Biosseguranca Laboratorios Biomedicos Microbiologia PDF

MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Vigilncia em Sade

Departamento de Vigilncia Epidemiolgica
Biossegurana
em Laboratrios
Biomdicos e de
Microbiologia
Ttulo original: Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories 4th edition May of 1999
3.a edio revista e atualizada

2.a reimpresso
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Braslia DF
2006
2000 Ministrio da Sade.

Todos os direitos reservados. permitida a
reproduo parcial ou total desta obra, desde
que citada a fonte e que no seja para venda
ou qualquer fim comercial.
A responsabilidade pelos direitos autorais de
textos e imagens desta obra da rea tcnica.
A coleo institucional do Ministrio da Sade
pode ser acessada, na ntegra, na Biblioteca
Virtual em Sade do Ministrio da Sade:
http://www.saude.gov.br/bvs
O contedo desta e de outras obras da Editora
do Ministrio da Sade pode ser acessado na
pgina: http://www.saude.gov.br/editora
Direitos patrimoniais de autor cedidos ao
Ministrio da Sade pelos editores para edio
desta obra em portugus.
Edio original em ingls: Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories
Editada pelo CDC Prevention and Control
Center of Diseases and INS National
Institute of Health Washington United
States 4th edition May of 1999, 1st edition
1994.
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Tiragem: 3. edio em portugus
revista e atualizada 2. reimpresso
2006 1.500 exemplares
Organizao, distribuio e informaes
3. edio revista e atualizada 2004:
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de Vigilncia Epidemiolgica

Coordenao-Geral de Laboratrios de
Sade Pblica
Setor de Autarquias Sul, quadra 4,
bloco N, sala 712
CEP: 70070-040, Braslia DF
Tels.: (61) 3314-6352 / 3314-6550 / 3314-6556
E-mail: svs@saude.gov.br
Home page: www.saude.gov.br/svs
Responsvel tcnico:
Mrio Cesar Althoff
1. edio em portugus 2001:
MINISTRIO DA SADE
Fundao Nacional de Sade
Centro Nacional de Epidemiologia
Coordenao Nacional de Laboratrios
de Sade Pblica
Setor de Autarquias Sul, quadra 4, bloco N, 6.
andar, sala 619
Tels: (61) 3314-6550 / 3314-6556
Reviso tcnica da traduo:
Ncleo de Biossegurana (NuBio)
Vice-Presidncia de Tecnologia
Fundao Oswaldo Cruz
Av. Brasil, n.o 4.036 7.o andar, sala 716
CEP: 21040-961, Rio de Janeiro RJ
Tels.: (21) 2590-9122 ramal 257/258
Fax: (21) 2590-9122
Impresso no Brasil / Printed in Brazil
Ficha Catalogrfica
Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica.
Biossegurana em laboratrios biomdicos e de microbiologia / Ministrio da Sade, Secretaria de Vigilncia
em Sade, Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. 3. ed. em portugus rev. e atual. Braslia: Ministrio
da Sade, 2006.
290 p.: il. (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos)
ISBN 85-334-0777-7
Traduo do ingls: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories
ISBN 017-040-00547-4
1. Laboratrios de sade pblica. 2. Tcnicas e procedimentos de laboratrio. I. Ttulo. II. Srie.
NLM QY 25
Catalogao na fonte Coordenao-Geral de Documentao e Informao Editora MS OS 2006/0694
Ttulo para indexao:
Em espanhol: Biosecuridad en laboratorios biomdicos y de microbiologa
EDITORA MS
Documentao e Informao
SIA, trecho 4, lotes 540/610
Tels.: (61) 3233-1774 / 3233-2020
Fax: (61) 3233-9558
E-mail: editora.ms@saude.gov.br
Home page: www.saude.gov.br/editora
Equipe editorial:
Normalizao: Leninha Silvrio
Reviso: Mara Pamplona e Paulo Henrique de Castro
Capa e projeto grfico: Fabiano Bastos
DEDICATRIA*
Esta quarta edio de Biossegurana em Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia dedicada vida e s realizaes de John
H. Richardson, D.V. M., M. P. H.
Dr. Richardson foi pioneiro e incessante defensor da segurana
para a educao biolgica. Ele foi o co-editor das duas primeiras
edies da BLBM, cujas normas so agora aceitas como o padro
ouro internacional para a conduo segura de uma pesquisa microbiolgica. Ele adaptou os programas de quarentena de animais
importados para os Estados Unidos e o de manejo de organismos
biolgicos perigosos em laboratrios de pesquisas. Ele foi sciopresidente e ex-presidente da Associao Americana de Segurana Biolgica (American Biological Safety Association) e auxiliou no
desenvolvimento do programa de qualificao dos profissionais da
rea de segurana biolgica. Aps uma longa e ilustre carreira no
Servio de Sade Pblica (Public Health Service), ele atuou como
diretor de Segurana do Meio Ambiente e na Secretaria de Sade
da Universidade de Emory, antes de se tornar um renomado consultor de Biossegurana.
Talvez o aspecto mais importante, por ter sido um cavalheiro e
defensor da sade pblica, os muitos amigos e associados que tiveram o privilgio de conhec-lo e trabalhar ao seu lado sentiro
muito a sua falta.
* Traduo fiel ao texto publicado na 4a edio da obra impressa em Washington United States.
sumrio
relao DE tabelas, FIGURAS e listas.........................................................
APRESENTAO. ......................................................................................................................................
PREFCIO.......................................................................................................................................................... 11
SEO I................................................................................................................................................................. 13
Introduo. ......................................................................................................................................................... 13
SEO II.............................................................................................................................................................. 19
Princpios de Biossegurana............................................................................................................ 19
Seo III............................................................................................................................................................ 29
Nveis de Biossegurana Laboratorial. ................................................................................. 29
SEO IV............................................................................................................................................................ 65
Critrios para os Nveis de Biossegurana
para Animais Vertebrados. ................................................................................................................ 65
SEO V............................................................................................................................................................... 89
Avaliao dos Riscos................................................................................................................................. 89
SEO VI............................................................................................................................................................ 97
Nveis de Biossegurana Recomendados para Agentes
Infecciosos e Animais Infectados............................................................................................... 97
SEO VII.......................................................................................................................................................... 101
Relao dos Agentes................................................................................................................................. 101
Seo VII-A: Agentes Bacterianos. .................................................................................. 101
Seo VII-B: Agentes Fngicos............................................................................................ 127
Seo VII-C: Agentes Parasitrios.................................................................................... 132
Seo VII-D: Prons.......................................................................................................................... 138
Seo VII-E: Agentes Rickettsiais..................................................................................... 149
Seo VII-F: Agentes Virais (No Incluindo o Arbovrus). .................... 153
Seo VII-G: Arbovrus e Vrus Zoonticos Relacionados. ................... 178
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ...................................................................................... 195

Referncias e Lista de Notas. .......................................................................................................... 195
APNDICE A.................................................................................................................................................... 235
Conteno Primria: Cabines de Segurana Biolgica........................................ 235
APNDICE B.................................................................................................................................................... 247
Imunoprofilaxia. ........................................................................................................................................... 247
APNDICE C.................................................................................................................................................... 249
Transporte e Transferncia de Agentes Biolgicos. ............................................... 249
APNDICE D................................................................................................................................................... 255
Patgenos Animais.................................................................................................................................... 255
APNDICE E.................................................................................................................................................... 257
Fontes de Informaes.......................................................................................................................... 257
APNDICE F.................................................................................................................................................... 259
Segurana do Laboratrio e Resposta de Emergncia
para Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia.................................................. 259
APNDICE G. .................................................................................................................................................. 265
Gerenciamento Integrado de Roedores e de Insetos............................................ 265
APNDICE H................................................................................................................................................... 271
Trabalhos com Clulas e Tecidos Humanos e de Outros Primatas. ...... 271
APNDICE I. .................................................................................................................................................... 273
Normas para o Trabalho com Toxinas de Origem Biolgica. ....................... 273
NDICE REMISSIVO. ............................................................................................................................. 279
EQUIPE TCNICA E EDITORIAL........................................................................................... 287
relao
DE tabelas,
FIGURAS
e listas
RELAO DE TABELAS
Tabela 1. Resumo dos nveis de biossegurana
recomendados para agentes infecciosos.............................................. 64
Tabela 2. Resumo dos nveis de biossegurana
recomendados para as atividades nas quais animais
vertebrados infectados naturalmente ou
experimentalmente so utilizados....................................................... 88
Tabela 3. As doenas causadas por prons........................................... 139
Tabela 4. Agentes causadores de infeces
adquiridas em laboratrio.................................................................... 179
Tabela 5. Cepas vacinais de vrus do NB-3/4
que podem ser manipuladas em um nvel de biossegurana 2.................. 185
Tabela 6. Infeces associadas ao laboratrio ou
ao laboratrio animal (1)...................................................................... 186
Tabela 7. Infeces associadas ao laboratrio ou
ao laboratrio animal (2)...................................................................... 192
Tabela 8. Comparao entre as cabines
de segurana biolgica.......................................................................... 239
Tabela 9. Patgenos animais ................................................................ 255
RELAO DE FIGURAS
Figura 1. Cabine de segurana biolgica classe I................................. 241
Figura 2a. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo A.................. 242
Figura 2b. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B1................243

Figura 2c. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B2................244
Figura 2d. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B3 ...............245
Figura 3. Cabine de segurana biolgica classe III...............................246
Figura 4. Embalagem e rotulagem de substncias infecciosas............254
Figura 5. Embalagem e rotulagem de amostras clnicas.....................254
RELAO DE LISTAS
Lista 1. Precaues padro para autpsias de
pacientes com suspeita de doena por prons.....................................145
Lista 2. Procedimentos de descontaminao
da sala de autpsia................................................................................146
Lista 3. Procedimentos de corte do crebro.........................................147
Lista 4. Preparao do tecido................................................................147
Lista 5. Arbovrus e arenavrus designados
para o nvel de biossegurana 2............................................................182
Lista 6. Arbovrus e alguns outros vrus
designados para o nvel de biossegurana 3
(com base em experincia insuficiente)...............................................189
Lista 7. Arbovrus e alguns outros vrus
designados para o nvel de biossegurana 3........................................190
Lista 8. Arbovrus, arenavrus e filovrus
designados para o nvel de biossegurana 4........................................193
APRESENTAO
O imprevisvel e diversificado comportamento das doenas infecciosas emergentes e reemergentes tem acarretado a discusso
das condies de biossegurana nas instituies de ensino, pesquisa, desenvolvimento tecnolgico e de prestao de servios. A
despeito do avano tecnolgico, o profissional de sade est freqentemente exposto a riscos biolgicos e de produtos qumicos,
cujo enfrentamento est consubstanciado na adequao das instalaes do ambiente de trabalho e na capacitao tcnica desses
profissionais. O manejo e a avaliao de riscos so fundamentais
para a definio de critrios e aes e visam a minimizar os riscos que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do
meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos.
A biossegurana constitui uma rea de conhecimento relativamente nova, regulada em vrios pases por um conjunto de leis,
procedimentos ou diretrizes especficas. No Brasil, a legislao de
biossegurana foi criada em 1995 e, apesar da grande incidncia
de doenas ocupacionais em profissionais de sade, engloba apenas a tecnologia de engenharia gentica, estabelecendo os requisitos para o manejo de organismos geneticamente modificados.
A segurana dos laboratrios e dos mtodos de trabalho transcende aos aspectos ticos implcitos nas pesquisas com manipulao gentica. Medidas de biossegurana especficas devem ser
adotadas por laboratrios e aliadas a um amplo plano de educao
baseado nas normas nacionais e internacionais quanto ao transporte, conservao e manipulao de microorganismos patognicos.
apresentao
Ao apresentar este livro, traduo autorizada do original em

ingls Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 4th
Edition CDC-INH, 1999, esperamos atender s necessidades de
conhecimento bsico de biossegurana laboratorial dos profissionais participantes do Programa Nacional de Capacitao em Biossegurana Laboratorial, que est sendo desenvolvido pelo Centro Nacional de Epidemiologia da Fundao Nacional de Sade
(Cenepi/funasa), e constituir um roteiro atualizado de condutas
gerais de segurana para os profissionais que atuam na Rede Nacional de Laboratrios de Sade Pblica.
Braslia (DF), abril de 2004.
Jarbas Barbosa da Silva Junior
Secretrio de Vigilncia em Sade do Ministrio da Sade
10
PREFCIO
Esta publicao descreve as combinaes das prticas padro

de microbiologia e as especiais dos equipamentos de segurana e
das instalaes que constituem os nveis de biossegurana de 1-4
recomendados para um trabalho que envolva uma variedade de
agentes infecciosos em vrios estabelecimentos laboratoriais.
Essas recomendaes possuem um carter consultivo. A inteno a de fornecer um guia voluntrio ou um cdigo de prtica,
assim como os objetivos para as operaes de um nvel mais alto.
Esses conselhos so tambm oferecidos como um guia e uma referncia na construo das instalaes de um novo laboratrio e na
reforma de instalaes j existentes.
Porm, a aplicao destas recomendaes na operao de um
laboratrio particular dever se basear na avaliao do risco dos
agentes e das atividades especiais, ao invs de ser considerada
como um cdigo universal e genrico aplicvel a todas as situaes.
Desde a publicao da terceira edio do livro Biossegurana
em Laboratrios Biomdicos e de Microbiologia, ocorreram inmeros eventos que acabaram por influenciar algumas das mudanas feitas nesta quarta edio.

Em resposta preocupao global referente s doenas

infecciosas emergentes e s reemergentes, a seo de
Avaliao de Riscos foi ampliada para proporcionar ao
laboratorista informaes adicionais para facilitar a implantao de tais determinaes.
11
prefcio
Devido grande demanda de projetos e construes de

laboratrios biomdicos e microbiolgicos, particularmente nos nveis de biossegurana 3, foram incorporados esclarecimentos e acrscimos s sees Instalaes,
em particular s sees III e IV. O objetivo a expanso
da abordagem baseada na atuao, com o objetivo de se
obter uma conteno apropriada.
Com a identificao da encefalopatia espongiforme bovina (EEB) na Inglaterra, houve um aumento significativo
do interesse sobre doenas provocadas por prons. Por
essa razo, foi acrescentado um apndice para direcionar
as vrias preocupaes associadas ao trabalho com tais
agentes.
Como tm ocorrido vrias infeces associadas a laboratrios envolvendo agentes previamente conhecidos e
desconhecidos, foram modificados ou acrescentados vrios resumos das caractersticas de agentes nesta edio.
Os resumos de agentes agora contm informaes sobre
os requisitos necessrios para a obteno de licenas para
o transporte de microorganismos infecciosos. O motivo
para essa modificao foi a preocupao em relao ao
crescente transporte nacional e internacional de microorganismos infecciosos.
E, finalmente, nestes ltimos anos, houve uma preocupao crescente em relao ao bioterrorismo, o que tem
provocado um considervel interesse nas questes que
envolvem a biossegurana. Portanto, foi acrescentado
um apndice para ajudar na concentrao das atenes
sobre as necessidades de se aumentar a segurana nos
laboratrios de microbiologia.
Gostaramos tambm de agradecer as contribuies de muitos profissionais da comunidade cientfica que proporcionaram
idias para o aperfeioamento desta edio. Em particular, temos
um grande dbito com o Comit Tcnico de Reviso (Technical Review Committee) da Associao Americana de Segurana Biolgica
(American Biological Safety Association), por seus amveis comentrios e suas valiosas sugestes.
12
SEO I
Introduo
Laboratrios de microbiologia so, com freqncia, ambientes

singulares de trabalho que podem expor as pessoas prximas a
eles, ou que neles trabalham, a riscos de doenas infecciosas identificveis. As infeces contradas em um laboratrio tm sido
descritas por meio da histria da microbiologia. Os relatrios de
microbiologia publicados na virada do sculo descreveram casos
de tifo, clera, mormo, brucelose e ttano associados a laboratrios.1 Em 1941, Meyer e Eddie2 publicaram uma pesquisa de 74
casos de brucelose associados a laboratrio ocorridos nos Estados
Unidos e concluram que a manipulao de culturas ou espcies
e a inalao da poeira contendo a bactria Brucella so eminentemente perigosas para os trabalhadores de um laboratrio. Inmeros casos foram atribudos falta de cuidados ou a uma tcnica
de manuseio ruim de materiais infecciosos.
Em 1949, Sulkin e Pike3 publicaram a primeira de uma srie de
pesquisas sobre infeces associadas a laboratrios. Eles constataram 222 infeces virais, sendo 21 delas fatais. Em pelo menos
um tero dos casos, a provvel fonte de infeco estava associada
ao manuseio de animais e tecidos infectados. Acidentes conhecidos foram registrados em 27 (12%) dos casos relatados.
Em 1951, Sulkin e Pike4 publicaram a segunda de uma srie
de pesquisas baseada em um questionrio enviado a 5.000 laboratrios. Somente um tero dos 1.342 casos citados foi relatado
na literatura. A brucelose era a infeco mais freqentemente encontrada nos relatrios em relao s infeces contradas em um
13
Seo I
introduo
laboratrio e, juntamente com a tuberculose, a tularemia, o tifo e

a infeco estreptoccica, contribua para 72% de todas as infeces bacterianas e 31% das infeces causadas por outros agentes.
O ndice total de mortalidade era de 3%. Somente 16% de todas as
infeces relatadas estavam associados a um acidente documentado. A maioria desses estava relacionada ao uso de pipetas, seringas e agulhas.
Essa pesquisa foi atualizada em 1965,5 quando houve um
acrscimo de 641 novos casos ou de casos que no haviam sido
relatados anteriormente. Em 1976,6 houve uma nova atualizao,
perfazendo um total acumulativo de 3.921 casos. A brucelose, o
tifo, a tularemia, a tuberculose, a hepatite e a encefalite eqina
venezuelana eram as infeces mais comumente relatadas. Menos de 20% de todos os casos estavam associados a um acidente
conhecido. A exposio aos aerossis infecciosos era considerada
uma fonte plausvel, mas no confirmada, de infeco para mais
de 80% dos casos em que as pessoas infectadas haviam trabalhado
com o agente.
Em 1967,7 Hanson e colaboradores relataram 428 casos patentes de infeces de arbovrus associados a laboratrio. Em alguns
casos, a capacidade de um dado arbovrus de produzir uma doena humana foi primeiramente confirmada como o resultado de
uma infeco no-intencional da equipe laboratorial. No caso, os
aerossis infecciosos eram considerados a fonte mais comum de
infeco.
Em 1974, Skinholj8 publicou os resultados de uma pesquisa segundo a qual os funcionrios dos laboratrios clnicos dinamarqueses apresentavam uma relatada incidncia de hepatite (2,3
casos ao ano por 1.000 funcionrios) sete vezes maior que a populao em geral. De maneira semelhante, uma pesquisa de 1976,
realizada por Harrington e Shannon,9 indicou que os trabalhadores de laboratrios mdicos na Inglaterra apresentavam um risco
cinco vezes maior de adquirir uma tuberculose do que a populao
em geral. A hepatite B e a shigelose tambm eram conhecidas por
serem um contnuo risco ocupacional. Junto com a tuberculose,
essas eram as trs causas mais comuns de infeces associadas a
laboratrio relatadas na Gr-Bretanha.
14
Seo I
introduo
Embora esses relatrios sugerissem que os funcionrios de laboratrios corriam um elevado risco de se contaminar pelos agentes que eles prprios manipulavam, os ndices atuais de infeco
no se encontram disponveis. Porm, os estudos de Harrington
e Shannon e os de Skinholj10 indicam que as equipes laboratoriais
apresentavam maiores ndices de tuberculose, shigelose e de hepatite B do que a maioria da populao em geral.
Ao contrrio das ocorrncias documentadas de infeces contradas por funcionrios de laboratrios, esses laboratrios que
trabalham com agentes infecciosos no representam uma ameaa sociedade. Por exemplo, embora 109 casos de infeces associadas a laboratrios tenham sido registrados nos Centros de
Preveno e Controle de Doenas, de 1947 a 1973,11 nenhum caso
secundrio foi relatado nos membros da famlia ou em contatos
comunitrios. O Centro Nacional de Doena Animal relatou uma
experincia12 semelhante, sem nenhum caso secundrio ocorrido
nos contatos laboratoriais e no-laboratoriais em relao aos 18
casos de infeces associadas a laboratrio no perodo de 1960
a 1975. Por meio de um caso secundrio da doena de Marburg,
contrado pela esposa de um paciente de caso primrio, concluiuse que a infeco havia sido sexualmente transmitida dois meses
aps o marido ter recebido alta do hospital.13 Trs casos secundrios de varola foram relatados em dois surtos associados a laboratrio, na Inglaterra, em 197314 e 1978.15 Relatos anteriores
de seis casos de febre Q entre os funcionrios de uma lavanderia
comercial que lavava os uniformes e as roupas de um laboratrio
que manipulava o agente,16 um caso de uma pessoa que visitava o
laboratrio17 e dois casos de febre Q em contatos domiciliares de
um rickettsiologista18 tambm foram constatados. Existe o relato de um caso de transmisso do vrus B de um macaco para um
tratador de animais infectados e deste para sua esposa, aparentemente provocado pelo contato do vrus com a pele lesionada do
indivduo.19 Esses casos so representativos da natureza espordica e da pouca freqncia das infeces na comunidade de trabalhadores de laboratrio que lidam com agentes infecciosos.
Na reviso de 1979,20 Pike chegou concluso de que o conhecimento, as tcnicas e o equipamento para a preveno das
infeces laboratoriais j estavam disponveis. Nos Estados Uni15
Seo I
introduo
dos, porm, nenhum cdigo de prtica, padres, diretrizes ou outras publicaes proporcionaram descries detalhadas das tcnicas, do equipamento e de outras consideraes ou recomendaes
para maior esfera de ao das atividades laboratoriais conduzidas
com uma variedade de agentes infecciosos exticos e nativos. O
folheto Classificao dos Agentes Etiolgicos Baseando-se no Grau de
Risco21 serviu como uma referncia geral para vrias atividades laboratoriais que utilizam agentes infecciosos. Nesse folheto, o conceito sobre a classificao dos agentes infecciosos e das atividades
laboratoriais em quatro nveis ou classes serviu como um formato
bsico para as edies anteriores do Biossegurana em Laboratrios
Biomdicos e de Microbiologia (BLBM). Esta quarta edio do BLBM
continua a descrever especificamente as combinaes de prticas
microbiolgicas, instalaes laboratoriais, equipamento de segurana e recomendaes sobre suas utilizaes nas quatro categorias ou nos quatro nveis de biossegurana de operao laboratorial com agentes infecciosos que afetam homens.
As descries dos nveis de biossegurana de 1-4 paralelas
quelas contidas nas Diretrizes do NIH para Pesquisa Envolvendo
o DNA Recombinante22, 23 esto de acordo com os critrios gerais
originalmente usados para a designao dos agentes infecciosos
para as classes de 1-4 na Classificao dos Agentes Etiolgicos Baseando-se no Grau de Risco.24 Quatro nveis de biossegurana tambm so determinados para as atividades de doenas infecciosas
utilizando pequenos animais de laboratrio. As recomendaes
para os nveis de biossegurana para agentes especficos so feitas
com base no risco potencial do agente, da funo ou da atividade
do laboratrio.
Desde o incio dos anos 80, os laboratrios aplicam esses fundamentos em atividades associadas com manipulaes envolvendo o vrus da imunodeficincia humana (HIV). Mesmo antes de o
HIV ter sido identificado como o agente causador da sndrome da
imunodeficincia adquirida (AIDS), os princpios que regulam a
manipulao de um patgeno presente no sangue j eram considerados adequados para um trabalho laboratorial seguro. Normas
tambm foram publicadas para os trabalhadores da rea de sade sob o ttulo de Precaues Universais.25 De fato, as Precaues
Universais e esta publicao tornaram-se a base do manuseio se16
Seo I
introduo
guro de sangue e de fluidos corporais, como descrito na recente

publicao da OSHA, intitulada Padro de Patgenos Sangneos.26
No final dos anos 80, havia uma grande preocupao com o
lixo mdico-hospitalar, o que levou publicao do Ato de Rastreamento de Lixo Hospitalar, de 1988.27 Os princpios estabelecidos
nos volumes anteriores do BLBM, para o manuseio de dejetos potencialmente infecciosos como um risco ocupacional, foi reforado pela Pesquisa do Conselho Nacional intitulada Biossegurana
em Laboratrios: Prticas Prudentes para o Manuseio e Remoo de
Materiais Infecciosos.28
No momento em que esta publicao estava sendo editada,
houve uma preocupao crescente em relao ao reaparecimento do M. tuberculosis, segurana dos trabalhadores de laboratrios e aos equipamentos da rea de sade. Os princpios descritos
no BLBM que tentam assegurar as prticas, os procedimentos e
as instalaes de segurana na sade so aplicveis ao controle
deste patgeno areo, incluindo suas cepas resistentes a inmeras
drogas (multidrogas) resistentes.29, 30 As tecnologias com DNA recombinante esto sendo aplicadas rotineiramente em laboratrios
para modificar a composio gentica de vrios microorganismos.
Uma avaliao completa de riscos deve ser conduzida quando nos
referimos a essas atividades e a seus resultados desconhecidos.
A experincia tem demonstrado a importncia das precaues
tomadas com as prticas, os procedimentos e as instalaes dos
nveis de biossegurana de 1-4 descritas para as manipulaes de
agentes etiolgicos em montagem de laboratrios e dependncias para animais. Embora no exista nenhum tipo de relatrio
nacional que descreva as infeces associadas a laboratrio, casos
curiosos sugerem que uma rgida adeso a essas normas contribui
para um meio de trabalho mais seguro e saudvel para a equipe
do laboratrio, seus colaboradores e a comunidade ao redor. Para
reduzir ainda mais o potencial de risco de infeces associadas a
laboratrios, as normas apresentadas aqui devem ser consideradas como uma orientao mnima para conteno das mesmas. As
normas devem ser adaptadas para cada laboratrio em particular
e podem ser utilizadas juntamente com outras informaes cientficas disponveis.
17
SEO II
Princpios de
Biossegurana
O termo conteno usado para descrever os mtodos de segurana utilizados na manipulao de materiais infecciosos em um
meio laboratorial onde esto sendo manejados ou mantidos. O
objetivo da conteno reduzir ou eliminar a exposio da equipe
de um laboratrio, de outras pessoas e do meio ambiente em geral
aos agentes potencialmente perigosos.
A conteno primria, a proteo da equipe do laboratrio e
do meio de trabalho contra a exposio aos agentes infecciosos,
proporcionada por uma boa tcnica de microbiologia e pelo uso
de um equipamento de segurana adequado. O uso de vacinas
pode fornecer um elevado nvel de proteo pessoal. J a conteno secundria, a proteo do meio ambiente externo ao laboratrio contra a exposio aos materiais infecciosos, proporcionada
pela combinao de um projeto das instalaes e das prticas operacionais. Dessa forma, os trs elementos de conteno incluem
a prtica e a tcnica laboratorial, o equipamento de segurana e
o projeto da instalao. A avaliao do risco do trabalho a ser realizado com um agente especfico determinar a combinao adequada desses trs elementos.
Prtica e Tcnica Laboratorial: O elemento de conteno mais importante a adeso rgida s prticas e s tcnicas padro de microbiologia. As pessoas que trabalham com agentes infecciosos ou com materiais potencialmente contaminados devem
se conscientizar dos riscos potenciais, devem ser treinadas e estar aptas a exercer as tcnicas e prticas necessrias para o manuseio seguro dos materiais. Cabe ao diretor ou pessoa responsvel
19
Seo II
princpios de biossegurana
pelo laboratrio a funo de fornecer ou elaborar um treinamento

adequado para os funcionrios.
Cada laboratrio dever desenvolver ou adotar um manual de
biossegurana ou de operaes que identifique os riscos que podem ser encontrados e que especifique tambm as prticas e os
procedimentos especficos para minimizar ou eliminar as exposies aos perigos. Os funcionrios devem receber informaes sobre os riscos especiais, devem ler e seguir todas as prticas e os
procedimentos solicitados. Um cientista treinado e com grande
conhecimento das tcnicas laboratoriais apropriadas, dos procedimentos de segurana e dos perigos associados ao manuseio de
agentes infecciosos deve ser o responsvel pela conduo do trabalho envolvendo quaisquer agentes ou materiais infecciosos.
Quando as prticas laboratoriais padro no forem suficientes
para controlar os perigos associados a um agente ou a um procedimento laboratorial em particular, medidas adicionais podero ser
necessrias. O diretor do laboratrio ser o responsvel pela seleo das prticas adicionais de segurana, que devem estar relacionadas aos riscos associados aos agentes ou aos procedimentos.
A equipe, as prticas de segurana e as tcnicas laboratoriais
devero ser complementadas com um projeto apropriado das instalaes e das caractersticas da arquitetura, do equipamento de
segurana e das prticas de gerenciamento.
Equipamento de Segurana (Barreiras Primrias): O
equipamento de segurana inclui as cabines de segurana biolgica (CSB), os recipientes adequados e outros controles da engenharia de segurana projetados para remover ou minimizar exposies aos materiais biolgicos perigosos. A CSB o dispositivo
principal utilizado para proporcionar a conteno de borrifos ou
aerossis infecciosos provocados por inmeros procedimentos microbiolgicos. Trs tipos de cabines de segurana biolgica (classes
I, II e III) usados em laboratrios de microbiologia esto descritos
e ilustrados no apndice A. As cabines de segurana biolgica classes I e II, que possuem a frente aberta, so barreiras primrias que
oferecem nveis significativos de proteo para a equipe do laboratrio e para o meio ambiente quando utilizados com boas tcnicas
microbiolgicas. A cabine de segurana biolgica classe II tambm
20
Seo II
fornece uma proteo contra a contaminao externa de materiais

(por exemplo, cultura de clulas, estoque microbiolgico) que sero manipulados dentro das cabines. A cabine de segurana biolgica classe III hermtica e impermevel aos gases proporciona o
mais alto nvel de proteo aos funcionrios e ao meio ambiente.
Um outro exemplo de barreira primria o copo de segurana da centrfuga, um recipiente conectado centrfuga projetado
para evitar que aerossis sejam liberados durante uma centrifugao. Para minimizarmos esse perigo, controles de conteno como
as cabines de segurana biolgica ou os copos da centrfuga devero ser utilizados na manipulao de agentes infecciosos que possam ser transmitidos com a exposio aos aerossis.
O equipamento de segurana tambm pode incluir itens para a
proteo pessoal, como luvas, aventais, gorros, proteo para sapatos, botas, respiradores, escudo ou protetor facial, mscaras faciais ou culos de proteo. O equipamento de proteo pessoal
freqentemente usado em combinao com as cabines de segurana biolgica e outros dispositivos que faam a conteno dos
agentes, dos animais ou dos materiais que esto sendo manipulados. Em alguns casos nos quais torna-se impossvel trabalhar em
cabines de segurana biolgica, o equipamento de segurana pessoal deve formar a barreira primria entre os trabalhadores e os
materiais infecciosos. Os exemplos incluem certos estudos e necropsias de animais, atividades de produo do agente em grande
escala e atividades relacionadas manuteno, aos servios ou ao
suporte de instalao do laboratrio.
Projeto e Construo das Instalaes (Barreiras Secundrias): O planejamento e a construo das instalaes contribuem para a proteo da equipe do laboratrio, proporcionando
uma barreira de proteo para as pessoas que se encontram fora
do laboratrio e para as pessoas ou os animais da comunidade
contra agentes infecciosos que podem ser liberados acidentalmente pelo laboratrio. A gerncia do laboratrio deve zelar para que
as instalaes estejam de acordo com o funcionamento do mesmo
e com o nvel de biossegurana recomendado para os agentes que
forem ali manipulados.
21
Seo II
As barreiras secundrias recomendadas dependero do risco

de transmisso dos agentes especficos. Por exemplo, o risco das
exposies para grande parte dos trabalhos laboratoriais em dependncias de nveis de biossegurana 1 e 2 ser o contato direto com os agentes ou as exposies inadvertidas por intermdio
de um meio de trabalho contaminado. As barreiras secundrias
nos laboratrios podem incluir o isolamento da rea de trabalho
para o acesso pblico, a disponibilidade de uma dependncia para
descontaminao (por exemplo, uma autoclave) e as dependncias
para lavagem das mos.
Quando o risco de contaminao por meio de exposio aos
aerossis infecciosos estiver presente, nveis mais elevados de
conteno primria e barreiras de proteo secundrias podero
ser necessrios para evitar que agentes infecciosos escapem para
o meio ambiente. Essas caractersticas do projeto incluem sistemas de ventilao especializados em assegurar o fluxo de ar unidirecionado, sistemas de tratamento de ar para descontaminao
ou remoo do ar liberado, zonas de acesso controlado, cmaras
pressurizadas, entradas de laboratrio separadas ou mdulos para
isolamento do laboratrio. Os engenheiros responsveis pelo projeto devem levar em considerao as recomendaes especficas
para ventilao, como as encontradas no Manual de Aplicaes para
Calefao, Ventilao e Refrigerao (Applications Handbook for Heating, Ventilation and Air-Conditioning HVAC), publicado pela Sociedade Americana de Engenheiros de Calefao, Refrigerao e
Condicionamento de Ar (American Society of Heating, Refrigerating and Air-Conditioning Engineers ASHRAE).1
Nveis de Biossegurana: Os quatro nveis de biossegurana (NB) esto descritos na seo III e consistem em combinaes
de prticas e tcnicas de laboratrio, equipamentos de segurana
e instalaes do laboratrio. Cada combinao especificamente
adequada para operaes realizadas, vias de transmisses documentadas ou suspeitas de agentes infecciosos e funcionamento ou
atividade do laboratrio.
Os nveis de biossegurana recomendados para os organismos
da seo VII (Resumo dos Agentes) representam as condies nas
quais o agente pode ser manuseado com segurana. O diretor do
22
Seo II
laboratrio o responsvel pela avaliao dos riscos e pela aplicao adequada dos nveis de biossegurana recomendados. Geralmente, o trabalho com agentes desconhecidos deve ser conduzido
em um nvel de biossegurana recomendado pela seo VII. Prticas mais (ou menos) rgidas podero ser adotadas quando temos
uma informao especfica disponvel que possa sugerir a virulncia, a patogenicidade, os padres de resistncia aos antibiticos
e s vacinas e a disponibilidade de tratamento ou outros fatores
significativamente alterados.
Nvel de Biossegurana 1: As prticas, os equipamentos
de segurana e o projeto das instalaes so apropriados para o
treinamento educacional secundrio ou para o treinamento de
tcnicos e de professores de tcnicas laboratoriais. Esse conjunto
tambm utilizado em outros laboratrios onde realizado o trabalho com cepas definidas e caracterizadas de microorganismos
viveis, conhecidos por no causarem doenas em homens adultos e sadios. O Bacillus subtilis, o Naegleria gruberi, o vrus da hepatite canina infecciosa e os organismos livres sob as Diretrizes
do NIH de DNA Recombinantes so exemplos de microorganismos que preenchem todos os requisitos descritos. Muitos agentes
que geralmente no esto associados a processos patolgicos em
homens so, entretanto, patgenos oportunos que podem causar
uma infeco em jovens, idosos e indivduos imunosupressivos ou
imunodeprimidos. As cepas de vacina que tenham mltiplas passagens in vivo no devero ser consideradas no-virulentas simplesmente por serem cepas de vacinas.
O nvel de biossegurana 1 representa um nvel bsico de conteno que se baseia nas prticas padro de microbiologia sem
uma indicao de barreiras primrias ou secundrias, com exceo de uma pia para a higienizao das mos.
Nvel de Biossegurana 2: As prticas, os equipamentos, a
planta e a construo das instalaes so aplicveis aos laboratrios clnicos, de diagnstico, laboratrios-escola e outros laboratrios onde o trabalho realizado com um maior espectro de agentes nativos de risco moderado, presentes na comunidade e que
estejam associados a uma patologia humana de gravidade varivel. Com boas tcnicas de microbiologia, esses agentes podem ser
23
Seo II
usados de maneira segura em atividades conduzidas sobre uma

bancada aberta, uma vez que o potencial para a produo de borrifos e aerossis baixo. O vrus da hepatite B, o HIV, a salmonela
e o Toxoplasma spp. so exemplos de microorganismos designados
para esse nvel de conteno. O nvel de biossegurana 2 adequado para qualquer trabalho que envolva sangue humano, lquidos corporais, tecidos ou linhas de clulas humanas primrias em
que a presena de um agente infeccioso pode ser desconhecida.
Os laboratoristas que trabalham com materiais humanos devem
consultar o livro Padro de Patgenos Transmitidos pelo Sangue, da
OSHA (OSHA Bloodborne Pathogen Standard),2 para as precaues
especficas necessrias.
Os perigos primrios em relao aos funcionrios que trabalham com esses agentes esto relacionados com acidentes percutneos das exposies da membrana mucosa ou com a ingesto
de materiais infecciosos. Deve-se tomar um extremo cuidado com
agulhas contaminadas ou com instrumentos cortantes. Embora os
organismos rotineiramente manipulados em um nvel de biossegurana 2 no sejam transmitidos por aerossis, os procedimentos envolvendo um alto potencial para a produo de salpicos ou
aerossis que possam aumentar o risco de exposio desses funcionrios devem ser conduzidos com um equipamento de conteno primria ou com dispositivos como a CSB ou os copos de segurana da centrfuga. Outras barreiras primrias, como os escudos
para borrifos, as protees faciais, os aventais e as luvas, devem
ser utilizadas de maneira adequada.
As barreiras secundrias, como pias para higienizao das mos
e instalaes para descontaminao de lixo, devem existir com o
objetivo de reduzir a contaminao potencial do meio ambiente.
Nvel de Biossegurana 3: As prticas, os equipamentos de
segurana, o planejamento e a construo das dependncias so
aplicveis para laboratrios clnicos, de diagnsticos, laboratriosescola, de pesquisa ou de produes. Nesses locais, realiza-se o trabalho com agentes nativos ou exticos que possuam um potencial
de transmisso via respiratria e que podem causar infeces srias e potencialmente fatais. O Mycobacterium tuberculosis, o vrus
da encefalite de St. Louis e a Coxiella burnetii so exemplos de mi24
Seo II
croorganismos determinados para esse nvel. Os riscos primrios

causados aos trabalhadores que lidam com esses agentes incluem a
auto-inoculao, a ingesto e a exposio aos aerossis infecciosos.
No nvel de biossegurana 3, enfatizamos mais as barreiras primrias e secundrias para protegermos os funcionrios de reas
contguas, a comunidade e o meio ambiente contra a exposio
aos aerossis potencialmente infecciosos. Por exemplo, todas as
manipulaes laboratoriais devero ser realizadas em uma cabine de segurana biolgica (CSB) ou em um outro equipamento de
conteno, como uma cmara hermtica de gerao de aerossis.
As barreiras secundrias para esse nvel incluem o acesso controlado ao laboratrio e sistemas de ventilao que minimizem a liberao de aerossis infecciosos do laboratrio.
Nvel de Biossegurana 4: As prticas, os equipamentos de
segurana, o planejamento e a construo das dependncias so
aplicveis para trabalhos que envolvam agentes exticos perigosos,
que representam um alto risco por provocarem doenas fatais em
indivduos. Esses agentes podem ser transmitidos via aerossis e,
at o momento, no h nenhuma vacina ou terapia disponvel. Os
agentes que possuem uma relao antignica prxima ou idntica
aos dos agentes do nvel de biossegurana 4 tambm devero ser
manuseados nesse nvel. Quando possumos dados suficientes, o
trabalho com os agentes deve continuar neste nvel ou em um nvel inferior. Os vrus, como os de Marburg ou da febre hemorrgica Crimia-Congo, so manipulados no nvel de biossegurana 4.
Os riscos primrios aos trabalhadores que manuseiam agentes
do nvel de biossegurana 4 incluem a exposio respiratria aos
aerossis infecciosos, a exposio da membrana mucosa e/ou da
pele lesionada s gotculas infecciosas e a auto-inoculao. Todas
as manipulaes de materiais de diagnstico potencialmente infecciosos, substncias isoladas e animais naturalmente ou experimentalmente infectados apresentam um alto risco de exposio e
infeco aos funcionrios de laboratrio, comunidade e ao meio
ambiente.
O completo isolamento dos trabalhadores de laboratrio em
relao aos materiais infecciosos aerossolizados realizado primariamente em cabines de segurana biolgica classe III ou com
25
Seo II
um macaco individual suprido com presso de ar positivo. A instalao do nvel de biossegurana 4 geralmente construda em
um prdio separado ou em uma zona completamente isolada com
uma complexa e especializada ventilao e sistemas de gerenciamento de lixo que evitem uma liberao de agentes viveis no
meio ambiente.
O diretor do laboratrio primariamente e especificamente
responsvel pela operao segura do laboratrio. O conhecimento
e o julgamento dele so crticos para a avaliao dos riscos e para
a aplicao adequada destas recomendaes. O nvel de biossegurana recomendado representa as condies sob as quais o agente
pode ser manipulado com segurana. As caractersticas especiais
dos agentes utilizados, o treinamento, a experincia dos empregados e a natureza da funo do laboratrio podero posteriormente influenciar o diretor quanto aplicao destas recomendaes.
Dependncias para Animais: Os quatro nveis de biossegurana tambm so descritos para as atividades que envolvem o
trabalho de doenas infecciosas com animais experimentais. Essas
quatro combinaes de prticas, equipamentos de segurana e de
instalaes so denominadas de nveis de biossegurana animal 1,
2, 3 e 4 e proporcionam nveis crescentes de proteo aos funcionrios e ao meio ambiente.
Laboratrios Clnicos: Os laboratrios clnicos, especialmente aqueles situados em clnicas e hospitais, recebem amostras
clnicas requisitando uma grande variedade de diagnsticos e servios de apoio clnico. Geralmente, a natureza infecciosa do material clnico desconhecida e as amostras so freqentemente
submetidas a uma ampla solicitao de exames microbiolgicos
em relao aos mltiplos agentes (por exemplo, o escarro pode
ser submetido a uma cultura de rotina, cido resistente e cultura
fngica. responsabilidade do diretor do laboratrio estabelecer
procedimentos padro no laboratrio que, de fato, direcionem a
questo do perigo da infeco imposto pelas amostras clnicas.
Com exceo de circunstncias extraordinrias (por exemplo,
suspeita de uma febre hemorrgica), o processamento inicial de
uma amostra clnica e a identificao sorolgica de substncias
26
Seo II
isoladas podero ser realizados de forma segura em um nvel de

biossegurana 2, o nvel recomendado para o trabalho com patgeno do sangue, como o vrus da hepatite B e o HIV. Os elementos
de conteno descritos no nvel de biossegurana 2 devero estar
de acordo com o padro da OSHA, Exposio Ocupacional aos Patgenos Transmitidos atravs do Sangue, 3, 4 publicado pela Administrao de Sade e Segurana Ocupacional. Isso requer o uso de
precaues especficas para todas as amostras clnicas de sangue
ou outros materiais potencialmente infecciosos (Precaues ou
Padres Universais).5 Alm disso, outras recomendaes especficas para laboratrios clnicos podem ser obtidas com o Comit
Nacional de Padres para Laboratrios Clnicos (National Committee for Clinical Laboratory Standard).6
As recomendaes para o nvel de biossegurana 2 e os requerimentos da OSHA enfocam a preveno exposio por contato
da pele e das mucosas com materiais clnicos. Barreiras primrias,
como as cabines de segurana biolgica (classes I e II), devem ser
usadas em procedimentos que causam gotejamento, pulverizao
e salpicos de gotas. As cabines de segurana biolgica tambm devem ser usadas no incio da manipulao de espcimes clnicos,
cuja natureza do teste o requerer, ou em presena de um agente que reconhecidamente transmita infeces por aerossis (por
exemplo, M. tuberculosis) ou quando o uso de uma cabine de segurana biolgica (classe II) for indicado para proteger a integridade
do espcime.
A segregao das funes de um laboratrio clnico e o acesso limitado ou restrito a essas reas so de responsabilidade do
diretor da instituio. responsabilidade tambm do diretor estabelecer um padro e procedimentos por escrito que direcionem
os riscos potenciais e os cuidados ou as precaues necessrias a
serem implantadas.
Importao e Expedio Interestadual de Certos Materiais Biomdicos: A importao de vetores e agentes etiolgicos de patologias humanas est sujeita aos regulamentos da Public
Health Service Foreign Quarentine. Os regulamentos do Servio de
Sade Pblica e do Departamento de Transportes especificam os
requisitos necessrios para a embalagem, a rotulagem e o embar27
Seo II
que de agentes etiolgicos e amostras para diagnsticos expedidos para o comrcio interestadual (veja o apndice C).
O Departamento de Agricultura dos EUA regulamenta a importao e a expedio interestadual de patgenos animais e probe a importao, a posse ou o uso de certos agentes patolgicos de
animais exticos que possam ser uma ameaa para aves e criaes
em geral por provocarem srias doenas (veja o apndice D).
28
Seo III
nveis de biossegurana
laboratorial
Os principais requisitos exigidos para os quatro nveis de biossegurana em atividades que envolvam microorganismos infecciosos e animais de laboratrio esto resumidos na tabela 1 desta seo e na tabela 2 da seo IV. Os nveis so designados em ordem
crescente, pelo grau de proteo proporcionado ao pessoal do laboratrio, ao meio ambiente e comunidade.
Nvel de Biossegurana (NB-1)
O nvel de biossegurana 1 adequado ao trabalho que envolva agentes bem caracterizados e conhecidos por no provocarem
doena em seres humanos e que possuam mnimo risco ao pessoal
do laboratrio e ao meio ambiente. O laboratrio no est separado das demais dependncias do edifcio. O trabalho conduzido,
em geral, em bancada, com adoo das boas prticas laboratoriais
(BPL). Equipamentos especficos de proteo ou caractersticas especiais de construo no so geralmente usados ou exigidos. O
pessoal do laboratrio dever ter treinamento especfico nos procedimentos realizados no laboratrio e dever ser supervisionado
por um cientista com treinamento em microbiologia geral ou cincia correlata.
Os seguintes padres e prticas especiais, os equipamentos de
segurana e as instalaes devero ser aplicados aos agentes designados ao nvel de biossegurana 1:
A. Prticas Padro em Microbiologia
1. O acesso ao laboratrio dever ser limitado ou restrito de
acordo com a definio do diretor do laboratrio quando
estiverem sendo realizados experimentos ou trabalhos
com culturas e amostras.
29
Seo III
nveis de biossegurana laboratorial
2. As pessoas devero lavar as mos aps o manuseio de

materiais viveis, aps a remoo das luvas e antes de
sarem do laboratrio.
3. No permitido comer, beber, fumar, manusear lentes
de contato, aplicar cosmticos ou armazenar alimentos
para consumo nas reas de trabalho. As pessoas que
usam lentes de contato em laboratrios devero usar
tambm culos de proteo ou protetores faciais. Os alimentos devero ser guardados fora das reas de trabalho
em armrios ou geladeiras especficos para tal fim.
4. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados
dispositivos mecnicos.
5. Devem ser institudas normas para o manuseio de agulhas.
6. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.
7. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas,
pelo menos, uma vez ao dia e sempre depois de qualquer
derramamento de material vivel.
8. Todas as culturas, colnias e outros resduos devero
ser descontaminados antes de serem descartados com
um mtodo de descontaminao aprovado, como, por
exemplo, esterilizao por calor mido (autoclave). Os
materiais que forem ser descontaminados fora do laboratrio devero ser colocados em recipientes inquebrveis, prova de vazamentos e hermeticamente fechados
para serem transportados ao local desejado. Os materiais
que forem enviados para descontaminaco fora da instituio devero tambm ser embalados de acordo com os
regulamentos locais, estaduais e federais, antes de serem
removidos das dependncias do laboratrio.
9. O smbolo de Risco Biolgico dever ser colocado na
entrada do laboratrio em qualquer momento em que
o agente infeccioso estiver presente no local. Este sinal
de alerta dever indicar o(s) agente(s) manipulado(s) e o
nome e o nmero do telefone do pesquisador.
10. Deve ser providenciado um programa rotineiro de controle de roedores e insetos (veja o apndice G).
30
Seo III
B. Prticas Especiais
Nenhuma.
C. Equipamentos de Segurana (Barreiras Primrias)
1. Os equipamentos especiais de conteno, tais como as
cabines de segurana biolgica, no so geralmente exigidos para manipulaes de agentes de classe de risco 1.
2. recomendado o uso de jalecos, aventais ou uniformes
prprios, para evitar contaminao ou sujeira de suas
roupas normais.
3. Recomenda-se o uso de luvas para os casos de rachaduras ou
ferimentos na pele das mos. Algumas alternativas, como
o uso de luvas de ltex com talco, devero ser avaliadas.
4. culos protetores devero ser usados na execuo de
procedimentos que produzam borrifos de microorganismos ou de materiais perigosos.
D. Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. Os laboratrios devero possuir portas para o controle
do acesso.
2. Cada laboratrio dever conter uma pia para lavagem
das mos.
3. O laboratrio deve ser projetado de modo a permitir fcil
limpeza. Carpetes e tapetes no so apropriados para laboratrios.
4. recomendvel que a superfcie das bancadas seja impermevel gua e resistente ao calor moderado e aos
solventes orgnicos, cidos, lcalis e qumicos usados
para a descontaminao da superfcie de trabalho e do
equipamento.
5. Os mveis do laboratrio devero ser capazes de suportar cargas e usos previstos. Os espaos entre bancadas,
cabines e equipamentos devero ser suficientes de modo
a permitir fcil acesso para limpeza.
6. Se o laboratrio possuir janelas que se abram para o exterior, estas devero conter telas de proteo contra insetos.
31
Seo III
Nveis de Biossegurana 2 (NB-2)

O nvel de biossegurana 2 semelhante ao nvel de biossegurana 1 e adequado ao trabalho que envolva agentes de risco
moderado para as pessoas e o meio ambiente. Difere do NB-1 nos
seguintes aspectos: o pessoal de laboratrio dever ter um treinamento especfico no manejo de agentes patognicos e devem ser
supervisionados por cientistas competentes; o acesso ao laboratrio deve ser limitado durante os procedimentos operacionais; precaues extremas sero tomadas em relao a objetos cortantes
infectados; e determinados procedimentos nos quais exista a possibilidade de formao de aerossis e borrifos infecciosos devem
ser conduzidos em cabines de segurana biolgica ou em outros
equipamentos de conteno fsica.
Os seguintes padres e as prticas especiais, os equipamentos
de segurana e as instalaes so aplicveis aos agentes designados para o nvel de biossegurana 2:
A. Prticas Padro de Microbiologia
estiver sendo realizado o experimento.
2. As pessoas devem lavar as mos aps a manipulao de
materiais viveis, aps a remoo das luvas e antes de
sarem do laboratrio.
3. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos nas reas de trabalho. Os alimentos devero ser guardados fora das reas de trabalho
em armrios ou geladeiras especficas para tal fim.
4. proibida a pipetagem com a boca; devem ser utilizados
5. Devem ser institudas normas para o manuseio de agulhas.
6. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de minimizar a criao de borrifos ou aerossis.
7. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas
com desinfetantes que sejam eficazes contra os agentes
manipulados, ao final do trabalho ou no final do dia e
aps qualquer vazamento ou borrifada de material vivel.
32
Seo III
8. Todas as culturas, colnias e outros resduos devero ser

descontaminados antes de serem descartados com um
mtodo de descontaminao aprovado, como, por exemplo, esterilizao por calor mido (autoclave). Os materiais descontaminados fora do prprio laboratrio devero ser colocados em recipientes inquebrveis, prova
de vazamentos e hermeticamente fechados para serem
transportados ao local desejado.
9. Deve ser providenciado um programa rotineiro de controle contra roedores e insetos (veja o apndice G).
acordo com a definio do diretor, quando o trabalho com
agentes infecciosos estiver sendo realizado. Em geral,
pessoas susceptveis s infeces ou pessoas que quando
infectadas possam apresentar srias complicaes no
sero permitidas no laboratrio ou nas salas dos animais.
Por exemplo, pessoas que estejam imunocomprometidas
ou imunodeprimidas podero estar correndo um srio
risco de se contaminarem. Cabe ao diretor a deciso final
quanto avaliao de cada circunstncia e a determinao de quem deve entrar ou trabalhar no laboratrio ou
na sala de animais.
2. O diretor do laboratrio dever estabelecer normas e
procedimentos com ampla informao a todos que trabalharem no laboratrio sobre o potencial de risco associado ao trabalho, bem como sobre os requisitos especficos
(por exemplo, imunizao) para entrada em laboratrio.
3. O smbolo de Risco Biolgico dever ser colocado na
entrada do laboratrio onde agentes etiolgicos estiverem sendo utilizados. Este sinal de alerta dever
conter informaes como o(s) nome(s) do(s) agente(s)
manipulado(s), o nvel de biossegurana, as imunizaes
necessrias, o nome e o nmero do telefone do pesquisador, o tipo de equipamento de proteo individual que
dever ser usado no laboratrio e os procedimentos necessrios para sair do laboratrio.
33
Seo III
4. O pessoal do laboratrio deve estar apropriadamente

imunizado ou examinado quanto aos agentes manipulados ou potencialmente presentes no laboratrio (por
exemplo, vacina contra a hepatite B ou teste cutneo
para a tuberculose).
5. Quando apropriado, dependendo do(s) agente(s)
manipulado(s), para referncia futura, devem ser mantidas amostras sorolgicas da equipe do laboratrio e de
outras pessoas possivelmente expostas aos riscos. Amostras sorolgicas adicionais devem ser colhidas periodicamente, dependendo dos agentes manipulados ou da
funo das instalaes laboratoriais.
6. Os procedimentos de biossegurana devem ser incorporados aos procedimentos padro operacionais ou a
um manual de biossegurana especfico do laboratrio,
adotado ou preparado pelo diretor do laboratrio. Todo
pessoal deve ser orientado sobre os riscos e devem ler e
seguir as instrues sobre as prticas e os procedimentos
requeridos.
7. O diretor do laboratrio dever assegurar que o laboratrio e a equipe de apoio recebam um treinamento apropriado sobre os riscos potenciais associados ao trabalho
desenvolvido, as precaues necessrias para preveno
de exposio e os procedimentos para avaliao das exposies. A equipe de funcionrios dever receber cursos
anuais de atualizao ou treinamento adicional, quando
necessrios e tambm no caso de mudanas de normas
ou procedimentos.
8. Deve-se sempre tomar uma enorme precauo em relao a qualquer objeto cortante, incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos cortantes devem ficar restritos ao laboratrio
e ser usados somente quando no houver outra alternativa para inoculao parenteral, flebotomia ou aspirao de fluidos de animais de laboratrio e de garrafas
com diafragma. Recipientes plsticos devem ser substitudos por recipientes de vidro sempre que possvel.
34
Seo III
b. Devem ser usadas somente seringas com agulha fixa

ou agulha e seringa em uma unidade nica descartvel usada para injeo ou aspirao de materiais infecciosos. As agulhas descartveis usadas no devero ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas
das seringas ou manipuladas antes de desprezadas.
Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente colocadas em recipiente resistente a perfuraes localizado convenientemente e utilizado para recolhimento de objetos cortantes desprezados. Objetos
cortantes no-descartveis devem ser colocados em
um recipiente cuja parede seja bem resistente para o
transporte at a rea para descontaminao, de preferncia por meio de uma autoclave.
c. As seringas que possuam um envoltrio para a agulha ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de
segurana devero ser utilizadas quando necessrio.
d. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com a mo, devem ser removidos por outros meios, tais como vassoura e p de lixo, pinas
ou frceps. Os recipientes que contm agulhas, equipamentos cortantes e vidros quebrados contaminados devero passar por um processo de descontaminao antes de serem desprezados, de acordo com os
regulamentos locais, estaduais ou federais.
9. Culturas, tecidos e amostras de fluidos corpreos ou dejetos potencialmente infecciosos devem ser colocados
em um recipiente com uma tampa que evite o vazamento
durante a coleta, o manuseio, o processamento, o armazenamento, o transporte ou o embarque.
10. O equipamento laboratorial e as superfcies de trabalho
devero ser descontaminados rotineiramente com um
desinfetante eficaz, aps a concluso do trabalho, com
materiais infecciosos e especialmente aps borrifos e
derramamentos ou depois que outras contaminaes por
materiais infecciosos tenham ocorrido. O equipamento
contaminado dever ser descontaminado de acordo com
as normas locais, estaduais ou federais, antes de ser en35
Seo III
viado para conserto, manuteno ou acondicionamento

para transporte, de acordo com as normas locais, estaduais ou federais aplicveis, antes de ser removido do local.
11. Respingos e acidentes resultantes de uma exposio de
materiais infecciosos aos organismos devero ser imediatamente notificados ao diretor do laboratrio. A avaliao mdica, a vigilncia e o tratamento devero ser
providenciados. Registros do acidente e das providncias
adotadas devero ser mantidos por escrito.
12. proibida a admisso de animais que no estiverem relacionados ao trabalho em execuo no laboratrio.
1. Devem ser usadas cabines de segurana biolgica mantidas de maneira adequada, de preferncia de classe II, ou
outro equipamento de proteo individual adequado ou
dispositivos de conteno fsica sempre que:
a. Sejam realizados procedimentos com elevado potencial de criao de aerossis ou borrifos infecciosos,
como centrifugao, triturao, homogeneizao,
agitao vigorosa, misturas, ruptura por sonificao,
abertura de recipientes contendo materiais infecciosos em que a presso interna possa ser diferente da
presso ambiental, inoculao intranasal em animais
e em cultura de tecidos infectados de animais ou de
ovos embrionados.
b. Altas concentraes ou grandes volumes de agentes
infecciosos forem utilizados. Tais materiais s podero ser centrifugados fora das cabines de segurana
se forem utilizadas centrfugas de segurana e frascos lacrados. Estes s devero ser abertos no interior
de uma cabine de segurana biolgica.
2. Proteo para o rosto (mscaras de proteo, protetor
facial, culos de proteo ou outra proteo para respingos) deve ser usada para prevenir respingos ou sprays
proveniente de materiais infecciosos ou de outros materiais perigosos, quando for necessria a manipulao de
microrganismos fora das cabines de segurana biolgica.
36
Seo III
3. No interior do laboratrio, os freqentadores devero

utilizar roupas apropriadas, como jalecos, gorros ou uniformes de proteo. Antes de sair do laboratrio para as
reas externas (cantina, biblioteca, escritrio administrativo), a roupa protetora deve ser retirada e deixada no laboratrio ou encaminhada para a lavanderia da instituio. A equipe do laboratrio nunca deve lev-la para casa.
4. Devem ser usadas luvas quando houver um contato direto com materiais e superfcies potencialmente infecciosos ou equipamentos contaminados. O mais adequado
usar dois pares de luvas. Essas luvas devem ser desprezadas quando estiverem contaminadas, quando o trabalho com materiais infecciosos for concludo ou quando a
integridade das luvas estiver comprometida. Luvas descartveis no podero ser lavadas, reutilizadas ou usadas
para tocar superfcies limpas (teclado, telefones, etc.)
e no devem ser usadas fora do laboratrio. Alternativas
como luvas de ltex com talco devero estar disponveis.
As mos devero ser lavadas aps a remoo das luvas.
D. Instalaes Laboratoriais (Barreiras Secundrias)
1. exigido um sistema de portas com trancas em dependncias que abrigarem agentes restritos (como o definido
em 42 CFR 72.6).
2. Considere a construo de novos laboratrios longe de
reas pblicas.
3. Cada laboratrio dever conter uma pia para a lavagem
das mos. Recomendamos a construo de pias que funcionem automaticamente ou que sejam acionadas com o
p ou com o joelho.
4. O laboratrio dever ser projetado de modo a permitir
fcil limpeza e descontaminao. Carpetes e tapetes no
so apropriados para laboratrio.
5. As bancadas devero ser impermeveis gua e resistentes ao calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos,
lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies de trabalho e do equipamento.
37
Seo III
6. Os mveis do laboratrio devem suportar cargas e usos

previstos com espaamento suficiente entre bancadas, cabines e equipamentos, para permitir acesso fcil para limpeza. As cadeiras e outros mveis utilizados no trabalho
laboratorial devem ser cobertos com um material que no
seja tecido e que possa ser facilmente descontaminado.
7. Cabines de segurana biolgica devem ser instaladas, de
forma que a variao da entrada e da sada de ar da sala
no provoque alterao nos padres de conteno de seu
funcionamento. As cabines de segurana biolgica devem
estar localizadas longe de portas e janelas que possam
ser abertas, reas laboratoriais muito cheias e que possuam outros equipamentos potencialmente dilaceradores,
de forma que sejam mantidos os parmetros de fluxo de
ar nessas cabines de segurana biolgica.
8. Um lava-olhos deve estar disponvel.
9. A iluminao dever ser adequada para todas as atividades, evitando reflexos e luzes fortes e ofuscantes que
possam impedir a viso.
10. No existem exigncias em relao ventilao. Porm,
o planejamento de novas instalaes deve considerar
sistemas mecnicos de ventilao que proporcionem um
fluxo interno de ar sem que haja uma recirculao para
os espaos fora do laboratrio. Caso o laboratrio possua
janelas que se abram para o exterior, essas devero possuir telas para insetos.
Nvel de Biossegurana 3 (NB-3)
O nvel de biossegurana 3 aplicvel para laboratrios clnicos, de diagnstico, ensino e pesquisa ou de produo onde o trabalho com agentes exticos possa causar doenas srias ou potencialmente fatais, como resultado de exposio por inalao. A
equipe laboratorial deve possuir treinamento especfico no manejo de agentes patognicos e potencialmente letais, devendo ser
supervisionados por competentes cientistas que possuam vasta
experincia com os agentes.
Todos os procedimentos que envolverem a manipulao de
materiais infecciosos devem ser conduzidos dentro de cabines de
38
Seo III
segurana biolgica ou de outro dispositivo de conteno fsica.

