Antisoro N para Haptoglobina Humana

N AS HAPT

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Sistema Atellica® NEPH 630 / Sistema BN II / Sistema BN ProSpec®

Campo de Aplicação
O N AS HAPT é um reagente de diagnóstico in vitro para a determinação quantitativa, normalizada
segundo a IFCC, da haptoglobina para auxiliar no diagnóstico de hemólise e anemia hemolítica em
doentes em risco ou com sinais de hemólise no soro e plasma com heparina e EDTA humanos através
de sistemas de imunonefelometria Siemens Healthineers automatizados.

Resumo e Explicação
A haptoglobina é uma α2‑glicoproteína que é sintetizada sobretudo pelo fígado. Tem propriedades
antioxidantes e imunomodulatórias, atuando como coletor ao ligar de forma estável a hemoglobina
que circula livremente depois de libertada pela hemólise ou regeneração normal de eritrócitos. Os
complexos resultantes são prontamente eliminados pelo sistema reticuloendotelial, prevenindo a
geração de espécies reativas de oxigénio e lesões renais. Após a endocitose, o complexo haptoglobina-
hemoglobina é decomposto pelos lisossomas, o que resulta na depleção de haptoglobina. A
haptoglobina não é uma proteína homogénea, pois existem dois alelos comuns, Hp1 e Hp2, resultando
em três variantes possíveis (1-1, 2-2 e 1-2) com polímeros de pesos moleculares diferentes, cuja
respetiva barreira contra a tensão oxidativa apresenta comportamentos diferentes1.
A haptoglobina sofre uma diminuição significativa durante a hemólise, tanto nas formas
intravasculares, devido ao aumento da Hb plasmática livre e à alteração do equilíbrio de haptoglobina
livre/complexada, como nos casos extravasculares, onde pode estar presente lise intravascular reduzida
dos eritrócitos estruturalmente alterados que escaparam à eliminação reticuloendotelial. A depleção de
haptoglobina no plasma ocorre antes do declínio da hemopexina, outra proteína de ligação ao heme,
envolvida na remoção da hemoglobina livre da circulação. Observa-se o aumento da hemólise e
anemia hemolítica na doença falciforme, talassemia, anemia autoimune, queimaduras, circulação
extracorporal e grandes transfusões de sangue2,3.
A depleção de haptoglobina representa um marcador fiável para o diagnóstico instantâneo de
destruição acelerada dos eritrócitos, independentemente do local de hemólise. Os níveis de
haptoglobina não são influenciados pela hemólise in vitro2.
Podem observar-se níveis reduzidos de haptoglobina noutras condições além da hemólise, tais como
insuficiência hepática, desnutrição e hipohaptoglobinemia congénita. Por outro lado, a haptoglobina é
uma proteína de fase aguda e aumenta em doenças inflamatórias, fumadores e na síndrome nefrótica.

Princípio do método
As proteínas contidas nos fluidos corporais humanos formam complexos imunitários numa reacção
imunoquímica com anticorpos específicos. Estes complexos difractam um feixe de luz que atravessa a
amostra. A intensidade da luz difractada é proporcional à concentração da proteína relevante na
amostra. O resultado é avaliado através de comparação com um padrão de concentração conhecida.

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Antisoro N para Haptoglobina Humana

Reagentes
Reagente Descrição Conservação Estabilidade

Antisoro N para Líquido pronto a utilizar contendo: 2–8 °C 2–8 °C:

Haptoglobina • soro animal produzido mediante Pode ser utilizado até ao depois de aberto,
Humana imunização de coelhos com prazo de validade indicado 4 semanasa,b
N AS HAPT haptoglobina humana altamente no rótulo, desde que se Não congelar!
purificada (concentração de anticorpos mantenha fechado.
ativos: < 1,4 g/L)
• azida de sódio (< 1 g/L)
a
se for bem tapado imediatamente após a utilização
b
se for excluída contaminação (por exemplo, por microrganismos)
Durante o armazenamento, o N AS HAPT pode desenvolver precipitados ou turvação que não são
provocados por contaminação microbiana e não afetam a sua atividade. Nestes casos, o N AS HAPT
deve filtrar-se antes da utilização. Os filtros descartáveis com poros de 0,45 µm são adequados a este
fim.
Estabilidade no sistema
Um mínimo de cinco dias a oito horas por dia para os frascos de 5 mL, e três dias a oito horas por dia
para os frascos de 2 mL, ou período de tempo comparável.
Nota: A estabilidade no sistema poderá variar consoante o sistema utilizado e as condições
laboratoriais. Para obter mais informações, consulte o respetivo documento dos Protocolos de ensaio.
Advertências e medidas de precaução
Apenas para utilização em diagnóstico in vitro.
Para utilização profissional em laboratório.
De acordo com o regulamento da UE 2017/746, qualquer incidente grave que tenha ocorrido em
relação com o dispositivo deve ser comunicado ao fabricante e à autoridade competente do Estado-
membro da UE onde reside o utilizador e/ou doente.
Fichas de dados de segurança do produto (MSDS/SDS) disponíveis em siemens-healthineers.com/sds.
Cuidado
Este dispositivo contém material de origem animal e deve ser manuseado como um possível portador e
transmissor de doenças.
Contém azida de sódio como conservante. A azida de sódio pode reagir com os tubos de cobre ou de
chumbo das canalizações de esgotos formando azidas metálicas explosivas. Aquando da sua
eliminação, irrigue os reagentes com grandes quantidades de água para evitar a acumulação de azidas.
A eliminação para os sistemas de esgotos deve ser efectuada de acordo com os requisitos das
regulamentações em vigor.
Elimine os materiais perigosos ou biologicamente contaminados de acordo com as práticas da sua
instituição. Elimine todos os materiais de forma segura e aceitável e em conformidade com todos os
requisitos governamentais.

