Bioquímica Humana

Bioquímica Humana

Cinética Enzimática
Ms. Prof. Fabiano Sousa

Cabo, 26 de outubro de 2021

 Bioquímica Humana

Cinética Enzimática
Estudo da velocidade da reação
enzimática e como ela se altera em
função de diferentes parâmetros
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Fatores que afetam a atividade de uma
enzima.

pH, Temperatura e Substrato

A concentração do substrato é o parâmetro mais

importante para comparar a atividade e o tipo de
reação das enzimas.
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: pH

q pH à potencial hidrogeniônico se refere a [H+].

q O pH pode influenciar a atividade de uma enzima através de diversas
maneiras diferentes;
q O pH pode levar à desnaturação proteica;
q O pH pode alterar o padrão de cargas de um determinado sitio ativo ou
catalítico,
q O pH pode alterar a conformação geral da proteína.
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: pH
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: pH
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: pH
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: temperatura

qO aumento da temperatura aumenta a taxa de reação enzimática devido

ao aumento de energia cinética das moléculas participantes da reação ;

qA temperatura pode interferir nas integrações que mantem as estruturas

secundarias e terciarias (ligações de hidrogênio e interações hidrofóbicas)

qA variação de temperatura pode levar à desnaturação proteica.

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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: temperatura
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: temperatura
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: temperatura
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: concentração do substrato

qConcentrações baixas de substrato ocorre com o aumento linear entre a

velocidade (V0) e o substrato [S];

qCom o aumento da [S] à V0 aumenta cada vez menos, até atingir um patamar
de (Vmax);
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: concentração do substrato
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: concentração do substrato
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Fatores que afetam a atividade de uma enzima: concentração do substrato
q Concentrações baixas de substrato ocorre com o
aumento linear entre a velocidade (V0) e o substrato
[S];

q Com o aumento da [S] à V0 aumenta cada vez

menos, até atingir um patamar de (Vmax);
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Equação de Michealis-Menten

𝑉"#$ [𝑆]
𝑉! =
𝐾" + [𝑆]
Constante de Michealis
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Equação de Michealis-Menten
q Km e a Vmax varia de enzima para enzima caracterizando-as e pode variar
também com o substrato;

RuBisCo
Hexoquinases Glicoses - Km – 0,05µM
q Km CO2 – 9µM
Frutoses – Km – 1,5µM
q Km O2 - 350µM

q Km não é uma medida de afinidade da enzima pelo substrato mas sim, a

concentração do substrato onde se obtém a metade da velocidade
máxima da reação.
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Equação de Michealis-Menten
Km à é a [S] onde se obtém metade da velocidade máxima da reação

𝑉"#$ [𝑆]
𝑉! =
𝐾" + [𝑆]
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Transformações da equação de Michaelis-Menten

Equação de Lineweaver-Burk ou duplo-reciproco

q Inversão dos lados da equação de Michaelis-Menten;

q Separação dos componentes do lado direito;

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Equação de Lineweaver-Burk ou duplo-reciproco
𝑉"#$ [𝑆] 1 𝐾" + [𝑆]
𝑉! = inverter =
𝐾" + [𝑆] 𝑉! 𝑉"#$ [𝑆]

Separar os 1 𝐾" [𝑆]

componentes = +
𝑉! 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$ [𝑆]
e resolver

1 𝐾" 1 1
= +
𝑉! 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$
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Equação de Lineweaver-Burk ou duplo-reciproco
q Com essa transformação matemática passa-
se a trabalhar com uma reta e não com uma
hipérbole, mais fácil;

q Varias informações podem ser obtidas como

esse gráfico;
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Equação de Lineweaver-Burk ou duplo-reciproco
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1 𝐾" 1
= +
𝑉! 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$

X=0

1 𝐾" 1 1 1 1 1 1
= + à =0+ à =
𝑉! 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$ 𝑉! 𝑉"#$ 𝑉! 𝑉"#$

y=0

1 𝐾" 1 1 𝐾" 1 1
= 𝑥 + à 0= 𝑥 +
𝑉! 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$ 𝑉"#$ [𝑆] 𝑉"#$

−1
1 𝐾" 1 1 𝑉"#$ 1 −1 𝑉"#$ 1 1
− = 𝑥 à = à = 𝑥 à =−
𝑉"#$ 𝑉"#$ [𝑆] [𝑆] 𝐾" [𝑆] 𝑉%&' 𝐾" [𝑆] 𝐾"
𝑉"#$
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Enzimas reguladoras
q Regulam a velocidade das reações metabólicas;

q São reguladas por determinados sinais.

• Enzimas alostéricas;
• Enzimas reguladas por modificações covalentes reversíveis;
• Enzimas reguladas por proteólise.
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Enzimas alostéricas
q Possui sítios reguladores para a ligação do
modulador especifico;

q Maiores e mais complexas que as não

alostéricas (mais que uma cadeia
polipepitídica);

q Sofrem modificações conformacionais em

resposta à ligação do modulador (positivo
ou negativo)
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Enzimas reguladoras por modificações – covalentes
reversíveis
q Diferentes grupos podem se ligar à molécula enzimátia e regular sua
atividade;

q Grupos ligados covalentemente e removidos pela ação de outras

enzimas;
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Regulação da atividade enzimática
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Controle da [E]

Dogma Central da Biologia Molecular

Foi postulado por Francis Crick em 1958. Ele explica como ocorre o
fluxo de informações do código genético. Esse modelo mostra
principalmente que uma sequência de um ácido nucleico pode
formar uma proteína, entretanto o contrário não é possível.
Segundo esse dogma, o fluxo da informação genética segue o
seguinte sentido: DNA → RNA→ PROTEÍNAS.
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Exemplos de moduladores
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Exemplos