Os manipuladores devem usar roupas e equipamentos de proteo individual.
Sabe-se, porm, que algumas instalaes existentes podem no
possuir todas as caractersticas recomendadas para um nvel de
biossegurana 3 (por exemplo, uma rea de acesso com duas portas, selamento das entradas de ar). Nessas circunstncias, um nvel
aceitvel de segurana para a conduo dos procedimentos de rotina (por exemplo, procedimentos para diagnsticos envolvendo a
reproduo de um agente para identificao, tipagem, teste de susceptibilidade, etc.) poder ser conseguido com instalaes do nvel
de biossegurana 2, garantindo-se que o ar liberado do laboratrio
seja jogado para fora da sala; a ventilao do laboratrio seja equilibrada para proporcionar um fluxo de ar direcionado para dentro
da sala; o acesso ao laboratrio seja restrito quando o trabalho
estiver sendo realizado; e as prticas padro de microbiologia, as
prticas especiais e o equipamento de segurana para o nvel de
biossegurana 3 sejam rigorosamente seguidas. A deciso de implementar essas modificaes das recomendaes do nvel de biossegurana 3 deve ser tomada somente pelo diretor do laboratrio.
Os seguintes padres e as prticas de segurana especiais, os
equipamentos e as instalaes se aplicam aos agentes enumerados
no nvel de biossegurana 3:
1. O acesso ao laboratrio deve ser limitado ou restrito de
experimentos estiverem sendo realizados.
2. As pessoas devem lavar as mos aps a manipulao de
materiais infecciosos, aps a remoo das luvas e antes
de sarem do laboratrio.
3. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos dentro da rea de trabalho. As
pessoas que usarem lentes de contato em laboratrios
devero tambm usar culos de proteo ou protetores
faciais. Os alimentos devem ser armazenados fora do
39
Seo III
4.
5.
6.
7.
8.
9.
ambiente de trabalho em armrios ou geladeiras utilizados somente para tal fim.

proibida a pipetagem com a boca e devem ser utilizados
Devem ser institudas normas para o manuseio de agulhas.
Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de minimizar a criao de aerossis.
As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas
pelo menos uma vez ao dia e depois de qualquer derramamento de material vivel.
Todas as culturas, colnias e outros resduos relacionados
devem ser descontaminados antes de serem descartados,
por meio de um mtodo de descontaminao aprovado,
como, por exemplo, a autoclavao. Os materiais descontaminados fora da rea prxima ao laboratrio devero
ser colocados dentro de um recipiente rgido, prova de
vazamento e hermeticamente fechado para ser transportado do laboratrio. O lixo infeccioso de laboratrios de
nveis de biossegurana 3 dever ser descontaminado antes de ser removido para locais fora do laboratrio.
Deve ser providenciado um programa rotineiro de controle de roedores e insetos (veja o apndice G).
1. As portas do laboratrio devem permanecer fechadas
quando experimentos estiverem sendo realizados.
2. O diretor do laboratrio dever controlar e limitar o acesso ao laboratrio. Somente as pessoas necessrias para
que o programa seja executado ou o pessoal de apoio devem ser admitidos no local. As pessoas que apresentarem risco aumentado de contaminao ou que possam
ter srias conseqncias, caso sejam contaminadas, no
sero permitidas dentro do laboratrio ou na sala de
animais. Por exemplo, pessoas imunocomprometidas ou
imunodeprimidas podem estar mais susceptveis a uma
contaminao. O diretor dever ser o responsvel final
pela avaliao de cada caso e pela determinao de quem
40
Seo III
3.
4.
5.
6.
7.
dever ou no entrar ou trabalhar dentro do laboratrio.

No permitida a entrada de menores no laboratrio.
O diretor do laboratrio dever estabelecer normas e
procedimentos por meio dos quais s sero admitidas no
laboratrio ou nas salas dos animais pessoas que j tiverem recebido informaes sobre o potencial de risco, que
atendam todos os requisitos para a entrada no mesmo
(por exemplo, imunizao) e que obedeam a todas as regras para entrada e sada no laboratrio.
Quando materiais infecciosos ou animais infectados estiverem presentes no laboratrio ou no mdulo de conteno, deve ser colocado em todas as portas de acesso
do laboratrio e das salas de animais um sinal de alerta
contendo o smbolo universal de risco biolgico e a identificao do agente, do nome do pesquisador principal ou
de outro responsvel, com endereo completo. O sinal de
alerta tambm dever indicar qualquer requisito especial
necessrio para a entrada no laboratrio, tais como a necessidade de imunizao, respiradores ou outras medidas
de proteo individual.
O pessoal do laboratrio deve ser apropriadamente imunizado ou examinado quanto aos agentes manipulados
ou potencialmente presentes no laboratrio (por exemplo, vacina para hepatite B ou teste cutneo para tuberculose). Exames peridicos tambm so recomendados.
Amostras sorolgicas de toda a equipe e das pessoas
expostas ao risco devero ser coletadas e armazenadas
adequadamente para futura referncia. Amostras sorolgicas adicionais podero ser periodicamente coletadas,
dependendo dos agentes manipulados ou do funcionamento do laboratrio.
Um manual de biossegurana especfico dever ser preparado e adotado pelo diretor do laboratrio e os procedimentos de biossegurana devem ser incorporados aos procedimentos padro operacionais. Todo pessoal deve ser
orientado sobre os riscos especiais, deve ler e seguir as instrues sobre as prticas e os procedimentos requeridos.
41
Seo III
8. A equipe do laboratrio e a equipe de apoio devero receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais
associados ao trabalho desenvolvido, os cuidados necessrios para evitar uma exposio perigosa ao agente infeccioso e sobre os procedimentos de avaliao da exposio. A equipe do laboratrio dever freqentar cursos
necessrio, e tambm em caso de mudanas de normas e
procedimentos.
9. Caber ao diretor do laboratrio assegurar que, antes que
o trabalho com os organismos designados para o nvel de
biossegurana 3 se inicie, toda a equipe do laboratrio
demonstre estar apta para prticas e tcnicas padro de
microbiologia e esteja habilitada tambm para prticas e
operaes especficas do laboratrio. Podem estar includos experincia anterior em manipulao de patgenos
humanos, culturas de clulas e treinamento especfico
proporcionado pelo diretor do laboratrio ou por outros
peritos na rea de manejo de prticas e tcnicas microbiolgicas seguras.
10. Deve-se tomar extrema precauo quando objetos cortantes (incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas,
tubos capilares e bisturis) forem manipulados.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos cortantes devem ficar restritos ao laboratrio e ser usados somente quando no houver outra
alternativa para inoculao parenteral, flebotomia
ou aspirao de fluidos de animais de laboratrio e
de garrafas com diafragma. Recipientes plsticos devem ser substitudos por recipientes de vidro sempre
que possvel.
b. Devem ser usadas somente seringas com agulha fixa
ou agulha e seringa em uma unidade descartvel
(por exemplo, quando a agulha parte integrante da
seringa) para injeo ou aspirao de materiais infecciosos. As agulhas descartveis usadas no devero
ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das
seringas ou manipuladas antes de serem despreza42
Seo III
das. Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente

colocadas em um recipiente resistente a perfuraes
localizado convenientemente e utilizado para recolhimento de objetos cortantes desprezados. Objetos
cortantes no-descartveis devero ser colocados em
um recipiente cuja parede dever ser bem resistente
para o transporte at uma rea para descontaminao, de preferncia com uma autoclave.
c. Seringas que possuem um envoltrio para a agulha
ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de segurana devero ser utilizados quando necessrios.
d. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com a mo, devem ser removidos por outros
meios mecnicos, tais como vassoura e p de lixo, pinas ou frceps. Os recipientes que contm agulhas,
equipamentos cortantes e vidros quebrados contaminados devero passar por um processo de descontaminao antes de serem desprezados, de acordo
com os regulamentos locais, estaduais ou federais.
11. Todas as manipulaes abertas que envolvam materiais
infecciosos devero ser conduzidas no interior de cabines de segurana biolgica ou de outros dispositivos de
conteno fsica dentro de um mdulo de conteno. Nenhum trabalho em que haja necessidade de abrir a pele
para se alcanar os vasos dever ser conduzido em bancadas abertas. A limpeza dever ser facilitada pelo uso
de toalhas absorventes com uma face de plstico voltada para baixo, recobrindo as superfcies de trabalho no
perfuradas das cabines de segurana biolgica.
12. O equipamento laboratorial e as superfcies de trabalho
devero ser descontaminados rotineiramente com um
desinfetante eficaz aps a concluso do trabalho com
materiais infecciosos, especialmente no caso de derramamento, vazamentos ou outras contaminaes por materiais infecciosos.
a. Vazamentos de materiais infecciosos devero ser
descontaminados, contidos e limpos pela equipe de
profissionais especializados ou por outras pessoas
43
Seo III
adequadamente treinadas e equipadas para trabalharem com material infeccioso concentrado. Os

procedimentos para vazamento devero ser desenvolvidos e notificados.
b. O equipamento contaminado dever ser descontaminado antes de ser removido do laboratrio para
conserto, manuteno ou para ser embalado para
transporte de acordo com os regulamentos locais,
estaduais e federais aplicveis.
13. As culturas, os tecidos, as amostras de fluidos corpreos
ou resduos devero ser colocados em um recipiente que
evite um vazamento durante coleta, manuseio, processamento, armazenamento, transporte ou embarque.
14. Todos os dejetos contendo materiais contaminados em
laboratrio (por exemplo, luvas, jalecos de laboratrios,
etc.) devero ser descontaminados antes de serem desprezados ou reutilizados.
15. Vazamentos e acidentes que resultem em exposies
abertas dos materiais infecciosos aos organismos devero ser imediatamente relatados ao diretor do laboratrio. Avaliao mdica adequada, vigilncia e tratamento
devero ser proporcionados e registros por escrito devero ser mantidos.
16. Animais e plantas que no estiverem relacionados ao trabalho em desenvolvimento no devero ser admitidos
dentro do laboratrio.
1. Roupas de proteo (como jalecos com uma frente inteira, macaco ou uniforme de limpeza) devero ser usadas
pela equipe quando estiver dentro do laboratrio. A roupa de proteo no dever ser usada fora do laboratrio.
Antes de ser lavada a roupa dever ser descontaminada e
trocada depois de contaminada.
2. Todos devero usar luvas quando estiverem manuseando
materiais infecciosos, animais infectados e equipamentos contaminados.
44
Seo III
3. Recomenda-se a mudana freqente das luvas acompanhada de lavagem das mos. As luvas descartveis no
devero ser reutilizadas.
4. Todas as manipulaes de materiais infecciosos, necropsias de animais infectados, coleta de tecidos ou lquidos
de animais infectados ou de ovos embrionados, etc. devero ser conduzidas em uma cabine de segurana biolgica de classe II ou III (veja o apndice A).
5. Quando um procedimento ou processo no puder ser
conduzido dentro de uma cabine de segurana biolgica,
devem ser utilizadas combinaes apropriadas de equipamentos de proteo individual (por exemplo, respiradores, protetores faciais) com dispositivos de conteno
fsica (por exemplo, centrfugas de segurana e frascos
selados).
6. A proteo facial e o respirador devero ser usados quando a equipe estiver dentro de salas contendo animais infectados.
D. Instalaes do Laboratrio (Barreiras Secundrias)
1. O laboratrio, com acesso restrito, dever estar separado
das reas de trnsito irrestrito do prdio. exigido um
sistema de dupla porta com sistema de intertravamento
automtico como requisito para entrada no laboratrio a
partir de corredores de acesso ou outras reas contguas.
As portas devero conter fechaduras (veja o apndice F).
Uma sala para a troca de roupas dever ser includa no
laboratrio.
2. Cada sala do laboratrio dever possuir uma pia para lavagem das mos. A pia dever ser acionada automaticamente sem o uso das mos e estar localizada perto da
porta de sada.
3. As superfcies das paredes internas, dos pisos e dos tetos
das reas, em que os agentes de NB-3 so manipulados,
devero ser construdas e mantidas de forma que facilitem a limpeza e a descontaminao. Toda a superfcie
deve ser selada e sem reentrncias. As paredes, os tetos
e os pisos devero ser lisos, impermeveis e resistentes a
45
Seo III
4.
5.
6.
7.
8.
9.
46
substncias qumicas e desinfetantes normalmente usados em laboratrios. Os pisos devero ser monolticos e
antiderrapantes. O uso de revestimento de piso dever
ser levado em considerao. Orifcios ou aberturas nas
superfcies de pisos, paredes e teto devero ser selados.
Dutos e espaos entre portas e esquadrias devem permitir o selamento para facilitar a descontaminao.
As bancadas devero ser impermeveis e resistentes ao
calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis
e solventes qumicos utilizados para descontaminao de
superfcies e equipamentos.
Os mveis do laboratrio devero suportar cargas e usos
previstos com espaamento suficiente entre bancadas,
cabines e equipamentos para permitir acesso fcil para
a limpeza. As cadeiras e outros mveis utilizados em um
laboratrio devero ser cobertos por uma material que
no seja tecido e possa ser facilmente descontaminado.
Todas as janelas do laboratrio devero ser fechadas e lacradas.
Um mtodo para descontaminao de todos os dejetos
do laboratrio dever estar disponvel para a equipe e ser
utilizado de preferncia dentro do laboratrio (por exemplo, autoclave, desinfeco qumica, incinerao ou outros mtodos aprovados de descontaminao). Deve-se
considerar os meios de descontaminao de equipamentos. Caso o lixo seja transportado para fora do laboratrio, ele dever ser adequadamente lacrado e no dever
ser transportado em corredores pblicos.
Devero existir cabines de segurana biolgica em todos
os laboratrios. Essas cabines devero estar distantes de
portas, de venezianas, do almoxarifado e de reas do laboratrio que possuam um grande movimento.
O laboratrio dever ter um sistema de ar independente,
com ventilao unidirecional que permita que o fluxo de
ar penetre no laboratrio atravs da rea de entrada. O
sistema de ar dever tirar o ar contaminado para fora do
laboratrio e jogar o ar de reas limpas para dentro do
Seo III
mesmo. O ar de exausto no dever recircular em outras

reas do prdio. A filtrao e outros tratamentos do ar
liberado no so necessrios, mas podero ser utilizados
dependendo das condies do local, dos agentes especficos manipulados e das condies de uso. O ar liberado
dever ser jogado fora de reas ocupadas e de entradas
de ar ou dever ser filtrado atravs de filtro HEPA (High
Efficiency Particulated Air). A equipe do laboratrio dever
verificar constantemente se o fluxo de ar (para dentro do
laboratrio) est funcionando de forma adequada. Recomenda-se que um monitor visual seja instalado para indicar e confirmar a entrada direcionada do ar para dentro
do laboratrio. Devemos considerar a instalao de um
sistema de controle HVAC para evitar uma pressurizao
positiva contnua do laboratrio. Alarmes audveis tambm so recomendados para notificar a equipe de uma
possvel falha no sistema HVAC.
10. O ar exaurido de uma cabine de segurana biolgica classe II, filtrado pelo HEPA, poder recircular no interior do
laboratrio se a cabine for testada e certificada anualmente. O ar exaurido das cabines de segurana biolgica deve
ser retirado diretamente para fora do ambiente de trabalho atravs do sistema de exausto do edifcio. As cabines
devero estar conectadas de maneira que evitem qualquer
interferncia no equilbrio do ar das cabines ou do sistema de exausto do edifcio (por exemplo, uma abertura
de ar entre o exaustor das cabines e o duto do exaustor).
Quando as cabines de segurana biolgica classe III forem
utilizadas, estas devero estar conectadas diretamente ao
sistema de exaustores. Se as cabines de classe III estiverem conectadas ao sistema de insuflao do ar, isso dever ser feito de tal maneira que previna uma pressurizao
positiva das cabines (veja o apndice A).
11. Centrfugas de fluxo contnuo ou outros equipamentos
que possam produzir aerossis devero ser refreados
por dispositivos que liberem o ar atravs de filtros HEPA
antes de serem descarregados no do laboratrio. Esses
sistemas HEPA devero ser testados anualmente. Uma
47
Seo III
outra alternativa seria jogar o ar de sada das cabines

para fora, em locais distantes de reas ocupadas ou das
entradas de ar.
12. As linhas de vcuo devero ser protegidas por sifes contendo desinfetantes lquidos e filtros HEPA ou o equivalente. Os filtros devero ser substitudos quando necessrio. Uma alternativa usar uma bomba a vcuo porttil
(tambm adequadamente protegida com sifes e filtros).
13. Um lava-olhos deve estar disponvel no laboratrio.
14. A iluminao dever ser adequada para todas as atividades,
evitando reflexos e brilhos que possam ofuscar a viso.
15. O projeto da instalao e os procedimentos operacionais
do nvel de biossegurana 3 devem ser documentados.
Os parmetros operacionais e das instalaes devero
ser verificados quanto ao funcionamento ideal antes que
o estabelecimento inicie suas atividades. As instalaes
devero ser verificadas pelo menos uma vez ao ano.
16. Protees adicionais ao meio ambiente (por exemplo,
chuveiros para a equipe, filtros HEPA para filtrao do ar
exaurido, conteno de outras linhas de servios e a descontaminao dos efluentes) devero ser consideradas
em conformidade com as recomendaes para manipulao dos agentes, com as normas de avaliao de risco,
condies do local ou outras normas locais, estaduais ou
federais aplicveis.
Nvel de Biossegurana 4 (NB-4)
O nvel de biossegurana 4 indicado para o trabalho que envolve agentes exticos e perigosos que exponham o indivduo a
um alto risco de contaminao de infeces que podem ser fatais,
alm de apresentarem um potencial elevado de transmisso por
aerossis. Os agentes com uma relao antignica prxima ou
idntica aos dos agentes includos no nvel de biossegurana 4 devero ser manipulados neste nvel at que se consigam dados suficientes para confirmao do trabalho neste nvel ou para o trabalho em um nvel inferior. A equipe do laboratrio dever ter um
treinamento especfico e completo direcionado para a manipulao de agentes infecciosos extremamente perigosos e dever ser
48
Seo III
capaz de entender as funes da conteno primria e secundria,

das prticas padro especficas, do equipamento de conteno e
das caractersticas do planejamento do laboratrio. Os trabalhadores devero ser supervisionados por cientistas competentes,
treinados e com vasta experincia no manuseio dos agentes. O
acesso ao laboratrio dever ser rigorosamente controlado pelo
diretor. A instalao dever ser em um edifcio separado ou em
uma rea controlada dentro do edifcio que seja totalmente isolada de todas as outras. Um manual de operaes especfico para as
instalaes dever ser preparado ou adotado.
Dentro do ambiente de trabalho, todas as atividades devero
permanecer restritas s cabines de segurana biolgica classes III
ou II usadas com roupas de proteo com presso positiva, ventiladas por sistema de suporte de vida. O laboratrio do nvel de
biossegurana 4 dever possuir caractersticas especficas quanto
ao projeto e engenharia para preveno da disseminao de microorganismos dentro do meio ambiente.
As seguintes prticas padro de segurana e especiais, bem
como as instalaes, se aplicam aos agentes pertencentes ao nvel
de biossegurana 4:
1. O acesso ao laboratrio dever ser limitado pelo diretor
quando experimentos estiverem sendo realizados.
2. A norma para manipulao segura de objetos perfurocortantes dever ser instituda.
3. Todos os procedimentos devero ser cuidadosamente realizados para minimizar a produo de aerossis.
4. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas
pelo menos uma vez ao dia e depois de qualquer vazamento de material vivel.
5. Todo o lixo dever ser descontaminado antes de ser desprezado por meio de um mtodo de descontaminao
aprovado tal qual a autoclavao.
6. Deve-se providenciar um programa rotineiro de controle
de roedores e insetos (veja o apndice G).
49
Seo III
1. Somente as pessoas envolvidas na programao e no suporte ao programa a ser desenvolvido, cujas presenas
forem solicitadas no local ou nas salas do laboratrio,
devero ter permisso para entrada no local. As pessoas
que estiverem imunocomprometidas ou imunodeprimidas estaro correndo um alto risco de adquirir infeces.
Portanto, as pessoas que forem susceptveis ou as pessoas em que uma eventual contaminao possa provocar
srios danos, como no caso de crianas ou gestantes, no
recebero permisso para entrar no laboratrio ou nas
salas de animais.
O supervisor do laboratrio dever ter a responsabilidade final no controle do acesso. Por questo de segurana,
o acesso ao laboratrio dever ser bloqueado por portas
hermeticamente fechadas. A entrada dever ser controlada pelo diretor do laboratrio, por outra pessoa responsvel pelo controle dos riscos biolgicos ou por outra
pessoa responsvel pela segurana fsica da instalao.
Antes de entrar no laboratrio, as pessoas devero ser
avisadas sobre o risco potencial e instrudas sobre as medidas apropriadas de segurana. As pessoas autorizadas
devero cumprir com rigor as instrues dadas e todos os
outros procedimentos aplicveis para entrada e sada no
laboratrio. Dever haver um registro, por escrito, de entrada e sada de pessoal, com data, horrio e assinaturas.
2. Quando materiais infecciosos ou animais infectados estiverem presentes no laboratrio, deve ser colocado em
todas as portas de acesso ao laboratrio e s salas de
animais um sinal de alerta contendo o smbolo universal
de risco biolgico. O sinal de alerta dever identificar o
agente, relacionar o nome do diretor do laboratrio ou
outra pessoa responsvel e tambm indicar qualquer requisito especial necessrio para a entrada na rea (por
exemplo, necessidade de imunizao, respiradores ou outras medidas de proteo individual).
3. O diretor do laboratrio dever ser o responsvel por assegurar que, antes de iniciar o trabalho com organismos
50
Seo III
4.
5.
6.
7.
8.
pertencentes ao nvel de biossegurana 4, toda a equipe

demonstre uma alta competncia em relao a prticas
e tcnicas microbiolgicas e a prticas e operaes especiais especficas do laboratrio. Isso poder incluir uma
experincia anterior no manuseio de patgenos humanos, culturas de clulas ou em um treinamento especfico
fornecido pelo diretor do laboratrio ou por outro perito
com experincia nessas tcnicas e prticas microbiolgicas singulares.
A equipe do laboratrio dever receber imunizaes para
os agentes manipulados ou potencialmente presentes no
laboratrio.
Amostras sorolgicas de toda a equipe do laboratrio e
de outras pessoas expostas a um elevado risco devero
ser coletadas e armazenadas. Amostras sorolgicas adicionais devero ser periodicamente coletadas, dependendo dos agentes manipulados ou do funcionamento
do laboratrio. Ao estabelecer um programa de vigilncia
sorolgica, deve-se considerar a disponibilidade dos mtodos para a avaliao do(s) anticorpo(s) do(s) agente(s)
em questo. O programa para o teste das amostras sorolgicas dever ter um intervalo a cada coleta, e o responsvel pelo projeto dever comunicar os resultados aos
participantes.
Um manual sobre biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe dever ser avisada quanto aos perigos
e riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre as prticas e os procedimentos.
A equipe do laboratrio e a equipe de apoio devero receber treinamento adequado sobre os perigos e riscos associados ao trabalho, as precaues necessrias para a preveno de exposies e os procedimentos de avaliao da
exposio. A equipe tambm dever participar de cursos
necessrio, em caso de mudanas nos procedimentos.
A entrada e a sada de pessoal do laboratrio devem ocorrer somente aps uso do chuveiro e troca de roupas. Os
funcionrios devero usar o chuveiro de descontamina51
Seo III
o a cada sada do laboratrio. A entrada e a sada de

pessoal por antecmara pressurizada somente devero
ocorrer em situaes de emergncia.
9. Para entrar no laboratrio, a roupa comum dever ser
trocada (nos vestirios externos) por roupa protetora
completa e descartvel. Todas as roupas usadas no laboratrio (incluindo roupas de baixo, calas e camisas ou
macaces, sapatos e luvas) devero ser fornecidas e utilizadas por todas as pessoas que entrarem no laboratrio.
Ao deixarem o local e antes de se dirigirem para as reas
de banho, as pessoas devero retirar a roupa usada no laboratrio, no vestirio interno. As roupas sujas devero
passar pela autoclave antes de lavadas.
10. Estoques e materiais necessrios para o laboratrio devero ser descontaminados em autoclave de dupla porta,
cmara de fumigao ou sistema de antecmara pressurizada antes de utilizados. Aps garantir a segurana das
portas externas, a equipe dentro do laboratrio dever
retirar os materiais abrindo as portas interiores da autoclave, da cmara de compresso ou da cmara de fumigao. As portas devero ser trancadas depois da retirada
dos materiais.
11. Deve-se sempre tomar extrema precauo com qualquer
objeto perfurocortante contaminado, como seringas e
agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis.
a. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos cortantes so restritos ao laboratrio e usados somente quando no houver outra alternativa
para inoculao parenteral, flebotomia ou aspirao
de fluidos de animais de laboratrio e de garrafas
com diafragma. Recipientes plsticos devem ser
substitudos por recipientes de vidro sempre que
possvel.
b. Devem ser usadas somente seringas com agulhas
fixas ou agulha e seringa em uma unidade nica e
descartvel (por exemplo, quando a agulha parte
integrante da seringa) para injeo ou aspirao de
materiais infecciosos. As agulhas descartveis usa52
Seo III
das no devero ser dobradas, quebradas, reutilizadas, removidas das seringas ou manipuladas antes
de desprezadas. Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente acondicionadas em um recipiente resistente a perfuraes localizado convenientemente
e utilizado para recolhimento de objetos cortantes
desprezados. Objetos cortantes no descartveis
devero ser acondicionados em um recipiente cuja
parede dever ser bem resistente para o transporte
at uma rea para descontaminao, de preferncia
por meio de autoclave.
c. As seringas que possuem um envoltrio para a agulha ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de
segurana devero ser utilizados quando necessrio.
d. Vidros quebrados no devem ser manipulados diretamente com a mo, devem ser removidos por meios
mecnicos, como vassoura e p de lixo, pinas ou
frceps. Os recipientes que contm agulhas, equipamentos cortantes e vidros quebrados contaminados
devero passar por um processo de descontaminao
antes de desprezados, de acordo com os regulamentos locais, estaduais ou federais.
12. O material biolgico vivel ou intacto a ser removido
de cabines classe III ou do laboratrio de nvel de biossegurana dever ser acondicionado em recipiente de
conteno primria lacrado e inquebrvel. Este, por sua
vez, dever ser acondicionado em um segundo recipiente
tambm selado e inquebrvel que dever passar por um
tanque de imerso contendo desinfetante, uma cmara
de fumigao ou por uma cmara de compresso planejada com esse propsito.
13. Nenhum material, com exceo do material biolgico,
que dever permanecer intacto ou vivel, poder ser removido de um laboratrio de nvel de biossegurana 4,
sem antes ter sido autoclavado ou descontaminado. Equipamentos ou materiais que no resistam a temperaturas
elevadas ou ao vapor devero ser descontaminados utili-
53
Seo III
zando-se gases ou vapor em uma cmara de compresso

ou em uma cmara especfica para tal fim.
14. O equipamento do laboratrio dever ser descontaminado rotineiramente aps o trabalho com materiais infecciosos e especialmente depois de vazamentos, gotejamentos ou outras contaminaes por material infeccioso.
O equipamento dever ser descontaminado antes de ser
enviado para conserto ou manuteno.
15. Vazamentos de materiais infecciosos devero ser refreados e limpos por profissionais especializados ou outros
propriamente treinados e equipados para o trabalho com
material infeccioso concentrado. Um procedimento para
vazamento dever ser desenvolvido e adotado pelo laboratrio.
16. Um sistema de notificao de acidentes e exposies laboratoriais, absentesmo de empregados e doenas associadas ao laboratrio dever ser organizado, bem como
um sistema de vigilncia mdica. Relatos por escrito devero ser preparados e mantidos. Deve-se, ainda, prever
uma unidade de quarentena, isolamento e cuidados mdicos para o pessoal contaminado por doenas conhecidas ou potencialmente associadas a laboratrio.
17. Todos os materiais no relacionados ao experimento que
estiver sendo realizado no momento (por exemplo, plantas, animais e roupas) no devero ser permitidos no laboratrio.
Todos os procedimentos dentro do laboratrio devero ser conduzidos em cabines de segurana biolgica classe III ou cabines
de classe II usadas em associao com roupas de proteo pessoal
com presso positiva e ventiladas por sistema de suporte de vida.
D. Instalaes dos Laboratrios (Barreiras Secundrias)
Existem dois modelos de laboratrio de nvel de biossegurana 4:
(A) o laboratrio cabine, onde todas as manipulaes do agente
so realizadas em uma cabine de segurana biolgica classe III; e
(B) o laboratrio escafandro, onde a equipe usa uma roupa de
54
Seo III
proteo. Os laboratrios de nvel de biossegurana 4 podem se

basear em um dos modelos ou em uma combinao dos dois modelos na construo de um s laboratrio. Se a combinao for
utilizada, cada tipo dever atender todos os requisitos identificados para o mesmo.
(A) Laboratrio Cabine (veja o apndice A)
1. O laboratrio de biossegurana 4 dever estar separado
do prdio ou em uma rea claramente demarcada e isolada. As salas do laboratrio devero ser planejadas para
assegurar a passagem atravs de, no mnimo, duas portas
antes de se entrar nas salas contendo as cabines de segurana biolgica classe III (sala das cabines). Devem estar
previstas cmaras de entrada e sada de pessoal, para troca de roupas, separadas por chuveiro. Deve ser previsto,
ainda, um sistema de autoclave de duas portas, um tanque de imerso contendo desinfetante, uma cmara de
fumigao ou uma ante-sala ventilada para descontaminao na barreira de conteno para o fluxo de materiais,
estoques ou equipamentos que no passam pelo interior
dos vestirios para chegar at a sala.
2. Inspees dirias de todos os parmetros de Conteno
(por exemplo, fluxo de ar direcionado) e sistemas de suporte de vida devero estar concludos antes que o trabalho se inicie dentro do laboratrio, para assegurar que
este esteja funcionando de acordo com os parmetros de
operao.
3. As paredes, os pisos e os tetos da sala contendo as cabines e do vestirio interno devero ser construdos de
maneira que formem uma concha interna selada que facilitar a fumigao e evitar entrada e sada de animais
e insetos. Os pisos devero ser totalmente selados e revestidos. As superfcies internas da concha devero ser
resistentes a lquidos e produtos qumicos, para facilitar
a limpeza e a descontaminao da rea. Aberturas ao redor das portas das salas de cabine e dentro dos vestirios
internos devero ser minimizadas e facilmente seladas
para facilitar a descontaminao. O sistema de drenagem
55
Seo III
4.
5.
6.
7.
8.
56
do piso da sala da cabine dever estar conectado diretamente ao sistema de descontaminao do dejeto lquido. O sistema de esgoto e outra linha de servio devero
conter filtros HEPA e protees contra animais nocivos,
parasitas, etc.
As bancadas devero possuir superfcies seladas e sem
reentrncias que devero ser impermeveis gua e resistentes ao calor moderado e aos solventes orgnicos,
cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies de trabalho e dos equipamentos.
Os mveis do laboratrio devero ter uma construo
simples e suportar cargas e usos previstos. O espaamento entre bancadas, cabines, armrios e equipamentos
dever ser suficiente para facilitar a limpeza e a descontaminao. As cadeiras e outros mveis usados em um laboratrio devero ser cobertos por um material que no
seja tecido e que possa ser facilmente descontaminado.
Pias com acionamento automtico ou que sejam acionadas sem uso das mos devero ser construdas prximas
porta da sala da cabine e perto dos vestirios internos e
externos.
Se existir um sistema central de vcuo, este no dever
servir s reas fora da sala das cabines. Filtros HEPA em
srie devero ser colocados da forma mais prtica possvel em cada ponto onde ser utilizado ou prximo da vlvula de servio. Os filtros devero ser instalados de forma
a permitir a descontaminao e a substituio local dos
mesmos. Outras linhas utilitrias, como a de gs e lquidos, que convergem para a sala das cabines, devero ser
protegidas por dispositivos que evitem o retorno do fluxo.
Se houver bebedouros de gua, eles devero ser acionados automaticamente ou com os ps e devero estar localizados nos corredores do local, fora do laboratrio. O
servio de abastecimento da gua dos bebedouros dever
ser isolado do sistema de distribuio e abastecimento de
gua das reas laboratoriais e dever ser equipado com
um dispositivo que previna o retorno do fluxo.
Seo III
9. As portas de acesso ao laboratrio devero possuir trancas e fechamento automtico.

10. Todas as janelas devero ser inquebrveis e seladas.
11. Todos os laboratrios devero possuir autoclaves de duas
portas para a descontaminao de materiais que passem
pelas cabines de segurana biolgica classe III e pelas salas com cabines. As portas das autoclaves, que se abrem
para fora da barreira de conteno, devero ser seladas s
paredes da barreira de conteno. Essas portas devero
ser controladas automaticamente de forma que a porta
externa da autoclave somente possa ser aberta depois que
o ciclo de esterilizao da autoclave tenha sido concludo.
12. Todos os laboratrios devero possuir tanques de imerso contendo desinfetantes, cmaras de fumigao ou
mtodos equivalentes de descontaminao, de forma
que os materiais e os equipamentos que no possam ser
descontaminados em uma autoclave sejam removidos de
maneira segura das cabines de segurana biolgica classe
III e das salas com as cabines.
13. Efluentes lquidos vindos da parte suja dos vestirios internos (incluindo os vasos sanitrios), das pias das salas
das cabines, do sistema de esgoto (se utilizado), das cmaras da autoclave e de outras fontes dentro da sala das
cabines devero ser descontaminados com um mtodo de
descontaminao comprovado, de preferncia por meio
de um tratamento por calor antes de serem jogados no
esgoto sanitrio. Os efluentes vindos de chuveiros e vasos sanitrios limpos devero ser jogados no esgoto sem
antes passar por um tratamento. O processo usado para
a descontaminao de dejetos lquidos dever ser validado fisicamente e biologicamente.
14. Todos os laboratrios devero possuir um sistema de
ventilao sem uma recirculao. Os componentes de
abastecimento e de liberao do sistema devero estar
equilibrados para assegurar um fluxo de ar direcionado
da rea de menos risco para rea(s) de maior risco potencial. O sistema de ar no laboratrio dever prever presso
57
Seo III
diferencial e fluxo unidirecionado de modo a assegurar

diferencial de presso que no permita a sada do agente de risco. O fluxo de ar direcionado/presso diferencial
dever ser monitorado e dever conter um alarme que
acuse qualquer irregularidade no sistema. Um dispositivo visual que monitorize a presso de maneira apropriada, que indique e confirme o diferencial da presso da
sala das cabines, dever ser providenciado e dever ser
colocado na entrada do vestirio. O fluxo de ar de entrada e sada tambm dever ser monitorado, e um sistema
de controle HEPA dever existir para evitar uma contnua pressurizao positiva do laboratrio. A cabine de
classe III dever ser diretamente conectada ao sistema de
exaustores. Se a cabine de classe III estiver conectada ao
sistema de abastecimento, isso dever ser feito de forma
que previna uma pressurizao positiva da cabine.
15. O ar que entra e sai da sala das cabines, do vestirio interno e da ante-sala dever passar pelo(s) filtro(s) HEPA.
O ar dever ser liberado longe dos espaos ocupados e das
entradas de ar. O(s) filtro(s) dever(o) estar localizado(s)
de maneira mais prxima possvel da fonte a fim de minimizar a quantidade de canos potencialmente contaminados. Todos os filtros HEPA devero ser testados e certificados anualmente. O alojamento dos filtros HEPA dever
ser projetado de maneira que permita uma descontaminao in situ do filtro antes de este ser removido ou antes
da remoo do filtro em um recipiente selado e de conteno de gs para subseqente descontaminao e/ou
destruio por incinerao. O projeto do abrigo do filtro
HEPA dever facilitar a validao da instalao do filtro.
O uso de filtros HEPA pr-certificados pode ser vantajoso.
A vida mdia de filtros HEPA de exausto pode ser prolongada com uma pr-filtrao adequada do ar insuflado.
16. O projeto e os procedimentos operacionais de um local
de nvel de biossegurana 4 devero ser documentados.
O local dever ser testado em funo do projeto e dos
parmetros operacionais para ser verificado se estes realmente atendem a todos os critrios, antes que comecem
58
Seo III
a funcionar. Os locais devero ser checados novamente

pelo menos uma vez ao ano, e os procedimentos neles
existentes devero ser modificados de acordo com a experincia operacional.
17. Sistemas de comunicao apropriados devero ser instalados entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax,
computador, interfone).
(B) Laboratrio Escafandro
1. A instalao de nvel de biossegurana 4 consiste de um
edifcio separado ou de uma rea claramente demarcada
e isolada dentro do edifcio. As salas devero ser construdas de forma que assegurem a passagem atravs dos
vestirios e da rea de descontaminao antes da entrada na(s) sala(s) onde o trabalho com os agentes do NB4 (rea do escafandro) realizado. Vestirios interno e
externo, separados por um chuveiro, devero ser construdos para entrada e sada da equipe que trabalha no
laboratrio escafandro. Uma rea para o uso do escafandro, projetada especialmente para o local, tambm ser
construda para proporcionar uma proteo pessoal equivalente quela proporcionada pelas cabines de segurana
biolgica classe III. As pessoas que entrarem nesta rea
devero vestir uma roupa de pea nica de presso positiva e que seja ventilada por um sistema de suporte de
vida protegido pelo sistema de filtros HEPA. O sistema
de suporte de vida inclui compressores de respirao de
ar, alarmes e tanques de ar de reforo de emergncia. A
entrada nesta rea dever ser feita atravs de uma cmara de compresso adaptada com portas hermticas. Um
chuveiro qumico para descontaminao da superfcie da
roupa, antes que o trabalhador saia da rea, dever ser
instalado. Um gerador de luz, automaticamente acionado
em casos de emergncia, ser instalado para evitar que
os sistemas de suporte de vida, os alarmes, a iluminao,
os controles de entrada e sada e as cabines de segurana parem de funcionar. A presso do ar dentro da roupa
dever ser positiva em relao rea ao redor do labora59
Seo III
trio. J a presso do ar dentro da rea da roupa dever

ser menor que aquela das reas adjacentes. A iluminao
e os sistemas de comunicao de emergncia devero ser
instalados. Todas as aberturas e fendas dentro da concha
interna da sala da roupa de proteo, do chuveiro qumico e das fechaduras devero ser seladas.
2. Uma inspeo diria de todos os parmetros de conteno (por exemplo, fluxo de ar direcionado, chuveiros
qumicos) e dos sistemas de suporte de vida dever estar
concluda antes que o trabalho no laboratrio se inicie,
para garantir que o laboratrio esteja operando de acordo com os parmetros operacionais.
3. Uma autoclave com duas portas dever ser instalada na
barreira de conteno para descontaminao dos dejetos
a serem removidos da rea do laboratrio escafandro. A
porta da autoclave, que se abre para a rea externa da
sala escafandro, dever ser automaticamente controlada
de forma que a porta exterior s possa ser aberta depois
que o ciclo de esterilizao esteja concludo. Um tanque
de imerso, uma cmara de fumigao ou de compresso
dever ser colocado no local para permitir a passagem de
materiais, suprimentos ou equipamentos que sero trazidos para o interior do laboratrio escafandro, atravs
dos vestirios. Esses dispositivos podem tambm ser
utilizados para a remoo de materiais, suprimentos ou
equipamentos que no possam ser descontaminados em
uma autoclave.
4. As paredes, os pisos e os tetos do laboratrio escafandro
devero ser construdos de maneira que formem uma
concha interna selada, que facilite a fumigao e que evite
a entrada de animais e insetos (veja o apndice G). As superfcies internas da concha devero ser resistentes a lquidos e solues qumicas, facilitando a limpeza e a descontaminao da rea. Todas as aberturas e fendas nessas
estruturas e superfcies devero ser seladas. Qualquer
sistema de drenagem do piso dever conter sifes cheios
de desinfetante qumico de eficcia comprovada contra o
agente-alvo que devero estar conectados diretamente ao
60
Seo III
sistema de descontaminao de dejetos lquidos. O esgoto e outras linhas de servio devero conter filtros HEPA.
5. Acessrios internos como dutos de ventilao, sistemas
de suprimento de luz e gua devero ser instalados de
maneira que minimizem a rea da superfcie horizontal.
6. As bancadas devero possuir superfcies seladas e sem
emendas, impermeveis e resistentes ao calor moderado
e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies de
trabalho e nos equipamentos.
7. Os mveis do laboratrio devero ter uma construo
simples e suportar cargas e usos previstos. Recomendase o uso de materiais no porosos. Os espaos entre as
bancadas, as cabines e armrios e o equipamento devero
ser suficientes para facilitar a limpeza e a descontaminao. As cadeiras e outros mveis do laboratrio devero
ser cobertos por um material que no seja tecido e que
possa ser facilmente descontaminado.
8. Pias com funcionamento automtico ou que sejam acionadas sem o uso das mos devero ser construdas prximas rea em conjunto com a roupa de proteo. A construo de pias para a lavagem das mos nos vestirios
internos e externos dever ser considerada bsica para a
avaliao de risco.
9. Se existir um sistema central de vcuo, este no servir s reas fora do laboratrio conjunto com a roupa de
proteo. Os filtros HEPA enfileirados devero ser colocados da forma mais prtica possvel em cada ponto em
que sero utilizados ou prximo da vlvula de servio. Os
filtros devero ser instalados de modo que permitam a
descontaminao e a substituio local dos mesmos. Outros servios de gs e lquidos para essas reas conjuntas
devero ser protegidos por meio de dispositivos que evitem o retorno do fluxo.
10. As portas de acesso ao laboratrio devero possuir trancas e fechamento automtico. As portas internas e externas ao chuveiro qumico e as internas e externas s en61
Seo III
tradas de ar devero ser trancadas para evitar que ambas

as portas sejam abertas simultaneamente.
11. Todas as janelas devero ser resistentes e seladas.
12. Efluentes lquidos provenientes das pias, dos canos de esgoto do piso (se utilizado), das cmaras da autoclave e de
outras fontes dentro da barreira de conteno devero ser
descontaminados com um mtodo de descontaminao
comprovado, de preferncia por um tratamento com calor, antes de serem jogados no esgoto sanitrio. Os efluentes vindos de chuveiros e vasos sanitrios limpos devero
ser jogados no esgoto sem antes passar por um tratamento. O processo usado para a descontaminao de dejetos lquidos dever ser validado fsica e biologicamente.
13. Todos os laboratrios devero possuir um sistema de
ventilao sem recirculao. Os componentes de insuflao e exausto de ar do sistema devero estar equilibrados para assegurar um fluxo de ar direcionado da rea de
menos risco para rea(s) de maior perigo. Recomendamos o uso de ventiladores para abastecimento e liberao
de ar. O fluxo de ar direcionado/presso diferencial entre
as reas adjacentes dever ser monitorado e dever conter um alarme para indicar qualquer irregularidade no
sistema. Um dispositivo visual que monitore a presso de
maneira apropriada, que indique e confirme o diferencial
da presso da sala das cabines dever ser providenciado e
colocado na entrada do vestirio. O fluxo de ar nos componentes de abastecimento e escape tambm dever ser
monitorado, e um sistema de controle HVAC dever ser
instalado para evitar uma pressurizao positiva do laboratrio.
14. O ar que abastece a rea conjunta, o chuveiro qumico e
a cmara de compresso dever passar atravs do filtro
HEPA. O ar que sai dessa rea conjunta, do chuveiro qumico e das cmaras de compresso e de descontaminao
dever passar por dois filtros HEPA em srie antes de ser
jogado para fora do laboratrio. O ar dever ser lanado
distante dos espaos ocupados e das entradas de ar. O(s)
filtro(s) HEPA devero estar localizados de maneira mais
62
Seo III
prxima possvel da fonte a fim de minimizar a extenso

dos canos potencialmente contaminados. Todos os filtros
HEPA devero ser testados e certificados anualmente. O
abrigo para os filtros HEPA dever ser projetado de maneira que permita uma descontaminao in situ do filtro
antes de este ser removido. Uma outra alternativa seria a
remoo do filtro em um recipiente primrio e hermtico
ao gs para subseqente descontaminao e/ou destruio por incinerao. O projeto do abrigo do filtro HEPA
dever facilitar a validao da instalao do filtro. O uso
de filtros HEPA pr-certificados pode ser vantajoso. A
vida mdia de filtros HEPA exaustores pode ser prolongada com uma pr-filtrao adequada do ar fornecido.
15. O posicionamento dos pontos de entrada e sada de ar
dever ser de forma que os espaos de ar estticos dentro
do laboratrio escafandro sejam minimizados.
16. O ar de sada tratado e o liberado das cabines de segurana biolgica classe II, localizadas no local onde os trabalhadores vestem a roupa de presso positiva, poder ser
jogado para dentro do ambiente de trabalho ou para o
exterior atravs do sistema de exaustores do local. Se o
ar tratado for liberado para fora atravs dos exaustores,
este dever estar diretamente conectado ao sistema, de
maneira que evite qualquer interferncia no equilbrio do
ar das cabines ou do sistema de exaustores.
17. O projeto e os procedimentos operacionais de um local
de nvel de biossegurana 4 devero ser documentados.
O local dever ser testado em funo do projeto e dos parmetros operacionais, para que se verifique se realmente atendem a todas as necessidades antes que comecem
a funcionar. Os locais devero ser checados novamente
uma vez ao ano, e os procedimentos neles existentes devero ser modificados de acordo com a experincia operacional.
18. Sistemas de comunicao apropriados devero ser instalados entre o laboratrio e o exterior (por exemplo, fax,
computador, interfone).
63
Seo III
Tabela 1. Resumo dos nveis de biossegurana recomendados para

agentes infecciosos
NB
AGENTES
PRTICAS
EQUIPAMENTOS DE
SEGURANA
(Barreiras Primrias)
INSTALAES
(Barreiras Secundrias)
Que no so conhecidos por cau

sarem doenas
em adultos sadios.
Associados com
doenas humanas, risco = leso percutnea,
ingesto, exposio da membrana mucosa.
Prticas padro de mi- No so necessrios.

crobiologia.
Bancadas abertas com

pias prximas.
Prtica de NB-1 mais:

acesso limitado;
avisos de risco biolgico;
precaues com objetos perfurocortantes;
manual de biossegurana que defina
qualquer descontaminao de dejetos
ou normas de vigilncia mdica.
NB-1 mais: autoclave

disponvel.
Agentes exticos
com potencial
para transmisso
via aerossol; a
doena pode trazer conseqncias srias ou at
fatais.
Prticas de NB-2 mais:

acesso controlado;
descontaminao de
todo o lixo;
descontaminao da
roupa usada no laboratrio antes de ser
lavada;
amostra sorolgica.
Barreiras primrias =
cabines de classe I ou
II ou outros dispositivos de conteno fsica
usados para todas as
manipulaes de agentes que provoquem aerossis ou vazamento
de materiais infecciosos; procedimentos especiais como o uso de
aventais, luvas e proteo para o rosto, quando necessrio.
cabines de classe I ou II
ou outros dispositivos
de conteno usados
para todas as manipulaes abertas de agentes;
uso de aventais, luvas e
proteo respiratria,
quando necessrio.
Agentes exticos ou perigosos

que impem um
alto risco de doenas que ameaam a vida, infeces laboratoriais
transmitidas via
aerossol ou relacionadas a agentes com risco
desconhecido de
transmisso.
NB-3 mais:
mudana de roupa
antes de entrar;
banho de ducha na
sada;
todo o material descontaminado na sada das instalaes.
todos os procedimentos
conduzidos em cabines
de classe III ou classe I
ou II juntamente com
macaco de presso positiva com suprimento
de ar.
64
NB-2 mais:
separao fsica dos
corredores de acesso;
portas de acesso duplas com fechamento
automtico;
ar de exausto no recirculante;
fluxo de ar negativo
dentro do laboratrio.
NB-3 mais:
edifcio separado ou
rea isolada;
sistemas de abastecimento e escape a vcuo e de descontaminao;
outros requisitos sublinhados no texto.
SEO IV
critrios para os nveis
de biossegurana para
animais vertebrados
Caso sejam usados animais experimentais, a administrao da

instituio dever fornecer instalaes adequadas, equipe para
cuidar dos animais e estabelecer prticas que assegurem nveis
apropriados para qualidade, segurana e cuidados com o meio ambiente. As instalaes para animais de laboratrio consistem de
um tipo especial de laboratrio. Como princpio geral, os nveis de
biossegurana (as instalaes laboratoriais, as prticas e os requisitos operacionais) indicados para o trabalho envolvendo agentes
infecciosos in vivo e in vitro so similares.
Porm, bom lembrarmos que as salas onde se encontram os
animais podem apresentar alguns problemas singulares. No laboratrio de microbiologia, as condies de risco so provocadas
pela equipe do laboratrio ou pelo equipamento usado por eles.
Nas salas dos animais, as atividades dos prprios animais podem
apresentar novos riscos. Os animais podem produzir aerossis,
morder e arranhar e podem estar infectados por uma doena zoontica.
Essas recomendaes presumem que as dependncias de um
laboratrio de experimentao animal, as prticas operacionais
e a qualidade do tratamento ao animal atendam a padres e
regulamentos aplicveis (por exemplo, Guide for the Care and Use
of Laboratory Animals1 e Laboratory Animal Welfare Regulations2)
e que espcies adequadas tenham sido selecionadas para os
experimentos animais. Alm desse aspecto, a organizao dever
ter um plano de segurana e de sade ocupacionais. A publicao
recente do Institute of Medicine, Occupational Health and Safety
Care of Research Animals3 auxilia muito.
65
SEO IV
critrios para os nveis de biossegurana para animais vertebrados
O ideal seria que as dependncias para animais de laboratrio

usados nos estudos de doenas infecciosas ou no infecciosas possussem um isolamento fsico de outros locais onde so realizadas
atividades, tais como a reproduo animal e a quarentena, de laboratrios clnicos e especialmente de dependncias onde pacientes so atendidos. No momento da elaborao do projeto das instalaes, deve-se considerar o fluxo de pessoas no local, de forma
que minimize o risco de infeces.
As recomendaes detalhadas a seguir descrevem quatro combinaes de prticas, equipamentos de segurana e dependncias para experimentos com animais infectados por agentes que
provocam ou possam provocar infeces humanas. Essas quatro
combinaes, designadas de nveis de biossegurana para animais
(NBA) 1-4, proporcionam nveis crescentes de proteo ao pessoal
e ao meio ambiente e so recomendadas como padres mnimos a
serem seguidos em atividades que envolvam animais de laboratrios infectados. Os quatro nveis descrevem as dependncias para
animais e prticas aplicveis para o trabalho com animais infectados por microorganismos pertencentes aos nveis de biossegurana 1-4, respectivamente.
Os pesquisadores inexperientes quanto conduo desses tipos de procedimentos devero procurar ajuda com pessoas que
possuam experincia com esse trabalho especial para que possam
realiz-lo com segurana.
Padres para as instalaes e prticas de manuseio de vetores
e hospedeiros invertebrados no esto includos nos padres de
trabalho para animais de laboratrio comumente utilizados. O livro Laboratory Safety for Arboviruses and Certain Other Viruses of
Vertebrates,4 preparado pelo Subcomit de Segurana de Laboratrios de Arbovrus (SALS), do Comit Americano de Vrus de Artrpodes, serve como uma referncia til no planejamento e na
operao das dependncias onde sero realizados trabalhos com
artrpodes.
Nvel de Biossegurana Animal 1 (NBA-1)
O nvel de biossegurana animal 1 (NBA-1) recomendado
para o trabalho que envolva agentes bem caracterizados, que no
66
SEO IV
sejam conhecidos por provocarem doenas em humanos adultos

sadios e que apresentem um risco potencial mnimo para a equipe
laboratorial e para o meio ambiente.
A. Prticas Padro
1. O chefe do laboratrio de experimentao animal dever estabelecer normas, procedimentos e protocolos para
situaes de emergncia. Cada projeto dever ser submetido a uma pr-aprovao pelo Comit Institucional
de Tratamento e Uso de Animais (IACUC) e pelo Comit
Institucional de Biossegurana (IBC). Quaisquer prticas
especiais devero ser aprovadas nesse momento.
2. Somente as pessoas que trabalham ou que fazem parte da equipe de apoio devero receber autorizao para
entrar no local. Antes de entrarem, as pessoas devero
ser avisadas quanto aos riscos biolgicos potenciais e receber instrues sobre os procedimentos de segurana
apropriados.
3. Um programa de vigilncia mdica adequado dever ser
institudo.
4. Um manual de segurana dever ser preparado ou adotado. A equipe dever ser avisada sobre os riscos especiais,
ler e seguir as instrues sobre as prticas e os procedimentos.
5. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos. Os alimentos para uso humano devero ser guardados somente em reas designadas
para tal fim e no sero permitidos nas salas de trabalho
ou nas salas dos animais.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados com cuidado para minimizar a criao de aerossis e borrifos.
7. As superfcies de trabalho devero ser descontaminadas
aps o uso ou depois de qualquer derramamento de materiais viveis.
8. Todos os rejeitos da sala de animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas de animais contaminados) devero ser transportados da sala dos animais em
67
SEO IV
recipientes rgidos, cobertos e a prova de vazamento para

serem adequadamente desprezados de acordo com os requisitos locais ou institucionais aplicveis. Recomendase a incinerao.
9. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos cortantes
devero ser institudas.
10. A equipe dever lavar as mos aps ter manuseado culturas e animais, depois da remoo das luvas e antes de
sarem da sala dos animais.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na entrada da sala de animais quando agentes infecciosos estiverem presentes no local. O aviso de risco dever identificar
o(s) agente(s) infeccioso(s) em uso, o nome e o nmero
do telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos
especiais para a entrada na sala dos animais (por exemplo, necessidade de imunizao e do uso de respiradores).
12. Deve ser providenciado um programa rotineiro de controle de roedores e insetos (veja o apndice G).
B. Prticas Especiais:
Nenhuma.
C. Equipamentos de Segurana (Barreiras Primrias):
1. Recomenda-se o uso de jalecos, aventais e/ou uniformes
prprios nas dependncias. Estes devero permanecer no
local e no devero ser usados fora das dependncias do
laboratrio de experimentao animal.
2. As pessoas que tiverem contato com primatas no-humanos devero avaliar o risco de exposio das mucosas
e usar uma proteo para os olhos e a face.5
D. Instalaes (Barreiras Secundrias):
1. As dependncias do laboratrio de experimentao animal devero estar separadas das reas do edifcio abertas
ao pblico.
2. As portas externas do laboratrio devero ser fechadas e
trancadas automaticamente. As portas das salas dos ani68
SEO IV
mais devero abrir para dentro, fechar automaticamente e

ser mantidas fechadas quando os animais estiverem presentes. As portas internas da sala e da ante-sala devero
abrir para fora ou deslizar vertical ou horizontalmente.
3. As dependncias devero ser planejadas, construdas e
mantidas de forma a facilitar a limpeza e a manuteno.
As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos devero
ser impermeveis gua.
4. Acessrios internos, como fixao de luzes, dutos de ar
e canos de gs e gua devero ser instalados de forma a
minimizar reas de superfcie horizontal.
5. Janelas no so recomendadas. Qualquer janela dever
ser resistente quebra. Em todos os locais possveis, as
janelas que porventura existirem devero ser seladas. Se
as dependncias para animais possurem janelas que so
abertas, estas devero conter telas para insetos.
6. Se houver sistema de drenagem no piso, os ralos devero
sempre conter gua e/ou um desinfetante adequado.
7. A ventilao a ser instalada dever estar de acordo com
a ltima edio do Guide for Care and Use of Laboratory
Animals.6 No dever haver nenhuma recirculao do ar
exaurido. Recomenda-se que as salas para os animais sejam mantidas com uma presso negativa em relao aos
corredores adjuntos.
8. A dependncia dever conter uma pia para lavagem das
mos.
9. As caixas e gaiolas devero ser lavadas manualmente ou
em uma mquina para sua lavagem mecnica. A mquina
dever ter enxge final com gua a uma temperatura de
pelo menos 72C (180F).
evitando reflexos e brilhos que possam impedir a viso.
O nvel de biossegurana animal 2 envolve prticas para o trabalho com agentes associados a doenas humanas. Este nvel indicado tanto para riscos advindos da ingesto quanto para expo69
SEO IV
sies da membrana mucosa e cutnea. O NBA-2 baseia-se nos

requisitos de prticas padro, procedimentos, equipamentos de
conteno e instalaes do NBA-1.
A. Prticas Padro
1. Alm das normas, dos procedimentos e dos protocolos
padro para situaes de emergncia estabelecidas pelo
diretor do local, normas e procedimentos especiais devero ser desenvolvidos quando necessrio e devero ser
aprovados pelo Comit Institucional de Tratamento e
Uso de Animais (IACUC) e pelo Comit Institucional de
Biossegurana (IBC).
2. O acesso s salas dos animais dever ser limitado, permitindo o acesso ao menor nmero de pessoas possvel. As
pessoas que receberem autorizao para entrar nas salas
para trabalhar ou realizar algum tipo de servio, quando
o trabalho estiver sendo realizado, devero ser avisadas
em relao aos riscos em potencial.
adotado. Toda a equipe dever ser imunizada e testada
contra os agentes manuseados ou potencialmente presentes (por exemplo, vacina de hepatite B e teste cutneo
para TB). Quando apropriado, um sistema de vigilncia
sorolgica dever ser implementado.7
4. Um manual de biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe do laboratrio dever ser avisada sobre os riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre
prticas e procedimentos.
5. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos. Os alimentos de uso humano
devero ser guardados somente em reas designadas
para tal fim e no sero permitidos dentro das salas para
os animais ou salas de procedimentos.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados com cuidado para minimizar a criao de aerossis e borrifos.
7. O equipamento e as superfcies de trabalho na sala devero ser rotineiramente descontaminados com um desin70
SEO IV
fetante de ao comprovada, aps o trabalho com o agente e especialmente depois de borrifos, derramamentos ou
de outras contaminaes com materiais infecciosos.
8. Todas as amostras infecciosas devero ser coletadas, etiquetadas, transportadas e processadas de maneira que
contenham e previnam a transmisso do(s) agente(s).
Todos os rejeitos da sala para animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas contaminadas dos animais, sobra de alimentos e objetos perfurocortantes) devero ser transportados da sala de animais em recipientes rgidos, cobertos e a prova de vazamentos, de acordo
com os requisitos locais aplicveis. A superfcie exterior
dos recipientes dever ser desinfetada antes de o material ser transportado. Antes da incinerao o contedo
dever ser autoclavado.
9. Normas para um manuseio seguro de objetos perfurocortantes devero ser adotadas:
a. As seringas e agulhas ou outros instrumentos perfurocortantes devero ficar restritos ao laboratrio
e ser usados somente quando no houver uma outra
alternativa, como nos casos de injeo parenteral,
flebotomia, aspirao de lquidos de animais e de
garrafas de diafragma.
b. Usar seringas que possuam envoltrio para a agulha,
ou sistemas que no utilizam agulhas e outros dispositivos de segurana quando apropriados.
c. Recipientes de plstico devero ser substitudos por
recipientes de vidro sempre que possvel.
10. A equipe dever lavar as mos aps o manuseio de culturas e animais, aps a remoo das luvas e antes de sair
das dependncias dos animais.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na entrada da sala dos animais sempre que houver agentes infecciosos presentes. O aviso dever conter a identificao
do(s) agente(s) infeccioso(s), dever relacionar o nome e
o telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos
71
SEO IV
especiais (por exemplo, necessidade de imunizao e do

uso de respiradores) para a entrada na sala dos animais.
12. Um programa de controle de insetos e roedores dever
ser adotado (veja o apndice G).
1. As pessoas que tratam dos animais e as que do suporte
ao programa devero receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais associados ao trabalho, sobre as
precaues necessrias para evitar exposies e os procedimentos de avaliao da exposio. A equipe dever
receber cursos anuais de atualizao ou treinamento adicional quando forem necessrias mudanas de normas
ou procedimentos. Os registros de todo o treinamento
fornecido devero ser mantidos. Em geral, as pessoas expostas a um elevado risco de contaminao ou para quem
as infeces possam ser perigosas no sero permitidas
dentro da sala para animais, a menos que procedimentos
especiais possam eliminar os riscos extras.
2. Somente animais usados para o(s) experimento(s) sero
permitidos na sala.
3. Todo o equipamento dever ser adequadamente descontaminado antes de ser removido da sala.
4. Respingos e acidentes que resultem em exposies a materiais infecciosos devero ser imediatamente relatados
ao chefe do laboratrio. Avaliao mdica, vigilncia e
tratamento devero ser providenciados e registros por
escrito devero ser mantidos.
1. Os aventais, uniformes ou jalecos de laboratrio devero ser usados enquanto a pessoa estiver dentro da sala
dos animais. O jaleco do laboratrio dever ser removido
e mantido dentro da sala. Antes de sair desta, os aventais, uniformes e jalecos devero ser removidos. As luvas
devero ser usadas ao manipular animais infectados e
quando for inevitvel o contato da pele com os animais
infectados.
72
SEO IV
2. O equipamento de proteo individual dever ser baseado nas determinaes da avaliao do risco (veja a seo
V). Protetores respiratrios e para olhos/rosto devero
ser usados por todos que entrarem nas salas de animais
que abrigam primatas no-humanos.8
3. Cabines de segurana biolgica, assim como outros dispositivos de conteno fsica e/ou equipamentos de
conteno fsica (por exemplo, respiradores, protetores
faciais), devero ser usados ao conduzir procedimentos
que apresentem um alto potencial de criao de aerossis. Esses procedimentos incluem necropsia de animais
infectados, coleta de tecidos, lquidos de animais ou ovos
infectados e inoculao intranasal de animais.
4. Quando necessrio, os animais devero ser alojados em
equipamentos de conteno primria apropriados s espcies animais. Sistemas com filtros de caixas ou gaiolas
devero sempre ser manipulados em cabines de bioconteno animal, recomendadas para roedores, adequadamente projetadas e operadas.
D. Instalaes (Barreiras Secundrias)
1. A dependncia para animais dever ser separada das reas que so abertas ao trnsito irrestrito de pessoas dentro do edifcio.
2. O acesso s dependncias dever ser limitado com portas
hermeticamente fechadas. As portas externas devero
ser fechadas e trancadas automaticamente. As portas das
salas dos animais devero se abrir para dentro, ser fechadas automaticamente e mantidas fechadas quando os
animais estiverem presentes. As portas internas da sala
e da ante-sala devero ser abertas para fora ou deslizar
vertical ou horizontalmente.
3. As dependncias devero ser planejadas, construdas e
mantidas de tal forma a facilitar a limpeza e a manuteno. As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos devero ser impermeveis gua.
73
SEO IV
4. Acessrios internos, como fixao de luzes, dutos de ar

