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células...”
FRITJOF CAPRA
1. INTRODUÇÃO
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melhoramento genético, crescimento, fisiologia vegetal e outras características
previamente estabelecidos.
Sistemática.
particular de seus pós quer pela própria natureza física, de suas características
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Do ponto de vista ecológico e econômico, a aplicação mais importante
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esteróides, lactonas sesquiterpênicas); terpenóides com grupo carbonila;
proteínas.
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(1969); VERMEER & PETERSON (1979); KARRFALT & KREITNER (1980); KELSEY &
SHAFIZADEH (1980); WERKER & FAHN (1981; 1982); ASCENSÃO & PAIS (1982);
ASCENSÃO & PAIS (1985); CAPPELLETTI et al (1986); ASCENSÃO & PAIS (1987);
DUKE & PAUL (1993); DUKE et al (1994); WERKER et al (1994); AFOLAYAN & MEYER
(1995); CORSI & NENCIONI (1995); FERREIRA & JANICK (1995); servindo como
reserva de terpenos.
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Por compostos fenólicos subentendem-se em histoquímica os fenóis
CUNHA, 2000).
folhas, no tegumento das sementes (COSTA & PROENÇA DA CUNHA, 2000), nos
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heterosídeos senevólicos localizam-se em células isolados de precipitado
2000).
MENDES et al, 2005; SANTOS et al, 2002; LORENZI & MATOS, 2002). Não foram
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caracterização fitoquímica e morfo-anatômicos com porções do vegetal de
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2. OBJETIVOS
D. mollis e D. gardneriana.
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3. MATERIAIS E MÉTODOS
Claros (Minas Gerais) foram transportadas até Viçosa, onde foram plantadas
foram feitos a partir de micrótomo LPJ, de mesa, modelo Rolemberg & Bhering,
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Tigre e/ ou pinça metálica e colocados em placas de vidro (Petri, Ø 5cm) com
gardneriana Tull.
controles.
(esquema 1.A), Sulfato azul do Nilo (CAIN, 1947) – Lípidios ácidos e neutros
(esquema 1.A); Tetróxido de ósmio (GANTER & JOLLÉS, 1969; 1970) – Lípidios
JOLLÉS, 1969) – Ácidos graxos (esquema 1.A); Reagente de NADI (DAVID &
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1969) – Terpenóides com grupos carbonila (esquema 1.B.IV); Cloreto férrico,
Vanilina clorídrica (MACE & HOWELL, 1974) – Taninos (esquema 1.C.III); Cloreto
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Esquema 1: Histoquímica vegetal (Ascensão, 2003)
A. Detecção de lipídios
Cortes histológicos (material fresco)
Placa de vidro ou vidro de relógio
Vermelho de Sudan (60 minutos, temperatura ambiente)
Lavar rapidamente em água
Positivo Negativo
VERDE ESCURO
LIPÍDIOS NEUTROS LIPÍDIOS ÁCIDOS
ÁCIDOS GORDOS
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B. Detecção de Terpenóides (I, II, III, IV e V)
ÓLEOS RESINAS
ESSENCIAIS
II. Esteróides
Cortes histológicos (material fresco)
Tricloreto de antimônio em Ácido perclórico 60%.
À quente ou à temperatura ambiente.
Montar diretamente a lâmina.
Observar depois de 3 a 10 min. em luz ultravioleta.
VERMELHO-ALARANJADO (VIS) AMARELO PÚRPURA (UV)
ESTERÓIDES
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III. Lactonas sesquiterpênicas
Cortes histológicos (material fresco)
Ácido sulfúrico P.A.
Montar a lâminas e observar imediatamente.
VERMELHO ACASTANHADO
LACTONAS SESQUITERPÊNICAS
TERPENÓIDES E CETOESTERÓIDES
V. Borracha
BORRACHA
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C. Detecção de Compostos fenólicos (I, II, III e IV)
I. Fenóis
• Cortes histológicos (material fresco) (VIS)
Cloreto férrico a 10% (15 – 30 min.).
Lavar em água.
VERDE INTENSO – PÚRPURA – AZUL – NEGRO
FENÓIS
FENÓIS
II. Flavonóides
AMARELO-ESVERDEADO
FLAVONÓIDES
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III. Taninos
TANINOS
LIGNINAS
D. Detecção de Alcalóides
ALCALÓIDES
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E. Detecção de Glucídios (I, II, III, IV, V, VI e VII)
I. Polissacarídeos gerais
AMIDO E POLISSACÁRIDEOS
II. Amido
AMIDO
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III. β-1,3 e β-1,4 Glucanos
Cortes histológicos (material fresco) (UV)
Calcofluor White MR2 0,01% (5 – 10 min.).
Lavagem rápida em água.
AZUL PÁLIDO
IV. Calose
Cortes histológicos (material fresco) (luz Azul)
Azul de Anilina 0,05% (5 min.).
