Terapia gentica ou gnica

Terapia gentica usando um Adenovrus como vetor. Um novo gene inserido no adenovrus, que usado para introduzir o DNA modificado na clula humana. Se o Terapia gentica ou Geneterapia a insero de genes nas clulas e tecidos de um indivduo para o tratamento de uma doena; em especial, doenas hereditrias. A terapia gentica visa a suplementar com alelos funcionais aqueles que so defeituosos. Embora a tecnologia ainda esteja em seu estgio inicial, tem sido usada com algum sucesso.
Histrico

Na dcada de 80, avanos na biologia molecular j permitiam que os genes humanas fossem seqenciados e clonados. Cientistas que procuravam por um mtodo para facilitar a produo de protenas tais como insulina pesquisaram a introduo de genes humanos no DNA de bactrias. As bactrias geneticamente modificadas passaram, ento, a produzir a protena correspondente, que podia ser recolhida e injetada em pessoas que no a podiam produzir naturalmente. Em 14 de setembro de 1990 pesquisadores do NationalInstitutesof Health , nos Estados Unidos, realizaram a primeira terapia gentica autorizada em AshantiDeSilva, de 4 anos de idade. Nascida com uma rara doena gentica chamada Imunodeficincia Combinada Gra ve, ela no tinha um sistema imunolgico saudvel, e era vulnervel a todos os germes com que tivesse contato. Crianas com essa doena geralmente desenvolvem muitas infeces e raramente sobrevivem idade adulta. Na terapia gentica realizada em Ashanti, os mdicos recolheram glbulos brancos do corpo da criana, e cultivaram as clulas em laboratrio. No segundo momento, inseriram o gene que faltava nas clulas e reintroduziram os glbulos brancos geneticamente modificados na corrente sangnea da paciente. Exames de laboratrio mostraram que a terapia fortaleceu o sistema imunolgico de Ashanti; ela parou de contrair resfriados recorrentes e pde voltar a freqentar a escola. Esse procedimento no a curou; os leuccitos geneticamente s funcionaram por poucos meses, e o processo teve de ser freqentemente repetido. (VII, Thompson, 1993). Embora essa explicao simplificada de terapia gentica possa soar como um final feliz, apenas um captulo inicial otimista numa longa histria. O percurso at a primeira terapia gentica autorizada foi conturbado e cheio de controvrsia. A biologia da terapia gentica em humanos muito complexa, e h ainda muitas tcnicas que precisam ser desenvol vidas e doenas que precisam ser entendidas de maneira mais completa antes que a terapia gentica possa ser usada apropriadamente. Cientistas tomaram a iniciativa de tentar introduzir genes diretamente nas clulas humanas, focando doenas causadas por defe itos em genes simples,

tais como fibrose cstica, hemofilia e distrofia muscular. Entretanto, esse objetivo foi muito mais difcil de se alcanar que modificar bactrias simples, principalmente por causa dos problemas envolvidos no transporte de grandes sees de DNA e no seu posicionamento no lugar certo do genoma.
Processo bsico

Na maioria dos estudos a respeito de terapia gentica, um gene "normal" inserido no genoma para substituir um gene "anmalo" causador de doena. Uma molcula transportadora, chamada vetor, prec isa ser usada para se enviar o gene teraputico para as clulas -alvo do paciente. Atualmente, o vetor mais comum um vrus que foi geneticamente alterado para transportar DNA humano normal. Vrus evoluram de forma a encapsular e transportar seus genes para clulas humanas, causando doenas. Cientistas tentaram aproveitar essa capacidade e manipular o genoma dos vrus, removendo os genes causadores de doena e inserindo genes teraputicos. Clulas-alvo, tais como clulas do fgado ou dos pulmes do paciente, so infectadas com o vetor. O vetor, ento, descarrega seu material gentico, contendo o gene teraputico humano, na clula -alvo. A produo de protenas funcionais pelos genes teraputicos restauram as clulas -alvo a um estado de normalidade.
Tipos de terapia gentica