5. As janelas no so indicadas. Qualquer janela dever ser
resistente quebra. Em todos os locais possveis, as janelas que porventura existirem devero ser seladas.
6. Se houver sistema de drenagem no piso, os sifes devero sempre conter desinfetante adequado.
7. O ar exaurido dever ser jogado para o lado de fora do
prdio, sem recircular por outras salas. A ventilao a ser
instalada dever estar de acordo com a ltima edio do
Guide for Care and Use of Laboratory Animals. A direo do
fluxo de ar na sala dos animais dever ser para dentro. As
salas para os animais devero ser mantidas sob presso
negativa em relao aos corredores adjuntos.
em uma mquina para a lavagem mecnica. A mquina
9. Dever existir uma autoclave dentro do laboratrio de
experimentao animal para descontaminao do lixo
infeccioso.
10. A sala de manuteno de animais infectados dever conter uma pia para lavagem das mos, assim como em qualquer outro lugar do laboratrio.
11. A iluminao dever ser adequada para todas as atividades, evitando reflexos e brilhos que possam impedir a
viso.
Nvel de Biossegurana Animal 3 (NBA 3)
O nvel de biossegurana animal 3 envolve as prticas adequadas para o trabalho com animais infectados por agentes nativos
ou exticos que apresentem potencial elevado de transmisso por
aerossis e risco de provocar doenas fatais ou srias. O NBA-3
baseia-se nos requisitos de prticas padro, procedimentos, equipamentos de conteno e instalaes do NBA-2.
74
SEO IV
A. Prticas Padro
1. Alm de normas, procedimentos e protocolos padro para
situaes de emergncia estabelecidas pela chefia do laboratrio, normas e procedimentos especiais devero ser
desenvolvidos quando necessrio e ser aprovados pelo Comit Institucional de Tratamento e Uso de Animais (IACUC) e pelo Comit Institucional de Biossegurana (IBC).
2. O chefe do laboratrio limitar o acesso s salas dos animais ao menor nmero de pessoas possvel. As pessoas
que receberem autorizao de entrada, para trabalhar ou
realizar algum tipo de servio, devero ser avisadas em
relao ao risco em potencial.
adotado. Toda a equipe dever ser imunizada e testada
contra os agentes manuseados ou potencialmente presentes (por exemplo, vacina de hepatite B, teste cutneo
para TB). Quando apropriado, um sistema de vigilncia
sorolgica dever ser adotado9. Em geral, as pessoas que
podem estar passando por um risco crescente de adquirir
a infeco ou para quem as infeces possam ter srias
conseqncias no sero permitidas dentro da sala para
animais, a menos que procedimentos especiais possam
eliminar os riscos extras.
4. Um manual de biossegurana dever ser preparado ou
adotado. A equipe do laboratrio dever ser avisada sobre os riscos especiais, ler e seguir as instrues sobre
prticas e procedimentos.
5. proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos. Os alimentos de uso humano
devero ser guardados somente em reas designadas
para tal fim e no sero permitidos dentro das salas para
animais ou das salas de procedimentos.
6. Todos os procedimentos devero ser realizados cuidadosamente para minimizar a produo de aerossis e borrifos.
7. Os equipamentos e as superfcies de trabalho na sala
devero ser rotineiramente descontaminados com desinfetante que possua ao comprovada, aps o trabalho
75
SEO IV
com agentes infecciosos e especialmente aps borrifos,

derramamentos ou outras contaminaes com materiais
infecciosos que tenham ocorrido.
8. Todos os rejeitos da sala de animais (incluindo tecidos,
carcaas e o material das camas dos animais contaminados, alimentao que no tenha sido utilizada e objetos
perfurocortantes) devero ser transportados da sala dos
animais em recipientes rgidos, a prova de vazamentos e
cobertos, para serem desprezados de forma adequada e
de acordo com os requisitos locais ou institucionais aplicveis. Recomendamos a incinerao. A superfcie externa dos recipientes dever ser desinfetada antes da remoo do material (veja Prticas Especiais n. 3, a seguir).
9. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos perfurocortantes devero ser institudas.
a. As seringas e agulhas ou outros instrumentos perfurocortantes devero ser restritos ao laboratrio e somente usados quando no houver outra alternativa,
como nos casos de injeo parenteral, flebotomia,
aspirao de lquidos de animais e de garrafas de diafragma. Os recipientes de plstico devero ser substitudos por recipientes de vidro sempre que possvel.
b. As seringas que possuem um envoltrio para a agulha ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de
c. Vasilhas plsticas devero ser substitudas por vasilhames de vidro sempre que possvel.
10. A equipe dever lavar as mos aps ter manuseado culturas e animais, depois da remoo das luvas e antes de sair
da sala dos animais.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na entrada da sala do laboratrio de experimentao animal
quando agentes infecciosos estiverem presentes no local. O aviso de risco dever identificar o(s) agente(s)
infeccioso(s) em uso, relacionar o nome e o nmero do
telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos es-
76
SEO IV
peciais para a entrada na sala dos animais (por exemplo,

necessidade de imunizao e do uso de respiradores).
12. Todas as amostras infecciosas devero ser coletadas, etiquetadas, transportadas e processadas de maneira que faam
a devida conteno e previnam a transmisso de agentes.
13. As pessoas que cuidam dos animais de laboratrio e as
que do suporte ao programa devero receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais associados
ao trabalho, sobre as precaues necessrias para evitar
exposies e os procedimentos de avaliao da exposio.
A equipe dever receber cursos anuais de atualizao ou
treinamento adicional quando forem necessrias mudanas de normas ou procedimentos. Os registros de todo o
treinamento fornecido devero ser mantidos.
14. Um programa de controle de insetos e roedores dever
ser adotado.
1. As caixas e gaiolas dos animais devero passar pela autoclave ou tero que ser descontaminadas antes que o material da cama seja removido e antes de serem lavadas. O
equipamento dever ser descontaminado de acordo com
as normas locais, estaduais ou federais antes de ser embalado para transporte ou remoo do local, para reparo
ou manuteno.
2. Deve-se desenvolver um procedimento para o caso de
respingos. Somente o pessoal adequadamente treinado e
equipado para trabalhar com materiais infecciosos dever
limpar os respingos. Respingos e acidentes que resultem
em uma exposio direta com materiais infecciosos devero ser imediatamente relatados ao chefe do laboratrio.
Avaliao mdica, vigilncia e tratamento devero ser providenciados e registros por escrito devero ser mantidos.
3. Antes de incinerados, todos os rejeitos provenientes das
salas de animais devero passar pela autoclave ou ser
tratados com outro mtodo de esterilizao.
77
SEO IV
4. Os materiais que no tiverem relao alguma com o experimento (por exemplo, plantas ou animais que no forem
ser utilizados no ensaio) no sero permitidos na sala.
1. Uniformes ou roupas especficos devero ser usados pelas
pessoas que entrarem na sala de animais. As vestimentas
tero toda a frente protegida. As roupas abotoadas na
frente no so adequadas. O uniforme dever ser retirado e deixado na sala de animais NBA-3. Antes de sair das
salas, as roupas ou os uniformes devero ser removidos
e adequadamente acondicionados e descontaminados
antes de lavados ou descartados (no caso de uniformes
descartveis).
2. O equipamento de proteo individual dever ser usado
de acordo com as determinaes da avaliao de riscos.
a. O equipamento de proteo individual dever ser
usado em todas as atividades envolvendo manipulaes de material infeccioso ou de animais infectados.
b. A equipe dever usar luvas ao manusear animais infectados. As luvas devero ser removidas assepticamente e autoclavadas juntamente com outros lixos
da sala de animais antes de descartadas.
c. Protetores respiratrios e para olhos/rosto devero ser
usados por todos que entrarem nas salas de animais.
d. Botas, sapatilhas ou pr-ps ou outro tipo de proteo para os ps e banhos desinfetantes para os ps
ou lava-ps devero ser avaliados e usados onde
forem indicados.
3. Podemos reduzir o risco de formao de aerossis infecciosos advindos da manipulao de animais infectados ou
dos materiais utilizados nas camas infectadas, se os animais forem colocados em sistemas de confinamento parcial, como caixas cobertas com filtros e paredes rgidas,
colocadas em locais com ventilao direcionada para o
interior das mesmas (por exemplo, cabines de fluxo laminar) ou outros sistemas similares de conteno primria.
78
SEO IV
4. As cabines de segurana biolgica e outros dispositivos

de conteno fsica devero ser usados ao conduzir procedimentos que possuam um alto risco de criao de aerossis. Esses incluem a necropsia de animais infectados,
coleta de tecidos, lquidos de animais ou ovos infectados
e inoculao intranasal de animais. Em um laboratrio
NBA-3, todo o trabalho dever ser realizado em uma barreira primria, caso contrrio as pessoas devero usar
protetores respiratrios dentro da sala.
1. A dependncia para os animais dever ser separada das
reas que so abertas ao trnsito irrestrito de pessoas
dentro do edifcio.
2. O acesso s dependncias dever ser limitado por meio
de portas que se fecham e se trancam automaticamente, com sistema de intertravamento ou leitura tica ou
carto magntico. A entrada de pessoal para a sala dos
animais dever ser realizada atravs de uma antecmara
pressurizada, que dever incluir chuveiro(s) e um vestirio para troca de roupa. Um acesso adicional com porta
dupla (air-lock) dever ser construdo ou uma autoclave com porta dupla dever existir no local para o fluxo
de suprimentos e rejeitos dentro e fora do laboratrio,
respectivamente. As portas para as salas de animais devero se abrir para dentro e se fechar automaticamente.
As portas internas da ante-sala dentro de uma sala para
animais devero ser abertas para fora ou deslizar vertical
ou horizontalmente.
3. As instalaes de um laboratrio de experimentao animal NBA-3 devero ser planejadas, construdas e mantidas de forma que facilitem a limpeza e a manuteno.
As superfcies das paredes, dos pisos e dos tetos devero
ser impermeveis gua. Selar juntas, fendas ou aberturas em paredes, pisos e tetos. Penetraes das linhas
de servio, tais como gua, luz, gs e outras devem ser
vedadas. Os espaos entre portas e esquadrias devero
79
SEO IV
4.
5.
6.
7.
8.
80
permitir um selamento para facilitar a descontaminao

do ambiente.
Cada sala para animais dever conter uma pia perto das
portas de sada, para lavagem das mos acionada automaticamente ou sem o uso destas. O sifo da pia dever
conter um desinfetante adequado aps o uso da mesma.
Acessrios internos, como fixao de luzes, dutos de ar
Qualquer janela dever ser resistente quebra. Em todos
os locais possveis, as janelas que porventura existirem
devero ser vedadas. Se as instalaes para animais possurem janelas que so abertas, estas devero conter telas
contra insetos.
Se houver sistema de drenagem no piso, este dever sempre conter um desinfetante adequado.
A ventilao instalada dever estar de acordo com a
ltima edio do Guide for Care and Use of Laboratory
Animals. Os sistemas de entrada de ar e exausto devem
ser interligados. O sistema cria um fluxo de ar direcionado, retirando o ar contaminado de dentro do laboratrio,
jogando-o para fora e ao mesmo tempo retirando o ar das
reas limpas e jogando-o para dentro do laboratrio. O
ar exaurido no pode recircular em nenhuma outra rea
do prdio. Filtrao ou outros tipos de tratamento do ar
exaurido podem no ser necessrios, mas devero ser
considerados, com base nos requisitos do local, nos microorganismos especficos manipulados e nas condies
de uso. O ar exaurido dever ser lanado para longe de
reas ocupadas e de entradas de ar ou poder ser filtrado
atravs de filtros HEPA. A equipe dever verificar se a direo do ar insuflado (para dentro das reas dos animais)
est apropriada. Recomenda-se o uso de monitores visuais que indiquem e confirmem o fluxo de ar direcionado
para dentro do recinto. Devemos considerar a instalao
de um sistema de controle de HVAC para evitar a pressurizao positiva nas reas onde esto os animais. Alar-
SEO IV
mes audveis devem ser considerados para evidenciar

qualquer falha no sistema de controle HVAC.
9. O ar filtrado pelo HEPA de uma cabine de segurana biolgica classe II poder recircular dentro da sala para animais
se a cabine for testada e aprovada anualmente. Quando
o ar exaurido das cabines de segurana biolgica classe II
for lanado para fora do ambiente de trabalho, atravs do
sistema de exausto do edifcio, as cabines devero estar
conectadas de maneira que evitem qualquer interferncia
no equilbrio do ar das cabines ou do sistema de exausto do edifcio (por exemplo, uma conexo metlica entre o exaustor das cabines e o que se prende ao duto dos
exaustores do edifcio). Quando as cabines de segurana
biolgica classe III forem utilizadas, elas devero estar
conectadas diretamente ao sistema de exausto. Se as cabines de classe III estiverem conectadas ao sistema de insuflao, isso dever ser feito de tal maneira que previna
a pressurizao positiva das cabines (veja o apndice A).
em uma mquina para a lavagem mecnica. A mquina
11. Dever existir uma autoclave dentro da sala de experimentao animal NBA-3, onde o risco est contido, para
descontaminao de lixo infeccioso antes de ser removido para outras reas do local.
12. Se houver um sistema de vcuo (por exemplo, central ou
local), cada conexo de servio dever possuir um sifo
contendo desinfetante lquido e um filtro HEPA em linha, colocado o mais prximo possvel de cada ponto de
uso ou da vlvula de servio. Os filtros devero ser instalados de tal forma que permitam a descontaminao e a
substituio dos mesmos no local.
evitando reflexos e brilhos que possam impedir a viso.
14. O projeto de edificao e os procedimentos operacionais
do laboratrio de experimentao animal NBA-3 devem
81
SEO IV
ser documentados. O local dever ser testado em funo do projeto e dos parmetros operacionais, para que
se verifique se realmente eles atendem a todas as necessidades antes que comecem a operar. Os locais devero
ser checados novamente pelo menos uma vez ao ano. Os
procedimentos neles existentes devero ser modificados
de acordo com a experincia operacional.
15. Protees adicionais ao meio ambiente (por exemplo,
chuveiros para a equipe, filtros HEPA para filtrao do ar
exaurido, conteno de outras linhas de servios e proviso da descontaminao dos efluentes) devero ser consideradas, se recomendadas devido s caractersticas dos
agentes manipulados, como determinado pela avaliao
do risco das condies locais ou por outros regulamentos
locais, estaduais ou federais.
O nvel de biossegurana animal 4 envolve as prticas adequadas para o trabalho com agentes perigosos ou exticos que exponha o indivduo a um alto risco de infeces que podem ser fatais,
alm de apresentarem um potencial elevado de transmisso por
aerossis ou de agentes relacionados com um risco de transmisso
desconhecido. O NBA-4 baseia-se nos requisitos de prticas, procedimentos, equipamentos de conteno e instalaes padro do
NBA-3. Os procedimentos devero ser desenvolvidos no prprio
local para direcionar as operaes especficas das cabines de segurana biolgica classe III ou no laboratrio escafandro.
A. Prticas Padro
1. Alm de normas, procedimentos e protocolos padro para
situaes de emergncia estabelecidos pela chefia do laboratrio, normas e procedimentos especiais devero ser desenvolvidos, quando necessrio, e aprovados pelo Comit
Institucional de Tratamento e Uso de Animais (IACUC)
e pelo Comit Institucional de Biossegurana (IBC).
2. O chefe do laboratrio dever limitar o acesso s salas dos
animais, permitindo o acesso ao menor nmero de pessoas possvel. As pessoas que receberem autorizao de
82
SEO IV
3.
4.
5.
6.
7.
8.
entrada, para trabalhar ou realizar algum tipo de servio,

devero ser avisadas em relao ao risco em potencial.
Um programa de vigilncia mdica adequado dever ser
adotado para todas as pessoas que entrarem em um laboratrio NBA-4. Esse programa dever incluir imunizaes, coleta para acompanhamento sorolgico, disponibilidade de aconselhamento ps-exposio e potencial
profilaxia.10 Em geral, as pessoas que podem estar passando por um crescente risco de adquirir a infeco ou
para quem as infeces possam ser perigosas no sero
permitidas dentro da sala para animais, a menos que procedimentos especiais possam eliminar os riscos extras. A
avaliao dever ser realizada pelo mdico do trabalho.
Um manual de biossegurana especfico para o local dever ser preparado ou adotado. A equipe do laboratrio
dever ser avisada sobre os riscos especiais, ler e seguir
as instrues sobre prticas e procedimentos.
proibido comer, beber, fumar, manusear lentes de contato e aplicar cosmticos. O alimento de uso humano dever ser guardado somente em reas designadas para tal
fim e no ser permitido dentro das salas para os animais
ou salas de procedimentos.
Todos os procedimentos devero ser realizados cuidadosamente para minimizar a produo de aerossis e borrifos.
Os equipamentos e as superfcies de trabalho na sala
devero ser rotineiramente descontaminados com desinfetante que possua ao comprovada, aps o trabalho
com agentes infecciosos e especialmente aps borrifos,
derramamentos ou outras contaminaes com materiais
infecciosos que tenham ocorrido.
Um procedimento para borrifos dever ser desenvolvido
e institudo. Somente o pessoal adequadamente treinado e equipado para esse tipo de trabalho dever limpar
os borrifos de materiais infecciosos. Borrifos e acidentes
que resultem em uma exposio direta com materiais infecciosos devero ser imediatamente relatados ao chefe
do laboratrio. Avaliao mdica, vigilncia e tratamento
83
SEO IV
devero ser providenciados e registros por escrito devero ser mantidos.

9. Todos os rejeitos provenientes das salas de animais (incluindo tecidos animais, carcaas e material da cama contaminado), outros materiais que sero descartados e as
roupas ou uniformes usados que iro ser encaminhados
para a lavanderia devero ser esterilizados em uma autoclave de porta dupla (veja B-4, a seguir). Recomendamos
a incinerao de materiais descartveis.
10. Normas quanto ao manuseio seguro de objetos perfurocortantes devero ser institudas.
a. Seringas, agulhas ou outros instrumentos perfurocortantes devero ser restritos sala dos animais e
usados somente quando no houver outra alternativa, como nos casos de injeo parenteral, coleta de
sangue ou aspirao de lquidos de animais de laboratrio e de garrafas de diafragma.
b. As seringas que possuem um envoltrio para a agulha ou sistemas sem agulhas e outros dispositivos de
c. Vasilhas plsticas devero ser substitudas por vasilhames de vidro sempre que possvel.
11. Um aviso de risco biolgico dever ser colocado na entrada da sala do laboratrio de experimentao animal,
quando agentes infecciosos estiverem presentes no local. O aviso de risco dever identificar o(s) agente(s)
infeccioso(s) em uso, relacionar o nome e o nmero do
telefone da pessoa responsvel e indicar os requisitos especiais para a entrada na sala dos animais (por exemplo,
necessidade de imunizao e do uso de respiradores).
12. As pessoas que cuidam dos animais de laboratrio e as
que do suporte ao programa devero receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais associados
ao trabalho, sobre as precaues necessrias para evitar
exposies e os procedimentos de avaliao da exposio.
A equipe dever receber cursos anuais de atualizao ou
treinamento adicional quando forem necessrias mudan84
SEO IV
as de normas ou procedimentos. Os registros de todo o

treinamento fornecido devero ser mantidos.
13. As caixas e gaiolas dos animais devero passar pela autoclave ou tero que ser descontaminadas antes que o
material da cama seja removido e antes de lavadas. Os
equipamentos e as superfcies de trabalho devero ser
rotineiramente descontaminados com desinfetante que
possua ao comprovada, aps o trabalho com materiais
infecciosos e especialmente depois de borrifos, derramamentos ou outras contaminaes com materiais infecciosos. Os equipamentos devero ser descontaminados
de acordo com qualquer regulamento local, estadual ou
federal antes de ser removido do local para reparo ou manuteno.
14. As pessoas responsveis pelo trabalho com animais infectados devero trabalhar em pares. Baseados na avaliao dos riscos (veja a seo V), procedimentos devero ser adotados, tais como o uso de caixas ou gaiolas de
conteno, realizao de trabalho somente com animais
anestesiados ou outros que visem a reduzir as possveis
exposies do trabalhador.
15. Os materiais no relacionados ao ensaio (por exemplo,
plantas e animais no utilizados) no sero permitidos
no local.
1. Medidas adicionais devero ser efetivadas para controle
do acesso (por exemplo, um sistema de guarda durante
24 horas para entrada e sada de pessoas). A equipe dever entrar ou sair do local somente atravs do vestirio e
das salas de banhos. Cada vez que sair do local, a equipe
dever tomar banho. A entrada ou a sada de pessoal por
antecmara pressurizada somente dever ocorrer em situaes de emergncia.
2. Em uma operao na cabine de segurana biolgica classe
III, a roupa do pessoal dever ser retirada no vestirio externo e deixada l mesmo. O traje laboratorial completo,
incluindo peas ntimas, calas e camisas ou macaces,
85
SEO IV
3.
4.
5.
6.
sapatos e luvas, dever ser providenciado e usado pelo

pessoal. Na sada, as pessoas devero retirar os trajes laboratoriais no vestirio interno antes de entrar na sala
de banho. A roupa suja (usada) dever ser esterilizada na
autoclave.
Nos procedimentos operacionais em laboratrios NBA4, dever ser necessria a mudana completa de roupa.
Um banho ser necessrio aps a remoo da roupa descontaminada. As roupas sujas do laboratrio devero ser
autoclavadas antes de lavadas.
Os materiais e suprimentos que forem introduzidos no
laboratrio devero passar por uma autoclave de porta dupla ou por uma cmara de fumigao. Depois que
a porta externa estiver trancada, as pessoas dentro do
laboratrio devero abrir a porta interna e retirar os materiais. As portas da autoclave e da cmara de fumigao
devero ser interligadas de maneira que a porta externa
s seja aberta depois que o ciclo de esterilizao tenha
sido concludo ou depois que a cmara de fumigao tenha sido descontaminada.
Um sistema para notificao de acidentes, incidentes, exposies e absentesmo deve ser estabelecido, bem como
um outro sistema para a vigilncia mdica de doenas
potencialmente associadas ao trabalho em laboratrio.
Um aspecto essencial para essa vigilncia/notificao a
disponibilidade de um local para quarentena, isolamento
e atendimento mdico de pessoas com suspeitas de contaminao.
As amostras sorolgicas coletadas devero ser analisadas
periodicamente. Os resultados devero ser comunicados
aos participantes.

1. Os animais infectados com microorganismos da classe de
risco 4 devero ser alojados dentro de cabines de segurana biolgica classe III em um laboratrio NBA-4. Em
um laboratrio NBA-4 escafandro, toda a equipe dever
vestir macaces com presso positiva e ventilados com
86
SEO IV
um sistema de suporte de vida. Os animais infectados

devero ser alojados em um sistema de conteno parcial
(como em caixas abertas colocadas em locais ventilados,
caixas de paredes slidas, possuindo um sistema de ventilao e exausto feitas atravs de filtros e abertas em
fluxos laminares ou outros sistemas de conteno primria equivalentes).
2. O uso de materiais descartveis que no requerem limpeza, incluindo caixas e gaiolas de animais, dever ser
levado em considerao. Esses materiais descartveis
devero passar pela autoclave na sada do laboratrio e
depois incinerados.
Os laboratrios NBA-4 podero ser includos como uma parte
integrante dos laboratrios NBA-4 de cabine ou aos laboratrios
NBA-4 de escafandro, como descrito na seo III deste documento. Os requisitos para instalao descritos na seo laboratrio
NB-4 devero ser utilizados juntamente com o uso das caixas descritas na seo de equipamentos.
87
SEO IV
Tabela 2. Resumo dos nveis de biossegurana recomendados

para as atividades nas quais animais vertebrados infectados
naturalmente ou experimentalmente so utilizados
BSL
Agentes
Desconhecidos por
causarem doenas
em adultos humanos
sadios.
Associados com doenas humanas. Risco: exposio cutnea, ingesto, exposio da membrana
mucosa.
Agentes nativos ou
exticos com elevado
potencial de transmisso por aerossis;
doenas que podem
causar srios danos
sade.
Agentes exticos ou
perigosos que imponham alto risco de
doena fatal, transmisso por aerossis ou relacionada
a agentes com risco
de transmisso desconhecido.
88
Equipamentos de
Instalaes
Segurana
(Barreiras Secundrias)
(Barreiras Primrias)
Cuidados com o animal e as Cuidados normais solicitados Instalao padro para animais:
-nenhuma recirculao do ar
prticas padro de gerencia- de cada espcie.
mento, incluindo prograexaurido;
mas de vigilncia mdica
-recomendao de fluxo de ar
adequados.
direcionado;
-recomendao de pia para lavagem das mos.
Prticas de NBA-1 mais:
Equipamento de NBA-1 mais Instalaes de NBA-1 mais:
-acesso limitado;
barreiras primrias: equipa- -autoclave disposio;
mento de conteno adequado -pia para lavagem das mos dentro
-avisos de risco;
-precauo com objetos para espcies animais; PPES:
da sala de animais;
perfurocortantes;
jalecos, luvas, proteo facial - uso de lavagem mecnica das
-manual de biossegurana; e respiradores quando ne- caixas e gaiolas.
-descontaminao de todo cessrios.
o lixo infeccioso e de caixas
e gaiolas de animais antes
da lavagem.
Prticas de NB-2 mais:
Equipamento de NBA-2 mais:
-acesso controlado;
-acesso controlado;
-equipamento de conteno para
-descontaminao de todo -descontaminao das roupas
manuteno dos animais;
-cabines SB de classe I ou II para
o lixo;
antes de serem lavadas;
manipulaes (inoculao, ne-descontaminao da roupa -descontaminao das caixas
usada no laboratrio antes
e gaiolas antes de o material
cropsia) que possam criar aerosde ser lavada;
da cama ser removido;
sis infecciosos. PPEs: proteo
respiratria adequada.
-amostra sorolgica.
-lavagem dos ps com desinfetante.
Instalaes de NBA-2 mais:
-separao fsica dos corredores
de acesso;
-fechamento automtico, porta
dupla de acesso;
-linhas de penetrao seladas;
-janelas vedadas;
-autoclave presente no local.
Equipamento de NBA-3 mais: Instalaes de NBA-3 mais:
-entrada atravs do vesti - equipamento de mxima -edifcio separado ou rea isorio para troca de roupa conteno (CSB classe III ou
lada;
onde a roupa pessoal rede conteno parcial junto -sistemas de insuflao e exausto,
movida e a do laboratrio, com macaco pressurizado
vcuo e sistemas de descontavestida. Banho na sada; positivamente com ar) usado
minao;
-todos os lixos devero ser para todas as atividades e os -outros requisitos enfatizados
descontaminados antes da procedimentos.
no texto.
remoo do local.
Prticas
SEO V
Avaliao dos Riscos
A palavra risco indica a probabilidade que um dano, um ferimento ou uma doena ocorra. No contexto dos laboratrios biomdicos e de microbiologia, a avaliao do risco se concentra
primariamente na preveno de infeces relacionadas aos laboratrios. Ao enderear atividades laboratoriais que envolvam materiais infecciosos ou potencialmente infecciosos, a avaliao do
risco um exerccio essencial e produtivo. Ele auxilia a designar
os nveis de biossegurana (instalaes, equipamentos e prticas)
que reduziro, para um risco mnimo, a exposio de trabalhadores e do meio ambiente a um agente perigoso. A inteno desta seo fornecer um guia e estabelecer parmetros para a seleo do
apropriado nvel de biossegurana.
A avaliao do risco pode ser qualitativa ou quantitativa. Na
presena de riscos conhecidos (por exemplo, nveis residuais de
gs de formaldedo depois da descontaminao do laboratrio),
a avaliao quantitativa poder ser realizada. Mas, em muitos
casos, os dados quantitativos estaro incompletos ou ausentes
(por exemplo, a investigao de um agente desconhecido ou de
uma amostra sem rtulo). Os tipos, os subtipos e as variantes dos
agentes infecciosos envolvendo vetores diferentes ou raros, a dificuldade de avaliar as medidas de um potencial de amplificao do
agente e as singulares consideraes dos recombinantes genticos
so alguns dos vrios desafios na conduo segura de um laboratrio. Diante de tal complexidade, nem sempre os mtodos de
amostragem quantitativa significativos esto nossa disposio.
Dessa forma, o processo de avaliao do risco para o trabalho com
89
Seo v
avaliao dos riscos
materiais biolgicos perigosos pode no depender de um algoritmo prescrito.

O diretor do laboratrio ou o principal pesquisador dever ser
o responsvel pela avaliao dos riscos que implique no estabelecimento de nveis de biossegurana para o trabalho. Isso dever ser
realizado em colaborao com o Institutional Biosafety Committee
(e/ou outros profissionais ou instituies, se necessrio) para assegurar a obedincia s normas e regras estabelecidas.
Ao se realizar a avaliao do risco qualitativo, todos os fatores de risco devero ser identificados e explorados. Informaes
relacionadas devero estar disponveis na forma de um manual.
Consultas s Normas do NIH de DNA Recombinante, Normas de
Biossegurana em Laboratrios Canadenses e Normas de Segurana da Organizao Mundial da Sade devero ser consideradas. Em alguns casos, devemos confiar nas fontes de informaes,
como os dados de campo de um expert no assunto. Essa informao dever ser interpretada pela sua tendncia em aumentar ou
diminuir o risco de uma infeco adquirida em laboratrio.1
O desafio da avaliao do risco se encontra naqueles casos em
que uma informao completa sobre esses fatores no est nossa disposio. Uma abordagem conservadora geralmente aconselhada quando as informaes forem insuficientes, forando a
um julgamento subjetivo. As Precaues Universais devero sempre ser recomendadas.
Os fatores de interesse em uma avaliao dos riscos incluem:

90
A patogenicidade do agente infeccioso ou suspeito, incluindo a incidncia e a gravidade da doena (por exemplo, morbidade mdia contra uma mortalidade alta, doena aguda versus doena crnica). Quanto mais grave a
potencialidade da doena adquirida, maior ser o risco.
Por exemplo, o Sthaphilococcus aureus raramente provoca
uma doena grave ou fatal em um indivduo contaminado em um laboratrio e est relegado ao NB-2. J vrus
como o ebola, Marburg e da febre de Lassa, que provocam
doenas com alta taxa de mortalidade, para as quais no
existem vacinas ou tratamentos, so trabalhadas em um
Seo v
avaliao dos riscos
NB-4. Porm, a gravidade da doena precisa ser amenizada por outros fatores. O trabalho com um vrus humano
de imunodeficincia (HIV) e com o vrus da hepatite B
tambm feito em um NB-2, embora eles possam causar
uma doena potencialmente fatal. Mas esses vrus no
so transmitidos por meio de aerossis, e a incidncia de
uma infeco adquirida em laboratrio extremamente
baixa para o HIV. No caso da hepatite B, j existe uma
vacina eficaz contra esta patologia.
A via de transmisso (por exemplo, parenteral, via area ou por ingesto) de agentes isolados recentemente
pode no estar definitivamente estabelecida. Os agentes
que podem ser transmitidos via aerossol tm provocado
grande parte das infeces laboratoriais. Ao planejar o
trabalho com um agente relativamente no caracterizado e com um modo de transmisso desconhecido, o mais
seguro considerar o potencial de transmisso por via
aerossol. Quanto maior o potencial do aerossol, maior o
risco.
A estabilidade do agente um aspecto que envolve no
somente a infectividade por aerossis (por exemplo, por
bactrias formadoras de esporos), mas tambm a capacidade do agente de sobreviver por um tempo extra no
meio ambiente. Fatores como a dissecao, a exposio
luz solar ou ultravioleta ou a exposio a desinfetantes
qumicos devero ser considerados.
A dose infecciosa do agente um outro fator a ser considerado. A dose infecciosa pode variar de uma a milhares de unidades. A natureza complexa da interao dos
microorganismos e do hospedeiro apresenta um desafio
significativo at mesmo para o mais saudvel e imunizado trabalhador de laboratrio, podendo impor um srio
risco queles com menos resistncia. O grau de imunizao do trabalhador do laboratrio est diretamente relacionado sua susceptibilidade doena provocada por
um agente infeccioso.
A concentrao (nmero de organismos infecciosos por
unidade de volume) ser importante na determinao do
91
Seo v
avaliao dos riscos
92
risco. Essa determinao dever considerar o meio que

contm o organismo (por exemplo, tecido slido, sangue
viscoso, escarro ou meio lquido) e a atividade laboratorial planejada (por exemplo, amplificao, sonificao
ou centrifugao do agente). O volume do material concentrado a ser manipulado tambm importante. Na
maioria dos casos, os fatores de risco aumentam com o
aumento do volume de trabalho de microorganismos de
alta titulao, uma vez que um manuseio adicional dos
materiais freqentemente solicitado.
A origem do material potencialmente infeccioso tambm fundamental para a avaliao dos riscos. A palavra
origem pode se referir localizao geogrfica (por exemplo, domstico ou originrio de outros pases), hospedeiro (por exemplo, animal ou ser humano infectado ou
no) ou natureza da fonte (por exemplo, potencialmente
zoontica ou associada a um outro surto de doena). Sob
outro ngulo, esse fator pode tambm levar em considerao o potencial dos agentes que ameaam as aves e os
animais de criao.
A disponibilidade de dados gerados por estudos animais,
na falta de dados humanos, poder fornecer informaes
teis para uma avaliao do risco. As informaes sobre a
patogenicidade, a infectividade e a via de transmisso em
animais podem proporcionar informaes valiosas. Porm, sempre devemos tomar cuidado em traduzir dados
de uma espcie animal para os de outras espcies.
A disponibilidade de uma profilaxia eficaz estabelecida
ou de uma interveno teraputica outro fator importante a ser considerado. A forma mais comum de profilaxia a imunizao com uma vacina eficiente. A avaliao
do risco inclui a determinao da disponibilidade de imunizaes eficazes. Em alguns casos, a imunizao pode
afetar o nvel de biossegurana (por exemplo, o vrus Junin do grupo NB-4 pode ser trabalhado no NB-3 por um
trabalhador imunizado). A imunizao tambm pode ser
passiva (por exemplo, o uso de uma imunoglobulina sorolgica nas exposies ao HBV). Apesar de importante,
Seo v
avaliao dos riscos
a imunizao somente servir como uma camada adicional de proteo mediante os controles de engenharia, as
prticas e os procedimentos padro e o uso de equipamentos de proteo individual. Ocasionalmente, a imunizao ou a interveno teraputica (terapia com antibiticos ou antiviral) pode ser particularmente importante
nas condies de campo. A oferta de imunizaes parte
do gerenciamento do risco.
A vigilncia mdica assegura que as normas de segurana decididas realmente produzam os resultados positivos
esperados. A vigilncia mdica tambm parte da administrao do risco. Podemos incluir o banco de soro, o
monitoramento da condio de sade do trabalhador e a
participao em um gerenciamento ps-exposio.
A avaliao do risco tambm pode incluir uma avaliao
da experincia e do nvel de capacitao das pessoas expostas a riscos, como os laboratoristas e as pessoas que
cuidam dos animais, da limpeza e da manuteno (veja
a seo III). Uma educao adicional tambm pode ser
necessria para garantir a segurana das pessoas que trabalham em cada um dos nveis de biossegurana.
Os agentes infecciosos cujo risco avaliado freqentemente
sero classificados em uma destas categorias:
Materiais contendo agentes infecciosos conhecidos.
As caractersticas da maioria dos agentes infecciosos so conhecidas. As informaes teis para a avaliao do risco podem ser
obtidas com pesquisas laboratoriais, vigilncia da doena e estudos epidemiolgicos. Os agentes infecciosos conhecidos por causarem infeces associadas a laboratrio esto includos no resumo das caractersticas dos agentes, neste volume (veja a seo
VII). Outras fontes incluem o manual do American Public Health
A ssociation, Control of Communicable Diseases.2 Os artigos literrios sobre infeces adquiridas em laboratrio tambm podero
ser teis.3, 4, 5, 6, 7, 8
Materiais contendo agentes infecciosos desconhecidos. O desafio aqui estabelecer o nvel de biossegurana mais
adequado, tendo em mos somente informaes limitadas. Com
93
Seo v
avaliao dos riscos
freqncia essas sero amostras clnicas. Algumas perguntas que

podero auxili-lo em uma avaliao de risco so as seguintes:
1. Por que um agente infeccioso considerado suspeito?
2. Quais so os dados epidemiolgicos disponveis? Qual
via de infeco indicada? Qual o ndice de morbidade
ou de mortalidade associado ao agente?
3. Quais so os dados mdicos disponveis?
As respostas a essas perguntas podem identificar o agente ou
o agente substituto cujas caractersticas so encontradas no resumo das caractersticas dos agentes e podero ser utilizadas para
determinar um nvel de biossegurana. Na ausncia de dados concretos, recomenda-se uma abordagem conservadora.
Materiais contendo molculas de DNA recombinantes.
Essa categoria de agentes inclui os microorganismos que foram
geneticamente modificados por tecnologias do DNA recombinante. Essas tecnologias continuam a ser desenvolvidas rapidamente. Os projetos experimentais designados para extrair novos vrus, bactrias, levedo e outros microorganismos recombinantes se
tornaram comuns nos dias de hoje. muito provvel que futuras
aplicaes da tecnologia do DNA recombinante produziro novos
vrus hbridos. A publicao do National Institutes of Health chamada Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecules9 um excelente ponto de referncia para a seleo de um nvel
de biossegurana adequado para o trabalho que envolva microorganismos recombinantes.
Ao selecionar um nvel de biossegurana apropriado para este
trabalho, talvez o maior desafio seja avaliar o aumento do risco
biolgico associado a uma modificao gentica em particular. Em
grande parte dos casos, a seleo de um nvel de biossegurana
adequado comea ao se estabelecer a classificao dos vrus no
modificados. Entre os vrus recombinantes, agora rotineiramente
desenvolvidos, esto o adenovrus, alfavrus, retrovrus, vrus vacnia, herpesvrus e outros designados para expressar os produtos
de genes heterlogos. Porm, a natureza da modificao gentica
e a quantidade de vrus devero ser cuidadosamente considerados
94
Seo v
avaliao dos riscos
ao selecionar um nvel de biossegurana adequado para o trabalho

com um vrus recombinante.
Dentre os pontos a serem considerados no trabalho com os microorganismos recombinantes esto:

O gene inserido codifica uma toxina conhecida ou uma

toxina relativamente descaracterizada?
A modificao possui um potencial para alterar o alcance
do hospedeiro ou o tropismo celular do vrus?
A modificao possui um potencial para aumentar a capacidade de replicao do vrus?
O gene inserido codifica um oncogene conhecido?
O gene inserido possui potencial para alterar o ciclo celular?
O DNA viral se integra ao genoma do hospedeiro?
Qual a probabilidade de que cepas de vrus competentes replicados sejam geradas?
A lista de perguntas no significa que seja uma questo inclusiva. Pelo contrrio, elas servem como um exemplo de informao necessrio para julgar se um nvel de biossegurana maior
necessrio para o trabalho com microorganismos geneticamente
modificados. J que em muitos casos as respostas para essas perguntas no sero definitivas, importante que a empresa possua
um Comit Institucional de Biossegurana constitudo e informado, como enfatizado pelos estatutos do NIH, para verificar a avaliao do risco.
Materiais que possam conter ou no agentes infecciosos desconhecidos. Na ausncia de informaes que possam sugerir a infectividade do agente, deve-se considerar as precaues universais.
Estudos Animais. Estudos laboratoriais que envolvam animais podero apresentar muitos tipos diferentes de riscos fsicos,
biolgicos e ao meio ambiente. Os riscos especficos presentes
em qualquer dependncia para animais em particular so nicos,
variando de acordo com as espcies envolvidas e com a natureza
da pesquisa desenvolvida. A avaliao do risco quanto ao perigo
biolgico dever se concentrar particularmente no potencial das
95
Seo v
avaliao dos riscos
instalaes animais para uma aumentada exposio de patgenos

humanos e aos agentes zoonticos.
Os prprios animais podem introduzir novos perigos biolgicos nas instalaes. As infeces latentes so mais comuns em
animais capturados no campo ou em animais vindos de populaes no selecionadas. Por exemplo, o vrus-b do macaco apresenta um risco latente aos indivduos que lidam com smios. As vias
de transmisso animais devem tambm ser consideradas na avaliao do risco. Os animais que transmitem vrus por disseminao respiratria ou disseminao na urina ou nas fezes so muito
mais perigosos do que aqueles que no o fazem. As pessoas que
lidam com animais experimentais em locais de pesquisas e trabalham com agentes infecciosos apresentam um risco muito maior
de exposio devido s mordidas, aos arranhes e aos aerossis
provocados por eles. A seo IV descreve prticas e instalaes
aplicveis ao trabalho de animais infectados por agentes listados
nos nveis de biossegurana de 1-4.1
Outras aplicaes. O processo de avaliao dos riscos descritos tambm se aplica s operaes laboratoriais que no envolvam o uso de agentes primrios de doenas humanas. verdade
que os estudos microbiolgicos de patgenos especficos de hospedeiros animais, do solo, da gua, dos alimentos, das raes e de
outros materiais naturais ou industrializados impem riscos consideravelmente menores para os laboratoristas. Ainda assim, os
microbiologistas e outros cientistas que trabalhem com esses materiais podem achar de grande valor tais prticas, equipamentos
de conteno e recomendaes para as instalaes descritas neste
livro, para o desenvolvimento de padres operacionais que atendam a todas as necessidades de suas prprias avaliaes.
96
SEO VI
Nveis de Biossegurana
Recomendados para
Agentes Infecciosos e
Animais Infectados
A seleo de um nvel de biossegurana adequado para o trabalho envolvendo um agente ou um estudo animal em particular
depende de um nmero de fatores (veja a seo V, Avaliao dos
Riscos). Alguns desses fatores mais importantes so a virulncia,
a patogenicidade, a estabilidade biolgica, a rota de disseminao
e a transmissibilidade do agente; a natureza ou a funo do laboratrio; os procedimentos e as manipulaes envolvendo o agente; a endemicidade do agente e a disponibilidade de vacinas ou de
medidas teraputicas eficazes.
A relao sumria dos agentes apresentada nesta seo proporciona um guia para a seleo dos nveis de biossegurana adequados. Tambm se encontram relacionadas nesta seo as informaes especficas sobre riscos laboratoriais relacionados com um
agente em particular e as recomendaes sobre uma conduta segura de procedimentos que possam reduzir significativamente o
risco de doenas associadas ao trabalho laboratorial. As relaes
sumrias dos agentes incluem um ou mais dos seguintes critrios:
o agente um fator de risco comprovado para os trabalhadores
que manipulam materiais infecciosos (por exemplo, vrus da hepatite B, M. tuberculosis); o potencial para as infeces associadas ao
trabalho laboratorial elevado mesmo na falta de um documento
prvio das infeces adquiridas em laboratrio (por exemplo, arbovrus exticos) ou as conseqncias da infeco sero graves.
As recomendaes para o uso de vacinas e toxides esto includas nas relaes sumrias dos agentes, assim como os produtos
licenciados disponveis, alm dos produtos em investigao pelo
Investigational New Drug (IND) (veja o apndice B, Imunoprofila-
97
Seo vi
nveis de biossegurana recomendados para agentes infecciosos e animais infectados
xia). Quando aplicvel, as recomendaes para o uso desses produtos sero baseadas nas recomendaes do Public Health Service
Advisory Committee on Immunization Practice e so especficas s
pessoas que esto expostas a esse tipo de risco, que trabalham em
laboratrio ou as que tm de entrar em reas laboratoriais. Essas
recomendaes especficas de maneira alguma devero impedir o
uso rotineiro desses produtos, como o toxide tetnico-diftrico,
a vacina contra plio, a vacina contra influenza e outras, porque o
risco potencial de exposio da comunidade independe de quaisquer riscos laboratoriais. Precaues adequadas devero ser tomadas na administrao de vacinas atenuadas de vrus vivo em indivduos com sistema auto-imune alterado ou com outra condio
mdica (por exemplo, gravidez), nos quais uma infeco viral pode
resultar em conseqncias adversas.
As avaliaes dos riscos e os nveis de biossegurana recomendados nas relaes sumrias dos agentes referem-se a uma populao de indivduos imunocompetentes. As pessoas com a imunocompetncia alterada podero ser expostas gradativamente
aos riscos. A imunodeficincia pode ser hereditria, congnita ou
induzida por um nmero de doenas neoplsicas ou infecciosas,
por terapia ou por radiao. O risco de se tornar infectado ou a
conseqncia de uma infeco podem tambm ser influenciados
por fatores, tais como: idade, sexo, raa, gravidez, cirurgias (por
exemplo, esplenectomia, gastrostomia), predisposio a doenas
(por exemplo, diabetes, lpus eritematoso) ou uma funo fisiolgica alterada. Estas e outras variveis devero ser consideradas
na aplicao das avaliaes dos riscos s atividades especficas dos
indivduos selecionados.
O nvel de biossegurana escolhido para um agente baseado
nas atividades associadas ao crescimento e manipulao das quantidades e concentraes dos agentes infecciosos requeridos para realizar a identificao ou a tipagem. Se as atividades com os materiais infecciosos provocarem um menor risco aos trabalhadores do
que aquelas atividades associadas com a manipulao de culturas,
recomenda-se um nvel de biossegurana menor. Por outro lado, se
as atividades envolverem grandes volumes e/ou altas concentraes (quantidades de produo) ou se as manipulaes geralmente
98
Seo vi
provocarem a formao de aerossis ou que sejam intrinsecamente

perigosas, podem ser indicadas precaues individuais especficas
ou se elevar os nveis de conteno primria a secundria.
O termo quantidades de produo se refere a grandes volumes
ou altas concentraes de agentes infecciosos considerados volumosos em relao quelas usadas para a identificao e a tipagem. A propagao e a concentrao dos agentes infecciosos, como
ocorre na fermentao em grande escala, na produo de antgenos e vacinas e em inmeras atividades comerciais e de pesquisa,
lidam claramente com massas significativas de agentes infecciosos
que so considerados quantidades de produo. Porm, em termos
de um risco potencialmente aumentado em funo da massa de
agentes infecciosos, impossvel definir como quantidades de produo os volumes ou as concentraes finitas de qualquer agente.
Portanto, cabe ao diretor do laboratrio realizar uma avaliao das
atividades conduzidas e das prticas selecionadas, dos equipamentos de conteno e das instalaes apropriadas ao risco, independente do volume ou da concentrao do agente envolvido.
Haver casos em que o diretor do laboratrio ter que selecionar um nvel de biossegurana maior que o recomendado. Por
exemplo, um nvel de biossegurana maior poder ser indicado
pela natureza nica da atividade proposta (por exemplo, a necessidade de uma conteno especial para aerossis gerados experimentalmente para estudos de inalao) ou pela proximidade
das reas de risco do laboratrio (por exemplo, um laboratrio de
diagnsticos localizado prximo s reas de atendimento de pessoas). Da mesma forma, um nvel de biossegurana recomendado
pode ser adaptado para compensar a ausncia de certas protees
recomendadas. Por exemplo, nas situaes em que recomendado
o nvel de biossegurana 3, pode-se conseguir um nvel satisfatrio de proteo nas operaes rotineiras ou repetitivas (por exemplo, procedimentos para diagnstico envolvendo a reproduo de
um agente para identificao, tipagem e teste de susceptibilidade)
nos laboratrios onde as caractersticas construtivas satisfaam
as recomendaes para o nvel de biossegurana 2, providos das
boas prticas microbiolgicas, de prticas especiais e de equipamentos de segurana para que o nvel de biossegurana 3 seja rigorosamente seguido.
99
Seo vi
Um exemplo envolve o trabalho com o vrus da imunodeficin

cia humana (HIV). O trabalho de rotina para o diagnstico do vrus com amostras clnicas pode ser feito com segurana em um
nvel de biossegurana 2, usando as prticas e os procedimentos
do nvel de biossegurana 2. O trabalho de pesquisa (incluindo
co-cultivo, estudos de replicao do vrus ou manipulaes envolvendo o vrus concentrado) pode ser feito em instalaes NB-2,
usando as prticas e os procedimentos de NB-3. As atividades de
produo de vrus, incluindo as concentraes virais, requerem
instalaes NB-3 e o uso de prticas e procedimentos de NB-3
(veja o resumo dos agentes).
A deciso de adaptar as recomendaes do nvel de biossegurana 3, como foi feito no exemplo citado, dever ser tomada somente pelo diretor do laboratrio. Essa adaptao, porm, no
indicada para operaes ou atividades de produo de agentes em
que os procedimentos freqentemente so mudados. O diretor do
laboratrio tambm dever ter uma ateno especial ao estabelecer procedimentos de segurana para os materiais que possam
conter um agente suspeito. Por exemplo, soro de origem humana
pode conter vrus da hepatite B e, dessa forma, todo o sangue ou
os fluidos derivados do sangue devero ser manuseados sob condies que evitem ao mximo a exposio cutnea, da membrana
mucosa ou parenteral do pessoal. O escarro enviado ao laboratrio para o ensaio do bacilo da tuberculose dever ser manipulado
sob condies que evitem a formao de aerossis durante a manipulao dos materiais clnicos ou das culturas.
Os agentes infecciosos que atendam aos critrios anteriormente estabelecidos esto relacionados pela categoria do agente
na seo VII. Para usar esses sumrios, primeiro localize o agente
na lista pela categoria adequada ao mesmo. Segundo, utilize as
prticas, os equipamentos de segurana e o tipo de instalao recomendado nas relaes dos agentes, como descrito na seo VII
para o trabalho com materiais clnicos, culturas, agentes infecciosos ou animais infectados.
O diretor do laboratrio tambm ser o responsvel pela avaliao dos riscos e pela utilizao adequada das prticas, dos equipamentos de conteno e das instalaes para os agentes no includos na lista dos agentes.
100
SEO VII
Relao dos Agentes
Seo VII-A: Agentes Bacterianos

Agente: Bacillus anthracis
Numerosos casos de carbnculo adquiridos em laboratrio, que
acontecem primariamente em locais onde so conduzidas pesquisas do antraz, tm sido relatados.1, 2 Nenhum caso de antraz que
no esteja associado a laboratrio foi relatado nos Estados Unidos
desde o final dos anos 50, quando a vacina contra o carbnculo foi
introduzida. Todo trabalho com o B. anthracis requer consideraes de segurana especiais devido ao seu uso potencial no terrorismo biolgico. Os animais naturalmente e experimentalmente
infectados oferecem um risco potencial equipe do laboratrio e
aos tratadores de animais.
Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente no
sangue, em exudatos de leso de pele, no lquido cerebroespinhal,
no lquido pleural, no escarro e raramente na urina e nas fezes. O
contato direto e indireto da pele intacta e rachada com culturas
e superfcies laboratoriais contaminadas, inoculaes parenterais
por acidente, e raramente por aerossis infecciosos, considerado
como risco primrio para os trabalhadores de um laboratrio.
Precaues Recomendadas: As prticas, os equipamentos
de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 devero ser os procedimentos indicados para as atividades que utilizem materiais clnicos e quantidades de culturas infecciosas para
diagnstico. As prticas, os equipamentos de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana animal 2 so os recomenda-
101
SEO VII
relao dos agentes
dos para estudos que utilizem roedores de laboratrio infectados

experimentalmente. J as prticas, os equipamentos de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 3 so indicados
para o trabalho que envolva quantidades ou concentraes de produo de culturas e para as atividades com um alto potencial para
a produo de aerossis.
Observao: Uma vacina licenciada est disponvel por meio
dos Centers for Disease Control and Prevention. Porm, a imunizao de toda a equipe no recomendada a no ser que o freqente
trabalho com amostras clnicas ou culturas para diagnstico esteja
previsto (por exemplo, laboratrio de diagnstico de doena animal). Nessas dependncias, a imunizao desse agente pode ser
obtida junto ao CDC. J para a exportao, ligue para o Department of Commerce. necessrio um registro do laboratrio com
o CDC antes de enviar ou receber esse agente. Uma licena para
a importao ou o transporte domstico pode ser obtida com a
USDA/APHIS/VS.
Agente: Bordetella pertussis
O Bordetella pertussis, um patgeno presente no sistema respiratrio humano e de distribuio mundial, o agente causador da
coqueluche. A doena ocorre tipicamente na infncia; entretanto,
o agente tem sido cada dia mais associado com a doena em adultos.3, 4, 5 Vrios surtos em trabalhadores da rea da sade foram relatados na literatura.6, 7 Adolescentes e adultos com doena atpica
ou sem diagnstico podem servir como reservatrios da infeco
e podem transmitir o patgeno para recm-nascidos e crianas.8
Oito casos de infeco em adultos pelo B. pertussis foram documentados em um instituto de grandes pesquisas. Os indivduos
infectados no trabalhavam diretamente com o microorganismo,
mas possuam um acesso aos espaos em comum de um laboratrio onde o agente era manipulado. Um caso de transmisso secundria para uma pessoa da famlia foi tambm documentado.9
Um incidente semelhante ocorreu em uma grande universidade
do meio-oeste dos Estados Unidos, que resultou em dois casos documentados de infeco adquirida em laboratrio e um caso documentado de transmisso secundria.10 Outras infeces com o B.
pertussis adquiridas em laboratrio foram relatadas, assim como
102
SEO VII
relao dos agentes
a transmisso de adulto para adulto no local de trabalho.11, 12 As

infeces adquiridas em laboratrio resultantes de manipulao
de amostras clnicas ou substncias isoladas no foram relatadas.
A incidncia dessa infeco disseminada no ar influenciada pela
intimidade e freqncia da exposio de indivduos susceptveis.
Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente em
secrees respiratrias, mas no encontrado no sangue ou tecido. Uma vez que o modo de transmisso via respiratria, quanto
maior a gerao de aerossis, durante a manipulao de culturas
ou de suspenses concentradas do agente, maior ser o risco.
de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 so
recomendados para todas as atividades que envolvam a manipulao de materiais ou culturas conhecida ou potencialmente infecciosas. J o nvel de biossegurana animal 2 dever ser usado
para o alojamento de animais. Os dispositivos e equipamentos de
conteno primria (por exemplo, cabines de segurana biolgica, conchas de segurana para centrfugas ou centrfugas de segurana especialmente projetadas) devero ser utilizados para as
atividades que provavelmente iro causar a formao de aerossis
potencialmente infecciosos. As prticas, os procedimentos e as
dependncias do nvel de biossegurana 3 so indicados para produes em grande escala.
Observao: As vacinas contra a coqueluche esto disponveis, mas no so atualmente recomendadas para uso em adultos.
Sugere-se ao leitor consultar as recomendaes atuais do Advisory
Committee on Immunization Practices (ACIP), publicada no CDC
Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), para a vacinao
de adultos contra a coqueluche.
Transferncia do Agente: A licena de importao desse
agente dever ser obtida junto ao CDC.
Agente: Brucella (B. abortus, B. canis, B. melitensis, B. suis)
A brucelose continua sendo a infeco bacteriana associada a
laboratrio mais comumente relatada.13, 14, 15 O B. abortus, o B. canis, o B. melitensis e o B. suis tm provocado vrias doenas em tra-
103
SEO VII
relao dos agentes
balhadores de laboratrios.16, 17, 18 A hipersensibilidade aos antgenos da Brucella tambm prejudicial equipe do laboratrio.
Casos ocasionais tm sido atribudos exposio a animais infectados experimentalmente ou naturalmente e aos seus tecidos.
Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente no
sangue, no lquido cerebroespinhal, no smen e ocasionalmente na urina. A maioria dos casos associados a laboratrio ocorreu em dependncias para pesquisas e envolveu a exposio ao
agente Brucella largamente produzido. Vrios casos em laboratrios clnicos tambm foram constatados em culturas bacteriolgicas desprezadas.19 O contato direto da pele com culturas ou com
amostras clnicas infecciosas de animais (por exemplo, sangue,
secrees uterinas) est comumente envolvido nesses casos. Os
aerossis formados durante os procedimentos laboratoriais tm
provocado grandes surtos.20, 21 Pipetagem com a boca, inoculaes
parenterais acidentais e sprays lanados nos olhos, nariz e boca
tambm tm provocado infeces.
Precaues Recomendadas: Recomendam-se as prticas do
nvel de biossegurana 2 para atividades que envolvam amostras
clnicas de origem humana ou animal contendo ou potencialmente contendo Brucella spp. patognico. J as prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 3
e do nvel de biossegurana animal 3 so recomendados, respectivamente, para todas as manipulaes de culturas do Brucella spp.
patognico relacionadas neste resumo e para estudos de animais
experimentais.
Observao: Embora as vacinas humanas contra a brucelose
tenham sido desenvolvidas e testadas em outros pases com limitado sucesso, at o momento da publicao deste volume nenhuma
vacina humana encontrava-se disposio nos Estados Unidos.22
Transferncia do Agente: A licena para a importao deste agente deve ser conseguida junto ao CDC, e a licena de exportao dever ser obtida no Department of Commerce. No caso de
envio ou recebimento deste agente necessrio obter um registro
do laboratrio com o CDC. A licena para importao ou transporte domstico do agente poder ser obtida no USDA/APHIS/VS.
104
SEO VII
relao dos agentes
Agentes:Burkholderia pseudomallei
(Pseudomonas pseudomallei)
Dois casos de melioidose associados a laboratrio foram relatados: um associado exposio massiva da pele aos aerossis e, o
segundo, provocado pela formao de aerossis durante a destruio de uma cultura que se supunha ser de Ps. Cepacia, em frasco
aberto atravs de ondas sonoras de alta freqncia.24
Riscos em Laboratrio: Este agente pode estar presente no
escarro, no sangue, nos exsudatos de um ferimento e em vrios
tecidos, dependendo do local da infeco. O contato direto com
culturas e materiais infecciosos de homens, animais ou do meio
ambiente, a ingesto, a auto-inoculao e a exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos so considerados como riscos primrios de um laboratrio. O agente tem sido encontrado em sangue,
escarro e materiais de abscesso e pode estar presente em amostras de solo e de gua de reas endmicas.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so recomendados para todas as atividades que envolvam lquidos corporais, tecidos e culturas reconhecidamente ou potencialmente
infecciosas. Deve-se usar luvas ao manusear animais infectados
durante a necropsia e quando existir a possibilidade de contato
direto da pele com os materiais infecciosos dos animais. A conteno primria e as precaues pessoais adicionais, como aquelas descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas
para atividades com um alto potencial para produo de aerossis ou perdigotos e para as atividades envolvendo quantidades
ou concentraes de produo de materiais infecciosos. As vacinas
no se encontram atualmente disposio para o uso em homens.
Transferncia do Agente: Entre em contato com o Department of Commerce para uma licena de exportao do agente.
Agente: Campylobacter (C. jejuni/C. coli, C. fetus subsp. fetus)
O C. jejuni/C. coli gastroenteritis raramente a causa de doenas
associadas a laboratrio, embora alguns casos adquiridos em laboratrio tenham sido documentados.25, 26, 27 Numerosos animais domsticos e selvagens, incluindo aves, animais de estimao, ani105
SEO VII
relao dos agentes
mais de fazenda, animais de laboratrio e pssaros selvagens so

reconhecidos como reservatrios e so uma fonte potencial de infeco para as pessoas que cuidam desses animais e que trabalham
no laboratrio. Animais experimentalmente infectados tambm
so uma fonte potencial de infeco.28
Riscos em Laboratrio: As campylobacters patognicas podem ser encontradas em amostras fecais em grande nmero. A
C. fetus subsp. fetus pode tambm estar presente no sangue, nos
exsudatos de abscessos, nos tecidos e no escarro. A ingesto ou
inoculao parenteral da C. jejuni constitui os riscos primrios de
um laboratrio. A ingesto oral de 500 microorganismos provocou uma infeco em um indivduo.29 A importncia da exposio
aos aerossis no conhecida.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so recomendados para atividades que envolvam culturas ou materiais
clnicos potencialmente infecciosos. As prticas, os equipamentos
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2
so recomendados para atividades com animais experimental ou
naturalmente infectados. As vacinas, atualmente, no se encontram disposio para o uso em humanos.
Transferncia do Agente: Para obteno de uma licena
para importao, entre em contato com o CDC.
Agentes: Chlamidia psittaci, C. pneumoniae, C. trachomatis.
Infeces como a psitacose, tracoma e o linfogranuloma venreo j foram, no passado, as infeces bacterianas mais comuns
associadas a laboratrio.30 Em casos relatados antes de 1955,31
a maioria das infeces diagnosticadas era de psitacose, que era
a doena que apresentava o mais alto ndice de mortalidade de
agentes infecciosos adquiridos em laboratrio. O contato e a exposio aos aerossis infecciosos ao manusear, cuidar ou realizar
necropsias em animais natural ou experimentalmente infectados
so as maiores fontes de transmisso da psitacose associada a laboratrio. Ratos e ovos infectados so fontes menos importantes
do C. psittaci. Os animais de laboratrio no so fontes relatadas
de infeco humana com o C. trachomatis.
106
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: A bactria C. psittaci pode estar

presente nos tecidos, nas fezes, nas secrees nasais e no sangue
de pssaros infectados e no sangue, no escarro e nos tecidos de
homens infectados. A C. trachomatis pode estar presente nos lquidos genitais, bulbares e conjuntivais de homens infectados. A
exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos produzidos durante o manuseio de pssaros e tecidos infectados o risco primrio para os trabalhadores de um laboratrio que trabalham com a
bactria psitacose. J os riscos primrios em um laboratrio, em
relao ao C. trachomatis, se encontram na inoculao parenteral
acidental e na exposio direta ou indireta das membranas mucosas dos olhos, do nariz e da boca aos lquidos genitais, bulbares e
conjuntivais, aos materiais de culturas de clulas e aos lquidos de
ovos infectados. Os aerossis infecciosos tambm podem ser uma
fonte potencial de infeco.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so os
recomendados para atividades envolvendo a necropsia de pssaros infectados e no diagnstico de tecidos ou de culturas conhecidas por conterem ou estarem potencialmente infectadas com a
C. psittaci ou a C. trachomatis. Para reduzir o risco de formao de
aerossis de fezes e secrees nasais infectadas contidas nas asas
e nas superfcies externas do pssaro, o melhor procedimento
molhar as asas dos pssaros infectados com um detergente-desinfetante antes de realizar a necropsia. As prticas, os equipamentos de conteno, as instalaes e a proteo respiratria do nvel
de biossegurana animal 2 so os procedimentos indicados para
as pessoas que realizam trabalhos com pssaros engaiolados natural ou experimentalmente infectados. Recomenda-se o uso de luvas para a necropsia dos pssaros e ratos, para a abertura de ovos
inoculados e quando houver a possibilidade de contato direto da
pele com tecidos infectados, lquido bulbar e outros materiais clnicos. As instalaes e as prticas do nvel de biossegurana 3 so
indicadas para as atividades com alto potencial de produo de
perdigotos ou aerossis e para as atividades envolvendo grandes
quantidades ou concentraes de materiais infecciosos.
Observao: Atualmente, as vacinas para esses agentes no
se encontram disponveis para o uso humano.
107
SEO VII
relao dos agentes
Transferncia dos Agentes: Para obter uma licena para exportao dos agentes, entre em contato com o Department of Commerce.
Agente: Clostridium botulinum
Embora s exista um relatrio32 sobre o botulismo associado
ao manuseio do agente ou da toxina no laboratrio ou no trabalho
com animais natural ou experimentalmente infectados, as conseqncias de tais intoxicaes ainda so consideradas bem graves.
O trabalho com culturas de C. botulinum requer consideraes especiais de segurana devido ao uso potencial dessas culturas no
terrorismo biolgico.
Riscos em Laboratrio: O C. botulinum ou a sua toxina pode
estar presente em uma variedade de produtos alimentcios, em
materiais clnicos (soro, fezes) e amostras do meio ambiente (solo,
gua de superfcie). A exposio toxina do C. botulinum considerada o risco laboratorial primrio. Essa toxina pode ser absorvida
aps ingesto ou contato posterior com a pele ou com as membranas mucosas, incluindo o trato respiratrio. A inoculao parenteral acidental tambm representa uma significativa exposio
toxina. O crescimento das culturas em caldos, quando sob tima
produo de toxina, pode conter uma DL50 de 2x106 ratos por mL.34
indicados para todas as atividades com materiais conhecidos por
conter ou potencialmente conter a toxina. Um toxide pentavalente do botulismo (ABCDE) encontra-se disponvel por meio dos
Centers for Disease Control and Prevention, como uma nova droga
de pesquisa (IND). Esse toxide indicado para as pessoas que
trabalham com culturas de C. botulinum ou com suas toxinas. Solues de hipoclorito de sdio (0.1%) ou de hidrxido de sdio
(0.1 N) inativam a toxina prontamente e so recomendadas para
a descontaminao das superfcies de trabalho e de perdigotos de
culturas ou de toxinas. Cuidados pessoais e conteno primria
adicional, como os recomendados para o nvel de biossegurana 3,
so indicados para as atividades com um alto potencial para a produo de aerossis ou perdigotos e para as atividades envolvendo
quantidades grandes de toxinas. As prticas, os equipamentos de
108
SEO VII
relao dos agentes
conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so

indicados para estudos de diagnsticos e titulao da toxina.
Transferncia do Agente: Para obter uma licena de importao para esse agente, entre em contato com o CDC.
Agente: Clostridium tetani
Embora o risco de infeco da equipe do laboratrio seja insignificante, cinco incidentes relacionados exposio do pessoal
durante a manipulao da toxina foram relatados.35
Riscos em Laboratrio: A inoculao parenteral acidental e
a ingesto da toxina so consideradas como risco primrio para a
equipe laboratorial. Como no se tem certeza se a toxina pode ser
absorvida atravs das membranas mucosas, os riscos associados
aos aerossis e perdigotos ainda permanecem desconhecidos.
Precaues Recomendadas: As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so
indicados para atividades envolvendo a manipulao de culturas
ou toxinas. Embora o risco de ttano associado a laboratrio seja
baixo, a administrao de um toxide ttano-difteria adulto, em
intervalos de 10 anos, reduz o risco de exposio toxina e de
contaminao por ferimento do pessoal do laboratrio e dos tratadores de animais e , portanto, altamente recomendada.36 O leitor dever consultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity
and Mortality Weekly Report (MMWR), para a vacinao de adultos
contra o C. tetani.
Transporte do Agente: Para obter uma licena de importao para esse agente, entre em contato com o CDC e com o Department of Commerce para uma licena de exportao. O registro do laboratrio com o CDC ser necessrio antes do envio ou
recebimento do agente.
Agente: Corynebacterium diphtheriae
As infeces com o C. diphtheriae associadas a laboratrio tm
sido relatadas, ao contrrio das associadas a animais de laboratrio.37
Riscos em Laboratrio: O agente pode estar presente em exsudatos ou secrees de nariz, garganta (amgdala), faringe, laringe,
109
SEO VII
relao dos agentes
ferimentos, sangue e sobre a pele. A inalao, a inoculao parenteral acidental e a ingesto so os riscos primrios em um laboratrio.
indicados para todas as atividades utilizando materiais clnicos ou
culturas potencial ou conhecidamente infectadas. J as prticas
do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para estudos que
utilizem animais de laboratrio infectados. Embora o risco da difteria associado a laboratrio seja baixo, a administrao de um toxide ttano-difteria adulto em intervalos de 10 anos pode posteriormente reduzir o risco de exposies toxina e a trabalhos com
materiais infecciosos pela equipe do laboratrio e aos tratadores
de animais.38 O leitor dever consultar as atuais recomendaes
do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), para
a vacinao contra o C. diphtheriae.
Transferncia do Agente: Para obteno de uma licena
para esse agente, entre em contato com o CDC.
Agentes:Escherichia coli (organismos produtores
(VTEC/SLT) de citotoxina)
As cepas produtoras de citotoxina (VTEC/SLT) da Escherichia
coli (tambm chamada de cepas enteroemorrgicas) so riscos
comprovados para as pessoas que trabalham em laboratrios nos
Estados Unidos e em outros locais.39, 40, 41 A sndrome urmica hemoltica ocorre em uma pequena proporo de pacientes (geralmente crianas) e a responsvel pela maioria das mortes associadas s infeces com esses organismos. Os animais domsticos
de fazendas (em particular os bovinos) so reservatrios significativos do organismo. Porm, os pequenos animais experimentalmente infectados tambm so fontes de infeces no laboratrio.
Riscos em Laboratrio: A E. coli enteroemorrgica geralmente isolada nas fezes. Uma grande variedade de alimentos
contaminados com esses agentes pode servir como veculo de
transmisso e inclui a carne moda crua e os produtos de laticnio
no-pasteurizados. Ela raramente encontrada no sangue de homens e animais infectados. A ingesto o risco laboratorial pri110
SEO VII
relao dos agentes
mrio. A importncia da exposio aos aerossis ainda no conhecida.

