas superiores.

ANIMALIA Animais pluricelulares;
FUNGI Mofos e leveduras;
PROTISTA Micro algas e protozorios;
MONERA Bactrias e cianobacterias
VIRUS- dependem de alguns estudos fisiolgicos. No possuem vida prpria e s
crescem quando esto dentro da clula do organismo do homem e animais. O homem
adquire esses microrganismos atravs da ingesto de gua leite ou outro alimento
contaminado, como tambm pelo ar ou atravs de pessoas doentes pelo contato direto
ou da manipulao de alimentos (hepatite, sarampo, gripe, rubola)

5
4.0 TEORIA CLULAR
Todas as clulas so basicamente semelhantes. Compem-se de protoplasma, um
complexo coloidal constitudo principalmente de protenas, lipdios e cidos nuclicos:
o conjunto circundado por membranas limitantes ou parede celular, e todas tm um
ncleo ou uma substancia nuclear equivalente.
Todos os sistemas biolgicos apresentam as seguintes caractersticas comuns:
1) Habilidade de reproduo; 2) Capacidade de ingesto ou assimilao de
substancias alimentares, metabolizando-as para suas necessidades de energia e
de crescimento; 3) Habilidade de excreo de produto de escria; 4) Capacidade
de reagir as alteraes do meio ambiente; 5) Suscetibilidade mutao.
Clula - Corresponde unidade fundamental do ser vivo. Uma nica clula corresponde
a uma entidade, separada das outras clulas por uma membrana, contendo uma
variedade de compostos qumicos e estruturas sub-celulares em seu interior.
De acordo com a estrutura celular os seres vivos se dividem em duas categorias:
PROCARIONTES E EUCARIONTES. Esta diviso se baseia nas diferenas na
organizao da mquina celular.
PROCARIONTES no possuem ncleos bem definidos, no possuem membrana
nuclear, por isso a regio do ncleo se confunde com o citoplasma.
EUCARIONTES possuem ncleos bem definidos, circundado por duas camadas.
As clulas dos organismos eucariontes compem-se de trs partes:
1. Membrana celular constituda de lipdios (40%), protenas (60%) e alguns
carboidratos. a camada que envolve a clula, tem a funo de transportar nutrientes e
servir de suporte ao sistema de formao de energia da celula.
2. Citoplasma toda substancia encontrada entre a membrana e o ncleo. Seu trabalho
garante a vida da clula, pois no citoplasma se realizam as funes de nutrio,
fundamentais para a conservao da vida; digesto, respirao, circulao e
excreo.

6
3. Ncleo parte central da clula. Estrutura chave onde a informao gentica (DNA)
armazenada.

Organelas citoplasmticas so estruturas encontradas no citoplasma e que

desempenham funes vitais na clula. So elas:
Mitocndria responsvel pela respirao da clula. Constituem verdadeiras usinas
de energias, onde a matria orgnica moda de maneira a fornecer, para o
metabolismo celular, a energia qumica acumulada em suas ligaes.
Complexo de Golgi o local de acumulo e concentrao de varias substancias; onde
ocorre a sntese das protenas dos carboidratos e dos lipdios.
Reticulo Endoplasmtico aumenta a superfcie da clula, o que amplia o campo de
atividades das enzimas, facilitando a ocorrncia de reaes qumicas necessrias ao
metabolismo celular; facilita o intercambio de substancias entre a clula e o meio
externo; armazena substancias diversas; regula a presso osmtica; produz lipdios.
Cpsula envoltrio protetor e pode servir tambm como reservatrio de alimentos
armazenado e como local de despejo de substncias de escoria.

Esquema de clulas animal e de uma clula vegetal tpica.

5 COMPONENTES DA CLULA
5.1 - COMPONENTES INORGNICOS
1) GUA um importante veculo de transporte de substancias, permitindo o
continuo intercambio de molculas entre os lquidos extra e intracelular.
Funes desempenhadas pela gua nos seres vivos:
Solventes de lquidos corpreos;
Meio de transporte de molculas;
Regulao trmica;
Ao lubrificante;
Atuao nas reaes de hidrlise.

8
2) SAIS MINERAIS So encontrados nos seres vivos sob duas formas bsicas:
insolvel e solvel.
Insolvel acham-se imobilizados como componentes do arcabouo esqueltico.
Solvel acham-se dissolvidos na gua em forma de ons Ca ++ ; Mg++; F++; PO4- - -;
K+; Na+; Cl - - Os sais minerais desempenham um importante papel biolgico nos seres
vivos, agindo como ativadores de enzimas, como componentes estruturais de
molculas orgnicas fundamentais e participando da manuteno do equilbrio
osmtico.
5.2 - COMPONENTES ORGNICOS DA CLULA
Os principais componentes orgnicos da clula so: carboidratos; lipdios;
protenas; enzimas; cidos nuclicos e vitaminas.
5.2.1- CARBODRATOS compostos orgnicos constitudos de carbono, hidrognio e
oxignio. Na molcula de um carboidrato existe sempre um grupo aldedo ou um
grupo cetona. Nos demais carbonos existem grupamentos hidroxilas (-OH) Por essa
razo, os carboidratos so definidos como poliidroxialdedos ou poliidroxicetonas.

Monossacardeo so carboidratos simples que no sofrem hidrlise, de frmula geral

Cn(H2O)n, onde n varia de 3 a 7(trioses, tetroses, pentoses, hexoses e heptoses.

9
Oligossacardeos carboidratos formados pela juno de 2 a 10 monossacardeos que se
separam por hidrlise
Sacarose (glicose + frutose)
Lactose (glicose + galactose)
Maltose (glicose + glicose)
Polissacardeos formados pela juno de muitos monossacardeos. Tem frmula geral
(C5H10O5)n Ex: Amido; Celulose; Glicognio.
5.2.2 LIPDIOS (do grego lipo gordura) so molculas orgnicas que resultam da
associao entre cidos graxos e lcool. Insolveis em gua. Solveis em solventes
orgnicos como benzena, ter e lcool.
Lipdios simples possuem em sua composio apenas tomos de carbono, hidrognio
e oxignio. Compreendem os glicerdeos, cerdeos e os esterdeos.
Lipdios Complexos apresentam, alm do Carbono, Hidrognio e Oxignio, tomos de
fsforo e nitrognio, Ex: fosfolipdios - encontrados em plantas e animais.
Esfingolipdios abundantes no tecido nervoso.
Funo:

So reservas alimentares

Fornecem energia

Protegem mecanicamente

So isolantes trmicos

Auxiliam a absoro de vitaminas e outras substncias lipossolveis.

5.2.3 PROTENAS quimicamente so macromolculas complexas, de alto peso

molecular constitudas de molculas menores denominadas AMINOCIDOS.
AMINOCIDOS so substncias orgnicas que contem sempre um grupo amina
(- NH2) e um radical cido, com seguinte frmula geral.

10

Figura representativa da estrutura de uma protena.

PAPEL BIOLGICO DAS PROTENAS

Funo estrutural
Funo enzimtica funo hormonal
Funo de defesa
Funo nutritiva.
10

11

5.2.4 ENZIMAS: So substncias de natureza protica, elaborada pelos seres vivos,

funcionando como agente cataltico que acelera a velocidade da reao qumica e no
so consumidoras durante a reao que catalisam.

E + S ES .E + P

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DE REAO DE UMA ENZIMA

CONCENTRAO DO SUBSTRATO a medida que transcorre uma reao,
ocorre uma diminuio na concentrao dos reagentes. Em geral a velocidade da
reao depende da concentrao dos reagentes pelo que a velocidade especifica
de converso diminui simultaneamente.

TEMPERATURA

Devido

sua

natureza protica a
desnaturao
enzimtica diminui
a concentrao efetiva e conseqentemente, decresce a velocidade da reao.

11

12

PH Extremos de pH podem levar a desnaturao da enzima pois afetaro o

carter inico dos grupos amina e carboxila da protena, conseqentemente
modificaro suas propriedades.

5.2.6 CIDOS NUCLICOS

So molculas gigantes, constitudas por unidades menores denominadas
nucleotdeos. Cada nucleotdeo constitudo de uma molcula de cido fosfrico
ligada a uma pentose, que se acha ligada a uma base nitrogenada.
Nos seres vivos existem dois grandes tipos de cidos nuclicos: cido
desoxirribonuclicos (DNA ou ADN) e o cido ribonuclico (RNA ou ARN).
As bases nitrogenadas so classificadas em duas categorias: pricas e
pirimdicas.