Teoricamente possvel transformar tanto clulas somticas (a maior parte de clulas do corpo) quanto clulas germinativas (espermatozides, vulos, e suas clulas-tronco precursoras). Todas as terapias genticas realizadas at agora em humanos foram dirigidas a clulas somticas, enquanto a engenharia de clulas germinativas continua altamente controversa. Para que os genes introduzidos sejam transmitidos normalmente para a descendncia, necessrio no apenas que sejam inseridos na clula, mas tambm que sejam incorporadas aos cromossomos por recombinao gentica. A terapia gentica com genes somticos pode ser dividida em duas grandes categorias: exvivo (em que as clulas so modificadas fora do corpo e, ento, transplantadas novamente para o paciente) e in vivo (em que os genes so modificados nas clulas ainda dentro do corpo). Abordagens in vivo baseadas em recombinao so especialmente incomuns .
Mtodos da terapia gnica

Existe uma variedade de mtodos diferentes para substituir ou reparar os genes focados na terapica gentica.
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Um gene normal pode ser inserido num local no especfico no genoma para substituir um gene problemtico. Essa abordagem a mais comum. Um gene anmalo pode ser trocado por um gene normal por meio da recombinao.

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O gene anmalo pode ser reparado por meio de mutao reversa seletiva, que devolve ao gene suas funes normais. A regulao (o grau em que um gene est ativo ou inativo) de um gene em particular pode ser alterada.

gene. Se essa clula hospedeira se dividir posteriormente, todas as suas descendentes contero os novos genes. Um dos problemas da terapia gnica usando retrovrus que a enzima integrase pode inserir o material gentico do vrus em qualquer posio arbitrria no genoma do hospedeiro. Se acontece do material gentico ser inserido no meio de um dos genes originais da c lula hospedeira, estes genes sero interrompidos (mutagnese por insero). Se acontece do gene ser um que regula a diviso celular, uma diviso celular incontrolvel (isto , cncer) pode ocorrer. Este problema comeou recentemente a ser tratado pela utilizao de nucleases de dedo de zinco [1] ou pela incluso de certas seqncias tal como a regio de controle do lcus da beta -globina[6] para direcionar o stio de int egrao para stios cromossmicos especficos. Testes de terapia gentica para tratar a imudeficincia combinada grave (IDCG) foram interrompidos ou restritos nos EUA quando foi relatada leucemia em trs de onze pacientes tratados no teste de terapia gentica de IDCG ligada a X de Terapia Francesa (XIDCG). Dez pacientes de XIDCG tratados na Inglaterra no apresentaram leucemia at hoje e tiveram sucesso similar na reconstituio imune. Teste de terapia gnica para tratar IDCG devida a deficincia da enzima Adenosina Desaminase (ADA) continuam com relativo sucesso nos EUA, Itlia e Japo.
Adenovrus

Adenovrus so vrus que possuem seu material gentico na forma de um DNA dupla-hlice. Eles causam infeces respiratrias, intestinais e oculares em humanos. Quando infectam uma clula hospedeira, esses vrus introduzem sua molcula de DNA. O material gentico dos adenovrus no so incorporad os ao material gentico da clula hospedeira. A molcula de DNA fica livre no ncleo da clula hospedeira, e as instrues nessa molcula de DNA extra so transcritas como qualquer outro gene. A nica diferena que esses genes extras no so replicados quando a clula est prestes a se dividir, assim os descendentes daquela clula no tero o gene extra. Como resultado, no tratamento com o adenovrus, ser necessria uma re -administrao em uma populao celular crescente. Este sistema tem demonstrado rea l promessa no tratamento do cncer e de fato o primeiro produto de terapia gentica a ser licenciado o adenovrus.
Vrus Adeno-associados

Pertencem famlia Parvoviridae, so vrus pequenos com um genoma de DNA de fita simples. Um vrus adeno-associado selvagem pode inserir seu material gentico em um local especfico no cromossomo 19 (humano). Porm a verso recombinante deste vrus, que no contm qualquer gene viral,

apenas o gene teraputico, no se integra ao genoma hospede iro. Ao contrrio, o genoma viral recombinante fusiona suas extremidades por recombinao ITR (sigla em ingls para Repeties Terminais Invertidas) para formar uma verso circular, epissomal que referida como responsvel pela expresso gnica de longa durao. H poucas desvantagens em usar vrus adeno-associados, incluindo a pequena quantidade de DNA que podem carregar (baixa capacidade) e a dificuldade em produz -los. Este tipo de vrus est sendo usado, entretanto, porque no patognico (a maioria das pessoas porta este vrus inofensivo). Diferente dos adenovrus, a maioria das pessoas tratadas com vrus adeno-associados no far uma resposta imune contra o vrus ou contra as clulas que foram tratadas de