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MICROBIOLOGIA GERAL
Pombal
2010
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MDULO I
Microbiologia Mdica
Microbiologia Aqutica
Microbiologia do Ar
Microbiologia do Leite
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ANIMALLES animais
VEGETALLES vegetais
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CONCEITO DOS CINCO REINOS outro sistema de classificao foi proposto por
Whittaker em 1969.
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Clula - Corresponde unidade fundamental do ser vivo. Uma nica clula corresponde
a uma entidade, separada das outras clulas por uma membrana, contendo uma
variedade de compostos qumicos e estruturas sub-celulares em seu interior.
De acordo com a estrutura celular os seres vivos se dividem em duas categorias:
PROCARIONTES E EUCARIONTES. Esta diviso se baseia nas diferenas na
organizao da mquina celular.
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3. Ncleo parte central da clula. Estrutura chave onde a informao gentica (DNA)
armazenada.
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5 COMPONENTES DA CLULA
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2) SAIS MINERAIS So encontrados nos seres vivos sob duas formas bsicas:
insolvel e solvel.
Insolvel acham-se imobilizados como componentes do arcabouo esqueltico.
Solvel acham-se dissolvidos na gua em forma de ons Ca ++ ; Mg++; F++; PO4- - -;
K+; Na+; Cl - - Os sais minerais desempenham um importante papel biolgico nos seres
vivos, agindo como ativadores de enzimas, como componentes estruturais de
molculas orgnicas fundamentais e participando da manuteno do equilbrio
osmtico.
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5.2.2 LIPDIOS (do grego lipo gordura) so molculas orgnicas que resultam da
associao entre cidos graxos e lcool. Insolveis em gua. Solveis em solventes
orgnicos como benzena, ter e lcool.
Funo:
So reservas alimentares
Fornecem energia
Protegem mecanicamente
So isolantes trmicos
Auxiliam a absoro de vitaminas e outras substncias lipossolveis.
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E + S ES .E + P
TEMPERATURA
Devido a sua
natureza protica a
desnaturao
enzimtica diminui
a concentrao efetiva e conseqentemente, decresce a velocidade da reao.
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Nos seres vivos existem dois grandes tipos de cidos nuclicos: cido
desoxirribonuclicos (DNA ou ADN) e o cido ribonuclico (RNA ou ARN).
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Frmulas estruturais das cinco bases nitrogenadas que podem ser encontradas nos
cidos nuclicos.
5.2.7 VITAMINAS
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Hidrossolveis
As vitaminas solveis em gua so absorvidas pelo intestino e transportadas pelo
sistema circulatrio at os tecidos em que sero utilizadas. O grau de solubilidade varia
de acordo com cada vitamina e influi no caminho que essa substncia percorre no
organismo. Quando ingeridas em excesso, as vitaminas hidrossolveis so
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armazenadas at uma quantidade limitada nos tecidos orgnicos, mas a maior parte
secretada na urina.
Lipossolveis
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AUTOTRFICO
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HETEROTRFOS
O2 + 4H+ + 4 e- 2H2O
2HNO3 + 10 H+ + 4 e- N2 + 6 H2O
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CARACTERSTICAS CULTURAIS
CARACTERSTICAS MOFOLGICAS
CARACTERSTICAS METABLICAS
CARACTERSTICAS ANTIGNAS
CARACTERISTICAS GENTICAS
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PRINCIPAIS CARACTERSTICAS:
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1 2 22 23 24 25 ..... 2n
O tempo necessrio para que a clula se divida ou seja, que a populao duplique
conhecido como TEMPO DE GERAO
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COLORAO DE GRAM
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CIANOBACTRIAS
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TIPOS DE MEIOS
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TCNICAS DE LAVAGEM
15.1.1 -TEMPERATURA
a) Calor seco
Flambagem em chama direta ( bico de Busen, lmpada
germicida
Ar quente estufas, forno de Paster
b) Calor mido
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O calor mido mais eficiente, pois tem um poder de penetrao maior que o
calor seco. O calor seco age, promovendo uma oxidao violenta de
componentes do protoplasma, enquanto que o calor mido age promovendo a
desnaturao das protenas e dissoluo de lipdios.
c) Congelamento
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MICROBIOLOGIA SANITRIA
1- SADE E SANEAMENTO
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4.0 POLUIO
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De varias maneiras a gua pode afetar a sade do homem: pela ingesto direta,
na preparao de alimentos; na higiene pessoal, na agricultura, na higiene do ambiente,
nos processos industriais ou nas atividades de lazer.