indicados para todas as atividades utilizando materiais clnicos
ou culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosos. J as
prticas do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para as
atividades com animais natural ou experimentalmente infectados.
Atualmente, as vacinas para uso em homens no se encontram
disposio. O leitor deve consultar as recomendaes atualizadas
do ACIP, relacionadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), sobre a existncia de indicaes para a vacinao
contra cepas enteroemorrgicas de E. coli.
Transferncia do Agente: A licena para importao desse
agente dever ser obtida no CDC.
Agente: Francisella tularensis
A tularemia tem sido uma infeco bacteriana associada a laboratrio comumente relatada.42 Quase todos os casos ocorreram
nas dependncias onde a pesquisa da tularemia estava sendo realizada. Casos ocasionais tm sido relacionados ao trabalho com
animais natural ou experimentalmente infectados ou seus ectoparasitas. Embora no tenham sido relatados, existem casos que
ocorreram em laboratrios. O trabalho com culturas de F. tularensis requer uma segurana especial devido ao seu potencial uso no
terrorismo biolgico.
exsudatos de leses, nas secrees respiratrias, no lquido cerebroespinhal, no sangue, na urina, nos tecidos de animais infectados e nos lquidos de artrpodes infectados. Resultaram em infeco o contato direto da pele ou de membranas mucosas com
materiais infecciosos, a inoculao parenteral acidental e a ingesto e a exposio aos aerossis e perdigotos infecciosos. A infeco tem sido mais comumente associada s culturas do que aos
materiais clnicos e animais infectados. As doses de 25% a 50%
infecciosas para homens so de aproximadamente 10 microorganismos pela via respiratria.43
111
SEO VII
relao dos agentes

de conteno e as dependncias do nvel de biossegurana 2 so
indicados para as atividades com materiais clnicos de origem humana ou animal contendo ou potencialmente contendo Francisella
tularensis. J as prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 3 e do nvel de biossegurana
animal 3 so indicados, respectivamente, para todas as manipulaes de culturas e para estudos de animais experimentais.
Observao: A vacinao contra a F. tularensis encontra-se
disposio para a populao e deve ser levada em considerao pelas pessoas que trabalham com materiais infecciosos ou roedores
infectados. A vacina tambm recomendada para as pessoas que
trabalham com o agente ou animais infectados e para aquelas que
trabalham dentro ou que entram no laboratrio ou na sala para
animais onde as culturas ou animais infectados esto sendo mantidos.44 O leitor dever consultar as recomendaes atualizadas do
Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas
no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), sobre as
recomendaes para vacinas contra a F. tularensis.
Transferncia do Agente: Para obteno de licena para
importao do agente, entre em contato com o CDC. Se a licena
for para exportao do agente, entre em contato com o Department of Commerce. O registro do laboratrio com o CDC necessrio antes do envio ou recebimento do agente.
Agente: Heliobacter pylori
Desde a sua descoberta em 1982, a Heliobacter pylori tem recebido uma grande ateno como um agente causador da gastrite.45
O habitat principal da H. pylori a membrana mucosa gstrica humana. A infeco com esse agente pode ser longa quanto durao, com poucos ou nenhum sintoma ou pode-se apresentar como
uma doena gstrica aguda. Tanto as infeces humanas associadas a laboratrios experimentais quanto as acidentais foram relatadas.46, 47 O agente pode estar presente nas secrees gstricas ou
orais e nas fezes. A transmisso, embora no seja completamente
clara, acredita-se ser atravs da via oral-fecal ou oral-oral.
112
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado nas

secrees gstricas e orais ou nas fezes. A ingesto o principal
risco dentro de um laboratrio. A importncia da exposio aos
aerossis desconhecida.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para as atividades com materiais clnicos e culturas conhecidamente ou potencialmente infectados pelo agente. J as prticas,
os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicados para atividades com animais natural ou experimentalmente infectados. Atualmente, as vacinas no
se encontram disposio para o uso em homens.
Transferncia do Agente: A licena para importao do
agente poder ser obtida junto ao CDC.
Agente: Leptospira interrogans todos os sorotipos
A leptospirose um risco laboratorial muito bem documentado. Pike relatou 67 infeces associadas a laboratrio, 10 mortes48
e ainda trs casos foram relatados em outros locais.49
Um coelho infectado experimentalmente foi identificado como
uma fonte de contaminao do L. interrogans sorotipo icterohemorrhagiae.50 Tanto o contato direto e indireto com lquidos e tecidos
de mamferos natural ou experimentalmente infectados, durante o
manuseio e o cuidado, quanto a necropsia so fontes potenciais de
infeco. Em animais com infeces renais crnicas, o agente encontrado na urina em numerosas quantidades por longos perodos.
Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado na
urina, no sangue e nos tecidos de animais e homens infectados. A
ingesto, a inoculao parenteral acidental e o contato direto ou
indireto da pele ou da membrana mucosa com culturas, tecidos ou
lquidos corporais infectados especialmente a urina so considerados riscos laboratoriais primrios. Ainda no se conhece a
importncia da exposio aos aerossis.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipu113
SEO VII
relao dos agentes
lao de tecidos, lquidos corporais e culturas conhecidamente ou

potencialmente infecciosas e para o alojamento de animais infectados. Recomenda-se o uso de luvas para o manuseio e a necropsia de
animais infectados e quando houver uma possibilidade de contato
direto da pele com os materiais infectados. Atualmente, as vacinas
contra o agente no se encontram disposio para uso em homens.
Transferncia de Agentes: Uma licena para importao
dos agentes poder ser obtida junto ao CDC. Uma licena para importao ou transporte domstico do agente poder ser obtida no
USDA/APHIS/VS.
Agente: Listeria monocytogenes
A Listeria monocytogenes oferece um risco potencial para a
equipe do laboratrio. Os bacilos aerbicos gram-positivos e no
formadores de esporos so hemolticos e catalase positivos.51 As
bactrias tm sido isoladas no solo, na poeira, no alimento humano, nos animais e nos humanos assintomticos.52, 53 A maioria dos
casos de listerose aconteceu devido ingesto de alimentos contaminados, mais notavelmente de queijos suaves, carne crua e vegetais crus no-lavados.54 Embora adultos e crianas saudveis possam contrair a infeco por Listeria, elas geralmente no adquirem
uma doena sria. J as mulheres grvidas, os recm-nascidos e as
pessoas com um sistema imunodeficiente fazem parte do grupo
de risco e adquirem a forma grave da doena.
Riscos em Laboratrio: A Listeria monocytogenes pode ser
encontrada nas fezes, no lquido cerebroespinhal e no sangue, assim como em alimentos e materiais provenientes do meio ambiente.55, 56 Os animais naturalmente ou experimentalmente infectados so uma fonte de exposio para os trabalhadores de
laboratrio, para as pessoas que zelam pelos animais e para outros
animais. A ingesto o modo de exposio mais provvel, mas a
Listeria tambm pode causar infeces nos olhos e na pele aps
uma exposio direta. As infeces causadas pelo agente em mulheres grvidas ocorrem com mais freqncia no terceiro semestre e podem precipitar o parto. A transmisso transplacentria do
agente oferece um grave risco ao feto e pode at resultar em um
abscesso disseminado, contribuindo para o ndice de mortalidade
de aproximadamente 100%.57
114
SEO VII
relao dos agentes

de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades com amostras clnicas e culturas
reconhecidas ou suspeitas de conterem o agente. Recomenda-se o
uso de luvas e proteo para os olhos ao manusear culturas infectadas. As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes
do nvel de biossegurana animal 2 so indicados para atividades
com animais natural ou experimentalmente infectados. Atualmente, as vacinas no se encontram disposio para uso humano.58
Mulheres grvidas que trabalham com o agente em um laboratrio
de diagnstico ou de pesquisa devero ser informadas sobre os riscos potenciais associados ao agente, inclusive para o feto.
Transferncia do Agente: Uma licena para importao ou
transporte domstico do agente poder ser obtida junto ao USDA/
APHIS/VS.
Agentes:Legionella pneumophila
(e outros agentes semelhantes Legionella)
Devido a uma presumida exposio aos aerossis ou perdigotos durante estudos animais com o agente da febre de Pontiac (L.
pneumophilia), um nico documento apresentando um caso de legionelose associado a laboratrio foi relatado.59 A transmisso de
homem para homem ainda no foi documentada.
As infeces experimentais so prontamente produzidas em
cobaias e ovos de galinha embrionrios.60 Coelhos de laboratrio
tambm desenvolvem anticorpos, mas no a doena clnica, enquanto que os camundongos so resistentes exposio parenteral. Estudos no publicados dos Centers for Disease Control and
Prevention mostram que a transmisso de animais para animais
no acontece em uma variedade de espcies mamferas e avcolas
experimentalmente infectadas.
Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado no
lquido pleural, no tecido, no escarro e nas fontes do meio ambiente (por exemplo, gua de torre). Uma vez que o modo natural
de transmisso aparentemente via area, o maior risco potencial
a produo de aerossis durante a manipulao de culturas ou
de outros materiais que contenham uma grande concentrao de
115
SEO VII
relao dos agentes
microorganismos infecciosos (por exemplo, tecidos e o saco vitelino infectado).

de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades envolvendo o uso ou a manipulao
de materiais clnicos ou de culturas sabiamente ou potencialmente infecciosas. J as prticas do nvel de biossegurana 3 com dispositivos de conteno primrios e equipamentos (por exemplo,
cabines de segurana biolgica, conchas de segurana em centrfugas) so usadas para atividades que possivelmente produzem
aerossis potencialmente infecciosos e para as atividades que envolvam quantidades de produo de microorganismos.
Observao: Atualmente, as vacinas para uso em homens
no se encontram disposio.
Transferncia do Agente: A obteno de uma licena para
importao do agente dever ser feita junto ao CDC.
Agente: Mycobacterium leprae
A transmisso parenteral acidental da lepra de homens para
homens tem sido relatada aps a contaminao de um cirurgio
por uma picada acidental de uma agulha61 e pelo uso de uma agulha para tatuagem provavelmente contaminada.62 No existem casos relatados que tenham sido provocados pelo trabalho em um
laboratrio envolvendo bipsias ou outros materiais clnicos de
origem humana e animal. Embora a lepra que ocorra naturalmente e as doenas semelhantes lepra tenham sido relatadas em tatus63 e em primatas no-humanos,64, 65 o ser humano o nico reservatrio importante da doena.
Riscos em Laboratrio: O agente infeccioso pode ser encontrado em tecidos e exsudatos de leses de homens infectados e
em animais natural ou experimentalmente infectados. O contato
direto da pele e das membranas mucosas com materiais e inoculaes parenterais acidentais infecciosas considerado risco primrio de um laboratrio, associado com o manuseio de materiais
clnicos infecciosos.
116
SEO VII
relao dos agentes

de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades com materiais clnicos sabidamente ou potencialmente infecciosos de homens e animais infectados.
Um cuidado especial deve ser tomado para evitar uma inoculao
parenteral acidental com instrumentos cortantes contaminados.
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel
de biossegurana animal 2 so indicados para estudos animais que
utilizem roedores, tatus e primatas-no humanos. Atualmente, as
vacinas para uso em humanos no se encontram disposio.
Agentes:Mycobacterium spp. diferente da M. tuberculosis, M.
bovis ou M. leprae
Pike relatou 40 casos de tuberculose no-pulmonar que se acreditava estar relacionada a acidentes ou incidentes ocorridos no laboratrio ou na sala de autpsia.66 Provavelmente, essas infeces
eram provocadas por um outro tipo de micobactria que no a M.
tuberculosis ou a M. bovis. Um nmero de micobactrias que so
ubquas na natureza associado com outras doenas que no a tuberculose ou a lepra em homens, animais domsticos e selvagens.
Em relao s caractersticas, esses organismos so infecciosos,
mas no so contagiosos. J clinicamente, as doenas associadas
com as infeces por essas atpicas bactrias podem ser divididas,
em geral, em trs categorias:
1. Doenas semelhantes tuberculose, que podem estar
associadas com a infeco pelo complexo M. kansasii, M.
avium e raramente pelo M. xenopi, M. malmoense, M. asiaticum, M. simiae e M. szulgai.
2. Limfadenitis, que podem estar associadas infeco pelo
complexo M. scrofulaceum, M. avium e raramente pelo M.
fortuitum e M. kansasii.
3. lceras de pele e infeces de ferimentos do tecido mole,
que podem estar associadas infeco pelo complexo M.
ulcerans, M. marinum, M. fortuitum e M. chelonei.
117
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados

no escarro, nos exsudatos de leses, nos tecidos e em amostras do
meio ambiente (por exemplo, solo e gua). O contato direto da
pele ou da membrana mucosa com materiais infecciosos, a ingesto e a inoculao parenteral acidental so riscos primrios laboratoriais associados aos materiais clnicos e s culturas. Um risco
de infeco potencial aos trabalhadores de laboratrio tambm
oferecido pelos aerossis infecciosos criados durante a manipulao do caldo de culturas ou homogeneizao de tecidos contendo
esses organismos associados doena pulmonar.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para atividades com materiais clnicos e culturas de Mycobacterium spp. com exceo dos tipos M. tuberculosis ou M. bovis.
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicados para estudos animais
com a micobactria que no a M. tuberculosis, M. bovis ou M. leprae.
Atualmente, as vacinas para uso humano ainda no se encontram
disponveis.
Agente: Mycobacterium tuberculosis, M. bovis
As infeces com a Mycobacterium tuberculosis e a M. bovis (incluindo a BCG) so um risco comprovado aos trabalhadores de
laboratrio, assim como para outras pessoas que podem estar
expostas aos aerossis infecciosos no laboratrio.67, 68, 69, 70, 71 A incidncia da tuberculose em pessoas que trabalham com a M. tuberculosis em laboratrio tem sido relatada como sendo trs vezes
maior do que em pessoas que no trabalham com o agente. Primatas no-humanos infectados natural ou experimentalmente so
uma fonte comprovada de infeco humana (por exemplo, o ndice de converso anual de tuberculina em pessoas que trabalham
com primatas no-humanos infectados de aproximadamente
70/10.000 se comparado ao ndice de menos de 3/10.000 da populao em geral).73 Cobaias ou camundongos experimentalmente
infectados no oferecem o mesmo risco, uma vez que ncleos em
perdigotos no so produzidos pela tosse nessas espcies. Porm,
118
SEO VII
relao dos agentes
o dejeto de animais infectados pode se tornar contaminado e servir como uma fonte de aerossis infecciosos.
Riscos em Laboratrio: Os bacilos da tuberculose podem
ser encontrados no escarro, nos lquidos de lavagem gstrica, no
lquido cerebroespinhal, na urina e nas leses em vrios tecidos.74
A exposio aos aerossis produzidos em laboratrio o risco
mais importante encontrado. Os bacilos da tuberculose podem
sobreviver em esfregaos fixados com o calor75 e ser nebulizados
na preparao de seces congeladas e durante a manipulao de
culturas lquidas. Devido baixa dose infecciosa da M. tuberculosis
para homens (i.e., DI50< 10 bacilos) e, em alguns laboratrios, um
alto ndice de isolamento de organismos resistentes ao cido originado de amostras clnicas (>10%),76 o escarro e outras amostras
clnicas de casos de tuberculose suspeitos ou j comprovados devem ser considerados potencialmente infecciosos e manipulados
com os adequados cuidados.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para as manipulaes de materiais clnicos que no produzam aerossis, como a preparao de esfregaos cido-resistentes.
Todas as atividades que formem aerossis devero ser conduzidas
em cabines de segurana biolgicas classe I ou II. Recomenda-se o
uso de uma bandeja para aquecer a lmina ao invs de sec-la em
um bico de Bunsen. A liquidificao ou a concentrao do escarro
para a colorao cido-resistente pode tambm ser conduzida de
forma segura em uma bancada aberta, tratando, primeiramente, a
amostra (em uma cabine de segurana classe I ou II) com um igual
volume de soluo de hipoclorito de sdio a 5% (branqueamento
domstico no-diludo) e, depois, esperando 15 minutos antes da
centrifugao.77, 78
As prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do
nvel de biossegurana 3 so indicados para atividades laboratoriais na propagao e na manipulao de culturas de M. tuberculosis ou M. bovis e para estudos animais que utilizem primatas nohumanos naturalmente ou experimentalmente infectados com a
M. tuberculosis ou a M. bovis. Estudos animais utilizando cobaias
119
SEO VII
relao dos agentes
ou camundongos podem ser conduzidos em um nvel de biossegurana animal 2.79

Observao: O teste cutneo com uma protena purificada
derivada (PPD) de pessoas que trabalham em laboratrios e apresentem um teste cutneo negativo pode ser usado como um procedimento de vigilncia. Uma vacina de vrus vivo atenuado (BCG)
encontra-se disposio, mas no usada nos Estados Unidos
para equipes de laboratrio. O leitor deve consultar as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices
(ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report
(MMWR), para as recomendaes atuais de vacinao.
importao do agente conseguida no CDC. J a licena para importao e transporte domstico da M. bovis deve ser obtida junto
ao USDA/APHIS/VS.
Agente: Neisseria gonorrhoeae
As infeces gonoccicas associadas a laboratrio tm sido relatadas nos Estados Unidos.80
Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado em
exsudatos cervicais, uretrais e conjuntivais, no lquido sinovial, na
urina, nas fezes e no lquido cerebroespinhal. A inoculao parenteral acidental e o contato direto ou indireto da membrana mucosa
com materiais infecciosos so os riscos primrios laboratoriais conhecidos. A importncia dos aerossis no foi ainda determinada.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipulao de materiais clnicos ou de culturas. Recomenda-se o uso
de luvas ao manipular animais laboratoriais infectados e quando
houver a possibilidade do contato direto da pele com os materiais
infecciosos. Cuidados de conteno primria ou pessoal, como as
descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicados
para a produo de perdigotos ou aerossis e para as atividades
envolvendo quantidades de produo ou concentraes de materiais infecciosos. As vacinas, atualmente, no esto disponveis
para uso em humanos.
120
SEO VII
relao dos agentes
Transferncia do Agente: A obteno e a licena para importao do agente devero ser feitas junto ao CDC.
Agente: Neisseria meningitis
A meningite meningoccica um risco demonstrado, mas raro
de ocorrer com trabalhadores de laboratrio.81, 82, 83
Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado em
exsudatos faringneos, no lquido cerebroespinhal, no sangue e na
saliva. A inoculao parenteral, a exposio da membrana mucosa
a perdigotos e a ingesto so os riscos primrios para a equipe do
laboratrio.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que utilizem lquidos corpreos,
tecidos e culturas conhecidamente ou potencialmente infecciosas. Precaues pessoais e de conteno primria adicional, como
as descritas para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas
para atividades com um alto risco potencial para formao de perdigotos ou aerossis e para as atividades que envolvam quantidades de produo ou concentraes de materiais infecciosos.
Observao: As vacinas para a N. meningitidis esto disponveis e devem ser indicadas para as pessoas que trabalham regularmente com materiais infecciosos. O leitor deve consultar as atuais
recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices
(ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly Report
(MMWR), para as recomendaes sobre vacinao contra a N. meningitidis.
Transferncia de Agentes: A obteno de uma licena para
importao do agente deve ser feita junto ao CDC.
Agente: Salmonella todos os sorotipos, com exceo do typhi
A salmonelose um risco documentado para as pessoas que
trabalham em laboratrios.84, 85, 86 Os hospedeiros, reservatrios
primrios, compreendem um amplo espectro de animais domsticos e selvagens, incluindo pssaros, mamferos e rpteis, sendo
que todos podem servir como uma fonte de infeco para a equipe
laboratorial.
121
SEO VII
relao dos agentes

fezes, no sangue, na urina e em alimentos, raes e materiais provenientes do meio ambiente. A ingesto ou a inoculao parenteral um perigo primrio para um laboratrio. A importncia da
exposio aos aerossis ainda desconhecida. Animais naturalmente ou experimentalmente infectados so uma fonte potencial
de infeco para funcionrios do laboratrio e para os que tratam
dos animais, alm de perigosos para outros animais tambm.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para as atividades com materiais clnicos e culturas conhecidas por possurem ou potencialmente conterem os agentes. As
prticas, os equipamentos de conteno e as instalaes do nvel
de biossegurana animal 2 so recomendados para atividades com
animais naturalmente ou experimentalmente infectados. As vacinas ainda no se encontram disposio da populao.
agente deve ser obtida junto ao CDC.
Agente: Salmonella typhi
A febre tifide um risco comprovado para pessoas que trabalham em laboratrio.87, 88, 89
fezes, no sangue, na vescula biliar (bile) e na urina. O ser humano
o nico reservatrio conhecido da infeco. A ingesto e a inoculao parenteral do agente representam o risco primrio em laboratrio. No se conhece ainda a importncia da exposio aos aerossis.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que utilizem materiais clnicos e
culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas. As prticas
do nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades que possivelmente provoquem a formao de aerossis ou de atividades
que envolvam quantidades de produo de microorganismos.
As vacinas para a S. typhi esto disponveis no mercado e devem ser indicadas para as pessoas que trabalham regularmente
122
SEO VII
relao dos agentes
com materiais potencialmente infecciosos. O leitor deve consultar

as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas pelo CDC Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR), para as recomendaes sobre a vacinao contra a S. typhi.
Transferncia do Agente: A licena para importao pode
ser conseguida junto ao CDC.
Agente: Shiguella spp.
A shigelose um risco comprovado aos trabalhadores de um laboratrio, com dzias de casos relatados s nos Estados Unidos e
na Gr-Bretanha.90, 91, 92, 93 Embora surtos tenham ocorrido em primatas no-humanos em cativeiro, somente o ser humano considerado um reservatrio significativo da infeco. Porm, cobaias,
outros roedores e primatas no-humanos experimentalmente infectados tambm so fontes comprovadas de infeco.
fezes e raramente no sangue de animais e humanos infectados.
A ingesto e a inoculao parenteral do agente so os riscos primrios de um laboratrio. A dose oral de 25% a 50% infecciosa
do agente da S. flexneri para humanos de aproximadamente 200
microorganismos.94 Ainda no se sabe a importncia da exposio
aos aerossis do agente.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que utilizem materiais clnicos ou
culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas. J as prticas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para atividades com animais infectados experimentalmente
ou naturalmente. As vacinas no se encontram disposio no
mercado para uso humano.
Transferncia do Agente: A licena para a exportao do
agente dever ser obtida no Department of Commerce.
Agente: Treponema pallidum
A sfilis um risco comprovado para as pessoas de laboratrio
que manipulam ou coletam materiais clnicos de leses cutneas.
123
SEO VII
relao dos agentes
Pike relacionou 20 casos dessa infeco associada a laboratrio.95

O ser humano o nico reservatrio conhecido desse agente. Um
exemplo o caso de um agente que foi transmitido a um indivduo
da equipe de um laboratrio que trabalhava com uma suspenso
concentrada do T. pallidum obtido de um coelho com orquite experimental.96 A transferncia hematognica da sfilis tem ocorrido
por meio da transfuso de uma unidade de sangue fresco obtida
de um paciente com sfilis secundria. O T. pallidum se encontra
presente na circulao durante a sfilis primria e a secundria. O
nmero mnimo de organismos do T. pallidum (DL50) necessrio
para infectar um indivduo por uma injeo subcutnea de 23.97
A concentrao do T. pallidum no sangue de pacientes durante o
incio da sfilis, porm, ainda no foi determinada.
Nenhum caso de infeco associado a laboratrios animais foi
relatado at o momento. Porm, cepas do T. pallidum (Nichols e
possivelmente outras) adaptadas a coelhos conservaram suas virulncias em homens.
materiais coletados de leses cutneas, de membranas mucosas
primrias e secundrias e no sangue. A inoculao parenteral acidental, o contato das membranas mucosas e de pele lesada com os
materiais infecciosos e possivelmente com aerossis infecciosos so
os riscos primrios para as pessoas que trabalham em laboratrio.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que envolvam o uso ou a manipulao de sangue ou material de leses de homens ou de coelhos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver a
possibilidade do contato direto da pele com os materiais da leso.
O monitoramento sorolgico peridico deve ser considerado para
pessoas que trabalham com materiais infecciosos. As vacinas, atualmente, no se encontram disponveis para o uso em humanos.
124
SEO VII
relao dos agentes
Agentes:Vibrionic enteritis
(Vibrio cholerae,Vibrio parahaemolyticus)
A enterite vibrinica causada pelo Vibrio cholerae ou pelo Vibrio
parahaemolyticus uma doena documentada associada a laboratrio, mas rara.98 Os animais naturalmente ou experimentalmente infectados so uma fonte potencial de infeco.
Riscos em Laboratrio: Os vibries patognicos podem
ser encontrados nas fezes. A ingesto do V. cholerae e a ingesto
ou inoculao parenteral de outros vibries constituem os riscos
primrios laboratoriais. A dose infecciosa oral humana de aproximadamente 106 organismos.99 A importncia da exposio aos
aerossis ainda desconhecida. O risco de infeco aps uma exposio oral pode ser aumentado em indivduos aclordricos.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para atividades com culturas ou materiais clnicos potencialmente infecciosos. J as prticas, os equipamentos de conteno
e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicados
para atividades com animais naturalmente ou experimentalmente
infectados. Embora existam vacinas contra a clera, no se recomenda o uso rotineiro pela equipe laboratorial. O leitor deve consultar as atuais recomendaes do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity and Mortality
Weekly Report (MMWR), sobre as recomendaes para a vacinao
humana contra o V. parahaemolyticus.
Transferncia do Agente: A licena para exportao do
agente dever ser obtida no Department of Commerce.
Agente: Yersinia pestis
A peste um risco laboratorial comprovado, mas raro. Nos Estados Unidos h relatos dessa infeco.100, 101 O trabalho com o Y.
pestis requer consideraes especiais de segurana devido ao seu
alto uso potencial no terrorismo biolgico.
Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado
no lquido bulbar, no sangue, no escarro, no lquido cerebroespinhal, nas fezes e na urina humana, dependendo da forma clnica
e do estgio da doena. Os riscos primrios para a equipe do labo125
SEO VII
relao dos agentes
ratrio se constituem por meio do contato direto com culturas e

materiais infecciosos de homens ou animais, aerossis ou perdigotos infecciosos produzidos durante a manipulao de culturas e
de tecidos infectados. Na necropsia de roedores, o risco primrio
para a equipe laboratorial inclui a inoculao parenteral acidental,
a ingesto e a picada de pulgas infectadas coletadas em roedores.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades que envolvam o manuseio de materiais clnicos e culturas potencialmente infecciosas. Deve-se tomar um cuidado especial para evitar a produo de aerossis de
materiais infecciosos e durante a necropsia de roedores naturalmente ou experimentalmente infectados. Recomenda-se o uso de
luvas ao manusear roedores de laboratrio coletados no campo ou
infectados e quando houver a possibilidade do contato direto da
pele com os materiais infecciosos. A necropsia de roedores idealmente conduzida em uma cabine de segurana biolgica. Precaues individuais e de conteno primria adicional, como as
descritas para o nvel de biossegurana 3, so recomendadas para
atividades com um alto potencial para formao de perdigotos ou
aerossis, para o trabalho com cepas resistentes a antibiticos e
para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de
produo de materiais infecciosos.
Observao: A vacina para o Y. pestis est disposio para
uso em humanos e deve ser usada pela equipe do laboratrio que
trabalha com materiais infecciosos ou roedores infectados. O leitor deve consultar as recomendaes atuais do Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP), publicadas no CDC Morbidity
and Mortality Weekly Report (MMWR), para maiores informaes
sobre a vacinao contra o Y. pestis.
agente dever ser obtida no CDC. J a licena para exportao
deve ser conseguida por intermdio do Department of Commerce. necessrio o registro do laboratrio junto ao CDC antes do
envio ou recebimento desse agente.
126
SEO VII
relao dos agentes
Seo VII-B: Agentes Fngicos

Agente: Blastomyces dermatitidis
Infeces locais associadas a laboratrio tm sido relatadas
aps a inoculao parenteral acidental com tecidos ou culturas infectadas contendo formas da B. dermatitidis semelhantes levedura. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 Infeces pulmonares ocorreram depois de uma
suposta inalao de condios; duas pessoas desenvolveram pneumonia e uma apresentou uma leso osteoltica da qual se retirou
amostra da B. dermatitidis para cultura. 9, 10 Provavelmente, as infeces pulmonares esto associadas somente s formas semelhantes levedura formadoras de esporos (condios).
Riscos em Laboratrio: Formas semelhantes a leveduras
podem ser encontradas nos tecidos de animais infectados e em
amostras clnicas. A inoculao parenteral (subcutnea) desses
materiais pode provocar granulomas locais. As culturas das formas fngicas da B. dermatitidis contendo condios infecciosos,
solo processado ou outras amostras ambientais podem oferecer
um risco quanto exposio aos aerossis.
Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do
nvel de biossegurana 2 e do nvel de biossegurana animal 2 so
indicadas para as atividades com materiais clnicos, tecidos animais, culturas, amostras ambientais e animais infectados.
agente dever ser obtida junto ao CDC. O registro do laboratrio no
CDC dever ser obtido antes do envio ou recebimento do agente.
Agente: Coccidioides immitis
A coccidioidomicose adquirida em laboratrio um risco documentado.11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 Smith relatou que de 31
infeces adquiridas em laboratrio da sua instituio, 28 (90%)
resultaram em uma doena clnica, em que mais da metade dessas
infeces adquiridas na natureza eram assintomticas.23
Riscos em Laboratrio: Devido ao tamanho (2-5 milimcrons), os artrocondios tendem a ser prontamente espalhados no
ar e retidos nos profundos espaos pulmonares. Quanto maior o
127
SEO VII
relao dos agentes
tamanho da esfrula (30-60 milimcrons), mais reduzida ser a

eficcia dessa forma de fungo como um patgeno areo.
As esfrulas dos fungos podem estar presentes em amostras
clnicas e tecidos animais. J os artrocondios infecciosos so encontrados em culturas e solos mofados ou em outras amostras de
locais naturais. A inalao do artrocondio contido nas amostras
ambientais ou nas culturas da forma fngica um perigo srio
dentro de um laboratrio. Um risco terico dentro de um laboratrio imposto por amostras clnicas ou tecidos de animais ou homens infectados que foram armazenados ou embalados de forma
a produzir a germinao de artrocondios. H um nico relatrio
sobre um veterinrio com uma coccidiodomicose que se iniciou 13
dias depois da autpsia de um cavalo com essa infeco, embora o
veterinrio morasse em uma rea endmica.24 A inoculao percutnea acidental da esfrula pode resultar na formao de um granuloma local.25 A doena disseminada ocorre com uma freqncia
muito maior em negros e em filipinos do que em brancos.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para manuseio e processamento de amostras clnicas, identificao isolada e processamento
dos tecidos animais. J as prticas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para estudos de experimentao
animal quando a via de transmisso do agente a via parenteral.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicadas para reproduo e manipulao de culturas que formam
esporos j identificados como C. immitis e para o processamento
de solo ou outros materiais do meio ambiente que contenham ou
possivelmente contenham artrocondios infecciosos.
agente dever ser obtida junto ao CDC. O registro do laboratrio
dever ser obtido no CDC antes do envio ou recebimento do agente.
Agente: Cryptococcus neoformans
A inoculao acidental de uma pesada quantidade de Cryptococcus neoformans nas mos de um trabalhador de laboratrio
ocorreu durante a injeo ou a necropsia de animais de laboratrios.26, 27 Mas no houve a formao de um granuloma local e nem
128
SEO VII
relao dos agentes
uma leso, sugerindo uma baixa patogenicidade por esta via. As

infeces respiratrias como conseqncia de exposio laboratorial ainda no foram registradas.
Riscos em Laboratrio: A inoculao parenteral acidental
de culturas ou de outros materiais infecciosos representa um risco
potencial para a equipe laboratorial, particularmente queles que
possam estar imunodeprimidos. Mordidas de camundongos experimentalmente infectados e as manipulaes de materiais do meio
ambiente infeccioso (por exemplo, excrementos de pombos) tambm representam um risco primrio ao pessoal do laboratrio.
indicadas, respectivamente, para atividades com materiais clnicos, ambientais ou de culturas sabidamente ou potencialmente infecciosas e ainda com animais infectados experimentalmente.
O processamento do solo ou de outros materiais do meio ambiente que contenha ou que potencialmente contenha clulas infecciosas semelhantes levedura dever ser conduzido em cabines
de segurana biolgicas classe I ou II. Essa precauo tambm
indicada para a cultura do estado perfeito ou sexual do agente.
Agente: Histoplasma capsulatum
A histoplasmose associada a laboratrio um risco comprovado em instalaes onde so conduzidos trabalhos de investigao
ou de diagnsticos.28, 29, 30 As infeces pulmonares so resultantes de culturas que formam fungos.31 J uma perfurao na pele
durante uma autpsia de um indivduo infectado32 e uma inoculao parenteral acidental de uma cultura vivel33 provocam uma
infeco local. A coleta e o processamento de amostras de solo retiradas de reas endmicas tm provocado infeces pulmonares
em trabalhadores de laboratrio. Os esporos encapsulados so
resistentes secagem e podem permanecer viveis durante longos perodos de tempo. O pequeno tamanho do condio infeccioso
(menos que 5 mcrons) possibilita sua disperso no ar e a reteno intrapulmonar. Furcolow relatou que em camundongos 10 es129
SEO VII
relao dos agentes
poros foram quase que to infecciosos quanto uma dose letal de

10.000 a 100.000 esporos.34
Riscos em Laboratrio: O estgio infeccioso desse fungo
dimrfico (condio) est presente nas culturas de formas esporuladas e no solo de reas endmicas. A forma de levedura em tecidos ou lquidos de animais infectados pode produzir uma infeco
local aps uma inoculao parenteral. As prticas e as instalaes
do nvel de biossegurana 2 e do nvel de biossegurana animal 2
so indicadas para o manuseio e o processamento de materiais clnicos, identificao de substncias isoladas, tecidos animais e culturas fngicas, identificao de culturas na rotina de laboratrios
de diagnsticos e para estudos animais experimentais quando a
via do agente for parenteral.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicadas para reproduo e manipulao de culturas j identificadas como de H. capsulatum e para o processamento de solo ou de
outros materiais ambientais conhecidos por conter ou possivelmente conter condio infeccioso.
agente deve ser feita junto ao CDC.
Agente: Sporothrix schenckii
O S. schenckii tem causado um nmero expressivo de infeces
locais na pele e nos olhos de pessoas que trabalham em laboratrios.35 A maioria dos casos est associada a acidentes que ocorrem com borrifos do material de uma cultura dentro do olho, 36, 37
arranho 38 ou mordida de um animal infectado 40, 41 ou ao injetar 39
material infectado na pele. As infeces dermatolgicas so causadas tambm pelo manuseio de culturas 42, 43 ou por necropsias
de animais 45 sem que ocorra um conhecido erro tcnico na hora
do procedimento. No houve nenhum caso de infeco pulmonar resultante da exposio laboratorial, embora se suponha que
a doena pulmonar tenha ocorrido naturalmente como resultado
de uma inalao.
indicadas para todas as atividades em laboratrio e em ativida130
SEO VII
relao dos agentes
des com experimentao animal com S. schenckii. Recomenda-se o

uso de luvas ao manusear animais experimentalmente infectados
e durante operaes com culturas lquidas (caldos) que possam resultar em uma contaminao da mo.
Agentes:Membros patognicos dos gneros
Epidermophyton, Microsporum e Trychophyton
Embora as infeces de pele, cabelo e unhas provocadas por
esses fungos dermatofdites estejam entre as infeces humanas
mais freqentes, o processamento do material clnico ainda no
foi associado s infeces laboratoriais. As infeces relatadas foram adquiridas por meio de contatos com animais de laboratrio
naturalmente ou experimentalmente infectados (camundongo, cobaias, etc.) e ocasionalmente com o manuseio de culturas.46, 47, 48, 49
Perigos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados na pele, no cabelo e nas unhas de hospedeiros humanos e animais. O contato com animais de laboratrios infectados que apresentem infeces aparentes ou no considerado risco primrio
para a equipe do laboratrio. As culturas e os materiais clnicos
no so uma fonte importante de infeco humana.
indicadas para todas as atividades em laboratrio e em atividades
com experimentao animal com os dermatofitdes. Os animais
infectados experimentalmente devem ser manipulados com luvas
descartveis.
Agentes: Fungos diversos
Vrios fungos tm provocado srias infeces em hospedeiros
imunocompetentes aps uma provvel inalao ou inoculao parenteral acidental de fontes do meio ambiente. Esses agentes so
os Penicillium marneffei, Exophiala (Wangiella) dermatitidis, Fonseca131
SEO VII
relao dos agentes
ea pedrosoi, Ochroconis gallopavum, Clauduphialopora bantians e Ramichlorisium mackenzieim. Embora nenhuma infeco causada por
grande parte desses agentes associados a laboratrio tenha sido
registrada, a gravidade dessa patologia adquirida naturalmente
suficiente para se adotar cuidados especiais no laboratrio. O Penicillium marneffei causou uma infeco local por inoculao acidental
em um laboratorista.50 J o Stachybotrus atra provavelmente no
o agente causador da infeco em seres humanos quando o fungo
ou fmites contidos no mofo so inalados, embora a ingesto de
gros mofados que possuam o fungo tenha envenenado animais.
Riscos em Laboratrio: A inalao de condios em culturas
de fungos com esporos ou a injeo acidental na pele durante um
procedimento de infeco de animais de experimentao so riscos tericos aos trabalhadores de um laboratrio.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para reproduo e manipulao de culturas conhecidas por conterem esses agentes.
Transferncia do Agente: A licena para importao dever ser obtida junto ao CDC.
Seo VII-C: Agentes Parasitrios

Agentes: Protozorios Parasitas de Tecido e Sangue Humanos
Infeces com o Plasmodium spp. (incluindo o P. cynomolgi), o
Trypanosoma spp. e a Leishmania spp. adquiridas em laboratrio
foram relatadas.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 Embora nenhuma infeco
laboratorial com a Babesia spp. tenha sido relatada, um indivduo
pode adquirir uma infeco por meio de uma picada acidental com
agulha ou por uma picada de um carrapato infectado.
Embora infeces associadas a animais de laboratrio no sejam comuns, a malria transmitida pelo mosquito realmente ocorre. Outras fontes diretas potenciais de infeco para a equipe de
um laboratrio incluem o contato com um material extrado de
uma leso de roedores que apresentam uma leishmaniose cutnea
e o contato com fezes ou sangue de animais experimentalmente
ou naturalmente infectados com T. cruzi.13
132
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: Os estgios contagiosos desses

agentes podem estar presentes no sangue, nas fezes, no fluido
cerebroespinhal, na medula ssea ou em outros tecidos de bipsia, exsudatos de leso e artrpodes infectados. Dependendo do
parasita, os riscos primrios laboratoriais incluem a ingesto, a
penetrao na pele por meio de ferimentos ou microabrases, a
inoculao parenteral acidental e a transmisso por vetores artrpodes. A exposio aos aerossis ou perdigotos de organismos nas
membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca considerada
um risco potencial quando o trabalho realizado com culturas de
Leishmania spp., T. cruzi ou com homogeneizao de culturas ou de
sangue contendo hemoflagelados. Os indivduos imunocomprometidos devem evitar qualquer trabalho com esses agentes vivos.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com estgios infecciosos dos parasitas relacionados. Os artrpodes infectados devem ser mantidos em dependncias que impeam a exposio do pessoal do laboratrio ou a sada do artrpode para fora
do local. A conteno primria (por exemplo, cabine de segurana
biolgica) e a proteo pessoal (por exemplo, proteo facial) podem ser indicadas quando o trabalho for realizado com culturas de
Leishmania spp., T. cruzi ou com a homogeneizao de tecidos ou
de sangue contendo hemoflagelados.14, 15 Recomenda-se o uso de
luvas para atividades nas quais exista a possibilidade do contato
direto da pele com os estgios infecciosos dos parasitas referidos.
O tratamento apropriado para a maioria das infeces provocadas
por protozorios existe. As informaes sobre dosagem, fonte da
droga, etc. se encontram disposio.16
Agentes: Protozorios Parasitas do Intestino Humano
Infeces com Toxoplasma spp., Entamoeba spp., Isospora spp.,
Giardia spp., Sarcocystis spp. e o Cryptosporidium spp. associadas a
laboratrio foram relatadas.17, 18, 19, 20, 21 Nenhuma infeco laboratorial com microspordios foi registrada, mas a ingesto de esporos encontrados nas fezes, na urina, no escarro, no fluido cerebroespinhal ou nas culturas pode provocar uma infeco.
133
SEO VII
relao dos agentes
Infeces associadas ao laboratrio de experimentao animal

tm sido relatadas e constituem uma fonte direta de infeco para
as pessoas que trabalham nesses locais e esto em contato com
as fezes de animais naturalmente ou experimentalmente infectados. No caso de roedores inoculados experimentalmente com o
Toxoplasma via intraperitoneal, o contato com o lquido peritoneal
pode provocar uma exposio aos organismos infecciosos.
J as infeces com o Cryptosporidium adquiridas em laboratrio ocorrem com regularidade em quase todos os laboratrios que
trabalham com esse agente, especialmente aqueles nos quais os
bezerros so usados como fonte de ocitos. Outros animais infectados experimentalmente tambm oferecem riscos potenciais. A
evidncia circunstancial sugere que a transmisso area de ocitos
desse pequeno organismo pode acontecer. Uma obedincia rigorosa a todas essas recomendaes reduz a ocorrncia de infeces
nos laboratrios e em tratadores de animais.
Riscos em Laboratrio: Os estgios ativos infecciosos podem ser encontrados nas fezes ou em outros fluidos e tecidos corporais. Dependendo do parasita, a ingesto o risco primrio laboratorial. Embora no se conhea o nvel do risco, as exposies
das membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca aos aerossis ou perdigotos de trofozotas podem ser riscos potenciais
quando esto sendo realizados trabalhos com culturas de amebas
que vivem livremente, como a Naegleria fowleri, Acanthamoeba ou
a Balamuthia. Os indivduos imunocomprometidos devem evitar
o trabalho com organismos vivos. Devido s graves conseqncias
da toxoplasmose em fetos em desenvolvimento e em mulheres sorologicamente negativas que podem engravidar, cabe ao supervisor do laboratrio informar essas mulheres sobre os riscos potenciais ao feto. Caso os empregados bem informados sobre os riscos
se recusarem a ficar expostos a esses agentes, o laboratrio dever
designar outras atividades em uma rea de trabalho onde o toxoplasma no esteja sendo manipulado. O trabalho com ocitos contagiosos oferece um risco maior de se adquirir uma infeco. As
picadas de agulhas com material contendo taquizotas ou bradizotas atravs da membrana mucosa ou de abrases na pele tambm
so riscos significativos. A infeco por taquizotas ou bradizotas
atravs da membrana mucosa ou de abrases da pele tambm so
134
SEO VII
relao dos agentes
possveis. Os laboratrios que conduzem estudos somente com

materiais de parasitas mortos ou inativados e com fraes de parasitas no oferecem riscos significativos de infeco.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com estgios contagiosos dos parasitas citados. A conteno primria (por
exemplo, cabine de segurana biolgica) e a proteo pessoal (por
exemplo, protetor facial) podem ser indicadas em trabalhos envolvendo culturas de Naegleria fowleri ou Cryptosporidium. O tratamento apropriado para a maioria das infeces provocadas por
protozorios j existe. Mais informaes sobre a dose e a fonte
das drogas, etc. esto disponveis.22
Agentes:Trematdeos Parasitas de Humanos
(Schistosoma spp. e Fasciola spp.)
Infeces com o Schistosoma spp. e a Fasciola spp. adquiridas em
laboratrio tm sido relatadas. Nenhuma infeco estava diretamente associada aos animais de laboratrio, com exceo dos moluscos infectados, que so os hospedeiros intermedirios.23, 24, 25, 26
Riscos em Laboratrio: Os estgios contagiosos do Schistosoma spp. (cercria) e da Fasciola spp. (metacercria) podem ser
encontrados, respectivamente, na gua ou encistados em plantas
de aqurios de laboratrios usados para manter os caracis hospedeiros. A penetrao das cercrias do esquistossomo na pele e
a ingesto da metacercria de qualquer trematdeo so consideradas riscos primrios. A disseco e o esmagamento de caracis
infectados pelo esquistossomo podem tambm resultar na exposio da pele ou da membrana mucosa aos tecidos contendo as
cercrias. Alm disso, a metacercria pode ser transferida inadvertidamente das mos para a boca pelos dedos ou pelas luvas,
depois do contato com a vegetao aqutica contaminada ou com
as superfcies contaminadas do aqurio. A maioria das exposies
laboratoriais ao Schistosoma spp. supostamente resultaria em baixas cargas de vermes com um potencial mnimo da doena. Drogas seguras e eficazes para o tratamento da esquistossomose j se
encontram no mercado.
135
SEO VII
relao dos agentes

nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades com os estgios contagiosos dos parasitas citados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver um contato direto com gua contaminada por
cercrias ou vegetao contendo metacercria de caracis infectados experimentalmente ou naturalmente. Jalecos de mangas compridas ou outro traje de proteo devero ser usados quando estiver sendo realizado um trabalho ao redor do aqurio ou em outras
fontes de gua que possam conter cercrias do esquistossomo. Os
caracis e as cercrias encontradas na gua proveniente do aqurio do laboratrio devem ser eliminados com substncias qumicas
(por exemplo, hipoclorito, iodo) ou por meio do calor antes de serem jogados no esgoto. O tratamento apropriado para grande parte das infeces causadas por trematdeos existe. As informaes
sobre a fonte das drogas e sobre as dosagens esto disponveis.27
Agentes:Cestides Parasitas de Humanos Echinococcus
granulosus, Taenia solium (cysticercus cellulosae) e
Hymenolepis nana
Embora nenhuma infeco com o E. granulosus ou a T. solium
relacionada a laboratrio tenha sido relatada, as conseqncias
dessas infeces aps a ingesto de ovos infectados por E. granulosus ou T. solium so potencialmente srias. A H. nana um parasita cosmopolita que no requer um hospedeiro intermedirio, e a
contaminao se d diretamente pela ingesto de fezes humanas
ou de roedores infectados.
Riscos em Laboratrio: Os ovos infectados podem ser encontrados nas fezes de ces ou de outros candeos (hospedeiro definitivo do E. granulosus) ou nas fezes humanas (o hospedeiro definitivo da T. solium). A ingesto de ovos infectados dessas fontes
considerada risco primrio em laboratrios. Os cistos e o fluido
de cistos do E. granulosus no so infecciosos para o homem. J os
cistos que contm a larva da T. solium (Cysticercus cellulosae) prontamente produzem a infeco humana com a solitria adulta. A ingesto de um nico ovo infectado pelos dois parasitas, proveniente
das fezes do hospedeiro definitivo, pode potencialmente resultar
136
SEO VII
relao dos agentes
em uma sria patologia. A ingesto dos ovos da H. nana nas fezes do hospedeiro definitivo pode causar uma infeco intestinal.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para o trabalho com os estgios contagiosos desses parasitas. Deve-se dar uma ateno especial higiene pessoal (por exemplo, lavagem das mos) e evitar
a ingesto de ovos infectados. Recomenda-se o uso de luvas quando houver um contato direto com as fezes ou com superfcies contaminadas por fezes frescas de ces infectados por E. granulosus,
com humanos infectados pela T. solium adulta ou com humanos
ou roedores infectados pela H. nana. O tratamento adequado para
muitas infeces causadas por cestides existe. Informaes sobre
a fonte das drogas, da dosagem, etc. j se encontram disponveis.28
Agentes: Nematides Parasitas de Humanos
Infeces por Ascaris spp., Strongyloides spp., ancilstomos e
Enterobius spp. j foram relatadas. As reaes alrgicas a vrios
componentes antignicos de nematides (por exemplo, antgenos
de Ascaris nebulizados) podem representar um risco ao indivduo
sensvel. As infeces associadas a laboratrio (incluindo artrpodes) no foram registradas, mas as larvas contagiosas encontradas nas fezes de primatas no-humanos infectados com o Strongyloides spp. so consideradas um risco potencial de infeco para
trabalhadores de laboratrio e tratadores de animais.
Riscos em Laboratrio: Os ovos e as larvas de fezes frescas
do hospedeiro definitivo no so geralmente infecciosos, uma vez
que o desenvolvimento dos estgios infecciosos pode levar de um
dia at vrias semanas. A Trichinella preocupa porque o tecido fresco ou digerido pode conter larvas que seriam infecciosas se ingeridas. A ingesto de ovos infectados e a penetrao de larvas infectadas na pele so os riscos primrios para as pessoas que trabalham
em um laboratrio e as que tratam dos animais. Os artrpodes
infectados com os parasitas filariais oferecem um risco potencial
para a equipe laboratorial. comum o desenvolvimento de uma
137
SEO VII
relao dos agentes
hipersensibilidade em trabalhadores de laboratrio que freqentemente so expostos aos antgenos aerolizados de Ascaris spp.
Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicadas para atividades que envolvam os estgios contagiosos relacionados. A exposio aos antgenos sensibilizados aerolizados do Ascaris spp.
deve ser evitada. Uma conteno primria (por exemplo, cabine de segurana biolgica) pode ser necessria para o trabalho com esses materiais por indivduos hipersensveis. O
tratamento adequado para maior parte das infeces causadas por nematides existe. Maiores informaes sobre a dosagem, a fonte das drogas, etc. j se encontram disponveis.32
Seo VII-D: Prons
Os Centros para Preveno e Controle de Doenas e os Institutos
Nacionais de Sade gostariam de expressar seus agradecimentos a Jiri
Safar, M.D; Darlene Groth, A.B; Stephen J. DeArmond, M.D., PhD.
e Stanley B. Prusiner, M.D., da University of California San Francisco, San Francisco, CA, pelas contribuies neste campo emergente e na
preparao desta seo.
Os prons so partculas infecciosas de proteinceos que no
possuem cidos nuclicos.1 Os prons so, em grande parte, se no
totalmente, compostos por um isoforme anormal de uma protena celular normal. Em mamferos, os prons so compostos de um
isoforme anormal, patognico da protena prinio (PrP), chamada
de PrPSc. O expoente Sc inicialmente derivou-se do termo scrapie (tronco), j que scrapie um distrbio degenerativo contagioso do sistema nervoso de ovinos e caprinos provocado pelos
prons. Uma vez que todas as doenas conhecidas causadas por
prons (tabela 3) em mamferos envolvem o metabolismo aberrante do PrP semelhante ao observado na scrapie, o uso de um
expoente Sc indicado para todos os isoformes PrP patognicos
anormais.2 Nesse contexto, o expoente Sc utilizado para designar a isoforma do PrP semelhante da scrapie.
138
SEO VII
relao dos agentes
Um gene cromossmico decodifica os genes PrP e no PrP que

so encontrados em preparaes purificadas dos prons. O PrPSc
derivado do PrPC (o isoforme celular do PRP) por um processo ps-translacional em que o PrPSc adquire um alto contedo da
enzima B da ovelha.3 Nem os cidos nuclicos especficos de prons nem as partculas semelhantes ao vrus foram detectados nas
preparaes infecciosas purificadas. Em fungos, evidncias de trs
prons diferentes foram acumuladas.4
Os prons em mamferos causam scrapie e outras doenas neurodegenerativas relacionadas ao homem e aos animais (tabela 3).
As doenas provocadas pelos prons tambm so referidas como
encefalopatias espongiformes transmissveis (TSEs).5
Tabela 3. As doenas causadas por prons
Patologias (abreviao)
Scrapie
Hospedeiro natural
ovelhas e cabras
Encefalopatia transmissvel
viso
de viso (TME)
Doena crnica distrfica (CWD) alce e veado de orelhas
longas
Encefalopatia espongiforme gado
bovina (BSE)
Encefalopatia espongiforme gatos
felina (FSE)
Encefalopatia extica ungula- antlope africano e niala
do (EUE)
Kuru
humanos
Doena de Cretzfeldt Jakob humanos
(CDJ)
Sndrome de Gerstmann
humanos
Stussler-Scheinker (GSS)
Insnia familiar Gatal (FFI)
humanos
Prons
scrapie
prons
prons
TME
prons
CWD
prons
BSE
prons FSE
prons
EUE
prons
kuru
prons
CJD
prons
GSS
prons FFI
Isoforma patognica
do PrP
OvPrPSc
MkPrPSc
MdePrSc
BoPrPSc
FePrPSc
UngPrPSc
HuPrPSc
HuPrPSc
HuPrPSc
HuPrPSc
Prons especficos de espcies: Diferente de alguns vrus,

as propriedades dos prons mudam dramaticamente quando so
passados de uma espcie para outra. Os resultados de estudos
transgnicos (Tg) em camundongos indicam que, quando os pr139
SEO VII
relao dos agentes
ons de homens so passados para os camundongos, a patogenicidade potencial dos no-transgnicos para os humanos diminui
drasticamente.6 Os prons que so reproduzidos em camundongos
no-transgnicos so agora prons de camundongos e prons nohumanos. Os prons de camundongos contm o PrP Sc e o PrPSc
no-humano. Essa mudana especfica da espcie na molcula do
PrPSc acompanhada pela alterao na patogenicidade do prons.
Em contraste com os prons humanos, os prons de camundongos so altamente patognicos para os prprios camundongos. A
compreenso dessas mudanas especficas na patogenicidade do
prons de cada espcie proveniente, em grande parte, de estudos
de camundongos que apresentam uma variedade de transgenes
PrP. Uma vez que o PrPSc produzido no camundongo derivado do
PrPC, no possvel determinar a origem do prons inicialmente
inoculados no camundongo.7
Vale a pena observar que a susceptibilidade de espcies em particular a um pron de outras espcies pode ser profundamente afetada pelas diferentes cepas de prons. As propriedades manifestadas pelas cepas de prons, como o perodo de incubao e os perfis
neuropatolgicos, parecem estar contidas na estrutura do PrP Sc.
Tais consideraes dos princpios bsicos da biologia prinica
ajudam a formar a base para a classificao da biossegurana de
diferentes prons.
Classificao do Nvel de Biossegurana: Os prons humanos e os reproduzidos em macacos e chimpanzs so manipulados no nvel de biossegurana 2 ou 3, dependendo dos estudos
que esto sendo conduzidos. Os prons BSE so igualmente manipulados no nvel de biossegurana 2 ou 3, devido possibilidade
de os prons terem sido transmitidos aos seres humanos na GrBretanha e na Frana.9
Todos os outros prons animais so considerados patgenos do
nvel de biossegurana 2. Portanto, baseado na nossa compreenso atual sobre a biologia descrita dos prons, assim que os prons
humanos so passados para camundongos, ocorre a produo do
PrPSc de camundongo. Nesse caso, esses prons devem ser considerados como do nvel de biossegurana 2, embora os prons humanos sejam manipulados no nvel de biossegurana 3, em gran140
SEO VII
relao dos agentes
de parte das condies experimentais. Uma exceo a essa regra

o caso de camundongos que apresentam transgenes de camundongos/humanos quimricos ou humanos. Os camundongos transgnicos produzem prons humanos quando infectados por prons
humanos e devem ser tratados no nvel de biossegurana 2 ou 3,
de acordo com os procedimentos descritos. Os mecanismos dos
prons disseminados em ovelhas e caprinos, que so os responsveis pelo desenvolvimento do scrapie, ainda so desconhecidos.10, 11
Acredita-se que os prons CWD, TME, BSE, FSE e EUE ocorrem depois do consumo de alimentos infectados por prons.12, 13, 14, 15
Doenas Humanas Provocadas por Prons: Os mesmos
cuidados usados em pacientes com aids ou com hepatite so certamente adequados para as patologias provocadas por prons e pacientes que esto morrendo devido a tal patologia. Em contraste com essas doenas virticas, as doenas provocadas por prons
no so transmissveis nem contagiosas.16 No h evidncias sobre a transmisso por contato de aerossis de prons de um indivduo para outro. Porm, esses agentes se tornam contagiosos em
algumas circunstncias como, por exemplo, no ritual de canibalismo na Nova Guin, que provoca a doena chamada kuru, na administrao do hormnio do crescimento contaminado por prons,
que resultar na CJD iatrognica e no transplante de enxertos de
tecido da dura-mter contaminado por prons que provocam a doena em outras pessoas. J as doenas CJD, GSS e FFI familiares
so doenas provocadas por prons dominantes herdados. Cinco
mutaes diferentes do gene PrP mostraram ser geneticamente ligadas ao desenvolvimento da doena congnita. Muitos prons de
doenas congnitas foram transmitidos a chimpanzs, macacos e
camundongos portadores de transgenes PrP humano.20, 21, 22
Procedimentos Cirrgicos: Os procedimentos cirrgicos
em pacientes diagnosticados como portadores da doena prinica
devem ser minimizados. Acredita-se que a CJD tenha sido transmitida de um paciente portador da CJD para dois outros que,
momentos depois, sofreram procedimentos neurocirrgicos na
mesma sala de cirurgia.23 Embora no existam documentos que
comprovem a transmisso de prons aos homens pela exposio
da pele intacta ou das membranas mucosas e gstricas aos perdigotos de sangue ou de lquido cerebroespinhal, o risco da ocorrncia de tais infeces uma possibilidade. A esterilizao dos
141
SEO VII
relao dos agentes
instrumentos e a descontaminao da sala de cirurgia devem ser

realizadas de acordo com as recomendaes descritas.
Por serem importantes o estabelecimento de um diagnstico
definitivo de uma doena provocada por prons e a distino entre
casos familiares e espordicos e as doenas adquiridas pela contaminao ocorrida em procedimentos mdicos ou pela ingesto
de alimentos contaminados por prons, deve-se obter o tecido cerebral no-fixado. Em todos os casos de suspeita de uma doena
prinica, o mnimo de um centmetro cbico de crtex cerebral
no-fixado deve fazer parte da bipsia. A amostra deve ser bisseccionada a partir da superfcie cortical at a substncia branca do
crebro adjacente, com uma metade da amostra fixada em formalina e a outra metade congelada.
Autpsias: As autpsias de rotina e o processamento de quantidades de tecidos fixados em formalina contendo prons humanos
requerem os cuidados de um nvel de biossegurana 2. 21 Na autpsia, todo o crebro deve ser coletado e cortado em seces coronais
de aproximadamente 4cm de espessura. Pequenos blocos de tecidos podem facilmente ser removidos de cada seco coronal e colocados em um fixador para posterior anlise histopatolgica. Cada
seco coronal dever ser imediatamente lacrada por calor em uma
sacola de plstico para carga pesada. Pressupe-se que o exterior
da sacola esteja contaminado por prons e outros patgenos. Com
luvas novas ou com a ajuda de um assistente que esteja usando
luvas sem contaminao, a sacola contendo a amostra dever ser
colocada em outra sacola plstica que no possua uma superfcie
exterior contaminada. As amostras, ento, devero ser congeladas
em gelo seco ou colocadas diretamente em um freezer com temperatura de 70C, para armazenamento. Deve-se obter e congelar,
no mnimo, uma seco coronal do hemisfrio do cerebelo contendo o tlamo e uma do hemisfrio cerebelar e do tronco cerebral.
A ausncia de qualquer tratamento eficaz para doenas prinicas demanda muita cautela. As maiores concentraes de prons
se encontram na rea do sistema nervoso central. Com base em
estudos animais, h a possibilidade de que altas concentraes de
prons sejam encontradas no bao, no timo, nos ndulos linfticos e nos pulmes. O principal cuidado a ser tomado, quando se
142
SEO VII
relao dos agentes
estiver realizando um trabalho com material contaminado ou infectado por prons, o de evitar a perfurao da pele.25 A pessoa
que estiver realizando o procedimento dever utilizar luvas resistentes a perfuraes. Caso ocorra uma contaminao acidental da
pele, a rea dever ser esfregada com hidrxido de sdio a 1N durante cinco minutos e depois lavada com enormes quantidades de
gua. As listas de 1 a 4 proporcionam procedimentos para a reduo de perfuraes na pele, formao de aerossis e contaminao
da sala de cirurgia, das superfcies do necrotrio e dos instrumentos. As amostras no-fixadas de crebro, medula espinhal e de outros tecidos contendo prons humanos devero ser processadas
com extremo cuidado em um nvel de biossegurana 3.
Encefalopatia Espongiforme Bovina: O risco de contaminao humana pelos prons BSE ainda no est muito claro.
Talvez, a abordagem mais prudente seja estudar os prons BSE em
dependncias de um nvel de biossegurana 2 ou 3 dependendo
das amostras a serem estudadas, como observado para prons humanos (crebro e medula espinhal).
Doenas Prinicas em Roedores Experimentais: Os camundongos e hamsters so os animais experimentais de escolha
para todos os estudos da doena prinica. Com o desenvolvimento do camundongo transgnico, que altamente susceptvel aos
prons humanos, o uso de chimpanzs e macacos raramente necessrio. As maiores titulaes de prons (~109,5 DI50/g) so encontradas no crebro e na medula espinhal de roedores de laboratrio
infectados com cepas adaptadas de prons.26, 27 As menores titulaes (~106 DI50 /g) esto presentes no bao e no sistema linforreticular.28, 29
Propriedades Fsicas dos Prons: A menor partcula de um
pron infeccioso provavelmente de um dmero de PrPSc. Essa estimativa consistente com o tamanho de um alvo de radiao ionizante de 55 9 kDa.30 Portanto, os prons podem no ser contidos
pela maioria dos filtros existentes que, de forma eficaz, eliminam
as bactrias e os vrus. Alm disso, os prons se agregam s partculas de tamanho no-uniforme e, assim, os detergentes no conseguem solubiliz-los, exceto sob condies de desnaturao em
que a infectividade perdida.31, 32 Os prons resistem inativao
143
SEO VII
relao dos agentes
por meio da nuclease,33 da irradiao de UV a 254nm34, 35 e do tratamento com psoralens,36 ctions divalentes, queladores do on
metal, cidos (entre pH 3 e 7), hidroxilamina, formalina, ebulio
ou proteases.37, 38
Inativao dos prons. Os prons se caracterizam pela extrema resistncia aos procedimentos convencionais de inativao, incluindo a irradiao, a ebulio, o calor seco e os agentes
qumicos (formalina, betapropiolactona e lcoois). Embora a infectividade do pron em amostras purificadas seja diminuda pela
prolongada digesto com proteases,39, 40 os resultados de ebulies
em dodecilsulfato de sdio e uria so variveis. A esterilizao de
extratos cerebrais de roedores com altas titulaes requer o uso
da autoclave a 132C durante quatro horas e meia. Os solventes
orgnicos desnaturadores, como o fenol, os reagentes caotrpicos,
como o tiocianato de guanidina, e os lcalis, como o NaOH, podem tambm ser utilizados para a esterilizao.41, 42, 43, 44, 45 Os prons so inativados por meio do NaOH a 1N, do cloridrato ou do
isocianato de guanidnio a 4.0 M, do hipoclorito de sdio (concentrao de cloro livre 2%) e da autoclave a vapor a 132C durante
quatro horas e meia.46, 47, 48, 49 Recomenda-se que o dejeto seco seja
autoclavado a 132C durante quatro horas e meia ou ento incinerado. Grandes volumes de dejetos lquidos infecciosos contendo altas titulaes de prons podem ser totalmente esterilizados
por meio do tratamento com NaOH a 1N (concentrao final) ou
por meio de uma autoclave a 132C durante quatro horas e meia.
Os vasilhames plsticos, que podem ser descartados como dejeto
seco, so altamente recomendveis. Uma vez que o procedimento
de vaporizao com paraformaldedo no diminui a titulao do
prons, as cabines de segurana devem ser descontaminadas com
NaOH a 1N, seguido de HCI a 1N e depois enxaguadas com gua.
Os filtros HEPA devem ser autoclavados e incinerados.
Embora no haja evidncias que possam sugerir que a transmisso via aerossol ocorra na doena natural, mais prudente
evitar a formao de aerossis ou perdigotos durante a manipulao de tecidos ou lquidos e durante a necropsia de animais experimentais. Recomenda-se, tambm, o uso de luvas para atividades que propiciem o contato direto da pele com tecidos e lquidos
infecciosos. Os tecidos fixados em formaldedos e embebidos em
144
SEO VII
relao dos agentes
parafina, especialmente os tecidos cerebrais, permanecem infecciosos. Alguns pesquisadores recomendam que tecidos de casos
suspeitos de doenas prinicas fixados em formaldedos sejam
imersos, durante 30 minutos, em cido frmico a 96% ou em fenol, antes de ser processados histopatologicamente,50 mas esse
tratamento pode distorcer a neuropatologia microscpica.
Manuseio e Processamento de Tecidos de Pacientes
com Suspeita de Doena por Prons: As caractersticas especiais do trabalho com prons requerem uma ateno particular
com as instalaes, os equipamentos, as normas e os procedimentos envolvidos. As consideraes relacionadas sublinhadas nas seguintes listas devem ser incorporadas administrao dos riscos
laboratoriais para este trabalho.
Lista 1. Precaues padro* para autpsias de pacientes com
suspeita de doena por prons
*No confundir com procedimentos padro universais.
1. O atendimento dever ser limitado a um patologista experiente e a uma equipe pequena. Os membros da equipe
devero evitar o contato direto com o corpo, mas devero assistir ao procedimento por meio do manuseio dos
instrumentos e recipientes da amostra.
2. Um traje padro para autpsia obrigatrio.