12

13
o Uma das mais importantes caractersticas do DNA a sua capacidade de
autoduplicao, de forma a originar cpias exatas de si mesmo.
o O DNA produz RNA e o RNA comanda a fabricao de enzimas e outras
protenas.

Frmulas estruturais das cinco bases nitrogenadas que podem ser encontradas nos
cidos nuclicos.
5.2.7 VITAMINAS
So substncias orgnicas de natureza qumica heterognea que atuam como
coenzima, ativando enzimas fundamentais no processo metablico dos seres vivos.
Coenzimas - So compostos orgnicos, quase sempre derivados de vitaminas, que atuam
em
-

conjunto
Ligando-se

com

as

enzimas.

enzima

com

Podem
afinidade

atuar

segundo

semelhante

modelos:

do

substrato

- Ligando-se covalentemente em local prximo ou no prprio stio cataltico da

apoenzima
- Atuando de maneira intermediria aos dois extremos acima citados.

13

14

Vitaminas so substncias necessrias para o metabolismo no organismo, mas

que no podem ser produzidas em nosso corpo. Assim, elas so obtidas atravs
de alimentos, bebidas ou suplementos vitamnicos. As excees so a vitamina
D, que sintetizada no organismo em uma escala limitada, e as vitaminas B12 e
K, as quais so sintetizadas pela flora bacteriana no intestino.
Sem as vitaminas as reaes metablicas em nosso organismo ficariam to
lentas que no seriam efetivas. Algumas vitaminas (C, E e A) tambm tem papel
antioxidante diminuindo a ao nociva dos radicais livres.
Ao contrario dos carboidratos lipdios e protenas as vitaminas no tem funo
estrutural, nem funo energtica; alem disso so exigidas pelo organismo em doses
mnimas. Cada vitamina tem um papel biolgico especifico; portanto nenhuma
vitamina pode substituir outra vitamina diferente.
As vitaminas podem ser classificadas de acordo com a sua solubilidade em lipdios
ou gua
Hidrossolveis
As vitaminas solveis em gua so absorvidas pelo intestino e transportadas pelo
sistema circulatrio at os tecidos em que sero utilizadas. O grau de solubilidade varia
de acordo com cada vitamina e influi no caminho que essa substncia percorre no
organismo. Quando ingeridas em excesso, as vitaminas hidrossolveis so

14

15
armazenadas at uma quantidade limitada nos tecidos orgnicos, mas a maior parte
secretada na urina.

Lipossolveis
As vitaminas solveis em gorduras so absorvidas no intestino humano com a
ajuda de sais biliares segregados pelo fgado. O sistema linftico as transporta as
diferentes partes do organismo. O corpo pode armazenar uma quantidade maior de
vitaminas lipossolveis do que de hidrossolveis. As vitaminas A e D so armazenadas
sobre tudo no fgado e a E nos tecidos gordurosos e, em menor escala, nos rgos
reprodutores. O organismo consegue armazenar pouca quantidade de vitamina K.
Ingeridas em excesso, algumas vitaminas hidrossolveis podem alcanar nveis txicos
no interior do organismo.

As vitaminas so produzidas pelas plantas clorofiladas e por certos organismos

unicelulares. Os animais adquirem as vitaminas de que necessitam atravs dos alimentos
que ingerem.
Esses grupos possuem caractersticas importantes:

15

16
As vitaminas hidrossolveis devem ser ingeridas diariamente pois no podem
ser armazenadas e so expelidas dentro de um a quatro dias . Elas no resistem
ao cozimento. Como exemplo citamos a vitamina C e as vitaminas do complexo
B.
As vitaminas lipossolveis podem ser armazenadas por perodos maiores no
tecido adiposo e no fgado . Elas so solveis em gordura e geralmente so
resistentes ao cozimento . Dentre essas encontram-se as vitaminas A , D , E e K .
As vitaminas lipossolveis devem ser administradas antes das refeies e as
vitaminas hidrossolveis entre ou aps as refeies
7.0 - NUTRIO DOS MICRORGANISMOS
Para o crescimento e multiplicao os organismos necessitam de:
Uma fonte de carbono, hidrognio e oxignio.
Uma fonte de sais minerais, ferro, enxofre, fsforo, sdio e magnsio.
Uma fonte de energia.
Existem entre os seres vivos 2 tipos de comportamento que caracterizem as
maneiras de enfrentar o problema de obteno de alimentos, ou seja sua fonte de
energia. O comportamento AUTOTRFICO E HETEROTRFICO.
AUTOTRFICO so seres que sintetizam seu prprio alimento, a partir de
molculas de baixa E. desenvolve-se em meios minerais. FOTOSSNTESE E
QUIMIOSSINTESE
HETEROTRFOS seres que no conseguem sintetizar seu prprio alimento e o
adquirem do meio onde se encontram. Necessitam de substancias orgnicas para o
seu desenvolvimento. FERMENTAO E RESPIRAO.
AUTOTRFICO
FOTOSSNTESE um processo de produo de alimentos onde ocorre a
transformao de substancias simples em compostos orgnicos atravs da luz solar.

16

17

CO2 + H2O CH2O + O2

QUIMIOSSINTESE o processo pelo qual certos organismos sintetizam molculas
orgnicas utilizando energia proveniente da oxidao de compostos inorgnicos. Estes
organismos oxidam substancias inorgnicas e a energia liberada nesta reao utilizada
na sntese da glicose que serve ento como matria prima para sntese de outras
molculas orgnicas e como fonte de energia para as reaes celulares.
HETEROTRFOS
FERMENTAO um processo de obteno de energia utilizado pelos seres vivos.
um conjunto de reaes enzimticas atravs das quais uma molcula orgnica
degradada a molcula orgnica mais simples. Neste processo o aceptor final de
hidrognio produzido pela oxidao das molculas orgnicas uma substancia orgnica,
produto da reao em questo.
RESPIRAO consiste no processo de extrato de energia qumica acumulada nas
molculas de substancias orgnicas diversas, tais como carboidratos e lipdios. Nesse
processo, verifica-se a oxidao ou queima de compostos orgnicos de alto teor
energtico conseqentemente, formam-se substancias de menor contedo energtico,
como CO2 e H2O.
Respirao aerbica quando o aceptor final de hidrognio produzido pela oxidao
das molculas orgnicas o oxignio.
O2 + 4H+ + 4 e- 2H2O
Respirao anaerbica - quando o aceptor final de hidrognio produzido pela
oxidao das molculas orgnicas uma substancia inorgnica diferente do oxignio.
Ex. nitrato, sulfato, carbonato etc.
2HNO3 + 10 H+ + 4 e- N2 + 6 H2O

17

18

8.0 - NECESSIDADE DE OXIGNIO

De acordo com o oxignio, os microrganismos so divididos em 4 grupos
fisiolgicos:
Microrganismos Aerbios necessitam de oxignio
Microrganismos Anaerbios no podem crescer em presena do ar e no utilizam
oxignio para as reaes de produo de energia
Microrganismos Facultativos so aqueles que crescem na presena do ar atmosfrico e
podem crescer tambm na ausncia de oxignio. Eles no requerem oxignio para o
crescimento, embora possam utiliza-lo para a produo de energia em reaes qumicas.
Microrganismos Microaerfilos necessitam de pequena quantidade de oxignio (1 a
15%).
9.0 - FAIXA DE TEMPERATURA
Para todos os microrganismos existem 3 temperaturas cardeais
a) Temperatura mnima abaixo da qual no h crescimento
b) Temperatura mxima acima da qual no h crescimento
c) Temperatura tima onde o crescimento mximo
De acordo com essa temperatura os microrganismos podem ser classificados em
3 grandes grupos:
a) Psicrfilos crescem em baixa temperatura
b)

Mesoflicos crescem em
temperatura moderada

c)

Termoflicos crescem
em alta temperatura

Psicrfilos
Mesoflicos
Termoflicos

18

T. mxima
25C
45C
95C

T. mnima
< 0C
20C
45C

T. tima
15C
35 37C
60 70C

19

10.0 CARACTERSTICAS DOS MICRORGANISMOS

CARACTERSTICAS CULTURAIS
CARACTERSTICAS MOFOLGICAS
CARACTERSTICAS METABLICAS
CARACTERSTICAS ANTIGNAS
CARACTERISTICAS GENTICAS
10.1 - CARACTERSTICAS DAS BACTRIAS
Bactrias so seres procarionte amplamente distribudo na natureza, sendo
encontrada em todos os ambientes. A clula bacteriana , normalmente envolvida por
uma parede espessa (parede celular). Muitas bactrias possuem estruturas locomotivas
denominadas FLAGELOS

19

20
PRINCIPAIS CARACTERSTICAS:
DIMENSES 0,5 a 10 micra de comprimento
FORMA: Cocos clulas de forma esfrica
Bacilos forma de bastonetes
Espirilos forma espiralada
Vibrio forma de vrgula
ARRANJO - H formas coloniais decorrentes da agregao das formas individuais
Diplococos colnias formadas por dois cocos ligados
Estreptococos cocos unidos em fileiras, como se fossem contas de colar
Estafilococos cocos agregados desordenadamente

ESTRUTURA - As bactrias so constitudas, normalmente, por uma parede celular,

que contm em sua composio polissacardeos, protenas e tambm lipdios.
Internamente parede celular, encontra-se a membrana plasmtica, que lipoprotica e o citoplasma,. O cromossomo encontra-se no citoplasma e possui
forma circular. constitudo por uma molcula de DNA que est ligado a uma
membrana de protena.

