Microscópio)ó*co))

Microscópio)
! )Instrumento)básico)para)o)estudo)da)célula)
! )Duas)categorias:)
)ó*co)de)luz)ou)fotónico)–)u*liza)luz)cons*tuída)por)) ) ) )
)fotões;)possuem)lentes)ó*cas)
)eletrónico)–)u*liza)um)feixe)de)eletrões)
)
Unidades(de(medida(u+lizadas(em(microscopia(
(1µm(=(1063mm(=(1066m(
(1nm(=(1063µm(=(1066mm((
(1Å(=(1061nm(=(1064µm(=(1067mm(

2
 1mm(=(1.000(μm(=(1.000.000(nm(
microscopia)electrónica)de)transmissão)
microscopia)óp*ca)
visão)humana)

1)cm) 1)mm) 100)μm) 10)μm) 1)μm) 100)nm) 10)nm) 1)nm) 0,1)nm)

proteínas) átomos)
células) células) vírus) pequenas)
eucariotas) procariotas) moléculas)

Limites(de(observação:(
Visão)humana)≈)0,1)mm))
Microscópio)ó*co)≈)0,2)μm)
Microscópio)eletrónico)≈)1)nm(
3

Componentes)do)microscópio)
ó*co)composto)
! (Sistema(mecânico( Ocular)

!  ) suporta) os) elementos) Tubo)ou)canhão)

do)sistema)ó*co)
)
Braço)ou)
! )Sistema(óp+co( Revólver) coluna)
Obje*va)
! )três)sistemas)de)lentes)
Pla*na)
! )oculares) Condensador)e) Parafuso)
diafragma) macrométrico)
! )obje*vas)
Parafuso)
! )condensador) Sistema)de) micrométrico)
iluminação)
Base)ou)pé)

! )fonte)de)luz)

4
Funcionamento)básico)
! )Um)feixe)de)luz)é)captado)pela)
lente)do)condensador)

! )Do)condensador)sai)um)cone)de)
luz)uniforme)que)vai)incidir)sobre)o)
objecto)e)vai)ser)captado)pela)
obje*va)

! )A)obje*va)projeta)uma)imagem)
aumentada)no)plano)focal)da)
ocular)

! )A)ocular)amplia)a)imagem)
projetada)pela)obje*va)

! )O)olho)capta)uma)imagem)virtual,)
ampliada)e)inver*da)do)objeto)

Especificações)
das)lentes) Abertura)
Ampliação)
obje*vas) numérica)
Espessura)da)lamela)
Comprimento)do) (mm))a)u*lizar)
tubo)

Abertura)
Ampliação) .
numérica)
Espessura)da)lamela)(mm))a)
u*lizar)

6
 Oculares)

Ampliam)a)imagem)
ob*da)na)obje*va))
)
Geralmente)têm)uma)
ampliação)entre)8x)a)
25x)

Condensador)
!  Concentra)a)luz)proveniente)da)fonte)luminosa)no)espécime)

!  Geralmente)possuem)uma)abertura,)o)diafragma,)que)é)ajustável)e))controla)o)
diâmetro)do)feixe)de)luz)que)sai)do)condensador)

!  Alguns)microscópios)podem)ter)um)diafragma)entre)a)fonte)luminosa)e)o)
condensador)(diafragma)de)campo))

8
 Ampliação)–)aumento)aparente)do)tamanho)do)objecto)
)
Ampliação(total(=(ampliação(da(obje+va(x(ampliação(da(ocular(

Poder(de(resolução(ou(Resolução)–)capacidade)de)fornecer)
imagens)dis*ntas)de)dois)pontos)adjacentes,)ou)seja)permite)ao)
observador)visualizar)dois)objetos)juntos)como)dois)objetos)individuais)
e)não)como)um)só.))

Limite(de(resolução)b)distância)linear)mínima)entre)dois)pontos)
adjacentes)dos)quais)o)microscópio)dá)imagens)dis*ntas.))

Limite(de(resolução(=(0,61λ(/(AN)

λ(–(comprimento)de)onda(
NA(–(abertura)numérica)

Obje*va)
NA)–)Abertura)numérica)da)lente)obje*va)

AN = η sen α)

η(–(índice)de)refracção)do)meio)
existente)entre)a)preparação)e)a)lente)
obje*va)
sen(α(–(seno)do)semibângulo)de)
α)
abertura)da)obje*va) Cone)de)luz) Semibângulo)
do)cone)de)luz)
Meio Índice de refracção que)entra)na)
Ar 1,00 obje*va)
Água 1,33
Glicerol 1,47 Preparação)
Óleo de imersão 1,51
Fonte)de)luz)
Vidro 1,52

Quanto)maior)a)abertura)numérica)maior)a)resolução)do)microscópio) 10
 Tipos)de)microscópios)ó*cos)
Microscópio)de)campo)claro)
usado)para)observar)espécimes)corados)ou)naturalmente)
pigmentados)como)organismos)fotossinté*cos)

Algas)verdes) Hemácias) Intes*no)delgado)

11

Microscópio)de)campo)escuro)
É)colocado)um)disco)opaco)por)baixo)da)lente)do)condensador)de)modo)que)a)luz)é)
projetada)obliquamente)sobre)a)preparação.))
)
Quando)os)raios)a*ngem)um)obstáculo)são)desviados)e)penetram)na)objec*va)
formando)uma)imagem)com)contorno)brilhante.)Os)raios)que)não)são)desviados)não)
penetram)na)objec*va.)
))
O)objecto)aparece)iluminado)e)brilhante)sobre)um)fundo)escuro)
u*lizado)na)observação)de)microorganismos)não)corados)

Leveduras)

12
 Microscópio)de)contraste)de)fase)
Permite)a)observação)de)espécimes)não)contrastados)*rando)par*do)dos)
diferentes)índices)de)refração)da)luz)apresentados)pelas)diferentes)estruturas)
do)material)a)observar)
É)par*cularmente)ú*l)para)observar)células)e)tecidos)vivos)

Condensador)associado)ao)
microscópio)ó*co)

13

Existem)anéis)na)
obje*va)(disco)de)fase))
e)no)condensador,)de)
forma)que)a)luz)é)
dividida)em)feixes.)As)
ondas)sofrem)um)
atraso)ao)passar)pelas)
diferentes)estruturas)
resultando)em)
diferenças)no)brilho)
com)que)as)estruturas)
surgem.)

14
Gera)imagens)com)diferentes)graus)de)obscuridade)ou)luminosidade)

Ameba) Células)do)epitélio)bucal)

15

Microscópio)de)fluorescência)

A)fonte)de)luz)é)uma)lâmpada)de)mercúrio)
que)produz)uma)grande)intensidade)de)luz)
ultravioleta.)Através)do)uso)de)vários)filtros)é)
possível)direccionar)luz)com)um)
comprimento)de)onda)de)365)nm)em)
direcção)ao)espécime.)
Algumas)substâncias)(fluorocromos))após)
serem)excitadas)com)radiação)de)baixo)
comprimento)de)onda)emitem)radiação)de)
maior)comprimento)de)onda))b)fluorescência.)
São)usados)corantes)fluorescentes)que)se)
associam)ao)material)biológico)permi*ndo)a)
sua)visualização,)
)

16
Espelho)dicróico)–)reflecte)a)luz)ultravioleta)até)ao)espécime)
A)luz))fluorescente)passa)pelo)espelho)dicróico)e)por)um)filtro)de)barreira)

17