ANEXO 2 : PO-001

1 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

01/09/2009 02

Assunto: Unidade
Centro de Tecnologia SENAI-RJ
Ambiental
INSTRUÇÃO TÉCNICA Código Página
IT-069 1/12
1 – OBJETIVO

Determinação de Formaldeído no ar através de método colorimétrico com leituras em

espectrofotômetro com absorção molecular na faixa do visível.

2 – CAMPO DE APLICAÇÃO

Aplica-se a amostras de higiene industrial.

3 – RESPONSABILIDADE

A aplicação desta IT é de responsabilidade do Laboratório de Espectrofotometria de

Ultravioleta / Visível.

4 – DEFINIÇÕES / SIGLAS

4.1 – SIGLAS

 P.A.: Para análise

 IT: Instrução Técnica
 PO: Procedimento Operacional
 NR: Norma Regulamentadora

4.2 – DEFINIÇÕES

 Solução TISAB: Solução Tampão de Atividade e Ionização Total

 Curva analítica: Relação matemática entre duas grandezas númericas (ex.:
concentração e absorvância)
 do analito em questão
 Água Milli-Q (Tipo I): Água filtrada, deionizada, desgaseificada e esterilizada própria
para análises químicas espectrofotométrica e cromatográfica
 ANEXO 2 : PO-001

2 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

01/09/2009 02

Assunto: Unidade
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Ambiental
INSTRUÇÃO TÉCNICA Código Página
IT-069 2/12
 Padrão de verificação: Solução-amostra utilizada para testar o nível de recuperação de
um método analítico
 Validação: é a confirmação por exame e fornecimento de evidência objetiva de que os
requisitos específicos para um determinado uso pretendido são atendidos (NBR ISO/IEC
17025)
 Limite de Detecção (L.D.): É a menor quantidade de analito presente na amostra, que pode
ser detectada, mas não necessariamente quantificada, independente do ruído.
 Limite de Quantificação (L.Q.): É a menor quantidade do analito presente na amostra, que
pode ser determinada com um nível aceitável de precisão e exatidão.

5 – REFERÊNCIAS

 PO-001: Elaboração e Controle da Documentação de laboratório

 IT-019: Guia de amostragem de agentes químicos em ar
 IT-020: Guia de amostragem de vapores orgânicos
 IT-023: Descarte de amostras e reagentes
 IT-025: Limpeza de materiais do Laboratório de Toxicologia e Higiene Ocupacional
 IT-026: Operação do espectrofotômetro de Visível da marca Thermo Electron Corporation,
modelo Aquamate
 IT-032: Operação do espectrofotômetro de Visível da marca GBC, modelo UV-VIS 918
 Portaria nº 3214 de 22 de dezembro de 1994, NR-15, anexo 11, Manuais de Legislação:
Segurança e Medicina do Trabalho
 PO-027: Garantia da Qualidade de Ensaios

6 – DIRETRIZES / METODOLOGIA

6.1 – Princípio do Método

Em baixa concentração os vapores de formaldeído são irritantes para as mucosas. Em

concentração mais elevada, uma irritação das vias respiratórias superiores se produz acompanhada
de tosse e sensação de constrição torácica. A inalação de doses maciças do formaldeído acarreta a
necrose das mucosas atingidas.
 ANEXO 2 : PO-001

3 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

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Assunto: Unidade
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INSTRUÇÃO TÉCNICA Código Página
IT-069 3/12
A intoxicação crônica é igualmente conhecida com manifestação de catarro nasal, faringite,
laringite crônica, bem como bronquite e asma.
A quantificação é realizada mediante complexação do formaldeído com ácido cromotrópico e
ácido sulfúrico concentrado sob aquecimento e posterior leitura em espectrofotômetro de absorção
molecular a 580,0 nm.

6.2 – Aspectos de Segurança

Usar luvas, jaleco de mangas compridas, sapatos fechados e óculos de segurança.

6.3 – Amostragem e Preservação das amostras

6.3.1 – Amostragem

Proceder a amostragem de Formaldeído de acordo com as IT-019 e IT-020.

6.3.2 – Preservação das amostras

Proceder a preservação das amostras de acordo com as IT-019 e IT-020.