a. Ao invs de um avental de tecido, deve-se usar uma
roupa descartvel e prova de gua.
b. Luvas resistentes a cortes e perfuraes devero ser
colocadas debaixo de dois pares de luvas cirrgicas
ou luvas chain mail, que devero ser usadas entre
dois pares de luvas cirrgicas.
c. Os aerossis so formados principalmente durante a
abertura do crnio com uma serra Stryker. Uma proteo respiratria adequada dever ser utilizada (PAPR).
3. Para reduzir a contaminao da sala de autpsia:
a. A mesa de autpsia dever ser coberta com um lenol descartvel com fundo plstico prova dgua.
b. Os instrumentos contaminados devero ser colocados em um papel absorvente.
145
SEO VII
relao dos agentes
c. O crebro dever ser removido, enquanto a cabea

dever ser colocada em um saco plstico para a reduo da nebulizao e de borrifos.
d. O crebro poder ser colocado em um recipiente com
um revestimento de saco plstico para pesagem.
e. O crebro dever ser colocado em uma tbua de corte e as amostras adequadas sero dissecadas para o
congelamento instantneo (veja a lista 3).
f. O crebro ou os rgos a ser fixados devero ser
imediatamente colocados em um recipiente com um
tampo neutro de formalina a 10%.
g. Na maioria dos casos de suspeita de doena prinica, a autpsia pode ser limitada somente ao exame
do crebro. Em casos que exijam uma autpsia completa, devemos considerar o exame e a amostragem
dos rgos torcicos e abdominais in situ.
Lista 2. Procedimentos de descontaminao da sala de autpsia
1. Os instrumentos (grampos) e as lminas da serra devero ser colocados em uma placa grande de ao inoxidvel
que dever ser imersa durante uma hora em hidrxido de
sdio a 2N ou durante duas horas em hidrxido de sdio
a 1N. Depois devero ser bem enxaguados em gua antes
de serem autoclavados a uma temperatura de 134C (autoclave de vapor com deslocamento de gravidade por 1
hora; autoclave de vapor para cargas porosas por um ciclo
de 18 minutos a 30 libras por polegada quadrada ou seis
ciclos de 3 minutos a 30 libras por polegada quadrada).
2. A serra Stryker dever ser descontaminada com repetidas
umidificaes com uma soluo de hidrxido de sdio a
2N, por um perodo de um hora. Uma lavagem adequada
dever ser realizada para remoo do NaOH residual.
3. O papel absorvente que cobre a mesa e envolve os instrumentos, as roupas descartveis, etc. devero ser duplamente embalados em sacos adequados para lixos infecciosos, para posterior incinerao.
4. Quaisquer reas suspeitas de contaminao da mesa ou
da sala de autpsia devero ser descontaminadas por re146
SEO VII
relao dos agentes
petidos banhos de uma soluo de hidrxido de sdio a

2N, durante uma hora.
Lista 3. Procedimentos de corte do crebro
1. Aps a adequada fixao em formaldedo (pelo menos de
10 a 14 dias), o crebro dever ser examinado e cortado sobre uma mesa coberta com um papel absorvente que possua a parte de trs coberta por um material impermevel.
2. As amostras para a histologia devero ser etiquetadas
com o termo: As precaues da CJD. Para laboratrios
que no possuam equipamento para colorao e imerso
ou um micrtomo exclusivo para doenas infecciosas
incluindo a CJD, blocos de tecido fixado pela formalina
podero ser colocados em cido frmico absoluto a 96%
durante 30 minutos, seguido de uma soluo de tampo
neutro de formalina a 10% por pelo menos 48 horas.51
O bloco de tecido ser, ento, imerso em parafina como
normalmente realizado. As tcnicas padro neuroistolgicas ou imunoistoqumicas no so afetadas pelo
tratamento com o cido frmico. Porm, de acordo com
experincias, os cortes de tecidos se tornam quebradios
e danificados durante o seccionamento.
3. Todos os instrumentos e as superfcies que tiveram um
contato com o tecido devero ser descontaminados como
descrito na lista 2.
4. Os resduos de tecidos, fragmentos de cortes e a soluo
de formaldedo contaminado devero ser descartados
como lixo hospitalar para eventual incinerao.
Lista 4. Preparao do tecido
1. Os tcnicos de histologia devero usar luvas, aventais,
jalecos e proteo facial.
2. A fixao adequada de pequenas amostras de tecidos (por
exemplo, bipsias) de um paciente com suspeita de doena prinica dever passar por uma ps-fixao em cido
frmico absoluto a 96% durante 30 minutos, seguido de
48 horas em formalina fresca a 10%.
147
SEO VII
relao dos agentes
3. O dejeto lquido dever ser coletado em um garrafo para

lixo de 4 litros contendo 600ml de hidrxido de sdio a 6N.
4. As luvas, os moldes imersos e todos os materiais de manipulao devero ser descartados como lixo de perigo
biolgico.
5. As fitas de tecido devero ser processadas manualmente
para prevenir a contaminao dos processadores de tecido.
6. Os tecidos devero ser imersos em um molde descartvel. Caso haja sua utilizao, as pinas devero ser descontaminadas.
7. Ao preparar as seces, recomenda-se o uso de luvas. Os
cortes no usados devero ser coletados e desprezados
em um recipiente para lixo de perigo biolgico. A faca
dever ser lavada com uma soluo de NaOH a 1-2N e
dever ser descartada imediatamente em um recipiente
para objetos cortantes biolgicos. As lminas devero ser
etiquetadas com os dizeres Precaues contra CDJ. O
bloco seccionado dever ser fixado com parafina.
8. Colorao de rotina:
a. As lminas devero ser processadas manualmente.
b. Os reagentes devero ser preparados em clices de
100ml descartveis.
c. Aps a colocao da lamnula, as lminas devero ser
descontaminadas ao mergulh-las em uma soluo
de NaOh a 2N durante 1 hora.
d. As lminas devero ser etiquetadas como CDJ Infecciosos.
9. Outras sugestes:
a. Os clices descartveis ou as estantes para lminas
podero ser usados para os reagentes.
b. As lminas para a imunocitoqumica podero ser
processadas em placas de Petri descartveis.
c. O equipamento dever ser descontaminado como
descrito.
148
SEO VII
relao dos agentes
Seo VII-E: Agentes Rickettsiais

Agente: Coxiella burnetii
Dos agentes rickettisiais, a Coxiella burnetii provavelmente o
agente que apresenta o maior risco de uma infeco laboratorial.
O organismo altamente contagioso e incrivelmente resistente
secagem e s condies ambientais.1 A dose infecciosa dos organismos da fase I virulenta em laboratrios animais tem sido calculada como sendo to pequena quanto um nico microorganismo.
A dose humana infecciosa estimada ID25-50 (inalao) para a febre
Q de 10 organismos.2 O resumo de Pike indica que a febre Q a
segunda infeco associada a laboratrio mais comumente relatada, com surtos envolvendo 15 ou mais pessoas registradas em vrias instituies.3, 4 Vrios mamferos domsticos e selvagens so
os hospedeiros naturais da febre Q e podem servir como fontes
potenciais de infeco para as pessoas que trabalham em um laboratrio e para os tratadores de animais de laboratrio. A exposio
a ovelhas naturalmente infectadas e freqentemente assintomticas e a seus filhotes so parte de um risco documentado ao pessoal.5, 6 Embora rara, a C. burnetii conhecida por causar infeces
crnicas como a endocardite ou a hepatite granulomatosa.
Riscos em Laboratrio: A necessidade do uso de ovos embrionrios ou de tcnicas de cultura celular para a reproduo da
C. burnetii leva a extensivos procedimentos de purificao. A exposio aos aerossis contagiosos e a inoculao parenteral so as
fontes mais provveis de contgio para as pessoas que trabalham
em laboratrios e as que tratam de animais.7 Os agentes podem
ser encontrados em artrpodes infectados, no sangue, na urina,
nas fezes, no leite e nos tecidos de hospedeiros animais ou humanos infectados. As placentas de ovelhas infectadas podem conter at 109 organismos por grama de tecido,8 enquanto que o leite
pode conter 105 organismos por grama.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para procedimentos laboratoriais no-reprodutivos, incluindo os exames sorolgicos e a
colorao de impresso dos esfregaos. As prticas e as instalaes
149
SEO VII
relao dos agentes
do nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades envolvendo a inoculao, a incubao e a coleta de ovos embrionados
ou de culturas de clulas, a necropsia de animais infectados e a
manipulao de tecidos infectados. Uma vez que cobaias e outros
roedores possam conter o agente nas fezes ou na urina,9 os roedores experimentalmente infectados devero ser mantidos sob um
nvel de biossegurana animal 3. O isolamento clonal especfico de
cepas no-virulentas (fase II) pode ser considerado para condies
de conteno inferiores.10
Spinelli11 e Bernard12 descreveram as precaues recomendadas
para as instalaes quando ovelhas so utilizadas como animais
experimentais. Uma nova fase I de investigao, a vacina contra a
febre Q (IND), j se encontra disponvel para os indivduos includos no Special Immnunizations Program (USAMRIID), em Fort
Detrick, Maryland. O uso da vacina deve se limitar aos indivduos
que esto expostos a altos riscos e que no tenham demonstrado
sensibilidade ao antgeno da febre Q. Os indivduos que possuem
uma doena cardiovalvular no devero trabalhar com a C. burnetii.
agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena para
exportao, esta dever ser conseguida no Department of Commerce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio para envio
ou recebimento do agente. J a licena para importao ou transporte domstico do agente poder ser obtida no USDA/APHI/VS.
Agentes:Rickettsia prowazekii, Rickettsia typhi
(R. mooseri), Orientia (Rickettsia) tsutsugamushi
e os agentes do Grupo da Febre Maculosa de Doena
Humana; Rickettsia ricketsii, Rickettsia conorii,
Rickettsia akari, Rickettsia australis, Rickettsia
siberica e Rickettsia japonicum.
Pike relatou 57 casos de tifo (tipo no especificado) associado a
laboratrio; 56 casos de tifo epidmico, com trs mortes; e alguns
casos de tifo murino.13 Mais recentemente, trs casos de tifo murino foram relatados em um laboratrio de pesquisa.14 Dois desses
trs casos estavam associados ao manuseio de materiais infecciosos em bancadas abertas. O terceiro caso foi provocado por uma
inoculao parenteral acidental. Esses trs casos representaram
150
SEO VII
relao dos agentes
uma incidncia de 20% das pessoas que trabalham com materiais

infecciosos.
A febre maculosa das Montanhas Rochosas um risco documentado para as equipes laboratoriais. Pike relatou 63 casos adquiridos em laboratrio, dos quais 11 foram fatais.15 Oster, por
sua vez, registrou 9 casos que ocorreram por um perodo de 6
anos em um laboratrio, que acreditava serem resultantes de uma
exposio aos aerossis infecciosos.16
Riscos em Laboratrio: A inoculao parenteral acidental
e a exposio aos aerossis contagiosos so as fontes mais provveis de infeces associadas a laboratrio.17 A transmisso bemsucedida por meio de aerossis contaminados por R. rickettsii foi
documentada experimentalmente em primatas no-humanos.18
Cinco casos de varola por riqutsia registrados por Pike estavam
associados exposio s picadas de caros infectados.19
Mamferos naturalmente ou experimentalmente infectados,
seus ectoparasitas e seus tecidos infectados so considerados riscos potenciais de infeco humana. Os organismos so relativamente instveis sob condies ambientais normais.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para procedimentos laboratoriais no-reprodutivos, incluindo procedimentos sorolgicos
e de anticorpo fluorescente e, ainda, a colorao de impresso dos
esfregaos. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3
so indicadas para todas as outras manipulaes de materiais sabidamente ou potencialmente infecciosos, incluindo a necropsia de
animais experimentalmente infectados e a triturao de seus tecidos, a inoculao, a incubao e a coleta de ovos embrionados e as
culturas de clulas. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so indicadas para o alojamento de mamferos,
com exceo dos artrpodes experimentalmente infectados. J as
prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicadas
para estudos animais com artrpodes naturalmente ou experimentalmente infectados por agentes rickettsiais da doena humana.
Devido ao valor comprovado da terapia com antibiticos nos
estgios iniciais da infeco, essencial que os laboratrios que
151
SEO VII
relao dos agentes
trabalham com a riqutsia possuam um sistema eficaz de relato

de doenas febris na equipe laboratorial, uma avaliao mdica de
casos potenciais e, quando indicada, a instituio de uma terapia
antibitica adequada. As vacinas, atualmente, no esto disposio para uso em homens (veja a seo seguinte sobre Vigilncia).
agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena para
exportao, esta dever ser conseguida no Department of Commerce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio para envio
ou recebimento do agente.
Vigilncia da Equipe Laboratorial em Relao s Infeces
Rickettsiais Adquiridas em Laboratrio
Sob circunstncias naturais, a gravidade da doena causada por
agentes rickettsiais varia consideravelmente. Em laboratrio, inoculaes muito grandes so possveis, o que poderia produzir respostas raras, mas muito srias. A vigilncia da equipe em relao
s infeces por riqutsias adquiridas em laboratrio pode reduzir
de forma dramtica o risco de srias conseqncias da doena.
A experincia mostra que as infeces, quando adequadamente
tratadas com quimioterapia anti-rickettisial especfica no primeiro
dia da doena, geralmente no provocam srios problemas no indivduo. A demora em adotar essa quimioterapia, porm, pode resultar em uma doena debilitante ou muito aguda, variando com
perodos crescentes de convalescena no caso do tifo, e em morte
no caso de tifo rural em infeces por R. rickettsii. A chave para a
reduo da gravidade da doena provocada por infeces associadas a laboratrio um sistema confivel de vigilncia, que inclui:
1. Disponibilidade total de um mdico experiente; 2. Doutrinao de toda a equipe sobre os riscos potenciais do trabalho com
agentes rickettisiais e as vantagens de uma terapia precoce; 3. Um
sistema de relatrios para todas as exposies conhecidas e os acidentes ocorridos; 4. Relatrios de todas as doenas febris, especialmente as associadas dor de cabea, ao mal-estar e prostrao,
quando no existir nenhuma outra causa; e 5. Uma atmosfera de
no-punio que possa motivar o relato de qualquer doena febril.
Os agentes rickttesiais podem ser manipulados em um laboratrio com um perigo real mnimo, quando um sistema adequado
152
SEO VII
relao dos agentes
de vigilncia for complementado por uma equipe que tenha conhecimento sobre os riscos de infeces por riqutsias e usos de
medidas seguras recomendadas pelo Resumo das Caractersticas
dos Agentes.
Seo VII-F: Agentes Virais (no incluindo

o arbovrus)
Agentes: Hantavrus
O trabalho com o vrus de Hantaan (febre hemorrgica com
sndrome renal) e outros hantavrus (Puumala, Seul e Sin Nombre
sendo ou no registrados no International Catalogue of Arboviruses
and Certain Other Viruses 1985, como o vrus El Moro Canyon)
em ratos, ratazanas e outros roedores de laboratrio dever ser
conduzido com especial cuidado devido ao risco extremo de contgio por aerossis, especialmente da urina de roedores infectados.
A sndrome pulmonar por hantavrus (HPS) uma nova doena grave e freqentemente fatal, causada pelo vrus Sin Nombre
e/ou um vrus relacionado.1 A maioria dos casos de patologias humanas resultou de exposies a roedores selvagens naturalmente
infectados. Os vetores artrpodes no so conhecidos como transmissores do hantavrus. Nenhuma transmisso de um indivduo
para outro foi provocada por um vrus associado a essa doena.
Riscos em Laboratrio: A transmisso laboratorial do
hantavrus de roedores para os homens por aerossol bem documentada.2, 3, 4, 5 As exposies s excrees de roedores, ao material fresco para necropsia e s roupas que envolvem os animais
de laboratrio so supostamente associadas ao risco. Outras vias
potenciais de infeco incluem a ingesto, o contato de materiais
contagiosos com membranas mucosas ou pele rachada e, em particular, as mordidas de animais.
Quatro trabalhadores de laboratrio foram infectados enquanto trabalhavam com o vrus Hantaan adaptado a uma cultura de
clulas. Embora os procedimentos associados s infeces ainda
no estejam bem explicados, esses quatro indivduos trabalharam
repetidas vezes com culturas de hantavrus e realizaram a cen153
SEO VII
relao dos agentes
trifugao do vrus concentrado.6 O RNA viral foi detectado em

amostras de necropsias e no sangue e plasma de um paciente coletados no incio da doena.7 As implicaes dessas descobertas
para a infectividade do sangue ou dos tecidos so desconhecidas.
Precaues Recomendadas: As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicadas para o manuseio laboratorial de
soros de pessoas potencialmente infectadas com os agentes da HPS.
O uso de uma cabine de segurana biolgica certificada recomendado para todas as manipulaes com lquidos humanos corporais
quando existe um potencial para a formao de borrifos ou aerossis.
Amostras de tecidos potencialmente infectados devero ser manipuladas em instalaes do NB-2, seguindo as prticas e os procedimentos do NB-3. A reproduo do vrus em culturas de clulas
dever ser realizada em uma instalao do NB-3, seguida das prticas e dos procedimentos do NB-3. O crescimento em grande escala do vrus, incluindo a preparao e o manuseio dos concentrados virais, dever ser feito em instalaes de conteno do NB-4.
Espcies de roedores experimentalmente infectados conhecidos por no apresentarem o vrus nas fezes podero ser alojados
em instalaes do NBA-2, usando prticas e procedimentos do
NBA-2. As cabines de segurana e outros dispositivos de conteno fsica primria devero ser utilizados onde procedimentos com
um alto potencial para formao de aerossis estiverem sendo
conduzidos. O soro ou as amostras de tecidos de roedores potencialmente infectados devero ser manipulados em NB-2, usando
prticas e procedimentos de um NB-3. Todo o trabalho envolvendo a inoculao do vrus contendo amostras do P. maniculatus
ou outras espcies permissivas dever ser conduzido em NBA-4.
Transferncia do Agente: A licena para importao desses agentes deve ser conseguida no CDC. A licena para exportao dever ser conseguida junto ao Department of Commerce e
necessrio o registro do laboratrio no CDC antes do envio ou recebimento dos agentes.
154
SEO VII
relao dos agentes
Agentes:Hendra e Vrus Semelhantes Hendra

(inclusive o vrus anteriormente conhecido
como Morbilivrus Eqino)
Surtos de um paramixovrus anteriormente desconhecido, que
foi primeiramente chamado de morbilivrus eqino e posteriormente denominado de vrus Hendra, ocorreram em cavalos na
Austrlia em 1994 e 1995.8, 9, 10, 11, 12 Trs pessoas que possuam
um contato prximo com cavalos enfermos desenvolveram a encefalite ou a doena respiratria e duas falecerem. Nenhum surto
associado doena humana foi reconhecido, mas dois indivduos
que trabalhavam em chiqueiro de porcos lembraram de uma doena que tiveram semelhante gripe, na mesma poca em que ocorreram os surtos. Alm disso, todos os dois indivduos possuam
titulaes neutralizadoras de anticorpos ao vrus de Menangle. De
1998 a 1999, um surto da doena provocado por um vrus semelhante, mas distinto do Hendra, aconteceu em Cingapura e na Malsia.13 Nesses dois pases, a doena humana caracterizada por
febre, dor de cabea grave, mialgia e sinais de encefalite acometeu indivduos que tiveram um contato prximo com porcos (isto
, fazendeiros e trabalhadores de abatedouros). Poucos pacientes
desenvolveram uma doena respiratria. Metade das pessoas infectadas por esse vrus faleceram. O(s) hospedeiro(s) natural(is)
da Hendra e dos vrus semelhantes Hendra no foram identificados. Porm, na Austrlia os morcegos eram animais suspeitos de
carregarem o vrus Hendra. Estudos epidemiolgicos e laboratoriais esto em andamento.
Nenhuma infeco adquirida em laboratrio conhecida por
ter sido resultante da exposio ao vrus Hendra ou semelhante
a ele. Porm, deve-se observar que nos surtos da Austrlia e da
Malsia/Cingapura, o vrus foi reconhecido como um significativo
patgeno veterinrio. Estudos laboratoriais foram limitados aos
laboratrios de doenas infecciosas humanas e/ou veterinrias de
alta conteno. Os cientistas e veterinrios da sade pblica, por
sua vez, tm acompanhado de perto todos esses estudos.
Riscos em Laboratrio: O modo exato de transmisso ainda no foi estabelecido. Todos os casos at hoje estavam associados ao contato prximo com cavalos e com sangue ou lquidos corporais de cavalos (Austrlia) ou de porcos (Malsia/Cingapura). O
155
SEO VII
relao dos agentes
vrus Hendra e o semelhante a ele foram encontrados nos tecidos

de animais contaminados durante os surtos descritos. Em um recente surto na Malsia e em Cingapura, o antgeno viral foi descoberto no sistema nervoso central, nos tecidos renais e pulmonares
de casos humanos fatais.14
Precaues Recomendadas: Devido aos riscos desconhecidos para os trabalhadores do laboratrio e ao impacto potencial
sobre criaes de animais nativos, o vrus dever ser pesquisado
ou diagnosticado no laboratrio. Os fiscais da sade e os gerentes
dos laboratrios devero avaliar a necessidade de se realizar um
trabalho com o vrus e a capacidade das dependncias antes de
iniciarem qualquer contato com o vrus Hendra, com o semelhante a ele ou com vrus suspeitos relacionados. Especialistas em doenas da sade pblica e veterinria devero desenvolver planejamentos, como estudos laboratoriais e transporte de amostras e de
substncias isoladas para o laboratrio. At que mais informaes
sejam conseguidas, o manuseio de amostras clnicas humanas e
as tentativas de isolamento desse vrus devero ser realizados em
dependncias de um NB-3 e por pessoas experientes. O NB-4 (laboratrio escafandro ou cabines de segurana classe III) dever
ser utilizado em qualquer trabalho envolvendo animais contaminados ou grandes quantidades de vrus.15
Transferncia do Agente: A licena para importao desse agente deve ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena para exportao, esta dever ser conseguida no Department of
Commerce. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio
para envio ou recebimento do agente.
Agentes: Vrus da Hepatite A, Vrus da Hepatite E
As infeces com os vrus da hepatite A e E adquiridas em laboratrio no parecem ser importantes riscos ocupacionais para
as equipes laboratoriais. Porm, a doena um risco documentado
para as pessoas que manuseiam animais e para outros que trabalham com chimpanzs e outros primatas no-humanos experimental ou naturalmente contaminados.16 O vrus da hepatite E parece
ser um risco menor para as pessoas que trabalham com ele em relao ao grande risco envolvendo os que manuseiam o vrus da hepatite A, exceto durante a gravidez, quando a infeco pode resultar
156
SEO VII
relao dos agentes
em uma doena fatal ou grave. Os trabalhadores que manipulam

outros primatas recentemente capturados e susceptveis (macacos-coruja, sagis) podem tambm estar correndo um srio risco.
Riscos em Laboratrio: Os agentes podem ser encontrados nas fezes, na saliva e no sangue de humanos e primatas nohumanos contaminados. A ingesto de fezes, gua de vaso sanitrio e outros materiais contaminados o risco primrio para a
equipe laboratorial. A importncia da exposio aos aerossis no
foi demonstrada. Cepas atenuadas ou no-virulentas dos vrus da
hepatite A resultantes de passagens em srie em cultura celular
foram descritas.17, 18
de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para atividades com fezes humanas ou de primatas nohumanos conhecidamente ou potencialmente contaminadas. J
as prticas e as instalaes do nvel de biossegurana animal 2 so
indicadas para atividades que usem primatas no-humanos naturalmente ou experimentalmente contaminados. Os tratadores de
animais devero usar luvas e tomar outras precaues adequadas
para evitar possveis exposies fecais-orais. Uma vacina inativada licenciada contra a hepatite A est disponvel na Europa. Nos
Estados Unidos encontramos somente uma vacina de pesquisa recomendada para os trabalhadores de laboratrio. As vacinas contra a hepatite E no esto disponveis para o uso em humanos.
Agentes:Vrus da Hepatite B, Vrus da Hepatite C
(anteriormente conhecidos como Vrus no-A e
Vrus no-B) e Vrus da Hepatite D
A hepatite B tem sido uma das infeces associadas a laboratrio19 mais freqentemente encontradas, e os trabalhadores de laboratrio so reconhecidos como o grupo de maior risco de contaminao por esse vrus.20 Os indivduos contaminados pelo vrus
da hepatite B correm o risco de contrarem o vrus da hepatite D
(delta), que incompleto e requer a presena do vrus da hepatite
B para se reproduzir.
157
SEO VII
relao dos agentes
A infeco por hepatite C pode acontecer em um laboratrio.

A prevalncia do anticorpo da hepatite C levemente maior em
trabalhadores da rea da sade pblica do que na populao em
geral. Evidncias epidemiolgicas indicam que a hepatite C disseminada predominantemente pela via parenteral.21, 22, 23
Riscos em Laboratrio: O vrus da hepatite B pode ser encontrado no sangue e nos produtos sangneos de origem humana, na urina, no smen, no lquido cerebroespinhal e na saliva. A
inoculao parenteral, a exposio das membranas mucosas e da
pele lesada aos perdigotos so os riscos primrios laboratoriais. O
vrus pode ser estvel no sangue ou nos componentes do sangue
seco. Cepas atenuadas ou no-virulentas no foram identificadas.
O vrus da hepatite C tem sido detectado primariamente em
sangue e soro, menos freqentemente na saliva e raramente em
urina ou smen. Ele parece ser relativamente instvel, quando estocado em temperatura ambiente e em congelamentos e descongelamentos repetidos.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para todas as atividades utilizando lquidos corporais e tecidos conhecidamente ou potencialmente contaminados. Precaues pessoais e conteno primria adicional, como as descritas
para o nvel de biossegurana 3, podem ser indicadas para atividades com potencial para a formao de perdigotos ou aerossis
e para as atividades envolvendo quantidades ou concentraes de
produo de materiais infecciosos. As prticas, os equipamentos
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana animal
2 so indicados para atividades que utilizem chimpanzs ou outros primatas no-humanos contaminados naturalmente ou experimentalmente. Deve-se usar luvas quando trabalhos com animais contaminados estiverem sendo realizados ou quando houver
a possibilidade de contato da pele com materiais contaminados.
As vacinas recombinantes licenciadas contra a hepatite B esto
disponveis e so altamente recomendadas e oferecidas aos trabalhadores de laboratrio.24 J as vacinas contra as hepatites C e D
ainda no esto disponveis para uso humano.
158
SEO VII
relao dos agentes
Alm dessas precaues recomendadas, as pessoas que trabalham com o HBV, o HVC ou outros patgenos do sangue devero
consultar o OSHA Bloodborne Pathogen Standard.25 Questes relacionadas interpretao desses padres devero ser direcionadas
aos escritrios federais, regionais e estaduais da OSHA.
Transferncia do Agente: A licena para importao desses agentes dever ser obtida junto ao CDC.
Agentes:Herpesvirus simiae (Cercopithecine herpesvirus
[CHV-1], B-virus)
O CHV-1 um alfaherpesvrus que ocorre naturalmente contaminando smios livres ou em cativeiro, incluindo a Macaca mulatta,
a M. fascicularis e outros membros do gnero. Em smios, este est
associado a leses orais vesiculares agudas, assim como infeces
latentes e freqentemente recrudescentes.26 A infeco humana
tem sido documentada em pelo menos 50 casos, geralmente com
um resultado fatal ou com srias seqelas de encefalites.27, 28, 29, 30,
31, 32, 33
Vinte e nove casos fatais de infeces humanas (com um ndice de fatalidade de 58%) com o CHV-1 foram relatados.34, 35, 36, 37
Embora o CHV-1 apresente um risco potencial aos trabalhadores de laboratrios que manipulam esse agente, as infeces
humanas com o CHV-1 adquiridas em laboratrio, com raras excees, se limitaram aos trabalhadores que tiveram um contato
direto com os smios. As culturas celulares primrias de smios,
incluindo as clulas dos rins dos macacos rhesus comercialmente
preparadas, ocasionalmente podem ser assintomaticamente contaminadas com o CHV-1 e comprometidas em um caso humano.38
O treinamento especfico peridico sobre a avaliao do risco,
a compreenso dos modos de transmisso, a exposio ao CHV-1
e o uso adequado de equipamentos de proteo pessoal so itens
altamente recomendados para as pessoas que trabalham com ou
que possuam um contato direto com smios, seus tecidos e com
um meio ambiente potencialmente contaminado por eles (incluindo gaiolas, brinquedos e materiais de dejetos). necessrio
um treinamento adequado para primeiros socorros e para o abastecimento, alm de um apoio mdico emergencial.
159
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: O alojamento assintomtico acontece na maioria das transmisses entre os macacos e os trabalhadores humanos, embora o maior risco de se adquirir o vrus CHV1 de smios seja por meio da mordida de um macaco contaminado
que possua leses ativas. A contaminao da pele rachada ou das
membranas mucosas por secrees orais, oculares ou urogenitais
de smios contaminados durante suas infeces recrudescentes
ou primrias tambm perigosa e tem provocado pelo menos um
caso de mortalidade ocupacional.39 A estabilidade de partculas virais em gaiolas e outras superfcies no conhecida, mas o risco
potencial dever ser reconhecido para cortes ou abrases provocados por essas superfcies potencialmente contaminadas. Acreditase que outros alfaherpesvrus no iro persistir no meio ambiente por longo tempo. O trabalho experimental com animais indica
que a importncia da exposio aos aerossis do CHV-1 possivelmente mnima. Cepas atenuadas ou no-virulentas ainda no
foram identificadas.
O agente tambm pode ser encontrado em vsceras torcicas e
abdominais e nos tecidos nervosos de smios naturalmente contaminados. Esses tecidos e as culturas preparadas a partir deles so
riscos potenciais.40
nvel de biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades envolvendo uso ou manipulao de tecidos lquidos corporais e materiais para cultura de tecidos de smios. As prticas e as precaues
individuais adicionais, como as detalhadas para o nvel de biossegurana 3, so indicadas para atividades envolvendo uso ou manipulao de qualquer material conhecido por conter ou supostamente
conter o CHV-1, incluindo a reproduo in vitro do vrus para diagnstico. Seria prudente limitar as manipulaes de culturas positivas contendo altas titulaes de vrus para instalaes do nvel
de biossegurana 4 (CSB de classe III ou laboratrio escafandro
veja a seo III), dependendo da deciso do diretor do laboratrio.
As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 4 so recomendadas para as atividades envolvendo a reproduo e a manipulao de quantidades e concentraes de produo de CHV-1.
160
SEO VII
relao dos agentes
Todas as colnias de smios, mesmo as que acreditamos no possurem o anticorpo do CHV-1, devem ser vistas como naturalmente contaminadas. Os animais com leses orais sugestivas de uma
infeco pelo vrus B ativo devero ser identificados e manipulados
com extremo cuidado. Os estudos com animais experimentalmente contaminados por CHV-1 devero ser conduzidos em um NBA-3.
Existem normas para o trabalho seguro com smios e estas devero ser consultadas.41, 42 O uso de luvas, mscaras, jalecos e macaces recomendado para todas as pessoas enquanto estiverem
trabalhando com primatas no-humanos especialmente smios
e outras espcies do Velho Mundo e para todas as pessoas que
entrarem nas salas de animais onde os primatas no-humanos so
alojados. Para minimizar o potencial da exposio da membrana
mucosa,43 alguma forma de barreira dever ser utilizada para prevenir a contaminao dos olhos, da boca e das narinas por borrifos e perdigotos. O uso de diferentes tipos de equipamento de proteo individual (culos de proteo, culos com escudos slidos
ou escudos faciais usados juntamente com mscaras e respiradores) deve ser obrigatrio para a avaliao do risco em laboratrio.
As especificaes do equipamento devero ser balanceadas com o
trabalho realizado, de maneira que as barreiras selecionadas no
aumentem o perigo apresentado pelo local de trabalho, obscurecendo a viso e contribuindo para o aumento de mordidas, picadas por agulhas ou arranhes de animais.
As drogas antivirais representam grandes promessas em relao terapia de coelhos contaminados com H. simiae. A limitada
experincia clnica44, 45 sugere que essa terapia pode ser estendida
ao homem.46, 47 Devido gravidade da infeco com o vrus, pessoas
com experincia mdica devero estar constantemente presentes
e disponveis para que possam gerenciar os incidentes envolvendo as exposies ao agente ou as infeces suspeitas. A transmisso de homens para homens foi documentada em um nico caso,
mostrando que se deve tomar cuidado com lquidos vesiculares,
secrees orais e secrees conjuntivais de pessoas contaminadas.48 As vacinas no esto disponveis para o uso em humanos.
Transferncia do Agente: A licena para a importao do
161
SEO VII
relao dos agentes
Agente: Herpesvrus Humano

Os herpesvrus so patgenos humanos ubquos e so comumente encontrados em uma variedade de materiais clnicos
submetidos ao isolamento do vrus. Embora poucos vrus sejam
agentes comprovadamente causadores de infeces associadas a
laboratrio, eles so patgenos primrios e oportunistas, especialmente em hospedeiros imunocomprometidos. Os vrus herpes
simples 1 e 2 e o vrus da varicela apresentam algum risco pelo
contato direto e/ou pelos aerossis. J os citomegalovrus e o vrus Epstein-Barr apresentam riscos de infeco relativamente baixos para as equipes de laboratrio. O risco de uma infeco laboratorial tendo os herpesvrus 6 e 7 como agentes etiolgicos ainda
desconhecido. Embora esse grupo diversificado de agentes virais
nativos no atenda aos critrios para que possam ser includos no
resumo das caractersticas dos agentes (isto , risco comprovado
ou alto risco potencial para infeces associadas a laboratrio e
para graves seqelas provocadas por uma infeco), a freqncia
de sua presena em materiais clnicos e o uso comum desse grupo
em pesquisas garante sua incluso nesta publicao.
Riscos em Laboratrio: Os materiais clnicos e as substncias isoladas dos herpesvrus apresentam um risco de infeco aps ingesto, inoculao parenteral acidental, exposio das
membranas mucosas dos olhos, do nariz ou da boca aos perdigotos ou inalao de materiais concentrados nebulizados. As amostras clnicas contendo o Herpesvirus simiae (vrus B), mais virulento, podem ser inadvertidamente submetidas a diagnstico de uma
suspeita infeco por herpes simples. O vrus tambm foi encontrado em culturas de clulas renais primrias dos macacos rhesus.
O citomegalovrus pode ser um risco especial durante a gravidez
devido infeco potencial do feto.
de conteno e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicados para atividades que utilizem materiais clnicos sabidamente
ou potencialmente infecciosos ou culturas de agentes virais nativos que estejam associadas ou sejam identificadas como patgenos primrios de doena humana. Embora existam poucas evidncias de que os aerossis infecciosos sejam uma fonte significativa
de infeces associadas a laboratrio, mais prudente evitar a for162
SEO VII
relao dos agentes
mao de aerossis durante a manipulao de materiais clnicos

ou de produtos isolados ou durante a necropsia de animais. Os
dispositivos de conteno primria (cabines de segurana biolgica) constituem a barreira bsica de proteo dos trabalhadores
para evitar a exposio a aerossis infecciosos.
Transferncia do Agente: A licena para importao desses agentes dever ser obtida junto ao CDC.
Agente: Influenza
As infeces adquiridas em laboratrio e que possuem o vrus
da influenza como agente causador no so normalmente documentadas na literatura. Entretanto, devem-se considerar dados
informais e relatrios publicados que indicam que, quando novas
cepas que apresentam um desvio ou uma flutuao antignica foram introduzidas em um laboratrio para diagnstico ou pesquisa, acabaram por causar infeces desse tipo.49
As infeces adquiridas em laboratrios animais, por sua vez,
no foram relatadas, mas h uma grande possibilidade de transmisso por doninhas infectadas para o ser humano e vice-versa.
tecidos ou secrees respiratrias de humanos ou de grande parte
de animais contaminados e na cloaca de muitas espcies de aves
contaminadas. O vrus pode ser disseminado em mltiplos rgos
de algumas espcies animais infectadas.
O risco laboratorial primrio a inalao do vrus pela formao de aerossis de materiais de animais contaminados ou pela
aspirao, suspenso ou mistura de amostras contaminadas pelo
vrus. A manipulao gentica tem um potencial de alterar o alcance, a patogenicidade e a composio dos vrus da influenza.
Existe um potencial desconhecido na introduo de vrus humanos transmissveis com uma nova composio antignica.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para recebimento e inoculao rotineira de amostras laboratoriais para diagnsticos. O material para autpsia dever ser manipulado em uma cabine de segurana biolgica usando os procedimentos do nvel de biossegurana 2.
163
SEO VII
relao dos agentes
Atividades Utilizando Cepas de Vrus No-Contemporneas: Os requisitos para a biossegurana, no caso de infeco
adquirida em laboratrio e transmisso subseqente, devem estar
de acordo com as informaes disponveis sobre a patogenicidade
e a virulncia das cepas que esto sendo usadas e o potencial de
danos para o ser humano ou para a sociedade. As atividades de
produo e pesquisa utilizando cepas contemporneas podem ser
realizadas com segurana usando as prticas de conteno do nvel
de biossegurana 2. A susceptibilidade infeco com cepas humanas no contemporneas mais velhas, recombinantes ou com
substncias isoladas de animais garante o uso de procedimentos
de conteno do nvel de biossegurana 2. Mas no h evidncias
para infeces adquiridas em laboratrio com referncia s cepas
A/PR/8/34 e A/WS/33 ou com suas variantes neurotrpicas mais
comumente usadas.
agente dever ser feita junto ao CDC. J a licena para importao
ou transporte domstico dever ser obtida junto ao USDA/APHIS/VS.
Agente: Vrus da Coriomeningite Linfoctica
As infeces com o vrus LCM adquiridas em laboratrio so
bem documentadas onde ocorram infeces em roedores de laboratrio especialmente camundongos, hamsters e cobaias.50, 51, 52
Os camundongos desprotegidos podem oferecer riscos especiais
por alojarem infeces crnicas silenciosas. As culturas celulares
que inadvertidamente se tornaram contaminadas representam
uma fonte potencial de infeco ou de disseminao do agente.
As infeces naturais so encontradas em primatas no-humanos,
incluindo chimpanzs e macacos sagis (o vrus Callitrichid um
vrus coriomeningite linfoctica), e pode ser fatal para os sagis.
Sunos e ces so vetores menos importantes.
Riscos em Laboratrio: Esse agente pode ser encontrado
no sangue, no lquido cerebroespinhal, na urina, nas secrees da
nasofaringe, nas fezes e nos tecidos de hospedeiros animais contaminados e, possivelmente, do homem. A inoculao parenteral,
a inalao, a contaminao das membranas mucosas ou de peles
rachadas por tecidos ou lquidos contaminados de animais in164
SEO VII
relao dos agentes
fectados so os riscos mais comuns. A transmisso por aerossis

tambm bem documentada.53 O vrus pode oferecer um risco especial durante a gravidez devido infeco potencial do feto.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para as atividades que utilizam lquidos corporais sabidamente ou potencialmente infecciosos
e passagem de cultura celular de cepas de clulas cerebrais de camundongo adaptadas para laboratrio. As prticas e as instalaes
do nvel de biossegurana animal 2 so adequadas para estudos em
camundongos adultos com cepas de passagem cerebrais de rato.
Porm, a conteno e as precaues individuais adicionais, como
as descritas para o nvel de biossegurana 3, so indicadas para
atividades que possuam um alto potencial para a formao de aerossis ou atividades que envolvam quantidades ou concentraes
de produo de materiais infecciosos. Essas precaues tambm
so recomendadas para a manipulao de tumores contaminados
infectveis, o isolamento de campo e os materiais clnicos de casos
humanos. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana
animal 3 so recomendadas para o trabalho com hamsters contaminados. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos.54
Agente: Poliovrus
As infeces com o poliovrus adquiridas em laboratrio so
raras e se limitam s pessoas que trabalham diretamente com esse
vrus em laboratrio e no so vacinadas.55 Existem no mnimo 12
casos documentados de infeces por poliovrus associados a laboratrio, incluindo duas mortes entre 1941 e 1976.56 Porm, uma
vez que ~1% das infeces com o poliovrus resultou em patologia, sem uma confirmao laboratorial impossvel estimar precisamente os nmeros das infeces adquiridas em laboratrio.
Com vacinas e instalaes laboratoriais eficazes, tecnologia e procedimentos bem possvel que essas infeces j sejam raras em
laboratrios. Mas, se os trabalhadores de um laboratrio se contaminarem, eles se tornaro uma fonte de vrus para a populao
no-vacinada.57 As infeces em animais associadas a laboratrio,
entretanto, no tm sido relatadas,58 mas os primatas no-huma165
SEO VII
relao dos agentes
nos experimentalmente ou naturalmente contaminados poderiam

ser uma fonte de infeco se expostos s pessoas no-imunizadas.
Os ratos transgnicos apresentam o receptor humano para o poliovrus e podem tambm ser fontes potenciais de infeco humana.
Riscos em Laboratrio: Esse agente est presente nas fezes
e em secrees de garganta de pessoas infectadas. A ingesto e a
inoculao parenteral de tecidos ou lquidos infecciosos por trabalhadores no-imunizados so consideradas como risco primrio de
infeco em laboratrios. As exposies laboratoriais oferecem um
risco insignificante para as pessoas adequadamente imunizadas.
nvel de biossegurana 2 so indicadas para todas as atividades
que utilizam lquidos sabidamente ou potencialmente infecciosos
e materiais clnicos contendo ou suspeitos de conter cepas do tipo
selvagem. Todos os trabalhadores de laboratrio que trabalhem
diretamente com o agente devero possuir um atestado de vacinao ou provas sorolgicas da imunidade a todos os trs tipos de
poliovrus.59 As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana
animal 2 so indicadas para estudos de vrus virulentos em animais. A menos que existam fortes razes cientficas para o trabalho com poliovrus virulentos (que foram erradicados dos Estados
Unidos), os laboratrios devero usar cepas de vacina oral Sabin
de poliovrus atenuado. Essas no oferecem risco algum equipe
imunizada dos laboratrios.
A Organizao Mundial da Sade (WHO) tem publicado guias
documentadas60 relacionadas ao trabalho com o poliovrus selvagem. A partir de 1999, os laboratrios que manipulam o poliovrus
devero estabelecer um NB-2 (especfico para plio) para todos os
trabalhadores que manipulam ou que forem manipular o poliovrus
selvagem. As NB-2 para plio seguem os requisitos do NB-2 tradicional quanto a instalaes, prticas e procedimentos com os seguintes acrscimos: 1) todos os estoques de poliovrus e materiais
potencialmente infecciosos sero descartados quando no houver
mais a necessidade de ret-los para a realizao de pesquisas ou
diagnsticos; 2) todas as pessoas que entrarem no laboratrio devero estar completamente imunizadas contra o vrus da plio; 3)
o acesso ao laboratrio dever ser restrito; 4) todos os poliovrus
166
SEO VII
relao dos agentes
selvagens retidos no laboratrio devero ser relacionados e armazenados em uma rea separada e segura com acesso limitado; 5) somente os vrus que forem prontamente identificveis por mtodos
moleculares sero usados se as cepas de vrus selvagens ou estoques
de trabalho forem necessrios; e 6) o descarte de poliovrus selvagens, materiais infecciosos e materiais potencialmente infecciosos
dever ser feito utilizando a esterilizao e/ou a incinerao.
Todos os laboratrios que desejarem guardar materiais contaminados por poliovrus selvagem ou potencialmente infecciosos
devero comear a implementao dos procedimentos de conteno do nvel de biossegurana 3 para plio e fornecer a documentao necessria para implementao at o segundo ano. Os laboratrios que desejarem ser qualificados como uma instalao de
NB-3/plio e quiserem reter materiais contaminados por poliovrus devero ser relacionados na Agency/Institutional e no National Inventories. J os que no desejarem a converso para uma
conteno de NB especfica para a plio devero destruir todos os
materiais contendo o poliovrus selvagem ou potencialmente infecciosos com incinerao ou uso da autoclave. Uma outra alternativa seria o contato com um depsito especfico designado pela
Organizao de Sade Pblica para conteno de agentes de um
NB-3/plio, que sero responsveis pelo transporte e armazenamento dos materiais selecionados.
Quando a imunizao pela OPV (vacina oral de poliovrus vivos)
terminar, todo o trabalho com o poliovrus selvagem ficar restrito
a laboratrios de conteno mxima (NB-4). Essa dever ser em laboratrios cabines ou laboratrios de roupa de proteo (seo III).
Transferncia do Agente: A licena para a importao desse agente dever ser obtida junto ao CDC.
Agente: Poxvrus
Casos espordicos de infeces por poxvrus (catapora, vacnia, yabapox, tanabox) foram relatados.61 Evidncias epidemiolgicas sugerem que a transmisso do vrus do macaco para homens
ou de roedores para homens possa ter ocorrido na natureza, mas
no nas dependncias de um laboratrio. Animais de laboratrios
naturalmente ou experimentalmente contaminados so fontes
167
SEO VII
relao dos agentes
potenciais de infeco para pessoas que trabalham em um laboratrio e no so vacinadas. Vrus da vacnia recombinantes reproduzidos geneticamente oferecem um risco potencial ainda maior
para a equipe laboratorial devido ao contato direto ou contato
com materiais clnicos de voluntrios ou animais contaminados.
Riscos em Laboratrio: Esses agentes podem ser encontrados em lquidos de leses ou em escaras, secrees respiratrias ou
tecidos de hospedeiros contaminados. A ingesto, a inoculao parenteral e a exposio de membranas mucosas ou da pele rachada
aos perdigotos ou aerossis de lquidos ou tecidos infecciosos so
os riscos primrios para trabalhadores de laboratrio e tratadores
de animais. Alguns poxvrus so estveis em temperatura ambiente quando secos e podem ser transmitidos por meio dos fmites.
Precaues Recomendadas: A posse e o uso do vrus da varola ficam restritos ao Collaborating Center for Smallpox and Other
Poxvirus Infections, da Organizao Mundial da Sade, localizado
nos Centros de Controle e Preveno de Doenas, em Atlanta, Georgia. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so
recomendadas para todas as atividades envolvendo o uso ou a manipulao de poxvrus, com exceo do vrus da varola, que apresenta um grande risco de infeco aos homens. Todas as pessoas
que trabalham dentro de um laboratrio ou que forem entrar nas
reas de laboratrio ou reas dos animais onde atividades com os
vrus vacnia, vrus da varola bovina e de macacos estiverem sendo conduzidas devero possuir um atestado de vacinao. Essa
imunizao dever ter sido realizada dentro de um perodo de dez
anos. As atividades com os vrus relacionados anteriormente, em
quantidades maiores que as apresentadas nas culturas para diagnstico, podero tambm ser conduzidas em um nvel de biossegurana 2, mas por pessoas imunizadas j que todas as manipulaes de materiais viveis devero ser realizadas em cabines
de segurana biolgica classe I ou II. Indivduos imunodeprimidos
correm um risco de adquirirem uma patologia ainda mais grave
quando infectados por um poxvrus.64
Transferncia do Agente: A licena para importao desse agente dever ser obtida junto ao CDC. No caso de uma licena
168
SEO VII
relao dos agentes
para exportao, esta dever ser obtida no Department of Commerce. O registro dos laboratrios junto ao CDC dever ser obtido
antes do envio ou recebimento dos agentes.
Agente: Vrus da Raiva
As infeces provocadas por esse agente e adquiridas em laboratrio so extremamente raras. Somente duas foram documentadas. Todas as duas resultaram de uma suposta exposio a nevoas
infecciosas de altas titulaes, sendo uma formada em um local
de produo da vacina65 e a outra em um local de pesquisa.66 Os
animais naturalmente ou experimentalmente contaminados, seus
tecidos e suas excrees constituem uma fonte potencial de exposio para o pessoal do laboratrio e tratadores de animais.
todos os tecidos de animais contaminados. As maiores titulaes
so encontradas em tecidos do sistema nervoso central, glndulas
salivares e na saliva. A inoculao acidental, os cortes ou as farpas
de equipamento laboratorial contaminado, as mordidas de animais infectados e a exposio de membranas mucosas (ou da pele
rachada) a lquidos ou tecidos contaminados so as fontes mais
provveis de riscos para a equipe laboratorial e os tratadores de
animais. J os aerossis contaminados ainda no foram demonstrados como sendo um perigo comprovado ao pessoal que trabalha com materiais clnicos e conduzem exames de diagnsticos.
Cepas fixas ou atenuadas desse vrus so supostamente menos
perigosas, mas os nicos dois casos comprovados de raiva adquiridos em laboratrio resultaram de exposio de um Padro Viral
Desafiador (CVS) fixo e de uma cepa atenuada derivada de uma
cepa SAD (Street Alabama Dufferin), respectivamente.67, 68
que utilizam materiais sabidamente ou potencialmente infecciosos. A imunizao recomendada para todos os indivduos antes que se inicie o trabalho com o vrus da raiva ou com animais
infectados ou atividades que envolvam diagnstico, produo ou
pesquisa do vrus. A imunizao tambm recomendada para todos os indivduos que forem entrar na mesma sala onde o vrus da
raiva ou de animais contaminados estiver sendo usado. Embora
169
SEO VII
relao dos agentes
no seja sempre possvel abrir o crnio ou retirar o crebro de um

animal infectado dentro de uma cabine de segurana biolgica,
essencial o uso de luvas pesadas de proteo para prevenir cortes
ou farpas de instrumentos cortantes ou de fragmentos de ossos e
tambm o uso de um escudo facial para proteo das membranas
mucosas dos olhos, do nariz e da boca quanto exposio destas
aos perdigotos infecciosos ou aos fragmentos de tecidos. Se a serra de Stryker for usada para abrir o crnio, evite o contato do crebro com a lmina da serra. A conteno primria e as precaues
individuais adicionais, como as descritas para o nvel de biossegurana 3, podero ser indicadas para atividades com um alto potencial de formao de aerossis ou perdigotos e para as atividades
que envolvam quantidades ou concentraes de materiais infecciosos em grande escala.
Agentes: Retrovrus, incluindo o Vrus da Imunodeficincia
Humana e o Vrus da Imunodeficincia Smia (HIV e SIV)
Os dados sobre a transmisso do HIV ocupacional para trabalhadores de um laboratrio so coletados por intermdio de dois
sistemas de vigilncia nacional apoiados pelos CDC: vigilncia
quanto aids e s pessoas infectadas pelo HIV que no adquiriram
a infeco em exposies ocupacionais. Para propsitos de vigilncia, os trabalhadores de laboratrio so definidos como as pessoas,
incluindo estudantes e estagirios, que trabalham ou j trabalharam em um laboratrio para diagnstico do HIV ou laboratrio clnico a partir de 1987. Os casos reportados nesses dois sistemas so
classificados como uma transmisso ocupacional possvel ou documentada. As que so classificadas como transmisso ocupacional
documentada possuem evidncias de uma soroconverso do HIV
(um teste HIV negativo no momento da exposio que se alterou
e se tornou positivo) seguida de uma discreta exposio ocupacional percutnea ou mucocutnea ao sangue, aos lquidos ou a outras amostras clnicas ou laboratoriais. At junho de 1998, o CDC
havia registrado 16 trabalhadores de laboratrios (todos clnicos)
nos Estados Unidos com transmisso ocupacional documentada.69
170
SEO VII
relao dos agentes
Em 1992, dois trabalhadores de diferentes laboratrios desenvolveram o vrus da imunodeficincia de smios (SIV) aps terem
se exposto. Um caso estava associado a uma picada de agulha, que
aconteceu enquanto o trabalhador estava manipulando uma agulha contaminada com sangue aps uma hemorragia em um macaco infectado por SIV.70 J o outro caso envolveu um trabalhador
que manipulava amostras de sangue de um macaco infectado pelo
SIV sem usar luvas. Embora ele no se lembrasse desse incidente
especfico, este indivduo apresentou dermatites nos antebraos
e nas mos enquanto trabalhava com amostras de sangue infectado.71 O primeiro trabalhador apresentou uma soroconverso e,
portanto, no apresentou evidncia alguma de infeco pelo SIV.
O segundo era soropositivo durante pelo menos nove anos, sem
evidncia alguma da doena ou de deficincia imunolgica.
Publicaes recentes72, 73 identificaram a prevalncia (4/231,
1,8%) da infeco por vrus espumosos de smios (SFV) entre humanos ocupacionalmente expostos a primatas no-humanos. O
diagnstico de infeces por SFV inclui a soropositividade, a deteco de DNA proviral e o isolamento do vrus espumoso. O SFV
se originou do macaco-verde africano (uma pessoa) e de babunos
(trs pessoas). Essas infeces ainda no provocaram doenas ou
transmisso sexual e podem representar infeces benignas.
Riscos em Laboratrio: O HIV tem sido isolado do sangue,
do smen, da saliva, das lgrimas, da urina, do lquido cerebroespinhal e do tecido de pessoas infectadas e de primatas no-humanos experimentalmente infectados.74 O CDC recomenda que
os cuidados com o sangue e os lquidos corporais sejam intensificados consistentemente quando amostras de sangue contaminadas estejam sendo manipuladas.75, 76 Essa abordagem, chamada
de precaues universais, inclui a necessidade de identificar as
amostras clnicas obtidas de pacientes soropositivos ou de se realizar um teste HIV da amostra.
Embora o risco de um HIV adquirido ocupacionalmente se d
primariamente por meio da exposio ao sangue contaminado,
deve-se usar luvas quando outros lquidos corporais como fezes,
saliva, urina, lgrimas, suor, vmito e leite do seio humano estiverem sendo manipulados. Esse procedimento tambm reduzir
171
SEO VII
relao dos agentes
o potencial de exposio a outros microorganismos que possam

causar outros tipos de infeces.
No laboratrio, deve-se supor que o vrus esteja presente em
todas as amostras sangneas ou clnicas contaminadas por sangue, em qualquer tecido ou rgo (que no seja a pele intacta) humano (vivo ou morto) no fixado, em culturas de HIV, em todos
os materiais derivados de culturas de HIV e em/sobre equipamentos e dispositivos que tenham um contato direto com qualquer
um desses materiais.
J o SIV tem sido isolado no sangue, no lquido cerebroespinhal e em uma variedade de tecidos de primatas no-humanos infectados. Existem dados limitados sobre a concentrao do vrus
no smen, na saliva, no lquido cerebroespinhal, na urina, no leite
materno humano e no lquido amnitico. No laboratrio, deve-se
supor que o vrus esteja presente em todas as culturas com SIV,
em animais experimentalmente infectados ou inoculados com
SIV, em todos os materiais derivados de culturas de HIV ou de SIV
e em/sobre todos os equipamentos de dispositivos que tenham
um contato direto com qualquer um desses materiais.77
No laboratrio, a pele (especialmente quando arranhes, cortes, abrases, dermatites ou outras leses estiverem presentes) e
as membranas mucosas dos olhos, do nariz e da boca devero ser
consideradas como vias de entrada potenciais desses retrovrus.
No se sabe se a infeco pode ocorrer via trato respiratrio. A
necessidade do uso de objetos cortantes no laboratrio dever ser
avaliada. Agulhas, instrumentos afiados, vidros quebrados e outros objetos afiados devero ser cuidadosamente manipulados e
adequadamente descartados. Deve-se tomar cuidado para prevenir a formao de borrifos ou o vazamento do lquido de cultura
de clulas contaminadas e de outros materiais contendo o vrus
ou potencialmente contaminados.78
Precaues Recomendadas: Alm das seguintes precaues recomendadas, as pessoas que trabalham com o HIV, o SIV
ou outros patgenos presentes no sangue devero consultar a
OSHA Bloodborne Pathogen Standard.79 As questes relacionadas
172
SEO VII
relao dos agentes
interpretao desse padro devero ser dirigidas aos escritrios

federais, regionais ou estaduais da OSHA.
1. O padro do NB-2 e as prticas especiais, os equipamentos de conteno e as instalaes so indicados para as
atividades que envolvam todas as amostras clnicas contaminadas com sangue, lquido corporal e tecidos de todos os homens ou animais laboratoriais inoculados ou
infectados com SIV ou HIV.
2. As atividades como a produo de quantidades em grande escala, para laboratrios de pesquisas de HIV ou SIV,
a manipulao de preparaes concentradas de vrus e a
conduo de procedimentos que possam formar perdigotos ou aerossis devero ser realizadas em um local de
NB-2, mas usando prticas e equipamentos de conteno
adicionais recomendadas para o nvel de biossegurana 3.
3. As atividades que envolvem volumes em escala industrial
ou a preparao de HIV ou SIV concentrado devero ser
conduzidas em um local de NB-3, usando prticas e equipamentos de contenos 3.
4. Primatas no-humanos ou outros animais infectados
com HIV ou SIV devero ser alojados em instalaes de
NB-2 usando prticas especiais e equipamentos de conteno de NBA-2.
Comentrios Adicionais:
1. No existem evidncias de que as roupas usadas em laboratrio representam um risco para a transmisso do
retrovrus. Porm, as roupas contaminadas pelo HIV ou
SIV devero ser descontaminadas antes de encaminhadas para a lavanderia ou descartadas. A equipe do laboratrio dever retirar a roupa usada nesse local antes de se
dirigir s reas no-pertencentes ao laboratrio.
2. As superfcies de trabalho devero ser descontaminadas com um germicida qumico apropriado depois de o
procedimento ser concludo, quando as superfcies estiverem excessivamente contaminadas e no final de cada
dia de trabalho. Muitos desinfetantes qumicos vendidos
comercialmente 80, 81, 82, 83, 84 podero ser utilizados para
173
SEO VII
relao dos agentes
a descontaminao das superfcies do laboratrio e de

alguns instrumentos, para limpeza local de roupas contaminadas usadas em laboratrio e para vazamento de
materiais infecciosos. A descontaminao imediata de
vazamentos ocorridos dever ser uma prtica padro.
3. O soro humano de qualquer fonte usado como um controle ou reagente em um teste dever ser manipulado em
um NB-2.
4. Recomenda-se que todas as instituies estabeleam normas por escrito em relao ao gerenciamento das exposies em laboratrio do HIV e do SIV juntamente com
as leis federais, estaduais e locais aplicveis. Tais normas
devero considerar como confidenciais questes como o
consentimento para realizao de teste, a administrao
de terapia de drogas profilticas adequadas,85 o aconselhamento e outros itens relacionados. Se um trabalhador
do laboratrio expuser a membrana mucosa ou parenteral ao sangue, ao lquido corporal ou ao material de cultura viral, o material utilizado dever ser identificado e,
se possvel, testado para verificao da presena do vrus.
Se o material fonte for HIV positivo para o antgeno, vrus ou anticorpo ou no possuir quantidade suficiente
para realizao do teste, o trabalhador dever ser aconselhado sobre o risco de infeco e avaliado clinicamente
e sorologicamente para evidncia de uma infeco por
HIV. A profilaxia ps-exposio dever ser oferecida de
acordo com as ltimas normas. O trabalhador deve ser
instrudo a relatar e procurar atendimento mdico caso
haja a ocorrncia de um quadro agudo de febre, com 12
semanas aps a exposio.86 Uma vez que a doena possui caractersticas singulares, se o indivduo apresentar
sintomas como febre, erupes ou linfoadenopatias, esses podero ser indicativos de uma infeco recente ao
HIV. Se no incio (no momento da exposio) o teste for
negativo, o trabalhador dever refazer o teste 6 semanas
depois da exposio e, a partir da, periodicamente (isto
, na 12. semana e no 6., 9. e 12. ms aps a exposio). Durante o acompanhamento, os trabalhadores ex174
SEO VII
relao dos agentes
postos devero ser aconselhados a se prevenir contra a

transmisso do HIV. 87, 88, 89, 90, 91
5. Outros agentes patognicos oportunistas e primrios podero estar presentes nos lquidos corporais e tecidos de
pessoas infectadas com o HIV. Os trabalhadores de laboratrio devero seguir as prticas de biossegurana aceitas para assegurar uma proteo mxima contra a exposio inadvertida aos agentes, que podem tambm estar
presentes em amostras clnicas ou em amostras obtidas
de primatas no-humanos.92, 93, 94
A pesquisa envolvendo outros retrovrus humanos (isto , vrus linfotrpico-T tipos I e II) e de smios est sendo desenvolvida
em muitos laboratrios. Uma vigilncia recente para essas infeces revelou a exposio e a infeco ocupacional pelo vrus espumoso do smio entre zeladores de animais de locais de pesquisas
laboratoriais.95, 96 As precaues destacadas devero ser suficientes
enquanto o trabalho com os agentes estiver sendo conduzido.
Os laboratrios que trabalham com vetores do retrovrus, especialmente os que possurem genomas moleculares infecciosos
de longa durao (HIV-1), devero ser manipulados em NB-2 sob
a prtica de NB-2/3. Isso inclui os clones infecciosos derivados de
vrus no-humanos, mas que possuem uma esfera de hospedeiro
xemotrpio (especialmente para clulas humanas).
Agentes:Encefalopatias Espongiformes Transmissveis
(por agentes da Creutzfeldt-Jakob, kuru e outros
agentes)
As infeces por encefalopatias espongiformes transmissveis adquiridas em laboratrio (doenas prinicas) ainda no foram documentadas. Porm, existe uma evidncia de que a doena
de Creutzfeldt-Jakob (CJD) tenha sido iatrogenicamente transmitida aos pacientes em transplantes de crnea, transplantes da
dura-mter, na extrao do hormnio do crescimento das glndulas pituitrias humanas e pela exposio aos eletrodos eletroencefalogrficos contaminados.97 A infeco sempre fatal. No se
175
SEO VII
relao dos agentes
conhece um reservatrio no-humano para a CJD ou para a kuru.