Preparação dos reagentes

N AS HAPT pronto a utilizar conforme fornecido e não necessita de preparação adicional.

Amostra
São adequadas amostras de soro e plasma heparinizado ou com EDTA humanos, o mais frescas
possível (conservadas durante não mais de sete dias a uma temperatura de 2 a 8 °C).
As amostras de soro e de plasma podem ser conservadas a temperaturas inferiores a −20 °C durante
um máximo de três meses se forem congeladas nas 24 horas a seguir à colheita e se se evitarem ciclos
repetidos de congelamento-descongelamento. As amostras de soro têm de estar completamente
coaguladas e, após a centrifugação, não podem conter quaisquer partículas ou vestígios de fibrina. As
amostras lipémicas ou as amostras congeladas que apresentem turvação depois de descongeladas têm
de ser clarificadas por centrifugação (10 minutos a cerca de 15 000 × g) antes de serem testadas.

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Execução do teste
Material fornecido
REF Conteúdo

OSAV15 Antisoro N para Haptoglobina Humana 1× 5 mL

N AS HAPT

OSAV09 Antisoro N para Haptoglobina Humana 1× 2 mL

N AS HAPT

Materiais necessários mas não fornecidos

Item Descrição
REF OQIM13 N PROT STANDARD SL , Padrão SL de Proteína N (humano)
REF OQIN13 N/T PROT CONTROL SL/L , Controlo SL/L de Proteína N/T (humano)
REF OQIO13 N/T PROT CONTROL SL/M , Controlo SL/M de Proteína N/T (humano)
REF OQIP13 N/T PROT CONTROL SL/H , Controlo SL/H de Proteína N/T (humano)

REF OUMS65 N BUFFER , Tampão de reação N

REF OUMT65 N DILUENT , Diluente N
REF OVLE21 Rolhas antievaporação BN II (opcional)
Instrumentosc, como: • Sistema Atellica® NEPH 630
• Sistema BN II
• Sistema BN ProSpec®
Materiais e equipamentos adicionais conforme descrito no Manual de instruções do respetivo Sistema.
c
A disponibilidade de analisadores pode variar consoante o país.

Notas
Para o Sistema Atellica® NEPH 630, Sistema BN II ou Sistema BN ProSpec®, os reagentes e as amostras
conservados a uma temperatura de 2 a 8 °C podem ser utilizados imediatamente.
Consulte o Manual de Instruções do respetivo sistema para obter mais informações acerca do
funcionamento do instrumento.
Protocolos de ensaio no Sistema Atellica® NEPH 630 e nos Sistemas BN
O protocolo de ensaio para soro e plasma é fornecido na documentação dos Protocolos de ensaio e no
software do instrumento. Todos os passos são executados automaticamente pelo sistema.
Calibração do ensaio
As curvas de referência são geradas por calibração de pontos múltiplos. As diluições em série do
N PROT STANDARD SL são automaticamente preparadas pelo instrumento utilizando o N DILUENT . As
curvas de referência podem utilizar-se, desde que os controlos com os valores-alvo correspondentes
dependentes do método, por exemplo, N/T PROT CONTROL SL/L , N/T PROT CONTROL SL/M e
N/T PROT CONTROL SL/H , sejam reproduzidos dentro dos respetivos intervalos. Caso se utilize um lote
diferente de antissoro, terá de se gerar uma nova curva de referência.
Os intervalos típicos de medição são fornecidos na respetiva documentação dos Protocolos de ensaio.
Medição de amostras
As amostras de soro e de plasma são automaticamente diluídas a 1:20 com N DILUENT e medidas. As
amostras diluídas têm de ser medidas num prazo de quatro horas.
Se as leituras obtidas se encontrarem fora do intervalo de medição, o ensaio pode repetir-se utilizando
uma diluição maior ou menor da amostra. Consulte o Manual de Instruções do respetivo sistema para
obter mais informações acerca da repetição de medições utilizando outras diluições.