6.4 – Limpeza de materiais

Todo o material deverá estar limpo de acordo com a IT-025.

6.5 – Materiais e Equipamentos

6.5.1 – Materiais

 Monitor passivo de Formaldeído 3M 3721;

 Mini-impinger capacidade de 30 mL;
 Tubo de ensaio capacidade 24 mL;
 ANEXO 2 : PO-001

4 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

01/09/2009 02

Assunto: Unidade
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INSTRUÇÃO TÉCNICA Código Página
IT-069 4/12
 Estante para tubo de ensaio;
 Bandeja metálica ou plástica
 Balão volumétrico de 1 L;
 Balão volumétrico de 100 mL;
 Béquer de 50 mL.

6.5.2 – Equipamentos

 Balança analítica com precisão ao 0,01mg;

 Espectrofotômetro de UV-Visível
 Banho-maria com controle de temperatura digital.
 Pipetador de volume variável de 100 µL a 1000 µL;

6.6 – Reagentes e Preparo de Soluções

6.6.1 – Reagentes

 Ácido Cromotrópico P.A.

 Ácido Sulfúrico P.A.
 Formaldeído P.A. – 37%
 Bissulfito de Sódio P.A.

6.6.2 – Preparo de Soluções

 Solução de bissulfito de sódio 1 %m/v: Dissolver 10 g de bissulfito de sódio P.A., e

avolumar a 1 L em balão volumétrico com água Milli-Q. Estocar esta solução a temperatura
ambiente.

 Solução estoque de Formaldeído 0,01 µg/µL: Adicionar 250 µL de formaldeído para um

balão volumétrico de 100 mL e avolumar com solução de bissulfito de sódio 1 %m/v. Transferir
1,00 mL desta solução para um balão volumétrico de 100 mL e avolumar com NaHSO 3 1
%m/v. Estocar esta solução sob refrigeração a 4 °C. A solução é estável por 3 meses.

 Solução de ácido cromotrópico: Dissolver 1,0 g de ácido cromotrópico P.A., e avolumar a

100 mL em balão volumétrico com água Mill-Q. Estocar esta solução sob refrigeração à 4 °C.

6.7 – Dados de Validação

 ANEXO 2 : PO-001

5 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

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Segue método normatizado NIOSH 3500

6.8 – Interferências

a) Materiais orgânicos oxidáveis dão interferência positiva.

b) O fenol produz interferência positiva
c) Etanol ou outro álcool de maior peso molecular, olefinas,
hidrocarbonetos aromáticos, ciclohexanona, outros aldeídos produzem pequena
interferência negativa.

6.9 – Procedimentos Analíticos

6.9.1 – Preparo dos coletores

a) Preparo do monitor passivo: Realizar a montagem do monitor de acordo com as instruções

fornecidas pelo fabricante e anexadas ao produto.

b) Preparo do mini-impinger: Preencher o mini-impinger com 20 mL da solução de bissulfito

de sódio 1 %m/v, vedar e transportá-lo com cuidado para não entornar o líquido.

6.9.2 – Análise dos monitores

6.9.2.1 - Preparo da curva de calibração para monitor passivo

a) Transferir, segundo a tabela 1, volumes da solução de formaldeído de 0,01 µg/µL para tubos de
ensaio de grande (20 mL de capacidade). No branco adicionar 2,00 mL da solução de bissulfito
de sódio 1% m/v e processar junto aos padrões.
b) Adicionar, segundo a tabela 1, volumes da solução de bissulfito de sódio 1% m/v.