Os primatas no-humanos e outros animais de laboratrio foram
contaminados por intermdio da inoculao, mas no existem evidncias de uma transmisso secundria. A scrapie de ovelhas e cabras, a encefalopatia espongiforme bovina e a encefalopatia de vises so encefalopatias espongiformes transmissveis de animais
que so semelhantes s doenas humanas transmissveis. Entretanto, no existem evidncias de que as doenas animais possam
ser transmitidas ao homem. (Veja tambm a seo VII-D, Prons).
Riscos em Laboratrio: Altas titulaes de um agente
transmissvel foram encontradas no crebro e na medula espinhal de pessoas com kuru. Em pessoas com a doena de Creutzfeldt-Jakob e as variantes da Sndrome de Gerstmann-StrusslerSchenker, encontrou-se um agente transmissvel semelhante no
crebro, no bao, no fgado, nos ndulos linfticos, nos pulmes,
na medula espinhal, nos rins, na crnea, nas lentes, no lquido
espinhal e no sangue. A inoculao parenteral acidental, especialmente de tecidos nervosos, incluindo amostras de tecidos no-fixados, extremamente perigosa. Embora os tecidos no-nervosos
sejam bem menos infecciosos, todos os tecidos de homens e de
animais infectados com esses agentes devero ser considerados
potencialmente perigosos. O risco de uma infeco por aerossis,
perdigotos e exposies da pele intacta, das membranas mucosas
e gstricas no conhecido. No h evidncia de contaminaes
por transmisso por aerossis ou contato. Esses agentes so caracterizados pela extrema resistncia aos procedimentos de inativao convencionais, incluindo a radiao, a ebulio, o calor seco
e as substncias qumicas (formalina, betapropiolactona, lcool).
Porm, eles foram inativados pelo uso de NaOH a 1N, de hipocloreto de sdio (concentrao de cloro livre > 2%) e da autoclave a
vapor durante quatro horas e meia em uma temperatura de 132C.
utilizando tecidos e lquidos sabidamente ou potencialmente infecciosos de homens naturalmente infectados e de animais experimentalmente infectados. Deve-se tomar um extremo cuidado
para evitar a auto-inoculao acidental ou outras inoculaes parenterais traumticas de tecidos e lquidos infecciosos. 98 Embora
176
SEO VII
relao dos agentes
no haja evidncias que sugiram a transmisso via aerossis na

doena natural, mais prudente evitar a formao de aerossis
ou perdigotos durante a manipulao de tecidos e lquidos e durante a necropsia de animais experimentais. Recomenda-se muito o uso de luvas para as atividades que proporcionem o contato
da pele com tecidos e lquidos infectados. Os tecidos fixados em
formaldedo e imersos em parafina, especialmente os tecidos do
crebro, permanecem infecciosos. Recomenda-se, ento, que os
tecidos de casos suspeitos de encefalopatia fixados em formalina
sejam imersos em cido frmico a 96% durante trinta minutos
antes do processamento histopatolgico.99 As vacinas no esto
disponveis para uso em humanos.100
Transferncia do Agente: A licena para importao desses agentes dever ser obtida junto ao CDC. A licena para importao ou transporte domstico do vrus da encefalopatia espongiforme bovina poder ser obtido no USDA/APHIS/VS.
Agente: Vrus da Estomatite Vesicular (VSV)
Um nmero de infeces por cepas nativas do VSV adquiridas
em laboratrio foi relatado.101 As atividades laboratoriais com essas cepas apresentam dois diferentes nveis de risco ao pessoal
do laboratrio e esto relacionadas, pelo menos em parte, histria das passagens das cepas utilizadas. As atividades que usam
criaes, seus tecidos infectados e substncias virulentas isoladas
dessas fontes so um perigo demonstrado aos funcionrios do laboratrio e aos tratadores de animais.102, 103 Os ndices de soroconverso e doena clnica em pessoas que trabalham com esses materiais so altos.104 Riscos semelhantes podem estar associados s
cepas exticas como a Piry.105
Em contraste, informaes no-oficiais indicam que as atividades com cepas menos virulentas adaptadas a laboratrio (por
exemplo, Indiana, San Juan e Glascow) so raramente associadas com a soroconverso ou com a doena. Essas cepas so comumente utilizadas por bilogos moleculares, freqentemente em
grandes volumes e altas concentraes, sob condies de conteno mnima ou nenhuma conteno primria. Algumas cepas do
VSV so consideradas organismos restritos pelos regulamentos
da USDA (9CFR 122.2). Ratos infectados experimentalmente no
serviram como uma fonte documentada de infeco humana.
177
SEO VII
relao dos agentes
Riscos em Laboratrio: O agente pode ser encontrado no lquido vesicular, nos tecidos de animais infectados e no
sangue e nas secrees de garganta de homens infectados. A
exposio aos aerossis ou perdigotos contaminados, ao contato direto da pele e da membrana mucosa com os tecidos e lquidos infectados e a auto-inoculao acidental so os perigos
primrios associados com a substncia virulenta isolada. A inoculao parenteral acidental e a exposio aos aerossis infectados representam os riscos potenciais ao pessoal que trabalha com cepas menos virulentas adaptadas aos laboratrios.
nvel de biossegurana 3 so indicadas para atividades que envolvam o uso ou a manipulao de tecidos infectados e substncias virulentas isoladas de animais de criao infectados naturalmente ou
experimentalmente. As luvas e a proteo respiratria so recomendadas para a necropsia e o manuseio de animais infectados. As prticas e as instalaes do nvel de biossegurana 2 so indicadas para
atividades que utilizam cepas adaptadas em laboratrios de baixa
virulncia. As vacinas no esto disponveis para uso em humanos.
Transferncia do Agente: A licena para exportao desse
agente dever ser obtida no Department of Commerce. J a licena para importao ou transporte domstico para o agente dever
ser obtido no USDA/APHIS/VS.
Seo VII-G: Arbovrus e Vrus Zoonticos

Relacionados
Arbovrus Designados para o Nvel de Biossegurana 2
O American Committee on Arthropod-Borne Viruses (ACAV)
registou 537 casos de arbovrus at dezembro de 1997. Em 1979,
o subcomit da ACAV sobre a segurana quanto ao arbovrus em
laboratrio (Subcommittee on Arbovirus Laboratory Safety
SALS) classificou e registrou 424 vrus no Catalogue of Arboviruses and Certain Other Viruses of Vertebrates (Catlogo de Arbovrus e Alguns Outros Vrus de Vertebrados) em um dos quatro
grupos de prticas, equipamentos de segurana e instalaes recomendadas. Essas recomendaes esto descritas nesta publicao
178
SEO VII
relao dos agentes
como nveis de biossegurana 1-4.2 O SALS tem atualizado periodicamente a publicao de 1980, fornecendo uma lista suplementar para os arbovrus registrados desde 1979.
As classificaes do SALS se baseiam nas avaliaes do risco
derivadas de informaes fornecidas por uma pesquisa mundial
de 585 laboratrios que trabalham com o arbovrus. O SALS recomenda que o trabalho com grande parte desses agentes seja conduzido em um nvel semelhante ao do nvel de biossegurana 2
(lista 5). O SALS tambm reconhece cinco cepas de vacinas comumente usadas, nas quais a atenuao foi firmemente estabelecida.
Esses vrus podem ser manipulados com segurana em um nvel
de biossegurana 2, uma vez que as pessoas que trabalham com
essas cepas de vacinas so imunizadas (tabela 5). O SALS classificou todos os vrus registrados com os quais a experincia laboratorial insuficiente como um nvel de biossegurana 3 (lista 6) e
reavalia a classificao assim que recebe novas informaes.
Os vrus classificados em um NB-2 esto relacionados por ordem
alfabtica na lista 5 e incluem os seguintes agentes que so relatados como causadores de infeces adquiridas em laboratrio.3, 4, 5
Tabela 4. Agentes causadores de infeces adquiridas em laboratrio
Vrus
Estomatite Vesicular**
Febre do Carrapato do Colorado
Dengue*
Pichinde
Encefalomielite Eqina Ocidental**
Rio Bravo
Kunjin
Catu
Caraparu
Rio Ross
Bunyamwera
Encefalomielite Eqina do Leste* **
Zika
Casos
46
16
11
17
7 (2 mortes)
7
6
5
5
5
4
4
4
continua
179
SEO VII
relao dos agentes
continuao
Vrus
Apeu
Marituba
Tacaribe
Murutucu
Onyong-nyong
Modoc
Oriboca
Ossa
Keystone
Bebaru
Bluetongue * **
Casos
2
2
2
1
1
1
1
1
1
1
1
* Licena de exportao obtida no Department of Commerce.

** A licena para importao ou transporte domstico para este agente pode ser obtida
junto ao USDA/APHIS/VS.
Os resultados de uma pesquisa realizada pelo SALS indicam,

claramente, que a fonte suspeita das infeces adquiridas em laboratrio relacionadas no foi a exposio aos aerossis infecciosos.
A recomendao de que o trabalho com os 342 vrus relacionados
na lista 5 seja conduzido em um nvel de biossegurana 2 baseouse na existncia de uma experincia laboratorial durante toda a
histria, para a avaliao dos riscos do trabalho com esse grupo de
vrus de risco. Isso indica que (a) nenhuma infeco aberta e associada ao laboratrio foi relatada; (b) as infeces foram provocadas por exposies diferentes das exposies aos aerossis; ou (c)
se a doena provocada pela exposio aos aerossis foi documentada, ela rara.
Riscos em Laboratrio: Os agentes relacionados neste grupo podem ser encontrados no sangue, lquido cerebroespinhal, tecidos do sistema nervoso central e outros tecidos e em artrpodes infectados, dependendo do agente e do estgio da infeco.
Os riscos primrios em laboratrios so impostos pela inoculao
parenteral acidental, contato do vrus com pele rachada ou membranas mucosas e mordidas de roedores e artrpodes de laboratrio. Porm, os aerossis infecciosos podem tambm ser uma fonte
potencial de infeco.
Precaues Recomendadas: As prticas, os equipamentos de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 2
so indicados para as atividades com materiais clnicos poten180
SEO VII
relao dos agentes
cialmente infecciosos, ovos embrionados e roedores. A infeco

de galinhas recm-nascidas pelos vrus da encefalomielite eqina ocidental e do leste especialmente perigosa e dever ser
manipulada por pessoas imunizadas em condies de um nvel de biossegurana 3. As vacinas investigacionais (IND) contra a encefalomielite eqina do leste e a ocidental esto disposio por meio do Centro de Preveno e Controle da Doena
(telefone 404-639-3356) e por meio do Instituto de Pesquisa
Mdica de Doenas Infecciosas do Exrcito (USDAMRIID) em
Fort Detrick, Maryland (telefone 301-619-2833). O uso dessas vacinas recomendado para as pessoas que trabalham diretamente e regularmente com esses dois agentes no laboratrio.
Antes de 1988, foram relatados 12 casos de dengue adquiridos em laboratrio. Porm, de 1988 at 1991, somente quatro casos foram documentados. Em todos os quatro casos, no se usou
uma roupa de segurana apropriada (jaleco de manga comprida
amarrado atrs, luvas, mscaras e culos de proteo) e em trs casos a conteno para aerossis potenciais em uma cabine de biossegurana de fluxo laminar foi ignorada. Esses sprays ou lquidos
infectados possivelmente contaminaram a pele desprotegida ou
rachada. Um fator adicional nesses casos foi o trabalho com quantidades de vrus altamente concentradas. A manipulao segura
do vrus da dengue em laboratrio (particularmente em preparaes concentradas) requer uma obedincia severa s recomendaes do nvel de biossegurana 2.
Grandes quantidades e/ou altas concentraes de qualquer vrus possuem um potencial para superar os mecanismos imunes
naturais e a imunidade induzida pela vacina. Quando um vrus do
nvel de biossegurana 2 produzido em grandes quantidades ou
em altas concentraes, os diretores dos laboratrios devero garantir que a roupa de proteo adequada seja usada, como descrita
no pargrafo anterior, e que as manipulaes sejam realizadas em
cabines de biossegurana de fluxo laminar (veja tambm a seo V,
"Avaliao dos Riscos").
Transferncia do Agente: A licena para importao desses
agentes dever ser conseguida no CDC. O registro do laboratrio junto ao CDC necessrio antes do envio ou recebimento dos agentes.
181
SEO VII
relao dos agentes
Lista 5. Arbovrus e arenavrus designados para o nvel de

biossegurana 2
Abras
Abu Hammad
Acado
Acara
Aguacate
Alfuy
Almpiwar
Amapari
Ananindeua
Anhang
Anhembi
Anfilo A
Anfilo B
Apeu
Apoi
Aride
Arkonam
Aroa
Aruac
Arumowot
Aura
Avalon
Babahoyo
Bagaza
Bahig
Bakau
Baku
Bandia
Bangoran
Bangui
Banzi
Barur
Batai
Batama
Bauline
Bebaru
Belmont
Benevides
Benfica
Bertioga
Bimiti
Birao
Bluetongue*
Boracia
Botambi
Boteke
Bouiboui
Bujaru
Bunyamwera
Bunyp Creek
Burg El Arab
Bushbush
Bussuquara
Buttonwillow
Bwamba
Cacao
Cache Valley
Caimito
California Enc.
Calovo
Candiru
Cape Wrath
Capim
Caraparu
Catu
Chaco
Chagres
Chandipuras
Changuinola
Chardleville
Chenuda
Chilibre
Chobar Gorge
Clo Mor
Corriparta
Cotia
Cowbone Ridge
Csiro Village
Cuiab
DAguilar
Dengue-1
Dengue-2
Dengue-3
Dengue-4
Dera Ghazi Khan do Leste **
Doena Hem. Ep.
Edge Hill
Encef. Eqina
Encef. Eqina Ocid.**
Erve
Eubenangee
Eyach
Feb. do Carrapato do Colorado
Febre do Mosquito-Plvora (Naples)
Febre do Mosquito-Plvora (Sicilian)
Febre Hem. de Smios
Flanders
Floresta Barmah
Forte Morgan
Frijoles
Gamboa
Gan Gan
Gomoka
Gossas
Grand Arbaud
Great Island
Guajara
Guama
Guaratuba
Guaroa
Gumbo Limbo
continua
182
SEO VII
relao dos agentes
continuao
Hart Park
Highlands J
Huacho
Hughes
Icoaraci
Ieri
Ilesha
Ilha Carey
Ilheus
Ingwavuma
Inkoo
Ippy
Irituia
Isfahan
Itaporanga
Itaqui
Jamestown Canyon
Japanaut
Johnson Atoll
Joinjakaka
Juan Diaz
Jugra
Jurona
Jutiapa
Kadam
Kaeng Khoi
Kaikalur
Kaisodi
Kamese
Kammavanpettai
Kannamangalam
Kao Shuan
Karimabad
Karshi
Kasba
Kemerovo
Kern Canyn
Ketapang
Keterah
Keuraliba
Keystone
Kismayo
Klamath
Kokobera
Kolongo
Koongol
Kowanyama
Kunjin
Kununurra
Kwatta
La Crosse
La Joya
Landjia
Langat
Lanjan
Las Maloyas
Latino
Le Bombo
Le Dantec
Lednice
Lipovnik
Lokern
Lone Star
Lukuni
Mpoko
Madrid
Maguari
Main Drain
Malakal
Manawa
Manitoba
Manzanilla
Mapputta
Maprik
Marco
Marituba
Marrakai
Matara
Matruh
Matucare
Melao
Mermet
Minatitlan
Minnal
Mirim
Mitchell River
Modoc
Mono Lake
Mont. Myotis leuk
Morcego Dakar
Morcego Entebe
Morcego Lagos
Morcego Mount Elgon
Morcego Phnom-Penh
Moriche
Mosqueiro
Mossuril
Murutucu
Mykines
Navarro
Ncgaigan
Nepuyo
Nique
Nkolbisson
Nola
Ntaya
Nugget
Nyamanini
Nyando
Onyong-nyong
Okhotskiy
Okola
Olifantsvlei
Oriboca
Ossa
Pacora
Pacui
Palyam
Paran
Pata
continua
183
SEO VII
relao dos agentes
continuao
Pathum Thani
Patois
Pichinde
Pixuna
Pongola
Ponteves
Precarious Point
Pretoria
Prospect Hill
Puchong
Punta Salinas
Punta Toro
Qalyub
Quaranfil
Rede Mahogany
Restan
Rio Bravo
Rio Grande
Ross River
Royal Farm
Sabo
Saboya
Saint Floris
Sakhalin
Salehabad
San Angelo
Sandjimba
Sango
Sathuperi
Sawgrass
Sebokele
Seletar
Serra do Navio
Shark River
Sharmonda
Shuni
Silverwater
Simbu
Sindbis
Sixgun City
Snowshoew Hare
Sokuluk
Soldado
Sororoca
Stratford
Sunday Canyon
Tacaiuma
Tacaribe
Taggert
Tahyna
Tamiami
Tanga
Tanjong Rabok
Tataguine
Tehran
Tembre
Tembusu
Tensaw
Tete
Tettnang
Thimiri
Thottapalayan
Tibrogargan
Timbo
Timboteua
Toscana
Toure
Tribec
Triniti
Trivittatus
Tsuruse
Turlock
Tyndholmur
Tyuleniy
Uganda S.
Uma
Umatilla
Umbre
Upolu
Urucuri
Usutu
Uukuniemi
Vellore
Venkatapuram
Vinces
Virgin River
VS-Indiana
VS-New Jersey
Wad Medani
Wallal
Wanowrie
Warrego
Whataroa
Witwatersand
Wongal
Wongorr
Wyeomyia
Yaquina Head
Yata
Yogue
Zaliv Terpeniya
Zegla
Zika
Zirqa
* A licena para a exportao desse agente deve ser obtida no Department of Commerce.
** A vacina j se encontra disponvel e recomendada para todas as pessoas que trabalham com o agente.
A licena para importao ou transporte domstico para esse agente poder ser obtida
184
SEO VII
relao dos agentes
Transferncia do Agente: A licena para importao dos

agentes deve ser obtida no CDC. O registro do laboratrio junto
ao CDC necessrio para o envio ou recebimento dos agentes.
Tabela 5. Cepas vacinais de vrus do NB-3/4 que podem ser
manipuladas em um nvel de biossegurana 2
Vrus
Cepa da Vacina
Chikungunya*
131/25
Junin*
cndida n. 1
Febre do Vale Rift*
20 MP-12
Encefalomielite Eqina Venezuelana*
TC-83
Febre Amarela*
17-D
* A licena para exportao deve ser obtida no Department of Commerce.
Arbovrus e Arenavrus Designados para o

Nvel de Biossegurana 3
O SALS recomenda que o trabalho com os 184 arbovrus inclu
dos nas listas por ordem alfabtica das listas 6 e 7 seja conduzido
pelas prticas, pelos equipamentos de segurana e pelas instalaes semelhantes as do nvel de biossegurana 3. Essas recomendaes baseiam-se nos seguintes critrios: para a lista 6, o SALS
considerou inadequada a experincia laboratorial para a avaliao
de risco, sem levar em considerao as informaes disponveis sobre a gravidade da doena. Para os agentes relacionados na lista 7,
o SALS registrou as infeces adquiridas em laboratrios abertos
que eram transmitidas por aerossis e na ausncia de vacinas. O
SALS considerou que a doena natural em homens potencialmente grave, ameaa vida ou causa seqelas. Os arbovrus tambm
foram classificados no NB-3 por causarem doenas em animais domsticos em pases fora dos Estados Unidos.
As infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio animal com os seguintes agentes de NB-3 foram relatados: 6, 7, 8
185
SEO VII
relao dos agentes
Tabela 6. Infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio

animal (1)
Vrus
Casos (SALS)
Encefalomielite Eqina Venezuelana*
150 (1 morte)
Febre do Vale Rift *
47 (1 morte)
Chikungunya *
39
Febre Amarela*
38 (8 mortes)
Encefalite Japonesa*
22
Encefalite Ovina
22
Nilo Oeste
18
Coriomeningite Linfoctica*
15
Orungo
13
Piry
13
Wesselsbron
13
Mucambo
10
Bhanja
6
Hantaan*
6
Mayaro
5
Spondweni
4
Encefalite do Vale Murray
3
Semliki Forest
3 (1 morte)
Powassan
2
Dugbe
2
Issyk-kul
1
Koutango
1
* A licena para a exportao desses agentes deve ser obtida no Department of Commerce.
A licena para importao ou transporte domstico do agente dever ser conseguida
Grandes quantidades e altas concentraes do vrus da floresta

de Semliki so comumente usadas ou manipuladas por bilogos
moleculares sob condies de uma conteno moderada ou baixa. Embora os anticorpos tenham sido demonstrados em indivduos que trabalhavam com esse vrus, a primeira infeco aberta
(e fatal) adquirida em laboratrio foi relatada em 1979. Uma vez
que o resultado dessa infeco pode ter sido influenciado por uma
via de exposio incomum ou por uma alta dose, um hospedeiro
comprometido ou uma cepa de vrus mutante, este caso e seu resultado no so exemplos tpicos. Mais recentemente, o SFV foi
186
SEO VII
relao dos agentes
associado ao surto de doenas febris entre soldados europeus cuja

base militar era em Bangui.9 A via de exposio no foi determinada na infeco laboratorial fatal, uma vez que os mosquitos foram
os provveis vetores dessas infeces naturais. O SALS continua
a classificar esse vrus (SFV) como um vrus do NB-3, com advertncia de que a maioria das atividades com o vrus pode ser conduzida com segurana em um nvel de biossegurana 2.
Alguns vrus (por exemplo, a meningoencefalite turca de Israel,
Akabane) esto relacionados em um NB-3, no por serem uma
ameaa sade humana, mas por serem doenas exticas de aves
ou criaes domsticas.
Riscos em Laboratrio: Os agentes relacionados nesse grupo podem ser encontrados no sangue, no lquido cerebroespinhal,
na urina e nos exsudatos, dependendo do agente especfico e do
estgio da doena. Os riscos laboratoriais primrios so a exposio aos aerossis de solues infecciosas e roupas de cama de
animais, inoculao parenteral acidental e o contato com a pele
rachada. Alguns desses agentes (por exemplo, o VEE) podem ser
relativamente estveis no sangue seco ou em exsudatos. Para os
vrus de um NB-3/4, as cepas atenuadas existem e podem ser manipuladas em um NB-2, conforme relacionado na tabela 5.
de segurana e as instalaes do nvel de biossegurana 3 so indicados para as atividades que usam materiais clnicos potencialmente infecciosos e culturas de tecido, animais e artrpodes infectados.
Um vrus vivo atenuado licenciado se encontra disposio
para a imunizao contra a febre amarela. Recomenda-se o uso
dessa vacina para as pessoas que trabalham com o agente ou com
animais infectados e a pessoas autorizadas a entrar na sala onde
os agentes ou os animais infectados estejam presentes. Realmente, para essa vacina, a infectividade dos aerossis e o alto ndice
de fatalidade do vrus da febre amarela fazem com que ele seja
classificado como um vrus do NB-4. Para a encefalomielite eqina venezuelana, a vacina investigacional TC-83 proporciona uma
excelente proteo contra muitas cepas epizoticas. Essa proteo
pode se estender a outras cepas de VEE do complexo, incluindo
os vrus Everglades, Mucambo, Tonate e Cabassou. A vacina TC-38
187
SEO VII
relao dos agentes
dever ser usada como parte de um programa de segurana e pode

ser particularmente importante para a proteo das pessoas que
trabalham com animais infectados e vrus concentrados. A administrao da vacina e o uso desse complemento inativado (C-84)
devero ser determinados por peritos com experincia no uso dessas vacinas dentro das restries compatveis com as drogas de
pesquisa. De forma semelhante, a vacina IND inativada est disposio para o vrus da febre do Vale Rift. Uma vacina de vrus Junin atenuado (Cndida n. 1) tambm est disponvel. Essas vacinas de IND podem ser obtidas no U.S Army Medical Research and
Material Command, aps consulta ao USAMRIID (telefone 301619-2833).
O SALS tem diminudo a classificao do risco biolgico do vrus Junin para o nvel de biossegurana 3, j que todas as pessoas
do grupo de risco so imunizadas e o laboratrio se encontra equipado com filtros HEPA de exausto. O SALS tambm diminuiu a
classificao do vrus da encefalite transmitida pelo carrapato da
Europa Central (CETBE) para o nvel de biossegurana 3, j que todas as pessoas do grupo de risco so imunizadas. Uma vacina IND
inativada para o CTEBE se encontra disponvel junto ao USAMRIID
e recomendada para todos os funcionrios de laboratrio e tratadores de animais que trabalham com o agente ou os animais infectados e tambm para todas as pessoas que entrarem nos laboratrios ou nas salas de animais quando o agente estiver sendo usado.
Conteno acentuada do Nvel de Biossegurana 3:
Podem ocorrer situaes em que so necessrias intensificaes
das prticas e dos equipamentos do nvel de biossegurana 3. Um
exemplo dessa situao seria um laboratrio de NB-3 realizar testes de diagnstico em amostras de pacientes com febre hemorrgica quando se suspeita de uma febre amarela ou dengue. Quando
a origem das amostras a frica, o Oriente Mdio ou a Amrica do Sul, o potencial est presente em amostras que contenham
agentes etiolgicos como o arenavrus, filovrus ou outros vrus
que so geralmente manipulados em laboratrios de NB-4. As intensificaes aos laboratrios de NB-3 podem incluir uma ou mais
destas trs categorias a seguir: a) aumentada proteo respiratria individual contra os aerossis; b) filtrao pelo HEPA do ar liberado do laboratrio; c) descontaminao de efluentes lquidos
188
SEO VII
relao dos agentes
de laboratrios. Um treinamento apropriado para as pessoas que

tratam dos animais dever ser considerado.
Bioconteno de Agentes Infecciosos Desconhecidos:
As decises em relao classificao do perigo biolgico para materiais que contenham um vrus infeccioso devero se basear em
todas as informaes disponveis em relao ao agente. Os vrus
isolados de pacientes humanos infectados devero ser manipulados em um nvel de biossegurana 3 com precaues intensificadas,
como detalhado no resumo das caractersticas do agente Hantavrus
ou de preferncia em um NB-4, a menos que se tenha certeza de que
o agente no infeccioso por meio de aerossis. Todas as amostras
desconhecidas devero ser manipuladas em um NB-3, a menos que
haja evidncias de uma transmisso por aerossis (que iria requerer uma conteno do NB-4). O SALS continuar a avaliar a infectividade e os dados sobre a virulncia para todos os vrus registrados
no Catalogue of Arboviruses and Certain Other Viruses of Vertebrates e para vrus recentemente desenvolvidos antes do registro.
Transferncia do Agente: A licena para a importao dos
agentes dever ser conseguida junto ao CDC.
Lista 6. Arbovrus e alguns outros vrus designados para o nvel
de biossegurana 3 (com base em experincia insuficiente)
Adelaide River
gua Preta
Alenquer
Almeirim
Altamira
Andasibe
Antequera
Araguari
Aransas Bay
Arbia
Arboledas
Babanki
Batken
Belm
Berrimah
Bimbo
Bobaya
Bobia
Bozo
Buenaventura
Cabassou 1, 2
Cacipacore
Calchaqui
Canania
Canind
Chim
Coastal Plains
Connecticut
Corfou
Dabakala
Douglas
Enseada
Estero Real
Fomede
Forecariah
Fort Sherman
Gabek Forest
Gadgets Gully
Garba
Gordil
Gray Lodge
Gurupi
Iaco
Ibaraki
Ife
Iguape
Inhangapi
Inini
continua
189
SEO VII
relao dos agentes
continuao
Issyk-Kul
Itaituba
Itimirim
Itupiranga
Jacareacanga
Jamanxi
Jar
Kedougou
Khasan
Kindia
Kyzylagach
Lake Clarendon
Llano Seco
Macaua
Mapuera
Mboke
Meaban
Moji Dos Compos
Monte Dourado
Munguba
Naranjal
Nariva
Nasoule
Ndelle
New Minto
Ngari
Ngoupe
Nodamura
Northway
Odrenisrou
Omo
Oriximina
Ouango
Oubangui
Oubi
Ourem
Palestina
Palma
Para
Paramushir
Paroo River
Perinet
Petevo
Picola
Playas
Pueblo Viejo
Purus
Radi
Razdan
Resistencia
Rochambeau
Salanga
San Juan
Santa Rosa
Santarm
Saraca
Saumarez Reef
Sena Madureira
Sendlec
Sepik
Shokwe
Slovakia
Somone
Sripur
Tai
Tamdy
Telok Forest
Termeil
Thiafora
Tilligerry
Tinaroo
Tlacotalpan
Tonate 1, 2
Utinga
Xiburema
Yacaaba
Yaounde
Yoka
Yug Bogdanovac
O SALS recomenda que o trabalho com esse agente dever ser feito somente em instalaes de NB-3 que proporcionem a filtrao HEPA de todo o ar liberado antes de ser
jogado para o laboratrio.
A vacina TC-83 est disponvel e recomendada para todas as pessoas que trabalhem
com o agente.
Lista 7. Arbovrus e alguns outros vrus designados para o nvel

de biossegurana 3
Cocal
Aino
Dhori
Akabane c
Dobrava-Belgrade
Banna a, f
Doena Ovina de Nairobi a
Bhanja
Dugbe
Central Eur. TBE b, d
Enc. de Vale Murray
(Kumlinge. Hypr,
Hanzalova, Absettarov) Encef. Japonesa h
Chikungunya c, d
Encefalite Eqina
Venezuelana c, d, h
Estomatite Vesicular
(Alagoas) h
Everglades c, d
Febre Amarela c, d
Febre do Rift Valley a, c, d, h
Flexal
continua
190
SEO VII
relao dos agentes
continuao
Germiston c
Getah
Haantan h
Junin c, d, h
Kairi
Kimberley
Koutango
Kumlinge (Europa
Central, TBE)
Louping III a, c, h
Mayaro
Menin. Tur. de Israel.
Mopeia e
Middelburg
Mobala
Mucambo c, d
Ndumu
Negishi
Oropouche c
Orungo
Peaton
Piry
Puumala
Rocio
Sagiyama
Sal Vieja
San Perlita
Seuol
Sin Nombre
Spondweni
Thogoto
Turuna
Wesselsbron a, c
West Nile
Zinga g
a. A importao, a posse e o uso desse agente ficam restritos ao regulamento ou norma

administrativa do USDA. Veja o apndice D.
b. O vrus da encefalite do carrapato da Europa Central (CETBE) no um nome registrado no The International Catalogue of Arboviruses 1985. At a questo do registro do
nome ter sido resolvida taxonomicamente, a CETBE se refere ao seguinte grupo de flavivrus associado ao carrapato muito prximo, mas no idntico, da Tchecoslovquia,
Finlndia e Rssia, como: Absettarov, Hanzalova, Hypr e Kumlinge. Esses quatro vrus
so antigenicamente homogneos e so diferenciados do vrus da encefalite primavera-vero da Rssia (RSSE).10, 11, 12 Embora haja uma vacina que confira imunidade ao
grupo da CETBE de vrus geneticamente homogneos (> 98%), a eficcia dessa vacina
contra as infeces causadas pelo vrus da CETBE ainda no foi estabelecida. Dessa
forma, o SALS reclassificou o grupo de vrus CETBE como do nvel de biossegurana 3,
quando as pessoas esto imunizadas com a vacina contra a CETBE. O RSSE continua
classificado como um vrus pertencente ao nvel de biossegurana 4.
c. O SALS tambm recomenda que o trabalho com esses agentes seja conduzido somente
em instalaes do nvel de biossegurana 3 que proporcionem uma filtrao HEPA de
todo o ar liberado antes de ser jogado para dentro do laboratrio.
d. A vacina est disponvel e recomendada para todas as pessoas que trabalhem com
esse agente.
e. Esse vrus atualmente est sendo registrado no Catalogue of Arboviruses.
f. Os cientistas da Repblica da China verbalmente relataram o vrus Banna como sendo
associado a casos graves de encefalites. As tradues dos originais do chins para o ingls no se encontravam disposio para esta reviso.
g. O vrus Zinga agora reconhecido como idntico ao vrus da febre do Rift Vale.
h. A licena para exportao desse vrus deve ser obtida junto ao Department of Commerce.
i. Uma licena de importao ou transporte domstico desse agente pode ser obtida junto ao USDA/APHIS/VS.
Arbovrus, Arenavrus e Filovrus Designados para o Nvel

de Biossegurana 4
O SALS recomenda que o trabalho com os 11 arbovrus, arenavrus ou filovrus13 includos na lista 8 seja conduzido pela prtica,
pelos equipamentos de segurana e pelas instalaes semelhantes
s do nvel de biossegurana 4. Essas recomendaes so basea191
SEO VII
relao dos agentes
das em casos documentados de infeces freqentemente fatais

ocorridas naturalmente em homens e nas infeces transmitidas
por aerossis em laboratrios. O SALS tambm recomenda que
alguns agentes com uma relao prxima com os agentes do nvel
de biossegurana 4 (por exemplo, o vrus da encefalite primavera-vero da Rssia) tambm sejam provisoriamente manipulados
nesse nvel at que experincias laboratoriais suficientes indiquem a posio do mesmo nesse nvel ou a reclassificao deste
para um nvel menor. Como observado a seguir, com a imunizao, o SALS recomenda uma diminuio do nvel de classificao
do vrus Junin e do complexo de vrus da encefalite do carrapato
da Europa Central (Absettarov, Hanzalova, Hypr e Kumlinge) ao
nvel de biossegurana 3. As infeces associadas a laboratrio ou
ao laboratrio animal provocadas pelos seguintes agentes foram
relatadas:14, 15, 16, 17, 18, 19, 20
Tabela 7. Infeces associadas ao laboratrio ou ao laboratrio
animal (2)
Vrus
Casos (SALS)
Junin*
21 (1 morte)
Marburg*
25 (5 mortes)
Enc. Primavera-vero
8
Enc. Hemorrgica Crimia-Congo
8 (1 morte)
Febre Hemorrgica Omsk
5
Lassa*
2 (1 morte)
Machupo*
1 (1 morte)
Ebola*
1
Sabia*
3 (1 morte)
* A licena para exportao desse agente dever ser obtida junto ao Department of Commerce.
Os roedores so hospedeiros naturais do vrus da Lassa (Mastomys spp.), do Junin, do vrus Machupo (Calomys
spp.), Guaranito (Zygodontomys spp.) e talvez de outros membros desse grupo. Os primatas no-humanos estavam associados aos surtos iniciais da doena da floresta de Kyasanur (Presbytis spp.) e o vrus da doena de Marburg (Cercopithecus
spp.). Mais recentemente, os filovrus relacionados com o ebo192
SEO VII
relao dos agentes
la foram associados com o Macaca spp. e chimpanzs (Pan troglodytes). Os artrpodes so os vetores naturais do complexo
de agentes da encefalite do carrapato. O trabalho com ou a exposio aos roedores, aos primatas no-humanos ou aos vetores naturalmente ou experimentalmente infectados com esses
agentes representa uma fonte potencial de infeco humana.
Riscos em Laboratrio: Os agentes infecciosos podem ser
encontrados no sangue, na urina e nas secrees da garganta, no
smen e nos tecidos de hospedeiros humanos ou animais, artrpodes, roedores e primatas no-humanos. A exposio respiratria aos aerossis infecciosos, a exposio da membrana mucosa
aos perdigotos infecciosos e a inoculao parenteral acidental so
os perigos primrios para o laboratrio e para as pessoas que cuidam de animais.21, 22
que utilizem materiais sabidamente ou potencialmente infecciosos de origem humana, animal ou artrpode. As amostras clnicas
de pessoas com suspeita de terem sido contaminadas pelos agentes relacionados devero ser submetidas a um exame laboratorial
do nvel de biossegurana 4 de mxima conteno.23, 24
Transferncia do Agente: A licena para a importao dos
agentes dever ser obtida no CDC. J a licena para exportao
dever ser conseguida no Department of Commerce. O registro do
laboratrio necessrio junto ao CDC antes do envio ou recebimento dos agentes.
Lista 8. Arbovrus, arenavrus e filovrus designados para o nvel
de biossegurana 4
Encefalite do Carrapato da
Doena da Floresta de Kyasanur
Europa Central
Lassa
Febre Hemorrgica
Machupo
Crimia-Congo
Febre Hemorrgica de Omsk
Ebola
Encefalite Primavera-vero da
Guaranito
Rssia
Junin
Sabia
193
REFERNCIAS
BIBLIOGRFICAS
Referncias e Lista de Notas*
Referncias Bibliogrficas: Seo I

1. WEDEN, A. G. History of microbiological safety. In:
BIOLOGICAL SAFETY CONFERENCE, 18., 1975, Lexington,
Kentucky. Proceedings Lexington, [s.n.], 1975.
2. MEYER, K. F.; EDDIE, B. Laboratory infections due to
Brucella. J Infect Disn, n. 68, p. 24-32, 1941.
3. SULKIN, S. E.; PIKE, R. M. Virali infections contracted in
the laboratory. New Engl J Med, v. 241, n. 5, p. 205-213,
1949.
4. SULKIN, S. E.; PIKE, R. M. Survey of laboratory-acquired
infections. Am J Public Health, v. 41, n. 7, p. 769-781, 1951.
5. PIKE, R. M.; SULKIN, S. E.; SCHULZE, M. L. Continuing
importance of laboratory-acquired infections. Am J Public
Health, n. 55, p. 190-199, 1965.
6. PIKE, R. M. Laboratory associated infections: summary
and analysis of 3.921 cases. Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1996.
7. HANSON, R. P. et al. Arbovirus infections of laboratory
workers. Science, n. 158, p. 1.283-1.286, 1967.
8. SKINHOL, J. P. Occupational risks in Danish Clinical
Chemical Laboratories: infections. Scand J Clin Lab Invest,
n. 33, p. 27-29, 1974.
* N.E. As referncias e/ou notas com dados ausentes, como ttulo e/ou autoria, foram
mantidas do original em ingls.
195
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
referncias e lista de notas
9. HARRINGTON, J. M.; SHANNON, H. S. Incidence of

tuberculosis workers. Br Med, n. 1, p. 759-762, 1976.
10. SKINHOL, J. P. n. 8, 1974.
11. RICHARDSON, J. H. Provisional summary of 109 laboratoryassociated infections at the Centers for Disease Control,
1947-1973. In: ANNUAL BIOSAFETY CONFERENCE, 16.,
1972, Ames, Iowa. Proceedings Ames, Iowa, [s.n.], 1972.
12. SULLIVAN, J. F.; SONGER, J. R.; ESTREM, I. E. Laboratoryacquired infections at the National Animal Disease Center,
1960-1976. Health Lab Sci, v. 15, n. 1, p. 58-64, 1978.
13. MARTINI, G. A.; SCHMIDT, H. A. Spermatogenic
transmission of malburg virus. Klin Wschr, n. 46, p. 398400, 1968.
14. COMMITTEE OF INQUIRY INTO THE SMALLPOX
OUTBREAK. Report. London, Her Majestys Stationery
Office, 1973. il.
15. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Smallpox surveillance.
Weekly Epidemiological Record, v. 53, n. 35, p. 265-266,
1978.
16. OLIPHANT, J. M.; PARKER, R. R. Q-fever: three cases of
laboratory infection. Public Health Rep, v. 63, n. 42, p. 1.3641.370, 1948.
17. OLIPHANT, J. W., PARKER, R. R. [Q-fever: three cases of
laboratory infection. Public Health Rep], v. 63, n. 16, 1948.
18. BEEMAN, E. A. Q-fever: an epidemiological note. Pub Hlth
Rep, v. 65, n. 2, p. 88-92, 1950.
19. HOLMES, G. P. et al. Virus herpesvirus simian, infection in
humans: epidemiologic investigation of a cluster. Ann of Int
Med, n. 112, p. 833-839, 1990.
20. PIKE, R. M. Laboratory associated infections, incidence,
fatalities, causes and prevention. Ann Ver Microbiol, n. 33, p.
41-66, 1979.
196
21. ESTADOS UNIDOS. Centers For Disease Control, Office

of Biosafety. Classification of etiologic agents on the basis of
hazard. 4. ed. [S.l.]: US Department of Health, Education
and Welfare; Public Health Service, 1974.
22. NATIONAL INSTITUTE OF HEALTH. (Estados Unidos).
Guidelines for research involving ecombinant DNA
molecules. Washington: GPO, Federal Register, v. 59, p.
FR34.496, 1994.
23. NATIONAL CANCER INSTITUTE (Estados Unidos). Office
of Research Safety; Special Committee of Safety and Health
Experts. Laboratory safety: monograph. Bethesda, MD,
National Institutes of Health, 1978. A supplement to the
NIH Guidelines for recombinant DNA research.
24. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Office of
Biosafety, v. 20, 1974.
25. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Update
universal precautions for prevention of transmission of
human immunodeficiency virus, hepatitis virus and other
bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, n.
37, p. 377-382; 387-388, 1988.
26. ESTADOS UNIDOS. Department of Labor. Occupational
exposure to bloodborne pathogens: final rule. Federal
Register, v. 56, p. 64.175-64.182, [19 - -].
27. ESTADOS UNIDOS. Congress Medical waste tracking. Act of
1988, v. 3.515, n. 42, p. USC 6.992-6.992k, 1988.
28. BIOSAFETY in the laboratory prudent practices for the handling
and disposal of infectious materials national. Washington, DC:
Research Council; National Academy Press, 1989.
29. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Guidelines
for preventing the transmission of tuberculosis in healthcare settings, with special focus on HIV-related issues.
MMWR, v. 39, n. RR-17, 1990.
30. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. National
action plan to combat multi-drug-resistant tuberculosis:
summary of a Conference Management of Persons Exposed
197
to Multi-Drug-Resistant Tuberculosis. MMWR , v. 41, n. RR11, 1992. Meeting the Challenge of Multi-drug-resistant
Tuberculosis.
Referncias Bibliogrficas. Seo II
1. AMERICAN SOCIETY OF HEATING, REFRIGERATING,
AND AIR-CONDITIONING ENGINEERS. Laboratories.
In: ASHRAE handbook, heating, ventilation, and airconditioning applications, chapter, 13, 1999.
2. ESTADOS UNIDOS. Department of Labor. Occupational
Safety and Health Administration. Occupational exposure
to bloodborne pathogens: final rule. Federal Register, v. 56,
p. 64.175-64; 182, 1991.
3. ESTADOS UNIDOS. Department of Labor, Occupational
Safety and Health Administrations, v. 2, 1991.
4. RICHMOND, J. Y. HIV biosafety: guidelines and regulations.
In: SCHOCHETMAN, G.; GEORGE, J. R. (Ed.). AIDS testing.
2. ed. New York: Springer-Verlag, 1994. p. 346-360.

5 ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Update:

human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other
bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, n.
37, p. 377-382; 387- 388, 1988.
6. NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY

STANDARDS - NCCLS. (Estados Unidos). Protection
of laboratory workers from instrument biohazards and
infectious disease transmitted by blood, body fluids and
tissue. Approved Guideline, 1997. ISBN-1-56238-339-6.
NCCLS Doc. M29-A.
Referncias Bibliogrficas. Seo IV
1. GUIDE for the care and use of laboratory animals. Washington,
DC, National Academy, 1996.
2. ESTADOS UNIDOS. Department of Agriculture. Laboratory
animal welfare: regulations 9 CRF, subchapter A, parts 1, 2
and 3, [19- -].
198
3. OCCUPATIONAL health and safety in the care of research

animals. Washington, DC: National Academy, 1996.
4. SUBCOMMITTEE ON ARBOVIRUS LABORATORY (Estados
Unidos). Laboratory safety for arbovirus and certain other
viruses for vertebrates. Am J Trop Med Hyg, v. 29, n. 6, p.
1.359-1.381, 1980.
5. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control and
Prevention. Fatal cercopithecine herpesvirus 1 (b virus)
infection following a mucocutaneous exposure and interim
recommendations for worker protection. MMWR, v. 47, n.
49; p. 1.073-6; 1.083, 1998.
6. GUIDE for the care ands use of laboratory animals (1), [19 - -].
animals (3), [19 - -].
8. ESTADOS UNIDOS. Center for Disease Control and
Prevention, 1998. (5), [19 - -].
animals (3), [19 - -].
Referncias Bibliogrficas. Seo V
1. KNUDSEN, R. C. Risk assessment for biological agents in
the laboratory. In: RICHMOND, J.; D, R. B. P. (Ed.). Rational
basis for biocontainment. In: NATIONAL SYMPOSIUM
ON BIOSAFETY, 5., Mundelein, IL, 1998. Proceedings
Mundelein, IL: American Biological Safety Association,
1998.
2. BENENSON, Abram S. (Ed.). Control of communicable diseases
manual. 16. ed. Washington, DC: American Public Health
Association, 1995.
3. COLLINS, C. H. Laboratory-acquired infections, history,
incidence, causes and prevention. [S.l.]: Butterwoths, 1983.
4. RICHMOND, Jonathan Y.; MCKINNEY, Robert W. (Ed.).
Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 3. ed.
[S.l.]: Public Health Service, 1993.
199
5. SEWELL, David L. Laboratory associated infections and

biosafety. Clinical Microbiologys Review, n. 8, p. 389-405,
1995.
6. SULKIN, S. E.; PIKE, R. M. Viral Infections contracted in
the laboratory. New England J. Medicine, n. 241, p. 205-213,
1949.
7. SULKIN, S. E.; PIKE, R. M. Survey of laboratory acquired
infections. Am J Public Health, n. 41, p. 769-781, 1951.
8. SULLIVAN, J. F.; SONGER, J. R.; ESTREM, I. E. Laboratory
acquired infections at the National Animal Disease Center,
1960-1975. Health Laboratory Sci, n. 15, p. 58-64, 1978.
9. NATIONAL INSTITUTE OF HEALTH. (Estados Unidos).
Guidelines for research involving recombinant DNA
molecules. Washington: GPO, Federal Register, Washington:
GPO, v. 59, p. FR 34.496, 1998.
Outras Fontes:
10. NIH Guidelines for recombinant DNA molecules: Disponvel
em: <http://www.NIH.gov/od/orda/toc.html>.
11. NIH. Office of Recombinant DNA Activities: Disponvel em:
<http://www.NIH.gov/od/orda>.
Referncias Bibliogrficas. Seo VII
1. ELLINGSON, H. V. et al. Cutaneous anthrax: report of
twenty-five cases. JAMA, n. 131, p. 1.105-8, 1946.
2. PIKE, R. M. Laboratory-associated infections: summary
and analysis of 3.921 cases, Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
3. LINNEMAN, C. C. et al. Use of pertussis vaccine in an
epidemic involving hospital staff. Lancet, n. 2, p. 540, 1975.
4. KURT, T. L. et al. Spread of pertussis by hospital staff.
JAMA, n. 221, p. 264,1972.
5. MORSE, S. I. Pertussis in adults. Ann Intern Med, n. 68, p.
953, 1968.
200
6. KURT, T. L. et al. (4), 1972.

7. LINNEMAN, C. C. et al. (3), 1975.
8. NELSON, J. D. The changing epidemiology of pertussis in
young infants, the role of adults as reservoirs of infection.
Am J Dis Child, n. 132, p. 371, 1978.
9. R . W. MCKINNEY et al. BIOLOGIC AL SAFETY
CONFERENCE, 27., 1985, La Jolla, CA. Anais La Jolla,
CA: Salk Institute for Biological Studies, 1985.
10. PARKER, C. Department of Microbiolgy, University of
Missouri. Columbia: University of Missouri, 1992. Personal
communication.
11. BURSTYN, D. G. et al. Serological response to
filamentous hemag lutinin and lymphoc y tosis promoting toxin of Bordetella per tussis.
Infection and Immunity, n. 41, p. 1.150-6, 1983.
12. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Pertussis.
Washington: University of Missouri. MMWR , v. 34, n. 26, p.
90-400, 1985.
13. MILLER, C. D.; SONGER, J. R.; SULLIVAN, J. F. A twentyfive year review of laboratory-acquired human infections at
the National Animal Disease Center. Am Ind Hyg Assoc J, n.
48, p. 271-275, 1987.
14. OLLE-GOIG, J.; CANELA-SOLER, J. C. An outbreak of
Brucella melitensis infection by airborne transmission among
laboratory workers. Am J Publ Hlth, n. 77, p. 335-338, 1987.
15. PIKE, R. M. (2), 1976.
16. MORRISET, R.; SPINK, W. W. Epidemic canine brucellosis due
to a new species, Brucella canis. Lancet, n. 2, p. 1.000-2, 1969.
17. PIKE, R. M. (2), 1976.
18. SPINK, W. W. The nature of brucellosis. Minneapolis, Minessota:
The University of Minessota Press, 1956. p. 106-108.
19. GRAMMONT-CUPILLARD, M.; BERTHET-BADETTI, L.;
DELLAMONICA, P. Lancet, n. 348, p. 1.733-1. 734, 1996.
201
20. HUDDLESON, I. F.; MUNGER, M. A study of an epidemic of

brucellosis due to brucella melitensis. Am J Public Health, n.
30, p. 944-954, 1940.
21. STASZKIEWICZ, J. et al. Outbreak of brucellosis melitensis
among microbiology laboratory workers in a community
hospital. J Clin Microbiol, n. 29, p. 278-290, 1991.
22. NICOLETTI, P. Vaccination against brucella. Advances in
Biotechnological Processes, n. 13, p. 147-168, 1990.
23. GREEN, R. N.; TUFFNELL, P. G. Laboratory-acquired
melioidosis. Am J Med, n. 44, p. 599-605, 1968.
24. SCHELECH, W. F. et al. Laboratory-acquired infection with
pseudomona pseudomallie (meliodosis). N Eng J Med, n.
305, p. 1.133-1.135, 1981.
25. OATES, J. D.; HODGIN Jr., U. G. Laboratory-acquired
campylobacter enteritis. South Med J, n. 74, p. 83, 1981.
26. PENNER, J. L. et al. Application of serotyping and
chromosomal restriction endonuclease digest analysis in
investigating a laboratory-acquired case of campylobacter
jejuni enteritis. J Clin Microbiol, n. 18, p. 1.427-1.428,
1983.
27. PRESCOTT, J. F.; KARMALI, M. A. Attempts to transmit
campylobacter enteritis to dogs and cats, letter. Can Med
Assoc J, n. 119, p. 1.001-1.002, 1978.
28. PRESCOTT, J. F.; KARMALI, M. A. (25) ,1978.
29. ROBINSON, D. A. Infective dose of campylobacter jejuni in
milk. Brit Med J, n. 282, p. 1.584, 1981.
30. MILLER, C. D.; SONGER, J. R.; SULLIVAN, J. F. (13), 1987.
31. PIKE, R. M. (2), 1976.
32. STERNE, M.; WERTZEL, L. M. A new method of large-scale
production of high-titer botulinum formol-toxoid inhalation
types C and D. J Immunol, n. 65, p. 175-183, 1950.
33. HOLZER, E. Botulism caused by inhalation. Med Klin, n. 41,
p. 1.735-1.740, 1962.
202
34. STERNE, M.; WERTZEL, L. M. (30), 1950.

35. PIKE, R. M. (2), 1976.
36. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control.
Recommendations of the Advisory Committee on
Immunization Practices ACIP. Diphteria, tetanus and
pertussis. MMWR, v. 30, n. 32, p. 392-396, 1981.
37. PIKE, R. M. (2), 1976.
38. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control (34),
1981.
39. ANONYMOUS. Laboratory acquired infection with
escherichia coli O 157. Communicable Disease Weekly, v. 4, n.
7, p. 29, 1994.
40. RAO, G. G.; SAUNDERS, B. P.; MASTERTON, R. G.
Laboratory-acquired verotoxin producing escherichia coli
VTEC infection. J Hospital Infection, v. 33, n. 3, p. 228-230,
1996.
41. BURNENS, A. P. A case of laboratory-acquired infection with
escherichia coli O 157 H7. Zentralblatt fur Bakteriologie, n.
279, p. 512-517, 1993.
42. PIKE, R. M. (2), 1976.
43. BURKE, D. S. Immunization against tularemia analysis of
the effectiveness of live francisella tularensis vaccine in
prevention of laboratory-acquired tularemia. J Infect Dis, n.
137, p. 55-60, 1977.
44. BURKE, D. S. (41), 1977.
45. MARSHALL, B. J.; WARREN, J. R. Unidentified curved
bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic
ulceration. Lancet, n. 1, p. 1.311-1.315, 1984.
46. MARSHALL, B. J. Attempt to fulfill Kochs postulates
for pyloric campylobacter. Med J Aust, n. 142, p. 436439,1985.
203
47. MATYSIAK-BUDNIK, T. et al. Laboratory-acquired

heliobacter pylori infection. Lancet, n. 346, p. 1.489-1.490,
1995.
48. PIKE, R. M. (2), 1977.
50. RICHARDSON, J. H. Provisional summary of 109 laboratoryacquired infections at the Centers for Disease Control, 19471973. Ames, Iowa, 1973. Presented at the 16th Annual
Biosafety Conference, Ames, Iowa.
51. SCHUCHAT, A.; SWAMINATHAN, B.; BROOME, C. V.
Epidemiology of human listeriosis. Clin. Microbiol, n. 4, p.
169-83,1991.
52. ARMSTRONG, D. Listeria monocytogenes. In: MANDELL,
G. L.; BENNET, J. E.; DOLIN, R. (Ed.). Principles and practices
of infectious diseases. New York, Churchill Livingstone, 1995.
p. 1.880-1.
53. SCHUCHAT, A.; SWAMINATHAN, B.; BROOME, C. V. (49),
1991.
Prevention. Update: foodborne listerosis United States,
1988-1990. MMWR, n. 41, p. 251-7, 1992.
55. ARMSTRONG, D. (50), 1995.
56. SCHUCHAT, A.; SWAMINATHAN, B.; BROOME, C. V. (49),
1991.
57. ARMSTRONG, D. (50), 1995.
58. GELLIN, B. C.; BROOME, C. V. Listerosis. JAMA, n. 261, p.
1.313-20, 1976.
Unpublished data Center for Infectious Disease. [Washington]:
Department of Health, Education and Welfare; Public
Health Service, 1976.
60. McDADE, J. E.; SHEPARH, C. C. Virulent to avirulent
conversions of legionnaires disease bacterium (Legionella
204
pneumophila), its effect on isolation techniques. J. Infect

Dis, n. 139, p. 707-711, 1979.
61. MARCHOUX, P. E. Un cas dinoculation accidentelle du
bacille de Hanson en pays non lepreux. Int J Lepr, n. 2, p. 17, 1934.
62. PARRIT, R. J.; OLSEN, R. E. Two simultaneous cases of
leprosy developing in tattoos. Am J Patrol, n. 23, p. 805-817,
1974.
63. WALSH, G. P. et al. Leprosy-like disease occuring naturally
in armadillos. J Reticuloendothel Soc, n. 18, p. 347-351,
1975.
64. DONHAM, K. J.; LEININGER, J. R. Spontaneous leprosylike disease in a chimpanzee. J. Infect. Dis, n. 136, p. 132136, 1997.
65. MEYERS, W. M. et al. Naturally acquired leprosy in a
mangabey monkey cercocebus sp. Int J Lepr, n. 48, p. 495496, 1980.
66. PIKE, R. M. (2), 1976.
67. GRIST, N. R.; EMSLIE, Jan. Infections in british clinical
laboratories, 1.982-3. J Clin Pathol, n. 38, p. 721-725, 1985.
69. MLLER, H. E. Laboratory-acquired mycobacterial
infection. Lancet, n. 2, p. 331, 1988.
70. PIKE, R. M. (2), 1976.
71. PIKE, R. M.; SULKIN, S. E.; SCHULZE, M. L. Continuing
importance of laboratory-acquired infections. Am J Public
Health, n. 55, p. 190-199, 1965.
72. REID, D. D. Incidence of tuberculosis among workers in
medical laboratories. Brit Med, n. 2, p.10-14, 1957.
73. KAUFMANN, A. F.; ANDERSON, D. C. Tuberculosis
control in nonhuman primates. In: MONTALI, R. J. (Ed.).
Mycobacterial infections of zoo animals. Washington, DC:
Smithsonian Institution Press, 1978. p. 227-234.
205
74. ANONYMOUS. Tuberculosis infection associated with

tissue processing. Cal Morbid, n. 30, 1980.
75. ALLEN, B. W. Survival of tubercle bacilli in heat-fixed
sputum smears. J Clinic Pathol, n. 34, p. 719-722, 1981 .
76. GOOD, R. C.; SNIDER Jr., D. E. Isolation of nontuberculosis
mycobacteria in the US, 1980. J Infect Dis, n. 146, p. 829833, 1982.
77. SMITHWICK, R. W.; STRATIGOS, C. B. Preparation of acidfast microscopy smears for proficiency testing and quality
control. J Clin Microbiol, n. 8, p. 110-111, 1978.
78. OLIVER, J.; REUSSER, T. R. Rapid method for the
concentration of tubercule bacilli. Am Ver Tuberc, n. 45, p.
450-452, 1942.
79. RICHMOND, J. Y.; KNUDSEN, R. C.; GOOD, R. C. Biosafety
in the clinical mycobacteriology laboratory. Clin Mycobac, v.
16, n. 3, p. 527-550, 1996.
80. DIENA, B. B. et al. Gonococcal conjunctivitis: accidental
infection. Can Med Assoc J, n. 115, p. 609-612, 1976.
81. BACTERIOLOGIST dies of meningitis. JAMA, n. 106, p.
129, 1936
Laboratory-acquired meningococcemia, California and
Massachusetts. MMWR, v. 40, n. 3, p. 46-47; 55, 1991.
83. PIKE, R. M. Laboratory-associated infections: incidence,
41-66, 1979.
84. GRIST, N. R.; EMISLIE, Jan. Infections in British clinical
laboratories, 1984-5. J Clin Pathol, n. 40, p. 826-829, 1987.
86. PIKE, M. R. (2), 1976.
87. BLASER, M. J. et al. Salmonella typhi: the laboratory as
a reservoir of infection. J. Infect Dis, n. 142, p. 934-938,
1980.
206
88. GRIST, N. R. EMSLIE, Jan. (65), 1985.