20

21

REPRODUO DAS BACTERIAS Reproduzem-se por diviso binria, onde uma

clula se divide, formando duas clulas. Assim sendo, partindo de uma nica bactria, o
aumento populacional se faz em progresso geomtrica:
1 2 22 23 24 25 ..... 2n
O tempo necessrio para que a clula se divida ou seja, que a populao duplique
conhecido como TEMPO DE GERAO

A reproduo das bactrias ASSEXUADA

Algumas bactrias formam sob certas condies, formas resistentes que so chamadas
de

ESPOROS.

fenmeno

de

da

formao

de

esporos

chamado

ESPORULAO

21

22
EXIGNCIAS NUTRICIONAIS h bactrias que fabricam seu prprio alimento
(AUTOTRFICAS) e outras que retiram seu alimento do meio em que se encontram
(HETEROTRFICAS).
COLORAO DE GRAM
De acordo com a constituio da parede, as bactrias podem ser divididas em
dois grandes grupos: Gram-positivas e gram-negativas.
A tcnica de Gram consiste essencialmente, no tratamento sucessivo de um
esfregao bacteriano, fixado pelo calor, com os seguintes reagentes: cristal violeta,
lugol, lcool e fucsina. Depois da adio de cada reagente, o esfregao lavado com
gua para retirar o excesso do reagente.

Quando se examina ao microscpio um esfregao bacteriano corado pelo

mtodo Gram, as bactrias Gram + se apresentam de cor roxa e as Gram -, de cor
avermelhada.
Diferenas bsicas entre Paredes Gram-Positivas e Gram-Negativas
A parede das bactrias Gram-positivas praticamente formada de uma s
camada enquanto que a parede das bactrias Gram-negativas formada de duas
camadas.

22

23
O complexo cristal violeta lugol no retirado do citoplasma das bactrias
Gram-Positivas devido a menor permeabilidade do espesso peptidoglicano destas
bactrias ao lcool.
Figura (A) Representao esquemtica das diferenas entre a estrutura fina da parede
celular da bactria Gram +, (B) Representao esquemtica das diferenas entre a
estrutura fina da parede celular da bactria Gram -.

CIANOBACTRIAS
Chamadas de algas azuis ou cianofceas, as cianobactrias tm organizao
celular semelhante das bactrias. O ncleo e as organelas no so organizados, o
material gentico fica em contato direto com o citoplasma. Por este motivo so do reino
Monera.
As cianobactrias vivem na gua, no solo bem mido, sobre plantas, em fontes
termais sob altas temperaturas e at entre os plos de certos animais, como as preguias.

23

24
As vezes a gua das represas torna-se esverdeada; isso acontece porque o
nmero de cianobactrias aumenta muito. Nessas ocasies eliminada uma toxina,
fazendo com que a gua apresente odor e sabor ruins. Como algumas bactrias, as
cianobactrias do solo conseguem transformar o nitrognio gasoso em sais de
nitrognio, absorvidos dos solos pelos vegetais.

11.2 - CARACTERSTICAS DOS FUNGOS

Os fungos so organismos heterotrficos, obtendo sua alimentao a partir da
matria orgnica inanimada ou nutrindo-se como parasitas de hospedeiros vivos. Como
saprfitas, decompem resduos complexos de plantas e animais, transformando-os em
formas qumicas mais simples, que retornam ao solo. Tais substncias so, ento,
absorvidas pelas geraes vegetais subseqentes. Desse modo, a atividade fngica
amplamente responsvel pela fertilidade do solo.
O crescimento dos fungos saprofitas, contudo pode ser prejudicial
apodrecimento da madeira, dos tecidos e dos alimentos.
Como parasitas causam doenas em vegetais, no homem e nos animais, embora
a maior parte das micoses seja menos severa que as bacterioses ou as viroses.
So importantes na fabricao de queijos, antibiticos etc.
MORFOLOGIA DOS FUNGOS

24

25

So microrganismos eucariticos, pluricelulares, reproduzem-se, naturalmente,

por meio de esporos. No tem clorofilas, e, portanto no podem fazer a fotossntese, so
filamentosos, medem em geral 5 a 10 m de dimenso transversal, so comumente
ramificados. Em sua maioria so imveis. A maior parte entre todas as classes de fungo
produz esporos de dois modos: SEXUADA E ASSEXUADA.
O talo de um fungo tipicamente composto por filamento tubular chamado
HIFAS. O conjunto de hifas recebe a denominao de MICLIO.

Fisiologia e nutrio dos fungos

Fisiologicamente, os fungos adaptam-se a sobrecargas mais severas do
que a maioria dos microrganismos. Desenvolvem-se em altas
concentraes de aucares.
Podem tolerar e crescer em concentraes altas de cidos, suportando
variaes de pH entre 2,0 e 9,0.
So capazes de viverem em ambientes midos e secos.
A maioria dos fungos so estritamente aerbios
Desenvolve-se numa ampla faixa de temperatura, com um timo de 22 a
30C.
A glicose a fonte de carbono adequada para, praticamente, todos os
fungos. A sacarose e a maltose, assim como muitos compostos orgnicos

25

26
de carbono mais complexos (amido celulose). Nitrognio orgnico, sob a
forma de sais de amnio ou de hidratos.

11.2.1 - CARACTERISITICAS DAS LEVEDURAS

As leveduras so fungos, mas deles se diferenciam por serem
unicelulares.
Sua reproduo se faz, geralmente por diviso binria. Como clulas
crescem e se reproduzem mais rapidamente que os bolores.
26

27
So desprovidas de clorofilas
Medem de 10 a 15 micras, com formato esfrico, oval ou em forma de
basto.
So similares as bactrias na morfologia, formao de colnias, mtodos
de cultivos e atividades bioqumicas
Crescem dentro da faixa de temperatura de 25 a 40C
Desenvolve-se em meios contendo uma quantidade relativa de umidade
Crescem na presena e tambm na ausncia de oxignio
So ativos agentes oxidativos e fermentadores dos cidos orgnicos e
carboidratos
So proteolticos embora algumas espcies decompem a gordura
So usadas na fabricao de vinhos, cervejas, aguardente, po .

11.3- CARACTERSTICAS DAS ALGAS

As algas so organismos autotrficos, clorofilados e portanto
fotossintetizantes
Existem na natureza, milhares de espcies de algas.
As pequenas formas aquticas formam grande parte da vida
microscpica

livremente

flutuante

na

gua,

chamada

PLANCTON que o principal alimento dos animais aquticos

MOFOLOGIA DAS ALGAS

27

28
As algas demonstram grande variedade de formas e de dimenses. Muitas
espcies ocorrem como clulas simples que podem ser esfricas, em basto. Outras
formas colnias multicelulares.

REPRODUO DAS ALGAS

As algas podem reproduzir-se por via sexuada ou assexuada. Algumas espcies
demonstram complicados ciclos vitais, utilizando ambos os meios de reproduo.

28

29
IMPORTNCIA ECONMICA DAS ALGAS
FERTILIDADE DO SOLO fixam o nitrognio atmosfrico
ALIMENTOS agente clarificante em sucos de frutas, fonte protica, carboidratos
COSMTICOS
DOENAS Prototheca identificada como capaz de provocar doenas no homem e
outros mamferos nos trpicos.