Tabela 1: Preparo dos padrões para análise de monitores

Código do Volume do Vol. bissulfito
Massa dos padrões (µg)
padrões padrão (mL) 1% m/v (mL)
Br 0,00 2,00 -
P1 0,10 1,90 1,0
P2 0,30 1,70 3,0
P3 0,50 1,50 5,0
 ANEXO 2 : PO-001

6 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

01/09/2009 02

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INSTRUÇÃO TÉCNICA Código Página
IT-069 6/12
P4
P5 1,50 0,50 15,0

c) Adicionar 0,1 mL da solução de ácido cromotrópico em todos os tubos.

d) Tampar e homogeneizar de ensaio em agitador de tubo (vórtex).
e) Adicionar 6,0 mL de ácido sulfúrico concentrado (adição lenta e com pipeta de embolo externo)
em banho de gelo.
f) Agitar no vórtex por 1 minuto.
g) Submeter a aquecimento em banho-maria a 95 ºC por 15 minutos.
h) Esperar esfriar e transferir para as cubetas de análise de 10 mm de caminho ótico.
i) Ler as soluções em espectrofotômetro, usando como célula de referência o branco de reagentes.
Não utilizar o sistema de sucção auto-sipper.

6.9.2.2 - Preparo das amostras para monitor

a) Preparar, segundo montagem do fabricante, o bóton para receber 3,00 mL de água Milli-Q.
b) Agitar intensamente o bóton durante 10 minutos.
c) Escorrer os 3,00 mL para um béquer.
d) Retirar uma alíquota de 1,00 mL e transferir a um tubo de ensaio de grande (20 mL).
e) Adicionar 1 mL de solução de bissulfito de sódio 1 %m/v.
f) Adicionar 0,1 mL da solução de ácido cromotrópico nos tubos.
g) Homogeneizar os tubos de ensaio em vórtex.
h) Adicionar 6,0 mL de ácido sulfúrico concentrado (adição lenta e com pipeta de embolo externo)
em banho de gelo.
i) Agitar no vórtex por 1 minuto.
j) Submeter a aquecimento em banho-maria a 95ºC por 15 minutos.
k) Esperar esfriar e transferir para as cubetas de análise de 10 mm de caminho ótico.
l) Ler a amostra em espectrofotômetro, usando como célula de referência o branco de reagentes.
Não utilizar o sistema de sucção auto-sipper.

6.9.3 – Análise dos mini-impingers

6.9.3.1 - Preparo curva de calibração para mini-impinger:

 ANEXO 2 : PO-001

7 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

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IT-069 7/12

a) Transferir alíquotas, segundo a tabela 2, da solução de formaldeído de 0,01 µg/µL para tubos de
ensaio grande (20 mL). No branco adicionar 4,00 mL da solução de bissulfito de sódio e
processar junto aos padrões.
b) Adicionar, segundo a tabela 2, solução de bissulfito de sódio 1%.

Tabela 2 : Preparo dos padrões para análise de mini-impinger

Código Volume do Padrão (mL) Vol. bissulfito 1% m/v (mL) Massa Formol (µg)
Br 0,00 4,00 -
P1 0,25 3,75 2,50
P2 0,50 3,50 5,00
P3 1,00 3,00 10,0
P4 2,00 2,00 20,0
P5 3,00 1,00 30,0
P6 4,00 00,0 40,0

c) Adicionar em seguida 0,1 mL de solução de ácido cromotrópico em todos os tubos.

d) Adicionar 6,0 mL de ácido sulfúrico concentrado (adição lenta e com pipeta de embolo externo)
em banho de gelo.
e) Tampar e homogeneizar em vórtex.
f) Submeter a banho-maria à 95 ºC por 15 minutos.
g) Esperar esfriar e transferir para cubetas de análise de 10 mm de caminho ótico.
h) Ler a amostra em espectrofotômetro, usando como célula de referência o branco de reagentes.
Não utilizar o sistema de sucção auto-sipper.

6.9.3.2 – Preparo das amostras para mini-impinger

a) Transferir 4,00 mL da amostra para um tubo grande (20mL).

b) Adicionar 0,1 mL de ácido cromotrópico.
c) Acrescentar 6,0mL de ácido sulfúrico concentrado em banho de gelo.
d) Tampar e homogeneizar em vórtex.
 ANEXO 2 : PO-001

8 DETERMINAÇÃO DE FORMALDEÍDO NO AR Vigência Revisão

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Assunto: Unidade
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IT-069 8/12
e) Submeter o sistema a banho-maria a 95ºC por 15 minutos.
i) Esperar esfriar e transferir para cubetas de análise de 10 mm de caminho ótico.
j) Ler a amostra em espectrofotômetro, usando como célula de referência o branco de reagentes.
Não utilizar o sistema de sucção auto-sipper.

