 Ágar Baird-Parker;

Composição:

Digestão pancreática de caseína 10,0 g

Extrato de levedura 1,0 g
Extrato de carne 5,0 g
Piruvato se sódio 10,0 g
L-glicina 12,0 g
Cloreto de lítio 5,0 g
Ágar 12 a 22 g
Água deionizada 1000 mL

Preparação:
 A D I C I O N AR OS I N GR E DI E NT E S O U O M E I O C OM P L E T AM E NT E
D E S I D R AT AD O E M Á GU A E DI S S O LV E R S O B AQ UE CI M E NT O
(seguir as instruções do fabricante);
 A J U S T AR O P H S E N E CE S S ÁR I O P AR A Q UE , AP ÓS A
E S T E R I LI Z AÇ Ã O , E S T E J A 7,2.±.0,2 a 25°C;
 Distribuir volumes de 400 mL ou 200 mL em frascos;
 Utilizar frascos com capacidade superior a 500 ml. Esterilizar em
autoclave a 121 °C ± 3°C por 15 minutos;
 Caso o meio não seja utilizado imediatamente após a sua
confecção, o mesmo deve ser armazenado, sob refrigeração, a 5
± 3 °C;
 Para usar o meio, deve-se fundi-lo para se tornar líquido
novamente e manter a 45°C ± 1 °C usando estufa;

Preparaçãoplaca deÁgar Baird-Parker:

 Deve-se adicionar assepticamente 50mL da emulsão de ovo e 10

mL da solução de telurito de potássio 1,0 %para cada litro de
meio;
 Verter aproximadamente 15 mL do ágar em placas de petri
estéreis e deixar solidificar, caso não sejam usadas
imediatamente, as placas devem ser armazenadas a 5 ºC ± 2 ºC,
protegidas da luz, por até 1 mês;
 Caldo cérebro-coração (BHI);

Composição:
 Digestão enzimática de tecido animal 10,0 g
Infusão de cérebro de bezerro desidratada 12,5 g
Infusão de coração de bovino 5,0 g
Glicose 2,0 g
Cloreto sódio 5,0 g
Fosfato de hidrogênio dissódico anidro (Na2HPO4) 2,5 g
Água deionizada 1000 mL

Preparação:
 A D I C I O N AR OS I N GR E DI E NT E S O U O M E I O C OM P LE T AM E NT E
D E S I D R AT AD O E M Á GU A E DI S S O LV E R S O B AQ UE CI M E NT O
(seguindo as instruções do fabricante);
 A J U S T E O P H S E F OR NE CE S S Á RI O P AR A Q UE AP Ó S A
E S T E R I LI Z AÇ Ã O 7,24 ± 0,2 em 25ºC;
 Transferir o meio de cultura de 5mL a 10mL para tubos de ensaio
e então levar a autoclave a 121ºC por 15 minutos.

 Plasma de coelho com EDTA;

 Utilizar plasma desidratado de coelho disponível comercialmente
seguindo as instruções do fabricante.

 Solução salina peptonada 0,1%;

Composição:

Cloreto de sódio 8,5 g

Peptona 1,0 g
Água deionizada 1000 mL

Preparação:
 Dissolver os componentes em água, sob aquecimento;
 Transferir 225 mL para recipiente adequado;
 Se necessário, ajustar o pH para que atinja 7,2 ± 0,2 em 25ºC;
 Autoclavar a 121ºC por 15 minutos.

OBS: Todos os reagentes preparados devem ser registrados no formulário

FORM-LAB-MB-4.A.01 (Controle de Preparo de Reagentes).

 Ágar Coliforme Cromogênico (CCA):

Composição:
Enzymaticdigestofcasein 1,0 g
Yeastextract 2,0 g
Sodiumchloride 5,0 g
Sodiumdihydrogenphosphate, 2H2O 2,2 g
Disodiumhydrogenphosphate 2,7 g
Sodiumpyruvate 1,0 g
Sorbitol 1,0 g
Tryptophane 1,0 g
Tergitol-7 0,15 g
6-chloro-3-indoxyl β-D-galactopyranoside 0,2 g
5-bromo-4-chloro-3-indoxyl- β-D-glucuronicacid 0,1 g
cyclohexamineammoniumsalt, monohydrate
IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) 0,1 g
Agar 9- 18 g
Água deionizada 1000 mL

Preparação:
 A D I C I O N AR OS I N GR E DI E NT E S O U O M E I O C OM P L E T AM E NT E
D E S I D R AT AD O E M Á GU A E DI S S O LV E R S O B AQ UE CI M E NT O
(seguir as instruções do fabricante);
 Se necessário ajustar o pH para que atinja 6,8 ±0,2 em 25ºC e
ferver o meio com agitação;
 Não autoclavar, não superaquecer;
 Verter o ágar em placas de petri estéreis e deixar solidificar, caso
não sejam usadas imediatamente, as placas devem ser
armazenadas a 5ºC ±2 ºC, protegidas da luz, por até 1 mês;
 Antes do uso, as placas devem estar secas.

 Reagente Oxidase ou Bactident®-oxidase:

Composição:

N,N-dimethyl-p-phenyldiamine-2-HCL 0,1 g
Água 10 mL

OBS: Este reagente não é estável. Deve ser preparado em pequenas porções
cada vez que for necessário e mantido ao abrigo de luz.

 Agar TSA (Tryptone Soy Agar):

Composição:
Tryptone 15,0 g
Soyapeptone 5,0 g
Sodiumchloride 5,0 g
Agar 15 – 25,0 g
Água deionizada 1000 mL

Preparação:
 Dissolver a base desidratada em água (seguindo as instruções do
fabricante);
 Se necessário ajustar o pH para que atinja 7,2 ±0,2 em 25ºC;
 Verter o ágar em placas de petri estéreis e deixar solidificar, caso
não sejam usadas imediatamente, as placas devem ser
armazenadas a 5ºC ± 2 ºC, protegidas da luz, por até 1 mês;
 Antes do uso, as placas devem estar secas.

OBS:Todos os reagentes preparados devem ser registrados no formulário

FORM-LAB-MB-4.A.01 (Controle de Preparo de Reagentes).