HORMNIOS ESTEROIDES SEXUAIS:

MTODOS DE QUANTIFICAO E SUAS

APLICAES
JANICE DE MIRANDA VASCONCELLOS VILELA
REPRODUO ANIMAL - 2017
INTRODUO
Derivados do
colestrol

Ligam-se a Hormnios
receptores Lipossolveis
intracelulares esteroides

Ligados a
protenas
HORMNIOS ESTEROIDES SEXUAIS
27 C

Sintetizados a partir do
20 C
colesterol

21 C
Ciclo
pentanoperidrofenantreno

HAFEZ & HAFEZ, 2004.

19 C
Controle: eixo hipotalmico-
hipofisrio

18 C
ESTRGENOS

Estrgenos
Funces Ruminantes
ativos
Induzem comportamento de cio
Estradiol
Anabolismo protico
Estimulam contraes uterinas
Estrona
Caractersticas sexuais
femininas
Regresso do corpo
lteo
Estriol Crescimento e desenvolvimento
das glndulas mamrias
PROGESTERONA

Secreo: corpo
lteo, adrenais,
placenta

SENGER, 2007.
ANDRGENOS
Funes
Espermatognese
Desenvolvimento e secreo
das glndulas acessrias
Caractersticas sexuais
secundrias masculinas
Comportamento sexual (libido)
Agressividade
HAFEZ & HAFEZ, 2007.
DESENVOLVIMENTO DAS TCNICAS

1960: Yallow e Benson

Marcao de protenas in vivo com 131I
Inibio por competio

1971: Engvall e Perlmann

Determinao quantitativa de IgG
TCNICAS

Imunoensaios
Plasma
Dependem da

AMOSTRAS
capacidade de Soro
anticorpos especficos
Urina
reconhecerem
hormnios Fezes
especficos
IMUNOENSAIOS
Radioiodao (RIA)

Enzima (EIA)
Reao imunolgica
in vitro entre
antgeno (Ag) e
anticorpo (Ac)
Fluorescncia

Quimioluminescncia
RADIOIMUNOENSAIO (RIA)

Competio pelos
stios de ligao

Ac primrio
Y

Ag marcado em
YYY
Ag que queremos mensurar
concentrao conhecida (sem marcao)
RADIOIMUNOENSAIO (RIA)

Y
Complexos de alto
Adio de Ac peso molecular
secundrio Ag livres

YYY Y
RADIOIMUNOENSAIO (RIA)

Centrfuga Separao das fraes

RADIOIMUNOENSAIO (RIA)

NAUS et al., 1977.

Medio da radiao na amostra Curva padro
IMUNOENSAIO ENZIMTICO (EIA)

Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA)

ELISA

Direto Indireto Captura Competio

Deteco de Deteco de Pesquisa Ac Reaes

Ag Ac utilizando Ac cruzadas
ELISA DIRETO

Deteco de antgenos

https://youtu.be/fw8wfRCoBmA
ELISA DOSAGEM HORMONAL
Espectrofotometria
RIA X EIA

RIA EIA
Mais preciso Menos sensvel

Mais sensvel
Menos estvel
Maior experincia acumulada
Mais barato
Resduos txicos

Caro No gera resduos txicos

IMPORTNCIA

Compreenso da regulao fisiolgica

Acompanhamento de funes dos rgos

sexuais

Diagnstico de desordens endcrinas

HAFEZ & HAFEZ, 2004.
REGULAO
REGULAO

SENGER, 2007.
REGULAO

SENGER, 2007.
APLICAO
Caracterizao de ciclos
Diagnstico de gestao estrais e perodos
gestacionais normais

Invesogao de
Determinao do
anormalidades dos ciclos
momento do parto
reprodutivos

Eficiencia de mtodos
Deteco de ovulao
contraceptivos

Correlaes entre
Sazonalidade reprodutiva reproduo e
comportamento social
DIAGNSTICO DE GESTAO

Deteco de substncias no sangue, na urina ou no leite

Teste de prenhez Princpio Estgio de prenhez Espcie

Fator precoce de Fator imunossupressivo

Pr-implantao Bovina, ovina, suna
gestao resultante da fertilizao

Progesterona Atividade lutenica Implantao Todas

eCG/hCG Funo fetoplacentria Ps-implantao Todas

Substncias associadas Identifica Ag especficos da

Ps-implantao Bovina
gestao prenhez
HAFEZ & HAFEZ, 2004.
ACOMPANHAMENTO DO CICLO REPRODUTIVO
Extrao de hormnios das fezes ou urina
Tcnica no invasiva estudos endocrinolgicos de animais
selvagens

Perodo
Durao do pr-
Puberdade Cio ciclo ovulatrio e
ovariano ocorrncia
da ovulao
ACOMPANHAMENTO DO CICLO REPRODUTIVO
Acompanhamento dos transplantes de tecido ovariano felino
fresco por at 63 dias

Leonel et al. (no publicado)

BIBLIOGRAFIA
GUYTON, A. C. & HALL, J. E. Tratado de Fisiologia Mdica, 12a
edio. Rio de Janeiro, Elsevier, 2006
MOLINA, P. E. Fisiologia Endcrina, 4a Edio. Porto Alegre,
AMGH, 2014.
NAUS, A. J., KUPPENS, P. S., BORST, A. Calculation of
radioimmunoassay standard curves. Clinical Chemistry Sep
1977, 23 (9) 1624-1627.
PEREIRA, R. J. G. Mtodos no-invasivos para anlises
hormonais aplicadas aos estudos de ecologia e etologia. R.
Bras. Zootec., v.36, suplemento especial, p.71-76, 2007.
SENGER, P.L. Pathways to Pregnancy and Parturition. 2nd
Edition. Current Conceptions Inc., 1997.