6.9.4 – Condições do equipamento

6.9.4.1 – Espectrofotômetro marca GBC modelo UV / VIS 918

 Application Directory: Quantify N° of repeats: 3

Number of sample replicates: 1
 Current Method: Formaldeído Number of standard replicates: 1
QC Checking: No
 Method parameters:
Method Name: Formaldeído  Calibration Parameters:
Method Description: Formaldeído Calibration Mode: Linear
Measurement Mode: Abs Conc. Units: µg
Measurement Type: Single Point
Wavelength: 580.0 nm  Accessory Parameters:
Measurement Time: 0.50 s Initialise Accessory
 Run Parameters:
 Measurement parameters: Number of Samples: 100
 6.9.4.2 - Espectrofotômetro marca Thermo Electron modelo Aquamate

6.9.4.2.1 – Condições utilizando o display do equipamento

 Quant: Ajuste curva: Linear

ID: Formaldeído Mede Stds: Sim
Compr. de onda: 580.0 nm Cronômetro(s): 0
Larg. de faixa: 2.0 nm UV CALC: 0
Integração: 1 s
Standards: 6 (de acordo com a tabela  Acessórios:
1) Sipper:
Repetições: 1 Sipper: Off
Unidades: µg

6.9.4.2.2 – Condições utilizando o software Visionlite

 Method: Cromo Hexavalente Unit: IU

 Calibration:  Spectrophotometer:
Curve type: Linear with intercept Integration time: 0,5 s
Measurement waveleght: 580 nm
Output digits: 2 , 3  Standard data: (Conforme Tabela 1)

6.10 – Controle de Qualidade

6.10.1 – Caso não seja construída uma curva de calibração no momento do ensaio, preparar
01 padrão de verificação: (P2 a 5 µg), (P5 a 30 µg) para checar a aceitabilidade da curva.
Estes padrões devem ser preparados alternando-se o uso a cada lote de amostras.
Registrar os valores obtidos no formulário de Registro FR-048. Os limites mínimo e máximo
de concentração, em mg/L, aceitáveis para os padrões de verificação são, respectivamente,
85 e 115 % do valor nominal.

6.10.2 – Duplicata: Realizar a análise das amostras em duplicata e obter a média para os
valores de concentração.

6.11 – Ações Corretivas

Não se aplicam.

6.12 – Expressão dos Resultados

Obter a quantidade de µg de formaldeído através da curva de calibração. Verificar a

quantidade em µg de formaldeído contida no boton ou impinger, levando-se em conta a diluição
realizada da alíquota para 2,00mL de bissulfito de sódio no bóton. Este resultado chamaremos de
W.

C = W*24,45*1000/61,4*30

C= resultado em ppm.

6.13 – Descarte de amostras / reagentes

O descarte de todo o rejeito desta análise deverá ser realizado em sistema de despejo de
capelas. Seguir orientação da IT-023.

6.14 – Bibliografia

 Manual de fichas toxicológicas – Programa Nacional de Capacitação técnico-científica.

 NIOSH – Manual of Analytical Methods, National Institute of Occupational 4 a edição – Method
3500.
 Determination of Formaldehyde vapor in air, using 3M 3721 Formaldehyde Monitors -
3M Company – Occupational Health and Environmental Safety Division. September,1997.
7 – REGISTROS

Observação: todo o registro de análise no laboratório deve ser feito no FR-048.

EQUI-064 - Para abrir os arquivos eletrônicos emitidos pelo espectrofotômetro GBC modelo
918 deve-se acessar o seguinte diretório localizado no computador conectado ao equipamento:
(C):\ Gbcuv \ Quantify \ (nome do arquivo).txt ou .rep. Todos os arquivos da análise de Formaldeído
gerados por este equipamento deverão ser armazenados definitivamente no seguinte diretório: \\
Shared em ‘Srvcta01’ (G): \ Laboratórios \ Laboratório Instrumental-LAI \ Áreas \ UV-Vis \ (ano) \
Formaldeído \ (nome do arquivo).txt ou .rep.