89. PIKE, R. M. (85), 1979.
90. GRIST, N. R.; EMSLIE, Jan. (65), 1985.
91. GRIST, N. R.; EMSLIE, Jan. (84), 1987.
92. JACOBSON, J. T.; ORLOB, R. B.; CLAYTON, J. L. Infections
acquired in clinical laboratories in Utah. J Clin Microbiol, n.
21, p. 486-489, 1985.
93. PIKE, R. M. (2), 1976.
94. WEDUM, A. G.; BARKLEY, W. E.; HELLMAN, A. Handling of
infectious agents. J Am Vet Med Assoc, n. 161, 1.557-1.567,
1972.
95. PIKE, R. M. (2), 1976.
96. FITZGERALD, J. J.; JOHNSON, R. C.; SMITH, M. Accidental
laboratory infection with treponema pallidum, Nichols
strain, J Am Vener Dis Assocn, n. 3, p. 76-78. 1976.
97. MAGNESON, H. J. et al. Inoculation syphilis in human
volunteers. Medicine, n. 35, p. 33-82,1956.
98. PIKE, R. M. (85), 1979.
99. LEVINE, M. M. et al. New knowledge on pathogenesis
of bacterial enteric infections as applied to vaccine
development. Microbiol Reviews, n. 47, p. 510-550, 1983.
100. BURMEISTER, R. W.; TIGERTT, W. D.; OVERHOLT, E. L.
Laboratory-acquired pneumonic plague. Ann Intern Med, n.
56, p. 789-800, 1962.
101. PIKE, R. M. (2), 1976.
Referncias Bibliogrficas. Seo VII B
1. EVANS, N. A clinical report of a case of blastomycosis of
the skin from accidental inoculation. JAMA, n. 40, p. 1.1721.175, 1903.
2. HARREL, E. R. The known and the unknown of the
occupational mycoses. In: OCCUPATIONAL diseases
207
acquired from animals. Public Health, Ann Arbor, MI: Univ

Mich Sch, p. 176-178, 1964. (Education series; n. 124).
3. LARSH, H. W.; SCHWARTZ, J. Accidental inoculationblastomycosis. Cutis, n. 19, p. 334-336, 1977.
4. LARSON, D. M. et al. Primary cutaneous, inoculation,
blastomycosis: an occupational hazard to pathologists. Amer
J Clin Pathol, n. 79, p. 253-255, 1983.
5. SEGRETAIN, G. Penicillium mamefii, n. sp., agent dune
mycose du systeme reticulo-endothelial. Mycopathol Mycol
Appl, n. 11, p. 327-353, 1959.
6. WILSON, J. W. et al. Primary cutaneous North American
blastomycosis. Arch Dermatol, n. 71, p. 39-45, 1955.
7. GRAHAM Jr., W. R.; CALLAWAY, J. L. Primary inoculation
blastomycosis in a veterinarian. J Am Acad Dermatol, n. 7, p.
785-786, 1982.
8. SCHAWARZ, J.; KAUFFAM, C. A. Occupational hazards
from deep mycoses. Arch Dermatol, n. 113, p. 1.270-1.275,
1977.
9. BAUN, G. L.; LERNER , P. I. Primary pulmonary
blastomycosis: a laboratory acquired infection. Ann Intern
Med, n. 73, p. 263-265, 1971.
10. DENTON, J. F.; DISALVO, A. F.; HIRSCH, M. L. Laboratoryacquired North American blastomycosis. JAMA, n. 199, p.
935-936, 1967.
11. BUSH, J. D. Coccidioidomycosis. J Med Assoc Alabama, n. 13,
p. 159-166, 1943.
12. CONANT, N. F. Development of a method for immunizing
man against coccidioidomycosis: third quarterly progress
report. Durham, NC: Duke University, 1955. Contract DA18-064-CML-2563, available from defense documents
center AD 121-600.
13. DICKSON, E. C. Coccidioides infection: part I. Arch Intern
Med, n. 59, p. 1.029-1.044, 1937.
208
14. DICKSON, E. C. Valley fever, of the San Joaquin Valley and

fungus coccidioides. Calif Western Med, n. 47, p. 151-155,
1937.
15. DICKSON, E. C.; GIFFORD, M. A. Coccidioides infection,
coccidioidomycosis: the primary type of infection. Arch
Intern Med, n. 62, p. 853-871, 1938.
16. KLUTSCH, K. et al. Zur klinik der coccidioidomykose. Deut
Med Wochensch, n. 90, p. 1.498-1.501, 1965.
17. LOONEY, J. M.; STEIN, T. Coccidioidomycosis. N Engl J Med,
n. 242, p. 77-82, 1950.
18. NABARRO, J. D. N. Primary pulmonary coccidioidomycosis:
case of laboratory infection in England. Lancet, n. 1, p. 982984, 1948.
19. SMITH, C. E. The hazard of acquiring mycotic infections
in the laboratory. Am Pub Hith Assoc, St. Louis, MO, 1950.
(Presented at 78th Ann. Meeting).
20. SMITH, C. E. et al. Human coccidioidomycosis. Bacteriol Ver,
n. 25, p. 310-320, 1961.
21. SMITH, D. T.; HARRELL Jr., E. R. Fatal coccidioidomycosis:
a case of laboratory infection. Am Ver Tuberc, n. 57, p. 368374, 1948.
22. SCHWARZ, J.; KAUFFMAN, C. (8), 1977.
23. WILSON, J. W.; SMUTH, C. E.; PLUNKETT, O. A. Primary
cutaneous coccidioidomycosis: the criteria for diagnosis and
a report of a case. Calif Med, n. 79, p. 233-239, 1953.
24. KOHN, G. et al. Acquisition of coccidiodomycosis by
inhalation of coccidioidal endospores. Diagn Microbiol Infect
Dis, n. 15, p. 527-530, [19- -].
25. TOMLINSON, C. C.; BANCROFT, P. Granuloma coccidioides:
report of a case responding favorably to antimony and
potassium tartrate. JAMA, n. 91, p. 947-951, 1928.
209
26. HALDE, C. Percutaneous cryptococcus noformans

inoculation without infection. Arch Dermatol, n. 89, p. 545,
1964.
27. CASADEVALL , A.; MUKHERJEE, J.; YUAN, R. P.
J. Management of injuries caused by cryptococcus
neoformans-contaminated needles. Clin Infect Dis , n. 19, p.
951-953, 1994.
28. PIKE, R. M. Past and present hazards of working with
infectious agents. Arch Path Lab Med, n. 102, p. 333-336,
1978.
29. PIKE, R. M. Laboratory-associated infectionsL: summary
and analysis of 3,921 cases. Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
30. SCHWARZ, J.; KAUFFMAN, C. A. (8), 1977.
31. MURRAY, J. F.; HOWARD, D. H. Laboratory-acquired
histoplasmosis. Am Ver Respir Dis, n. 89, p. 631-640,1964.
32. TOSH, F. E. et al. Primary cutaneous histoplasmosis: report
of a case. Arch Intern Med, n. 114, p. 118-119, 1964.
33. TESH, R. B.; SCHNEIDAY Jr., J. D. Primary cutaneous
histoplasmosis. New Engl J Med, n. 275, p. 597-599, 1966.
34. FURCOLOW, M. L. Airborne histoplamosis. Bact Ver, n. 25,
p. 301-309, 1961.
35. ISHIZAKE, H.; IKEDA, M.; KURATA, Y. Lymphocutaneous
sporatrichosis caused by accident inoculation. J Dermatol,
n. 6, p. 321-323, 1979.
36. FAVA, A. Un cas de sporotrichose conjonctivale et palpebrale
primitives. Ann Ocul, Paris, n. 141, p. 338-343, 1909.
37. WILDER, W. H.; McCULLOUGH, C. P. Sporotrichosis of the
eye. JAMA, n. 62, p. 1.156-1.160, 1914.
38. CAROUGEAU, M. Premier cas africain de sporotrichose de
Beurmann: transmission de la sporotrichose du mulet a
Ihomme. Bull Mem Soc Med Hop, Paris, n. 28, p. 507-510,
1909.
210
39. THOMPSON, D. W. KAPLAN. Laboratory acquired

sporotrichosis. Sabouraudia, n. 15, p. 167-170, 1977.
40. J E A N S E L M E , E . ; C H E VA L L I E R , P. C h a n c re s
sporotrichosiques des doigts produits par la morsure dun
rat inocule de sporotrichose. Bull Mem Soc Med Hop, Paris,
n. 30, p. 176-178, 1910.
41. JEANSELME, E.; CHEVALLIER, P. Transmission de la
sporotrichose a lhomme par les morsures dun rat blanc
inocule avec une nouvelle variet de sporotrichum:
lymphangite gommeuse ascendante. Bull Men Soc Med Hop,
Paris, n. 31, p. 287-301, 1911.
42. MEYER, K. F. The relationship of animal to human
sporotrichosis: studies on american sporotrichosis III.
JAMA, n. 65, p. 579-585, 1915.
43. NORDEN, A. Sporotrichosis: clinical and laboratory features
and a serologic study in experimental animals and humans.
Acta Pathol Microbiol Scand, Suppl, n. 89, p. 3-119, 1951.
44. COOPER, C. R.; DIXON, D. M.; SALKIN, I. F. Laboratoryacquired sporotrichosis. J Med Vet Mycol, n. 30, p. 169-171,
1992.
45. FIELITZ, H. Ueber eine laboratorumsinfektion mit dem
sporotrichum de beurmanni. Centralbl Bakteriol Pparasitenk,
v. 55, p. 361-370, 1970. (ABT I ORIG).
46. HANEL Jr., E.; KRUSE, R. H. Laboratory-acquired mycoses.
[Washington]: Department of the Army. Miscellaneous
Publication, n. 28, 1967.
47. MCAKEERM, R. An epizootic in laboratory guinea pigs due
to trichophyton mentagrophytes. Aust Vet J, n. 56, p. 234236, 1980.
and analysis of 3.921 cases. Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105114,1976.
211
49. KAMALAM, A.; THAMBIAH, A. S. Trichophtyon simii

infection due to laboratory accident. Dermatologica, n. 159,
p. 180-181, 1979.
50. SEGRETAIN, G. Penicillium mamefii, n. sp., agent dune
mycose du systeme reticulo-endothelial. Mycopathol Mycol
Appl, n. 11, p. 327-353, 1959.
Referncias Bibliogrficas Seo VII C
1. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Chagas
disease. Kalamazoo, Michigan. MMWR, v. 20, n. 13, p. 1478, 1980.
2. EYLES, D. E.; COATNEY, G. R.; GETZ, M. E. Viax-type
malaria parasite of macaques transmissible to man. Science,
n. 131, p. 1.812-1.813, 1960.
3. GUTTERIDGE, W. E.; COVER, B.; COOKE, A. J. D. Safety
precautions for working with trypanosoma cruzi. Trans R
Soc Trop Med Hyg, n. 68, p. 161, 1974.
4. HERWALDT, B. L.; JURANEK, D. D. Laboratory acquired
malaria, leishmaniasis, trypanosomiasis and toxoplasmosis.
Am J Trop Med Hyg, n. 48, p. 313-323, 1993.
5. LETTAU, L. A. Nocosomial transmission and infection
control aspects of parasites and ectoparasitic diseases: part
I. Introduction/enteric parasites; part II. Blood and tissues
parasites. Infect Control Hosp Epidemiol, n. 12, p. 59-65; 111121, 1991.
6. PIKE, R. M. Laboratory-associated infections: summary and
analysis of 3.921 cases. Health Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
7. ROBERTSON, D. H. H. et al. An accidental laboratory
infection with African trypanosomes of a defined stock. I
and II. J Infect, n. 2, p. 105-112; 113-124, 1980.
8. DILLON, N. L. et al. Leishmaniose cutnea accidental. Ver
Insti Med Trop, So Paulo, n. 35, p. 385-387, 1993.
9. HERWALDT, B. L.; JURANEK, D. D. Protozoa and
helminthes. In: FLEMING, D. O. et al. (Ed.). Laboratory safety
212
principles and practices. 2. ed. Washington, DC: American

Society for Microbiological, 1995. p. 77-91.
10. KIRCHHOFF, L . V. C hagas disease. Amer ican
trypanosomiasis. Inf Dis Clin North Am, n. 7, p. 487-502,
1993.
11. RECEVEUR, M. C.; LE BRAS, M.; VINGENDEAU, P.
Laboratory-acquired gambian trypanosomiasis. N Engl J
Med, n. 329, p. 209-210, 1993.
12. SEWELL, D. L. Laboratory-acquired infections and biosafety.
Clin Microbiol Ver, n. 8, p. 389-405, 1995.
13. HERWALDT; JURANEK. (9), 1995.
14. GUTTERIDGE et al. (3), 1974.
16. ANONYMOUS. Drugs for parasitic infections. The Medical
Letter on Drugs and Therapeutics, n. 37, p. 99-108, 1995.
19. LETTAU, L. A. (5), 1991.
20. PIKE, R. M. (5), 1976.
21. SEWELL, D. L. (12), 1995).
22. ANONYMOUS. (16), 1995.
24. LETTAU, L. A. (5), 1991.
25. PIKE, R. M. (6), 1976.
26. VAN GOMPEL, A. et al. Laboratory infection with
schistosoma mansoni. Trans R Soc Trop Med Hyg, n. 87, p.
554, 1993.
27. ANONYMOUS. (16), 1995.
28. ANONYMOUS. (16), 1995.
213

30. LETTAU. (5), 1991
31. PIKE. (6), 1976.
32. ANONYMOUS. (16), 1995.
Referncias Bibliogrficas. Seo VII D
1. PRUSINER, S. B. Prion diseases and the BSE crisis. Science,
n. 278, p. 245-251, 1997.
2. PRUSINER, S. et al. Prions, virus taxonomy: REPORT OF
THE INTERNATIONAL COMMITTEE ON TAXONOMY OF
VIRUSES. 7., [S.l.]: Academic Press, [19- -]. In press.
3. PAN K. M. et. al. Conversion of a-helices into b-sheets
features in the formation of the scrapie prion proteins. Proc
Natl Acad Sci USA, n. 90, p.10.962-10.966, 1993.
4. WICKNER, R. B. A new prion controls fungal cell fusion
incompatibility [commentary]. Proc Natl Acad Sci USA, n. 94,
p. 10.012-10.014, 1997.
5. GAJDUSEK, D. C. Unconventional viruses and the origin
and disappearance of kuru. Science, n. 197, p. 943-960,
1997.
6. TELLING G. C. Prion propagation in mice expressing human
and chimerical PrP transgenes implicates the interaction of
cellular PrP with another protein. Cell, n. 83, 79-90, 1995.
7. PRUSINER, S. B. (1) 1997.
8. PRUSINER S. B. (1) 1997.
9. WILL, R. G. et al. A new variant of Creutzfeldt-Jakob disease
in the UK. Lancet, n. 347, p. 921-925, 1996.
10. FOSTER, J. D. et al. McKelvey. Studies on maternal
transmission of scrapie in sheep by embryo transfer. Vet
Rec, n. 130, p. 341-343, 1992.
11. DICKINSON, A. G.; STAMP, J. T.; RENWICK, C. C. Maternal
and lateral transmission of scrapie in sheep. J Comp Pathol,
n. 84, p. 19-25, 1974.
214
12. PRUSINER, S. B. (1), 1997.

13. GAJDUSEK, D. C. The transmissible amyloidoses: genetical
control of spontaneous generation of infectious amyloid
proteins by nucleation of configurational change in host
precursors: kuru-CJD-GSS-scrapie-BSE. Eur J Epidemiol, n.
7, p. 567-577, 1991.
14. MARSH, R. F. Transmissible mink encephalopathy. In:
PRUSINER, S .B. (Ed.). Prion diseases of humans and animals.
Ellis Horwood, London, 1992, p. 300-307.
15. COLLINGE Jr.; PALMER, M. S. Human prion diseases. In:
COLLINGE, J.; PALMER, M. S. (Ed.). Prion Diseases. Oxford,
UK: Oxford University Press, 1997, p. 18-56.
16. RIDLEY, R. M.; BAKER, H. F. Occupational risk of
Creutzfeldt-Jakob disease. Lancet, n. 341, p. 641-642,
1993.
17. GAJDUSEK, D. C. (5), 1977.
18. P U B L I C H E A LT H S E R V I C E I N T E R A G E N C Y
COORDINATING COMMITTEE. Report on human growth
hormone and Creutzfeldt-Jakob Disease, n. 14, p. 1-11, 1997.
19. CDC. Creutzfeldt-Jakob disease associated with cadaveric
dura mater grafts. Japan, Jan. 1979-May 1996. MMWR, n.
46, p. 1.066-1.069, 1997.
20. TELLING, G. C. et al. (6), 1995.
21. BROWN P. et al. Human spongiform encephalopathy:
the National Institutes of Health, series of 300 cases of
experimentally transmitted disease. Ann Neurol, n. 35, p.
513-529, 1994.
22. TELLING, G. C. et al. Evidence for the conformation of the
pathologic isoform of the prion protein enciphering and
propagating prion diversity. Science, n. 274, p. 2.079-2. 082,
1996.
23. BROWN, P.; PREECE, M. A.; WILL, R. G. Friendly fire in
medicine: hormones, homographs, and Creutzfeldt-Jakob
disease. Lancet, n. 340, p. 24-27, 1992.
215
24. IRONSIDE, J. W.; BELL, J. E. The high-risk neuropathological

autopsy in AIDS and Creutzfeldt-Jacob disease: principles
and practice. Neuropathol Appl Neurobiol, n. 22, p. 388-393,
1996.
25. RIDLEY, R. M.; BAKER, H. F. (16), 1993.
26. EKLUND, C. M.; KENNEDY, R. C.; HADLOW, W. J.
Pathogenesis of scrapie virus infection in the mouse. J Infect
Dis, n. 117, 15-22, 1967.
27. PRUSINER, S. B. Molecular properties, partial purification,
and assay by incubation period measurements of the
hamster scrapie agent. Biochemistry, n. 19, p. 4.883-4.891,
1980.
28. PRUSINER, S. B. Sedimentation characteristics of the
scrapie agent from murine spleen and brain. Biochemistry,
n. 17, p. 4.987- 4.891, 1978.
29. KIMBERLIN, R. H. Scrapie in the mouse. Durham, England:
Meadowfield Press, 1976
30. BELLINGER-KAWAHARA, C. G. Scrapie prion liposomes
and rods exhibit target sizes of 55,000Da. Virology, n. 164,
p. 537-541, 1988.
31. GABIZON, R.; PRUSINER, S. B. Prion liposomes. Biochem J,
n. 266, p. 1-14, 1990.
32. SAFAR, J. et al. Subcellular distribution and physicochemical
properties of scrapie associated precursor protein and
relationship with scrapie agent. Neurology, n. 40, p. 503508, 1990.
33. BELLINGER-KAWAHARA, C. et al. Purified scrapie prions
resist inactivation by procedures that hydrolyze, modify, or
shear nucleic acids. Virology, n. 160, p. 271-274, 1987.
34. ALPER, T. et al. Does the agent of scrapie replicate without
nucleic acid? Nature, n. 214, p. 764-766, 1967.
35. BELLINGER-KAWAHARA, C. et al. Purified scrapie prions
resist inactivation by UV irradiation. J Virol, n. 61, p. 159166, 1987.
216
36. MCKINLEY, M. P. Resistance of the scrapie agent to

inactivation by psoralens. Photochem Photobiol, n. 37, p.
539-545, 1983.
37. PRUSINER, S. B. Novel proteinaceous infectious particles
cause scrapie. Science, n. 216, p. 136-144, 1982.
38. BROWN, P.; WOLFF, A.; GAJDUSEK, D. C. A simple and
effective method for inactivating virus infectivity in
formalin-fixed samples from patients with CreutzfeldtJakob disease. Neurology, n. 41, p. 887-890, 1990.
39. PRUSINER, S. B. Scrapie agent contains a hydrophobic
protein. Proc Natl Acad Sci USA, n. 78, p. 6.675-6.679, 1981.
40. MCKINLEY, M. P.; BOLTON, D. C.; PRUSINER, S. B. A
protease-resistant protein is a structural component of the
scrapie prion. Cell, n. 35, 57-62, 1983.
41. PRUSINER, S. B. et al. Thiocyanate and hydroxyl ions
inactivate the scrapie agent. Proc Natl Acad Sci USA, n. 78, p.
4.606-4.610, 1981.
42. PRUSINER, S. B. et al. Prions: methods for assay,
purification and characterization. In: MARAMOROSCH,
K.; KOPROWSHI, H. (Ed.). Methods in virology. New York:
Academic Press, p. 293-345, 1984.
43. PRUSINER, S. B. Attempts to restore scrapie prion
infectivity after exposure to protein denaturants. Proc Natl
Acad Sci USA, n. 90, p. 2.793-2.797, 1993.
44. TAYLOR, D. M.; WOODGATE, S. L.; ATKINSON, M. J.
Inactivation of the bovine spongiform encephalopathy
agent by rendering procedures. Vet Rec, n. 137, p. 605-610,
1995.
45. TAYLOR, D. M. Effect of rendering procedures on the scrapie
agent. Vet Rec, n. 141, p. 643-649, 1997.
46. PRUSINER, S. B. et al. (42), 1984.
47. PRUSINER, S. B. et al. (43, 1993.
217
48. TAYLOR, D. M.; WOODGATE, S. L.; ATKINSON, M. J. (44),

1995.
49. TAYLOR, D. M. et al. (45), 1997.
50. BROWN, P.; WOLFF, A.; GAJDUSEK, D. C. (38), 1990).
51. BROWN, P.; WOLFF, A.; GAJDUSEK, D. C. (38), 1990).
Referncias Bibliogrficas. Seo VII E
1. WEDUM, A. G.; KRUSE, R. H. Assessment of risk of human
infection in the microbiology laboratory. Misc Pub 30, Fort
Detrick, Frederick, MD: Industrial Health and Safety
Directorate, 1969.
2. WEDUM, A. G.; BARKLEY, W. E.; HELLMAN, A. Handling
of infectious agents. J. Am Vet Med Assoc, n. 161, p. 1.5571.567, 1972.
3. OLIPHANT, J. W. et al. Q-fever in laundry workers,
presumably transmitted from contaminated clothing. Am J
Hyg, v. 49, n.1, p. 76-82, 1949.
and analysis of 3.921 cases. Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
5. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Q-fever
at a university research center, California. MMWR, n. 28,
1979.
6. SPINELLI, J. S. et al. Q-fever crisis in San Francisco:
controlling a sheep zoonosis in a lab animal facility. Lab
Anim, v. 10, n. 3, p. 24-27, 1981.
7. OLIPHANT, J. W. et al. (3), 1949.
8. WELSH, H. H. et al. Q-fever in California IV: occurence of
coxiella burnetii in the placenta of naturally infected sheep.
Public Health Rep, n. 66, p. 1.473-1.477, 1951.
9. PIKE, R. M. (4), 1976.
10. HACKSTADT, T. Biosafety concerns and coxiella burnetii
(Letter). Trends Microbiol, n. 4, p. 431-432, 1996.
218
11. SPINELLI, J. S. et al. Q-fever in San Francisco: controlling a

sheep zoonosis in a lab animal facility. Lab Anim , v. 10, n. 3,
p. 24-27, 1981.
12. BERNARD, K. W. et al. Q-fever control measures:
recommendations for research of facilities using sheep. Inf
Contro, n. 3, p. 461-465, 1982.
13. PIKE, R. M. (4), 1976.
Laboratory-acquired endemic thyphus. MMWR, v. 27, n. 26,
p. 215-216, 1978.
15. PIKE, R. M. (4), 1976 .
16. OSTER, C. N. et al. Laboratory-acquired Rocky Mountain
spotted fever. The hazard of aerosol transmission. N Engl J
Med, n. 297, p. 859-862, 1977.
17. HATTWICK, M. A. W.; OBRIEN, R. J.; HANSON, B. F.
Rocky mountain spotted fever; epiomolgy of an increasing
problem. Ann Intern Med, n. 84, p. 732-739, 1976.
18. SATAW, S.; CARLISLE, H. N. Aerosol infection of monkeys
with rickettsia rickettsii. Bact Ver, n. 30, p. 636-645, 1966.
19. PIKE, R. M. (4), 1976.
Referncias Bibliogrficas. Seo VII F
Prevention. Laboratory management of agents associated
with hantavirus pulmonary syndrome: interim biosafety
guidelines. MMWR, n. 43, p. RR-7, 1994.
2. TSAI, T. F. Hemorrhagic fever with renal syndrome: mode
of transmission to humans. Lab Animal Sci, n. 37, p. 428-30,
1987.
3. UMENAI, T. et al. Korean haemorrhagic fever in staff in an
animal laboratory. Lancet, n. 1, p. 314-6, 1979.
4. DESMYTER, J. et al. Ypersele de Strihou C. laboratory
rat-associated outbreak of haemorrhagic fever with renal
219
syndrome due to hantaan-like virus in Belgium. Lancet, n. 1,

p. 445-8, 1983.
5. LLOYD, G. et al. HFRS outbreak associated with laboratory
rats in UK. Lancet, n. 1, p. 175-6, 1984.
6. SCHMALJONH, C. unpublished data, 1994.
7. SCHMALJOHN, C. (15), 1994.
8. SELVEY, L. A. et al. Infection of humans and horses by a
newly described morbillivirus. Med J Australia, n. 162, p.
642-5, 1995.
9. HOOPER, P. T. et al. The retrospective diagnosis of a second
outbreak of equine morbillivirus infection. Australian Vet J,
n. 74, p. 244-5, 1996.
10. ROGERS, R. J. et al. Investigation of a second focus of equine
morbillivirus infection in coastal Queensland. Australian Vet
J, n. 74, p. 243-4, 1996.
11. WILLIAMSON, M. M. et al. Transmission studies of hendra
virus, equine morbillivirus, in fruit bats, horses and cats.
Australian Vet J, n. 76, p. 813-8, 1998.
12. YU, M. et al. Sequence analysis of the hendra virus of the
subfamily paramyxovirinae. J Gen Virol, n. 79, 17.775-80,
1998.
13. ESTADOS UNIDOS. Centres for Disease Control and
Prevention. Outbreak of hendra-like virus, Malaysia and
Singapore, 1998-1999. MMWR, v. 48, n. 13, p. 265-69,
1999.
Prevention. (13), 1999.
15. DELLA-PORTA, A. J.; MURRAY, P. K. Management of
biosafety. In: RICHMON, J. Y. (Ed.). Anthology of biosafety I:
perspectives on laboratory design. Nundelein, IL: American
Biological Safety Association, 1999.
220
16. PIKE, R. M. Laboratory-associated infections: incidence,

41-66, 1979.
17. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control And
Prevention. Prevention of hepatitis A through active or passive
immunization: recommendations of the Advisory Committee
on Immunization Practices. MMWR, v. 45, n. RR-15, p. 1130, 1996.
18. BOYLARD, E. A. et al. Guidelines for infection control in
health care personnel. Asm Jnl Inf Control, n. 26, p. 2.389394, 1998.
19. PIKE, R. M. (1), 1979.
20. SKINHOLJ, P. Occupational risks in danish clinical chemical
laboratories: II infections. Scan J Clin Lab Invest, n. 33, p.
27-29, 1974.
21. HOUGHTON, M. et al. Molecular biology of the hepatitis C
viruses: implications for diagnosis, development and control
of viral disease. Hepatology, n. 14, p. 381-388, 1991.
22. MIYAMURA, T. et al. Detection of antibody against antigen
expressed by molecularly cloned hepatitis C virus DNA:
application to diagnosis and blood screening for posttransfusion hepatitis. Proc Natl Acad Sci USA, n. 87, p. 983987, 1990.
Prevention. Recommendations for follow-up of heath care
workers after occupational exposure to hepatitis C virus.
MMWR, n. 46, p. 603-606, 1997.
Recommendations of the Immunizations Practices Advisory
Committee ACIP: inactivated hepatitis B virus vaccine.
MMWR, n. 39, n. RR-2, 1990.
to bloodborne pathogens: final rule. Fed. Register, n. 56, p.
64.175-64;182, 1991.
221
26. WEDUM, A. G.; KRUSE, R. H. Assessment of risk of human

infection in the microbiology laboratory. Misc Pub 30, Fort
Detrick, Frederick, MD, Industrial Health and Safety
Directorate, 1969.
27. PIKE, R. M. Laboratory-associated infections: summary
and analysis of 3,921 cases. Hlth Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
28. PIKE, R. M. (1), 1979.
Prevention. Fatal cercopithecine herpesvirus, 1 (B Virus),
infection following a mucocutaneous exposure and interim:
recommendations for worker protection. MMWR, v. 47, n.
49, p. 1.073-6; 1.083, 1998.
30. ARTENSTEIN, A. W. et al. Human infection with B virus
following a needlestick injury. Ver Infect Dis, n. 13, p. 28891, 1991.
31. HOLMES, G. P. et al. B virus herpesvirus simiae: historical
perspective. J Med, 1990.
32. PERKINS, F. T.; HARTLEY, E. G. Precautions against B virus
infection. Brit Med J, n. 1, p. 899-901, 1966.
32. PALMER, A. E. B virus, herpesvirus simiae: hitorical
perspective. J. Med. Primatol, n. 16, p. 99-130, 1987.
33. HILLIARD, Julia. Personal communication, n. 20, 1998.
34. PIKE, R. M. (1), 1979.
35. PIKE, R. M. (12), 1976.
36. WEIGLER, B. J. Biology of B virus in macaque and human
hosts: a review. Clin Infect Dis, n. 14, p. 555-67, 1992.
37. HILLIARD, Julia. Personal communication (18), [19- -].
38. HOLMES, G. P. et al. (31), 1990.
39. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. (29),
1998.
222
40. WELLS, D. L. et al. Herspesvirus simiae: contamination of

primary rhesus monkey kidney cell cultures Centers for
Disease Control: recommendations to minimize risks to
laboratory personnel. Diagn Microbiol Infect Dis, n. 12, p.
333-336, 1989.
Prevention. Guidelines for pevention of herpesvirus simiae
(B virus) infection in monkey handlers. MMWR, n. 36, p.
680-2; 687-9, 1987.
42. PERKINS, F. T.; HARTLEY, E. G. Precautions against B virus
infection. Brit Med J, n. 1, p. 899-901, 1996.
Safety and Health Administration. Eye and face protection,
29 CFR 1910.133, 1996.
44. OSHA, 29 CFR 1910. 133 (42).
45. HOLMES, G. P., Chapman, L. E., STEWART, J. A. et al.
Guidelines for the prevention and treatment of B-virus
infections in exposed persons. Clin Inf Dis, n. 20, 1995, p.
421-39.
46. ARTENSTEIN, A. W. et al. Human infection with B virus
following a needlestick injury. Rev Infect Dis, n. 13, p. 28891, 1991.
47. HOLMES, G. P. et al. (31), 1990.
48. HOLMES, G. P. et al. (31), 1990.
49. DAWDLE, W. R.; HATTWICK, M. A. W. Swine influenza
virus infections in humans. J Infect Dis, n. 136. Suppl. S386389, 1977.
50. BOWEN, G. S. et al. Laboratory studies of a lymphocitic
choriomeningitis virus outbreak in man and laboratory
animals. Am J Epidemiol, n. 102, p. 233-40, 1975.
51. JAILING, P. B.; PETERS, C. J. Lymphocytic choriomeningitis
virus: a neglected pathogen of man. Arch Pathol Lab Med, n.
116, p. 486, 1992.
223
52. PIKE, R. M. (12), 1976.

53. BOWEN, G. S. et al. (12), 1975.
54. JAHRLING, P. B.; PETERS, C. J. (35), 1992.
55. PIKE, R. M. (12), 1976.
56. ESTADOS UNIDOS. World Health Organization. Global
action plan for laboratory containment of wild poliovrus.
Geneva, n. 15, 1999.
57. MULDERS et al. Genetic analysis of wild type poliovirus
importation into the Netherlands, 1979-1995. J Inf Dis, n.
176, p. 617-24, 1997.
58. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Prevention and
Control. Office of Biosafety. Classification of etiologic agents
on the basis of hazard. 4. ed. [Washington]: Department of
Health, Education and Welfare; Public Health, Education
and Welfare; Public Health Service, 1974.
Recommendations of the Advisory Committee on
Immunization Practices ACIP poliomyelitis prevention.
MMWER, v. 29, n. 3, p. 22-26; 31-34, 1982.
60. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Propose global action
plan and timetable for safe handling and maximum containment
of wild poliovirus and potentially infectious materials: Global
Program for Vaccines and Immunization. Geneva, 1998.
61. PIKE, R. M. (12), 1976.
62. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Smallpox
vaccines: recommendation of the Advisory Committee on
Immunization Practices ACIP. MMWR, n. 29, p. 417-420,
1980.
63. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Vaccinia
(Smallpox) vaccine, recommendations of the Advisory
Committee on Immunization Practices ACIP. MMWR, v.
40, n. RR-14, 1991.
64. CDC, (47), 1991.
224
65. WINKLER, W. G. Airborne rabies transmission in a

laboratory worker. JAMA, v. 226, n. 10, p. 1.219-1.221,
1973.
66. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Rabies in
a laboratory worker. MMWR, New York, v. 26, n. 22, p. 183184, 1977.
67. CDC, (50), 1977.
68. WINKLER, W.G. (49), 1973.
69. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. HIV/AIDS
surveillance report, n. 10, jun.1998.
70. KHABBAZ, R. F. et al. Simian immunodeficiency virus
needlestick accident in a laboratory worker. Lancet, n. 340,
p. 271-273, [19- -].
Soroconversion to a simian immunodeficiency virus in two
laboratory workers. MMWR, n. 41, p. 678-681, 1992.
Nonhuman primate spumavirus infectious among persons
with occupational exposures, United States, 1996. MMWR,
v. 46, n. 6, p. 129-131, 1997.
73. HENEINE, W. et al. Identification of a human population
infected with simian foamy virus. Nature Medicine, v. 4, n. 4,
p. 403-407, apr. 1998.
74. SCHOCHETMAN, G.; GEORGE, J. R. AIDS testing:
methodology and management issues. New York: SpringerVerlag, 1991.
75. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Update:
human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other
bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, n. 37,
p. 337-382; 387; 388, 1988.
Recommendations for prevention of HIV transmission in
health-care settings. MMWR, v. 36, n. 25, p. 1-7, 1987.
225
77. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Guidelines

to prevent simian immunodeficiency vrus infection in
laboratory workers. MMWR, n. 37, p. 693-704, 1988.
78. SOTIR, M. et al. Risk of occupational exposure to potentially
infectious nonhuman primate materials and to simian
immunodeficiency virus. J Med Primatol, n. 26, p. 233-240,
1997.
to bloodborne pathogens: final rule. Fed Register, v. 56, n.
64, p. 175-64; 182, 1991.
80. FEVER, M. S.; BOND, W. W. Sterilization, disinfections and
antisepsis in the hospital. In: LENNETTE, E. (Ed.). Manual
of clinical microbiology. 4. ed. Washington, DC: American
Society for Microbiology, 1991, p. 183-200.
81. MARTIN L. S.; MCDOUGLAS, J. S.; LOSKOSKI, S. L.
Disinfections and inactivation of the human T. lymphotropic
virus type ill/lymphadenopathy-associated virus. J Infect
Dis, n. 152, p. 400-3, 1985.
82. RESNIK, L. et al. Stability and inactivation of HTLV-III/LAV
under clinical and laboratory environments. JAMA, n. 255,
p. 1.887-91, 1986.
83. RUTALA, W. A. APIC guidelines for selection and use of
disinfectants. Am J Infection Control, n. 18, p. 99-117, 1990.
84. ESTADOS UNIDOS. Environmental Protection Agency
EPA. Guide for infectious waste management. Washington,
DC: Environmental Protection Agency, 1986. (EPA/5305W-86-014).
85. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control; Public
Health Service. Guidelines for the management of health
care worker exposures to HIV and recommendations for
post-exposure prophylaxis. MMWR, v. 47, n. RR-7, p. 1-34,
1998.
Recommendations for prevention of HIV transmission in
226
health care settings. MMWR, 36, p. 3S-18S. [19 - -]. Suppl

2.
Additional recommendation to reduce sexual and
dr ug abuse-related transmission of human Tlymphotrophic vir us type ll lymphadenopathy associated virus. MMWR, n. 35, p. 152-5, 1986.
88. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control, (60), 1987.
89. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Public
Health Service. Guidelines for counseling and antibody
testing to prevent HIV infections and AIDS. MMWR, n. 36,
509-15, 1987.
Prevention, (69), 1996.
91. MCGR AY, E. Occupational risk of the acquired
immunodeficiency syndrome among health-care workers. N
England J Med, Cooperative needlestick study group,n. 314,
p. 1.127-32, 1986.
92. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Revision of
the case definition of acquired immunodeficiency syndrome
for national reporting. MMWR, n. 34, p. 375-5, 1985.
Diagnosis and management of mycobacterial infection
and disease in persons with T-lymphotropic vrus type ill
lymphadenopathy-associated virus infection. MMWR, n. 35,
p. 448-52, 1986.
94. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Revision of
the Centers for Disease Control surveillance case definition
for acquired immunodeficiency syndrome. MMWR, n. 36,
(Suppl 1), p. 1S-15S, 1987.
95. HENEINE, W. et al. (57), 1998.
96. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. (56),
1997.
227
97. JARVIS, W. R. Precautions for Creutzfeldt-Jakob disease infect

control. [S.l.: s.n.] n. 3. 1982. p. 238-239.
98. GAJDUSEK, D. C. et al. Precautions in the medical care and
handling materials from patient with transmissible virus
dementia, Creutzfeldt-Jakob Disease, N Engl J Med, n. 297
p. 1.253-1.258, 1977.
99. BROWN, P.; WOLFF, A.; GAUDSEK, D. C. A simple
and effective method for inactivating virus infectivity
in formalin-fixed tissue samples from patients with
Creutzfeldt-Jakob disease. Neurology, n. 40, p. 887-890,
1990.
Recommendations of the advisory committee on
immunization practices ACIP. MMWR, v. 40, n. RR-12,
1991.
101. SUBCOMMITTEE ON ARBOVIRUS LABORATORY. Safety
for arboviruses and certain other viruses of vertebrates. Am
J Trop Med Hyg, v. 29, n. 6, p. 1.350-1.381, 1980.
102. HANSON, P. R. et al. Human infections with the virus of
vesicular stomatitis. J Lab Clin Med, n. 36, p. 754-758,
1950.
103. PATTERSON, W, C.; MOTT, L. O; JENNEY, E. W. A study of
vesicular stomatitis in man. J Am Vet Med Assoc, v. 133, n. 1,
p. 57-62, 1958.
104. PATTERSON, W. C.; MOTT, L. O. JENNEY, E. W. (87),
1958.
105. SUBCOMMITTEE ON ARBOVIRUS. Laboratory safety for
arboviruses and the certain other viruses of vertebrates.
(85), 1980.
Referncias Bibliogrficas. Seo VII G
1. INTERNATIONAL catalog of a rboviruses including certain
other viruses of vertebrates. In: KARABATSOS, N. (Ed.).
The subcommittee on information exchange of the American
Committee on Arthropod-borne Viruses. 3. ed. San Antonio,
228
TX: American Society for Tropical Medicine and Hygiene,

1985.
2. SUBCOMMITTEE ON ARBOVIRUS. Laboratory Safety for
arboviruses and certain other viruses of vertebrates. Am J
Trop Med Hyg, v. 29, n. 6. p. 1.359-1.381, 1980.
3. HANSON, R. P. et al. Arbovrus infections of laboratory
workers. Science, n. 158, p. 1.283-1.286, 1967.
and analysis of 3.921 cases. Htlh Lab Sci, n. 13, p. 105-114,
1976.
for arboviruses and certain other viruses of vertebrates. (2),
1980.
6. HANSON, R. P. et al. (3), 1967.
7. PIKE, R. M. (4), 1976.
for arbovirus and certain other viruses of vertebrates. (4),
1980.
9. MATHIOT, C. C. et al. An outbreak of human semliki forest
virus infections in Central African Republic. Am J Trop Med
Hyg, n. 42, p. 386-393, 1990.
10. HEINZ, F. X.; KUNZ, C. Molecular epidemiology of tickborne encephalitis virus: peptide mapping of large non
structural proteins of European isolates and comparison
with other flaviviruses. J. Gen. Virol, n. 62, p. 271, 1982.
11. CALISHER, C. H. Antigenic classification and taxonomy of
flaviviruses (Family Flaviviridae) emphasizing a universal
system for the taxonomy of viruses causing tick-borne
encephalitis. Acta Virol, n. 32, p. 469, 1998.
12. WALLNER, G. et al. Characterization and complete genome
sequences of high and low-virulence variants of tick-borne
encephalitis vrus. J. Gen. Virol, n. 77, p. 1.035, 1996.
229
13. KILLEY, M. P. et al. Filoviridae: a taxonomic home for

marburg and ebola viruses? Intervirology, n. 18, p. 24-32,
1982.
14. EDMOND, R. T. D. et al. A case of ebola virus infection. Br
Med J, n. 2, p. 541-544, 1977.
15. HANSON, R. P. et al. (3), 1967.
16. HENNESSEN, W. Epidemiology of marburg virus disease. In:
MARTINI, G. A.; SIEGERT, R. (Ed.). Marburg vrus disease.
New York: Springer-Verlag. 1971. p. 161-165.
17. LEIFER, E.; GOCKE, D. J.; BOURNE, H. Lassa fever, a
new virus disease of man from West Africa: II report of a
laboratory-acquired infection treated with plasma from a
person recently recovered from the disease. Am J Trop Hyg,
n. 19, p. 677-9, 1970.
18. PIKE, R. M. (4), 1976.
for arboviruses and certain other viruses of vertebrates. (2),
1980
20. WEISSENBACHER, M. C. et al. Inapparent infections with
junin virus among laboratory workers. J Infect Dis, n. 137, p.
309-313, 1978.
21. LEIFER, E.; GOCKE, D. J.; BOURNE, H. (24), 1970,.
22. WEISSENBACHER, M. C. et al. (27).
23. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Office
of Biosafety. Classification of etiologic agents on the basis
of hazard. 4. ed. [Washington]: Department of Health,
Education and Welfare; Public Health, 1974.
24. OLIPHANT, J. W. et al. Q-fever in Laundry workers,
presumably transformitted from contaminated clothing.
Am J Hyg, v. 49, n. 1, p. 76-82, 1949.
Referncias Bibliogrficas. Apndice B
Prevention. General recommendations on immunization,
230
recommendations of the Advisory Committee on

Immunization Practices ACIP: morbidity and mortality
weekly report. MMWR, v. 43, n. RR01, p. 1-38, jan. 1994.
Prevention. Immunization of health-care workers:
recommendations of the Advisory Committee on
Immunization Practices ACIP, and the Hospital Infection
Control Practices Advisory Committee HICPAC. Morbidity
and Mortality Weekly Repor. MMWR, v. 46, n. RR-18, p.142, 1997.
Referncias Bibliogrficas. Apndice F
1. TOROK T. J. et al. A large community outbreak of
salmonellenosis caused by intentional contamination of
restaurant salad bars. JAMA, v. 278, p. 389-395, 1997.
2. KOLAVIC, S. A. et al. An outbreak of shigella dysenteriae,
type 2, among laboratory workers due to intentional food
contamination. JAMA, v. 278, p. 396-398, 1997.
3. REPORT to Congress on Abnormal Occurrences with
occurred in 1995. 3. vent: NIH Incident. Federal Register, v.
61, n. 38, p. 7.123-7.124, 1996.
4. ESTADOS UNIDOS. Nuclear Regulatory Commission.
NUREG 1.535, ingestion of phosphorous-32 at MIT.
Cambridge, MA: Nuclear Regulatory Commission, 1995.
5. ESTADOS UNIDOS. Nuclear Regulatory Commission.
Preliminary notification of event or unusual occurrence
PNO-1-98-052: subject, intentional ingestion of Iodine
125 tainted food. [S.l]: Brown University, 1998.
6. NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH NIH. (Estados
Unidos). Issuance of directors decision: the NIH incident.
Federal Register, v. 62, n. 185, p. 50.018-50.033, Sept.
1997.
7. ATLAS RM. Biological weapons pose challenge for
microbiology community. ASM News, v. 64, p. 383-389,
1998
231
8. RUYS, Theodorus. (Ed.). Laboratory design principles. In:

HANDBOOK of facilities planning. New York: Van Nostrand
Reinhold, p. 257-264, 1990.
9. ESTADOS UNIDOS. Public Health Service. Additional
requirements for facilities transferring or receiving select
agents: final rule. Federal Register, v. 61, p. FR 29.327,
1996.
Referncias Bibliogrficas. Apndice G
1. ROBINSON, W. H. Insect and mite pests in the human
environment. Urban entomolgy. New York: Chapman and
Hall, 1996.
2. BENNETT, Gary W.; OWENS, John M. (Ed.). Advances in
urban pest management. New York: Van Nostrand Reinhold,
1986.
3. OLKOWSK, William; DAAR, Sheila; OLKOWSKI, Helga.
Common sense pest control: least-toxic solutions for four
home, garden, pests and community. [S.l.]: The Taunton
Press, 1991.
4. ASSOCIAO NACIONAL DE CONTROLE DE ROEDORES
E DE INSETOS: Disponvel em: <http://www.pestworld.
org>.
5. REDE DE BIOCONTROLE. Disponnel em: http://www.
bioconet.com>.
Referncias Bibliogrficas. Apndice H
1. DAVIDSON, W. L.; HUMMLER, K. B-virus infection in man.
Annals of the New York Academy of Science, v. 85, p. 9.970979, 1960.
2. NATIONAL RESEARCH COUNCIL. (Estados Unidos). Safe
handling of infectious agents. In: Biosafety in the laboratory.
Prudent practices for the handling and disposal of infectious
material. Washington, DC: National Academ Press, 1989. p.
13-33.
232
3. MCGARRITY, G. J.; HOERNER, C. L. Biological safety in

the biotechnology industry, laboratory safety: principles and
practice. Washington, DC: ASM Press, 1995.
4. ESTADOS UNIDOS. Centers for Disease Control. Update:
universal precautions for prevention of transmission
human Immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other
bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, n. 37,
p. 377-382; 387- 388, 1988.
Prevention. Guidelines for prevention of transmission of
human immunodeficiency virus and hepatitis B virus to
healthcare and public safety workers. MMWR, v. 38, n. S-6,
1989.
to bloodborne pathogens: 29 CFR, part 1910. [S.l.]: n. 1.030,
p. 231-243, 1991.
7. McGARRITY, G. J.; CORIELL, L. L. Procedures to reduce
contamination of cells cultures, In Vitro, v. 6, n. 4, p. 257265, 1971.
8. McGARRITY, G. J. Spread and control of mycoplasmal
infection of cell culture. In Vitro. v. 12, p. 643-648, 1976.
9. NELSON REES, W. A.; DANIELS, D. W.; FLANDERMEYER,
R. R. Cross-contamination of cells in culture. Science, v. 212,
p. 446-452, 1981.
10. MCGARRITY, G. J.; HOERNER, C. L. (3), 1995.
11. WEISS, R. A. Why cell biologists should be aware of
genetically transmitted viruses. National Cancer Institute
Monograph, v. 48, p. 183-189, 1978.
12. BARKLEY, W. E. Safety considerations in the cell culture
laboratory. Methods Enzymol, v. 58, p. 6-54, 1979.
13. GRIZZLE, W. E.; SARAH, S. Polt. Guidelines to avoid
personnel contamination by infective agents in research
laboratories that use human tissues. Journal of Tissue Culture
Methods, v. 11, p. 191-199, 1988.
233
14. CAPUTO, J. L. Biosafety procedures in cell culture. Journal

of Tissue Culture Methods, v. 11, p. 233-227, 1988.
15. CAPUTO J. L. Safety procedures. In: FRESHNEY, R. Ian;
FRESHNEY, Mary G. (Ed.). Culture of immortalized cells.
Wiley-Liss, 1996.
16. OCCUPATIONAlL exposure to bloodborne pathogens (6).
Referncias Bibilogrficas. Apndice I
1. ESTADOS UNIDOS Department of the Army. DOD, 32 CFR:
part. 626, 628. Biological Defense Safety Program. [19 - -].
Safety and Health Administration. 29 CFR, art. 1.910.
Occupational Safety and Health Standards. [19 - -].
3. ESTADOS UNIDOS. Department of Labor, Occupational Safety
and Health Administration. 29 CFR, part. 1.910, (2), [19 - -].
Referncias Adicionais
1. HEINSOHN, P. A.; JACOBS, R. R.; CONCOBY, B. A. (Ed.).
American industrial hygiene association: biosafety reference.
[Faurfax]: American Industrial Hyigiene Association, 1995.
2. NATIONAL RESEARCH COUNCIL. (Estados Unidos).
Prudent practices in the laboratory: handling and disposal of
chemicals. Washington, DC: National Academy Press, 1995
3. DERELANKO, M. A.; HOLLINGER, M. A. (Ed.). CRC
handbook of toxicology. Boca Raton: CRC Press, 1995.
4. ELLENHORN, M. J. et al. Ellenhorns medical toxicology:
diagnosis and treatment of human poisoning. Baltimore,
Williams and Wikins, 1997.
234
APNDICE A
Conteno Primria:
Cabines de Segurana
Biolgica
As cabines de segurana biolgica (CSB) esto entre os mais

comuns e eficazes dispositivos de conteno primria utilizados
em laboratrios que trabalham com agentes infecciosos 1. Os trs
tipos gerais de cabines (classes I, II e III) possuem caractersticas e
aplicaes que sero descritas neste apndice.
As CSB de classes I e II adequadamente mantidas, quando usadas em conjunto com boas tcnicas de microbiologia, proporcionam um sistema de conteno eficaz para uma manipulao segura de microorganismos de risco moderado ou alto (agentes dos
nveis de biossegurana 2 e 3). Tanto as cabines de classe I como
as de classe II possuem uma velocidade de fluxo de ar (75-100 ps
lineares por minuto) que proporciona nveis de conteno comparveis proteo dos funcionrios de laboratrio e do meio ambiente das reas adjacentes contra aerossis infecciosos gerados
dentro das cabines. As cabines de segurana biolgica de classe II
tambm protegem o prprio material e a pesquisa com uma filtrao altamente eficiente (filtrao HEPA) do fluxo de ar sobre toda
a superfcie de trabalho (fluxo laminar vertical). J as cabines de
classe III oferecem uma proteo mxima para os trabalhadores
do laboratrio, para a comunidade e para o meio ambiente porque
todos os materiais perigosos esto contidos em uma cabine ventilada e totalmente fechada.
Classe I
(Observao: as cabines de classe I, atualmente, esto sendo
fabricadas em nmero limitado. Muitas podem ser substitudas
por cabines de classe II).
235
APNDICE A
conteno primria: cabines de segurana biolgica
A cabine de segurana biolgica de classe I (fig. 1) uma cabine ventilada de presso negativa operada por uma abertura frontal e uma mnima velocidade de face para abertura de trabalho de
75 ps lineares por minuto (lfpm). Todo o ar da cabine liberado
atravs de um filtro HEPA para dentro ou para fora do laboratrio.
A cabine de classe I projetada para a pesquisa geral de agentes
microbiolgicos de risco moderado e baixo e til para a conteno de processadores, liquidificadores e outros equipamentos. Essas cabines no so apropriadas para a manipulao de materiais
de pesquisa que sejam vulnerveis contaminao pelo ar, uma
vez que o fluxo interno do ar no-filtrado do laboratrio pode carregar microorganismos contaminantes para dentro da cabine.
A cabine de classe I pode tambm ser usada com um painel
frontal fechado e sem as luvas de borracha, que aumentaro a velocidade do fluxo interno para aproximadamente 150 lfpm. Se essas
cabines equipadas estiverem ligadas por dutos externos de exausto, elas podero ser usadas para materiais txicos ou com baixos
nveis radioativos usados como auxiliares da pesquisa microbiolgica. Alm disso, as luvas de braos longos de borracha podem
ser anexadas ao painel frontal com um dispositivo de liberao da
presso do ar para proteo adicional. Nessa configurao, necessrio instalar uma entrada de ar adaptada e ajustada com um
filtro HEPA na cabine.
Classe II
A cabine de segurana biolgica de classe II (fig. 2) projetada
com um fluxo de ar interior com uma velocidade de 75-100 lfpm,
para proteger os funcionrios, um fluxo de ar laminar vertical filtrado pelo sistema HEPA, para proteo do produto, e com ar de
sada, de exausto, filtrado pelo sistema HEPA para proteo do
meio ambiente. Os padres do projeto, da construo e da atuao das cabines de classe II, assim como as listas de produtos que
atendam a esses padres, foram desenvolvidos pela National Sanitation Foundation International 2, em Ann Arbor, Michigan. A
utilizao do padro e da lista dever ser o primeiro passo na seleo e aquisio de uma cabine de classe II.
As cabines de classe II so classificadas em dois tipos (A e B)
baseados na construo, nas velocidades e nos padres do fluxo
236
APNDICE A
de ar e nos sistemas de exausto. Basicamente, as cabines do tipo

A so adequadas para pesquisas microbiolgicas na ausncia de
substncias qumicas volteis ou txicas e de radionucldeos, uma
vez que o ar recirculado dentro da cabine. As cabines do tipo A
podem ter exausto dentro do laboratrio ou para fora atravs de
uma conexo metlica que se prende ao sistema de exaustores do
edifcio.
As cabines do tipo B so subdivididas em tipos B1, B2 e B3.
Uma comparao entre as caractersticas do projeto e as aplicaes est representada nas figuras 2b, 2c e 2d, respectivamente.
As cabines do tipo B possuem dutos rgidos conectados ao sistema de exausto do prdio e contm um sistema de ar de presso
negativa. Essas caractersticas, mais uma velocidade plena de 100
lfpm, permitem o trabalho a ser feito com substncias qumicas
txicas ou radionucldeos.
essencial que as cabines de proteo biolgica I e II sejam
testadas e certificadas in situ no momento da instalao dentro do
laboratrio, todas as vezes que a CSB for removida ou uma vez ao
ano. A verificao local pode atestar a performance da cabine individual ou modelo, mas no poder excluir os testes crticos antes
do uso em laboratrio.
Como em qualquer equipamento de laboratrio, as pessoas devero ser treinadas para o uso adequado das cabines de segurana biolgica. De particular interesse so as atividades que possam
romper o fluxo direcionado para o interior. Causam a liberao de
partculas aerolizadas de dentro da cabine fatores como a insero
e a retirada repetida dos braos dos trabalhadores para dentro e
para fora das cabines, a abertura e o fechamento de portas do laboratrio ou do cubculo de isolamento, a colocao ou a operao
imprpria dos materiais ou dos equipamentos dentro da cmara
de trabalho ou uma caminhada vigorosa prxima CSB enquanto esta estiver sendo utilizada. As cabines de classes I e II devero
estar localizadas longe do fluxo de pessoas e das portas. O fluxo
de ar gerado por ventiladores, a ventilao proveniente de venezianas metlicas em portas ou paredes e outros dispositivos para
movimentao do ar podem interromper o padro de fluxo de ar
na frente da cabine. A obedincia severa a essas regras para uso de
237
APNDICE A
CSB e a colocao adequada das mesmas em um laboratrio so

to importantes na manuteno da capacidade de conteno mxima do equipamento quanto o prprio funcionamento deste.
Classe III
A cabine de segurana biolgica de classe III (fig. 3) uma cabine totalmente fechada e ventilada, prova de escape de ar, que
oferece o mais alto grau de proteo ao pessoal e ao meio ambiente contra aerossis infecciosos, assim como a proteo de materiais de pesquisa de contaminantes microbiolgicos. As cabines
de classe III so mais adequadas para o trabalho com agentes perigosos que requerem uma conteno de um nvel de biossegurana
3 ou 4.
Todas as operaes na rea de trabalho da cabine devero ser
realizadas por meio de braos com luvas de borracha ou por meio
de macaco. A cabine de classe III operada com presso negativa.
O suprimento de ar filtrado atravs do sistema HEPA, e o ar liberado da cabine filtrado atravs de dois filtros HEPA em srie ou a
filtrao HEPA seguida de uma incinerao, antes de ser descartado para fora do local.
Todos os equipamentos necessrios para uma atividade em um
laboratrio, como as incubadoras, geladeiras e centrfugas devero ser uma parte integral do sistema de cabine. A cabine de classe
III dever ser conectada a uma autoclave de duas portas e/ou um
tanque de imerso qumica usado para esterilizar ou desinfetar
todos os materiais que sarem da cabine, permitindo que os estoques entrem na cabine. Vrias cabines de classe II so, portanto,
tipicamente instaladas como um sistema interconectado.
Macaco individual de presso positiva
A proteo individual equivalente fornecida por cabines de
classe III tambm pode ser obtida pelo uso de uma vestimenta de
pea nica e ventilada. O trabalhador dever us-la quando estiver trabalhando com agentes do nvel de biossegurana 3 ou 4 em
uma rea de risco correspondente e usando CSB de classe I ou II.
A roupa individual mantida sob uma presso positiva com um
sistema de suporte de vida, para prevenir o vazamento dentro da
238
APNDICE A
vestimenta. Nesse sistema de conteno, o trabalhador dever estar isolado dos materiais de trabalho.
A rea escafandro dever ser essencialmente equivalente a uma
cabine grande de classe III. A entrada nessa rea dever ser feita
atravs da cmara de compresso adaptada com portas hermticas. Um chuveiro qumico dever ser instalado como um tanque
de imerso para descontaminao das superfcies da roupa e dos
trabalhadores que entram e saem da rea. O ar liberado da rea
escafandro dever ser filtrado atravs de dois filtros HEPA instalados em srie. Toda a rea dever estar sob presso negativa.
Assim como nas CSB III, as luvas das roupas individuais so o
componente mais vulnervel do sistema, pois esto sujeitas a perfuraes por objetos cortantes e mordidas de animais.
Outros dispositivos: As bancadas de fluxo laminar de ar
horizontal de clean benches so usadas em instalaes clnicas, farmacuticas e laboratoriais estritamente para garantir a proteo
do produto. Esse equipamento nunca dever ser usado para a manipulao de materiais txicos, infecciosos, radioativos ou sensibilizadores, uma vez que o trabalhador respira o ar liberado da
bancada limpa. As bancadas de fluxo laminar vertical podem ser
teis para algumas manipulaes de materiais limpos (por exemplo, placa de agar), mas no devero ser usadas quando o trabalho
com materiais infecciosos estiver sendo conduzido.
Tabela 8. Comparao entre as cabines de segurana biolgica
Tipo
Velocidade
frontal
Classe I* com
a frente aberta
75
Classe II
Tipo A
75
Tipo B1
100
Padro de fluxo
do ar
Frontal, atrs e
acima atravs do
filtro HEPA.
70% de ar
recirculado atravs
do HEPA; exausto
atravs do HEPA.
30% de ar
recirculado atravs
do HEPA; exausto
de ar via HEPA e
dutos.
Proteo
Radionucldeos/
Nveis de
substncias
do
biossegurana
qumicas
Produto
No
2, 3
No
No
2, 3
Sim
Sim
(nveis baixos/
volatilidade)
2, 3
Sim
continua
239
APNDICE A
continuao
Tipo
Velocidade
frontal
Tipo B2
100
Tipo B3
100
Classe III
NA
Padro de fluxo
do ar
Nenhuma
recirculao do ar;
total exausto via
HEPA e dutos.
Idntica s cabines
II A, mais o sistema
de ventilao
plena sob presso
negativa para sala e
exausto atravs de
dutos.
Entradas e sada do
ar atravs do filtro
HEPA 2.
Proteo
Radionucldeos/
Nveis de
substncias
do
biossegurana
qumicas
Produto
Sim
2, 3
Sim
Sim
2, 3
Sim
Sim
3, 4
Sim
* Os compartimentos para as luvas podero ser acrescentados e aumentaro a velocidade frontal para 150 lfpm. As luvas podem ser adicionadas com a liberao da presso
da entrada de ar, que permitir o trabalho com radionucldeos/substncias qumicas.
240
APNDICE A
Figura 1. Cabine de segurana biolgica classe I. (A) Abertura

frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para exausto.
(D) Espao de exausto.
vista lateral
Ar ambiente
Ar potencialmente contaminado
Ar filtrado por filtro HEPA
241
APNDICE A
Figura 2a. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo A.

(A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para
exausto. (D) Espao posterior. (E) Filtro HEPA para suprimento
de ar. (F) Ventilador.
Ar ambiente
242
APNDICE A
Figura 2b. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B1

(desenho clssico). (A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia.
(C) Filtro HEPA para exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento
de ar. (E) Espao de exausto com presso negativa.
(F) Ventilador. (G) Filtro HEPA adicional para suprimento de ar.
Observao: O exaustor da cabine necessita ser conectado ao
sistema de exaustores do edifcio.
Conexo necessria de sistema de

exaustores do edifcio
vista lateral
vista frontal
Ar ambiente
243
APNDICE A
Figura 2c. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B2.

(A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para
exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento de ar. (E) Espao de
exausto com presso negativa. (F) Tela do filtro.
Observao: O filtro de carbono do sistema de exaustores do
edifcio no est mostrado nesta figura. O ar de exausto na
cabine dever ser conectado ao sistema de exaustores do edifcio.

vista lateral
Ar ambiente
244
vista frontal
APNDICE A
Figura 2d. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B3

(modelo de mesa). (A) Abertura frontal. (B) Vidraa corredia.
(C) Filtro HEPA de exausto. (D) Filtro HEPA para suprimento de
ar. (E) Espao de presso positiva. (F) Espao de presso negativa.
Observao: Os exaustores da cabine devero ser conectados
aos sistemas de exaustores do edifcio.

vista lateral
vista frontal
Ar ambiente
245
APNDICE A
Figura 3. Cabine de segurana biolgica classe III.