As doenas relacionadas com a gua podem ser agrupadas em duas categorias:
Compostos Orgnicos
Pesticidas
Trihalometanos
Hidrocarbonos Polinucleares aromticos
Compostos Inorgnicos
Antimnio, Arsnico (0,10 mg/L); Brio (1,0mg/L); Cdmio (0,001mg/L);
Cobalto, Chumbo (0,03mg/L); Mercrio (0,002mg/L); Molibdeno, Selnio
(0,01mg/L); Urnio.
Flor em concentraes de 2 a 4 mg/L causa mancha no esmalte dos dentes,
rigidez e dores nas articulaes e deformao do esqueleto. A concentrao
sugerida para guas de 1,0 mg/L.
Tambm podem ser consideradas doenas de origem hdrica aquelas causadas
pela carncia de alguns elementos na gua. Assim, a ausncia de iodo
responsvel pelo bcio e consequentemente pelo cretinismo. Da mesma forma a
falta de flor causa crescimento debilitado de dentes e ossos.
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Todos esses patgenos seguem a via oral-fecal, isto so eliminadas com as fezes
do doente e penetram pela boca da pessoa susceptvel que se tornar novo doente
A gua apenas a via de transmisso.
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Diarria e vmitos
Calicivirus -
Salmonella
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8.1 Coliformes
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Aplicao:
o Avaliao da contaminao fecal em guas superficiais, de esturios e marinas.
o Monitoramento de guas recreacionais como piscinas, praias e lagos. um
indicador fundamental para avaliar as condies de balneabilidade, de acordo
com os padres nacionais.
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas destinadas irrigao,
descendentao de animais, criao de ostras e mariscos.
o Avaliao da eficincia dos sistemas de tratamento de ETES
o Monitoramento da qualidade de gua para consumo humano, da rede de
distribuio, de guas minerais, poos, etc.
Gneros: Citrobacter,
Escherichia, Enterobacter e
Klebsiella
Citrobacter, Enterobacter e
Klebsiella: coliformes ambientais
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Aplicao:
o As mesmas que para os coliformes
o Confirmao contaminao de origem fecal, quando os resultados de
coliformes so duvidosos;
o Avaliao da qualidade de guas subterrneas (devido maior resistncia no
solo que os coliformes, tornam-se indicadores confiveis).
Aplicao:
o Avaliao da qualidade da gua de novas fontes de abastecimentos.
o Deteco da contaminao em sedimentos marinos e resduos industriais.
o Anlises da qualidade de guas recicladas e fontes reconhecidamente poludas.
o Avaliao da qualidade de guas minerais.
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Aplicao:
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas recreacionais, guas industriais
e corpos receptores de esgotos domsticos, hospitalares e industriais.
o Avaliao da qualidade bacteriolgica de guas potveis e minerais.
o Monitoramento da rede de abastecimento, quando esta bactria detectada em
testes prvios.
8.7 Colifagos
Aplicao
o Indicadores da qualidade sanitria de guas doces, salobras e salinas.
o Indicadores da provvel presena de enterovirus
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H uma forte ligao entre a falta dgua e altos ndice de mortalidade infantil
A gua de chuva, ao cair, quase pura; ao atingir o solo seu poder de dissolver e
carrear substncias altera suas qualidades.
Dentre o material dissolvido encontram-se as mais variadas substncias tais
como: substancias calcarias e magnesianas que tornam a gua dura; substancias
ferruginosa que do cor r sabor; partculas finas que do durbidez; e tambm
organismos patgenos resultantes das atividades humana. Em conseqncia da sua
grande atividade, a gua pura no encontrada na natureza.
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gua potvel aquela que prpria para o consumo humano, pelas suas qualidades
organolepticas, fsicas, qumicas e biolgicas. Em outras palavras aquela que no
contem germes patognicos, nem substncias qumicas alem do limite de tolerncia.
gua poluda - aquela que contem substancias que modificam suas caractersticas e a
tornam imprprias para consumo.