Lavagem em água.
FLUORESCÊNCIA AMARELA PÁLIDO
CALOSE
V. Pectinas
PECTINAS
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VI. Mucopolissacarídeos Ácidos
Cortes histológicos (material fresco) (VIS)
Azul de Alcian a 1% em Ácido acético 3% (pH = 2,5; 30 min.).
Lavagem em água (5 min.).
AZUL TURQUESA
MUCOPOLISSACARÍDEOS ÁCIDOS
VII. Mucilagens
Cortes histológicos (material fresco) (VIS)
Ácido tânico 5% (10 min.).
Lavagem em água.
Cloreto férrico 3% (1min.).
Lavar rapidamente em água.
NEGRO
MUCILAGENS
F. Detecção de proteínas
Cortes histológicos (material fresco) (VIS)
Azul brilhante de Comassie (C. Blue) 0,25% em Ácido acético 7%.
Temperatura ambiente (10min.).
Lavar rapidamente em água.
AZUL
PROTEÍNAS
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4. RESULTADOS E DISCUSSÃO
4.1. RESULTADOS
parenquimatosas.
positivas nos tratamentos TR-DM e TR-DG (quadro 1) (figuras 2A, 2B, 2C, 2D,
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(quadro 1), no entanto pelo excesso de compostos fenólicos, a diferenciação
epidérmicas em TR-DM (figuras 6A, 6B, 6C), e em TR-DG apenas nas células
(quadro 1).
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Figura 1: Reação de detecção de lipídios em D. mollis (TR-DM 1A e 1B) e
D.gardneriana (TR-DG 1C e 1D) (Sudan IV).
EPAD
GOT
EPAB
GOT
TRIC
TRIC
B NM
1.A: D. mollis (Sudan): detalhe das papilas e gotículas de lipídios (GOT) nas
células da epiderme adaxial e abaxial (EPAD E EPAB), e nos tecidos
parenquimáticos. B. Nervura mediana (NM) de D. mollis, detalhe dos tricomas
(TRIC).
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EPAD
GOT
GOT
EPAB
C
NM
87
Figura 2: Reação de detecção de Óleos essenciais e resinas pelo Reagente de
NADI nos tratamentos TR-DM e TR-DG (2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F, 2G).
EPAD
EPAB
A
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EPAD
PP
X F
ID
TRIC
B
EPAB
89
CRS
CRS
90
TRIC
91
G
EPAD
PP
FV
X
F
D
NM
ID
92
EPAD
PP
FV
F
NM
INC
D
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Figura 5: Reação de detecção de Ligninas por Floroglucinol nos tratamentos
TR-DM e de TR-DG.
VL
A.
5.A D. mollis Detalhe dos vasos lenhosos (VL) da nervura mediana. 5.B
Nervura mediana de D. mollis.
94
C
VL
EP
BFV
6.A. D. mollis. Detalhe da bainha dos feixes vasculares (BFV), das paredes das
células epidérmicas (EP).
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B ID
6.B. D. mollis. Nervura mediana sob luz polarizada, detalhe dos idioblastos (ID).
BFV
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Quadro 1: Resultados de análise histoquímica de Dimorphandra mollis (TR-
DM) e Dimorphandra gardneriana (TR-DG).
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4.2. DISCUSSÃO
1975).
espécies, uma vez que, esses açúcares são prontamente utilizados pelo
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bibliografia consultada (BUCKERIDGE et al, 2000, 1995; CHAVES et al, 2001;
PEDRIALI et al, 2005). Também não foi detectado amido (Reação de Lugol) que
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acréscimo de temperatura, o que deveria ocorrer em Dimorphandra mollis e D.
gardneriana.
folíolos das folhas jovens. CALDAS et al (1997) constataram que o ajuste dos
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foliares (FLEURAT-LESSARD, 1988; MOYSSET & SIMON, 1991). TORIYAMA (1953)
quanto o fluxo lateral de íons potássio (K+) e de água (SATTER et al, 1970;
MORSE & SATTER, 1979; CAMPBELL & GARBER, 1980; FLEURAT-LESSARD, 1981;
foliares.
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A Análise histoquímica dos tratamentos TR-DM e TR-DG revelou, que a
direta entre as células, mas indireta na coesão das células que contém lignina.
DM e TR-DG, pode ser explicada pelo seu papel defensivo, pois estas são
e taninos (NORIS & KOGAN, 1980). Segundo SILVA, ALQUINI & CAVALLET (2005) o
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conseqüentemente, pode acarretar alteração na eficiência fotossintética (AKIN &
SILVA, ALQUINI & CAVALLET (2005) relatam que quanto mais espessa a cutícula e
bovinos, que pode ser causada pela relação cutícula/ alto teor de compostos
fenólicos (rutina) (CHAVES et al, 2001; FARIA et al, 2005; POGGIANI, 1974).
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5. CONCLUSÕES
4).
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