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Controlo interno de qualidade

Ensaie os N/T PROT CONTROL SL/L , N/T PROT CONTROL SL/M e N/T PROT CONTROL SL/H depois de cada
estabelecimento de uma curva de referência, depois da primeira utilização de um frasco novo de
antisoro e com cada processamento de amostras de soro ou plasma.
Os controlos devem ser ensaiados e avaliados tal como as amostras dos doentes. Os valores atribuídos
e os intervalos encontram-se listados na tabela de valores atribuídos do respetivo controlo.
Os valores podem ser introduzidos através do dispositivo de armazenamento de dados no Sistema
Atellica® NEPH 630 e no Sistema BN ProSpec®.
Seguir as normas governamentais ou os requisitos de validação quanto à frequência do controlo de
qualidade.
Caso um valor de controlo se encontre fora do intervalo de confiança, tem de repetir-se a
determinação. Caso a determinação repetida confirme o desvio, deve definir-se uma nova curva de
referência. Não divulgue os resultados do doente até que a causa do desvio tenha sido identificada e
corrigida.

Cálculo dos resultados

O instrumento calcula e imprime automaticamente a concentração de haptoglobina no soro e no
plasma em g/L ou numa unidade selecionada pelo utilizador.

Limitações do procedimento
Não se detectou interferência para concentrações de triglicéridos até 8,2 g/L, de bilirrubina até 0,6 g/L,
e de hemoglobina livre até 10 g/L. Desconhece-se a interferência de fármacos vulgarmente utilizados.
Turvação e partículas nas amostras podem interferir com a determinação. Por conseguinte, as
amostras que contenham partículas têm de ser centrifugadas antes do teste. As amostras lipémicas ou
turvas que não consigam ser clarificadas por centrifugação (10 minutos a cerca de 15 000 × g) não
podem ser utilizadas.
A Siemens Healthineers validou a utilização destes reagentes em vários analisadores, com o intuito de
otimizar o desempenho do produto e satisfazer as especificações do produto. Tenha em atenção que as
aplicações em outros analisadores podem ser validadas pelo fabricante do instrumento de acordo com
os requisitos do REGULAMENTO (EU) 2017/746 sob a sua responsabilidade desde que a finalidade
pretendida e o desempenho não sejam modificados. As modificações definidas pelo utilizador não são
suportadas pela Siemens Healthineers, na medida em que podem afetar o desempenho do sistema e
os resultados do ensaio. Constitui responsabilidade do utilizador validar as modificações efetuadas
nestas instruções ou em relação ao uso dos reagentes noutros analisadores que não os incluídos nas
folhas de instruções de aplicação da Siemens Healthineers ou nestas instruções de utilização.
Os resultados deste teste devem sempre ser interpretados em conjunto com o histórico médico do
doente, estado clínico e outros dados de interesse.
Devido aos efeitos matriz, as amostras de estudo e de controlo inter-laboratoriais podem apresentar
resultados que diferem dos valores obtidos com outros métodos. Poderá ser assim necessário avaliar
esses resultados comparando-os com os valores-alvo específicos do método utilizado.

Intervalo de referência
Os intervalos de referência seguintes aplicam-se às amostras de soro e plasma de adultos saudáveis4:
Haptoglobina 0,3 a 2,0 g/L
Os intervalos de referência variam de laboratório para laboratório, dependendo da população servida,
da técnica, do método, do equipamento e do lote de reagentes utilizados. Por conseguinte, cada
laboratório deve estabelecer os seus próprios intervalos de referência ou verificá-los sempre que uma
ou mais das variáveis acima mencionadas sejam alteradas.
A Siemens Healthineers não definiu intervalos de referência para crianças.

Características do teste
Nota: Os valores citados para características de desempenho específicas do ensaio representam
resultados típicos e não são vistos como especificações para o N AS HAPT .

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Intervalo de medição
O intervalo de medição do N AS HAPT é estabelecido pelo limite inferior da curva de referência e
depende, portanto, das concentrações das proteínas no N PROT STANDARD SL . Os intervalos típicos de
medição são fornecidos na respetiva documentação dos Protocolos de ensaio.
Especificidade
Não se conhecem reatividades cruzadas do antissoro utilizado.
Sensibilidade
A sensibilidade analítica do ensaio é determinada pelo limite inferior da curva de referência e depende,
portanto, da concentração da proteína no N PROT STANDARD SL . Um limite de deteção típico para
N AS HAPT é < 0,076 g/L.