11.4 - CARACTERSTICAS DOS PROTOZORIOS

So protistas eucariticos, heterotrficos, unicelulares, em sua maioria so
aquticos. Seu tamanho pode variar de 2 a 3 m a 250m ou mais existindo certas
espcies visveis a olho nu. Alguns protozorios so de vida livre podendo nadar
livremente ou fixados a um substrato, outros podem viver no interior de animais e nas
plantas, sendo em alguns casos parasitas.
Doenas causadas por protozorios: disenteria amebiana, malaria, doena das
chagas.

29

30

11.5. CARACTERISTICAS DOS VIRUS

So microrganismos muito pequenos (em media 0,1 micra). No possuem
estrutura celular, so construdos por cido nuclico (DNA ou RNA) circundado por
uma camada protica e so incapazes de produzir ATP, ou seja, energia necessria para
as atividades de uma clula ou organismo superior. Assim precisam de uma clula viva
para se replicar, da qual utilizam as estruturas celulares que lhes faltam e o ATP da
clula parasitada. So inativos nos alimentos. Nos alimentos provocam problemas na
fabricao de iogurtes e queijos, pois os bacterifagos destroem as clulas das culturas
starter. Os vrus patognicos como o da hepatite A, da poliomelite e os causadores da
gastroenterite (rotavirus e vrus Norwalk) podem ser veiculados ao homem por gua e
alimentos.

30

31

12.0 CURVA DE CRESCIMENTO

A FASE LAG (fase de latncia) Imediatamente aps sua inoculao no meio, as

clulas comeam a se ajustar s condies fsicas e aos nutrientes disponveis,
sintetizando enzimas e coenzimas necessrias ao seu crescimento. Durante esse perodo
no ocorre diviso celular. A medida que as clulas se tornam adaptadas ao meio,
sintetizam componentes celulares, aumentando sua massa e comeam a se dividir. O
aumento do nmero de indivduos no fim da fase lag gradual, uma vez que nem todas
as clulas completam sua adaptao ao mesmo tempo. Quando todas as clulas da
cultura esto aptas a se dividir em tempos regulares, inicia-se a fase seguinte.
B - FASE LOG durante esta fase todas as clulas dividem-se a intervalos regulares de
tempo resultando num aumento exponencial do numero de indivduos na populao.
Durante a fase exponencial, o grfico que relaciona o logaritmo do nmero de
microrganismo com o tempo uma reta. Esta fase de intensa multiplicao dura
enquanto no houver limitao de nutrientes ou acumulo de produtos txicos.
C FASE ESTACIONARIA a diminuio do ritmo de crescimento, que ocorre ao
fim da fase exponencial, d incio fase estacionaria onde o nmero de individuo
permanece constante no decorrer do tempo. Nesta fase existe um equilbrio entre a taxa
de morte e a taxa de divises na populao e sua durao varivel, dependendo no s
da espcie do microrganismo como tambm do meio e condies de cultivo.

31

32
D FASE DE DECLINIO OU MORTE Algum tempo depois da populao ter
entrado na fase estacionaria, a taxa de morte comea a exceder a de diviso,
ocasionando um decrscimo no nmero de microrganismos, entrando a cultura na fase
de morte cuja durao tambm bastante varivel.
13.0 - MEIOS DE CULTURA
O cultivo dos microrganismos, em condies laboratoriais, um pr-requisito
para um estudo adequado. Para que isso possa ser realizado, necessrio o
conhecimento de suas exigncias nutricionais e das condies fsicas requeridas.
MEIOS DE CULTURA so substancias de composio qumica definida, destinada
ao cultivo de tipos especficos e conhecidos de microrganismos.
Matrias primas como: peptonas, extrato de carne, extrato de levedura so empregadas
nos meios de cultura resultando um meio que promove o desenvolvimento de grande
nmeros de microrganismos.
Os meios de cultura podem ser lquidos ou slidos.
TIPOS DE MEIOS
Meios de Enriquecimento permite o crescimento
Meios Seletivos previne o crescimento de um grupo de microrganismos sem agir
sobre outros
Meios Diferenciais permite distinguir o tipo de microrganismos
Meios de dosagem so empregados para dosagem de vitaminas, aminocidos e
antibiticos.
Meios para Contagem
Meios para Identificao
14 - REGRAS BSICAS EM MICROBIOLOGIA

32

Usar bata; no comer, beber, nem fumar no laboratrio,

Limpar e sanitizar as bancadas antes e depois do trabalho

33

Identificar as amostras antes de iniciar a analises, no descartar a amostra at

obter os resultados.

Usar bico de Busen, entre o material e o analista.

As pipetas devem conter algodo na extremidade de suco para evitar

contaminao do material e do analista.

No conversar na hora do trabalho para evitar contaminaes

O material utilizado deve receber o seguinte tratamento:

a) Esterilizao (autoclave)
b) Lavagem
c) Secagem em estufa
d) Esterilizao em estufa 170C por 2 horas
e) Armazenamento
TCNICAS DE LAVAGEM
a) Lavar com detergente
b) Imerso em soluo de HNO3; HCl (1%) ou soluo sulfocrnica
c) Lavar com gua da torneira
d) Enxge com gua destilada
15.0 - CONTROLE DOS MICRORGANISMOS PELA AO DOS AGENTES
FSICOS
15.1.1 -TEMPERATURA
Esterilizar inativar todos os microrganismos existentes no material.
a) Calor seco
Flambagem em chama direta ( bico de Busen, lmpada
germicida
Ar quente estufas, forno de Paster
b) Calor mido
33

34
Pasteurizao visa destruio dos germes patognicos e no
a eliminao total de germes contaminantes.
gua Fervente - A fervura destri quase que instantaneamente
os germes patognicos no esporulados.
Vapor sob presso autoclave.
O calor mido mais eficiente, pois tem um poder de penetrao maior que o
calor seco. O calor seco age, promovendo uma oxidao violenta de
componentes do protoplasma, enquanto que o calor mido age promovendo a
desnaturao das protenas e dissoluo de lipdios.
c) Congelamento
Congelamento lento promove a formao de cristais de gelo, que
perfura a membrana e a parede celular.
Congelamento brusco- temperaturas inferiores a 30C no leva a
formao de cristais, os microrganismos sobrevivem durante muito
tempo nestas condies principalmente se o processo seguido de um
dessecamento vcuo Liofilizao.
15.1.2 RADIAES atividades letais dos microrganismos
Ultravioleta (UV) comprimento de onda entre 240 e 280 nm so
absorvidos pelas purinas e piridinas dos cidos nuclicos provocando
mutaes. Anis aromticos de aminocidos tambm absorvem radiao
levando inativao das enzimas.
Ionizantes atingem os tomos e so incomparavelmente mais
eficientes seringas, agulhas outros materiais descartveis.
15.1.3 FILTRAO passagem de solues ou gases atravs de filtros de
poros suficientemente pequenos que retm os microrganismos.

34

35
15.2. CONTROLE DOS MICRORGANISMOS PELA AO DOS
AGENTES QUMICOS
Os agentes qumicos empregados para matar ou inativar os microrganismos so:
Desinfetantes e Agentes Quimioterpicos
Desinfetantes so substancias que agem diretamente sobre as
estruturas microbianas, causando a morte dos microrganismos. No
matam necessariamente todos os microrganismos, diminuem o numero
de tal forma que os indesejveis no representam mais um risco para o
processo.
Quimioterpicos so substancias que interferem na grande maioria
dos casos, em determinadas vias metablicas, isto , a ao dos agentes
quimioterpicos se restringe as clulas de microrganismos que possuem a
via metablica sensvel.
Microbicida determinando a morte dos microrganismos

Microbiosttico apenas impedindo a sua proliferao

MICROBIOLOGIA SANITRIA
1- SADE E SANEAMENTO
o SANEAMENTO Segundo a OMS o controle de todos os fatores de meio
fsico do homem, que exercem ou podem exercer efeitos nocivos sobre o bem
estar fsico, mental e social.
o SADE o estado de completo bem estar fsico, mental e social, e no apenas
ausncia de doena.
o SADE PBLICA a cincia, e a arte de evitar doenas prolongando a vida.
o SANEAMENTO AMBIENTAL o conjunto de aes socioeconmicas que
tem por objetivo alcanar salubridade ambiental, por meio de abastecimento de
gua potvel, coleta e disposio sanitria de resduos slidos, lquidos e gasoso,