Para que o lançamento dos resultados seja feito automaticamente no aplicativo Cali-Lims, é
necessário que o arquivo original do EQUI-064 receba uma simbologia única relativa a cada
amostra, da seguinte forma: R (nº. do recebimento sem o ano)-ID;a e R (nº. do recebimento
sem o ano)-ID;b. Por exemplo: Para o recebimento 1/06-1 a identificação seria R1-1;a e R1-1;b.
Sendo a identificação a referente primeira replicata e a b referente a segunda replicata.
Exemplo de cadastro de amostra:
Sample 1
R1-1;a Wt. 1.000 Vol. 1.000
0.913 0.915 0.913
Sample Conc 2.020 µg %RSD 0.125

Sample 2
R1-1;b Wt. 1.000 Vol. 1.000
0.093 0.095 0.093
Sample Conc 0.200 µg %RSD 0.125
Para que o Cali Lims reconheça os dados referente às amostras, é necessário copiá-los
para o driver de comunicação que se encontra no diretório: \\ Shared em ‘Srvcta01’ (G): \
Laboratórios \ Laboratório Instrumental-LAI \ Áreas \ UV-Vis \ Driver Comunicação \ GBC 918.rep.

EQUI-065 – Para abrir os arquivos gerados pelo espectrofotômetro Thermo Electron modelo
Aquamate deve-se consultar o diretório “Biblioteca” situado na tela “Home” do display do
equipamento ou, no caso do uso do software Visionlite, no diretório: \\Shared em ‘Srvcta01’ (G):\ \
Laboratórios \ Laboratório Instrumental-LAI \ Áreas \ UV-Vis \ Aquamate \ (ano) \ Formaldeído \
(nome do arquivo).rqa. onde são armazenados definitivamente.
Os dados relativos a curva de calibração são salvos em: \\Shared em ‘Srvcta01’ (G):\ \
Laboratórios \ Laboratório Instrumental-LAI \ Áreas \ UV-Vis \ Aquamate \ (ano) \ Formaldeído \
Curva \ (nome do arquivo).mqa.

Observação: O equipamento EQUI-065 não possui driver de comunicação para transporte

automático de dados para o aplicativo Cali Lims. Sendo assim, o lançamento dos resultados
emitidos por este equipamento deve ser realizado manualmente.

O lançamento e a revisão dos resultados inseridos no Cali-Lims devem ser realizados por
pessoas distintas e habilitadas para tal ou, se lançado e revisado pelo mesmo analista, deve
ocorrer em momentos diferentes e cada amostra deve ter o seu resultado conferido
individualmente com o arquivo original gerado pelo espectrofotômetro. O FR-048 deve receber uma
rubrica de aprovação pelo responsável ou substituto, sendo esta etapa realizada por pessoas
diferentes ou em momentos distintos.
O número, o ano e a revisão do formulário de registro original bem como o número e a
revisão desta IT devem ser cadastrados no campo “Observações da preparação” do Cali-Lims.
As informações relativas ao preparo das soluções de análise devem ser cadastradas no Caderno
de Soluções UV-(Seqüência), FR-089 (número)/(ano).

8 – HISTÓRICO DE REVISÕES

Número da Data da Resumo das alterações

Revisão revisão

00 03/06/2005 Documento original

Em todo o documento – Substituiu-se “água deionizada” por

“água Milli-Q”. Substituiu-se a unidade “%” por “% m/v”.
Item 4.2 – Item novo.
Item 5 – Foi inserida a referência “PO-027”.
01 13/09/2007
Item 6.6.2 – Foram acrescentadas a forma de estocagem de
todas as soluções descritas.
Item 6.9.4.2 – Item novo.
Item 6.10.1 – Foi relatado o uso do padrão verificação com o
intuito de aprovar uma curva de calibração anterior ao invés de
servir para ensaio de precisão.
01 13/09/2007 Item 6.10.2 – Item novo
Item 7 – Foi alterado o diretório de armazenamento definitivo dos
arquivos emitidos pelos espectrofotômetros. Foi referenciada a
forma de lançamento dos dados das amostras bem como o
registro do FR de preparo de soluções.
No cabeçalho, o campo “Unidade” foi modificado de Centro de
02 01/09/2009 Tecnologia Ambiental do Sistema FIRJAN para Centro de
Tecnologia SENAI-RJ Ambiental.

