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MIB3 - Fermentacao Lactica
MIB3 - Fermentacao Lactica
Fermentação Láctica
As bactérias do ácido láctico são bastonetes (ex. Lactobacillus sp.) ou cocos (ex.
Streptococcus sp.) Gram positivos anaeróbios aerotolerantes. Como estes microrganismos
não possuem citocromos, não efectuam fosforilação oxidativa, e obtém energia unicamente
através de fosforilação ao nível de substrato. A designação de bactérias do ácido láctico
advém do facto destes microrganismos fermentarem com produção de lactato como produto
final ou como produto maioritário através de vias homo- ou heterofermentativas,
respectivamente.
A maioria das bactérias do ácido láctico utiliza unicamente açúcares como fonte de energia,
e por isso podemos isolá-los de locais onde existam hidratos de carbono em elevadas
concentrações. Outra particularidade dos organismos deste grupo metabólico, é o facto de
apresentarem capacidades biossintéticas limitadas, e deste modo necessitarem de meios de
cultura complexos contendo vitaminas, aminoácidos e bases nitrogenadas.
Pretende-se com este trabalho medir a taxa de formação de ácido láctico a partir de
glucose por uma cultura mista das bactérias do ácido láctico isoladas de iogurte
comercial. A produção de ácido é seguida por titulação periódica da suspensão de
células com uma solução alcalina.
PARTE EXPERIMENTAL
1. Agite um iogurte natural (ex. Clesa), e com uma pipeta de vidro estéril, adicione 10 mL a
150 mL de meio líquido MRS, num matraz de 250 mL;
C. Ensaio:
9. Adicione 5 gotas do indicador púrpura de bromocresol à suspensão do copo (nº 1). Retire
20 ml para outro copo (nº 2).
COPO 1: titule com solução NaOH 0,01 M até a cor ficar ligeiramente violeta. Faça a
leitura do volume da bureta. Este copo irá servir de controlo para o ponto de viragem
do indicador pretendido.
- COPO 2: titule com NaOH 0,01 M até a cor ser semelhante à obtida no copo 1 (o
volume usado deve ser aproximado do que usou para o copo 1). Faça a leitura do
volume da bureta ou ajuste o volume novamente ao zero.