35

36
promovendo a disciplina sanitria do uso do slido, drenagem urbana, controle
de doenas transmissveis, com a finalidade de proteger e melhorar as condies
de vida urbana.
o IMPACTO AMBIENTAL qualquer alterao das propriedades fsicas,
qumicas e biolgicas do meio ambiente, causada por qualquer forma de matria
ou energia resultante das atividades humanas que, direta ou indiretamente,
afetam:

A sade a segurana e o bem estar da populao;

As atividades sociais e econmicas;

A biota;

As condies estticas e sanitrias do meio ambiente;

A qualidade dos recursos ambientais

2.0 ATIVIDADES BSICAS DO SANEAMENTO

Abastecimento de gua populao, com qualidade compatvel com a proteo
da sade e em quantidade suficiente para a garantia de condies bsicas de
conforto.
Coleta, tratamento e disposio ambientalmente adequada e sanitariamente
segura dos esgotos sanitrios proveniente das atividades domesticas, comerciais
e de servios pblicos.
Coleta, tratamento e disposio ambientalmente adequada e sanitariamente
segura dos resduos slidos rejeitados pelas mesmas atividades.
Coleta de guas pluviais e controle de empoamentos e inundaes.
Controle de vetores de doenas transmissveis (insetos, roedores, molsculos,
etc)
3.0 SANEAMENTO E MEIO AMBIENTE
36

37

O meio ambiente tem sido degradado atravs de diferentes formas:

A gua utilizada como meio de transporte de dejetos e rejeitos;
O solo prejudicado pelo lanamento do lixo a cu aberto
A qualidade do ar alterada pela emisso de gases nocivos pelas indstrias e
veculos.
As aes de saneamento devem ter como principal objetivo, assegurar um meio
ambiente favorvel vida humana e de outros seres vivos, atravs da poluio da gua,
do solo e do ar.
4.0 POLUIO
O termo poluio provm do latim polluere SUJAR
POLUIO tudo que ocorre com um meio e altera prejudicialmente, suas
caractersticas originais, de forma a:

Afetar a sade, a segurana e o bem estar da populao;

Criar condies adversas s atividades sociais e econmicas

Ocasionar danos relevantes flora, fauna e a qualquer recurso natural, aos

acervos histricos, culturais e paisagsticos.

O termo poluio abrange hoje trs determinaes bsicas:

o Introduo de substancias artificiais e estranhas ao meio (agrotxicos) ou
contaminao por organismos patognicos.
o Introduo de sedimentos em suspenso nas guas de um lago, ocupando
seu volume til tornando-o turvo.
o Alterao na proporo ou nas caractersticas dos elementos constituintes
do prprio meio, como diminuio do OD nas guas de um rio, devido a
presena de MO.
5.0 SANEAMENTO E SADE PBLICA

37

38
O controle da transmisso das doenas, alm da interveno em saneamento e
dos cuidados mdicos, completa-se quando promovida a educao sanitria, adotandose hbitos higinicos como:
o Utilizao e manuteno adequada das instalaes sanitrias;
o Melhoria da higiene pessoal, domstica e dos alimentos.
5.1 DOENAS RELACIONADAS COM A HABITAO
o Moradias construdas a concentrao elevadas de vetores;
o Nas habitaes deve ser promovida a higiene domestica, esta uma das
estratgias preventivas na transmisso de doenas oral-fecal e das
controladas pela limpeza com a gua.
o As habitaes tm influncia nas doenas transmitidas pelo ar, como
catapora, cachumba, menigite, difteria e doenas respiratrias. O projeto
de uma habitao deve, ento, prever condies adequadas de espao,
ventilao, temperatura e umidade, de forma a no favorecer a
transmisso de patgenos pelo ar;
o O acabamento inadequado nas habitaes pode favorecer a proliferao
de ratos, mosquitos, carrapatos, piolhos, etc.
5.2 DOENAS RELACIONADAS COM O LIXO

38

39

5.3 DOENAS RELACIONADAS COM A GUA

De varias maneiras a gua pode afetar a sade do homem: pela ingesto direta,
na preparao de alimentos; na higiene pessoal, na agricultura, na higiene do ambiente,
nos processos industriais ou nas atividades de lazer.
As doenas relacionadas com a gua podem ser agrupadas em duas categorias:
DOENAS DE ORIGEM HDRICA so aquelas causadas por determinadas por
substncias qumicas (orgnicas e inorgnicas) presentes na gua em concentraes
inadequadas que causam danos sade. Estas substncias podem existir naturalmente
no manancial ou resultarem da poluio
Compostos Orgnicos

Pesticidas

Trihalometanos

Hidrocarbonos Polinucleares aromticos

Compostos Inorgnicos

Antimnio, Arsnico (0,10 mg/L); Brio (1,0mg/L); Cdmio (0,001mg/L);

Cobalto, Chumbo (0,03mg/L); Mercrio (0,002mg/L); Molibdeno, Selnio
(0,01mg/L); Urnio.

Flor em concentraes de 2 a 4 mg/L causa mancha no esmalte dos dentes,

rigidez e dores nas articulaes e deformao do esqueleto. A concentrao
sugerida para guas de 1,0 mg/L.

Tambm podem ser consideradas doenas de origem hdrica aquelas causadas

pela carncia de alguns elementos na gua. Assim, a ausncia de iodo
responsvel pelo bcio e consequentemente pelo cretinismo. Da mesma forma a
falta de flor causa crescimento debilitado de dentes e ossos.

DOENAS DE VEICULAO HDRICA neste caso a gua age como veiculo

transmissor de agente infeccioso ou de vetores biolgicos e mecnicos dos mesmos.

39

40
As infeces relacionadas com a gua podem ser classificadas de acordo com o
mecanismo pelo qual o patgeno transmitido desde uma pessoa doente para um
novo hospedeiro sadio. Essa classificao apresenta 4 categorias:

MECANISMO QUE TEM COMO ORIGEM A GUA o patgeno

est presente na gua e ingerido pelo novo hospedeiro (homem ou animal)
o qual adquirir a infeco. Nesta categoria esto includas as infeces
causadas por bactrias como: clera, febre tifide, disenteria bacilar; por
vrus: hepatite infecciosa (hepatite A), poliomelite, diarrias e doenas
causadas por protozorios: amebase.

Todos esses patgenos seguem a via oral-fecal, isto so eliminadas com as fezes
do doente e penetram pela boca da pessoa susceptvel que se tornar novo doente
A gua apenas a via de transmisso.

MECANISMO ASSOCIADOS A GUA DE LAVAGEM E HIGIENE

PESSOAL - numerosas doenas intestinais, da pele e dos olhos esto
relacionadas com a falta de higiene e/ou uso de gua contaminada.

a) Infeco do aparelho digestivo diarrias morte nas crianas

b) Infeces nos olhos, pele, furnculo, micoses, sarnas, tracomas Infeces
causadas por piolhos, pulgas e percevejos.

MECANISMO BASEADO NA GUA - So doenas cujo agente

etiolgico passa parte do seu ciclo na gua, dentro de um hospedeiro
intermedirio como o caramujo. Todos estes patgenos so vermes
parasitas (helmintos) que dependem do hospedeiro aqutico para
completar seu desenvolvimento.

Exemplos:
Esquistossomose a gua poluda com excretas contm ovos de S. mansoni os
quais eclodem infectam os caramujos evoluem e infectam o homem penetrando
pela pele.

40

41
Verme Guinea (Dracunculos medinensis) a larva sai do homem atravs de feridas
na pele penetra no crustceo. O homem se re-infecta ao ingerir a gua com o
crustceo contaminado.

MECANISMO QUE TEM INSETOS COMO VETORES - so doenas

transmitidas por insetos os quais se criam na gua ou se alimentam e picam
o individuo prximo da gua.

Exemplos: malaria; dengue, febre amarela e a doena do sono (mosca Ts-Ts).