Precisão
Foram obtidos os seguintes coeficientes de variação (CV) para soro com N AS HAPT num Sistema BN:

Haptoglobina
CV intra-disposi‐
CV de repetibili‐ tivo/de precisão
Média dade laboratorial
Amostra n [g/L] [%] [%]
N/T PROT CONTROL SL/L 40 0,64 2,5 3,2
N/T PROT CONTROL SL/M 40 1,3 3,4 4,2
N/T PROT CONTROL SL/H 40 1,7 2,1 2,5
Pool 1 de amostra sérica 40 0,67 3,5 3,9
Pool 2 de amostra sérica 40 5,5 4,1 4,0
Avaliaram-se os resultados (dez processamentos, cada um com quatro determinações) por análise de
variâncias.
Equivalência para o Atellica® NEPH 630 foi confirmada.
A reprodutibilidade foi avaliada pela Siemens Healthineers para o N AS HAPT com base em informações
de testes de proficiência disponíveis publicamente em 2020/2021. A % de CV mediana de
reprodutibilidade geral foi considerada como sendo < 10 % incluindo fatores de variabilidade de lote,
instrumento, laboratório e operador.
Comparação de métodos
Ensaiaram-se trinta (30) amostras de soro com N AS HAPT num Sistema BN (y) e por imunodifusão
radial (x) (Partigen®).
A correlação dos resultados apresenta os seguintes dados:
Regressão de Passing-Bablok Coeficiente de correlação
Haptoglobina y (BN) = 1,01 × (RID) - 0,110 g/L 0,96
A equivalência para o Atellica® NEPH 630 para um Sistema BN foi confirmada.
Excesso de antigénio
O reagente N AS HAPT não apresenta qualquer efeito de prozona de dose elevada no ensaio de HPT até
concentrações de haptoglobina de: 13,8 g/L.

Assistência técnica
Para serviços de apoio ao cliente, contacte o seu distribuidor ou o fornecedor de assistência técnica
local.
siemens-healthineers.com

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Antisoro N para Haptoglobina Humana

Versão atual dos Protocolos de Ensaio

O N AS HAPT pode ser utilizado com vários analisadores automatizados. Siemens Healthineers
disponibiliza Protocolos de ensaio para os aparelhos listados na secção "Materiais necessários mas não
fornecidos", página 3 na hiperligação dedicada abaixo:
siemens-healthineers.com/ap
Como o Siemens Healthineers monitoriza continuamente o desempenho e segurança do produto, os
utilizadores têm de se certificar de que trabalham com a revisão correta das instruções para os lotes de
produto em utilização. Reveja periodicamente a disponibilidade de revisões de rótulo eletrónicas para
garantir a utilização segura do produto.
O número de versão das Instruções de utilização está visível no rótulo da caixa de cada produto.
Siemens Healthineers garante que todos os lotes de produtos com o mesmo número de versão das
Instruções de utilização são compatíveis com o rótulo eletrónico fornecidos através de
siemens-healthineers.com/eIFU.

Bibliografia
1. Barcellini W, Fattizzo B. Clinical Applications of Hemolytic Markers in the Differential Diagnosis and
Management of Hemolytic Anemia. Dis Markers 2015;2015:635670.
2. Körmöczi GF, Säemann MD, Buchta C, et al. Influence of clinical factors on the haemolysis marker
haptoglobin. Eur J Clin Invest 2006;36:202-9.
3. Schaer DJ, Vinchi F, Ingoglia G, et al. Haptoglobin, hemopexin, and related defense pathways-basic
science, clinical perspectives, and drug development. Front Physiol 2014;5:415.
4. Dati F, Schumann G, Thomas L, et al. Consensus of a group of professional societies and diagnostic
companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in serum based on the
standardization against the IFCC/BCR/CAP Reference Material (CRM 470). International Federation
of Clinical Chemistry. Community Bureau of Reference of the Commission of the European
Communities. College of American Pathologists. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996; 34: 517-20.

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Definição de símbolos
Os símbolos que se seguem podem surgir no rótulo do produto:

Não reutilizar Prazo de validade

LOT Código do lote REF Referência de catálogo

Atenção, consulte a documentação
Fabricante
incluída
Representante autorizado na Comunidade Conteúdo suficiente para "n"
EC REP
Europeia ensaios
Dispositivo médico para
Riscos biológicos IVD
diagnóstico in vitro
Consulte as instruções de
Limites de temperatura
utilização

Não estéril Marca CE

Marca CE com número de identificação do

organismo notificado.
CONTENTS Conteúdo
O número de identificação do organismo
notificado pode variar.

Volume de reconstituição LEVEL Nível

Manter protegido da luz solar e do calor WARNING Aviso

Dispositivo sujeito a receita

DANGER Perigo RxOnly
médica (apenas nos EUA)
Código de barras de Identificação do Número de autorização
UDI REACH xx/xx/xx
dispositivo (UDI) REACH

Informações legais
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Todas as outras marcas comerciais pertencem aos respetivos proprietários.

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