O S IN N - B L U -

. e osin m e th y l e n e b l u e ( E M B ) a g a r ⇒ c o m p l e x , s e l e c t ive a n d d iffere n t ia l m e d i u m

⇒ c o n t a in s g e l a t in , l a ct o se , a n d t h e d y e s e o s i n Y a n d m e th y l e n e b l u e
⇒ g e l a t in = p r ovi d es n itro gen a n d o rg a n ic c a rb o n ( n u tri en t s o u rce )

⇒ l a ct o se = f erm e n t e d t o a ci d - e n d p r o d u ct s b y E . c o li a n d E . a e r o g e n e s
• e o si n Y a n d m e th y l e n e b l u e d y e s p u rp ose ⇒ t o i n h ib i t m o s t' G r a m + o r g a n i s m g r o w th ( e x ce p ti o n s : E n t er o c o c cu s & S t a p h y l o c o c cu s )

⇒ re a c t w i th a g g re s siv e l a ct o se f e r m e n ter s w h o s e e n d pr o d u c ts t u r n d ark p u rp l e o r

b l a ck ( t y p i c a l o f E . c o li) a n d a c c o m p a n ie d b y g r e e n m e t a l l i c s h e e n

- o th er s cen a ri o s ⇒ re a ct w i th l e s s a g g re s sive l a ct ose f e rm e n t e rs ( E n t e r o b a ct er o r K l e b s iel l a ) t h a t m a k e s pi n k t o d a rk p u rple c o l o n ie s

⇒ l a ct os e n o n - f er m e n t ers r e t a in th e i r n orm a l c o lor o r t a k e o n t h e c o l or o f th e m e d iu m ( c o l orl e s s )

• a p p l i c a t i o n ⇒ t o i s o l a t e f e c a l c o l if o r m

◦ N E N = R IC A G A R .
- h e k t o n e n t er i c ( H E ) a g a r ⇒ c o m p l e x , m o d e r a te l y s e l e cti ve a n d d iffe re n t ia l m e d iu m m a d e t o i s o l a t e S a l m o n e l l a a n d S h ig e l la s p e c ie s
- th i s i s o l a t io n i s b a s e d o n th e a b i lity t o f erm en t l a ct o se , s u c r o se , o r s a l icin t o a ci d e n d - p r o d u cts a n d t o r e d u ce s u lfu r t o h y d rogen s u lfid e g as ( H a s )
- f e r r i c a m m o n ium c i t r a te i n c lu d e d a s a s o urce of o x i d ize d i ron t o r e a ct w i th a n y H a s p r o d u ce d t o m a k e b l a ck pre cipit a te f er r o u s s u l fid e ( F e s )

• b i l e s a l t s i n clu d e d t o p re ve n t / i n h ib i t G r a m + g r o w th

• b r o m o t h y m o l b lu e a n d a ci d f u ch s i n d y e ss a d ded t o i n d ic ate pH c h a n g e s

- d i f fer e n t i a t ion o f m e d ia i s a re s u lt of v ari o us c o l o rs p r o d u ce d i n t h e c o lo n ies a n d a g ar

• e n t e r i e s p r o d u ce a ci d f ro m f e r m e n t a tion ⇒ y e l low t o s a l m o n - p i n k c o lo n ie s

• S a l m o n el l a a n d S h i g e l l a s pe cie s d o n 't f er m e n t a n y g t h e s u g ars , t h ey b r e a k d ow n a n im a l t is su e t h a t r a ise s p H o f t h e m e d iu m a n d p r od u ces ⇒ b l u e - g re en c o l or

• S a lm on el l a s p e cies re d u ce s u lfu r t o H a s a n d c o l o n ies c o n t a in F e s ⇒ p ro d u ces b l a ck c o lor

• R e s u lts a n d I n terpre tation s

↳ p oor or n o g ro w th ⇒ i n h i b i ted b y b ile a n d / or d y e s ⇒ G r a m +

↳ g ood g row th ⇒ n o t i n h ib i ted b y b ile a n d / or d y e s ⇒ G r a m -

↳ pin k t o o ran ge g row th ⇒ p ro d u ce s a ci d f ro m l actose , s u cr o se , a n d / or s a li cin f e rm en t a t io n ⇒ n o t S h i g e l l a o r S a l m o n e ll a
↳ b lu e - g re en g ro w th w ith b l a ck p re ci p i t a t e ⇒ d o e s n 't f erm en t l a ct o s e , s u crose , o r s a l i cin , b u t r e d u ces s u lfu r t o h y d rogen s u lfid e ( H as ) ⇒ p r o b a b le S a l m o n ell a
↳ b lu e - g re en g ro w th w ith o u t b l a ck p re ci p i t a t e ⇒ d o e s n 't f e rm en t l a ct o s e , s u crose , o r s a l i cin ,a n d d o e s n 't r e d u c e s u l f u r ⇒ p r ob a b le S h i g e l l a o r r a re ly S a l m o n el la
- a p plic a t i o n ⇒ t o i s olate a n d d iff e r e n t ia t e S a l m o n el la a n d S h ig e lla s p e cies f ro m o th er G r a m - e n teri c o rg an is m s i n a p a t i e n t 's s t o ol s a m p le

⇒ t o i d en t if y f ec a l c o n t a m in a t io n of d a iry a n d p o u ltry p r o d u ct s

I 1 S N IR O N A G A R .
• l y sin e i r on a g ar ( L 1A ) ⇒ a c o m b i n a t io n m e d iu m t h a t d etect s b a ct er i a l a b i l ity t o d e c a rb o xy l a te o r d e a m in a t e l y s in e a n d t o r e d u ce s u l f u r
• f e rri c a m m o n iu m cit r ate ⇒ s u lfur re d u ct ion i n d ic a t or
. b r om o c re s o l purp le ⇒ pH i n d ic a t or

↳ p u rpl e a t pH = 6 .8

↳ y e ll o w a t o r b e l ow p H = 5 .2
• L IA p r e p a re d a s a s l a n t w i th d eep b u tt ( a e r o b i c z o n e i n s l a n t a n d a n a er ob i c z o n e i n b u tt )

• i f m e d ium i n o cu l a te d w i th l y sin e d ec arb oxylase f ) o rg a n is m , a ci d p r o d u ct i o n f ro m g lu c ose f erm e n t a t io n w i ll i n d u ce d e c a rb oxy lase e n zy m e p r o d u ct io n

• a cid ic pH w ill tu rn t h e m e d iu m y ell o w

- d e c a r b o x y l a t io n o f l y sine m a k es a m in e c a d a ve rin e a n d a l k a lin ize th e a g ar t o t u rn it pu rpl e

• i f o rg a n is m pro d u ces l y sin e d e a m in a s e ⇒ p r o d u ce s c om p oun d s t h at r e a ct w i th f erri c a m m onium c i t r ate a n d m ak es a re d color
↳ d e a m in a t io n r e a ct ions re q u ire o x y g en ( s l a n t)

. h y d rogen s u l fid e ( H a s ) p r o d u ce d i n L IA b y a n a er obi c r e d u ct io n of t h io s u lfate

↳ f erri c i ons in m e d iu m r e a ct w ith H as t o m a k e b l a ck p re cip i t a t e i n b u tt of m e d ium

• R e s u lts a n d I n terpre tation s

↳ pu rple s l a n t / p u rp l e b u tt ⇒ l y s i n e d e a m in a se - ; l y s in e d e c a rb o x y l ase - 1 ⇒ K I K
↳ pu rple s l a n t / y e llow b u tt ⇒ l y s i n e d e a m in a se - ; l y s in e d e c a rb o x y l ase - ; g l u c o s e f e r m e n t a t io n ⇒ K I A

↳ re d s lan t / y e llow b u tt ⇒ l y s i n e d e a m in a se - l ; l y s in e d e c a rb o x y l ase - ; g lu c ose f er m en t a t io n ⇒ R IA

↳ b l a ck p re cipit at e ⇒ s u l f u r re d u c t io n ⇒ H a s
- a p plic a t i o n ⇒ t o d if fer e n t ia te e n teri c s b a s e d o n t h eir a b i l ity t o d e c a rb o x yl a te or d e a m in a te l y sin e a n d p r o d u ce h y dro gen s u l fid e ( H as )

⇒ u s e d t o i d en t ify m e m b e r s o f S a lm o n ella a n d S h ig e lla