METODOLOGIA - Biofotlise indireta (cianobactrias)

De acordo com Longo, Lazzarin e Marques (2008) as cianobactrias so

consideradas boas candidatas num sistema produtor de hidrognio, no qual apresentam
requisitos nutricionais simples. A partir da energia solar e da gua, elas formam
hidrognio e oxignio, sem desprendimento de CO2 . Utilizam o N2 e CO2
atmosfricos como fontes de nitrognio e carbono, gua como fonte de eltrons e poder
redutor, e a luz como fonte de energia, cujo so capazes de fixar o nitrognio ( N 2 )
em amnia. O processo se revela relativamente simples e pouco dispendioso e o seu
processo fotossinttico anlogo aos das algas e plantas.

Conforme Longo, Lazzarin e Marques (2008) nas cianobactrias podem

existir trs tipos de enzimas diretamente envolvidas no metabolismo do hidrognio. no
qual a figura 2 apresenta esse metabolismo:

1. Um complexo enzimtico designado por nitrogenase, que catalisa a reduo de

+
N2 a NH 4 com liberao obrigatria de H2 ;

2. Uma hidrogenase de assimilao que recicla o H 2 liberado pela nitrogenase;

3. Uma hidrogenase bidirecional e que pode funcionar no sentido de produo no

sentido da produo ou do consumo de H2 .

Figura 2 Enzimas diretamente envolvidas no metabolismo do hidrognio em

cianobactrias.
Fonte: Tamagini, Leito e Oliveira (2003).

A hidrogenase de assimilao tem como funo de reciclar o H2

produzido pela nitrogenase ,e j a hidrogenase bidirecional uma enzima comum a
cianobactrias fixadoras e no-fixadoras de N2 (Longo, Lazzarin e Marques, 2008).
A nitrogenase um complexo enzimtico muito sensvel ao oxignio ( O2 ), pelo que
as cianobactrias desenvolveram diferentes mecanismos e estratgias de modo a
proteger a nitrogenase, no s do O2 atmosfrico, mas tambm do O2 gerado
intracelularmente pela fotossntese. Segundo Longo, Lazzarin e Marques (2008), esses
mecanismos vo desde a fixao de nitrognio em condies exclusivamente
anaerbicas, a uma separao temporal ou mesmo espacial da fixao de nitrognio e
produo de O2 . A separao temporal (dia/noite) entre a fotossntese e a fixao de
nitrognio parece ser a estratgia geralmente adotada pelas cianobactrias sem
diferenciao celular.

A nitrogenase e a hidrogenase bidirecional, so os dois tipos de enzimas que

tem a capacidade de produzir H2 nas cianobactrias fixadoras de nitrognio. Nestes
organismos, a produo total de hidrognio o resultado da libertao de H2 pelas
nitrogenases e o seu consumo, principalmente, pela hidrogenase de assimilao.
Consequentemente necessria a produo/seleo de mutantes deficientes na atividade
de assimilao do H 2 (Longo, Lazzarin e Marques, 2008).