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COLORAO DE GRAM
PROCEDIMENTO
METODOLOGIA:
1. Lavar a lmina com gua e sabo e/ou lcool e ter. Secar a lmina e verificar se
toda gordura foi removida.
2. Colocar uma ou duas gotas do liquido contendo a suspenso na lmina. Espalhar
sobre uma rea de cerca de 1,5 cm de dimetro.
3. Deixar o esfregao secar temperatura ambiente ou em estufa.
4. Passar o esfregao 3 vezes sobre a chama do bico de Bunsen para fixao do
mesmo.
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OBSERVAES:
1. Quando o material a ser analisado for viscoso, deve-se proceder diluio
usando-se uma gota de gua destilada.
2. A fixao do esfregao faz-se necessria para manter o microrganismo
aderido lmina.
3. O Lugol uma substancia mordente empregada com o objetivo de fixar o
corante clula.
4. O lcool agente descorante que remove o corante de certas bactrias.
5. Cultivos antigos de algumas bactrias Gram positivas podem perder a
propriedade de reter o Cristal violeta, e, conseqentemente, podero se corar
com a safranina.
(a) (B)
Figura 1: Tcnica para identificar as bactrias Gram e Gram+.
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- Vibro Colrico
- Colibacilo;
- Salmonelas.
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INTRODUO
MEIOS DESIDRATADOS
A maior parte dos meios de cultura pode ser obtida na forma desidratada e neste
caso alguns aspectos devem ser obtidos:
1. ARMAZENAMENTO E CONSERVAO
Anotar em livro prprio a data da recepo dos meios de cultura e ingredientes
empregados na formulao.
Armazen-lo de acordo com as especificaes contidas no rotulo, em uma rea
de pouca umidade, afastada da luz direta do sol, das autoclaves, estufa de
secagem e qualquer outra fonte de calor.
Quando especificado no rotulo, manter sob refrigerao.
Aps o uso assegurar-se de que o frasco esta bem fechado e armazena-lo em
local prprio.
Descartar o meio caso o p no esteja fluindo facilmente ou se houver alteraes
na cor e/ou consistncia.
2. PESAGEM
Ao preparar meios e cultura deve-se usar primeiro o estoque mais velho. No se
deve abrir um novo lote de meio ate que o anterior tenha esgotado.
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3. DISSOLUO
Usar vidros bem lavados e enxaguados. No usar gua suspeita de conter cloro,
cobre ou detergentes. Usar gua deionizada ou destilada.
Antes a aplicar calor dissolver meios desidratados deve-se ler o rotulo. Alguns
meios no devem ser submetidos a temperaturas acima de 55C, (Caldo urea, Agar
urea) enquanto que outros meios desidratados devem ser aquecidos a fim de garantir
a completa dissoluo e distribuio uniforme dos ingredientes.
O aquecimento deve ser feito sob agitao continua e suave, evitando que o
mesmo se queime no fundo do frasco. A agitao do meio durante o aquecimento
deve ser feita com cautela porque alguns meios, especialmente os que contm Agar,
podem formar espuma e transbordar.
Os meios que contm Agar devem permanecer, em geral durante 5 a 10 minutos
em repouso na gua, antes de serem aquecidos, para permitir que as partculas de
Agar se reidratem adequadamente, elevando a solubilidade do Agar resultando em
gel mais uniforme.
O meio preparado deve ser distribudo em frasco ou tubo (permitindo uma
pequena folga da tampa) apropriado e levado para esterilizao.
Ao distribuir o meio em recipientes adequados, no devemos colocar mais de 2/3
da capacidade do mesmo.
ESTERILIZAO
Alguns meios no devem ser esterilizados em autoclave. Em alguns casos, os
meios devem ser esterilizados por filtrao, outros so to seletivos que no
necessitam de calor nem de filtro (Agar Salmonella-shiguella, Agar citrato
desoxicolato, Caldo de tetrationato, Caldo de selenito). A atividade seletiva destes
meios destruda durante a autoclavao.
O microbiologista dispe de numerosos filtros de diferentes tipos e poros de
tamanhos variveis. Os filtros de membrana (Millipore, Belford, Mass) so
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