9 – ANEXOS

9.1 – Anexo 1: FR-048 – Formulário de Registro da Determinação de formaldeído não ar

Elaborado em 01/09/2009 Verificado em 01/09/2009 Aprovado em 01/09/2009

_______________________ _______________________ ______________________

Reinaldo de Sousa da Silva Carolina Maria Machado de
(Técnico em Serviços Renata Guimarães dos Santos Carvalho Andrade
Tecnológicos) (Técnico em Serviços Tecnológicos) (Especialista em Serv.
Tecnológicos)
 ANEXO 1: IT-069
14
FR-048 rev.02
Formulário de Registro Vigência: 13/09/2007
Página
Determinação de Formaldeído no ar N.º / Ano
____/____ 1/1

Método: IT-069 rev.01 Data da Análise: Analista/Responsável:

Registro de soluções de análise Obs. n° EQUI de Transferência
Nº DO CADERNO: Nº / ANO DO FR-089:
SOLUÇÃO PADRÃO DE FORMALDEÍDO EQUI-252 EQUI-211
0,01 Μg/ΜL UV-_________ ______ / ______ EQUI-384 EQUI-_______

Nº DO CADERNO: Nº / ANO DO FR-089:

SOLUÇÃO DE BISSULFITO DE SÓDIO EQUI-213 EQUI-211
1% m/V UV-_________ ______ / ______ EQUI-226 EQUI-_______

Nº DO CADERNO: Nº / ANO DO FR-089:

SOLUÇÃO DE ÁCIDO CROMOTRÓPICO EQUI-252 EQUI-307
1% m/V UV-_________ ______ / ______ EQUI-237 EQUI-_______

Registro de Reagente Obs. n° EQUI de Transferência

MARCA: LOTE: NÃO SE APLICA
ÁCIDO SULFÚRICO P.A.
__________________

Registros de análise
DATA DA CURVA DE CALIBRAÇÃO:
BANHO-MARIA: EQUI-471 EQUI-090 EQUI-_______
PIPETA DAS AMOSTRAS: EQUI-213 EQUI-211 EQUI-226 EQUI-_______

Registro do padrão de verificação

USO DE PADRÃO
DE VERIFICAÇÃO:
Obs. CONCENTRAÇÕES DOS PADRÕES DE VERIFICAÇÃO
Não Utilizado Valor obtido (5 µg): __________ µg Limite inferior: 4,25 Μg Limite Superior: 5,75 Μg
Utilizado Valor obtido (30 µg): __________ µg Limite inferior: 25,5 µg Limite Superior: 34,5 µg

Uso do Espectrofotômetro EQUI-064 Uso do Espectrofotômetro EQUI-065

Não Utilizado Utilizado Não Utilizado Utilizado
Localização Eletrônica dos Dados das Localização Eletrônica de Dados Localização Eletrônica da Curva de
Amostras e Curva de Calibração: das Amostras: Calibração:
SHARED EM ‘SRVCTA01’ (G):\ SHARED EM ‘SRVCTA01’ (G): \ SHARED EM ‘SRVCTA01’ (G): \
LABORATÓRIOS\LABORATÓRIO LABORATÓRIOS\ LABORATÓRIO LABORATÓRIOS\ LABORATÓRIO
INSTRUMENTAL-LAI\ÁREAS\UV-VISÍVEL\ INSTRUMENTAL-LAI\ÁREAS\UV- INSTRUMENTAL-LAI\ÁREAS\UV-VISÍVEL\
GBC 918\20______(ANO)\FORMALDEÍDO\ VISÍVEL\AQUAMATE\ AQUAMATE\ 20______(ANO)\
20______(ANO)\FORMALDEÍDO\ FORMALDEÍDO\CURVA\
____________________.txt _____________.rqa _____________.mqa
Registros das amostras
n° Recebimento-ID Código Interno n° Recebimento-ID n° Recebimento-ID Código Interno

Código das Obs. Descrição das Observações

Aprovado por: Data da Aprovação: