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UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCURI DEPARTAMENTO DE QUMICA/FACET

AULAS PRTICAS DE BIOQUMICA

PROFA. PATRCIA MACHADO DE OLIVEIRA PROF. GUILHERME LUIZ DA COSTA LAGE tatiana de

andrade

campos

PROGRAMA DA DISCIPLINA
EMENTA: Aspectos qumicos dos carboidratos, lipdios, cidos nuclicos, aminocidos e protenas. Aspectos cinticos e metablicos de enzimas e coenzimas. Metabolismo energtico. Fotossntese: Aspectos moleculares. CONTEDO: AULAS TERICAS Apresentao da disciplina Introduo Bioqumica/Origem bioqumica da vida/Energtica bioqumica Introduo Bioqumica/Origem bioqumica da vida/Energtica bioqumica; Solues aquosas/pH e solues tampo Solues aquosas/pH e solues tampo Carboidratos e polissacardeos Propriedades qumicas dos aminocidos e protenas Propriedades qumicas dos aminocidos e protenas Propriedades qumicas dos lipdeos PRIMEIRA AVALIAO cidos nuclicos e seus componentes Enzimas, vitaminas e coenzimas Fundamentos do metabolismo dos compostos produtores de energia Fundamentos do metabolismo dos compostos produtores de energia SEGUNDA AVALIAO EXAME FINAL AULA PRTICA Aula Prtica 01 pH e efeito tampo Aula Prtica 02 Caracterizao de carboidratos Aula Prtica 03 Titulao e cromatografia de aminocidos Aula Prtica 04 Titulao e cromatografia de aminocidos Aula Prtica 05 Estudo da solubilidade de protenas Aula Prtica 06 Caracterizao de lipdeos Aula Prtica 07 Caracterizao de enzimas Apresentao de trabalho (G1, G2 e G3) Apresentao de trabalho (G4, G5 e G6) DATA 19/04 03/05 10/05 17/05 24/05 07/06 14/06 21/06 28/06 AVALIAO DUAS AVALIAES valor: 100 pontos cada (peso = 35% cada) AULAS PRTICAS RELATRIOS + CADERNO DE LABORATRIO + FREQUNCIA valor: 100 pontos (peso = 20%) TRABALHO AULA PRTICA valor: 100 pontos (peso = 10%) DATA 09/04 16/04 19/04 30/04 07/05 14/05 21/05 28/05 31/05 04/06 11/06 18/06 02/07 05/06 12/06

Elaborao de um ROTEIRO DE AULA PRTICA OU PLANO DE AULA, adequado ao Ensino Mdio, versando sobre contedos relacionados disciplina Bioqumica, biomolculas e/ou macromolculas. O material didtico elaborado dever ser utilizado para realizao de aula prtica ou terica, ministrada pelo grupo de discentes (at quatro membros) na data estabelecida no cronograma do curso. Cabe ao discente o planejamento da referida aula no que se refere organizao, aquisio e/ou adequao dos materiais necessrios realizao da aula. BIBLIOGRAFIA BSICA 1. VOET, D. Fundamentos de bioqumica. Porto Alegre: ARTMED. 2002. 2. CONN, E., STUMPF, P.K. Introduo Bioqumica, So Paulo, SP, 3 Ed. 1975. 3. LEHNIGER, A. L. Princpios de Bioqumica, So Paulo, SP: Sarvier, 1 Ed., 1984. BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR 1. SOLOMONS, T.W.G. Qumica Orgnica, vol. 18a edio, Editora LTC, 2006. 2. BRUICE, P.Y. Qumica Orgnica, vol. 14a edio, Editora Pearson Prentice Hall, 2006.

APRESENTAO Essa apostila fornece informaes bsicas para aulas de laboratrio de Bioqumica, abordando condutas de uso do laboratrio, diretrizes para confeco de relatrio e alguns conceitos bsicos sobre algumas tcnicas bioqumicas. USO DO LABORATRIO

1.1 Normas de conduta no Laboratrio


Regras bsicas de conduta no laboratrio so desenvolvidas visando a segurana individual e coletiva, bem como a realizao adequada da experincia proposta. Dentre as principais, destacamos: 1. No entrar no laboratrio com comidas e bebidas ou fumando; 2. O material de uso pessoal deve ser guardado longe da bancada de trabalho, de modo a evitar acidentes. Principalmente aparelhos celulares; 3. proibido o uso de roupas ou calados inadequados para um ambiente de laboratrio, tais como: sandlias, saias, bermudas, chinelos, etc. No laboratrio devem ser utilizados calados fechados (sapato ou tnis) e cala comprida1. Cabelos longos, sempre devero estar presos, para evitar que o cabelo atrapalhe o manuseio das vidrarias, solues e outros; 4. Alm da vestimenta adequada, ao entrar no ambiente do laboratrio imprescindvel a utilizao de avental de algodo e culos de segurana; <<< Lembre-se: O uso do avental OBRIGATRIO nas aulas prticas!! >>> 5. No permitido correr e realizar brincadeiras e jogos no laboratrio. Ao andar pelo laboratrio, cuidado com o colega que est trabalhando na bancada, para evitar esbarres que podem causar acidente; 6. Mantenha seu espao de trabalho organizado e cuide para que os bancos fiquem prximos s bancadas de trabalho e no nos centros de corredores de passagem;

1.2 Caderno de Laboratrio


Cada grupo ter um CADERNO DE LABORATRIO exclusivo para a disciplina, onde devero constar as informaes sobre as atividades desenvolvidas no laboratrio. No Caderno de Laboratrio dever conter os seguintes itens: 1. Ttulo e data do experimento; 2. Registro das atividades do dia, com as informaes sobre os procedimentos realizados, os dados coletados dos experimentos realizados, e o planejamento para a aula seguinte. 3. O caderno o registro dos seus dados para confeco do relatrio, por isso, anote as observaes que achar pertinente, imprevistos, acidentes, comportamentos inesperados de substncias, equipamentos, falhas, etc. 4. As anotaes devem ser feitas principalmente a lpis.

1.3 Segurana Equipamentos de Proteo Individual (EPIs)


Para os fins de aplicao da Norma Regulamentadora NR, considera-se Equipamento de Proteo Individual EPI, todo dispositivo ou produto, de uso individual utilizado pelo trabalhador, destinado proteo de riscos suscetveis de ameaar a segurana e a sade no trabalho. (A Norma Regulamentadora 6 NR 6, com redao dada pela Portaria N. 25, de 15 de outubro de 2001, publicada no DOU em 17 de outubro de 2001, estabelece as disposies relativas aos EPI. O texto

completo da NR 6 encontra-se disponvel no site do Ministrio do Trabalho e Emprego - MTE.1) Os EPIs se destinam a proteger o laboratorista em operaes com riscos de exposies ou nas operaes em que se pode ter emanaes de produtos qumicos, riscos de quebras ou exploses de aparelhos de vidro, riscos de cortes com vidrarias, lminas etc. Os EPIs devero ser usados a partir do momento em que entrarmos no laboratrio, quer estejamos fazendo anlises ou no. Estes equipamentos so de uso individual, portanto no devem ser emprestados. Os EPIs necessrios para as aulas prticas sero: Avental de algodo. Luvas de borracha (e no luvas cirrgicas). culos de segurana.

1.4 Descarte de Materiais e Reagentes


Assim como a produo industrial, o laboratrio gera resduos provenientes dos restos das amostras analisadas e produtos lquidos (aquosos ou orgnicos) ou slidos provenientes de processos de anlise, digestes etc. Em princpio devemos procurar reduzir ao mnimo a gerao de lixo requisitando apenas o necessrio e suficiente de materiais e reagentes para a realizao da anlise, e sempre que possvel adotar mtodos analticos que utilizem o mnimo de amostras. Antes de realizar a lavagem e descarte dos materiais e reagentes, utilizados na aula prtica, buscar obter informaes respeito do descarte desses materiais. proibido o descarte de resduos txicos no esgoto, ou seja, diretamente na pia Com relao aos tipos de substncias que devero sofrer tratamento antes do descarte em laboratrios qumicos, clnicos e microbiolgicos em geral temos: a) As solues e lquidos de laboratrios de anlises clnicas ou microbiolgicas, quando patognicos, devem passar por mtodo de esterilizao por calor mido (autoclavagem) ou com soluo 1,0 a 2,5% de hipoclorito, em seguida destinadas ao esgoto. b) Para materiais perfuro cortantes como agulhas, seringas e placas de Petri descartveis, uma coleta seletiva deve ser solicitada. Portanto, pergunte sobre o local adequado de descarte desses materiais no laboratrio. c) Lquidos aquosos sem metais pesados e sem fluoretos, solues geradas em anlises titulomtricas cido-base, de precipitao, determinaes de metais alcalinos terrosos com EDTA, acertar o pH entre 5 e 9, diluir e descartar no esgoto. d) Lquidos contendo fluoretos: precipitar com clcio, filtrar, o slido deve ser acumulado e, posteriormente, enviado para o aterro sanitrio. O filtrado vai para o esgoto. e) Solues contendo metais pesados requerem tratamento especial pela alta toxidez e rigidez da legislao vigente, consultar a pgina do Programa de Gerenciamento de Resduos da Unicamp: http://www.cgu.unicamp.br/residuos. f) O Mercrio, de uso em praticamente todos os laboratrios, presente nos termmetros, merece comentrios parte. prtica usual utilizar um termmetro de mercrio para indicar a temperatura em reaes em estufas e incubadoras. Ocorre que, com grande facilidade, pode-se quebrar o bulbo gerando alta concentrao de vapores de mercrio, no interior da estufa e at mesmo no ambiente do laboratrio. H registro de morte, por intoxicao aguda, citada na literatura mdica de toxicologia. Em caso de derramamento
1

Portaria MTE n. 485, de 11 de Novembro de 2005 (DOU de 16/11/05 Seo 1)

de mercrio, deve-se providenciar ventilao exaustiva nas salas, usar EPIs (mscara respiratria adequada, culos e luvas de borracha), remover o mercrio fazendo amlgama com limalha ou fio de cobre. Encaminhar para empresas que reciclam2.

Acidentes e Intoxicaes no Laboratrio:


Temos por ordem de maior freqncia os riscos ao qual um usurio do laboratrio est sujeito. So eles: a) Leses com produtos custicos e corrosivos. b) Queimaduras com produtos inflamveis. c) Acidentes com vidrarias e materiais cortantes e contundentes. d) Acidentes com equipamentos eltricos. e) Problemas de exposio a radiaes. f) Exposio a agentes txicos. No laboratrio, sempre que abrimos um frasco de um reagente qumico, este por sua presso de vapor maior ou menor, estar emitindo vapores em nveis prejudiciais, dependendo da natureza do produto. Por isso, de extrema importncia o uso das capelas. A capela um exemplo de equipamentos de proteo coletiva (EPCs), assim como o chuveiro e o lava-olhos de emergncia. A capela de uso geral dotada de sistema de exausto com potncia suficiente para promover a exausto dos gases leves que rapidamente ocupam as camadas superiores, e dos gases pesados tipo enxofre, e alguns solventes, que tendem a permanecer nas partes baixas. Quando o indivduo exposto a estes vapores txicos a contaminao ocorrer lentamente atravs da respirao, pele e via oral. Embora o mesmo no sinta a gravidade do problema num primeiro momento, aps algum tempo este poder sofrer uma intoxicao crnica, que a que se d num perodo de longa exposio. Outros casos em que por um acidente no laboratrio, ou uma operao realizada sem os devidos cuidados ou sem o uso dos equipamentos de proteo, o indivduo se expe a uma concentrao elevada de um agente qumico txico por um curto perodo de tempo, o que chamamos de intoxicao aguda. Os sintomas de intoxicao aguda provocada por solventes so: a) Tonturas; b) descoordenao dos movimentos; c) dores de cabea; d) cansao; e) nuseas; f) anorexia (falta de apetite); g) diarria; h) perda de conscincia; i) morte.

Toxicidade de Alguns Produtos Qumicos Usados em Laboratrio


1.4.1.1 cidos: Ao corrosiva sobre a pele, mucosas, olhos, tecidos do trato respiratrio e digestivo.

cido Clordrico (cido muritico, nome comercial): Gs clordrico borbulhado em gua destilada. Vapores so irritantes das vias respiratrias. cido Sulfrico

Verga, A.F.F, Arcuri, A.S.A, Borges, A.G, Manual Seglab: Segurana em laboratrios, Apostila de segurana, Isolab Consultoria e representaes, 1996.

Vapores irritantes das mucosas, corroso dos dentes, dificuldades para respirar, bronquite, edema na laringe e pulmes, perda dos sentidos. Na pele solues diludas causam dermatites irritativas, solues concentradas causam alteraes e destruio dos tecidos; muito corrosivo. cido Actico Causa irritao e queimaduras quando concentrado, lacrimao e conjuntivites. Corroso dos dentes Inalao causa irritao das mucosas. Exposio elevada pode causar quadro agudo com morte por edema pulmonar. Pode formar misturas explosivas com o ar produzindo incndios. 1.4.1.2 Bases Hidrxidos de Sdio Inalao provoca danos nos trato respiratrio at pneumonite grave. Corrosivo de todos os tecidos. Nos olhos causa opacidade da crnea, edema pronunciado ulceraes e at cegueira. Hidrxido de Amnio Inalao produz irritaes das vias respiratrias. Exposio intensa produz bronco pneumopatias e morte. Produz irritao e queimaduras em contato com a pele. Nos olhos produz opacidade da crnea e cristalino. Cada aluno dever providenciar seus prprios EPIs (avental, culos e luvas), e seu uso ser obrigatrio!! 2 RELATRIOS

O relatrio dever conter informaes completas sobre o experimento. Voc no tem a obrigao de chegar ao resultado esperado, porm, deve relatar tudo o que foi feito com preciso e clareza. A literatura especializada deve ser consultada para o embasamento terico, para justificar os procedimentos realizados em laboratrio e para obteno de informaes que ajudem na discusso dos resultados obtidos. Aprender a redigir textos tcnico-cientficos corretamente, seguindo as normas e convenes exigidas pela maioria dos peridicos de publicaes cientficas nacionais e internacionais tambm so objetivos dos relatrios. Para isso, siga as instrues de como organizar e formatar o texto, bem como a maneira adequada de apresentar figuras e tabelas e de citar a bibliogrfica consultada para redao do relatrio. Observao: no tente inventar dados ou alterar resultados para mostr-los no relatrio, seja honesto com voc mesmo, seu objetivo aprender, seja errando ou acertando. No desperdice esta chance!

2.1 Organizao
O relatrio deve ser organizado da seguinte forma:

Folha de Rosto
Contendo nome da disciplina, logotipo do departamento de Qumica e da UFVJM, ttulo do experimento, nome de todos os integrantes do grupo, nome dos

docentes e tcnico responsvel, data da realizao das experincias e data da redao do relatrio.

Resumo
Uma breve introduo sobre o trabalho realizado, uma sntese dos mtodos, dos resultados e a concluso.

Introduo
a apresentao do assunto a ser tratado, do problema, contendo a base terica e a importncia de se buscar a resposta para o problema (justificativa). Devese cuidar para no antecipar na Introduo os resultados do trabalho. A introduo deve ter no mximo uma pgina.

Objetivos
o que vai ser feito, uma proposta de trabalho, meta a ser atingida para a soluo do problema. Para redao dos objetivos, deve-se usar preferencialmente verbos no infinitivo.

Materiais e Mtodos
Apresenta a estratgia utilizada na experimentao, incluindo as tcnicas utilizadas e a seqncia de execuo das mesmas, os equipamentos, os materiais e reagentes, citando sempre a concentrao das solues. Uma tcnica pode ser descrita de forma simplificada, desde que seja indicada a referncia de onde encontrla, mesmo que seja no guia de laboratrio. Os mtodos matemticos, estatsticos e computacionais tambm devem ser abordados. No deve ser uma redao descritiva, mas uma estrutura em tpicos, de maneira que fiquem em destaque as tcnicas utilizadas. Nesse item no deve conter resultados.

Resultados e Discusso
Esses itens podem ser elaborados juntos ou separados, j que resultados e discusso possuem caractersticas distintas, porm intimamente ligadas e complementares. Em trabalhos menores, esses itens so elaborados juntos. Resultados: Nesse item, apresentam-se os dados coletados de forma organizada, representando-os na linhagem pertinente, como grficos, tabelas. o momento de descrever o que foi observado nos dados coletados. Discusso: Relacionar os dados obtidos entre si e com a literatura da rea, inferindo dedues, generalizaes, teorias sobre os dados e que proponham a resoluo do problema.

Concluses
A concluso deve ser clara, direta e concisa. a resposta propriamente dita pergunta levantada pelo problema, ao objetivo proposto. Advm dos resultados obtidos e do contraste fundamentado da literatura. O autor deve reafirmar de maneira sinttica a idia geral do trabalho e responder indagao levantada, comprovando ou refutando as hipteses.

Bibliografia
Corresponde a toda a literatura consultada em todas as fases da atividade.

2.2 Formatao
Apresente o relatrio formatado para folha de papel A4 (tamanho padro em todo o mundo, exceto EUA). Use a seguinte formatao: 1. As pginas devem ser numeradas (exceo feita folha de rosto) no canto superior direito.

2. As margens devem ser de 2,5cm. 3. A fonte usada deve ser Arial tamanho 12. 4. Os pargrafos devem ser justificados com espaamento simples entre as linhas.

2.3 Apresentao de Tabelas


1. Organiz-las de modo a conter o maior nmero possvel de dados de forma compreensvel e sem exagerar o nmero de colunas ou linhas. 2. Usar o mnimo possvel de traos e de forma visvel, evitar cores, colocar os desvios, nmero de algarismos significativos condizente com a medida, colocar as unidades de forma inteligvel. 3. As legendas devem vir acima da tabela, ser numeradas em seqncia, dando todos os detalhes para se entender a tabela sem ler o texto, mas sem ser muito extensa. 4. A legenda deve ser alinhada com as margens do texto. 5. Centralizar a Tabela e ajustar o tamanho para que seja o mais legvel possvel.

2.4 Citao de Bibliografia


Revistas Ser utilizada a abreviatura da revista como definida no Chemical Abstracts service Source Index (ver http://www.cas.org/sent.html). Caso a abreviatura autorizada de uma determinada revista no puder ser localizada e no for bvio como o ttulo deve ser abreviado, devesse citar o ttulo completo. 1. Varma, R. S.; Singh, A. P.; J. Indian Chem. Soc. 1990, 67, 518. No caso especial da revista citada no ser de fcil acesso, recomendado citar o seu nmero de Chemical Abstract, como segue: 2. Provstyanoi, M. V.; Logachev, E. V.; Kochergin, P. M.; Beilis, Y. I.; Izv. Vyssh. Uchebn. Zadev.; Khim. Khim. Tekhnol. 1976, 19, 708. (CA 85:78051s). Livros 7. Regitz, M. Em Multiple Bonds and Low Coordination in Phosphorus Chemistry; Regitz, M.; Scherer, O. J., eds.; Georg Thieme Verlag: Stuttgart, 1990, cap. 2. 8. Cotton, F.A., Wilkinson, G.; Advanced Inorganic Chemistry, 5th ed., Wiley: New York, 1988. Programas de computao (Softwares) 9. Sheldrick, G. M.; SHELXL-93; Program for Crystal StructureRefinement; Universidade de Gttingen, Alemanha, 1993. Teses 10. Velandia, J. R.; Tese de Doutorado, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, Brasil, 1997. Material apresentado em Congressos 11. Ferreira, A. B; Brito, S. L.; Resumos da 20a Reunio Anual da Sociedade Brasileira de Qumica, Poos de Caldas, Brasil, 1998. Pginas Internet http://www.sbq.org.br/jbcs, acessada em Junho 2001.

Material no publicado

Para material aceito para publicao: Magalhes, U. H.; J. Braz. Chem. Soc., no prelo. Para material submetido, mas ainda no aceito: Magalhes, U. H.; J. Braz. Chem. Soc., submetido. Para trabalho no publicado ou comunicao pessoal: Magalhes, U. H.; trabalho no publicado ou Magalhes, U. H., comunicao pessoal. Os resultados no publicados s podero ser citados com a permisso explcita das pessoas envolvidas na sua obteno. Quando o trabalho for redigido em idioma ingls, os autores so solicitados a se remeterem s normas do Journal of the Brazilian Chemical Society.

ATIVIDADE PRTICA N1: PH E EFEITO TAMPO


1. CONCEITOS BSICOS Teoria cido-Base Em 1923, o qumico dinamarqus Johannes Bronsted props que um cido um doador de prtons e uma base um receptor de prtons. A mesma definio fora proposta independentemente pelo qumico ingls Thomas Lowry, e a teoria baseada nelas amplamente conhecida como a teoria de Bronstedlowry de cidos e bases. Um exemplo de um cido de Bronsted o HCl. Quando uma molcula de cido clordrico dissolve-se em gua, ela doa um prton para uma molcula de gua vizinha, e dizemos que ela fica desprotonada. Escrevemos o equilbrio de transferncia de prtons como:
HCl (aq)
+

H2O (l)

H3O + (aq)

Cl- (aq)

Todas as molculas de HCl doam seus prtons para a gua, o HCl classificado como um cido forte. No equilbrio, praticamente todas as molculas de HCl doaram seus prtons, e a reao de transferncia de prtons se completou totalmente. Outro exemplo de um cido o CH3COOH, que tambm transfere prtons para a gua. Entretanto, somente uma frao das molculas de CH3COOH doa seus prtons; e no equilbrio, ambos, molculas de CH3COOH e de CH3COO -, esto presentes. Escrevemos o equilbrio de transferncia de prtons como:
CH3COOH (aq)
+

H2O (l)

H3O + (aq)

CH3COO - (aq)

Como somente uma frao de molculas de CH3COOH doa seus prtons, o CH3COOH classificado como um cido fraco em gua. Um cido fraco uma espcie que est incompletamente desprotonado em soluo. Um exemplo de uma base de Bronsted o NaOH. Todas as molculas de NaOH retiram prtons da gua. Portanto, no equilbrio, podemos dizer que praticamente todas as molculas de NaOH retiraram prtons da gua:
NaOH (aq)
+

H2O (l)

Na+ (aq)

OH- (aq)

Assim, podemos classificar o NaOH como uma base forte em soluo aquosa. Muitos compostos moleculares que contem nitrognio so tambm bases porque o par isolado de eltrons do tomo de nitrognio pode atrair um prton. Por exemplo, quando amnia, NH3, dissolve-se em gua, algumas das molculas aceitam prtons das molculas de gua: + NH3 (aq) + H2O (l) NH4 (aq) + OH (aq) O par isolado de eltrons no tomo de N na molcula neutra NH3 tem um poder menor de puxar eltrons que a carga negativa de um on hidrxido proveniente de uma base forte. Como resultado, somente uma pequena poro das molculas de NH3 so convertidas em ons NH4 +. A amnia ento um exemplo de base fraca. Uma base fraca uma espcie que est incompletamente protonada em soluo Todas as aminas so bases fracas em gua. Quando olhamos para uma soluo aquosa de amnia, devemos imaginar os prtons sendo incessantemente trocados entre as molculas de NH3 e H2O, de tal forma que haja sempre uma concentrao constante, mas pequena, de ons NH4 + e OH -. Para todos os cido e bases fracos, devemos considerar a reao inversa da transferncia de prtons bem como a reao direta. Veja o equilbrio das reaes de CH3COOH e NH3 em gua:
CH3COOH (aq)
+

H2O (l)

H3O

+ (aq) +

CH3COO

(aq)

O on CH3COO -, produzido quando o CH3COOH perde um prton para a gua, pode aceitar um prton de uma molcula de gua para formar CH3COOH de novo. Assim, de acordo com a definio de Brnsted, CH3COO uma base: ele chamado base conjugada do CH3COOH. Do mesmo modo, considerando o equilbrio:
NH3 (aq)
+

H2O (l)

NH4

+ (aq) +

OH (aq)

Devido a capacidade do on NH4+ de doar prton para uma molcula de gua para formar NH3, de acordo com a definio de Brnsted, NH4 + uma cido: ele chamado cido conjugado do NH33 . Definio de pH A concentrao de ons H+ denominada como o valor de pH de um determinado meio. Tal grandeza determinante de vrias reaes bioqumicas, podendo variar desde 10-1 no estmago, 10-3 no vacolo de clulas vegetais at 10-7 no citossol. Como a expresso destas quantidades em um grfico torna-se difcil, Srensen, em 1909 props o uso da escala logartmica, definindo:
Jones & Atkins: Princpios de Qumica: Questionando a vida moderna e o meio ambiente, trad. I. Caracelli et al., Bookman, 2001.
3

1 pH = log H + = log + H

[ ]

[ ]

Assim: [H+] = [OH-] soluo neutra + [H+] = 10-7 M portanto pH = 7,0 [H+] = [OH-] soluo cida + [H+] > 10-7 M; portanto pH < 7,0 [H+] = [OH-] soluo bsica + [H+] < 10-7 M; portanto pH > 7,0 Dissociao de cidos e Bases Fortes Os cidos e bases fortes so completamente dissociados em soluo aquosa, sendo a [H+] ou de [OH-] respectivamente, correspondente concentrao da espcie no dissociada, ou seja, uma soluo de HCl 0,1 M, apresenta: [H+] = 0,1 M e [Cl-] = 0,1 M Logo, o pH desta soluo ser = -log [H+] = -log 0,1 = 1,0 Dissociao de cidos e Bases Fracas Em contraste aos eletrlitos fortes (HCl, NaOH etc...), os cidos e bases fracas no se dissociam completamente em soluo aquosa. Tomando-se como exemplo o cido actico, temos: CH3COOH + H2O H+ + CH3COOA constante de dissociao desta reao representada por Ka. O Ka do cido actico 1,76 x 10-5 e por analogia com pH os valores de Ka so expressos na escala logartmica, definindo-se : pKa = - log Ka Assim o pKa cido actico = - log 1,76 x 10-5 = 4,75 Relao entre pH e pka (Equao de Henderson-Hasselbach) Representando um cido fraco por HA, a sua dissociao ser: HA H+ + A Tomando-se o logartmico negativo de ambos os lados da equao:

A 1 log + ou pH = pKa + log -log [H ] = -log Ka + H [HA]


+

[ ]

Esta a equao de Henderson-Hasselbach, que pode ser escrita como uma expresso mais geral se substituirmos [A-] pelo termo base conjugada e [H+] por cido conjugado, assim:

pH = pKa + log

[base conjugada] [cido conjugado]

Soluo tampo Tampes so sistemas aquosos que tendem a resistir a variaes no seu pH quando pequenas quantidades de cido (H+) ou base (OH-) so adicionadas. Um sistema tampo consiste de um cido fraco (o doador de prtons) e sua base conjugada (o aceptor de prtons). comum encontrar os seguintes smbolos para representar um cido (HA ou BH+) e sua base conjugada (A- ou B). A adio de cido forte (H+) ou base forte (OH-) a uma soluo aquosa de um cido fraco, por exemplo, cido actico (pKa = 4,76), causa pequenas variaes de pH, se a soluo estiver a um pH prximo do pK do cido. Este comportamento define um tampo cido-base.

2. OBJETIVOS
Observar a variao de pH em solues-tampo aps adio de cido ou base.

3. MATERIAIS
Solues tampo pHs: 3,0; 4,0; 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0 e 10,0; Indicador Universal Soluo de hidrxido de sdio 0,1 mol/L Soluo de hidrxido de sdio Soluo de cido clordrico 0,1 mol/L Soluo de cido clordrico Soluo de cido actico 0,1 mol/L Tampo fosfato 0,1 mol/L pH 7,0

4. PROCEDIMENTO
a. Prepare uma bateria de oito tubos de ensaio. Adicionar ao primeiro tubo 2,0 mL de soluo tampo pH 3,0. No segundo tubo adicione 2,0 mL de soluo tampo pH 4,0 e assim, sucessivamente, at pH 10,0. b. Adicionar a cada tubo de ensaio 2 (duas) gotas do Indicador Universal e 8,0 mL de gua destilada. Esta bateria ir constituir sua escala cromtica de pH. c. Dilua 1 mL da soluo de cido clordrico 0,1 mol/L para 100 mL. Transfira 10 mL desta soluo diluda para um tubo de ensaio. Adicione 2 (duas) gotas do Indicador Universal. Verifique o pH utilizando a escala cromtica obtida com o procedimento do item anterior e anote. Repita o procedimento com a soluo de cido actico 0,1 mol/L. Como se explica a diferena de pH entre as duas solues? d. Prepare outra bateria com quatro tubos de ensaio e numere-os de 1 a 4. Adicione trs gotas do Indicador Universal a cada tubo. e. Aos tubos 1 e 3 adicione 10,0 mL de gua destilada. Aos tubos 2 e 4 adicione 3,0 mL de soluo tampo pH 7,0 e 7,0 mL de gua destilada. Agite. f. Adicione uma gota de NaOH 0,1 mol/L aos tubos 1 e 2. Agite. Observe e explique. g. Com uma pipeta sopre ar expirado na soluo tubo 1 por 45 segundos. Observe as mudanas na colorao. Verifique o pH. Explique.

h. Sopre o tubo 2 por 1 (um) minuto. Explique. i. Adicione aos tubos 3 e 4 duas gotas de soluo de cido clordrico a 0,1 mol/L. Agite. Observe as mudanas de colorao e anote o pH. j. Continue a adio de cido clordrico no tubo 4, gota a gota, agitando-o. Determine quantas gotas ou mL de cido devem ser adicionadas at que se obtenha a mesma colorao do tubo 3. Explique.

5. GRUPO DE DISCUSSO
1) a) Qual o pH das solues 0,1 M dos cidos fortes HCl e HNO3? b) Usar a equao Henderson-Hasselbach para calcular o grau de dissociao dos cidos fracos i) H2S (Ka = 1x10-7) e ii) cido actico (Ka = 2x10-5) em solues 0,1 M. Qual o respectivo pH dessas solues? 2) Um volume de 100 mL de uma soluo-tampo formada de CH3COOH(aq) 0,100 M e CH3COONa(aq) 0,100 M. a) Escreva a equao de ionizao do CH3COOH em gua. b) Escreva a equao da constante de equilbrio para o cido? c) Escreva a equao de Henderson-Hasselbalch para o tampo em questo. d) Mostre os clculos necessrios para preparar o tampo a partir das solues estoque fornecidas. e) Qual o pH terico da soluo tampo? f) Qual o pH terico e a mudana desse pH resultante da adio de 10 mL de NaOH 0,4 M? g) Qual o pH terico e a mudana desse pH resultante da adio de 20 mL de HCl 0,4 M? i) Calcule os valores tericos de pH a cada adio de cido e de base 25 mL da soluo tampo. 3) Desenhe a estrutura do gelo, mostrando as ligaes de hidrognio entre molculas de gua. O que acontece quando o gelo derrete? Porque a gua lquida 4oC mais densa do que o gelo 0oC? 4) Desenhe a estrutura do NaCl no estado slido e tambm no estado aquoso, neste ltimo, destaque suas interaes com gua.