6. DOENAS DE VEICULAO HDRICA

6.1 DOENAS DE ORIGEM VIRAL
VIRUS
1. ENTEROVIRUS

RSERVATRIO

DOENA
Poliomelite, febre,

Polivirus

Homem

meningite
Diarria, febre, meningite,

Echovirus

Homem

doenas respiratrias
Febre, meningite, doenas

Coxsackie

Homem

respiratrias
Doenas respiratrias,

Adenovirus

Homem e animais

infeces de olhos

41

42

Reovirus

Homem e animais

No tem definidas

2. Vrus da Hepatite A
3.Virus associados com

Homem

Hepatite infecciosa

Provavelmente o homem

Diarria e vmitos

gastroenterite
Rotavirus

Diarria e vmitos
Calicivirus

6.2. DOENAS DE ORIGEM BACTERIANO

BACTERIAS

RESERVATORIOS

DOENAS

E. coli patognica

Homem

Diarria

S. tyfho

Homem

Febre tifide

S. paratyphi

Homem

Febre para tifide

Outras Salmonellas

Homem e animais

Intoxicao alimentar e

Salmonella

diarria
Shigela spp

42

Homem

Disenteria bacilar

43

V. cholerae

Homem

Clera

Outros vibrios

Homem

Diarria

Campylobacter spp

Homem e animais

Diarria

Yersinia enterocolitica

Homem e animais

Diarria e septicemias

Leptospira

Ratos

Leptospirose

Icterohaemonhagiae

6.3 DOENAS CAUSADAS POR PROTOZORIOS

Os protozorios mais freqentes em fezes e transmitidos pela gua
correspondem apenas a trs espcies:
PROTOZOARIOS

TRANSMISSO

DOENA

Girdia lamblia

Homem-solo-agua-homem

Giardiase

Entamoeba histolytica

Homem-solo-agua-homem

Amebiase

Balantidium coli

Homem-solo-agua-homem

Balantidiase

6.4 DOENAS CAUSADAS POR HELMINTOS

HELMINTOS

TRANSMISSO

DOENA

43

44
Schistosoma mansoni

Homem e animais-

Esquistossomose

caramujo aqutico
homem
Schistosoma haematobium

Homem-caramujo

Esquistossomose

aqutico homem
Schistosoma japonicum

Homem-caramujo

Esquistossomose

aqutico homem
Fasciola heptica

Homem-caramujo
aqutico -homem

44

Fasciolase

45
Principais Vias de Transmisso de Patogenos

7. INDICADORES DE POLUIO FECAL

Os indicadores de poluio fecal so grupos de bactrias que pela sua origem e
ecologia demonstram a contaminao por fezes ou esgotos.
Os requisitos bsicos que deve reunir um bom indicador esto indicados a
seguir:

Ser um componente normal da flora intestinal de indivduos sadios;

Estar ausente no meio ambiente e em animais

Estar presente sempre que microrganismos patognicos intestinais estiverem

presentes;

Apresentar nmeros mais elevados que os patgenos intestinais;

No se reproduzir fora do intestino

Apresentar taxa de morte igual ou levemente menor que os patgenos intestinais

Ter resistncia igual ou maior aos fatores ambientais que os patgenos fecais

Fceis de detectar e quantificar

No serem patognicos.

45

46
Nenhuma bactria rene todas estas condies. Os principais grupos de bactrias
que servem como indicadores que cumprem com alguns requisitos anteriores so:
coliformes a 35 e 45C, Estreptococos fecais; Clostridium perfringens e os colifdos
somticos.
7.1 INDICADORES DE GUAS RECREACIONAIS
guas recreacionais so guas superfcies como rios e lagos destinados
natao, piscinas e praias.
Tradicionalmente a qualidade destas guas monitorada atravs das bactrias do
grupo coliformes e contagem padro de bactrias hetertrofas. A deteco dos primeiro
grupo serve para indicar a qualidade de guas destinadas para o consumo humano
tratadas ou no, cuja ingesto poder causar doenas intestinais. Portanto, estes
indicadores so de uso limitado em guas destinado recreao. Tornam-se necessrios
microrganismos que indiquem riscos sade pelo contato direto do individuo com a
gua e no apenas pela ingesto da mesma. Foram esto sugeridas, como indicadores
adicionais, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus.
8. DEFINIES E APLICAES DE MICRORGANISMOS INDICADORES
8.1 Coliformes
O grupo de coliformes a 35C inclui as bactrias na forma de bastonetes Gramnegativos, no esporuladas, aerbias ou anaerbias facultativas, capazes de fermentar a
lactose com produo de gs, em 24-48 horas a 35C, o grupo inclui cerca de 20
espcies, dentre as quais encontram-se, tanto bactrias originrias do trato gastrintestinal
de humanos e outros animais de sangue quente, como tambm diversos gneros e
espcies de bactrias no entricas, como Serratia e Aeromonas. Por essa razo, sua
enumerao em gua e alimentos menos representativa como indicao de
contaminao fecal, do que a enumerao de E. coli.

46

47
8.2 Escherichia coli
A E. coli um membro da famlia Enterobacteriaceae apresentando-se como um
bacilo Gramnegativo anaerbio facultativo, capazes de fermentar a lactose com
produo de gs, em 24-48 horas a 44-45C. geralmente encontrada no intestino do
homem e animais de sangue quente e pode ser isolada de alimentos de origem animal.
Cerca de 95% dos coliformes existentes nas fezes humanas e de outros animais
so E. coli, e dentre as bactrias de habitat reconhecidamente fecal a E. coli o melhor
indicador de contaminao fecal conhecido at o momento, pois satisfaz quase todas as
exigncias de um indicador ideal.
Aplicao:
o Avaliao da contaminao fecal em guas superficiais, de esturios e marinas.
o Monitoramento de guas recreacionais como piscinas, praias e lagos. um
indicador fundamental para avaliar as condies de balneabilidade, de acordo
com os padres nacionais.
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas destinadas irrigao,
descendentao de animais, criao de ostras e mariscos.
o Avaliao da eficincia dos sistemas de tratamento de ETES
o Monitoramento da qualidade de gua para consumo humano, da rede de
distribuio, de guas minerais, poos, etc.

Gneros: Citrobacter,
Escherichia, Enterobacter e
Klebsiella
Citrobacter, Enterobacter e
Klebsiella: coliformes ambientais

47

48

8.3. Estreptococcus faecalis

So cocos Gram-positivos presentes em fezes humanas e animais. So mais
resistentes que os coliformes s condies ambientais externas (pH, temperatura,
salinidade, etc).
Aplicao:
o As mesmas que para os coliformes
o Confirmao contaminao de origem fecal, quando os resultados de
coliformes so duvidosos;
o Avaliao da qualidade de guas subterrneas (devido maior resistncia no
solo que os coliformes, tornam-se indicadores confiveis).
8.4 Clostridium perfringens
So bastonetes Gram-positivos, esporulados, anaerbios que fermentam a
lactose com produo de gs. Produzem fermentao turbulenta do leite, reduzem os
nitratos (atividade desnitrificante), reduzem sulfitos na gua, produzem lecitinase e
fosfatase cida e hidrolizam a gelatina.
Aplicao:
o Avaliao da qualidade da gua de novas fontes de abastecimentos.
o Deteco da contaminao em sedimentos marinos e resduos industriais.
o Anlises da qualidade de guas recicladas e fontes reconhecidamente poludas.
o Avaliao da qualidade de guas minerais.
8.5 Pseudomonas aeruginosas
So bactrias Gram-negativas, aerbias, moveis por filamentos polares, oxidase
e catalase positivos. A maioria das cepas produzem pigmentos esverdeados. Crescem a
37C e 41C, mas no a 4C.

48

49
Apresentam elevada resistncia a antibiticos e desinfetantes (portanto so bons
indicadores do grau de higiene de guas de piscinas) e a biocidas. Toleram valores de
pH relativamente altos (pH= 8,5).
Aplicao:
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas recreacionais, guas industriais
e corpos receptores de esgotos domsticos, hospitalares e industriais.
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas potveis e minerais.
o Monitoramento da rede de abastecimento, quando esta bactria detectada em
testes prvios.
8.6 Staphylococos ureos
So cocos Gram positivos, catalase positiva, fermentadores de glicose e manitol
em anaerobiose. So coagulase positivo e produzem uma nuclease termoresistente.
Aplicao:
o Avaliao da qualidade sanitria de guas de piscinas e recreacionais em
geral.
o Avaliao da eficincia da desinfeco em piscinas, devido sua alta
resistncia ao cloro e outros desinfectantes
o Apresentam as mesmas aplicaes que os coliformes e a E. coli.
8.7 Colifagos
Os colifagos so vrus (bacterifagos) que infectam e se replicam em
bactrias coliformes e aparentemente esto presentes sempre que coliformes a
35C, coliformes a 45C e E.coli esto presentes.

Aplicao
o Indicadores da qualidade sanitria de guas doces, salobras e salinas.
o Indicadores da provvel presena de enterovirus

49

50
o Servem como modelo do comportamento de enterovirus em sistema de
tratamento.

9.0. AGUA NA NATUREZA

9.1 DISTRIBUI DA AGUA NA TERRA
As guas cobrem da superfcie da terra; deste total, 97% da gua s salgadas
3% so gua doce. Dessa ultima 77% esto congeladas nos crculos polares; 22%
compem-se de guas subterrneas. Esses valores ressaltam a grande importncia de se
preservar os recursos hdricos na terra, e de se evitar a contaminao.
H uma forte ligao entre a falta dgua e altos ndice de mortalidade infantil
9.2. QUALIDADE DA GUA
A gua de chuva, ao cair, quase pura; ao atingir o solo seu poder de dissolver e
carrear substncias altera suas qualidades.
Dentre o material dissolvido encontram-se as mais variadas substncias tais
como: substancias calcarias e magnesianas que tornam a gua dura; substancias
ferruginosa que do cor r sabor; partculas finas que do durbidez; e tambm
organismos patgenos resultantes das atividades humana. Em conseqncia da sua
grande atividade, a gua pura no encontrada na natureza.

50

51
gua potvel aquela que prpria para o consumo humano, pelas suas qualidades
organolepticas, fsicas, qumicas e biolgicas. Em outras palavras aquela que no
contem germes patognicos, nem substncias qumicas alem do limite de tolerncia.
gua poluda - aquela que contem substancias que modificam suas caractersticas e a
tornam imprprias para consumo.
gua contaminada aquela c que contem germes patognicos.
10. ABASTECIMENTO DE GUA
O Sistema de Abastecimento Pblico de gua constitui-se no conjunto de obras,
instalaes e servios, destinados a produzir e distribuir gua a uma comunidade, em
quantidade e qualidade compatveis com as necessidades da populao, para fins de
consumi domestico, servios pblicos, industrial e outros A gua constitui elemento
essencial vida vegetal e animal. O homem necessita de gua em qualidade adequada e
quantidade suficiente para atender suas necessidade, para proteo da sade e para
proporcionar o desenvolvimento econmico.
10.1 IMPORTANCIA DO SISTEMA DE ABASTECIMENTO DE GUA
A importncia do sistema de abastecimento de gua pode ser considerada nos seguintes
aspectos:
10.2 ASPECTO SANITRIO E SOCIAL
o Melhoria da sade e das condies de vida de uma comunidade
o Diminuio da mortalidade, principalmente infantil;
o Diminuio da incidncia de doenas relacionada com a gua;
o Implantao de hbitos higinicos na populao
o Facilidade na implantao e melhoria dos sistemas de esgotos sanitrios
o Possibilidade de proporcionar conforto e bem estar
o Melhoria das condies de segurana.

51

52

10.3 ASPECTO ECONMICO

o Aumento da vida produtiva dos indivduos economicamente ativos;
o Diminuio dos gastos particulares e pblicos com consultas e internaes
hospitalares.
o Facilidade para instalao de indstrias, onde a gua utilizada como matriaprima ou meio de operao;
o Incentivo industria turstica em localidades com potencialidade para seu
desenvolvimento.
10.4 SISTEMA DE ABASTECIMENTO DE GUA
Quando a densidade demogrfica de uma comunidade aumenta, a soluo mais
econmica e definitiva a implantao de um sistema de abastecimento de
gua. Sob o ponto de vista sanitrio, a soluo coletiva a mais indicada, por
ser mais eficiente no controle dos mananciais, e da qualidade da gua
distribuda populao.
Um sistema de abastecimento de gua composto das seguintes unidades:

Manancial fonte de onde se retira a gua com condies sanitrias

adequadas e vazo suficiente para atender a demanda. A escolha de um
manancial feita considerando-se so s a quantidade e a qualidade mas,
tambm o aspecto econmico.

Captao o conjunto de equipamentos e instalaes utilizados para a tomada

de gua do manancial, com a finalidade de lan-la no sistema de abastecimento.
O tipo de captao varia de acordo com o manancial e com o equipamento
empregado.

Aduo adutora o conjunto de tubulaes, peas especiais, dispostas entre:

Captao e a estao de Tratamento;

Captao e o reservatrio de distribuio;
Captao e a rede de distribuio
ETA e reservatrio de distribuio;

52

53
ETA e a rede de distribuio
A adutora pode ser por gravidade e por recalque

Estao de Tratamento O trata mento de gua consiste em melhorar suas

caractersticas organolepticas, fsicas, qumicas e bacteriolgicas, a fim de
que se torne adequada ao consumo humano. A qualidade fsico qumica e
bacteriolgica da gua obtida no manancial definir o mtodo de tratamento
necessrio para atender aos padres de potabilidade estabelecidos pela
portaria n 1.469/2000 do Ministrio da sade.

Reservatrio empregado para o acumulo da gua com o propsito de:

Atender s variaes de consumo na hora que este maior;
Manter a presso mnima ou constante n a rede;
Atender s demandas de emergncias, em caso de incndio, ruptura
de rede, etc.

Distribuio leve a gua do reservatrio ou da adutora para os pontos de

consumo.

11. UNIDADES DO SISTEMA DE ABASTECIMENTO

11.1 ESTAO CONVENCIONAL
A estao de tratamento tem como funo de eliminar certas impurezas e/ou
corrigir algumas impropriedades que as tornem inadequadas para o consumo humano.
Finalidade do tratamento submete-se a gua a um tratamento com o objetivo de
melhorar a sua qualidade sob os seguintes aspectos fundamentais.
a) higinico
b) esttico
c) econmico

53

54

ETA ESTAO DE TRATAMENTO DE GUA

AERAO - um processo fsico onde a rea de contato, entre a gua e o ar,

aumentada, de modo a facilitar a transferncia ou i intercambio de gases.
DECANTAO a remoo de partculas slidas que decantam, sem emprego de
processos qumicos, pela ao da gravidade em unidades de decantadores primrios.
COAGULAO a desestabilizao das partculas coloidais, ou seja, fazer com
que as partculas coloidais que no se agregam lentamente passem a se agregar.

54

55
FLOCULAO um processo mecnico que visa aglutinar as partculas minsculas
coaguladas por meio de um contato estabelecido entre elas e outras existentes na gua,
atravs de uma agitao prolongada durante a qual elas se unem, aumentam de tamanho
e se acondicionam, tornando-se mais densas.
Coagulante: sulfato de alumnio ( Al2(SO4)3 . 18 H2O)
FILTRAO a remoo de slidos dissolvidos, coloidais e em suspenso, atravs
da passagem da gua por meio poroso (areia, silte, brita) resultam em um efluente de
melhores caractersticas de potabilidade, em virtude da ao puramente fsica de
filtrao ou reteno de impurezas. Remove alto teor de bactrias (90 a 99%), cor,
turbidez, mas pouca remoo de sabor e odor.
DESINFECO o processo de tratamento que visa a eliminao dos germes
patognicos presentes na gua. Esta desinfeco pode ser feita atravs do cloro ou de
seus compostos (clorao); por meio de oznio (ozonizao) e tambm por meio da
radiao ultra-violeta, produzida em lmpadas especiais, que exerce uma ao
esterilizante.
12. ANALISES MICROBIOLGICAS
12.1 COLETA DE AMOSTRAS

GUA DE TORNEIRA abre-se a torneira, deixa-se correr gua para

eliminar a que ficou retida na tubulao. Fecha-se, esteriliza-se com algodo
embebido de lcool e cesso.

BALNERIOS os pontos de coletas so os mais freqentados, as amostras

devem ser coletadas na hora de maior pico; a freqncia de amostragem ser
aumentada na poca de chuva.

PISCINAS coletar a gua a 30 cm de profundidade. O frasco dever conter

Tiosulfato de sdio, as amostras devem ser coletadas na hora de maior
concorrncia.

RIOS, LAGOS em reservatrios utilizados como fonte de gua potvel, os

pontos de coletas sero prximos a captao. No deve coletar amostras nas

55

56
bordas do rio, reservatrio, porque nessa regio a gua mais poluda e h
acumulo de matria orgnica, crescimento de plantas e insetos, o que eleva o
teor de microrganismos e os resultados no seriam representativos.

12.2 TCNICAS BACTERIOLGICAS

1- A amostra deve ser coletada em frascos estreis;
2- A amostra deve ser representativa
3- Deve evitar contaminao da amostra durante e aps a coleta;
4- A amostra deve ser examinada logo aps a coleta
5- Em caso de demora a amostra deve ser guardada a uma temperatura entre 0C e 10C.
No Brasil os padres de potabilidade da gua para o consumo humano so
estabelecidos pelo Ministrio da Sade e atualmente encontra-se em vigor a Portaria MS
n 1.469/2000.