(A) Compartimento para fixao de luvas longas de borracha
cabine. (B) Vidraa corredia. (C) Filtro HEPA para exausto.
(D) Filtro HEPA para o suprimento de ar. (E) Autoclave dupla
sada na extremidade ou caixa de passagem da cabine.
Observao: Um tanque de imerso qumica pode ser instalado
e dever ser colocado abaixo da superfcie de trabalho da CSB com
o acesso por cima. O sistema de exaustores da cabine necessita ser
conectado a um sistema de exaustores independente.

vista frontal
Ar ambiente
246
vista lateral
APNDICE B
Imunoprofilaxia
Um nvel adicional de proteo para pessoas do grupo de risco pode ser conseguido com imunizaes profilticas adequadas.
essencial uma norma organizacional por escrito que defina as
pessoas do grupo de risco, os riscos e os benefcios das vacinas
especficas, fazendo distino entre as vacinas solicitadas e as recomendadas. Ao se desenvolver tal norma, as recomendaes e os
requisitos devero ser especificamente concentrados em doenas
infecciosas que sero ou provavelmente vo ser encontradas em
um local em particular.
As vacinas licenciadas cujos benefcios (nveis de anticorpos
considerados como protetores) excedam os riscos (por exemplo,
as reaes locais ou sistmicas) devero ser requisitadas para todas as pessoas claramente identificadas. Exemplos dessas preparaes incluem as vacinas anti-rbicas e contra hepatite B, febre
amarela e plio. As recomendaes para aplicao de vacinas menos eficazes, como as associadas aos altos ndices de reaes locais
ou sistmicas, as que produzem reaes muito graves com o uso
repetido e as vacinas no-licenciadas, dadas sob os protocolos de
uma nova droga de pesquisa (IND), devero ser cuidadosamente
consideradas. Os produtos com essas caractersticas (por exemplo, as vacinas contra a clera, o antraz e a tularemia) podem ser
recomendados, mas no podero ser requisitados para o trabalho.
Um registro completo das vacinas recebidas baseando-se em requisitos ou recomendaes ocupacionais dever ser mantido em
cada ficha mdica do trabalhador.
As recomendaes para o uso de vacinas adaptadas da
lista mencionada no Public Health Service Advisory Committee
247
APNDICE B
imunoprofilaxia
on Immunization Practices esto includas no resumo das

caractersticas dos agentes na seo VII e esto elaboradas nas
referncias a seguir.1, 2 O leitor dever consultar as recomendaes
atuais da ACIP publicadas no CDC Morbidity and Mortality Weekly
Report (MMWR). Deve-se dar uma ateno particular para os
indivduos que esto ou que podem se tornar imunodeprimidos,
uma vez que as recomendaes para a administrao de vacinas
podem ser diferentes das recomendaes indicadas para um
adulto imunologicamente competente.
248
APNDICE C
Transporte e
Transferncia de
Agentes Biolgicos
Os agentes biolgicos incluem os agentes infecciosos de homens, plantas e animais, assim como as toxinas que podem ser
produzidas por micrbios e por material gentico potencialmente
perigoso por si s ou quando introduzido em um vetor adequado.
Agentes etiolgicos e substncias infecciosas so termos intimamente relacionados e so encontrados nas normas de transporte e
de transferncia. Os agentes biolgicos podem existir em culturas
purificadas e concentradas, mas tambm podem ser encontrados
em uma variedade de materiais como fluidos corpreos, tecidos,
amostras de solo, etc. Agentes biolgicos e materiais suspeitos de
cont-los, ou que sabidamente os contm, so reconhecidos pelos
governos federais e estaduais como materiais perigosos, e o transporte e a transferncia desses materiais devero estar sujeitos a
controle normativo.
O termo transporte se refere ao acondicionamento e envio desses materiais pelo ar, pela terra ou pelo mar, geralmente feito por
uma empresa comercial. J o termo transferncia se refere ao processo de mudana de local dos materiais.
Transporte
Os regulamentos sobre o transporte de agentes biolgicos so
definidos de forma a assegurar proteo ao pblico e aos trabalhadores da rede de transporte contra a exposio a qualquer agente que possa estar presente na embalagem. A proteo obtida
por meio de: (a) requisitos para um rigoroso acondicionamento
que suporte manipulaes bruscas e a conteno de todo o material lquido dentro da embalagem sem que ocorra vazamento
para o lado de fora; (b) rotulagem adequada das embalagens com
249
APNDICE C
transporte e transferncia de agentes biolgicos
o smbolo de risco biolgico e outros rtulos que alertem os trabalhadores da rede de transporte sobre o contedo perigoso da
embalagem; (c) documentao sobre o contedo perigoso da embalagem contendo informaes necessrias para o caso de uma situao de emergncia; e (d) treinamento de trabalhadores da rede
de transporte para que possam se familiarizar com os contedos
perigosos, de forma que sejam capazes de responder s situaes
de emergncia.
Regulamentos
Servio Pblico de Sade. 42 CRF Parte 72. Transporte Interestadual de Agentes Etiolgicos. Este regulamento est sendo revisado para se harmonizar com outros regulamentos internacionais
e dos E.U.A. Uma cpia do regulamento atual poder ser conseguida pela internet: <http://www.cdc.gov/od/ohs>.
Departamento de Transporte. 49 CFR Partes 171-178. Regulamentos para transporte de Materiais Perigosos. Este se aplica aos
agentes biolgicos e s amostras clnicas. Maiores informaes
podero ser obtidas pela internet: <http://dot.gov.rules.html>.
Servio Postal dos Estados Unidos. 39 CFR Parte 111. Envio
Postal de Agentes Etiolgicos. Codificados no Manual de Postagem Domstica 124.38: Preparaes dos Agentes Etiolgicos.
Uma cpia do Manual de Postagem Domstica poder ser obtida
no Setor de Publicao do Governo pelo telefone 1-202-512-1800
ou pela internet: <http://www.access.gpo.gov>.
Administrao da Segurana e da Sade Ocupacional (OSHA).
29 CFR Parte 1910.1030: Exposio Ocupacional aos Patgenos do
Sangue. Estabelece os requisitos mnimos de acondicionamento e
rotulagem para o transporte de sangue e de fluidos corpreos dentro
e fora do laboratrio. Maiores informaes podero ser adquiridas
no escritrio local da OSHA ou pela internet: <http://osha.gov>.
Regulamentos sobre Produtos Perigosos (DGR). Associao Internacional de Transporte Areo (IATA). Esses regulamentos fornecem os requisitos para o acondicionamento e a rotulagem de
substncias e materiais infecciosos e de amostras clnicas que possuam uma baixa probabilidade de conter substncias infecciosas.
Esses so os regulamentos seguidos pelas empresas areas. Eles se
250
baseiam nos regulamentos do Comit de Peritos em Transporte

de Produtos Perigosos e do Secretariado das Naes Unidas e nas
Instrues Tcnicas para o Transporte de Produtos Perigosos via
area, que so fornecidas pela Organizao Internacional da Associao Civil (ICAO). A cpia do DGR poder ser obtida pelo telefone 1-800-716-6326 ou pela internet: <http://www.iata.org> ou
<http://who.org>.
Requisitos Gerais de Acondicionamento para Transporte
de Agentes Biolgicos e de Amostras Clnicas
A figura 4 mostra o acondicionamento do tipo triplo (container
primrio, embalagem secundria com conteno de gua, embalagem externa resistente a impacto) necessrio para agente biolgico oriundo de doena humana ou de materiais suspeitos de
cont-los ou que sabidamente os contm. Essa embalagem requer
a colocao de um rtulo externo, com os dizeres Substncia Infecciosa, como mostrado na figura 2. A embalagem dever atender aos testes de performance enfatizados nos regulamentos do
DOT, USPS, PHS e da IATA.
As amostras clnicas com uma baixa probabilidade de conter
um agente infeccioso tambm necessitam de um acondicionamento triplo, mas os testes de performance s exigem que a embalagem no apresente vazamentos aps o teste de uma queda
de quatro ps. O DOT, o PHS e a IATA exigem um rtulo externo
identificando a embalagem como Amostra Clnica.
Transferncia
Os regulamentos para a transferncia de agentes biolgicos objetivam assegurar que a mudana de posse dos materiais biolgicos esteja dentro dos interesses do pblico e da nao. Esses regulamentos exigem a documentao dos trabalhadores, instalaes
e justificativa da necessidade de transferncia do agente e subseqente aprovao desse processo por uma autoridade federal. Os
seguintes regulamentos se aplicam nesta categoria:
Importao de Agentes Etiolgicos de Doenas Humanas
42 CFR Parte 71 Quarentena Estrangeira. Parte 71.54 Agentes,
Hospedeiros e Vetores Etiolgicos. Esse regulamento exige uma licena para a importao (obtida nos Centros de Preveno e Con251
APNDICE C
trole de Doenas) dos agentes etiolgicos de doenas humanas e de

quaisquer materiais, incluindo animais e insetos vivos que possam
cont-los. Um requerimento e maiores informaes sobre as licenas para importao podero ser obtidos pelo telefone 1-888-CDCFAXX e dando entrada no documento nmero 101000 ou pela
internet: <http://www.cdc.gov/od/ohs/biosty/imprtper.html>.
Importao de Agentes Etiolgicos de Criaes, Aves e de
Outras Doenas em Animais
9 CFR Partes 92, 94, 95, 96, 122 e 130. Esses regulamentos
exigem que uma licena de importao obtida no Departamento
de Agricultura dos Estados Unidos (USDA), no Servio de Inspeo de Sade de Plantas e Animais (APHIS) e nos servios veterinrios para importao ou transferncia domstica de agentes
etiolgicos de criaes, aves, outros animais e qualquer outro material que possa conter esses agentes etiolgicos. Maiores informaes podero ser obtidas pelo telefone (301) 734-3277 ou pela
internet: <http://aphisweb.aphis.usda.gov/ncie>.
Importao de Pestes de Plantas
7 CFR Parte 330. Regulamentos Federais de Pestes de Plantas; Geral; Pestes de Plantas; Solo; Pedras e Produtos de Ardsia;
Lixo. Esse regulamento exige uma licena para a importao ou a
transferncia domstica de pestes botnicas, agentes biolgicos
de plantas ou de qualquer material que possa cont-los. Maiores
informaes podero ser obtidas pelo telefone 301-734-3277 ou
pela internet: <http://aphis.usda.gov./ppq/ppqpermits.html>.
Transferncia de Agentes Biolgicos Selecionados de
Doenas Humanas
42 CFR Parte 72.6. Exigncias Adicionais para Instalaes
que Realizam Transferncias ou Recebimento de Agentes Selecionados. Instalaes que transferem ou importam agentes selecionados devero ser registradas junto ao CDC. Cada transferncia de um agente selecionado dever ser documentada.
Maiores informaes podero ser conseguidas pela internet:
<http://www.cdc.gov/od/ohs/lrsat>.
252
Exportao de Agentes Etiolgicos Humanos, Animais,

Plantas e Materiais Relacionados
Departamento de Comrcio. 15 CFR Partes 730 a 799. Esses
regulamentos exigem que os exportadores de uma grande variedade de agentes etiolgicos humanos, plantas e doenas animais,
incluindo o material gentico e produtos que podero ser usados
na cultura de grandes quantidades de agentes, possuam uma licena para exportao. Maiores informaes podero ser obtidas pelo telefone do DOC Bureau of Export Administration: 202482-4811 ou pela internet: <http://www.bxa.fedworld.gov> ou
<http://www.bxa.doc.gov>.
As figuras 4 e 5 ilustram o acondicionamento e a rotulao de
substncias e amostras clnicas infecciosas em volumes de menos
de 50ml, de acordo com as provises do subpargrafo 72.3 (a) do
regulamento do Interstate Shipment of Etiologic Agents (42 CFR,
Parte 72). A reviso depende ainda dos resultados dos requisitos
adicionais de rotulao de embalagens, mas at o momento da publicao desta quarta edio do BMBL essas modificaes no haviam sido concludas.
Para maiores informaes sobre qualquer clusula deste regulamento, entre em contato com:
Centers for Disease Control and Prevention
Attn: External Activities Program
Mail Stop F-05
1600 Clifton Road N.E.
Atlanta, GA 30.333
Telephone: (404) 639-4418
FAX: (404) 639-2294.
Observe que o nome, o endereo e o nmero de telefone do
remetente devero ser colocados nos lados externo e interno dos
containers. Recomendamos ao leitor consultar outras clusulas
adicionais do Department of Transportation (49 CFR, Partes 171180) Hazardous Materials Regulations.
253
APNDICE C
Figura 4. Embalagem e rotulagem de substncias infecciosas
Recipiente primrio
Embalagem de material absorvente
Cultura
Rtulo de risco biolgico
Fita prova dgua
Cultura
Rtulo de identificao
da amostra
Embalagem de
material absorvente
Tampa
Segundo recipiente ou
recipiente secundrio
Nome, telefone e
endereo
do remetente.
Outro
recipiente
Rtulo de substncia infecciosa
Figura 5. Embalagem e rotulagem de amostras clnicas
Lista discriminada dos contedos

Recipiente secundrio
hermeticamente fechado
(lacrado em um saco plstico)
Recipiente hermtico primrio
Recipiente hermtico primrio

Recipiente secundrio hermeticamente fechado (lacrado em um saco plstico)
Embalagem de material absorvente
Amostra ID
Embalagem de
material absorvente
Embalagem exterior
Rtulo da amostra clnica

Nome, telefone e endereo do destinatrio
254
APNDICE D
Patgenos Animais
Os patgenos que normalmente no so encontrados na criao domstica de aves e de gado podero necessitar de um projeto
laboratorial especial, uma operao e de caractersticas especficas de conteno, que geralmente no esto especificadas nesta
publicao. A importao, a posse e o uso dos seguintes agentes
so proibidos ou restritos por lei ou pelos regulamentos ou normas administrativas do Departamento de Agricultura dos Estados
Unidos ou por polticas administrativas:
Tabela 9. Patgenos animais
Doena do cavalo africano
Vrus da febre suna africana*
Vrus da Akabane
Vrus da influenza aviria
Besnoitia Besnoiti
Vrus da lngua azul*
Vrus da doena de Borna
Encefalopatia espongiforme bovina
Agente da febre petequial
infecciosa bovina
Brucella abortus
Brucellosis melitensis*
Burckholderia mallei
(Pseudomonas mallei Glanders)
Mycoplasma mycoides (mycoides)

Vrus da doena de ovinos africanos
(vrus Ganjam)
Vrus da doena de Newcastle* (cepas
velognicas)
Peste dos pequenos ruminantes*
(praga dos pequenos ruminantes)
Vrus da febre do Vale Rift*
Vrus de Rinderspest*
Varola de ovinos e caprinos*
Vrus da doena vesicular de sunos*
Vrus da doena de Teschen*
Theileria annulata
Theileria lawrencei
Theileria bovis
continua
255
APNDICE D
patgenos animais
continuao
Vrus da varola do camelo

Febre suna clssica
Cochliomya hominivorax
(larva da Cochliomya hominivorax)
Cowdria ruminantium (caudriose)
Encefalopatia espongiforme bovina, variante da doena de Creutzeldt-Jakob
Vrus da febre efemeral
Vrus da doena da mo-e-boca*
Histoplasma (Zymonema) farciminosum
Vrus da encefalite bovina
Vrus da doena da pele granulosa
Mycobacterium bovis
Mycoplasma agalactiae
Theileria hirci
Trypanosoma brucei
Trypanosoma congolense
Trypanosoma equiperdum (dourine)
Trypanosoma evansi
Trypanosoma vivax
Encefalomielite eqina venezuelana
Vrus do exantema vesicular
Estomatite vesicular
Doena hemorrgica viral de coelhos
Vrus da doena de Wesselsbron
A importao, a posse, o uso ou o embarque interestadual de

patgenos animais, com exceo dos relacionados, podem tambm estar sujeitos aos regulamentos do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos.
A licena para importao por meio do USDA/APHIS necessria para a importao de qualquer agente infeccioso animal que
esteja na lista de patgenos animais da USDA/APHIS. Essa licena
poder ser requerida para a importao de qualquer outro agente
de infeco de aves e gado. Uma licena tambm necessria para
a importao de qualquer produto derivado de aves ou de gado,
tais como sangue, soro ou outros tecidos.
Mais informaes podero ser obtidas escrevendo para:
U.S. Department of Agriculture
Animal and Plant Health Inspection Service
Veterinary Services, National Center for Import and Export
4700 River Road, Unit # 40
Riverdale, Maryland 20737-1231
Telefone: (301) 734-3277
Fax: (301) 734-8226
Internet: http://www.aphis.usda.gov/ncei
256
APNDICE E
fontes de informaes
As fontes de informaes, as consultas e as recomendaes sobre o controle de risco biolgico, os procedimentos de descontaminao e outros aspectos do gerenciamento da segurana de um
laboratrio incluem:
Centers for Disease Control and Prevention
Attention: External Activities Program
Atlanta, Georgia 30333
Telefone: (404) 639-4418
National Institutes of Health
Attention: Division of Safety
Bethesda, Maryland
Telefone: (301) 496-1357
National Animal Disease Center
U.S Department of Agriculture
Ames, Iowa 50010
Telefone: (515) 862-8258
United States Department of Labor, Occupational Safety
and Health Administration
Exposio Ocupacional aos Patgenos do Sangue, Regra Final
Fed Reg 1991; 56: 64041-64182
http://www.osha-slc.gov/OshStd_data/1910_1030.html.
Regra Proposta para TB:
http://www.osha-slc.gov/FedReg_osha_data/FED19980205.html.
Padres de Segurana e de Sade. Ocupacional 29 CFR Parte 1910:
http://www.oshda-slc.gov/OshStd_toc/OSHA_Std_toc_1910.html
257
APNDICE e
fontes de informaes
Normas:
Centros de Preveno e Controle de Doenas
Tuberculose:
1994: http://www.cdc.gov/nchstp/tb/pubs/250001.pdf
1997 (labs): http://www.cdc.gov/od/ohs/tbdoc2.html
Imunizao para Trabalhadores da rea de Sade:
http://www.cdc.gov/epo/mmwr/preview/rr4618.html
Normas para Controle de Infeces em Trabalhadores da rea
de Sade, 1998:
http://www.cdc.gov/ncidod/hip/draft_gu/waisgate.txt
Profilaxia para o HIV:
http://www.cdc.gov/epo/mmwr/mmwr_rr.html
Departamento do Exrcito, DOD. 32 CFR Partes 626, 627
Programa de Segurana da Defesa Biolgica:
http://www.gpo.gov
Comit Nacional para Padres de Laboratrios Clnicos (NCCLS)
Normas aprovadas para a proteo de trabalhadores de laboratrios contra os agentes de risco biolgico e doenas infecciosas transmitidas pelo sangue, fluidos corpreos e tecidos.
Dezembro de 1997, NCCLS Doc. M29-A (ISBN1-56238-339-6.
http://www/exoffice@nccls.org ).
Institutos Nacionais de Sade
Normas do NIH para Molculas de DNA Recombinante:
http://www.NIH.gov/od/orda/toc.html
Escritrio do NIH para Atividades com DNA Recombinante:
http://www.NIH.gov/od/orda
258
APNDICE F
Segurana do
Laboratrio e
Resposta de Emergncia
para Laboratrios
Biomdicos e de
Microbiologia
Normas tradicionais de segurana laboratorial enfatizam o uso

de boas prticas de trabalho, de equipamentos de conteno adequados, dependncias bem projetadas e controles administrativos
que minimizem os riscos de uma infeco acidental ou ferimentos
em trabalhadores de laboratrio e que evitem a contaminao do
meio ambiente.
Embora os laboratrios clnicos e de pesquisas possam conter
uma variedade de materiais biolgicos, qumicos e radioativos perigosos, at o momento existem poucos relatrios sobre o uso intencional de quaisquer desses materiais para ferir trabalhadores
de laboratrio ou outras pessoas.1, 2, 3, 4, 5, 6
Entretanto, h uma crescente preocupao sobre o possvel
uso de materiais biolgicos, qumicos e radioativos como agentes
para o terrorismo.7, 8 Em resposta a essas preocupaes, as seguintes normas orientam essas questes de segurana laboratorial
(por exemplo, preveno da entrada de pessoas no autorizadas
em reas laboratoriais e preveno da remoo no autorizada de
agentes biolgicos perigosos).
Os seguintes itens so oferecidos como normas para os laboratrios que usam agentes biolgicos ou toxinas capazes de causarem doenas srias ou fatais aos homens e aos animais. A maioria
desses laboratrios estaria trabalhando sob condies de nveis
de biossegurana 3 ou 4 descritas nas sees II e III. Porm, os laboratrios de pesquisa, de produo e os clnicos que trabalham
com patgenos recentemente identificados, patgenos animais de
alto nvel e/ou toxinas no-cobertas pelas recomendaes dos n-
259
APNDICE f
segurana do laboratrio e resposta de emergncia para laboratrios biomdicos e de microbiologia
veis de biossegurana 3 ou 4 devero tambm seguir essas normas

para minimizar as oportunidades de remoo acidental ou intencional dos agentes de um laboratrio.
1. Reconhecer que a segurana do laboratrio est relatada, mas
diferente de um laboratrio seguro
Envolver profissionais com experincia em segurana e
proteo para avaliao e desenvolvimento das recomendaes para um dado local ou laboratrio.
Revisar as normas e os procedimentos de segurana regularmente. A administrao dever revisar as normas
para garantir que esto adequadas para as condies atuais e consistentes com outras normas e procedimentos
amplos do local. Os supervisores do laboratrio devero
assegurar que todos os trabalhadores e visitantes de um
laboratrio entendam os requisitos de segurana e sejam
treinados e equipados para seguirem os procedimentos
estabelecidos.
Rever as normas e os procedimentos quando ocorrer um
incidente ou quando uma nova ameaa for identificada.
2. Acesso controlado s reas onde agentes biolgicos ou toxinas
estejam sendo usados ou armazenados
As reas dos laboratrios e de tratamento de animais devero ser separadas das reas pblicas dos edifcios onde
se encontram localizadas.
As reas do laboratrio ou de cuidados animais devero
ser trancadas todas as vezes.
Os cartes-chave ou dispositivos similares devero ser
usados para permitir a entrada nas reas do laboratrio e
nas de cuidado dos animais.
Todas as entradas (incluindo as entradas para visitantes,
trabalhadores de manuteno, trabalhadores para realizao de reparos e outros que precisarem entrar ocasionalmente) devero ser registradas por um dispositivo
semelhante a um carto-chave (prefervel) ou pela assinatura no livro de entrada.
260
APNDICE f
Somente os trabalhadores necessrios para a realizao

de um trabalho devero receber permisso para entrar
nas reas e nas horas que um trabalho em particular for
realizado.
a. O acesso para estudantes, cientistas, etc. dever ser
limitado ao horrio em que os funcionrios regulares estiverem presentes.
b. O acesso para limpeza, manuteno e consertos rotineiros dever ser limitado ao horrio em que os funcionrios estiverem presentes.
Freezers, geladeiras, cabines e outros recipientes, em que
estoques de agentes biolgicos, materiais clnicos ou radioativos so guardados, devero ser trancados quando
no estiverem vista dos trabalhadores (por exemplo,
quando localizados em reas de armazenamento no freqentadas regularmente).
3. Saber quem est nas reas do laboratrio

Os supervisores e diretores do local devero conhecer
todos os trabalhadores. Dependendo dos agentes biolgicos envolvidos e do tipo de trabalho a ser desenvolvido,
deve-se fazer uma reviso da limpeza e da segurana antes que novos funcionrios sejam designados para a rea
de trabalho.
Todos os trabalhadores (incluindo estudantes, cientistas
visitantes e outros trabalhadores temporrios) devero
usar crachs de identificao. Os crachs devero conter
no mnimo uma fotografia, o nome do indivduo e a data
de vencimento da identificao. O uso de marcadores coloridos ou de outros smbolos facilmente identificveis
sobre os crachs seria til para a identificao e para indicar a liberao para a entrada em reas restritas (por
exemplo, laboratrios de NB-3 ou 4 e reas de tratamento de animais).
Os visitantes devero ser identificados com crachs e
acompanhados ou autorizados a entrar usando os mesmos procedimentos como os usados para trabalhadores.
261
APNDICE f
4. Saber quais os materiais que esto sendo trazidos para dentro

da rea laboratorial
Todos os materiais devero ser verificados (visualmente ou
por raios-x) antes de trazidos para dentro do laboratrio.
Os pacotes contendo amostras, substncias bacterianas
ou isoladas ou toxinas devero ser abertos em uma cabine de segurana ou em outro dispositivo de conteno
adequado.
5. Saber quais materiais esto sendo removidos da rea
laboratorial
Os materiais/toxinas biolgicas que sero removidos
para outros laboratrios devero ser embalados e rotulados de acordo com todos os regulamentos locais, federais
e internacionais aplicveis.9
a. As licenas necessrias (por exemplo, PHS, DOT,
DOC, USDA) devero ser obtidas antes que os materiais sejam acondicionados e rotulados.
b. Os recipientes (de preferncia) ou o local de recebimento dos materiais devero ser conhecidos pelo
remetente. Este dever fazer um esforo para assegurar que os materiais sejam enviados para um local
equipado com recursos para manipular os materiais
com segurana.
O transporte manual de materiais e toxinas biolgicas
para outros laboratrios considerado inadequado. Se
os materiais ou toxinas biolgicas a serem carregados
manualmente forem transportados por carregadores comuns, todos os regulamentos devero ser seguidos.
Materiais contaminados ou possivelmente contaminados
devero ser descontaminados antes de sar da rea do laboratrio. Os materiais qumicos e radioativos devero
ser descartados de acordo com os regulamentos locais,
federais e estaduais.
6. Tenha um plano de emergncia
O controle do acesso s reas do laboratrio poder fazer
com que os procedimentos de emergncia sejam dificul262
APNDICE f
tados. Esse fato dever ser considerado quando os planos

de emergncia forem desenvolvidos.
a. Uma avaliao da rea laboratorial pelos funcionrios do local, com profissionais de fora, se necessrio, para a identificao dos aspectos de segurana e
proteo, dever ser conduzida antes que um plano
de emergncia seja desenvolvido.
b. Os administradores, diretores, principais pesquisadores e trabalhadores do laboratrio e os trabalhadores responsveis pela segurana do local devero
estar envolvidos no planejamento de emergncia.
c. A polcia, o corpo de bombeiros ou outras pessoas
envolvidas em situaes de emergncia devero ser
informados quanto aos tipos de materiais biolgicos
em uso nas reas laboratoriais e devero dar uma
assistncia ao planejamento dos procedimentos de
emergncia nas reas laboratoriais.
d. Os planos devero incluir a proviso de uma notificao imediata aos diretores e trabalhadores do
laboratrio e pessoas encarregadas pela segurana
ou outros indivduos quando ocorrer uma emergncia, de maneira que possam lidar com as questes de
biossegurana caso ocorram.
O planejamento de emergncia laboratorial dever ser
coordenado com planos de expanso. Fatores como ameaas de bombas, problemas climticos (furaco e inundao), terremotos, falta de energia e outros desastres naturais (ou no-naturais) devero ser considerados quando
o plano de emergncia estiver sendo desenvolvido.
7. Possua um protocolo para relato de incidentes

Os diretores do laboratrio, em cooperao com os encarregados pela segurana e proteo do local, devero ter
normas e procedimentos no local para relatar e investigar
os incidentes ou possveis incidentes (por exemplo, visitantes sem documentos, desaparecimento de substncias qumicas, telefonemas incomuns ou ameaadores).
263
APNDICE G
Gerenciamento
Integrado de Roedores
e de Insetos
O gerenciamento de roedores e de insetos uma parte importante na administrao de um local de pesquisa. Muitos insetos,
como mosquitos e baratas, podem ser vetores e espalhar mecanicamente os patgenos de doenas, comprometendo o meio ambiente de pesquisa. Mesmo a presena de insetos incuos contribui para as condies fora dos padres sanitrios.
A abordagem mais comum para o controle de roedores e de insetos tem sido a aplicao de produtos qumicos, como uma medida preventiva ou remediadora. Os tratamentos com pesticidas
podem ser eficazes e necessrios como medidas corretivas, mas
tm resultados limitados a longo prazo quando usados sozinhos.
As aplicaes de pesticidas tambm apresentam potencial de contaminao para o meio ambiente de pesquisa, pela aerolizao e
volatilizao do pesticida.
Para controlar os roedores e os insetos e minimizar o uso de
pesticidas, necessrio empregar um programa de abordagem
que integre os servios de limpeza, de manuteno e de controle
de roedores e insetos. Esse mtodo de controle freqentemente chamado de gerenciamento integrado de roedores e de insetos
(GIRI). O objetivo primrio de um programa GIRI prevenir os
problemas causados pelos roedores e insetos por meio do gerenciamento do meio ambiente local, de maneira que o torne menos
propcio para a infestao de roedores e de insetos. Juntamente
com as aplicaes limitadas de pesticidas, o controle conseguido com estratgias de intervenes administrativas e operacionais
retroativas para corrigirem condies que propiciem o surgimento
de roedores e insetos.
265
APNDICE g
gerenciamento integrado de roedores e de insetos
O GIRI um servio baseado em estratgias. A deciso de implementar um programa GIRI dever se basear no somente no
custo, mas tambm na eficcia dos componentes do servio. O
GIRI especfico para cada local. Cada programa dever ser idealizado conforme o meio ambiente onde ser aplicado. Os servios
de GIRI em um laboratrio sero diferentes daqueles aplicados em
um edifcio de escritrios ou em um local de tratamento de animais.
Os programas de gerenciamento integrado de roedores e de insetos (GIRI) so baseados nos vrios componentes que esto inter-relacionados e que contribuem para o gerenciamento do meio
ambiente de pesquisa para controlar os roedores e os insetos. So
eles:

266
Projeto do Local: A incluso de questes e requisitos

para o gerenciamento de roedores e de insetos no planejamento, no projeto e na construo proporciona a
oportunidade de incorporar caractersticas que auxiliam
a impedir a presena de roedores e de insetos, a minimizar o seu habitat e a promover condies sanitrias
adequadas. Isso poder ajudar a reduzir a necessidade
de futuros servios corretivos de gerenciamento de roedores e de insetos, que podem ser um obstculo para as
operaes de pesquisa.
Monitoramento: Armadilhas, inspees visuais e entrevistas com os funcionrios so usadas para identificao das reas e das condies que possam abrigar roedores e insetos. O monitoramento a atividade central de
um programa de GIRI e usado no lugar de tratamentos
preventivos com pesticidas.
Manuteno do Local e do Saneamento Bsico:
Muitos dos problemas com roedores e insetos podem
ser prevenidos ou corrigidos ao usarmos um saneamento adequado, reduzindo a desordem e o habitat desses.
A manuteno de registros das deficincias estruturais
e das condies de manuteno do local pode ajudar a
detectar problemas e determinar se as aes corretivas
foram concludas de maneira satisfatria.
APNDICE g
Comunicao: Um membro da equipe do laboratrio

pode ser designado para se reunir com os funcionrios
do gerenciamento de roedores e de insetos, para assistilos nas resolues de questes especficas do laboratrio
que tenham impacto sobre o gerenciamento de roedores
e de insetos. As informaes sobre as atividades de roedores e de insetos e as recomendaes sobre as prticas
e as condies do local que possam impactar o gerenciamento de roedores e de insetos devem ser retransmitidos verbalmente ou por escrito para aquelas pessoas. O
treinamento dos indivduos em questes relacionadas
identificao, biologia e s condies sanitrias pode
tambm promover a compreenso e a cooperao com os
objetivos do programa de GIRI.
Manuteno de Registros: Um livro de registro pode
ser usado para anotar a atividade dos roedores e dos insetos e as condies pertinentes ao programa de GIRI. O livro poder conter os protocolos e os procedimentos para
os servios de GIRI naquela instalao, folhas de dados
sobre a segurana dos pesticidas, rtulos dos mesmos,
registros de tratamento, planos para o uso, relatrios de
pesquisa, etc.
Controle de Roedores e de Insetos sem o uso de
Pesticidas: Os mtodos de controle como o uso de armadilhas, calafetagem ou vedao, lavagem e congelamento podem ser aplicados de forma segura e eficiente,
quando usados juntamente com condies sanitrias e
reparos estruturais adequados.
Controle de Roedores e de Insetos usando Pesticidas: As aplicaes preventivas dos pesticidas devero
ser desencorajadas, e os tratamentos devero ficar restritos s reas de atividades conhecidas de roedores e dos
insetos. Quando os pesticidas so aplicados, deve-se usar
e aplicar produtos menos txicos, de melhor eficcia, de
maneira segura.
Avaliao e Garantia de Qualidade do Programa:
A reviso do programa e a garantia da qualidade devero

267
APNDICE g
proporcionar uma avaliao contnua e objetiva das atividades e da eficcia do GIRI. Isso feito para assegurar
que o programa esteja realmente controlando os roedores
e os insetos e atendendo as necessidades bsicas do programa de instalao e de seus ocupantes. Baseado nessa
reviso, os protocolos de gerenciamento de roedores e de
insetos podem ser modificados e novos procedimentos
podem ser implementados.
Percia Tcnica: Um entomologista qualificado pode
fornecer um guia tcnico til ao desenvolvimento e
implementao de um programa GIRI. As pessoas responsveis pelo gerenciamento de roedores e de insetos
devero ser licenciadas e certificadas por uma agncia
regulamentadora adequada.
Segurana: Ao limitar o espectro dos tratamentos com
pesticidas e ao usarmos prticas de controle sem pesticidas, o programa de GIRI poder minimizar o potencial
de exposio do meio ambiente de pesquisa e da equipe
de funcionrios ao pesticida.
Antes de iniciar qualquer tipo de programa de controle de roedores e de insetos, o desenvolvimento de uma estrutura operacional para os servios GIRI poder ajudar a promover a colaborao
entre especialistas no controle e o pessoal do local. Essa estrutura
pode tambm ser usada para incorporar as restries de instalao fsica laboratorial e questes operacionais e processuais dentro do programa de GIRI. Um programa eficaz de gerenciamento
de roedores e de insetos uma parte integral da administrao
das instalaes laboratoriais. Ao incluir uma poltica de GIRI nos
procedimentos padro de operao de instalaes laboratoriais,
aumenta-se a conscientizao do programa.
O treinamento sobre os princpios e as prticas do gerenciamento estrutural (indoor) integrado ao gerenciamento de roedores e de insetos e as informaes sobre o programa do GIRI esto
disponveis em muitas fontes. Algumas delas so: os departamentos de entomologia de universidades, os escritrios de extenso
municipal, a Sociedade Entomolgica dos EUA, os departamentos
estaduais de agricultura, as associaes estaduais de controle de
268
APNDICE g
roedores e de insetos, os estoques de equipamentos para controle

e os consultores ou as firmas de gerenciamento de roedores e de
insetos. H tambm cursos por correspondncia em vrias universidades, cursos de curta extenso e conferncias de treinamento
sobre o gerenciamento estrutural de roedores e de insetos.
Informaes adicionais:
Urban Entomolgy. 1996. Insect and mite Pests in the Human
Environment. W.H. Robinson. Chapman and Hall. New York.
Advances in Urban Pest Management. 1986. Gary W. Bennett and
John M. Owens, eds. Van Nostrand Reinhold Company. New York.
Common Sense Pest Control. 1991. Least-toxic solutions for
four home, garden, pests and community. William Olkowski,
Sheila Daar, Helga Olkowski. The Taunton Press Inc.
Internet:
Associao Nacional de Controle de Roedores e de Insetos:
http://www.pestworld.org
Rede de Biocontrole:
http://www.bioconet.com
269
APNDICE H
Trabalhos com Clulas
e Tecidos Humanos e de
Outros Primatas
Os Centers for Disease Control and Prevention e o National

Institutes of Health gostariam de expressar agradecimentos a Frank
P. Simione, M.S. e Jane Caputo, B.A., da American Type Culture
Collection (ATCC), uma organizao global de biocincia dedicada
aos padres biolgicos e biodiversidade, por suas contribuies na
preparao deste apndice.
Pelo menos 24 casos documentados de infeco em funcionrios de laboratrio que manipulam culturas de clulas primrias
(por exemplo, clulas renais do macaco rhesus) ocorreram nos ltimos 30 anos.1, 2 Embora um nmero limitado de infeces adquiridas em laboratrio tenha sido relatado como resultado da manipulao de clulas humanas e de outros primatas, h um risco
significativamente maior em adquirir uma infeco pelo HIV ou
pelo HBV por meio da exposio ao sangue humano e a outros
lquidos corporais.3, 4, 5 Por essa razo, a OSHA desenvolveu um
padro para patgenos do sangue. 6 Os procedimentos foram publicados para reduzir a contaminao de culturas celulares com
microorganismos7, 8 ou com outras clulas.9
Riscos Potenciais em Laboratrios: Os riscos potenciais
laboratoriais associados s clulas e aos tecidos humanos incluem
os patgenos do sangue HBV e HIV, assim como agentes tais como
Mycobacterium tuberculosis que podem estar presentes nos tecidos
pulmonares humanos. Outras clulas e tecidos de primatas tambm apresentam riscos aos trabalhadores de laboratrio.10 Riscos
potenciais aos trabalhadores de laboratrio so apresentados por
clulas transformadas por agentes virais, como as SV-40, EBV ou
a HBV, assim como as clulas que carregam material gentico vi-
271
APNDICE H
trabalhos com clulas e tecidos humanos e de outros primatas
ral. As clulas humanas tumorignicas tambm podem oferecer

potenciais riscos como resultado de uma auto-inoculao.11
Prticas Recomendadas: Clulas humanas e de outros primatas devero ser manipuladas usando as prticas e a conteno
do nvel de biossegurana 2. Todo o trabalho dever ser realizado
em uma cabine de segurana biolgica, e todo o material dever
ser descontaminado pela autoclave ou desinfetado antes de ser
descartado.12, 13, 14, 15 Todos os funcionrios que trabalham com clulas e tecidos humanos devero ser registrados no Programa de
Patgenos do Sangue e trabalhar de acordo com as normas e polticas estabelecidas pelo Plano Institucional de Controle de Infeco.16 Os empregados devero fornecer uma amostra do soro,
permitir a sua imunizao contra o vrus da hepatite B e ser avaliados por um profissional da rea de sade depois de qualquer
exposio incidental.
272
APNDICE I
Normas para o
Trabalho com Toxinas
de Origem Biolgica
Em reconhecimento ao crescente nmero de laboratrios biomdicos e microbiolgicos que trabalham com toxinas de origem
biolgica, apresentamos as seguintes normas para o trabalho com
essas toxinas.
O material a seguir foi adaptado do Programa de Segurana
da Defesa Biolgica e dos Requisitos de Segurana Tcnica (DA
Pamphlet 385-69)1 e do apndice A do United States Department
of Labor Occupational Safety and Health Association regulado por
Occupational Exposure to Hazardous Chemicals in Laboratories. 2
Os gerentes de laboratrio e os encarregados pela segurana
das instalaes devero ser encorajados a utilizar as referncias relacionadas a seguir e a consultar peritos no assunto antes de usar
qualquer toxina, para assegurar que as instalaes, os equipamentos de conteno, as normas e os procedimentos, os programas de
treinamento de pessoal e os protocolos de vigilncia mdica especficos para a toxina e para o laboratrio so adequados.
Geral
As instalaes, os equipamentos e os procedimentos laboratoriais para o trabalho com toxinas de origem biolgica devero
refletir o nvel intrnseco de perigo imposto por uma toxina em
particular, assim como os riscos potenciais inerentes s operaes
realizadas. Se a toxina e os agentes infecciosos forem usados, os
dois devero ser levados em considerao quando o equipamento
de conteno for selecionado e os procedimentos e as normas forem escritos. Caso sejam usados animais, as prticas de segurana
animal tambm devero ser consideradas.
273
APNDICE i
normas para o trabalho com toxinas de origem biolgica
Prticas padro
As prticas padro relacionadas nos NB-2 e 3 devero ser revisadas e incorporadas aos protocolos para o trabalho com as toxinas.
Prticas Especiais
As prticas especiais relacionadas nos NB-2 e 3 devero ser revisadas e incorporadas aos protocolos apropriados para o trabalho
com as toxinas.
1. Cada laboratrio dever desenvolver um plano de higienizao qumica especfico para a(s) toxina(s) usada(s).
O plano de higienizao qumica dever: 1) identificar os
perigos que sero encontrados no uso normal da toxina e
no caso de um vazamento ou outro acidente; e 2) especificar as prticas e normas a serem usadas para minimizar
os riscos (por exemplo, equipamento de conteno e proteo individual, gerenciamento de vazamentos, gerenciamento de exposies acidentais e vigilncia mdica). 3
2. O treinamento especfico para o uso de toxinas dever
ser exigido e documentado para todos os funcionrios
de laboratrio que trabalhem com as toxinas antes que o
trabalho com esse elemento seja iniciado e, a partir da,
em intervalos de tempo.
3. Um sistema de controle de inventrio dever ser adotado.
4. As toxinas devero ser guardadas em salas de armazenamento, cabines ou freezers trancados, quando no estiverem sendo usadas.
5. O acesso s reas que contm toxinas dever ficar restrito s pessoas que trabalham no local.
6. A preparao de recipientes primrios contendo estoques
de solues de toxinas e manipulaes de containers primrios de formas secas de toxinas dever ser conduzida
em uma coifa qumica a vapor, em uma cabine com luvas (glove box), em uma cabine de segurana biolgica ou
em um sistema de conteno equivalente aprovado pelo
responsvel pela segurana. A filtrao do ar liberado
atravs de filtros HEPA e/ou atravs de carvo poder ser
necessria, dependendo da toxina.
274
APNDICE i
7. O usurio dever verificar o fluxo de ar no interior da coifa ou da cabine de segurana biolgica antes de iniciar o
trabalho.
8. Todo trabalho dever ser feito dentro de uma rea efetiva
da coifa ou da cabine de segurana biolgica.
9. Quando as toxinas estiverem sendo usadas, a sala dever
conter um aviso indicando Toxinas em Uso Somente
Pessoas Autorizadas. Qualquer solicitao especial para
a entrada no recinto dever ser colocada na entrada da
sala. Somente os funcionrios cuja presena necessria
devero ser permitidos enquanto as toxinas estiverem
sendo usadas.
10. Todas as operaes de alto risco devero ser conduzidas
na presena de duas pessoas experientes. Cada um dever estar familiarizado com os procedimentos aplicveis,
mantendo o contato visual um com o outro e pronto a
prestar socorro no caso de um acidente.
11. Antes que os recipientes sejam removidos da sala, da coifa, das cabines ou da cabine com luvas (glove box), o exterior do recipiente primrio fechado dever ser descontaminado e colocado em um container secundrio limpo. As
toxinas devero ser transportadas somente em containers
prova de vazamentos.
12. As roupas e os equipamentos de proteo contaminados
ou potencialmente contaminados devero ser descontaminados utilizando mtodos conhecidos pela eficcia
contra toxinas antes de serem removidos do laboratrio,
para que possam ser desprezados, limpos ou consertados. Caso a descontaminao no seja possvel/prtica,
os materiais (por exemplo, luvas usadas) devero ser descartados como lixo txico. Os materiais contaminados
com agentes infecciosos e as toxinas devero tambm ser
autoclavados ou convertidos em no-infecciosos de outra
maneira antes de deixar o laboratrio.
13. O interior da coifa, da cabine com luvas (glove box) ou da
cabine dever ser descontaminado periodicamente, por
exemplo, no final de uma srie de experimentos relacio275
APNDICE i
nados. At que sejam descontaminadas, a coifa, a cabine

com luvas e a cabine devero conter um aviso indicando
que toxinas esto sendo usadas e que o acesso ao equipamento e aos utenslios fica restrito aos funcionrios
autorizados.
Equipamentos de Segurana
As normas para o uso de equipamentos de segurana relacionados nos nveis de biossegurana 2 e 3 (veja seo III) devero
ser revisadas e incorporadas adequadamente aos protocolos para
o trabalho com as toxinas.
1. Quando utilizando coifas a vapor com abertura frontal
ou cabine de segurana biolgica, roupa de proteo,
incluindo as luvas e uma capa descartvel que cubra o
corpo e tenha manga comprida (jaleco, avental ou traje
semelhante), estes devero ser usados de maneira que as
mos e os braos estejam completamente cobertos.
2. Uma proteo para os olhos dever ser utilizada se um
sistema de conteno que possua uma abertura na frente
for usado.
3. Outro equipamento poder ser necessrio, dependendo
das caractersticas da toxina e do sistema de conteno.
Por exemplo, use uma proteo respiratria adicional se
a a formao de aerossis ocorrer e no for possvel o uso
de um equipamento de conteno ou de outros controles
de engenharia de segurana.
4. Quando manipular formas secas de toxinas que sejam
eletrostticas:
a. No use luvas (como as de ltex) que ajudem a formar eletricidade esttica.
b. Use uma glove box ou uma cabine com luvas ou uma
cabine de segurana biolgica de classe III.
5. Quando manipular toxinas que sejam perigosas para a
membrana percutnea (irritantes, que provocam necrose
no tecido ou sejam extremamente txicas para a exposio dermatolgica), selecione luvas que sejam impermeveis toxina.
276
APNDICE i
6. Considere a toxina e o diluente quando for selecionar luvas e outras roupas de proteo.
7. Se os agentes infecciosos e as toxinas forem usados juntamente com um sistema experimental, considere os
dois quando for selecionar os equipamentos e as roupas
de proteo.
Instalaes do Laboratrio
As recomendaes de instalao do laboratrio relacionadas
para os nveis de biossegurana 2 e 3 (veja a seo III) e os padres
da OSHA* devero ser revisados e incorporados de forma apropriada nos protocolos para o trabalho com toxinas.
1. Linhas de Vcuo. Ao usar as linhas de vcuo juntamente com sistemas de conteno de toxinas, estas devero
ser protegidas com um filtro HEPA para prevenir a entrada de toxinas nas linhas. Os ralos das pias devero ser
tambm protegidos quando os aspiradores de gua forem
usados.
277
NDICE
REMISSIVO
A
Agentes Bacterianos 101
Agentes Parasitrios 132
Trematdeos 135, 136
agentes virais 153, 162, 271
Agulhas e seringas 34, 42, 52
Antraz 101, 247
Arbovrus e Arenavrus 182, 185
Ascaris spp 137, 138
Avaliao dos Riscos 23, 26, 85, 89, 90, 92, 96, 97, 100, 180
B
Bacillus anthracis 101
Bacillus subtilis 23
Besnoitia Besnoiti 255
BMBL 253
Bordetella pertussis 102
Botulismo 108
Bovino 110, 139, 143, 168, 176, 177, 255, 256
Abortus 103, 255
Canis 103, 201
Melitensis 103, 201, 202, 255
Suis 103
Brucelose 13, 14, 103, 104
279
NDICE REMISSIVO
C
Cabines de Segurana Biolgica 20, 21, 24, 25, 27, 31, 32, 36, 38, 43,
46, 47, 49, 54, 55, 57, 59, 63, 73, 79, 81, 82, 86, 88, 103, 116,
119, 129, 160, 163, 168, 235, 237, 238, 239, 246
Classe I 64, 88, 119, 129, 168, 235, 236, 238, 239, 241
Classe II 20, 27, 36, 45, 47, 54, 63, 81, 235, 236, 238, 239, 242,
243, 244, 245
Classe III 21, 25, 47, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 64, 81, 82, 85, 86, 88,
156, 160, 235, 238, 239, 240, 246, 276
Calomys spp. 192
Campylobacter 105, 106, 202, 203
Caudriose 256
Cercopithecus spp. 192
Chimpanzs 140, 141, 143, 156, 158, 164, 193
Citomegalovrus 162
Clostridium 108, 109
Coccidioides immitis 127
Clera 13, 125, 247
Condios 127, 132
Conteno 17, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 27, 31, 32, 36, 38, 39, 41,
43, 45, 48, 49, 53, 55, 57, 58, 60, 62, 64, 70, 73, 74, 77, 78,
79, 82, 85, 87, 88, 96, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106,
107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 115, 116, 117, 118, 119,
120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 133, 135, 138, 150, 154,
155, 158, 162, 163, 164, 165, 167, 170, 173, 177, 181, 186,
188, 189, 193, 235, 236, 238, 239, 249, 251, 255, 259, 262,
272, 273, 274
Conteno primria 19, 22, 24, 49, 53, 73, 78, 87, 99, 103, 105,
108, 120, 121, 126, 133, 135, 138, 158, 163, 170, 177, 235
Conteno secundria 19
Coriomeningite Linfoctica 164, 186
Coxiella burnetii 24, 149, 218
Cryptococcus neoformans 128, 209
CSB. vejaCabines de Segurana Biolgica
D
Dengue 179, 181, 182, 188
280
NDICE REMISSIVO
Descontaminao 22, 24, 30, 31, 33, 35, 37, 40, 43, 45, 46, 48, 49,
51, 53, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 74, 80, 81, 82,
88, 89, 108, 142, 146, 174, 188, 239, 257, 275
Difteria 109, 110
Doena da Floresta de Kyasanur 192, 193
E
Ebola 90, 192, 193, 229
Encefalite 186, 190, 193
Encefalomielite eqina 179, 185, 186, 190, 256
Envio 104, 109, 112, 126, 127, 128, 150, 152, 154, 156, 169, 181,
185, 193, 249, 250
Equipamento de segurana 16, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 29, 32,
39, 64, 66, 99, 100, 157, 178, 180, 185, 187, 191, 276
Escherichia coli 110, 203
F
Fasciola spp 135
Febre Amarela 185, 186, 187, 188, 190, 247
Febre de Pontiac 115
Febre Hemorrgica de Omsk 193
Febre maculosa das Montanhas Rochosas 151
Febre Q 15, 149, 150
Febre tifide 122
Filovrus 188, 191, 192, 193
Filtro HEPA 47, 58, 62, 63, 81, 236, 239, 240, 241, 242, 243, 244,
245, 246
Francisella tularensis 111, 112, 203
G
Giardia spp 133
H
Hantavrus 153, 189
Heliobacter pylori 112, 203
Hepatite 14, 15, 23, 24, 27, 34, 41, 70, 75, 91, 97, 100, 141, 149,
281
NDICE REMISSIVO
156, 157, 158, 247, 272

Herpesvrus 94, 162
Histoplasma 129, 256
Capsulatum 129, 130
Farciminosum 256
I
Imunoprofilaxia 97, 247
Influenza 98, 163, 223, 255
Instalaes animais 96
K
Kuru 139, 141, 175, 176, 214
L
Laboratrios clnicos 14, 23, 24, 26, 27, 38, 66, 104, 259
Laboratrio escafandro 54, 59, 60, 63, 82, 156, 160
Legionella pneumophila 115, 204
Leishmania spp 132, 133
Lepra 116, 117
Limpeza 31, 37, 38, 43, 44, 45, 46, 55, 56, 60, 61, 69, 73, 79, 87, 93,
174, 261, 265
Listeria monocytogenes 114, 204
Luvas 21, 24, 30, 31, 32, 37, 39, 44, 45, 52, 64, 68, 71, 72, 76, 78,
86, 88, 105, 107, 114, 115, 120, 124, 126, 131, 133, 135, 136,
137, 142, 143, 144, 145, 147, 148, 157, 158, 161, 170, 171,
177, 178, 181, 236, 238, 239, 240, 246, 274, 275, 276, 277
M
Machupo 192, 193
Malria 132
Marburg 15, 25, 90, 192, 229
Meningitis 121, 206
Metacercria 135, 136
Meyer e Eddie 13
Moldes 148
282
NDICE REMISSIVO
Mycobacterium 24, 116, 117, 118, 256, 271

asiaticum 117
bovis 117, 118, 119, 120, 255, 256
fortuitum 117
kansasii 117
leprae 116, 117, 118
malmoense 117
marinum 117
scrofulaceum 117
simiae 117, 159, 161, 162, 222
szulgai 117
tuberculosis 17, 24, 27, 97, 117, 118, 119, 196, 197, 205, 271
ulcerans 117
xenopi 117
Mycoplasma agalactiae 256
Mycoplasma mycoides 255
N
Naegleria 23, 134, 135
fowleri 134, 135
gruberi 23
Neisseria 120, 121
Nveis de Biossegurana (NB) 16, 17, 22, 23, 26, 29, 32, 40, 64, 65,
66, 88, 89, 90, 93, 96, 97, 98, 179, 235, 259, 276, 277
Nvel de Biossegurana 1 23, 29, 32
Nvel de Biossegurana 2 23, 24, 27, 32, 39, 99, 100, 101, 103, 104,
105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 115, 116, 117,
118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129,
130, 131, 132, 133, 135, 136, 137, 138, 140, 141, 142, 143,
149, 151, 154, 157, 158, 160, 162, 163, 164, 165, 166, 168,
169, 176, 178, 179, 180, 181, 182, 185, 187, 272
Nvel de Biossegurana 3 24, 25, 38, 39, 42, 48, 99, 100, 102, 103,
104, 105, 107, 108, 112, 116, 119, 120, 121, 122, 126, 128,
130, 140, 143, 150, 151, 158, 160, 165, 167, 170, 173, 178,
179, 181, 185, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 238
Nvel de Biossegurana 4 25, 26, 48, 49, 51, 53, 54, 55, 58, 59, 63,
160, 191, 192, 193
Nvel de Biossegurana Animal 1 66
283
NDICE REMISSIVO
Nvel de Biossegurana Animal 2 69, 101, 103, 106, 107, 109, 110,
111, 113, 115, 117, 118, 120, 122, 123, 125, 127, 128, 129,
130, 131, 151, 157, 158, 165, 166
Nvel de Biossegurana Animal 3 74, 104, 112, 150, 165
Nvel de Biossegurana Animal 4 82
Normas 2, 3, 9, 16, 17, 30, 32, 33, 34, 35, 36, 40, 41, 42, 48, 64, 67,
68, 70, 71, 72, 75, 76, 77, 82, 84, 85, 90, 93, 145, 161, 174,
249, 255, 258, 259, 260, 263, 272, 273, 274, 276
Nova droga de pesquisa 108, 247
O
Objetos cortantes 32, 35, 42, 43, 53, 68, 148, 172, 239
P
Patgenos 17, 23, 24, 27, 28, 42, 51, 96, 140, 142, 159, 162, 172,
250, 255, 256, 257, 259, 265
Patgenos animais 28, 255, 256, 259
Patgenos do sangue 159, 271, 272
Pipetagem 30, 32, 40, 104
Poliovrus 165, 166, 167, 223
Poxvrus 167, 168
Praga 255
Prticas laboratoriais 29
Precaues universais 16, 90, 95, 171
Presbytis spp 192
Primatas 68, 73, 116, 117, 118, 119, 123, 137, 151, 156, 157, 158,
161, 164, 165, 171, 172, 173, 175, 176, 192, 193, 271, 272
Prons 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 176
Projeto da instalao 19, 48
Protozorios parasitas 133, 135
Pseudomonas 105, 255
pseudomallei 105
Psittaci 106, 107
Q
Quantidades de produo 98, 99, 116, 120, 121, 122
284
NDICE REMISSIVO
R
Reaes alrgicas 137
Retrovrus 94, 170, 172, 173, 175
Rickettsia 150, 219
akari 150
australis 150
conorii 150
coxiella burnetii 218
grupo da febre maculosa 151
mooseri 150
prowazekii 150
rickettsii 151, 152, 219
Riscos laboratoriais 97, 98, 113, 145, 187
S
Salmonella 121, 122, 206
SALS 66, 178, 179, 180, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192
Schistosoma spp 135
Shiguella spp 123
Sfilis 123, 124
Smio 175
Sujeira 31
T
Taenia solium 136
Tatus 117
Tecnologias do DNA recombinante 94
Ttano 13, 109, 110
Toxinas de origem biolgica 273
Toxides 97
Toxoplasma spp 24, 133
Transporte e Transferncia de Agentes Biolgicos 249
Treponema pallidum 123
Trypanosoma 132, 256
cruzi 132, 133, 212
evansi 256
vivax 256
285
NDICE REMISSIVO
Tuberculose 14, 15, 34, 41, 100, 117, 118, 119, 258
Tularemia 14, 111, 203, 247
V
Vacinas 19, 23, 90, 97, 98, 99, 103, 104, 105, 106, 107, 111, 112,
113, 114, 115, 116, 117, 118, 120, 121, 122, 123, 124, 125,
152, 157, 158, 161, 165, 177, 178, 179, 181, 185, 188, 247,
248
Vacnia 94, 167, 168
Varola 15, 151, 168, 255, 256
Vigilncia 36, 44, 51, 54, 64, 67, 70, 72, 75, 77, 83, 86, 88, 93, 120,
152, 153, 170, 175, 273, 274
Vrus da doena de Borna 255
Vrus da Estomatite Vesicular (VSV) 177
Vrus da febre do Vale Rift 188, 255
Vrus da febre efemeral 256
Vrus da imunodeficincia humana 16, 100, 170
Vrus da raiva 169
Vrus hendra 220
Vrus Junin 92, 188, 192
Y
Yersinia pestis 125
286
equipe tcnica e editorial
Equipe tcnica e editorial

Editores da Obra Original 1999
Jonathan Y. Richmond, Ph.D. Diretor do Escritrio de Sade e Segurana
Servio de Sade Pblica
Centros de Preveno e Controle da Doena
1600 Clifton Road N. E.
Atlanta, Gergia, 30333
Robert W. McKinney, Ph.D. Diretor da Diviso de Segurana
Servio de Sade Pblica
Institutos Nacionais de Sade
Building 31, Room 1C02
Bethesda, Maryland, 20892
Editores Convidados
Centers for Prevention and Control of the Diseases (United States)
Robert B. Craveb, M.D. Chefe do Departamento de Epidemiologia
Diviso de Doena Provocada por Arbovrus
Centro Nacional de Doenas Infecciosas
Mark L. Eberhard, Ph.D. Chefe da Diviso de Biologia e Diagnsticos
Diviso de Doenas Parasitrias
Thomas Folks, Ph.D. Chefe da Diviso de HIV e Retrovirologia
Diviso de AIDS, DST e Laboratrio de Pesquisa.
Bradford Kay, Dr. P.H. Consultor Snior do Laboratrio da Diviso de Bacteriologia
e Doenas Micticas.
Richard C. Knudsen, Ph.D. Chefe do Laboratrio de Segurana
Secretaria da Sade e Segurana
Brian W. J. Mahy, Sc. D, Ph.D. Diretor da Diviso de Doenas Virais e Rickettsiais.
C.J. Peters, M.D. Chefe da Diviso de Patgenos Especiais
Margaret A.Tipple, M.D. Chefe do Programa de Atividades Externas
Secretaria da Sade e Segurana
National institute of Health (United States)
John Bennett, M.D. Chefe da Seo de Micologia do Instituto
Nacional de Alergias e Doenas Infecciosas
David Hackstadt, Ph.D Microbiologista do Rocky Mountain Laboratory.
Pgina 4 - A IV
Deborah E. Wilson, Dr. P.H. Chefe da Diviso de Segurana e Sade Ocupacional
Departamento de Segurana
Editores Individuais Convidados
Jonathan Crane, A.I.A. Arquiteto
Atlanta, GA
287
equipe tcnica e editorial
Peter J. Gerone, Sc.D. Diretor do Centro de Pesquisa Regional de Primatas de Tulane

Centro Mdico da Universidade de Tulane
Convington, Louisiana
Thomas Hamm, D.V.M, Ph.D. Consultor
Cary, NC
Debra L. Hunt, Dr. P.H. Diretor da Segurana Biolgica e Controle de Infeces
Centro Mdico da Universidade de Duke
Durham, North Carolina
Peter Jahrling, Ph.D. Cientista Senior de Pesquisa
Diviso de Avaliao da Doena
USAMRIID
Frederick, Maryland.
Thomas Kost, Ph.D. Chefe do Departamento de Cincias Moleculares
Glaxo Welcome, Inc.
Research Triangle Park, NC
Editor Tcnico
Marie J. Murray Editor Escritora
Atlanta, GA
Editores da Obra Traduzida
Organizao da 1. Edio em Portugus 2001
Coordenao Nacional de Laboratrios de Sade Pblica
Centro Nacional de Epidemiologia
Fundao Nacional de Sade
Equipe Tcnica
Ana Rosa dos Santos
Maria Adelaide Millington (Coordenadora)
Mrio Cesar Althoff
Reviso Tcnica da Traduo
Ncleo de Biossegurana/NuBio
Vice-Presidncia de Tecnologia
Fundao Oswaldo Cruz
Equipe Tcnica
Bernardo Elias Corra Soares
Francelina Helena Alvarenga Lima e Silva
Leila Macedo Oda (Coordenadora)
Sheila Sotelino da Rocha
Telma Abdalla de Oliveira Cardoso
Traduo:
Denise Bittar
Reviso Grfica:
Junio Ferreira da Silva
288
A coleo institucional do Ministrio da Sade pode ser acessada

gratuitamente na Biblioteca Virtual em Sade do Ministrio da Sade:
http://www.saude.gov.br/bvs
O contedo desta e de outras obras da Editora do Ministrio da Sade

pode ser acessado na pgina:
http://www.saude.gov.br/editora
EDITORA MS
Coordenao-Geral de Documentao e Informao/SAA/SE
MINISTRIO DA SADE
(Normalizao, reviso, editorao, impresso e acabamento)
SIA, trecho 4, lotes 540/610 CEP: 71200-040
Telefone: (61) 3233-2020 Fax: (61) 3233-9558
E-mail: editora.ms@saude.gov.br
Home page: http://www.saude.gov.br/editora
Braslia DF, junho de 2006
OS 0694/2006

Biosseguranca Laboratorios Biomedicos Microbiologia PDF

Enviado por

Dados do documento

Título original

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Biosseguranca Laboratorios Biomedicos Microbiologia PDF

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

MINISTRIO DA SADE

Secretaria de Vigilncia em Sade

3.a edio revista e atualizada

2000 Ministrio da Sade.

Departamento de Vigilncia Epidemiolgica

relao DE tabelas, FIGURAS e listas.........................................................

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ...................................................................................... 195

Figura 2b. Cabine de segurana biolgica classe II, tipo B1................243

Ao apresentar este livro, traduo autorizada do original em

Esta publicao descreve as combinaes das prticas padro

Em resposta preocupao global referente s doenas

Devido grande demanda de projetos e construes de

Laboratrios de microbiologia so, com freqncia, ambientes

laboratrio e, juntamente com a tuberculose, a tularemia, o tifo e

guro de sangue e de fluidos corporais, como descrito na recente

pelo laboratrio a funo de fornecer ou elaborar um treinamento

fornece uma proteo contra a contaminao externa de materiais

As barreiras secundrias recomendadas dependero do risco

usados de maneira segura em atividades conduzidas sobre uma

croorganismos determinados para esse nvel. Os riscos primrios

isoladas podero ser realizados de forma segura em um nvel de

2. As pessoas devero lavar as mos aps o manuseio de

Nveis de Biossegurana 2 (NB-2)

8. Todas as culturas, colnias e outros resduos devero ser

4. O pessoal do laboratrio deve estar apropriadamente

b. Devem ser usadas somente seringas com agulha fixa

viado para conserto, manuteno ou acondicionamento

3. No interior do laboratrio, os freqentadores devero

6. Os mveis do laboratrio devem suportar cargas e usos

segurana biolgica ou de outro dispositivo de conteno fsica.

ambiente de trabalho em armrios ou geladeiras utilizados somente para tal fim.

dever ou no entrar ou trabalhar dentro do laboratrio.

das. Ao contrrio, elas devero ser cuidadosamente

adequadamente treinadas e equipadas para trabalharem com material infeccioso concentrado. Os

mesmo. O ar de exausto no dever recircular em outras

outra alternativa seria jogar o ar de sada das cabines

capaz de entender as funes da conteno primria e secundria,

pertencentes ao nvel de biossegurana 4, toda a equipe

o a cada sada do laboratrio. A entrada e a sada de

zando-se gases ou vapor em uma cmara de compresso

proteo. Os laboratrios de nvel de biossegurana 4 podem se

9. As portas de acesso ao laboratrio devero possuir trancas e fechamento automtico.

diferencial e fluxo unidirecionado de modo a assegurar

a funcionar. Os locais devero ser checados novamente

trio. J a presso do ar dentro da rea da roupa dever

tradas de ar devero ser trancadas para evitar que ambas

prxima possvel da fonte a fim de minimizar a extenso

Tabela 1. Resumo dos nveis de biossegurana recomendados para

Que no so conhecidos por cau

Prticas padro de mi- No so necessrios.

Bancadas abertas com

Prtica de NB-1 mais:

NB-1 mais: autoclave

Prticas de NB-2 mais:

Agentes exticos ou perigosos

Caso sejam usados animais experimentais, a administrao da

O ideal seria que as dependncias para animais de laboratrio

sejam conhecidos por provocarem doenas em humanos adultos

recipientes rgidos, cobertos e a prova de vazamento para

mais devero abrir para dentro, fechar automaticamente e

sies da membrana mucosa e cutnea. O NBA-2 baseia-se nos

especiais (por exemplo, necessidade de imunizao e do

4. Acessrios internos, como fixao de luzes, dutos de ar

Agentes:Hendra e Vrus Semelhantes Hendra