56

57

COLORAO DE GRAM

A colorao de Gram um dos mais importantes procedimentos para a

caracterizao de bactrias. As bactrias so divididas em dois grupos, baseados na
capacidade de que possuem de reter ou perder o corante primrio (cristal violeta).
Os organismos que retm o cristal violeta (aparecem azul escuro ou violeta) so
chamados Gram positivos, aqueles que perdem o cristal violeta e so posteriormente
corados pela safranina (aparecem vermelhos) so denominados Gram negativos.
O mecanismo de Gram o seguinte: h um elevado contedo de lipdeos nas
paredes celulares dos organismos Gram. O lcool empregado extrai as graxas,
aumentando a porosidade ou permeabilidade da parede celular nas bactrias Gram
(-). O complexo Cristal violeta extrado pelo lcool e o microrganismo fica
descolorido.
As paredes celulares das bactrias Gram (+), devido a sua diferente composio,
desidratam pelo lcool, o tamanho dos poros diminui, a permeabilidade reduzida e
o complexo cristal violeta se fixa.
PROCEDIMENTO
MATERIAL: Lmina; Bico de Bunsen; Estufa; Microscpio; Cristal violeta; Lugol;
Safranina e lcool.
METODOLOGIA:
1. Lavar a lmina com gua e sabo e/ou lcool e ter. Secar a lmina e verificar se
toda gordura foi removida.
2. Colocar uma ou duas gotas do liquido contendo a suspenso na lmina. Espalhar
sobre uma rea de cerca de 1,5 cm de dimetro.
3. Deixar o esfregao secar temperatura ambiente ou em estufa.
4. Passar o esfregao 3 vezes sobre a chama do bico de Bunsen para fixao do
mesmo.
57

58
5. Adicionar o Cristal violeta, aguardar 20 a 60 segundos.
6. Aplicar soluo de Lugol esperar 60 segundos. Lavar com gua.
7. Descorar com lcool ate que a cor livre tenha sado.
8. Corar com Safranina esperar 20 a 60 segundos. Lavar e secar.
9. Examinar ao microscpio com a objetiva de imerso.

OBSERVAES:
1. Quando o material a ser analisado for viscoso, deve-se proceder diluio
usando-se uma gota de gua destilada.
2. A fixao do esfregao faz-se necessria para manter o microrganismo
aderido lmina.
3. O Lugol uma substancia mordente empregada com o objetivo de fixar o
corante clula.
4. O lcool agente descorante que remove o corante de certas bactrias.
5. Cultivos antigos de algumas bactrias Gram positivas podem perder a
propriedade de reter o Cristal violeta, e, conseqentemente, podero se corar
com a safranina.

(a)

(B)

Figura 1: Tcnica para identificar as bactrias Gram e Gram+.

So

exemplos

- Estreptococos;
- Estafilococos;
- Enterococos.

58

de

bactrias

Gram-positivas

vrias

espcies

de:

59
So

exemplos

de

bactrias

Gram-negativas:

- Vibro Colrico
- Colibacilo;
- Salmonelas.
Entre a grande variedade de doenas provocadas por cocos salientam-se:
- Pneumonia
-Pneumonia

nosocomial

(adquirida

adquirida

em
na

meio

hospitalar);
comunidade;

- Infeces da pele e tecidos moles.

59

60

PREPARAO E ESTERILIZAO DE MEIOS DE CULTURA

INTRODUO
Os microrganismos necessitam, para o seu crescimento, de nutrientes prprios e
condies fsicas e qumicas especificas.
Um meio de cultura um conjunto de ingredientes formulados no laboratrio ou
adquiridos desidratados, que empregado com o objetivo de possibilitar a
multiplicao de microrganismos.
Cada microrganismo ou grupo de microrganismo possui exigncias nutritivas
especificas.
MEIOS DESIDRATADOS
A maior parte dos meios de cultura pode ser obtida na forma desidratada e neste
caso alguns aspectos devem ser obtidos:
1. ARMAZENAMENTO E CONSERVAO
Anotar em livro prprio a data da recepo dos meios de cultura e ingredientes
empregados na formulao.
Armazen-lo de acordo com as especificaes contidas no rotulo, em uma rea
de pouca umidade, afastada da luz direta do sol, das autoclaves, estufa de
secagem e qualquer outra fonte de calor.
Quando especificado no rotulo, manter sob refrigerao.
Aps o uso assegurar-se de que o frasco esta bem fechado e armazena-lo em
local prprio.
Descartar o meio caso o p no esteja fluindo facilmente ou se houver alteraes
na cor e/ou consistncia.
2. PESAGEM

60

61
Ao preparar meios e cultura deve-se usar primeiro o estoque mais velho. No se
deve abrir um novo lote de meio ate que o anterior tenha esgotado.
Usar uma balana cuja exatido se verifique freqentemente. Os meios
desidratados so hidroscpicos e desta forma, a pesagem deve ser feita rapidamente
e em local de pouca umidade.
3. DISSOLUO
Usar vidros bem lavados e enxaguados. No usar gua suspeita de conter cloro,
cobre ou detergentes. Usar gua deionizada ou destilada.
Antes a aplicar calor dissolver meios desidratados deve-se ler o rotulo. Alguns
meios no devem ser submetidos a temperaturas acima de 55C, (Caldo urea, Agar
urea) enquanto que outros meios desidratados devem ser aquecidos a fim de garantir
a completa dissoluo e distribuio uniforme dos ingredientes.
O aquecimento deve ser feito sob agitao continua e suave, evitando que o
mesmo se queime no fundo do frasco. A agitao do meio durante o aquecimento
deve ser feita com cautela porque alguns meios, especialmente os que contm Agar,
podem formar espuma e transbordar.
Os meios que contm Agar devem permanecer, em geral durante 5 a 10 minutos
em repouso na gua, antes de serem aquecidos, para permitir que as partculas de
Agar se reidratem adequadamente, elevando a solubilidade do Agar resultando em
gel mais uniforme.
O meio preparado deve ser distribudo em frasco ou tubo (permitindo uma
pequena folga da tampa) apropriado e levado para esterilizao.
Ao distribuir o meio em recipientes adequados, no devemos colocar mais de 2/3
da capacidade do mesmo.

ESTERILIZAO
Alguns meios no devem ser esterilizados em autoclave. Em alguns casos, os
meios devem ser esterilizados por filtrao, outros so to seletivos que no
necessitam de calor nem de filtro (Agar Salmonella-shiguella, Agar citrato
desoxicolato, Caldo de tetrationato, Caldo de selenito). A atividade seletiva destes
meios destruda durante a autoclavao.

61

62
O microbiologista dispe de numerosos filtros de diferentes tipos e poros de
tamanhos variveis. Os filtros de membrana (Millipore, Belford, Mass) so
provavelmente o sistema de filtro mais usado e podem ser empregados com
adaptadores prprios permitindo a esterilizao de grandes volumes.
Na esterilizao por autoclavao o meio no deve ser tratado deficientemente
ou excessivamente. O excesso de tratamento em um meio pode acarretar um erro
pior do que a subesterilizao. necessrio pr-aquecer meios em volumes maiores,
para evitar demora em alcanar a temperatura de esterilizao. Nunca deve ser
autoclavado mais de dois litros por recipiente. Antes de esterilizar o pH do meio
deve ser comprovado em potencimentro (ajustado com tampes). Esta medida deve
ser tirada a 25C e normalmente no precisa ser ajustada. A adio de componentes
pode afetar o equilbrio do meio.
ARMAZENAMENTO DO MEIO PRONTO
De forma geral, os meios prontos devem ser armazenados a temperatura entre 2
e 8C (geladeira). O efeito nocivo comumente associado ao armazenamento a
desidratao. Esta no ser problema em meios lquidos e sim em meios em placas,
principalmente em laboratrios pequenos onde certos meios so usados
ocasionalmente. Estes meios em placas devem ser conservados em sacos plsticos,
selados, para minimizar a perda de umidade, e estocados em posio invertida.
Todos os meios devem ser levados a temperatura ambiente antes de seu uso.
Meios como Agar padro, Agar batata e outros, podem ser guardados em
volumes para serem adicionados em placas (15 mL). No momento da analise sero
fundidos e resfriados.

62